一种含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物及护肤品的制作方法

本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物及护肤品。

背景技术

皮肤衰老是随着增龄而出现的皮肤生理结构紊乱以及功能退化的复杂过程，它同时受到内在因素和外在因素的综合影响，一般表现为自然衰老和光老化两种形式。自然衰老主要受遗传等内源性因素导致，随时间流逝而逐渐显现，多表现在皱纹细浅，皮肤干燥、松弛和粗糙；光老化则是由长期紫外线照射等外界环境因素引发，临床特征性改变包括皱纹粗深、弹性降低、斑点状色素沉着等。皮肤衰老重要的特征之一是皮肤含水量伴随增龄而不断下降；正是由于水合能力逐渐降低，皮肤细胞组织缺水，细胞老化、组织萎缩，致使皮肤组织学和形态学结构的改变而产生细小皱纹。因此皮肤含水量的检测常作为皮肤抗衰老研究的重要指标。造成皮肤衰老的原因主要有：(1)紫外线的照射导致胶原蛋白流失，从而加速皮肤老化；(2)体内氧自由基的攻击导致皮肤损伤；(3)皮肤中的成纤维细胞自然老化。

皮肤覆盖体表，是人体与外界交流联系的最重要窗口，在衰老时极易显露，直接引发焦虑、抑郁、自卑等一系列的心理及社会问题，对人们的生活、工作带来严重影响。随着全球老龄化问题的益加剧，如何延缓衰老的发生，尤其是如何“美容颜”、“驻颜”成为全世界关注的焦点，因此预防和延缓皮肤衰老，成为当今医学研究的热点之一。

目前，市场上抗衰老产品琳琅满目，但作用和效果大有差异。大部分产品仅作用于皮肤表层，并不能渗透吸收进入真皮层，从根本上起到延缓皮肤衰老的效果；且大部分护肤品容易对皮肤产生刺激，可能对皮肤造成不可逆的损伤。

中药化妆品在中国有着上千年的历史，现存最早的医学典籍《皇帝内经》中就有关于中药美容的论述，《神农本草经》、《本草纲目》等古代中医名著中均有将中医应用到化妆品中的记载。从中药中提取出的一些有效成分可以促进皮肤角质形成细胞的及成纤维细胞合成弹性蛋白与胶原的，发挥延缓皮肤衰老的功效；但这些提取物常常具有气味难闻，易与护肤品基质反应产生沉淀或不稳定等确定。因此，如何运用传统中医思想进行中药配伍组方并提取有效成分，再运用现代科学方法深化对中药复方成分药理、剂量、剂型等方面的研究，合理配以抗衰老生化成分、抗氧化剂等，研究出一种安全、有效的抗衰老产品，是化妆品领域迫切需要解决的问题。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供一种含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物及护肤品。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物，包含中药复方成分，所述中药复方成分为包含以下重量份数的原料的提取物：红花10～20份、白芨15～40份、当归20～40份、土贝母30～50份、核桃30～50份和黄连10～30份。

中医学常将面部皮肤老化描述为“面焦”“皮槁”等。肾中精气的自然衰减及其他四脏的功能衰减会影响到气血化源和运行，导致新陈代谢缓慢，代谢产物堆积，使皮肤缺乏营养而衰老。中医学认为，气血能够濡养皮肤，气血亏虚则运行失调，引起皮肤衰老。营卫具有“熏肤、充身、泽毛”的作用，与皮肤衰老密切相关。本发明选用红花、白芨、当归、土贝母、核桃和黄连进行组方，能使气血充盈、气血调和，使皮肤年前红润。各味药材的功效简介如下：

红花：具有活血祛瘀、通经止痛之功效，可用于治疗经闭、痛经、跌打损伤、关节疼痛、斑疹等病症。现代药理研究表明，红花不仅能够抗炎、镇痛，还能能够帮助和促进外伤愈合。红花可以活化肌肤，补充肌肤元气，提高肌肤角质细胞储水、锁水的能力，提升角质层细胞含水量，令角质细胞进化为高透明的“透润角质细胞”，肌肤瞬间水润晶莹。

