发明涉及植物高效提取技术，具体涉及红景天提取中百脉根苷的降低方法。
背景技术：
红景天为景天科红景天属(rhodiolal.)多年生草本或亚灌木植物的统称，民间多以其匍匐的根状茎作为药用。早在1200年前的藏医《四部医典》中已将其作为“神药”，1596年李时珍《本草纲目》中记有“景天、上品、甘涩、寒、无毒、治肺疾”。红景天是中药“适应原样作用”研究最具代表性的品目，依据植物形态特征差异，gbif2010（全球生物多样性信息网）统计，红景天属植物全世界共有136个种，我国73种，2个亚种和7个变种。红景天属植物进行过化学成份研究的种有47个，从中分离出了近300种化合物，人们基于8种化学成分：红景天苷、络塞维、rosarin、rosavin、酪醇、儿茶酸、草质素苷和没食子酸的差异性建立了化学分类系统，其中红景天苷和没食子酸是红景天种的共有成分。研究发现红景天根中所含百脉根苷（lotaustralin）成分在生药粉碎和饮料加工过程中会被生氰糖苷水解酶linamarase分解，产生毒理成分氢腈酸，是红景天提取物临床应用过程中产生收敛作用和便秘的主要原因。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种红景天提取中百脉根苷的降低方法，减少红景天提取物在临床应用过程中产生收敛作用和便秘的副作用，本发明提取方法简单，提取效率稳定，提取物具有强的自由基清除能力。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：红景天提取中百脉根苷的降低方法，其步骤如下：
a、将红景天根风干后粉碎，过45～60目筛，得到红景天根粉末，称重，装入超临界萃取釜中；
b、在超临界萃取釜中萃取，萃取温度为30～50℃，co2流体压力为20～40mpa，夹带剂流速0.2～0.5ml/min，萃取时间1～3h，萃取物用甲醇吸收为吸收液，所述甲醇与红景天根粉末的体积质量比为50ml:100g，所述夹带剂由乙醇、石油醚、水按照质量比5：1：4配置而成；该夹带剂可将药材中红景天苷、络塞维等活性成分提出，而百脉根苷提出量极低；
c、吸收液用d101型大孔树脂层析，每小时两个柱床体积流速的蒸馏水洗脱至流出液无色，再用10个柱床体积的质量百分浓度80%乙醇洗柱子，乙醇洗脱液在450～500pa条件下减压浓缩至近干，105℃干燥24h，得到浅红色红景天提取物。
与现有技术相比，本发明的优点在于红景天提取中百脉根苷的降低方法，在超临界萃取釜中萃取，萃取中夹带剂由乙醇、石油醚、水按照质量比5：1：4配置而成，因而红景天提取物中百脉根苷只有1.52‰，本发明通过超临界萃取，四因素五水平方案优化，大孔树脂层析粗分离，得到浅红色红景天提取物，提取物中红景天苷、络塞维重量百分比大于18%、12%，百脉根苷重量百分比小于0.5%，减少红景天提取物在临床应用过程中产生收敛作用和便秘的副作用，本发明提取方法简单，提取效率稳定，提取物具有强的自由基清除能力。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
将红景天根风干后粉碎，过45～60目筛，得到红景天根粉末，称重100g，装入超临界萃取釜中，萃取温度为42℃，co2流体压力为28mpa，夹带剂乙醇流速0.37ml/min，夹带剂由乙醇、石油醚、水按照质量比5：1：4配置而成，萃取时间2.5h，萃取物50ml甲醇吸收，吸收液d101型大孔树脂层析，每小时两个柱床体积流速的蒸馏水洗脱至流出液无色，再用10个柱床体积的80%乙醇洗柱子，80%乙醇洗脱液450～500pa条件下减压浓缩至近干，105℃干燥24h，得到浅红色红景天提取物2.13g，采用超高效液相色谱sbc-18柱pda检测器分析提取物中红景天苷、络塞维重量百分比大于18%、12%，脉根苷重量百分比小于0.5%。
实施例2
与实施例1基本相同，所不同的只是萃取温度为30℃，co2流体压力为40mpa，夹带剂乙醇流速0.21ml/min，萃取时间3.0h。
实施例3
与实施例1基本相同，所不同的只是萃取温度为50℃，co2流体压力为20mpa，夹带剂乙醇流速0.50ml/min，萃取时间1.0h。
检测例1
自由基清除活性测定，dpph（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）法分析结果，量取50ul质量百分浓度0.5%样品溶液，和50ul100mmol/l的dpph自由基溶液到96孔板中，以乙醇为阴性控制，黑暗处反应30min,在517nm下测定吸光度。自由基清除率（%）=（a阴性控制-a样品）/a阴性控制，由软件计算出抑制率为50%时对应的浓度即ec50值，此值越小，活性越强，样品溶液ec50为1.028，对照为17.36。
检测例2
自由基清除活性测定，abts法分析结果，将2.45mmol/l的k2s2o8与7mmol/l的abts混合，在黑暗处反应16h，稀释到波长734nm时吸光度a=0.70，量取50ul的质量百分浓度0.5%样品溶液，和50ul稀释好的abts自由基溶液到96孔板中，以去离子水为阴性控制，黑暗处10min后测定734nm下的吸光度，自由基清除率（%）=（a阴性控制-a样品）/a阴性控制，由软件计算出抑制率为50%时对应的浓度即ec50值，样品溶液ec50为0.945，对照为14.38。
检测例3
自由基清除活性测定，frap法分析结果：frap工作液：25ml300mmol/lph3.6的醋酸盐缓冲液、2.5ml10mmol/ltptz溶液、2.5ml20mmol/lfecl3溶液混合。标准曲线绘制：分别吸取10,60,160,260,310,360,400um/l维生素c标准液，在96孔板中加入280ulfrap工作液，准确反应5min，593nm处测定其吸光度。以超纯水做阴性对照，绘制吸光度关于浓度的标准曲线，（a=0.13456+0.00129c）。样品测定：量取20ul质量百分浓度0.5%样品溶液，加入180ulfrap工作液，准确反应5min，593nm处测定其吸光度，用超纯水做阴性对照,测定吸光度。样品抗氧化活性(frap值)以达到相同吸光度所需维生素c的毫克数表示，终表达成mgaae/100g的形式，样品值为1163.34，对照为2.756。