本发明涉及化妆品制备技术领域，尤其涉及一种天然美白抗氧化组合物及由其制备的纳米凝胶化妆品。
背景技术
延缓皮肤衰老，拥有健康亮丽的肌肤一直是人们追求的美好夙愿。现代社会随着人们年龄的增长，以及环境污染、紫外线、电磁辐射、工作压力等外界因素，都将导致皮肤色素失调，黑色素沉淀增加，皮肤粗糙，进而加速皮肤老化。抗氧化是预防肌肤衰老的重要一步，由于自由基和氧化剂会破坏细胞组织，妨碍肌肤正常的代谢作用，因此能够有效地控制自由基的数量，就能预防肌肤衰老，拥有健康亮丽的肌肤(臧洪敏，皮肤衰老的影响因素及防治.中国科学美容，1997(10):4-5.)。
人体皮肤色素失调、沉积主要与黑色素有关，黑色素是酪氨酸在酪氨酸酶作用下产生，而酪氨酸酶是酪氨酸转变为黑色素的主要限制酶。常用的美白化妆品主要在于影响酪氨酸酶、黑色素细胞及黑色素的新陈代谢。目前化妆品主要以cu2+螯合剂曲酸、乙二胺四乙酸edta、苯氧肟酸和环庚三烯酚酮等酪氨酸酶活性抑制剂作为美白剂，但长时间使用会对皮肤产生刺激性等不良影响(刘月恒，宋飞飞，王领，董银卯，何聪芬.皮肤黑色素形成机理的研究进展及皮肤美白剂的发展现状.北京日化，2009(1):24-30)。关于皮肤衰老机制包括皮肤衰老的自由基学说、皮肤衰老的代谢失调学说、皮肤衰老基因调控学说、皮肤衰老的光老化学说等，目前比较认可的是自由基学说，为了预防衰老，化妆品主要依靠自由基清除剂预防或清除由于皮肤氧化损伤而产生的过多的氧自由基。现常用的自由基清除剂包括维生素a、维生素e、半胱氨酸、抗坏血酸、谷胱甘肽等，但它们抗氧化效果却不太理想，且化学性质不稳定，对产品生产的工艺要求比较高，同时容易失去活性(郭莉，皮肤衰老的机理和影响因素.中国美容医学,2001,10(5):438-440)。因此，从天然植物中寻找具有抗氧化美白活性的成分，日益受到人们的重视和欢迎。
技术实现要素：
本发明所解决的技术问题在于提供一种天然美白抗氧化组合物及由其制备的纳米凝胶化妆品，以解决上述背景技术中的缺点。
本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现：
天然美白抗氧化组合物，包括白藜芦醇、黄芩苷、光甘草定及玫瑰精油，其重量份数配比为：白藜芦醇1～15份，黄芩苷0.5～5份，光甘草定0.5～15份，玫瑰精油0.05～1份；且光甘草定纯度>90％，白藜芦醇纯度>90％，黄芩苷纯度>90％。
光甘草定是一种天然、绿的美白剂，能够显著抑制酪氨酸酶活性，防止紫外线引起的发炎、色素沉着和皮肤粗糙；白藜芦醇具有显著的抗氧化、抗自由基作用，主要是在自由基形成前起抑制作用，起到防预效果，而黄芩苷可以清除已经生成的自由基和减少自由基的生成，这两者相互结合，能够充分发挥本发明抗氧化的作用，同时白藜芦醇是一种炎性抑制因子，可直接抑制炎症反应过程，黄芩苷也同时具有抗过敏和抗紫外线的作用。各成分组配，具有很好的协同作用，这使得抗氧化组合物在具有美白抗氧化作用的同时还具有抗炎、抗过敏作用。
由上述天然美白抗氧化组合物制备的纳米凝胶化妆品，包括抗氧化组合物、稳定剂、凝胶基质、助剂及双蒸水，其质量百分配比为抗氧化组合物2～45份，稳定剂0.5～5份，凝胶基质为5～20份，助剂为0～10份，双蒸水100份。
所述稳定剂为卵磷脂、甜茶苷、d-α生育酚、聚乙二醇琥珀酸酯中的任何一种或任意多种混合物。
所述凝胶基质为阿拉伯胶、黄原胶、卡波姆、透明质酸、透明质酸钠、西黄蓍胶、海藻糖的任何一种或任意多种混合物。
所述助剂为香精、保湿剂与防腐剂中的一种或两种或三种。
纳米凝胶化妆品的制备方法，具体步骤如下：
(1)将白藜芦醇、黄芩苷、光甘草定、玫瑰精油及稳定剂按照重量份数配比，加入双蒸水中分散，而后加入高压均质机中，控制均质温度为4～10℃，分别在200bar、400bar、600bar各循环5～30次；再在800bar～1000bar条件下循环20～50次，制得均一的纳米胶体分散液；