白芨：性微寒，味苦、甘、涩。具有收敛止血、消肿生肌之功效。《本草纲目》云其“洗面黑，祛斑”。白芨外用可治疗外伤出血、皮肤皲裂等各种疾病，有良好的促进创面愈合的功效。其主要化学成分包括白芨胶、淀粉和少量挥发油、粘液质等，现代药理研究表明，白芨胶液可显著缩短凝血时间并加速红细胞沉降率、促进角质形成细胞的游走速度，一次加速伤口愈合；其提取物能舒缓肌肤，提升细胞的活性，加快皮肤的代谢。

当归：性温，味甘辛，入心肝脾三经，善能补血，又能活血。现代研究发现，当归含有大量的挥发油、维生素、有机酸等多种有机成分及微量元素，实验研究表明，当归能扩张外周血管，降低血管阻力，增加循环血液量等。当归提取物具有极强的抑制酪氨酸酶活性作用，，因而能抑制黑色素的形成，对治疗黄褐斑、雀斑等色素性皮肤病收效良好，具有抗衰老和美容作用，有助于使人青春常驻。

土贝母：其为一种传统中药，原载于清代赵氏所编的《本草纲目拾遗》，《中药大辞典》中记载其具有清热解毒、消肿散结之功效。随着现代药理研究的发展，发现土贝母中含有糖类、皂苷和蒽醌等多种化学成分，具有显著的抗炎、抗氧化等活性，可清除人体内的自由基，延缓衰老。

核桃：补肾益肺，健脑长智，乌须发，润肌肤，令人肥健。国内外研究表明，核桃含有丰富的黄酮类和多酚类化合物，有抗菌，清除羟基自由基、超氧自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(dpph)自由基的能力，因此，具有显著的抗氧化、抗衰老功效。

黄连：可清热泻火解毒，消肿止痛，疏风散邪，可治疗皮肤炎症、湿疹、愈合伤口等，具有收敛、消炎、抑制渗出和安抚止痒等作用，有强烈的抗菌性，无局部刺激。黄连提取物对胶原蛋白的生成有促进作用，有活肤作用，结合它们的抗氧化性，可用于抗衰化妆品；黄连提取物还有一定的抑制过敏作用，美白皮肤的作用以及良好的保湿作用。

优选地，所述护肤组合物还包含活性多肽，所述活性多肽包含寡肽-1、水解胶原蛋白和丝肽中的至少一种。

寡肽-1：又名表皮细胞生长因子，是人体内的一种活性物质，由53个氨基组成的活性多肽，其稳定性能极好，在常温下不易失散流动，能与人体内各种酶形成良好的协调效应。寡肽-1藉由刺激表皮细胞生长因子受体之酪氨酸磷酸化，促进细胞的增殖分化，从而以新生的细胞代替衰老和死亡的细胞，达到修补增生肌肤表层细胞的功效，促使表皮细胞变得饱满、恢复年轻状态。它还可以促使胶原蛋白生长能力，修复老化断裂的胶原弹性纤维，所以被众多科学家誉为“美丽因子”。丝肽：是蚕丝蛋白的降解产物，是天然丝经适当条件下水解而获得的，分子量约在300～5000之间。蚕丝美容在中国已有悠久的历史，早在我国明代，蚕丝已作为宫廷贵妃的美容美颜秘方，据《本草纲目》记载:丝粉可以消除皮肤黑斑，治疗化脓性皮炎。现代研究表明，丝肽具有强效持久的保湿能力、自然抗皱并促进胶原蛋白的分泌、强效增白、抗uv、抗发炎及痘疱、改善发炎性伤口的功效。寡肽-1、水解胶原蛋白和丝肽，能修补增生肌肤表层细胞、促使胶原蛋白生长、修复老化断裂的胶原弹性纤维，使表皮细胞变得饱满、恢复年轻状态。

