小柴胡汤在制备治疗肝性脑病药物中的应用的制作方法

本发明属于中药材应用技术领域，尤其涉及小柴胡汤在制备治疗肝性脑病药物中的应用。

背景技术：

肝性脑病(he)又叫肝脑病已经成为一个影响人们健康生活的全球性问题，也是肝脏疾病较为常见的严重病发症之一。肝性脑病的确切发病率尚难评估，但我国是肝病大国，慢性肝病患者人数非常庞大，其中许多患者会逐渐发展成为肝硬化，而绝大多数肝硬化患者在病程中的某些阶段会出现不同程度的肝性脑病症状，并且当肝脏疾病程度越严重时，肝性脑病的发生率可能更高。

肝性脑病是由严重肝功能失调或障碍引起的以代谢紊乱为基础的中枢神经系统功能失调的综合征，以肝病不同，常表现为认知障碍、人格改变、情绪行为异常甚至昏迷。其中，a型肝性脑病(ahe)是急性肝功能衰竭相关的肝性脑病，其来势凶险，死亡率高。肝性脑病诱发因素较复杂，目前治疗手段有限，现代医学治疗肝性脑病多将焦点集中在肠道清毒、减少毒物吸收方面，长期服用乳果糖是其首选治疗方式，但长期服用难免出现腹部胀气和口中黏干，严重的还会发生脱水、低钠血症等一系列严重并发症。因此研究有效而且不良反应少的药物对肝性脑病的治疗以及提高患者的生活质量具有重要意义。

技术实现要素：

本发明意在提供小柴胡汤在制备治疗肝性脑病药物中的应用，尤其是在对治疗a型肝性脑病的应用。

本发明的方案为小柴胡汤在制备治疗肝性脑病药物中的应用。

本发明的小柴胡汤的原料为柴胡、黄芩、姜半夏、党参、生姜、甘草和大枣(小柴胡汤出自汉代张仲景《伤寒论》,该方由柴胡、黄芩、人参、半夏、炙甘草、生姜和大枣七味药组成，现在方中人参一般多用党参代替)。人参与党参：均能补脾益肺，生津养血，均可用于脾气不足的体虚倦怠，食少便溏；肺气亏虚的咳嗽气促，语声低微及气虚血虚者。但人参能大补元气，为治气虚欲脱、脉微欲绝危重证候的要药。人参还能益气安神，益气生血，益气摄血和益气壮阳，故又可用于气津两伤的口渴及消渴证，气血亏虚、神志不安的心悸、失眠、健忘证，血虚证，气不摄血的出血证和阳痿证等。党参补脾肺之气及生津、养血、扶正祛邪等功效与人参基本类似而力较弱，故古今方中以人参治疗一般脾肺气虚及津伤血亏而证候较轻者，现多以党参代之，按方中配比仍然为小柴胡汤，如果方中党参换成人参，理论上对肝性脑病也具有治疗作用。

进一步，所述肝性脑病为a型肝性脑病，所述a型肝性脑病为急性肝功能衰竭相关的肝性脑病。

肝性脑病根据病因可分为：a型肝性脑病，由急性肝功能衰竭导致的肝性脑病；b型肝性脑病，由门静脉-体循环异常分流所导致的肝性脑病；c型肝性脑病，由肝硬化导致的肝性脑病。上述三种病因致病的机理不同，治疗的机理也不同，溶血性肝硬化性肝性脑病属于c型，是慢性肝性脑病的一种，是与a型肝性脑病不同的，本发明主要是对a型肝性脑病效果最为显著。

进一步，所述小柴胡汤包括的原料为柴胡、黄芩、姜半夏、党参、生姜、甘草和大枣。

进一步，所述小柴胡汤原料中柴胡：黄芩：姜半夏：党参：生姜：甘草：大枣的重量比为15:10:10:12:6:6:20。

本发明的工作原理及有益效果：本发明在制备的时候，先将柴胡、黄芩、姜半夏、党参、生姜、甘草和大枣加水煎煮2～4次，每次0.5～3小时，合并水煎液，过滤后浓缩得流浸膏，加入辅料后用流化床制粒后，制备成药物制剂；如果条件有限的话，也可以直接到药店购买相应配方的小柴胡颗粒。之后口服给药，待药液或药物进入血液中，通过降低外周血氨的量，来降低脑组织内谷氨酰胺合酶(gs)和反映脂质过氧化程度的丙二醛(mda)的量，以及提高反映脂质过氧化能力的超氧化物歧化酶(sod)的活性，改善肝性脑病中的脑功能和肝功能，来达到治疗肝性脑病的目的。

