一种治疗尖锐湿疣防复发中药水剂及其制备方法与流程

文档序号:17631147发布日期:2019-05-11 00:07阅读:375来源:国知局
本发明属于中药领域,特别是一种治疗尖锐湿疣的防复中药水剂。
背景技术
:尖锐湿疣又名尖圭湿疣、生殖器疣,系人类乳头瘤病毒(hpv)感染所致生殖器、会阴、肛门的表皮瘤样增生,属性传播疾病,潜伏期1-6个月,平均3个月,分显性感染、亚临床感染和隐性感染三种。初起为淡红色丘疹,渐次增大增多,融合为乳头状、菜花状或鸡冠状增生物,根部可有蒂,因分泌物浸润表面呈现白色、污色或红色,有痒感、灼痛和恶臭,增生甚者成为巨大尖锐湿疣。性滥交为本病传播原因,为全世界流行,目前stds已达20余种,尖锐湿疣是其常见之一,对人类生命健康危害极大。尖锐湿疣这一性传播疾病目前随着社会不断开放,人类流动性的加大等诸多社会因素,在我国一些地区已成为常见的性病,增长呈明显上升趋势。目前治疗尖锐湿疣的方法包括手术、口服或注射药物、外涂药、外洗药等。手术方法如手术切除、激光切除、冷冻等,只能清除可见病灶,且痛苦较大不能消除亚临床症状,复发率高。药物疗法如使用干扰素、抗病毒药物等,疗程长,费用高,不易根治,很难从才良本上解决问题。该病临床以西医治疗为主,一般采用祛除局部外生疣的治疗方法。(一)外用药物:1、足叶草酯与足叶草毒素的应用;2、外用3%肽丁胺霜的应用;3、80%-90%三氯醋酸的应用;4、干扰素制剂的局部皮损内注射及其外用制剂。(二)全身用药:1、抗病毒药物,如阿昔洛韦等药物;2、干扰素的全身应用;3、胸腺肽、转移因子等提高机体免疫力的药物。由于ca易于复发,上述治疗只能暂时清除疣体,不能根本消灭尖锐湿疣病毒,不能根除hpv的感染,有效率仅在30%左右,且复发率极高,通常3个月内最低复发率也达25%以上。技术实现要素:本发明的一个目的是提供一种治疗尖锐湿疣防复发中药水剂,治愈率高,复发率低。本发明还有一个目的是提供一种治疗尖锐湿疣防复发中药水剂的制备方法。本发明治疗尖锐湿疣防复发中药水剂,由如下重量份数比的原料组分制成:金银花8-9份、蒲公英10-12份、苦参5-8份、马齿苋10-11份、黄芪3-5份、白花蛇舌草5-7份、黄柏5-8份、板蓝根7-9份、紫草3-5份、薏苡仁4-6份、白术1-3份、白鹅膏2-3份、温敏性包埋载体10-20份;所述温敏性包埋载体由原料大豆卵磷脂和亮氨酸拉链型肽复配制成。优选的是,所述温敏性包埋载体由原料大豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽和甘油三油酸酯复配制成;大豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽、甘油三油酸酯的用量重量比为15:6:1。优选的是,所述大豆卵磷脂可以采用羟基化改性的大豆卵磷脂,或者采用酰羟化改性的大豆卵磷脂。其中,羟基化改性方法为:将大豆卵磷脂中添加4%的乳酸和17%的双氧水,双氧水中过氧化氢浓度含量20%,于50~70℃温度下搅拌反应1~3h,然后加入浓度2%的氢氧化钠溶液进行中和,并在减压条件下干燥至水分1%以下。酰羟化改性方法为:首先将大豆卵磷脂中加入5%的乙酸酐,酰化反应30min,制得乙酰化改性磷脂;然后将乙酰化改性磷脂中加入4%的乳酸和10%的双氧水,双氧水中过氧化氢浓度含量20%,于80℃温度下搅拌反应30min,然后加入浓度2%的氢氧化钠溶液进行中和,并在减压条件下干燥至水分1%以下。优选的是,所述金银花预处理方法:将新鲜采摘的金银花进行清洗和杀菌消毒;然后直接置于-10℃温度下冷冻5h;将冷冻后的原料放入真空压力0.01mpa、温度为50℃的真空容器中进行脱水干燥3h,得到冻干的金银花;将冻干的金银花放置到温度为18℃和湿度≤20%的环境中粉碎成粒径30~40目的金银花颗粒。