一种玫瑰复方组合物及其制备方法与流程

文档序号:16639457发布日期:2019-01-16 07:22阅读:205来源:国知局
本发明涉及一种采用分级超滤、超微粉碎联用方法制备的玫瑰复方组合物,它属于中医中药以及食品工业领域。
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:都市生活节奏快压力大,不少人都会有心烦气躁的问题,或是情绪低落,或是唉声叹气,或是烦躁易怒,总是控制不住自己的情绪,影响日常工作和生活。心情烦躁会影响睡眠,睡眠不好的话,身体的毒素就不能及时的排出去,加上五脏六腑等在夜间处于高度精神状态,那么内脏也会上火。心情也会影响肝气条达,肝气不畅,人体内部气机就会壅闭、阻塞,从而引发机体的多种病理变化,如水肿、瘀血、女子闭经等。心情会影响食欲,损伤消化器官,导致消化不畅,营养吸收差,大小便郁结。此外,精神和心情呈现萎缩的状态,身体免疫力下降,加重了患病的可能性,而且患上疾病后,恢复较慢。中医认为,心为阳脏而主通明,以阳气为用,以通畅为本,以清明为要。心阳能推动和鼓舞人的精神活动,使人精神振奋,神采奕奕,思维敏捷;心阴的宁静作用,能制约和防止精神躁动。心阳与心阴的作用协调,心脏搏动有力,节律一致,速率适中,脉管舒缩有度,心血才能循脉运行通畅,精神内守,既无亢奋,也无抑郁。祖国的传统中医学,把不同颜色的食物或药物归属于人体的五脏,红色入心、青色入肝、黄色入脾、白色入肺、黑色入肾。红色食物被称为是补充脑能量,补心补气补血,特别是一些药食同源的中药材,对心脏有一定的滋养和呵护,从而起到养心解郁的作用。中医养生最重要的是养心。静心可以让气血按正常的规律而运行,达到内养精神,达到平心静气,培充人体能量;而杂念重生,心神动荡,这样就会消耗大量能量,致使气血动荡不安,心神外驰。中药化学成分复杂,传统的入药方式以煎煮为主,煎煮过程伴随着大量成分流失,并且药用成分不能完全析出,并且工艺时间长,能耗高。随着现代医药学科技发展,以传统的经验提取技术已不能满足预防治疗的需要,并且中药有效成分通常分布在细胞壁包裹着的细胞内部,要提高目标产物的提取率和充分利用资源,需采取有效方法破坏其细胞壁而使细胞中有效成分析出,同时不会对有效成分结构造成太大的破坏,可见中药有效成分的提取越来越重要了。技术实现要素:针对现有技术存在的不足,本发明的目的之一是提供一种养心除烦的玫瑰复方组合,它选用药食同源的中药材为原料,具有养心静气、芳香解郁、和血散瘀的功效,可制备成饮品系列,无任何毒副作用。本发明的另一目的是提供上述玫瑰复方组合的制备方法,它采用分级超滤、超微粉碎联用技术制备玫瑰复方组合物,它采用分级超滤、超微粉碎破坏原料细胞壁而使细胞中有效成分析出,同时不会对有效成分结构造成破坏,使制得的玫瑰复方组合超微粉末能很快发挥疗效。为了实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种玫瑰复方组合物,它主要是由下述原料按所述重量份数制备而成:玫瑰12-18份,玫瑰茄4-8份,枸杞4-8份,莲子1-5份。上述的一种玫瑰复方组合物,它主要是由下述原料按所述重量份数制备而成:玫瑰15份、玫瑰茄6份、枸杞6份、莲子3份。