本发明属于制药技术领域，尤其涉及一种抗过敏的组合物及其制备方法与应用。
背景技术
过敏是一种机体的变态反应，是人对正常物质(过敏原)的一种不正常的反应，只有当过敏原接触到过敏体质的人群才会发生过敏，过敏原有花粉、粉尘、异体蛋白、化学物质、紫外线等几百种。在过敏反应的发生过程中，过敏介质起着直接的作用。
抗过敏药物主要指抗组胺类药。第一代抗组胺药(如扑尔敏、苯海拉明)，有明显的镇静作用和中枢神经不良反应，最常见的是嗜睡和乏力，反应时间延长等。另外，此类药物还具有抗胆碱能作用，可引起口干、眼干、视力模糊、便秘、尿潴留等症状，还可能诱发青光眼。因此，前列腺肥大、青光眼、肝肾功能低下者和老年患者应慎用。
目前，针对皮肤过敏多使用激素类药物，副作用大，而国内目前虽有少部分的中药组合物，对缓解皮肤过敏有一定疗效，但是成分效果不明朗，有效成分也不确切，副作用也未经过调研，存在安全隐患。因此寻找一种成分明朗，效果显著的减缓过敏反应的组合物，是本领域目前刻不容缓的事情。
技术实现要素：
本发明目的在于解决现有的抗过敏的组合物疗效低下，对服用者副作用大，存在安全隐患。
为了解决上述问题，本发明提供一种抗过敏的组合物的应用以及含有该抗敏组合物的制剂的制备方法。
具体方案如下：
第一方面，本发明提出一种抗过敏的组合物，所述组合物包括以下重量份组分：1-10份nadh、1-10份葡萄籽提取物、1-10份燕窝酸、1-10份s-腺苷蛋氨酸、1-10份ppd以及1-10份rh2。
其进一步地技术方案为：还包括辅药，所述辅药包括以下重量份组分的至少一种：0.9-8.3份果胶多糖、0.9-9.5份丁香油酚、0.9-8份没食子酸，0.9-8.3份枳实提取物，1.1-9.2份红球姜提取物，1.1-9.2份悬钩子叶，0.5-10份白芨，4-15份木蓝、4-14份车前子、3-7份秦皮、1-6份软蒺藜、1.1-9.2份香草精、3-5份马齿苋提取物、1-3份地榆提取物、0.5-1份大黄提取物；其中，所述果胶多糖的分子量为6000道尔顿以上。
其进一步地技术方案为：还包括辅药，所述辅药包括以下重量份组分的至少十种：0.9-8.3份果胶多糖、0.9-9.5份丁香油酚、0.9-8份没食子酸，0.9-8.3份枳实提取物，1.1-9.2份红球姜提取物，1.1-9.2份悬钩子叶，0.5-10份白芨，4-15份木蓝、4-14份车前子、3-7份秦皮、1-6份软蒺藜、1.1-9.2份香草精、3-5份马齿苋提取物、1-3份地榆提取物、0.5-1份大黄提取物；其中，所述果胶多糖的分子量为6000道尔顿以上。
其进一步地技术方案为：还包括辅料，所述辅料包括以下重量份组分的至少三种：0.5-5份尼泊金复合酯，0.5-5份富马酸，0.5-5份磷酸盐，0.5-5份木糖醇、0.5-5份微晶纤维素、0.5-5份失水山梨醇脂肪酸酯、0.5-5份硬脂酸镁、0.5-5份交联羧甲基纤维素钠、0.5-5份氢氧化镁、0.5-5份预胶化淀，0.5-5份硫酸钙，0.5-5份气相二氧化硅，0.5-5份乳糖。
本发明还提供了上述的抗过敏的组合物在制备缓解和/或减轻过敏症状、祛风止痒的药物中的应用。
第二方面，本发明提供一种抗过敏的组合物的制剂，其特征在于，包括如权利要求1-5任一项所述的抗过敏的组合物。
本发明还提供如第一方面、第二方面所述的抗过敏的组合物的水剂的方法，包括如下步骤：
s1、将组合物中的各组分分别干燥、粉碎、过30-80目筛，并按比例称重混合；