优选地，所述中药复方成分的制备方法为：将中药复方成分的原料采用提取溶剂进行提取，即得所述中药复方成分；所述原料与提取溶剂的重量之比为：原料：提取溶剂＝1:3～10。

优选地，所述活性多肽包含以下重量份数的组分：寡肽-10.00005～0.001份、水解胶原蛋白0.1～1份和丝肽0.1～1份。活性多肽采用上述配比的寡肽-1、水解胶原蛋白和丝肽时，能更好地恢复皮肤弹性，抗衰老效果更佳。

优选地，所述中药复方成分的制备方法为：

(a)、将中药复方成分的原料加入提取溶剂中，于25～50℃浸泡36～72小时，过滤，即得所述中药复方成分；所述原料与提取溶剂的重量之比为：原料：提取溶剂＝1:3～8；

或(b)、将中药复方成分的原料加入提取溶剂中，浸泡18～30小时后，渗漉，即得所述中药复方成分；所述原料与提取溶剂的重量之比为：原料：提取溶剂＝1:5～10；

所述(a)或(b)中，提取溶剂为山茶油、甘油、聚乙二醇400、聚乙二醇600和水中的至少一种。

优选地，所述中药复方成分在护肤组合物中的重量百分含量为0.1～2％。所述中药复方成分在该含量时对dpph自由基、羟自由基具有较强的清除能力，抗氧化效果显著。

优选地，所述中药复方成分在护肤组合物中的重量百分含量为0.5～1％。

优选地，所述护肤组合物包含以下重量百分含量的组分：中药复方成分0.1～2％、活性多肽0.2～2.1％、抗氧化剂1～10％、皮肤渗透剂0.1～1％、保湿剂5～20％、皮肤调理剂0.05～1％和防腐剂0.1％～1％。

在运用现代科学方法深化对中药复方成分药理、剂量、剂型等方面的研究的基础上，合理配以抗衰老生化成分、皮肤调理剂、抗氧化成分等活性成分，所制得的抗衰老产品安全、有效。本发明的护肤品中各成分复配使用能协同增效，提升抗氧化能力及祛皱效果，还可增加肌肤保湿力，具有长效抗衰老、驻颜的功效。

优选地，所述皮肤调理剂包含积雪草提取物和/或尿囊素。积雪草提取物和尿囊素均能够帮助皮肤抗炎、舒缓、促进细胞修复、提高细胞活力的作用。

优选地，所述皮肤调理剂包含积雪草提取物和尿囊素，在护肤组合物中，所述积雪草提取物的重量百分含量为0.1～1％，所述尿囊素的重量百分含量为0.1～0.2％。

优选地，所述抗氧化剂为芦荟提取物。芦荟提取物具有促进纤维蛋白增长、促进胶原蛋白合成以及清除自由基的作用。

优选地，所述皮肤渗透为氮酮；所述保湿剂包括丁二醇、甘油、海藻糖和透明质酸钠中的至少一种；所述防腐剂包括羟苯甲酯和/或苯氧乙醇。

优选地，所述护肤组合物还包含重量百分含量为0.01～0.1％的香精。

优选地，所述护肤组合物的制备方法包含以下步骤：

(1)、将a相组分加热至80～90℃，溶解完全并恒温消毒25～60分钟；

(2)、将b相组分加水溶解；

(3)、将a相加至降温至35～45℃左右，边搅拌边加入b相，搅拌均匀，再加入适量香精，继续搅拌均匀后，即得所述含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物；

在护肤组合物中，所述a相组分包含以下组分：保湿剂、皮肤调理剂和防腐剂；所述b相组分包含以下组分：中药复方成分、活性多肽、抗氧化剂，皮肤渗透剂和防腐剂。

本发明还公开了一种包含上述所述含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物的护肤品，所述护肤品为精华液、爽肤水、喷雾剂或面膜。