现有技术有记载小柴胡汤可以治疗肝病，可以改善肝脏功能，但是肝性脑病是由严重肝病引起、以代谢紊乱为基础的中枢神经系统功能失调的综合病征，其主要临床表现是意识障碍、行为失常和昏迷。肝性脑病不同于单纯的肝病，是由于肝脏功能障碍，神经毒性物质产生增多、或者神经毒性物质的毒性效应增加，同时脑组织对各种毒性物质的敏感性提高，另外血脑屏障(在血管和脑之间的一种保护性屏障结构)的通透性增加，使更多的神经毒性物质到达脑部，从而诱发脑病，此时大脑中枢神经系统已发生功能紊乱。所以本发明旨在说明小柴胡汤在治疗肝性脑病时，不仅可以改善肝脏功能，同时对脑功能也有明显改善。本发明疗效明确，依从性好，适于在临床上推广。

本发明的小柴胡汤，可以制成颗粒、汤剂、片剂、胶囊等任一口服剂型。

在制备本发明小柴胡汤的时候，可以添加微晶纤维素、粉末状纤维素、甘露糖醇、淀粉、乳糖、明胶、甲基纤维素、糊精、预胶化淀粉、微粉硅胶、羟丙甲基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、聚乙二醇、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、酒石酸，二氧化硅，硬脂酸钙和硬脂酸镁中的一种或多种辅料，以增加药物的口感。

附图说明

图1为各实验组ahe大鼠模型体重变化图；

图2为各实验组ahe大鼠模型行为学评分结果图；

图3为各实验组ahe大鼠模型脑功能评分结果图；

图4为各实验组ahe大鼠模型血清、血浆中谷丙转氨酶检测结果；

图5为各实验组ahe大鼠模型血清、血浆中谷草转氨酶检测结果图；

图6为各实验组ahe大鼠模型血清、血浆中血氨检测结果图；

图7为各实验组ahe大鼠模型的肝组织切片he染色反馈结果图；

图8为各实验组ahe大鼠模型脑组织脑水含量变化结果图；

图9为各实验组ahe大鼠模型脑组织谷氨酰胺合酶含量变化结果图；

图10为各实验组ahe大鼠模型脑组织丙二醛含量变化结果图；

图11为各实验组ahe大鼠模型脑组织总超氧化物歧化酶变化结果图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式进一步详细的说明：

1建立大鼠a型肝性脑病模型，观察小柴胡汤对大鼠a型肝性脑病的治疗作用：

1.1造模方法

清洁级sd大鼠50只，雄性，体重200±20g，适应性喂养一周后随机分为5组，每组10只，分别为①空白对照组(vehiclegroup)；②模型组(taagroup)；③小柴胡汤高剂量组(xcht,4g/kg)；④小柴胡汤中剂量组(xcht,2g/kg)；⑤小柴胡汤低剂量组(xcht,1g/kg)。除空白对照组外，余鼠采用硫代乙酰胺(taa,250mg/kg/day)溶于生理盐水中连续2天腹腔注射给药，制备ahe模型。空白对照组给予等量生理盐水腹腔注射。首次taa用药前禁食不禁水8-14小时，给药后每天两次给予10％葡萄糖3ml和生理盐水2ml混合液腹腔注射预防低血糖。首次给药后每4小时观察各组大鼠的意识、行为学及神经系统功能改变，对大鼠进行脑功能评分。模型成功后，第3天开始，按分组不同，分别以等量双蒸水、小柴胡汤高剂量、小柴胡汤中剂量、小柴胡汤低剂量灌胃给药2周。1.2体重变化、行为学检测及脑功能评分。

测量大鼠体重，观察给药前后的体重变化。采用旷场实验，在安静的环境下进行。将大鼠放入箱内底面中心，同时进行摄像和计时。观察10min后取出大鼠，酒精清洗及擦拭方箱内壁及底面，以免上次动物余留的信息影响下次测试结果，记录各大鼠运动总距离。