s2、向步骤s1得到的混合物中加水并在25-40℃下搅拌混合均匀，然后升温至50℃后搅拌1-2h，得到抗过敏的组合物的水剂。
本发明还提供如第一方面、第二方面所述的抗过敏的组合物的片剂的方法，包括如下步骤：
s1、将组合物中各组分分别干燥、粉碎、过40-60目筛，并按比例称重混合；
s2、将步骤s1得到的混合物烘干后进行整粒和压片处理，得到抗过敏的组合物的片剂。
本发明还提供如第一方面、第二方面所述的抗过敏的组合物的软胶囊的方法，包括如下步骤：
s1、将组合物中各组分分别干燥、粉碎、过40-60目筛，并按比例称重混合；
s2、将步骤s1得到的混合物充填于软胶囊体中，并经过压丸、定型干燥、洗丸、晾丸、捡丸、包装的步骤，得到抗过敏的组合物的软胶囊。
本发明还提供如第一方面、第二方面所述的抗过敏的组合物的胶囊的方法，包括如下步骤：
s1、将辅药干燥、粉碎为颗粒，按比例称重混匀，向混合颗粒中加70％的乙醇加热回流提取2h，乙醇的添加量为混合颗粒质量的5倍，过滤处理，得到第一药渣和第一药液，将第一药渣与3倍量的70％乙醇加热回流提取1h，过滤处理，得到第二药渣和第二药液，将第一药液、第二药液混合，并减压浓缩制得相对密度为1.35-1.4的第一稠膏备用；
s2、将步骤s1得到的第二药渣加7倍量的水，加热回流提取4h，得到挥发油、药渣和药液的混合物，分取所述挥发油，并将药渣和药液的混合物过滤分离，得到第一上清液和第三药渣；
s3、将nadh、葡萄籽提取物、燕窝酸、s-腺苷蛋氨酸、ppd以及1-10份rh2与步骤s2得到第三药渣混合，加18倍量的水煎煮提取2h，过滤得到第一滤液和第一滤渣，将第一滤液离心分离，得到第二上清液；将第一滤渣加12倍量的水煎煮提取1h，过滤得到第二滤液和第二滤渣，将第二滤液离心分离，得到第三上清液；将第二上清液、第三上清液与步骤s2中的第一上清液混合，减压浓缩制得相对密度为1.35-1.4的第二稠膏备用；
s4、将糊精、微粉硅胶混匀并与第一稠膏、第二稠膏共同搅拌均匀，将得到的混合物干燥并粉碎后，加入糊精，喷入步骤s2得到的挥发油后过筛、混匀并装入胶囊壳，得到抗过敏的组合物的胶囊。
与现有技术相比，本发明所能达到的技术效果包括：
本发明的优点和效果在于各个组分采用适宜的配伍比例，协同发挥作用，提供一个能够全方位针对多个环节的一种抗过敏的组合物。
本发明所述的抗过敏的组合物组分简单、配比合理、各组分间协同作用，以整体观念辩证治疗、毒副作用小，具有清热解毒、祛风止痒之功，对过敏性皮炎具有显著疗效。本发明中药组方依据中医对湿疹的辨证认知，遵循中药的配伍理论，为了制成方便易用且疗效稳定的制剂，强化了药材的使用量。该组方是以nadh和葡萄籽提取物为君药，益肝清热化湿；以人参皂苷ppd，人参皂苷rh2为臣药，祛风止痒、渗湿通淋；以s-腺苷蛋氨酸为佐药，补中益气；以燕窝酸为使药，调和诸药药性，诸药配合，相辅相成，协同作用，共同配合起到了驱风散邪、清热解毒、祛风止痒等功效，对过敏症状有十分显著的疗效，调整内分泌系统功能，改善机体内外环境，从而缓解或减轻过敏的各种症状，适于抗过敏领域中的推广应用。本发明提供的抗过敏组合物的原料均为天然舒缓成分，组分明确，药效温和，安全合理，工艺简单易行，具有很好的应用前景和市场前景。