(2)在步骤(1)制得的纳米胶体分散液中加入凝胶基质，搅拌溶胀生成均一的纳米凝胶；
(3)将助剂加入纳米凝胶中，即可得纳米凝胶化妆品。
有益效果：
(1)本发明的抗氧化组合物以光甘草定、白藜芦醇、黄芩苷、玫瑰精油为主要活性成分，通过将光甘草定、白藜芦醇、黄芩苷、玫瑰精油按限定的比例进行复配，所得组合物及化妆品具有良好的抗氧化协同效果；
(2)本发明所含光甘草定、黄芩苷、白藜芦醇、玫瑰精油均难溶于水，通过运用高压均质技术，依靠稳定剂的作用实现所含活性成分的纳米化分散，能够更好的促进活性成分的皮肤渗透和吸收，同时借助凝胶结构以保持活性成分的纳米化分散与稳定；
(3)本发明产品不会对使用者产生过敏、刺激等现象，使用安全，在抗氧化、延缓皮肤衰老的功效上有显著的效果。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白清晰，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
实施例1
(1)制备天然美白抗氧化组合物
首先将光甘草定、白藜芦醇、黄芩苷按照表1所述的重量份数直接混合均匀得混合粉末，而后将一定比例的玫瑰精油喷入混合粉末密封、混合均匀；
表1抗氧化组合物配方表
(2)制备对照例1～4
与实施例1的配方相比，对照例1～4分别采用表2所示的配方(重量份数)：
表2对照例1～4配方表
试验例1组合物的抗氧化作用的测试(dpph测试)
为了在实施例1和对照例1～4制备得到的组合物的抗氧化作用，基于由自由基dpph的还原(抗氧化剂被氧化)所引起的吸光度变化，通过比较测定dpph(1，1-二苯基-2-苦基腙(1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl))氧化抑制作用于评价上述制备得到的组合物的抗氧化活性。对于实施例1和对照例1～4，与对照物相比较，测定由抑制dpph的氧化所引起的吸光度的下降，吸光度为对照物的50％时的浓度定义为有效抗氧化浓度；
制备试验样品
从实施例1和对照例1～4制备的组合物各取0.5g，加乙醇至50ml定容，作为供试品溶液，将10μl的供试品溶液和阳性对照物样品分别加入至190μl的100μm的dpph乙醇溶液中，以制备各自的反应溶液；再将反应溶液于37℃下反应30min，随后在540nm下测定吸光度，使用广泛使用的合成抗氧化剂水溶性维生e(trolox)作为阳性对照物，每一种组合物的dpph分析结果如表3所示，ic50是指吸光度下降50％时的样品浓度；
表3dpph分析结果统计表
从表3可知，与对照例1～4相比，实施例1中的光甘草定、白藜芦醇、黄芩苷产生协同作用，有效提高抗氧化的作用；而对照例4与实施例1相比，抗氧化作用相当，说明玫瑰精油抗氧化作用较弱；
试验例2测定大鼠的色素细胞的黑色素生成抑制效果
为确认所述实施例1配方、对照例1～4与对照试料的黑色素生成抑制效果，利用大鼠的色素细胞进行测定：
首先，将源自c57bl/6小鼠的鼠色素细胞(mel-abcell)接入含有10％胎牛血清、100nm12-o-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(12-o-tetradecanoylphorbol-13-acetate)、1nm霍乱毒素(choleratoxin)的dmem培养基中，在37℃、5％co2的条件下进行培养；再将培养的mel-ab细胞用0.25％的胰岛素-edta分离，而后在24-孔板上以105细胞/孔(cells/well)的浓度培养细胞，第二天开始连续3天以10ppm的对苯二酚、对照例1～4和实施例1中制备的组合物以及空白对照试料作为试验物质添加培养；此时，所述对苯二酚作为阳性对照组而使用，随后除去培养液，用pbs洗涤后，用1n氢氧化钠溶解细胞，在400nm下测定吸光度，然后按照下式(1)计算黑色素生成抑制率，将其结果在表4中示出(dooley的方法)；
