本发明涉及一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物及其制备方法。
背景技术：
随着人们生活水平的提高，饮食、环境等因素的影响使我国糖尿病的发病率逐年上升，且有低龄化趋势。糖尿病是一种发病机制较复杂的内分泌系统疾病，多引起糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱，以高血糖和尿糖为特征，与癌症和心脑血管病并称为世界三大健康杀手。
莲子红衣是莲子加工生产中的副产物。莲子红衣制成的粉末包括莲子一道粉和莲子二道粉，莲子一道粉指带红衣莲子经第一遍机械打磨后所得的深褐色粉末为莲子一道粉，经第二遍机械打磨后所得的淡粉色粉末为莲子二道粉。每加工100公斤红莲，大约产生15公斤红衣粉，其中一道粉和二道粉各约占60％和40％。目前莲子红衣粉尚无有效的利用方式，只能大量的废弃于田间地头，对环境造成污染。
经本发明人测定，这些废弃物中含有多酚、多糖等多种活性物质，因此拟从中提取出一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物。既有助于减少糖尿病的发生，又可以解决莲子产业副产物多的难题，充分利用自然资源，避免环境污染，拓宽莲产业开发应用空间，给莲产业带来附加效益。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物，及其制备方法。
一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物，其中，它是由下述方法制备：首先将莲子一道粉和水或者亲水性有机溶剂混合搅匀，然后将所得物经超声浸提后干燥。
本发明一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6-14(g：ml)将莲子一道粉和40-80％乙醇水溶液混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将所述混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20-40min，共浸提1-4次，每次超声浸提的时间相同，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中所述的相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将所述的浸提液在在35-60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明有一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉和60％乙醇水溶液混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明的有一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6-14(g：ml)将莲子一道粉和40-80％甲醇水溶液混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，每次超声浸提时间为20-40min，共浸提1-4次，每次超声浸提的时间相同，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在35-60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明有一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉和60％甲醇水溶液混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明有一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6-14(g：ml)加入40-80％丙酮水溶液，搅匀；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20-40min，共浸提1-4次，每次超声浸提的时间相同，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在35-60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明有一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)分别加入60％丙酮水溶液，搅匀；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物在制备预防高血糖活性成分中的应用。
本发明一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物在制备预防高血糖功能性食品中的应用。
本发明的优点：将食品加工中的废物进行处理，减少了对于环境的污染，化废为宝，并在食品中获得一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的方法。
本发明中所涉及到的乙醇水溶液、甲醇水溶液、丙酮水溶液的浓度均为体积比浓度。
具体实施方式
实施例一
在制备过程中使用乙醇的，制备一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的方法。
1、一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6(g：ml)将莲子一道粉100g和40％乙醇水溶液600ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20min，共浸提1次；
(3)浸提液35℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.53g；低温冷藏。
2、一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉100g和60％乙醇水溶液1000ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次；第一次浸提后，第二次浸提是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中2次浸提所得的浸提液后，将浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.98g，低温冷藏，备用。
3、一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：14(g：ml)将莲子一道粉100g和80％乙醇水溶液1400ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为40min，共浸提4次；第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次超声浸提所得的浸提液后将浸提液在60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物2.01g，低温冷藏。
实施例二
在制备过程中使用甲醇水溶液的，制备一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的方法。