所述白术预先经过预处理操作:将粳米制成粉状后与水按1:5的比例浸泡得到粳米液,将白术加入到粳米液中浸泡,至白术吸收饱和为止,然后取出晾干,备用。一种制备上述治疗尖锐湿疣防复发中药水剂的方法,包括如下步骤:s1、药物有效成分的提取s11、按重量份数比称取各原料组分:金银花8-9份、蒲公英10-12份、苦参5-8份、马齿苋10-11份、黄芪3-5份、白花蛇舌草5-7份、黄柏5-8份、板蓝根7-9份、紫草3-5份、薏苡仁4-6份、白术1-3份、白鹅膏2-3份;s12、药材预处理步骤,具体包括:(1)金银花预处理:将新鲜采摘的金银花进行清洗和杀菌消毒;然后直接置于-10℃温度下冷冻5h;将冷冻后的原料放入真空压力0.01mpa、温度为50℃的真空容器中进行脱水干燥3h,得到冻干的金银花;将冻干的金银花放置到温度为18℃和湿度≤20%的环境中粉碎成粒径30~40目的金银花颗粒,备用;(2)白术预处理:将粳米制成粉状后与水按1:5的比例浸泡得到粳米液,将白术加入到粳米液中浸泡,至白术吸收饱和为止,然后取出晾干,备用;(3)白花蛇舌草预处理:将白花蛇舌草用炒锅翻炒30min,翻炒温度为100-110℃,然后研磨成80-120目的粉末,备用。s13、将白鹅膏研磨,过100目筛,锤成饼,然后加酒曲经发酵至成熟,加入5倍白鹅膏重量的蒸馏水,加热至60℃,搅拌至其溶解完全,过滤,滤液蒸发浓缩除去五分之四的水分,得到白鹅膏浓缩液,备用;s14、将预处理后的金银花颗粒、白术和白花蛇舌草,以及除白鹅膏以外的其他原料组分一起放入砂锅内,清水浸泡,用水量以水漫过所泡药物为宜,浸泡时间不低于30min;然后用先武后文之火煎煮,煎煮时间15-20min,煎煮后所剩药液以100ml为宜,用纱布过滤,滤液备用;向过滤出来的药渣中加入浓度为60%的乙醇,乙醇用量以水漫过所泡药物为宜,进行超声波提取20min,减压回收乙醇,过滤,滤液备用,将两种滤液以及白鹅膏浓缩液混合均匀,得到混合药液。s2、温敏性包埋载体的制备s21、将大豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽、甘油三油酸酯加入到含有无水乙醇的烧瓶中,60℃水浴加热搅拌至完全溶解,减压旋转蒸发除去乙醇(真空度0.07mpa),形成薄膜层;s22、形成薄膜后向烧瓶中加入硫酸铵溶液作为水化溶液,水浴恒温60℃旋转蒸发水化30min,再超声10min,得到脂质体的包埋载体初样品,初样品经过200nm的聚碳酸酯膜过滤后,得到包埋硫酸铵的载体样品;s23、将载体样品放入预先经过处理的截流量3500的透析袋中,100倍体积的0.9%氯化钠作为外围透析液,透析10h,除去硫酸铵小分子,得到温敏性包埋载体。s3、载药;取10-20份步骤s2制备的温敏性包埋载体与步骤s1提取出的混合药液在55℃条件下孵育1h,使得中药成分被包埋于载体中,得到的乳液,即是治疗尖锐湿疣防复发中药水剂。优选的是,所述步骤s2中,大豆卵磷脂为羟基化改性的大豆卵磷脂或酰羟化改性的大豆卵磷脂;羟基化改性方法为:将大豆卵磷脂中添加4%的乳酸和17%的双氧水,双氧水中过氧化氢浓度含量20%,于50~70℃温度下搅拌反应1~3h,然后与一定浓度氢氧化钠进行中和,并在减压条件下干燥至水分1%以下;酰羟化改性方法为:首先将大豆卵磷脂中加入5%的乙酸酐,酰化反应30min,制得乙酰化改性磷脂;然后将乙酰化改性磷脂中加入4%的乳酸和10%的双氧水,双氧水中过氧化氢浓度含量20%,于80℃温度下搅拌反应30min,然后加入浓度2%的氢氧化钠溶液进行中和,并在减压条件下干燥至水分1%以下。本发明制备的中药水剂为外用药,使用时涂抹于患处。