上述玫瑰复方组合物的制备方法,其制备方法步骤如下:(1)称取符合所述重量份数的玫瑰、玫瑰茄、枸杞、莲子,经混合粉碎至10-40目,得粗药粉备用;(2)将粗药粉置于药锅中,第一次加水量为粗药粉重量的10-14倍,浸泡0.5-1.5小时,加入0.15-0.75重量份复合酶,柠檬酸-柠檬酸钠调ph值为4.0-6.0,于40℃-60℃酶解锅中恒温酶解1-2小时,酶解结束后,升温至93-97℃灭酶;(3)灭酶后,将酶处理体系煮沸,微沸煎煮0.5-1.5小时,滤过,收集滤液;滤渣第二次加水量为粗药粉重量的8-12倍,煮沸后,微沸煎煮0.5-1.5小时,滤过,收集滤液;滤渣第三次加水量为粗药粉重量的6-10倍,煮沸后,微沸煎煮0.5-1.5小时,滤过,收集滤液;(4)将步骤(3)所得的三次滤液合并,4000-6000r/min离心10-20min,收集上清液;(5)将步骤(4)收集的上清液,分别采用截留按分子量300k、100k、10k中空纤维超滤柱进行超滤,收集超滤液;(6)将步骤(5)所得的超滤液,在40-50℃条件下,采用膜截留相对分子质量300-600da进行纳滤浓缩,浓缩液体积为原液体积的1/4-3/4,得浓缩液;(7)向步骤(6)所得的浓缩液里添加浓缩液重量0.2-0.4倍的麦芽糊精,搅拌均匀后进行喷雾干燥,喷雾干燥条件如下:进风温度110-130℃,出风温度80-100℃,雾化压力750-850pa,喷液速度8-12%,得干燥粉末;(8)将步骤(7)所得干燥粉末放入超微粉碎机进行超微粉碎,通过高能纳米冲击磨罐体内的磨介撞击研磨5-15min,使超微粉的平均粒径达到900-1500nm,即得玫瑰复方组合超微粉末。上述步骤(1)原料混合后粉碎至20目。上述步骤(2)中第一次加水量优选为粗药粉重量的12倍,浸泡时间优选1小时,复合酶加入量优选0.45重量份,ph值优选为5.0,酶解温度优选为50℃,酶解时间优选1.5小时,灭酶温度优选为95℃。上述的复合酶是由果胶酶和纤维素酶混合而成,果胶酶和纤维素酶的质量比为1:2。上述步骤(3)中酶解煎煮时间优选为1小时,第二次加水量优选为粗药粉重量的10倍,煎煮时间优选为1小时,第三次加水量优选为粗药粉重量的8倍,煎煮时间优选为1小时。上述步骤(4)中离心速率优选为5000r/min,离心时间优选为15min。上述步骤(6)中纳滤温度优选为45℃,膜截留分子量优选为450da。上述步骤(7)中麦芽糊精的添加量优选为浓缩液重量的0.3倍;喷雾干燥进风温度优选120℃,出风温度优选90℃,雾化压力优选800pa,喷液速度优选10%。上述步骤(8)中撞击研磨优选10min,超微粉的平均粒径为1200nm。。由于采用上述技术方案,使得本发明与现有技术相比,具有如下特点和有益效果:本发明所用中药原料的功效如下:玫瑰:基源:蔷薇科植物玫瑰和重瓣玫瑰的花;性味:甘、微苦,温;归经:入肝、脾经。功能主治:行气解郁,和血,止痛;用于肝胃气痛,食少呕恶,月经不凋,跌扑伤痛。玫瑰茄:基源:锦葵科植物玫瑰茄的根、种子;性味:酸,凉。归经:入肾经;功能主治:敛肺止咳,降血压,解酒;用于肺虚咳嗽,高血压,醉酒。枸杞:基源:茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实;性味:甘,平;归经:入肝、肾经。功能主治:养肝,滋肾,润肺;用于虚劳精亏,腰膝酸痛,眩晕耳鸣,阳痿遗精,内热消渴,血虚萎黄,目昏不明。莲子:基源:睡莲科植物成熟果实的干燥幼叶及胚根;性味:苦,寒;归经:入心、肾经;功能主治:清心安神,交通心肾,涩精止血;用于热入心包,神昏谵语,心肾不交,失眠遗精,血热吐血。本发明养心除烦玫瑰复方组合所用的中药材,甄选国家药食同源目录内药材为原料,也是传统药膳中常选用的原料。以中医理论为基础,秉承治未病的中医学说,按君臣佐使为原则进行组方,符合五色入五脏中医理论,严格控制各组分的选择与配比,养心静气、芳香解郁、和血散瘀,对人体心脏进行日常调理与养护,顺应心脏特性与变化进行相应地预防与调理。本发明将上述玫瑰、玫瑰茄、枸杞、莲子按所述用量进行组合,使得各原料产生协同增效作用,复合物中以玫瑰中没食子酸为指标性成分,其含量较单一玫瑰中含量提升了50%。