所述护肤品除上述组分有明确的要求外，在无损本发明的效果的范围内，本领域技术人员可以根据具体的护肤品剂型添加或使用其他辅料成分。

本发明的有益效果在于：本发明提供了一种含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物，本发明所述含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物运用传统中医理论，选用能活血通经、散瘀止痛的红花，具有收敛止血、消肿生肌之功效的白芨，善能补血、又能活血的当归，均有清热解毒、消肿散结之功效的土贝母、黄连，具有抗氧化、润泽肌肤功效的核桃进行组方；根据该方的特点设计活性成分的提取工艺；提取得到的中药复方成分，不仅能使气血充盈、气血调和，还具有良好的自由基清除能力，保证皮肤年轻红润。该护肤组合物不仅对dpph自由基、羟自由基具有较强的清除能力，抗氧化效果显著；还对对大鼠皮肤床上具有良好的修复作用。总而言之，本发明所述组合物含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物能增强皮肤韧性，促进皮肤再生，改善老化皮肤的病理形态及延缓皮肤衰老。

附图说明

图1为实施例1的中药复方成分对dpph自由基的清除作用图；

图2为实施例3的中药复方成分对dpph自由基的清除作用图；

图3为实施例4的中药复方成分对dpph自由基的清除作用图；

图4为实施例1的中药复方成分对羟自由基的清除作用图；

图5为实施例2中大鼠创面愈合情况及炎症反应。

具体实施方式

本发明实施例的试验材料的来源：所用药材均来源于河北顺威药业有限公司；寡肽-1来源于广州丽嘉化妆品有限公司；水解胶原蛋白、丝肽、积雪草提取物、透明质酸钠均来源于西安韵禾生物科技有限责任公司；羟苯甲酯、苯氧乙醇均来源于浙江圣效化学品有限公司；甘油来源于临沂绿森化工有限公司；丁二醇来源于美国oxea；海藻糖来源于日本林原株式会社；尿囊素提取物来源于上海发凯化工有限公司；芦荟提取物来源于西安四季生物科技有限公司；香精来源于日化香精有限公司。

为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

一种中药复方成分的实施例，本实施例所述中药复方成分的原料如下：红花15g、白芨20g、当归30g、土贝母40g、核桃40g、黄连20g。

本实施例所述中药复方成分的制备方法如下：将原料混合，加入由重量比为：水:甘油:山茶油＝5:90:5组成的提取溶剂中，在25～35℃下浸泡72小时；所述原料与提取溶剂的重量比为：原料：提取溶剂＝1:3，用200目滤布过滤，得中药复方成分。

实施例2

一种中药复方成分的实施例，本实施例所述中药复方成分的原料如下：红花10g、白芨40g、当归20g、土贝母30g、核桃35g、黄连25g。

本实施例所述中药复方成分的制备方法如下：将原料混合，加入由重量比为：水:聚乙二醇400:甘油＝10:20:70组成的提取溶剂中，在40～50℃下浸泡24小时，所述原料与提取溶剂的重量比为：原料：提取溶剂＝1:6，用200目滤布过滤，得中药复方成分。

实施例3

一种中药复方成分的实施例，本实施例所述中药复方成分的原料如下：红花15g、白芨30g、当归25g、土贝母45g、核桃30g、黄连10g。

本实施例所述中药复方成分的制备方法如下：将原料混合，加入由重量比为：水:乙醇＝90:10组成的提取溶剂中，所述原料与提取溶剂的重量比为：原料：提取溶剂＝1:5，浸泡24小时后渗漉，得中药复方成分。

实施例4

一种中药复方成分的实施例，本实施例所述中药复方成分的原料如下：红花20g、白芨15g、当归25g、土贝母30g、核桃30g、黄连15g。

本实施例所述中药复方成分的制备方法如下：将原料混合，加入由重量比为：水:甘油:聚乙二醇600＝70:15:15组成的提取溶剂中，所述原料与提取溶剂的重量比为：原料：提取溶剂＝1:8，浸泡24小时后渗漉，得中药复方成分。

