白花前胡甲素在缓解抗肿瘤药物顺铂所致肾毒性中的应用的制作方法

本发明属于医药领域，涉及已知化合物的新用途，具体涉及白花前胡甲素在缓解抗肿瘤药物顺铂所致肾毒性中的应用。

背景技术：

顺铂是在1965年由美国科学家rosenberg等人偶然发现。该药自用于临床治疗癌症以来，被认为是治疗实体瘤的高效、广谱抗癌药，广泛应用于小细胞和非小细胞肺癌、睾丸癌、卵巢癌、宫颈癌等肿瘤的治疗。然而顺铂在临床上虽得到广泛应用，但是存在两个严峻的问题：一是获得性耐药，二是组织或器官毒性。顺铂能引起多个组织(器官)的不良反应，常见的有肾脏、肝脏、消化系统、造血系统、耳、神经毒性、过敏反应，其中肾脏毒性是最为严重的不良反应，且成剂量依赖性。

因此，有必要开发缓解抗肿瘤药物顺铂所致肾毒性的药物。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供白花前胡甲素在缓解抗肿瘤药物顺铂所致肾毒性中的应用。

本发明上述目的通过如下技术方案实现：

白花前胡甲素在制备缓解抗肿瘤药物顺铂所致肾毒性的药物中的应用。

一种用于缓解抗肿瘤药物顺铂所致肾毒性的药物制剂，活性成分为白花前胡甲素，还含有药学上可以接受的载体或赋形剂，制成药学上可以接受的剂型。

进一步地，所述载体或赋形剂为固体或液体辅料。

进一步地，所述剂型为片剂、丸剂、膏剂、胶囊、注射剂或口服液。

有益效果：

本发明发现，白花前胡甲素可以有效缓解顺铂对人近端肾小管细胞株hk-2细胞的毒性损伤，因此，白花前胡甲素有望开发成用于缓解顺铂所致肾毒性的药物。

附图说明

图1为顺铂组浓度为10μm时，各组的hk-2细胞存活率比较；

图2为顺铂组浓度为20μm时，各组的hk-2细胞存活率比较。

具体实施方式

下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。

一、实验材料

人近端肾小管细胞株hk-2由中国药科大学药物代谢动力学实验室惠赠。dmem/f12基础培养基和0.25％含edta的胰酶购自厚百生物商城，胎牛血清(fbs)购自南京福麦斯生物技术有限公司(货号04-001-1acs)，cck-8试剂盒购自碧云天生物技术有限公司(货号c0039)，白花前胡甲素(cas号73069-25-7)购自成都瑞芬思生物科技有限公司。

二、实验方法

1、细胞培养

人近端肾小管细胞株hk-2细胞培养在37℃，含5％co2的培养箱中，培养液为89％dmem/f12基础培养基、10％胎牛血清(fbs)和1％双抗。细胞生长于25cm培养瓶中，2天更换培养基一次，待细胞生长至90％融合时进行传代。

2、配药、造模、分组、给药、测定

2.1配制含系列浓度的顺铂培养液

称取顺铂粉末1mg，加入pbs1ml，60℃水浴助溶。过滤除菌，-20℃避光保存，得母液，以该母液配制系列浓度顺铂的细胞培养液，使终浓度分别为10、20μm。

2.2配制含系列浓度的白花前胡甲素溶液

称取白花前胡甲素溶于二甲基亚砜中，制成50mm的单体母液，4℃避光保存。临用前，取适量该母液用培养基稀释配制成白花前胡甲素浓度为40、80μm。

2.3造模、分组、给药、测定

取对数生长期的hk-2细胞，0.25％胰蛋白酶消化后收集细胞，接种于96孔细胞培养板，每孔约5.0×10⁴个细胞，设空白组、对照组、顺铂组和白花前胡甲素联用顺铂的治疗组，其中空白组不接种细胞，每组3-6个复孔。待细胞贴壁后，吸弃旧培养基，空白组和对照组依旧给予常规培养基，顺铂组换成含有10、20μm浓度顺铂的培养基，白花前胡甲素联用顺铂的治疗组换成含有40、80μm白花前胡甲素和浓度10、20μm顺铂的培养基，继续培养48h，换含10％wst-8的培养基，培养箱孵育2h后，于450nm波长下测定吸光度值。按wst-8法测定细胞生存率，即细胞存活率(％)＝(给药组-空白组)/(对照组-空白组)×100％。

2.4数据处理

所有数据以均值±标准差表示，将数据导入graphpadprism数据处理软件，用双侧非配对t检验统计差异，比较不同浓度的白花前胡甲素是否能改善顺铂所致的hk-2细胞存活率降低。p<0.05为差异显著。

三、实验结果

与对照组相比，10μm浓度的顺铂显著降低hk-2细胞的生存率，p<0.0001，以****表示。与顺铂组相比，40μm和80μm白花前胡甲素联用顺铂后，能显著提高hk-2细胞的存活率，p<0.0001，以####表示。结果如表1和图1所示。

表1顺铂组浓度为10μm时，各组的hk-2细胞存活率比较

与对照组相比，20μm浓度的顺铂显著降低hk-2细胞的生存率，p<0.0001，以****表示。与顺铂组相比，40μm和80μm白花前胡甲素联用顺铂后，能显著提高hk-2细胞的存活率，p<0.0001，以####表示。结果如表2和图2所示。

表2顺铂组浓度为20μm时，各组的hk-2细胞存活率比较

上述结果表明，白花前胡甲素可以有效缓解顺铂对人近端肾小管细胞株hk-2细胞的毒性损伤，因此，白花前胡甲素有望开发成用于缓解顺铂所致肾毒性的药物。

上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。

技术特征：

技术总结
本发明公开了白花前胡甲素在缓解抗肿瘤药物顺铂所致肾毒性中的应用。顺铂被认为是治疗实体瘤的高效、广谱抗癌药，广泛应用于小细胞和非小细胞肺癌、睾丸癌、卵巢癌、宫颈癌等肿瘤的治疗。但是，顺铂能引起多个组织器官的不良反应，常见的有肾脏、肝脏、消化系统、造血系统、耳、神经毒性、过敏反应，其中肾脏毒性是最为严重的不良反应，且成剂量依赖性。本发明发现，白花前胡甲素可以有效缓解顺铂对人近端肾小管细胞株HK‑2细胞的毒性损伤，因此，白花前胡甲素有望开发成用于缓解顺铂所致肾毒性的药物。

技术研发人员：许风国;许蕾;张培;田媛;张尊建
受保护的技术使用者：中国药科大学
技术研发日：2018.09.19
技术公布日：2019.01.25