人体系统器官紧密相连,单一原料覆盖面有限,君臣佐使相搭配有助于复合物发挥极致效果。心为五脏之主,是全身血脉的总枢纽,以玫瑰为君药,玫瑰茄、枸杞、莲子作为臣佐药,调节心藏神的能力,使心情调达、神志清晰、思维敏捷,配以滋养肝肾,使其肾水上行滋养心阴,防止心火亢盛。心血通畅,血液运载营养物质以供养全身,使五脏六腑、四肢百骸、肌肉皮毛,整个身体都获得充分的营养,藉以维持其正常的功能活动。本发明应用分级超滤、超微粉碎联用技术制备玫瑰复方组合物,将传统中药提取工艺与现代生物技术工艺相结合,保留传统水煎汤剂的提取方式,利用酶解前处理工艺将细胞壁上的蛋白质、纤维素、果胶质等阻碍胞内有效成分溶出的主要屏障降解,从而使细胞壁疏松、破裂,减少胞内有效成分扩散阻力,提高提取率。本发明针对组合物中原料来源采用复合酶,复合酶由果胶酶-纤维素酶质量比1:2,能有效分解细胞壁及细胞壁间的果胶质和纤维素等成分。酶解温度对酶解程度至关重要,酶解温度升高,酶活性上升,反应物能量增加,使反应速度加快,当温度达到60℃后,引起酶蛋白变性,使酶活力大大减弱,反应速度下降,从而影响对细胞的分解,所以酶解温度选择在40℃-60℃之间。因原料特性酶解时间过长,药材细胞破坏严重,产品活性下降,经考察酶解时间在1-2小时内,有效物质含量达到峰值。在研究过程中发现,酶解酸度对指标性成分收率有一定影响,只有在一定的ph值范围内才能发挥催化作用。当ph值在4.0-6.0之间时,收率达到峰值,ph值再升高,收率反而下降。通过酶解参数优化后,总多酚指标含量较传统提取方法提升一倍。采用生物超滤技术去除水提取液中淀粉、蛋白质等大分子惰性物质,同时减少有效成分损失,再利用纳滤生物技术滤过除水,富集有效成分,同时在浓缩提取液时可避免高温蒸煮料液,提高有效成分保留率,减少热能损耗。得到的超微粉经水溶解后,液体澄清透明,无残渣沉淀现象。同时本发明在制备工艺中,未引入有机溶剂和化学试剂,不破坏药材内部成分结构,保护药材特性,更好地发挥保健疗效。本发明养心除烦的玫瑰复方组合物可用于制备代用茶。本发明应用分级超滤、超微粉碎联用技术制备玫瑰复方组合物,经制备得到的超微粉可用于制备玫瑰复方组合饮料系列产品。本发明应用分级超滤、超微粉碎联用技术制备玫瑰复方组合物在调理养心除烦方面效果较好,气味芳香可解郁散结,调养心机可静气养神,抑制情绪波动,缓解心脏搏动负担,缓解因心脏问题导致的无力、疲乏、胸闷等症状及其带来的其他健康问题。本发明应用分级超滤、超微粉碎联用技术制备玫瑰复方组合物所选材料皆为药食同源中药,原料易得,取天然草本植物之药性,无任何毒副作用,能够减轻使用者的身体肝肾负担和经济负担。本发明应用分级超滤、超微粉碎联用技术制备玫瑰复方组合物,经口服给药吸收后,机体活动次数增加,心情愉悦,喜于群体活动。在不同时间点取血检测血液玫瑰总多酚含量,在1小时含量可达峰值,在体内保留时间长,并在多个脏器中均能检出,能有效地被机体吸收代谢,生物利用度较高。本发明的制备方法,它使药用成分完全析出,能耗低,它采用分级超滤、超微粉碎破坏原料细胞壁而使细胞中有效成分析出,同时不会对有效成分结构造成破坏,使制得的玫瑰复方组合超微粉末能很快发挥疗效。具体实施方式下面结合实施例对本发明进行进一步描述。以下实施例仅为本发明的几个具体实施例,但本发明的设计构思并不局限于此,凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动,均应属于侵犯本发明保护范围的行为。下述实施例中的方法,如无特别说明,均为常规方法。下述实施例中的百分含量,如无特别说明,均为质量百分含量。下述实施例中的份数均为重量份数。