与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:(1)本发明的中药水剂采用中药材作为有效成分,清除病毒所寄生的湿热内环境,能有效抑制人乳头瘤病毒核酸复制,进而从源头上有效治疗由人类乳头瘤病毒引起的尖锐湿疣,有效地对尖锐湿疣患者的疣体进行标本兼治,痊愈率高、复发率低且对人体副作用小。(2)采用温敏性脂质体作为包埋载体将提取出的中药成分包埋于载体内。该脂质体由原料大豆卵磷脂和亮氨酸拉链型肽复配而成,或者由原料大豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽及甘油三油酸酯复配制成。该脂质体由双分子膜包裹的粒径仅有几十纳米至数微米的超微球状小囊,其壁材磷脂分子的亲水头部形成囊泡外表面,亲脂尾端脂肪酸链形成双分子层的疏水核心区域。基于这种结构,脂质体双分子层脂质膜之间为油相,能包埋脂溶性物质,各层之间和核心区为水相,能包埋水溶性物质,脂质体的生物相容性好,无免疫抑制作用,毒性小。亮氨酸拉链型肽是由两条具有平行走向的α-螺旋结构多肽构成的二聚体,广泛存在于生物体内,且具有温度响应特性。发明人通过实验研究得出,由于大豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽、甘油三油酸酯三者之间的相互影响,制得的复合脂质体具有温敏特性,相变温度范围为37.6℃。当温度在相变温度以下时,复合脂质体处于稳定的凝胶态,通透性较差,包埋于载体内的中药成分释放速度很慢甚至难以释放。当温度达到或超过相变温度时,复合脂质体发生凝胶-液晶相转变,流动性增加,进而使通透性增加,包埋于载体内的中药成分释放速度加快。将本发明的中药水剂涂抹于患处,由于患处病变部位温度通常高于人体正常体温,在患处复合脂质体发生相变,释放出中药成分,随着病变部位逐渐恢复正常,温度降低,复合脂质体转变为凝胶态,通透性变小,药物释放变慢,有效成分继续保存在脂质体内,再扩散至其他病变部位,达到持续释放的作用。而且,制得的复合脂质体与人体皮肤具有结构相似性,对皮肤有较好的渗透性,能直达病变部位。(3)本发明的制备方法最大限度的利用了各原料药材的药用成分,制备的中药水剂对尖锐湿疣患者治疗见效快,痊愈率高、复发率低且对人体副作用小。本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。具体实施方式下面对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。应当理解,本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。一、治疗尖锐湿疣防复发中药水剂制备实施例实施例1一种治疗尖锐湿疣防复发中药水剂,由如下重量份数比的原料组分制成:金银花8份、蒲公英10份、苦参8份、马齿苋11份、黄芪3份、白花蛇舌草5份、黄柏5份、板蓝根9份、紫草5份、薏苡仁4份、白术1份、白鹅膏2份、温敏性包埋载体10份。制备方法步骤如下:1、药材预处理步骤,具体包括:(1)金银花预处理:将新鲜采摘的金银花进行清洗和杀菌消毒;然后直接置于-10℃温度下冷冻5h;将冷冻后的原料放入真空压力0.01mpa、温度为50℃的真空容器中进行脱水干燥3h,得到冻干的金银花;将冻干的金银花放置到温度为18℃和湿度≤20%的环境中粉碎成粒径30~40目的金银花颗粒,备用;(2)白术预处理:将粳米制成粉状后与水按1:5的比例浸泡得到粳米液,将白术加入到粳米液中浸泡,至白术吸收饱和为止,然后取出晾干,备用;(3)白花蛇舌草预处理:将白花蛇舌草用炒锅翻炒30min,翻炒温度为100-110℃,然后研磨成80-120目的粉末,备用。2、将白鹅膏研磨,过100目筛,锤成饼,然后加酒曲经发酵至成熟,加入5倍白鹅膏重量的蒸馏水,加热至60℃,搅拌至其溶解完全,过滤,滤液蒸发浓缩除去五分之四的水分,得到白鹅膏浓缩液,备用。