发明人在传统配方的基础上，首次提出加用nadh和葡萄籽提取物、ppd、人参皂苷rh2等明确的有效成分的理论，并以该理论为指导思想，通过大量药理实验。中西医理论相呼应，加入各类特定的辅料的引入能够显著提高方中其它药材对抗过敏具有促进效果，以上几个组分发生了协同增效作用。
现有报道中，nadh、葡萄籽提取物、ppd、rh2四者仅仅单独作为原料被使用，目前尚未检索到任何将四者共同使用制备的组合物，本发明通过调配得到了1+1+1+1＞4的技术效果。本发明所述的抗过敏的组合物制剂的制备方法，步骤简单、条件温和，适宜于工业化批量生产。
具体实施方式
以下通过实施例和实验来具体阐述本发明的内容，这些实施例和实验只是为了进一步说明本发明的内容而阐述的，本发明的权利范围不受这些实施例和实验所记载内容的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供一种抗过敏的组合物，以重量份计，所述组合物包括5份的nadh、5份的人参皂苷ppd、5份的人参皂苷rh2、5份的葡萄籽提取物、5份的燕窝酸、5份的s-腺苷蛋氨酸；分子量在8000道尔顿的果胶多糖4重量份、丁香油酚4重量份、没食子酸0.9～8重量份、枳实提取物4.5重量份，红球姜提取物5.5份、悬钩子叶6份、白芨5.5份，木蓝8份、车前子7.5份、秦皮4.5份。
本实施例还提出了上述抗过敏的组合物在制备缓解和/或减轻过敏症状、祛风止痒的药物中的应用。
本发明实施例提供的抗过敏的组合物，其中，nadh(即烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的制备方法包括如下步骤：
a.提取烟酰胺核苷腺苷酰转移酶的粗提物或其纯酶；
b.固定化重组烟酰胺核苷腺苷酰转移酶的粗提物或其纯酶；
c.用固定化重组烟酰胺核苷腺苷酰转移酶催化，以烟酰胺核苷酸和三磷酸腺苷二钠(atp)为底物制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。
具体步骤如下：
将含烟酰胺核苷腺苷酰转移酶基因的质粒prset-bmj转化感受态细菌细胞e.colihb101，在luriabroth(lb)平板(含100mg/l卡那霉素)上37℃培养24小时。接种单个克隆于5毫升lb液体培养基(含100mg/l卡那霉素)中于30℃培养2024小时。离心收集菌体，并悬浮于1毫升100mmtris盐酸缓冲液(ph7.5)中。然后用超声波裂解细菌细胞。离心(10℃，17,800g，10分钟)并收集上清液，即为粗提蛋白(或称粗提物)。重组的烟酰胺核苷腺苷酰转移酶粗提蛋白经70℃热处理10分钟，离心(10℃，17,800g，10分钟)并收集上清液，即为部分纯化的蛋白。
烟酰胺核苷腺苷酰转移酶固定化
取烟酰胺核苷腺苷酰转移酶粗提蛋白或部分纯化的蛋白，用洗酶缓冲液(0.02mtrishcl/0.001medta，ph7.0溶液)稀释至蛋白含量5-10mg/ml。将酶稀释液与pb溶液(2.0mol/l磷酸二氢钾，ph7.5)等体积混合，加入环氧型固定化酶载体lx-3000(10毫克酶/克载体)，于摇床(转速100rpm)中25℃反应20小时。反应完成后用滤袋过滤，用洗酶缓冲液清洗5-6次，得到固定化烟酰胺核苷腺苷酰转移酶。
用固定化烟酰胺核苷腺苷酰转移酶制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