实施例1一种玫瑰复方组合物,它是由下述原料按所述重量份数制备而成:玫瑰12份,玫瑰茄8份,枸杞8份,莲子5份。玫瑰复方组合物的制备方法,步骤如下:(1)称取12重量份玫瑰、8重量份玫瑰茄、8重量份枸杞、5重量份莲子,经混合粉碎至10目,得粗药粉备用;(2)将粗药粉置于药锅中,第一次加水量为粗药粉重量的10倍,浸泡0.5小时,加入0.15重量份的复合酶,柠檬酸-柠檬酸钠调ph值为4.0,于40℃酶解锅中恒温酶解1小时,酶解结束后,升温至93℃灭酶;(3)灭酶后,将酶处理体系煮沸,微沸煎煮0.5小时,滤过,收集滤液;滤渣第二次加水量为粗药粉重量的8倍,煮沸后,微沸煎煮0.5小时,滤过,收集滤液;滤渣第三次加水量为粗药粉重量的6倍,煮沸后,微沸煎煮0.5小时,滤过,合并滤液;(4)将步骤(3)所得的三次滤液合并,4000r/min离心10min,收集上清液;(5)将步骤(4)收集的上清液,分别采用截留按分子量300k、100k、10k中空纤维超滤柱进行超滤,收集超滤液;(6)将步骤(5)所得的超滤液,在40℃条件下,采用膜截留相对分子质量300da进行纳滤浓缩,浓缩液体积为原液体积的1/4,得浓缩液;(7)向步骤(6)所得的浓缩液里添加浓缩液重量0.2倍的麦芽糊精,搅拌均匀后进行喷雾干燥,得干燥粉末;喷雾干燥条件如下:进风温度110℃,出风温度80℃,雾化压力750pa,喷液速度8%;(8)将步骤(7)所得干燥粉末放入超微粉碎机进行超微粉碎,通过高能纳米冲击磨罐体内的磨介撞击研磨5min,使超微粉的平均粒径达到900nm,即得玫瑰复方组合超微粉末。所述复合酶是由果胶酶和纤维素酶混合而成,果胶酶和纤维素酶的质量比为1:2。实施例2一种玫瑰复方组合物,它是由下述原料按所述重量份数制备而成:玫瑰13.5份,玫瑰茄7份,枸杞7份,莲子4份。玫瑰复方组合物的制备方法,步骤如下:(1)称取13.5重量份玫瑰、7重量份玫瑰茄、7重量份枸杞、4重量份莲子,经混合粉碎至16目,得粗药粉备用;(2)将粗药粉置于药锅中,第一次加水量为粗药粉重量的11倍,浸泡0.8小时,加入0.3重量份的复合酶,柠檬酸-柠檬酸钠调ph值为4.5,于45℃酶解锅中恒温酶解1.2小时,酶解结束后,升温至94℃灭酶;(3)灭酶后,将酶处理体系煮沸,微沸煎煮0.8小时,滤过,收集滤液;滤渣第二次加水量为粗药粉重量的9倍,煮沸后,微沸煎煮0.8小时,滤过,收集滤液;滤渣第三次加水量为粗药粉重量的7倍,煮沸后,微沸煎煮0.8小时,滤过,合并滤液;(4)将步骤(3)所得的三次滤液合并,4500r/min离心12min,收集上清液;(5)将步骤(4)收集的上清液,分别采用截留按分子量300k、100k、10k中空纤维超滤柱进行超滤,收集超滤液;(6)将步骤(5)所得的超滤液,在43℃条件下,采用膜截留相对分子质量400da进行纳滤浓缩,浓缩液体积为原液体积的1/4,得浓缩液;(7)向步骤(6)所得的浓缩液里添加浓缩液重量0.25倍的麦芽糊精,搅拌均匀后进行喷雾干燥,得干燥粉末;喷雾干燥条件如下:进风温度115℃,出风温度85℃,雾化压力780pa,喷液速度9%;(8)将步骤(7)所得干燥粉末放入超微粉碎机进行超微粉碎,通过高能纳米冲击磨罐体内的磨介撞击研磨8min,使超微粉的平均粒径达到1000nm,即得玫瑰复方组合超微粉末。所述复合酶是由果胶酶和纤维素酶混合而成,果胶酶和纤维素酶的质量比为1:2。实施例3一种玫瑰复方组合物,它是由下述原料按所述重量份数制备而成:玫瑰15份,玫瑰茄6份,枸杞6份,莲子3份。