3、将预处理后的金银花颗粒、白术和白花蛇舌草,以及除白鹅膏以外的其他原料组分一起放入砂锅内,清水浸泡,用水量以水漫过所泡药物为宜,浸泡时间不低于30min;然后用先武后文之火煎煮,煎煮时间15-20min,煎煮后所剩药液以100ml为宜,用纱布过滤,滤液备用;向过滤出来的药渣中加入浓度为60%的乙醇,乙醇用量以水漫过所泡药物为宜,进行超声波提取20min,减压回收乙醇,过滤,滤液备用,将两种滤液以及白鹅膏浓缩液混合均匀,得到混合药液。4、温敏性包埋载体的制备,步骤如下:(1)大豆卵磷脂为羟基化改性:将大豆卵磷脂中添加4%的乳酸和17%的双氧水,双氧水中过氧化氢浓度含量20%,于50~70℃温度下搅拌反应1~3h,然后与浓度2%的氢氧化钠溶液进行中和,并在减压条件下干燥至水分1%以下;(2)将羟基化改性的大豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽、甘油三油酸酯加入到含有无水乙醇的烧瓶中,60℃水浴加热搅拌至完全溶解,减压旋转蒸发除去乙醇,真空度0.07mpa,得到一层分布均匀的薄膜层,然后将烧瓶放入常温真空干燥性30min将残余的乙醇除去完全;(3)向烧瓶中加入硫酸铵溶液作为水化溶液,水浴恒温60℃旋转蒸发水化30min,再超声10min,得到脂质体的包埋载体初样品,初样品经过200nm的聚碳酸酯膜过滤后,得到粒径不超过200nm且粒径大小分布均一的包埋硫酸铵的载体样品;(4)将载体样品放入预先经过处理的截流量3500的透析袋中,100倍体积的0.9%氯化钠作为外围透析液,透析10h,除去硫酸铵小分子,得到温敏性包埋载体;测得包埋载体的相变温度为37.5℃。5、载药:将10份制备的温敏性包埋载体加入到提取出的混合药液中国,混合均匀,并在55℃条件下孵育1h,使得中药成分被包埋于载体中,然后自然冷却,得到的乳液,即是治疗尖锐湿疣防复发中药水剂。实施例2一种治疗尖锐湿疣防复发中药水剂,由如下重量份数比的原料组分制成:金银花9份、蒲公英12份、苦参5份、马齿苋10份、黄芪5份、白花蛇舌草7份、黄柏8份、板蓝根7份、紫草3份、薏苡仁6份、白术3份、白鹅膏3份、温敏性包埋载体20份。制备方法步骤如下:1、药材预处理步骤,具体包括:(1)金银花预处理:将新鲜采摘的金银花进行清洗和杀菌消毒;然后直接置于-10℃温度下冷冻5h;将冷冻后的原料放入真空压力0.01mpa、温度为50℃的真空容器中进行脱水干燥3h,得到冻干的金银花;将冻干的金银花放置到温度为18℃和湿度≤20%的环境中粉碎成粒径30~40目的金银花颗粒,备用;(2)白术预处理:将粳米制成粉状后与水按1:5的比例浸泡得到粳米液,将白术加入到粳米液中浸泡,至白术吸收饱和为止,然后取出晾干,备用;(3)白花蛇舌草预处理:将白花蛇舌草用炒锅翻炒30min,翻炒温度为100-110℃,然后研磨成80-120目的粉末,备用。2、将白鹅膏研磨,过100目筛,锤成饼,然后加酒曲经发酵至成熟,加入5倍白鹅膏重量的蒸馏水,加热至60℃,搅拌至其溶解完全,过滤,滤液蒸发浓缩除去五分之四的水分,得到白鹅膏浓缩液,备用。3、将预处理后的金银花颗粒、白术和白花蛇舌草,以及除白鹅膏以外的其他原料组分一起放入砂锅内,清水浸泡,用水量以水漫过所泡药物为宜,浸泡时间不低于30min;然后用先武后文之火煎煮,煎煮时间15-20min,煎煮后所剩药液以100ml为宜,用纱布过滤,滤液备用;向过滤出来的药渣中加入浓度为60%的乙醇,乙醇用量以水漫过所泡药物为宜,进行超声波提取20min,减压回收乙醇,过滤,滤液备用,将两种滤液以及白鹅膏浓缩液混合均匀,得到混合药液。