脑功能评分分级如下表，请与本实验无关人员对大鼠进行脑功能测评。

模型成功后，从第3天开始，按分组不同，分别以等量双蒸水、小柴胡汤高剂量、小柴胡汤中剂量、小柴胡汤低剂量灌胃给药2周。

1.3肝功能及血氨含量检测

给药两周后麻醉采血，取血清检测ast、alt，取血浆用于测血氨。

1.4肝组织病理检测

给药两周后麻醉取肝，行he染色，观察肝脏的病理学改变。

1.5脑含水量及谷氨酰胺合酶、丙二醛、超氧化物歧化酶检测

给药两周后麻醉取半脑，去除小脑及脑干留大脑，电子天平精准称重后，放入110℃恒温干燥箱烘烤24h至恒重后，用同一电子天平再次测量干脑组织质量，脑含水量＝(湿重-干重)/湿重。给药两周后麻醉断头取脑，去除小脑及脑干留大脑，测量各鼠大脑内gs、mda及sod含量。

2实验结果

2.1五组大鼠初始体重均为220g左右，给予硫代乙酰胺造模后，除空白组外其他四组体重均明显下降。如图1所示，其中(a)大鼠体重变化(b)大鼠行为学变化结果(c)脑功能等级评分#p＜0.05、##p＜0.01vsvehiclegroup、*p＜0.05、**p＜0.01vstaagroup。

灌胃治疗药物两周后，空白组体重持续上升，三个治疗组体重均有所上升，模型组体重基本保持稳定(图1)。空白组自发运动正常，模型组明显减少，低剂量及高剂量治疗组自发运动稍增加，中剂量治疗组明显增加(图2)。五组大鼠初始脑功能评分等级均为0级。给予硫代乙酰胺造模后，空白组脑功能评分等级为0级，模型组为1.4，低剂量组1.6，中剂量组1.4，高剂量组1.4。给予小柴胡汤治疗1周后，空白组脑功能评分等级为0级，模型组为2.1，低剂量组1.0，中剂量组0.8，高剂量组0.6。给予小柴胡汤治疗2周后，空白组脑功能评分等级为0级，模型组为2.3，低剂量组0.7，中剂量组0.7，高剂量组0.6。小柴胡汤各治疗组大鼠脑功能均有明显改善(图3)。

2.2如图4～6所示，图4为谷丙转氨酶检测结果图，图5为谷草转氨酶检测结果图，图6为血氨检测结果图，其中：#p＜0.05、##p＜0.01vsvehiclegroup、*p＜0.05、**p＜0.01vstaagroup。

空白组谷丙转氨酶(alt)、谷草转氨酶(ast)均正常，模型组明显升高，治疗组均显著下降，其中高剂量组下降最为明显、中剂量及低剂量组次之(图4、图5)。空白组血浆内血氨正常，模型组明显升高，治疗组均显著下降，其中高剂量组下降较多、中剂量及低剂量组次之(图6)。

2.3如图7所示，空白组大鼠肝小叶清晰完整，未见肝细胞变性坏死，肝索围绕中央静脉呈放射状排列，肝窦未见充血、水肿等。模型组肝小叶正常结构被破坏，肝索断裂，肝细胞排列紊乱且见大量单核细胞淋巴细胞、嗜酸粒细胞等炎症细胞浸润。小柴胡汤给药组的肝组织破坏情况可见不同程度的改善。

2.4如图8～图11所示，图8为脑水含量检测，图9为谷氨酰胺合酶含量检测，图10为丙二醛含量检测，图11为总超氧化物歧化酶含量检测，其中：#p＜0.05、##p＜0.01vsvehiclegroup、*p＜0.05、**p＜0.01vstaagroup。

空白组大鼠脑水含量正常，模型组较正常组升高，治疗组脑水含量均呈降低趋势，其中，中剂量组降低较明显(图8)。空白组大鼠脑谷氨酰胺合酶含量正常，模型组升高明显，低剂量给药组降低较明显，中剂量组高剂量组均降低但两组差异不大(图9)。空白组大鼠脑内丙二醛含量正常，模型组显著升高，低剂量组下降，中剂量组显著下降，高剂量组下降次之(图10)。空白组大鼠脑内超氧化物歧化酶含量正常，模型组显著升高，低剂量组、中剂量组及高剂量组均明显降低(图11)。

对本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利。