玫瑰复方组合物的制备方法,步骤如下:(1)称取15重量份玫瑰、6重量份玫瑰茄、6重量份枸杞、3重量份莲子,经混合粉碎至20目,得粗药粉备用;(2)将粗药粉置于药锅中,第一次加水量为粗药粉重量的12倍,浸泡1小时,加入0.45重量份的复合酶,柠檬酸-柠檬酸钠调ph值为5.0,于50℃酶解锅中恒温酶解1.5小时,酶解结束后,升温至95℃灭酶;(3)灭酶后,将酶处理体系煮沸,微沸煎煮1小时,滤过,收集滤液;滤渣第二次加水量为粗药粉重量的10倍,煮沸后,微沸煎煮1小时,滤过,收集滤液;滤渣第三次加水量为粗药粉重量的8倍,煮沸后,微沸煎煮1小时,滤过,合并滤液;(4)将步骤(3)所得的三次滤液合并,5000r/min离心15min,收集上清液;(5)将步骤(4)收集的上清液,分别采用截留按分子量300k、100k、10k中空纤维超滤柱进行超滤,收集超滤液;(6)将步骤(5)所得的超滤液,在45℃条件下,采用膜截留相对分子质量450da进行纳滤浓缩,浓缩液体积为原液体积的1/2,得浓缩液;(7)向步骤(6)所得的浓缩液里添加浓缩液重量0.3倍的麦芽糊精,搅拌均匀后进行喷雾干燥,得干燥粉末;喷雾干燥条件如下:进风温度120℃,出风温度90℃,雾化压力800pa,喷液速度10%;(8)将步骤(7)所得干燥粉末放入超微粉碎机进行超微粉碎,通过高能纳米冲击磨罐体内的磨介撞击研磨10min,使超微粉的平均粒径达到1200nm,即得玫瑰复方组合超微粉末。所述复合酶是由果胶酶和纤维素酶混合而成,果胶酶和纤维素酶的质量比为1:2。实施例4一种玫瑰复方组合物,它是由下述原料按所述重量份数制备而成:玫瑰16.5份,玫瑰茄5份,枸杞5份,莲子2份。玫瑰复方组合物的制备方法,步骤如下:(1)称取16重量份玫瑰、5重量份玫瑰茄、5重量份枸杞、2重量份莲子,经混合粉碎至30目,得粗药粉备用;(2)将粗药粉置于药锅中,第一次加水量为粗药粉重量的13倍,浸泡1.2小时,加入0.6重量份的复合酶,柠檬酸-柠檬酸钠调ph值为5.5,于55℃酶解锅中恒温酶解1.8小时,酶解结束后,升温至96℃灭酶;(3)灭酶后,将酶处理体系煮沸,微沸煎煮1.2小时,滤过,收集滤液;滤渣第二次加水量为粗药粉重量的11倍,煮沸后,微沸煎煮1.2小时,滤过,收集滤液;滤渣第三次加水量为粗药粉重量的9倍,煮沸后,微沸煎煮1.2小时,滤过,合并滤液;(4)将步骤(3)所得的三次滤液合并,5500r/min离心17min,收集上清液;(5)将步骤(4)收集的上清液,分别采用截留按分子量300k、100k、10k中空纤维超滤柱进行超滤,收集超滤液;(6)将步骤(5)所得的超滤液,在47℃条件下,采用膜截留相对分子质量500da进行纳滤浓缩,浓缩液体积为原液体积的3/4,得浓缩液;(7)向步骤(6)所得的浓缩液里添加浓缩液重量0.35倍的麦芽糊精,搅拌均匀后进行喷雾干燥,得干燥粉末;喷雾干燥条件如下:进风温度125℃,出风温度95℃,雾化压力830pa,喷液速度11%;(8)将步骤(7)所得干燥粉末放入超微粉碎机进行超微粉碎,通过高能纳米冲击磨罐体内的磨介撞击研磨12min,使超微粉的平均粒径达到1300nm,即得玫瑰复方组合超微粉末。所述复合酶是由果胶酶和纤维素酶混合而成,果胶酶和纤维素酶的质量比为1:2。实施例5一种玫瑰复方组合物,它是由下述原料按所述重量份数制备而成:玫瑰18份,玫瑰茄4份,枸杞4份,莲子1份。