4、温敏性包埋载体的制备,步骤如下:(1)大豆卵磷脂的酰羟化改性:首先将大豆卵磷脂中加入5%的乙酸酐,酰化反应30min,制得乙酰化改性磷脂;然后将乙酰化改性磷脂中加入4%的乳酸和10%的双氧水,双氧水中过氧化氢浓度含量20%,于80℃温度下搅拌反应30min,然后加入浓度2%的氢氧化钠溶液进行中和,并在减压条件下干燥至水分1%以下;(2)将酰羟化改性的大豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽、甘油三油酸酯加入到含有无水乙醇的烧瓶中,60℃水浴加热搅拌至完全溶解,减压旋转蒸发除去乙醇,真空度0.07mpa,形成薄膜层;(3)形成薄膜后向烧瓶中加入硫酸铵溶液作为水化溶液,水浴恒温60℃旋转蒸发水化30min,再超声10min,得到脂质体的包埋载体初样品,初样品经过200nm的聚碳酸酯膜过滤后,得到包埋硫酸铵的载体样品;(4)将载体样品放入预先经过处理的截流量3500的透析袋中,100倍体积的0.9%氯化钠作为外围透析液,透析10h,除去硫酸铵小分子,得到温敏性包埋载体。5、载药:取20份制备的温敏性包埋载体与提取出的混合药液在55℃条件下孵育1h,使得中药成分被包埋于载体中,得到的乳液,即是治疗尖锐湿疣防复发中药水剂。实施例3一种治疗尖锐湿疣防复发中药水剂,由如下重量份数比的原料组分制成:金银花8份、蒲公英11份、苦参6份、马齿苋10份、黄芪4份、白花蛇舌草6份、黄柏7份、板蓝根8份、紫草4份、薏苡仁5份、白术2份、白鹅膏2份、温敏性包埋载体15份。制备方法步骤如下:1、药材预处理步骤,具体包括:(1)金银花预处理:将新鲜采摘的金银花进行清洗和杀菌消毒;然后直接置于-10℃温度下冷冻5h;将冷冻后的原料放入真空压力0.01mpa、温度为50℃的真空容器中进行脱水干燥3h,得到冻干的金银花;将冻干的金银花放置到温度为18℃和湿度≤20%的环境中粉碎成粒径30~40目的金银花颗粒,备用;(2)白术预处理:将粳米制成粉状后与水按1:5的比例浸泡得到粳米液,将白术加入到粳米液中浸泡,至白术吸收饱和为止,然后取出晾干,备用;(3)白花蛇舌草预处理:将白花蛇舌草用炒锅翻炒30min,翻炒温度为100-110℃,然后研磨成80-120目的粉末,备用;2、将白鹅膏研磨,过100目筛,锤成饼,然后加酒曲经发酵至成熟,加入5倍白鹅膏重量的蒸馏水,加热至60℃,搅拌至其溶解完全,过滤,滤液蒸发浓缩除去五分之四的水分,得到白鹅膏浓缩液,备用。3、将预处理后的金银花颗粒、白术和白花蛇舌草,以及除白鹅膏以外的其他原料组分一起放入砂锅内,清水浸泡,用水量以水漫过所泡药物为宜,浸泡时间不低于30min;然后用先武后文之火煎煮,煎煮时间15-20min,煎煮后所剩药液以100ml为宜,用纱布过滤,滤液备用;向过滤出来的药渣中加入浓度为60%的乙醇,乙醇用量以水漫过所泡药物为宜,进行超声波提取20min,减压回收乙醇,过滤,滤液备用,将两种滤液以及白鹅膏浓缩液混合均匀,得到混合药液。4、温敏性包埋载体的制备,步骤如下:(1)大豆卵磷脂的酰羟化改性:首先将大豆卵磷脂中加入5%的乙酸酐,酰化反应30min,制得乙酰化改性磷脂;然后将乙酰化改性磷脂中加入4%的乳酸和10%的双氧水,双氧水中过氧化氢浓度含量20%,于80℃温度下搅拌反应30min,然后加入浓度2%的氢氧化钠溶液进行中和,并在减压条件下干燥至水分1%以下;(2)将酰羟化改性的大豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽、甘油三油酸酯加入到含有无水乙醇的烧瓶中,60℃水浴加热搅拌至完全溶解,减压旋转蒸发除去乙醇,真空度0.07mpa,形成薄膜层,将烧瓶放入常温的真空干燥性内干燥1h除去残余的乙醇;(3)将烧瓶置于60℃水浴中,将硫酸铵溶液置于60℃水浴中加热至恒温,待硫酸铵溶液恒温后将其倒入烧瓶中作为水化溶液,继续水浴恒温60℃旋转蒸发水化30min,再超声10min,得到脂质体的包埋载体初样品,初样品经过200nm的聚碳酸酯膜过滤后,得到包埋硫酸铵的载体样品;(4)将载体样品放入预先经过处理的截流量3500的透析袋中,100倍体积的0.9%氯化钠作为外围透析液,透析10h,除去硫酸铵小分子,得到温敏性包埋载体。