黑色素生成抑制率(％)＝100-(试验物质的吸光度/对照组的吸光度×100)(1)
表4大鼠色素细胞的黑色素生成抑制效果表
从表4可知，实施例1与对照例1～3相比，加入光甘草定与黄芩苷有协同作用，提高抑制黑色素的作用；实施例1与对照例4相比，加入玫瑰精油也有利于提高细胞的抗氧化性，有一定的抑制黑色素生成作用。
实施例2制备纳米凝胶化妆品
按照表5所示的重量份数配比制备实施例2和对照例a～d：
表5纳米凝胶重量份数配比表
纳米凝胶化妆品按以下步骤制备：
首先按实施例1中的重量份数配比称取白藜芦醇、黄芩苷、光甘草定、玫瑰精油混合制备各自的抗氧化组合物，在按照表5配比称取聚乙二醇琥珀酸酯，加入双蒸水中分散，而后加入高压均质机中，控制均质温度为4～10℃，分别在200bar、400bar、600bar各循环5～30次；再在800bar～1000bar条件下循环20-50次，制得均一的纳米胶体分散液如表6所示，最后向纳米胶体分散液中再加入表5所述的透明质酸钠、海藻糖，保持温度40～60℃，搅拌溶胀生成均一的纳米凝胶，最后将助剂加入纳米凝胶中，即得纳米凝胶化妆品。
表6纳米胶体分散液粒径表
实施例2与对照例a-d的凝胶理化测试，其测试如下：
1.外观：细腻凝胶；
2.ph值：5.0-7.0；
3.粘度：50000-150000mpa.s；
4.耐热稳定性考察(48℃×24h):合格；
5.耐寒稳定性考察(-15℃×24h):合格。
试验例3纳米凝胶的美白抗氧化功效试验
美白抗氧化功效试验均采用人体测试方式，通过皮肤黑红色素测试仪和皮肤色度测试探头+mpa9测试仪测定皮肤的黑色素含量和皮肤亮度：
选取120个志愿者，男女各半，随机分为6组，每组20人，每组分别用实施例2中的制备得到的纳米凝胶化妆品和空白例进行试验，空白例为普通的水溶液，各组的测试数据均取平均值，受试部位前2～3天不能使用任何产品；采用干面巾纸将双手前臂内侧擦拭干净并做4×4cm2试验区域测定标记，运用皮肤黑红色素测试仪和皮肤色度测试探头+mpa9测试仪测定受试皮肤的黑色素含量和皮肤亮度；而后将测试样品和空白组按10.0±0.3mg凝胶样品/cm2的用量分别覆盖在左右手臂上，每天早、晚间使用一次，重复上述试验1～4周，后分别测量第1～4周每个区域的黑色素含量和皮肤亮度：
(1)黑色素含量变化分析
皮肤黑色素含量变化反映在测试周期内，试验区域皮肤黑色素含量随时间变化规律，其值越大，皮肤黑色素含量越大，反之，皮肤黑色素含量；黑色素含量差值(δt)＝使用产品后各时间点黑色素含量(tn)-使用产品前黑色素含量(t0)如表7所示：
表7受试部位皮肤黑色素含量与初始值的差值表
在测试周期4周内，空白组受试部位皮肤的黑色素含量呈正值，数值无明显变化，说明涂抹的基质不具有转移黑色素的能力。实施例2组受试部位皮肤的黑色素含量与初始值的差值一直为负值；第4周时黑色素含量差值为-5以下，且随时间的延长而显著降低，说明该纳米凝胶化妆品具有转移或降低黑色素含量的能力；实施例2组和对照例i组相比，加入光甘草定可以提高抑制黑色素的作用；实施例2组和对照例iii组相比，加入黄芩苷可以有效地使皮肤镇静、抗炎，产生增效抑黑抗老化的效果；对照例iv组相比，加入玫瑰精油也明显提高抑制黑色素的作用。
试验例4纳米凝胶的皮肤亮度的分析
测试期间，皮肤亮度变化分析主要考察实验区域皮肤亮度l值随时间变化规律，其值越大，皮肤亮度越大，反之，皮肤亮度越低；皮肤亮度差值(δt)＝使用产品后各时间点l值(tn)-使用产品前l值(t0)如表8所示:
表8受试部位皮肤亮度l值与初始值的差值表
从表8可知，实施例2相比于对照例i～iv，由实施例1制备得到的纳米凝胶化妆品可有效地改善皮肤的亮度。
试验例5纳米凝胶化妆品的安全性测试
上述志愿者涂抹本产品测试期间，未见皮肤发红或出现红斑等过敏现象，说明本纳米凝胶化妆品安全性良好，没有任何不良现象。