实施例5

一种包含所述含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物的护肤品实施例，本实施例所述护肤品为精华液，本实施例所述精华液包含以下重量百分含量的组分：

a相组分：丁二醇3.0％、甘油5.0％、海藻糖4.0％、透明质酸钠1.0％、积雪草提取物0.5％、尿囊素0.1％、羟苯甲酯0.1％；

b相组分：实施例1制备的中药复方成分1.0％、寡肽-10.001％、水解胶原蛋白1.0％、丝肽1.0％、芦荟提取物5.0％、氮酮0.5％、苯氧乙醇0.2％；

香精0.02％；

余量为水。

本实施例所述精华液的制备方法包括以下步骤：

(1)、将a相组分加热至80～85℃溶解完全，并恒温消毒30分钟；

(2)、将b相组分加入适量纯化水搅拌溶解，采用0.22μm无菌滤膜过滤除菌；

(3)、将a相加至乳化锅内，降温至35～45℃左右，边搅拌(搅拌转速600rpm)边加入b相，搅拌均匀(搅拌转速600rpm)，再加入香精，继续搅拌均匀后，即得所述精华液。

实施例6

一种包含所述含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物的护肤品实施例，本实施例所述护肤品为爽肤水，本实施例所述爽肤水包含以下重量百分含量的组分：

a相组分：丁二醇3.0％、甘油2.0％、海藻糖1.0％、透明质酸钠0.5％、积雪草提取物0.5％、尿囊素0.1％、羟苯甲酯0.1％；

b相组分：实施例1制备的中药复方成分1.5％、寡肽-10.0001％、水解胶原蛋白0.3％、丝肽0.3％、芦荟提取物3.0％、氮酮0.5％、苯氧乙醇0.2％；

香精0.05％；

余量为水。

本实施例所述爽肤水的制备方法同实施例5。

实施例7

一种包含所述含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物的护肤品实施例，本实施例所述护肤品为面膜，本实施例所述面膜包含以下重量百分含量的组分：

a相组分：丁二醇3.0％、甘油3.0％、海藻糖1.0％、透明质酸钠0.5％、积雪草提取物0.5％、尿囊素0.1％、羟苯甲酯0.1％；

b相组分：实施例1制备的中药复方成分2.0％、寡肽-10.0003％、水解胶原蛋白0.5％、丝肽0.5％、芦荟提取物2.0％、氮酮0.5％、苯氧乙醇0.2％；

香精0.02％；

余量为水。

本实施例所述面膜的制备方法包括以下步骤：

(1)、将a相组分加热至80～85℃溶解完全，并恒温消毒30分钟；

(2)、将b相组分加入适量纯化水搅拌溶解，采用0.22μm无菌滤膜过滤除菌；

(3)、将a相加至乳化锅内，降温至35～45℃左右，边搅拌(搅拌转速600rpm)边加入b相，搅拌均匀(搅拌转速600rpm)，再加入香精，继续搅拌均匀后，即得所述面膜液；