5、载药:取20份制备的温敏性包埋载体与提取出的混合药液在55℃条件下孵育1h,使得中药成分被包埋于载体中,得到的乳液,得到的乳液,即是治疗尖锐湿疣防复发中药水剂。实施例4一种治疗尖锐湿疣防复发中药水剂,由如下重量份数比的原料组分制成:金银花8份、蒲公英11份、苦参6份、马齿苋10份、黄芪4份、白花蛇舌草6份、黄柏7份、板蓝根8份、紫草4份、薏苡仁5份、白术2份、白鹅膏2份、温敏性包埋载体15份。制备方法步骤如下:1、药材预处理步骤,具体包括:(1)金银花预处理:将新鲜采摘的金银花进行清洗和杀菌消毒;然后直接置于-10℃温度下冷冻5h;将冷冻后的原料放入真空压力0.01mpa、温度为50℃的真空容器中进行脱水干燥3h,得到冻干的金银花;将冻干的金银花放置到温度为18℃和湿度≤20%的环境中粉碎成粒径30~40目的金银花颗粒,备用;(2)白术预处理:将粳米制成粉状后与水按1:5的比例浸泡得到粳米液,将白术加入到粳米液中浸泡,至白术吸收饱和为止,然后取出晾干,备用;(3)白花蛇舌草预处理:将白花蛇舌草用炒锅翻炒30min,翻炒温度为100-110℃,然后研磨成80-120目的粉末,备用;2、将白鹅膏研磨,过100目筛,锤成饼,然后加酒曲经发酵至成熟,加入5倍白鹅膏重量的蒸馏水,加热至60℃,搅拌至其溶解完全,过滤,滤液蒸发浓缩除去五分之四的水分,得到白鹅膏浓缩液,备用。3、将预处理后的金银花颗粒、白术和白花蛇舌草,以及除白鹅膏以外的其他原料组分一起放入砂锅内,清水浸泡,用水量以水漫过所泡药物为宜,浸泡时间不低于30min;然后用先武后文之火煎煮,煎煮时间15-20min,煎煮后所剩药液以100ml为宜,用纱布过滤,滤液备用;向过滤出来的药渣中加入浓度为60%的乙醇,乙醇用量以水漫过所泡药物为宜,进行超声波提取20min,减压回收乙醇,过滤,滤液备用,将两种滤液以及白鹅膏浓缩液混合均匀,得到混合药液。4、温敏性包埋载体的制备,步骤如下:(1)大豆卵磷脂的酰羟化改性:首先将大豆卵磷脂中加入5%的乙酸酐,酰化反应30min,制得乙酰化改性磷脂;然后将乙酰化改性磷脂中加入4%的乳酸和10%的双氧水,双氧水中过氧化氢浓度含量20%,于80℃温度下搅拌反应30min,然后加入浓度2%的氢氧化钠溶液进行中和,并在减压条件下干燥至水分1%以下;(2)将15重量份酰羟化改性的大豆卵磷脂、6重量份亮氨酸拉链型肽、1重量份甘油三油酸酯、0.5重量份猪油加入到含有无水乙醇的烧瓶中,60℃水浴加热搅拌至完全溶解,减压旋转蒸发除去乙醇,真空度0.07mpa,形成薄膜层,将烧瓶放入常温的真空干燥性内干燥1h除去残余的乙醇;(3)将烧瓶置于60℃水浴中,将硫酸铵溶液置于60℃水浴中加热至恒温,待硫酸铵溶液恒温后将其倒入烧瓶中作为水化溶液,继续水浴恒温60℃旋转蒸发水化30min,再超声10min,得到脂质体的包埋载体初样品,初样品经过200nm的聚碳酸酯膜过滤后,得到包埋硫酸铵的载体样品;(4)将载体样品放入预先经过处理的截流量3500的透析袋中,100倍体积的0.9%氯化钠作为外围透析液,透析10h,除去硫酸铵小分子,得到温敏性包埋载体。测得包埋载体的相变温度为37.7℃。5、载药:取20份制备的温敏性包埋载体与提取出的混合药液在55℃条件下孵育1h,使得中药成分被包埋于载体中,得到的乳液,即是治疗尖锐湿疣防复发中药水剂。