玫瑰复方组合物的制备方法,步骤如下:(1)称取18重量份玫瑰、4重量份玫瑰茄、4重量份枸杞、1重量份莲子,经混合粉碎至40目,得粗药粉备用;(2)将粗药粉置于药锅中,第一次加水量为粗药粉重量的14倍,浸泡1.5小时,加入0.75重量份的复合酶,柠檬酸-柠檬酸钠调ph值为6.0,于60℃酶解锅中恒温酶解2小时,酶解结束后,升温至97℃灭酶;(3)灭酶后,将酶处理体系煮沸,微沸煎煮1.5小时,滤过,收集滤液;滤渣第二次加水量为粗药粉重量的12倍,煮沸后,微沸煎煮1.5小时,滤过,收集滤液;滤渣第三次加水量为粗药粉重量的10倍,煮沸后,微沸煎煮1.5小时,滤过,合并滤液;(4)将步骤(3)所得的三次滤液合并,6000r/min离心20min,收集上清液;(5)将步骤(4)收集的上清液,分别采用截留按分子量300k、100k、10k中空纤维超滤柱进行超滤,收集超滤液;(6)将步骤(5)所得的超滤液,在50℃条件下,采用膜截留相对分子质量600da进行纳滤浓缩,浓缩液体积为原液体积的3/4,得浓缩液;(7)向步骤(6)所得的浓缩液里添加浓缩液重量0.4倍的麦芽糊精,搅拌均匀后进行喷雾干燥,得干燥粉末;喷雾干燥条件如下:进风温度130℃,出风温度100℃,雾化压力850pa,喷液速度12%;(8)将步骤(7)所得干燥粉末放入超微粉碎机进行超微粉碎,通过高能纳米冲击磨罐体内的磨介撞击研磨15min,使超微粉的平均粒径达到1500nm,即得玫瑰复方组合超微粉末。所述复合酶是由果胶酶和纤维素酶混合而成,果胶酶和纤维素酶的质量比为1:2。实施例1、2、3、4、5中步骤(1)所得粗药粉可应用于制备玫瑰复方代用茶。实施例1、2、3、4、5中步骤(8)所得玫瑰复方组合超微粉末可用于玫瑰复方组合饮料系列产品。试验例1本发明实施例1、2、3、4、5方法制备的玫瑰复方组合超微粉末成分的检测与含量分析方法及结果如下:(1)对照品溶液制备:取没食子酸对照品适量,精密称定,用70%乙醇制成浓度为0.5mg/ml的溶液,即得。(2)标准曲线的制备:取对照品溶液进一步稀释0.02、0.04、0.08、0.10、0.12、0.16mg/ml不同质量浓度的标准品溶液。上述稀释好的溶液各取0.3ml置于10ml棕色量瓶中,分别加入0.3ml福林酚试剂,充分混匀后,加入7%na2co33ml,加水定容至刻度,摇匀后放置1.5h,以零管为空白,用1cm的比色皿在766nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线。(3)供试品溶液制备与测定:精密称取1、2、3、4、5方法制备的玫瑰复方组合超微粉末1.0g,分别置于塞锥形瓶中,加入50%乙醇30ml,浸泡10min,30℃超声提取30min,滤过至100ml量瓶中。将滤渣重新放回锥形瓶中,加入50%乙醇,按上法共提取3次,合并滤液,用50%乙醇定容至刻度。精密吸取0.3ml至10ml棕色量瓶中,按标准曲线制备操作步骤,于766nm波长处测定吸光度并得出玫瑰总多酚在提取液中的浓度,计算出玫瑰总多酚含量。玫瑰单味药制备:精密称取玫瑰,按实施例3提取方法提取,按供试品溶液方法制备,即得玫瑰单味药溶液。传统水煎剂组样品制备:按实施例3步骤(1)比例称取玫瑰15份、玫瑰茄6份、枸杞6份、莲子3份,混合后进行粉碎至20目。第一次加水量为药材量的12倍,浸泡1.5小时,微沸煎煮1小时,滤过,收集滤液;滤渣第二次加水量为药材量的10倍,煮沸后,微沸煎煮1小时,滤过,收集滤液;滤渣第三次加水量为药材量的8倍,煮沸后,微沸煎煮1小时,滤过,收集滤液。合并三次滤液,水分挥干。精密称取1.0g浸膏,按供试品溶液方法制备,即得传统水煎剂组样品溶液。(4)实验结果表1绘制标准曲线葡萄糖浓度mg/ml0.020.040.080.100.120.16吸光值0.1070.2030.3390.4350.5210.713标准曲线方程为a=4.244c+0.0185,相关系数r=0.9980表2总多酚含量测定对比分组总多酚含量%实施例1组11.98实施例2组13.18实施例3组14.09实施例4组13.82实施例5组13.44玫瑰单味药组9.74传统水煎剂组6.99表3营养成分测定对比试验例2本发明实施例1、2、3、4、5方法制备的玫瑰复方组合超微粉末用于失眠模型小鼠试验。