(4)、取步骤(3)制得的面膜液25～30ml，将面膜纸浸泡其中，包装，灭菌，即得所述面膜。

实施例8

一种包含所述含中药复方成分的抗衰老驻颜护肤组合物的护肤品实施例，本实施例所述护肤品为喷雾剂，本实施例所述喷雾剂包含以下重量百分含量的组分：

a相组分：丁二醇1.0％、甘油2.0％、海藻糖0.5％、透明质酸钠1.0％、积雪草提取物1.0％、尿囊素0.2％、羟苯甲酯0.1％；

b相组分：实施例1制备的中药复方成分0.5％、寡肽-10.00005％、水解胶原蛋白0.1％、丝肽0.1％、芦荟提取物2.0％、氮酮0.5％、苯氧乙醇0.2％；

香精0.01％；

余量为水。

本实施例所述喷雾剂的制备方法同实施例5。

对比例1

本对比例与实施例5的不同之处在于本对比例所述精华液中不含中药复方成分、活性多肽、芦荟提取物和积雪草提取物，即本对比例所述精华液包含以下重量百分含量的组分：

a相组分：丁二醇3.0％、甘油5.0％、海藻糖4.0％、透明质酸钠1.0％、、尿囊素0.1％、羟苯甲酯0.1％；

b相组分：氮酮0.5％、苯氧乙醇0.2％；

香精0.02％；

余量为水。

本对比例所述精华液的制备方法同实施例5。

对比例2

本对比例与实施例5的不同之处在于本对比例所述精华液中不含中药复方成分，即本对比例所述精华液包含以下重量百分含量的组分：

a相组分：丁二醇3.0％、甘油5.0％、海藻糖4.0％、透明质酸钠1.0％、积雪草提取物0.5％、尿囊素0.1％、羟苯甲酯0.1％。

b相组分：寡肽-10.0002％、水解胶原蛋白1.0％、丝肽1.0％、芦荟提取物5.0％、氮酮0.5％、苯氧乙醇0.2％；

香精0.02％；

余量为水。

本对比例所述精华液的制备方法同实施例5。

实施例9

中药复方成分抗氧化性能的试验

1、dpph自由基清除试验

(1)供试品溶液制备

采用本发明实施例1、实施例3、实施例4所制得的样品作为试验样品。

取实施例1试验样品0.1g，用无水乙醇按重量比配制成浓度为0.1％、0.3％、0.5％、1％、1.5％、2％的实施例1的供试品溶液。

取实施例3试验样品0.1g，用无水乙醇按重量比配制成浓度为0.2％、0.5％、0.8％、1.2％、1.5％、2.0％的实施例1的供试品溶液。

取实施例4试验样品0.1g，用无水乙醇按重量比配制成浓度为0.5％、0.8％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％的实施例1的供试品溶液。

(2)试验方法

取dpph标准品配制成浓度为0.2mmol/l的dpph-乙醇溶液，4℃冰箱中保存备用。分别量取1.5ml各实施例的供试品溶液于试管中，加入1.5ml的dpph-乙醇溶液，摇匀，暗处反应30min，于波长517nm处测定吸光度(ai)。以1.5ml无水乙醇代替各实施例的供试品溶液作为空白测定吸光度ao，用1.5ml无水乙醇代替dpph溶液测定各实施例的供试品溶液吸光度aj。以维生素c为阳性対照，测定方法同供试品溶液测定。按照以下公式进行清除率计算：

清除率(％)＝1-[(di-dj)/do]×100％

(3)试验结果

dpph自由基清除能力测定的试验结果如图1～3所示。从图1～3的结果可以看出，提取液的浓度越大，对dpph自由基的清除能力越强，表明提取液具有清除dpph的能力。从图1的结果可以看出当实施例1的提取液浓度达到0.5％时就有很好的清除效果；从图2的结果可以看出，当实施例3的提取液浓度达到0.8％时就有很好的清除效果，从图3的结果可以看出，当实施例4的提取液浓度达到1.0％时就有很好的清除效果，这表明本发明的中药复方成分在一定浓度范围内具有很好的清除dpph的能力。

2、羟自由基清除试验

(1)供试品溶液制备

采用本发明实施例1所制得的样品作为试验样品。

取实施例1试验样品0.1g，用无水乙醇按重量比配制成浓度为2％、4％、6％、8％、10％的实施例1的供试品溶液。

(2)试验方法

量取1ml0.75mmol/l的邻二氮菲无水乙醇溶液，加入2ml0.05mol/lph7.4的磷酸盐缓冲液和1ml各实施例的供试品溶液，充分混合后再加入1ml0.75mmol/l硫酸亚铁溶液，摇匀，然后加入1ml0.01％过氧化氢溶液，37℃水浴60min，510nm处测吸光值(a样品)；以无水乙醇代替各实施例的供试品溶液测得吸光值(a损伤)；以蒸馏水代替0.01％过氧化氢溶液测得吸光值(a未损)；以维生素c为阳性対照，测定方法同供试品溶液测定。按照以下公式进行清除率计算：