对比例1一种治疗尖锐湿疣防复发中药水剂,原料组分同实施例1,但是没有加入温敏性包埋载体,由如下重量份数比的原料组分制成:金银花8份、蒲公英10份、苦参8份、马齿苋11份、黄芪3份、白花蛇舌草5份、黄柏5份、板蓝根9份、紫草5份、薏苡仁4份、白术1份、白鹅膏2份。制备方法步骤如下:1、药材预处理步骤,具体包括:(1)金银花预处理:将新鲜采摘的金银花进行清洗和杀菌消毒;然后直接置于-10℃温度下冷冻5h;将冷冻后的原料放入真空压力0.01mpa、温度为50℃的真空容器中进行脱水干燥3h,得到冻干的金银花;将冻干的金银花放置到温度为18℃和湿度≤20%的环境中粉碎成粒径30~40目的金银花颗粒,备用;(2)白术预处理:将粳米制成粉状后与水按1:5的比例浸泡得到粳米液,将白术加入到粳米液中浸泡,至白术吸收饱和为止,然后取出晾干,备用;(3)白花蛇舌草预处理:将白花蛇舌草用炒锅翻炒30min,翻炒温度为100-110℃,然后研磨成80-120目的粉末,备用。2、将白鹅膏研磨,过100目筛,锤成饼,然后加酒曲经发酵至成熟,加入5倍白鹅膏重量的蒸馏水,加热至60℃,搅拌至其溶解完全,过滤,滤液蒸发浓缩除去五分之四的水分,得到白鹅膏浓缩液,备用。3、将预处理后的金银花颗粒、白术和白花蛇舌草,以及除白鹅膏以外的其他原料组分一起放入砂锅内,清水浸泡,用水量以水漫过所泡药物为宜,浸泡时间不低于30min;然后用先武后文之火煎煮,煎煮时间15-20min,煎煮后所剩药液以100ml为宜,用纱布过滤,滤液备用;向过滤出来的药渣中加入浓度为60%的乙醇,乙醇用量以水漫过所泡药物为宜,进行超声波提取20min,减压回收乙醇,过滤,滤液备用,将两种滤液以及白鹅膏浓缩液混合均匀,得到混合药液,即治疗尖锐湿疣防复发中药水剂。对比例2一种治疗尖锐湿疣防复发中药水剂,原料组分同实施例1,但是没有加入白鹅膏和温敏性包埋载体,由如下重量份数比的原料组分制成:金银花8份、蒲公英10份、苦参8份、马齿苋11份、黄芪3份、白花蛇舌草5份、黄柏5份、板蓝根9份、紫草5份、薏苡仁4份、白术1份。制备方法步骤如下:1、药材预处理步骤,具体包括:(1)金银花预处理:将新鲜采摘的金银花进行清洗和杀菌消毒;然后直接置于-10℃温度下冷冻5h;将冷冻后的原料放入真空压力0.01mpa、温度为50℃的真空容器中进行脱水干燥3h,得到冻干的金银花;将冻干的金银花放置到温度为18℃和湿度≤20%的环境中粉碎成粒径30~40目的金银花颗粒,备用;(2)白术预处理:将粳米制成粉状后与水按1:5的比例浸泡得到粳米液,将白术加入到粳米液中浸泡,至白术吸收饱和为止,然后取出晾干,备用;(3)白花蛇舌草预处理:将白花蛇舌草用炒锅翻炒30min,翻炒温度为100-110℃,然后研磨成80-120目的粉末,备用。2、将预处理后的金银花颗粒、白术和白花蛇舌草,以及其他原料组分一起放入砂锅内,清水浸泡,用水量以水漫过所泡药物为宜,浸泡时间不低于30min;然后用先武后文之火煎煮,煎煮时间15-20min,煎煮后所剩药液以100ml为宜,用纱布过滤,滤液备用;向过滤出来的药渣中加入浓度为60%的乙醇,乙醇用量以水漫过所泡药物为宜,进行超声波提取20min,减压回收乙醇,过滤,滤液备用,将两种滤液混合均匀,得到混合药液,即治疗尖锐湿疣防复发中药水剂。二、治疗尖锐湿疣防复发中药水剂的性能试验临床收集生殖道尖锐湿疣标本,共计30份,制匀浆后提取人乳头瘤病毒(hpv)核酸dna。取8份hpv核酸dna样品,分别将实施例1-4制备的中药水剂分别作用于4份hpv核酸dna,对比例1和2制备的中药水剂分别作用于2份hpv核酸dna,以生理盐水为阴性对照作用于另外1份hpv核酸dna,试验温度为37.5℃,作用时间30小时,观察本发明的中药水剂能否抑制人乳头瘤病毒核酸复制。