3.1实验分组将90只健康昆明种小鼠,3月龄,体重(20±2)g,雌雄各半,随机分为9组,每组10只。分别为空白对照组、模型组、实施例1、2、3、4、5组、玫瑰单味药组和传统水煎剂组。3.2造模及给药取健康昆明种小鼠,根据体重腹腔注射对氯苯丙氨酸(pcpa)300mg/kg。28-30h后,造模小鼠昼夜节律消失,白天活动不停,总睡眠量减少,几乎均达到完全失眠,给予普通饲料喂养。造模同时即开始给药。各实施例组、玫瑰单味药组和传统水煎剂组给药剂量为255.27mg/kg。空白对照组和模型组给予等容积生理盐水。各组均按0.25ml·10g-1·d-1灌胃,1次/天,连续6天。3.3取材方法小鼠连续给药6d后,禁食24h,断头,迅速取脑,生理盐水冲洗,滤纸拭干,加预冷的0.1mol/l的高氯酸(内含0.1mol/ledta),950ul,玻璃匀浆器中匀浆,以2000r/min匀浆10s,取上清液20ul进行测定,以ng/g脑组织湿度表示。3.4实验结果表4各组对小鼠脑中多巴胺(da)含量的影响分组da含量(ng/g)空白对照组619.29±103.16模型组1138.43±192.08δδ实施例1组851.53±109.64*#▲实施例2组792.63±124.65**#▲实施例3组719.37±93.28**##▲▲实施例4组738.68±116.21**##▲▲实施例5组777.48±113.46**#▲玫瑰单味药组958.12±131.08传统水煎剂组969.03±121.32注:与空白对照组比较,△p<0.05,△△p<0.01与模型组比较,*p<0.05,**p<0.01与玫瑰单味药组比较,#p<0.05,##p<0.01与传统水煎剂组比较,▲p<0.05,▲▲p<0.05由上表可知,各实施例组均能降低由pcpa所致的脑中da含量的升高作用,与模型组有显著性差异,其中实施例3组的效果最为显著;而玫瑰单味药组和传统水煎剂组的效果没有各实施例组明显,说明玫瑰复方组合物对小鼠失眠症的治疗效果优于玫瑰单味药和组方传统水煎剂。试验例3本发明实施例1、2、3、4、5方法制备的玫瑰复方组合超微粉末用于抑郁焦虑症小鼠试验。(1)动物及分组选取昆明种小鼠80只,雌性,体重18-22g,正常饮食,在光暗周期为12h,温度为(20±2)℃的安静环境下饲养7天以适应环境。随机分为空白对照组、实施例1、2、3、4、5组、玫瑰单味药组和传统水煎剂组,每组10只。其中空白对照组灌服生理盐水,其他组给药剂量同试验例2。(2)观察指标小鼠连续灌胃7天,于末次灌胃1h后放入xzc-4a小动物自主活动测定仪中,适应3min后,观察5min内的活动时间。于末次灌胃1h后将小鼠尾2cm处固定于水平面上,使其呈倒挂状态,头部离台面约30cm,四周以板隔离动物视线,记录小鼠在6min内的不动时间。(3)实验结果表5各组小鼠5min自主活动时间和6min悬尾实验不动时间的比较注:与空白对照组比较,△p<0.05,△△p<0.01与玫瑰单味药组比较,#p<0.05,##p<0.01与传统水煎剂组比较,▲p<0.05,▲▲p<0.05由上表可知,玫瑰复方组合组可有效抑制小鼠自主活动时间,清心除烦缓解烦躁,但对于悬挂小鼠抑郁情况看,玫瑰复方组合可缓解抑郁情绪,激发小鼠活动次数,效果均优于玫瑰单味药组和传统水煎剂组,且实施例3的效果优于其他各组。当前第1页12
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