清除率(％)＝[(a样品-a损伤)/(a未损-a损伤)]×100％

(3)试验结果

对羟自由基清除作用的测定结果见图4所示。从图4中可以看出，提取液浓度越大，对羟自由基的清除能力越强。证明本发明对清除自由基有很好的效果，可以有效地祛皱抗皱。

实施例10

大鼠皮肤缺损创伤的药效试验

1、试验样品

分别取实施例5、6、对比例1、2所制得的护肤品。

2、试验方法

2.1动物分组、造模及给药

(1)动物分组

取spf级sd大鼠32只，雌雄各半，试验时体重为180～220g，分成对比例1基质对照组(a组)，对比例2寡肽-1组(b组)，实施例5组(c组)，实施例6组(d组)，每组8只，雌雄各半。

(2)动物造模

大鼠术前禁食不禁水16h(前一天17:30禁食)，手术当天10％水合氯醛(300mg/kg，3ml/kg)腹腔注射麻醉大鼠，背部剃毛约成7cm×4cm的区域，75％酒精消毒皮肤，以大鼠背部脊柱为中线，将自制的直径为2.5cm圆形模具贴在皮肤上，用记号笔延边描出图形，手术刀沿边划线，镊子提起皮肤，眼科剪沿边剪掉皮肤、浅筋膜，直至深筋膜浅面，彻底止血，使其成直径为2.5cm的圆形创面。术后大鼠单笼饲养。

(3)给药方案

造模0.5h后给药，各组按剂量分别给药，用移液枪吸取1ml药量少量多次打在创面上，以浸没创面为宜，等几分钟后再放回笼中。每天换药1次，连续14天。

2.2观察指标及检测方法

(1)大鼠体重

于造模成功后第0、7、14天，各组大鼠进行称重，考察给药后体重变化。

(2)创面愈合百分率

于造模成功后第0、7、14天，在相同条件下，用照相机，固定相同高度，对创面愈合情况进行拍照观察。采用imageproplus图像分析软件计算创面愈合面积百分率，创面愈合面积百分率＝(用药前创面面积－用药后创面面积)/用药前创面面积×100％。

2.3数据统计

计量资料以均数加减标准差表示，以多组间均数的比较采用单因素方差分析(one-wayanova)，组间均数两两比较，采用snk法。病理分析等级资料用非参数秩和检验，组间均数两两比较，采用nemenyi法，由spssl3.0软件完成，α＝0.05。

3、试验结果

3.1大鼠一般情况

于大鼠背部制作上下两个皮肤缺损创面，单笼饲养，0.5h后给药，1次/d，给药14天，并每日观察各大鼠创面愈合情况及炎症反应，详见图5。

创伤后第7天～14天，创面面积越来越小，创面有炎性渗出物，以阴性对照组出现数量较多，创缘周围毛发已长长。

4.2大鼠体重变化

各组体重结果如表1所示，各组大鼠随时间的增长，体重间的差异无统计学意义，说明样品均无增加大鼠体重的作用。

表1各组大鼠体重

4.3创面愈合百分率

各组大鼠创面愈合百分率变化情况详见表2。第7、14天时，与对比例1基质组比较，各组药物创面愈合速率均明显增大；与对比例2寡肽-1组相比，实施例5、6对创面愈合能力更优。

表2各组大鼠创面愈合速率变化

注：与对比例1基质对照组相比，*p<0.05，**p<0.01。

4、试验结论

各药物均有促进皮肤缺损创面愈合的能力，创伤后第7-14天，实施例5、6对皮肤缺损创面愈合效果均比对比例2强，说明本发明所述护肤组合物对缺损创伤具有良好的修复的作用，可增强皮肤韧性，修复受损细胞，从而延缓皮肤衰老。

最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。