配制底物溶液：含5mm的烟酰胺核苷酸、10mm的三磷酸腺苷二钠(atp)、100mmtris盐酸缓冲液和终浓度为10mm的mgcl2，调ph至7.5。取底物溶液1毫升，然后加入0.05克固定化烟酰胺核苷腺苷酰转移酶，于37℃进行反应2-20小时。离心(10℃，17,800g，15分钟)并收集上清液。通过高效液相色谱(hplc)测定所得上清液中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的含量。结果，烟酰胺核苷酸转化为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的转化率超过80％。
本实施例提供的抗过敏组合物可用于治疗荨麻疹，湿疹，皮炎，过敏性鼻炎，皮肤瘙痒等过敏性疾病。对于驱风散邪、清热解毒、祛风止痒有显著功效，对过敏症状有十分显著的疗效，调整内分泌系统功能，改善机体内外环境，从而缓解或减轻过敏的各种症状，适于抗过敏领域中的推广应用，其原料均为天然舒缓成分，组分明确，药效温和，安全合理，工艺简单易行，具有很好的应用前景和市场前景。
实施例2
本实施例提供一种抗过敏的组合物，以重量份计，所述组合物包括1份的nadh、10份的人参皂苷ppd、1份的人参皂苷rh2、10份的葡萄籽提取物、1份的燕窝酸、10份的s-腺苷蛋氨酸。
本实施例还提出了上述抗过敏的组合物在制备缓解和/或减轻过敏症状、祛风止痒的药物中的应用。
例如，本实施例提出一种抗过敏的组合物的水剂，所述水剂通过如下步骤制备：
s1、将组合物中的各组分分别干燥、粉碎、过30目筛，使颗粒度分布均匀，流动性更好，按各组分比例称重混合均匀；
s2、向步骤s1得到的混合物中加水，水与混合物的质量比为2：1，在25℃下搅拌混合均匀，然后升温至50℃后搅拌1h，得到抗过敏的组合物的水剂。
在本实施例中，可依据口感添加适宜的调味剂如白糖、蜂蜜、食用盐等，本发明对此不做具体限定。
实施例3
本实施例提供一种抗过敏的组合物，以重量份计，所述组合物包括10份nadh、1份葡萄籽提取物、10份燕窝酸、1份s-腺苷蛋氨酸、10份ppd以及1份rh2。
本实施例中，所述抗过敏的组合物还包括辅药和辅料，以重量份计，辅药以及辅料，辅料包括7份秦皮、1份软蒺藜、1.1份香草精、5份马齿苋提取物、1份地榆提取物、1份大黄提取物；辅料包括0.5份微晶纤维素、0.5份失水山梨醇脂肪酸酯、2份硬脂酸镁、4份交联羧甲基纤维素钠。
本实施例还提出了上述抗过敏的组合物在制备缓解和/或减轻过敏症状、祛风止痒的药物中的应用。
例如，本实施例提出一种抗过敏的组合物的软胶囊，所述软胶囊通过如下步骤制备：
本实施例还提出一种抗过敏的组合物的软胶囊，所述软胶囊通过如下步骤制备：
s1、将组合物的各组分分别干燥、粉碎、过60目筛，并按比例称重混合均匀；
s2、将步骤s1得到的混合物充填于软胶囊体中，并经过压丸、定型干燥、洗丸、晾丸、捡丸、包装的步骤，得到抗过敏的组合物的软胶囊，所述软胶囊体以常规工艺制备：将甘油和水加入溶胶罐中，随后分别加入明胶和相关辅料，搅拌、真空脱气，制得软胶囊体。
实施例4
本实施例提供一种抗过敏的组合物，以重量份计，所述组合物包括3份nadh、7份葡萄籽提取物、4份燕窝酸、8份s-腺苷蛋氨酸、9份ppd以及7份rh2。