1、一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6(g：ml)将莲子一道粉100g和40％甲醇水溶液600ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20min浸提1次；
(3)浸提液在35℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.69g；低温冷藏。
2、一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉100g和60％甲醇水溶液1000ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物2.21g，低温冷藏。
3、一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：14(g：ml)将莲子一道粉100g和80％甲醇水溶液1400ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为40min，共浸提4次，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将浸提液在60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物2.30g，低温冷藏。
实施例三
在制备过程中使用丙酮水溶液的，制备一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的方法。
1、一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6(g：ml)将莲子一道粉100g和40％丙酮水溶液600ml混合均匀得到混合液；(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20min浸提1次；
(3)浸提液在35℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.49g；低温冷藏。
2、一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉100g和60％丙酮水溶液1000ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.74g，低温冷藏。
3、一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：14(g：ml)将莲子一道粉100g和80％丙酮水溶液1400ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为40min，共浸提4次，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将浸提液在60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.92g，低温冷藏。
实施例四
本发明预防高血糖功能的证实实验。
本实验以spf级雄性icr小鼠作为实验动物，灌胃给予实施例一第2组所得的提取物连续三周。然后在不继续给予提取物的情况下，通过监测被化学物质损伤法(腹腔注射四氧嘧啶)诱导处高血糖症状小鼠的空腹血糖值，评价高血糖病症的预防效果。其他实施例中所得的提取物经实验证实也有相同的效果。
1材料和方法
1.1实验动物：
spf级健康icr雄性小鼠30只，体重25-30g，购自维通利华，许可证号：scxk(京)2012-0001；
spf级大小鼠维持饲料：碳水化合物64％，蛋白质21％，脂肪4％，纤维5％，购自北京科澳协力饲料有限公司。
1.2主要仪器与试剂
葡萄糖测定试剂盒为上海荣盛生物技术有限公司生产，主要仪器为强生one-touch血糖仪。
1.3试验方法
1.3.1实验分组
小鼠饲养于spf级动物实验中心。室内通风条件良好，正常昼夜变化，相对湿度55±5％，室温：23±2℃。取30只小鼠，适应环境饲养3天，饲喂普通饲料，自由饮水、觅食。适应环境后根据体重将小鼠分组，使每组体重分布均匀，平均体重不存在显著性差异。本研究共分为3组，分别为空白对照组、实验高剂量组、实验低剂量组，每组10只，作好标记，均食用普通饲料，实验高、低剂量组每天接受剂量分别为600mg/kg·bw/d、300mg/kg·bw/d的莲子红衣提取物溶液灌胃处理，空白对照组给予灌胃同等体积的蒸馏水，实验周期为3周。灌胃处理3周后，各组小鼠腹腔连续3天、每天1次注射四氧嘧啶(200mg/kg·bw/d)以诱导产生高血糖症状。
1.3.2体重的测定
每周定期给小鼠称重，并作记录。
1.3.3空腹血糖的测定
各组小鼠分别于给予提取物前、给予提取物3周后、注射四氧嘧啶诱导5天后，通过尾尖采血，使用强生one-touch血糖仪、血糖试纸条测定小鼠禁食不禁水12h后的空腹血糖值，并作记录。本实施例中所述给予提取物3周后特指的是：给予提取物后的第22天。本实施例中所述注射四氧嘧啶诱导5天后特指的是：从第一次注射四氧嘧啶诱导后的第6天。
1.3.4口服糖耐量的测定
灌胃干预3周后，各组小鼠禁食不禁水12h，除正常对照组给予等体积蒸馏水外，高、低剂量组按剂量600mg/kg·bw/d、300mg/kg·bw/d，按体积10ml/kg·bw灌胃给予提取物。30min后，各组均灌胃葡萄糖糖溶液2.5g/kg·bw，在随后的2h内，分别在0h、0.5h、1h、2h时剪尾采血，测定血糖值。口服糖耐量曲线面积(auc)按照下列公式计算：
曲线面积(auc)＝0.25×(0h血糖+0.5h血糖)+0.25×(0.5h血糖+1h血)+0.5×(1h血糖+2h血糖)
1.3.4数据处理：
用spss19.0统计软件处理数据，lsd法进行方差分析，分析结果以均值±标准偏差表示。
2实验结果
2.1不同剂量提取物对小鼠体重的影响
表1不同剂量提取物对小鼠体重的影响(均值±标准偏差)
注：采用spss19.0软件lsd法进行显著性分析。
如表1所示，高、低剂量组小鼠在三周实验期内体重均匀增长且始终与空白对照组相接近，不存在显著性差异(p>0.05)，即口服提取物对小鼠体重无异常影响。
2.2不同剂量提取物对小鼠空腹血糖值的影响
表2不同剂量提取物对小鼠空腹血糖值的影响(均值±标准偏差)
注：采用spss19.0软件lsd法进行显著性分析，与空白对照组比较，*表示p<0.05
如表2所示，实验高、低剂量组小鼠在实验开始前和给予提取物3周后的血糖值都在正常值范围内，且与空白对照组相接近，不存在显著性差异(p>0.05)，即莲子红衣提取物对血糖值无影响。注射四氧嘧啶5天后，空白对照组小鼠空腹血糖值从6.57mmol/l增高至23.00mmol/l，实验高、低剂量组血糖值也随之增高，但均低于对照组，尤其是高剂量组较对照组存在显著性差异(p<0.05)。可见，莲子红衣提取物具有一定抵抗四氧嘧啶诱导血糖升高的功效。
2.3口服糖耐量的测定
表3不同剂量提取物对小鼠糖耐量的影响(均值±标准偏差)
注：采用spss19.0软件lsd法进行显著性分析，与对照组比较，*表示p<0.05。
如表3所示，灌胃干预3周后，实验高、低剂量组的口服糖耐量曲线面积均低于对照组，其中高剂量组与对照组存在显著性差异(p<0.05)。可见，莲子红衣提取物可在一定程度上抑制餐后血糖的升高。
综上所述，本发明一种有预防高血糖作用的莲子红衣提取物具有预防高血糖的功效。与空白对照组比较，一次口服600mg/kg.bw剂量莲子红衣提取物即可有效控制2h糖耐量曲线下面积；连续给予600mg/kg.bw剂量莲子红衣提取物3周后，即可在一定程度上抵抗由四氧嘧啶诱导的血糖升高。