本实施例中，所述抗过敏的组合物还包括辅药和辅料，以重量份计，辅药以及辅料，辅药包括1份分子量为6000道尔顿的果胶多糖、0.9份丁香油酚、8份没食子酸，1.1份红球姜提取物，9.2份悬钩子叶，0.5份白芨，4份木蓝、14份车前子、5份秦皮、1份软蒺藜、1.1份香草精、5份马齿苋提取物、1份大黄提取物；辅料包括5份尼泊金复合酯，4.7份富马酸，0.5份氢氧化镁、0.5份预胶化淀、3.1份磷酸盐，5份木糖醇。
本实施例还提出了上述抗过敏的组合物在制备缓解和/或减轻过敏症状、祛风止痒的药物中的应用。
例如，本实施例提出一种抗过敏的组合物的胶囊，所述胶囊通过如下步骤制备：
s1、将辅药干燥、粉碎为颗粒，按比例称重混匀，向混合颗粒中加70％的乙醇加热回流提取2h，乙醇的添加量为混合颗粒质量的5倍，过滤处理，得到第一药渣和第一药液，将第一药渣与3倍量的70％乙醇加热回流提取1h，过滤处理，得到第二药渣和第二药液，将第一药液、第二药液混合，并减压浓缩制得相对密度为1.35-1.4的第一稠膏备用；
s2、将步骤s1得到的第二药渣加7倍量的水，加热回流提取4h，得到挥发油、药渣和药液的混合物，分取所述挥发油，并将药渣和药液的混合物过滤分离，得到第一上清液和第三药渣；
s3、将nadh、葡萄籽提取物、燕窝酸、s-腺苷蛋氨酸、ppd以及1-10份rh2与步骤s2得到第三药渣混合，加18倍量的水煎煮提取2h，过滤得到第一滤液和第一滤渣，将第一滤液离心分离，得到第二上清液；将第一滤渣加12倍量的水煎煮提取1h，过滤得到第二滤液和第二滤渣，将第二滤液离心分离，得到第三上清液；将第二上清液、第三上清液与步骤s2中的第一上清液混合，减压浓缩制得相对密度为1.35-1.4的第二稠膏备用；
s4、将糊精、微粉硅胶、辅料混匀并与第一稠膏、第二稠膏共同搅拌均匀，将得到的混合物干燥并粉碎后，加入糊精，喷入步骤s2得到的挥发油后过筛、混匀并装入胶囊壳，得到抗过敏的组合物的胶囊。
实施例5
本实施例提供一种抗过敏的组合物，以重量份计，所述组合物包括2份nadh、9份葡萄籽提取物、6份燕窝酸、5份s-腺苷蛋氨酸、8份ppd以及9份rh2。
本实施例中，所述抗过敏的组合物还包括辅药和辅料，以重量份计，辅药以及辅料，辅药包括8份分子量为6000道尔顿的果胶多糖、9份丁香油酚、3份没食子酸，6.2份枳实提取物，3.8份红球姜提取物，2.6份悬钩子叶，9份白芨，14份木蓝、6份车前子、4.5份秦皮、5.3份软蒺藜、7.8份香草精、3.1份马齿苋提取物、2.5份地榆提取物，0.29份大黄提取物；辅料包括4.9份尼泊金复合酯，3.1份富马酸，2.3份磷酸盐，3.5份微晶纤维素、4.1份失水山梨醇脂肪酸酯、4.6份硬脂酸镁、1.8份交联羧甲基纤维素钠、0.9份氢氧化镁、4.7份预胶化淀，2.5份硫酸钙，1.5份气相二氧化硅，5份乳糖。
本实施例还提出了上述抗过敏的组合物在制备缓解和/或减轻过敏症状、祛风止痒的药物中的应用。
例如，本实施例提出一种抗过敏的组合物的片剂，所述片剂通过如下步骤制备：
s1、将组合物中的各组分分别干燥、粉碎、过60目筛，使颗粒度分布均匀，流动性更好，按各组分比例称重混合均匀；
s2、将步骤s1得到的混合物烘干后进行整粒和压片处理，得到抗过敏的组合物的片剂，所述片剂理论片重为500mg，最后进行薄膜包衣、检验和包装。
实施例6
本实施例提供一种抗过敏的组合物，以重量份计，所述组合物包括9份nadh、3份葡萄籽提取物、8份燕窝酸、2份s-腺苷蛋氨酸、4份ppd以及2份rh2。
本实施例中，所述抗过敏的组合物还包括辅药和辅料，以重量份计，辅药以及辅料，辅药包括2.3份枳实提取物、4.8份红球姜提取物、6.1份悬钩子叶、7.4份白芨、10份木蓝、8份车前子、6份秦皮、4.1份软蒺藜、8.1份香草精、4份马齿苋提取物、3份地榆提取物；所述辅料包括3.8份失水山梨醇脂肪酸酯、1.1份硬脂酸镁、0.6份交联羧甲基纤维素钠、5份氢氧化镁、4.1份预胶化淀、2份硫酸钙、0.9份气相二氧化硅、4.6份乳糖。
本实施例还提出了上述抗过敏的组合物在在制备缓解和/或减轻过敏症状、祛风止痒的药物中的应用。
例如，本实施例提出一种抗过敏的组合物的水剂，所述水剂通过如下步骤制备：
s1、将组合物中的各组分分别干燥、粉碎、过60目筛，使颗粒度分布均匀，流动性更好，按各组分比例称重混合均匀；
s2、向步骤s1得到的混合物中加水，水与混合物的质量比为3：1，在40℃下搅拌混合均匀，然后升温至50℃后搅拌2h，得到抗过敏的组合物的水剂。
实施例7
本实施例提供一种抗过敏的组合物，以重量份计，所述组合物包括2.8份nadh、3.6份葡萄籽提取物、4.3份燕窝酸、2.5份s-腺苷蛋氨酸、5.5份ppd以及9.8份rh2。
本实施例中，所述抗过敏的组合物还包括辅药和辅料，以重量份计，辅药以及辅料，辅药包括8.7份木蓝、10.6份车前子、7份秦皮、5份软蒺藜、3份香草精、3份马齿苋提取物、1份地榆提取物；所述辅料包括1份尼泊金复合酯、5份富马酸、3份磷酸盐、4份木糖醇、2份失水山梨醇脂肪酸酯、3份硬脂酸镁、3份交联羧甲基纤维素钠、4份氢氧化镁、1份预胶化淀、4份硫酸钙、3份气相二氧化硅、2份乳糖。
本实施例还提出了上述抗过敏的组合物在在制备缓解和/或减轻过敏症状、祛风止痒的药物中的应用。
例如，本实施例提出一种抗过敏的组合物的软胶囊，所述软胶囊通过如下步骤制备：
s1、将组合物的各组分分别干燥、粉碎、过40目筛，并按比例称重混合均匀；
s2、将步骤s1得到的混合物充填于软胶囊体中，并经过压丸、定型干燥、洗丸、晾丸、捡丸、包装的步骤，得到抗过敏的组合物的软胶囊。
本实施例中，软胶囊体以常规工艺制备：将甘油和水加入溶胶罐中，随后分别加入明胶和相关辅料，搅拌、真空脱气，制得软胶囊体。
实验例
本发明所用试剂和原料均市售可得或可按文献方法制备。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
抗过敏实验
取体重(20±2)g小鼠140只，雌雄各半，随机分组，分别为空白组，氯苯那敏组，实施例2～6，每组20只。按剂量灌胃给药，空白组给予等容积蒸馏水，每天给药1次，连续10d。给药第5d，将3％的2，4－二硝基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤(去毛)致敏(统一面积)。末次给药0.5h后再用3％的2，4-二硝基氯苯涂右耳，左耳做对照。0.5h后处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用一定直径的打孔器打下双耳同一部位圆片，用电子分析天平精密称重，以左、右耳片重量之差作为迟发型超敏反应值，换算为抗敏有效率，结果见表1所示。
表1抗过敏实验结果
由表1可知，本发明实施例提供的抗过敏组合物的不同制剂，其抗敏有效率在95％以上，较现有的药物(氯苯那敏)有显著的抗过敏疗效。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。