作用50小时,观察本发明的中药水剂能否抑制人乳头瘤病毒核酸复制。试验结果见表1,由对比例1和对比例2可以看出,添加有白鹅膏成分的中药水剂对hpv的抑制作用优于不含有白鹅膏的药液。由对比文件1和实施例1可看出,将中药成分包埋在温敏性包埋载体内得到的中药水剂,与不含有包埋载体的中药水剂的药效是相同的,即包埋载体的使用不会抑制药物的药效。由实施例1-4可以看出,本发明的中药水剂在体外可抑制人乳头瘤病毒核酸复制,有效地破坏病毒dna,具有杀灭病毒的能力,且对hpv的抑制作用随时间的延长而加强。其中,实施例2的中药水剂对hpv的抑制作用最佳,药效最好。表1、各种中药水剂对hpv核酸dna的抑制作用三、治疗尖锐湿疣效果试验选择18-65岁男女外生殖器尖锐湿疣病例:单个疣体直径<0.5cm,疣体数目<5个(疣体团块直径<1cm),疣体位于外因或肛周部位,将其分为6个试验组(试验组1、2、3、4、5、6、7)和1个对照组,每组各30人,其中,6个试验组分别使用实施例1-4制备的中药水剂和对比例1、对比例2的中药水剂,对照组使用咪喹莫特乳膏。试验方法:6个试验组:试验组1、2、3、4分别使用实施例1、2、3、4的中药水剂,试验组5、6分别使用对比例1、对比例2的中药水剂。用棉签蘸取对应的中药水剂涂于疣体及周围2cm区域,2次/日,连续使用3天,停4天,7天为一个疗程。若一个疗程结束后,疣体未完全脱落,可使用第二个疗程,最多四个疗程。对照组:用5%咪喹莫特乳膏用棉签涂于疣体及周围2cm区域,每周三次,隔日应用,治疗8周。6个试验组和对照组的患者每2周复诊一次,共8周,观察疗效并采集样品通过pq-pcr法进行病毒标志物检测。试验结果:(1)首疗程疣体完全脱落率,见表2。可以看出,首疗程中,本发明的中药水剂的疗效明显优于咪喹莫特乳膏。4个实施例和对比例1的中药水剂的疗效相似,这也再次证明了温敏性包埋载体不会抑制中药水剂药效。对比例2中没有加入白鹅膏,其药效相对其他含有白鹅膏的要差一些。表2、各种中药水剂首疗程疣体完全脱落率比较试验组1试验组2试验组3试验组4对比例1对比例2对照组首疗程有效人数28282929282618首疗程无效人数22112412(2)病毒转阴检测数据见表3。实施例1-4的中药水剂的hpv病毒标志物转阴率显著高于咪喹莫特乳膏,其中实施例4的转阴率最高(100%)。表3、各种中药水剂治疗后hpv病毒标志物转阴率比较试验组1试验组2试验组3试验组4对比例1对比例2对照组转阴人数28282929262420无效人数22114610(3)复发情况统计数据见表4。可以看出,采用本发明的中药水剂进行治疗以后,复发率明显低于咪喹莫特乳膏。另外,由两个对比例中可以看出,中药水剂中白鹅膏的加入更够一定程度提高中药的药效。由对比例1和实施例1可以看出,在中药原料组分及用量相同的条件下,经过包埋载体包埋的药物,尖锐湿疣的复发率更低,由此说明,温敏性包埋载体能够提升中药水剂的防复发效果。其作用原理是,温敏性包埋载体是由大豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽、甘油三油酸酯三者复配而成的一种温敏性复合脂质体;或者是由豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽、甘油三油酸酯、猪油复配而成的一种温敏性复合脂质体。由于豆卵磷脂、亮氨酸拉链型肽、甘油三油酸酯、猪油之间的相互影响,包埋载体在37.6℃时会发生相变,低于37.6℃时,包埋载体为凝胶状,温度超过37.6℃时凝胶发生相变为液晶相。制得的复合脂质体与人体皮肤具有结构相似性,对皮肤有较好的渗透性,能直达病变部位。因此,当温度在相变温度以下时,复合脂质体处于稳定的凝胶态,通透性较差,包埋于载体内的中药成分释放速度很慢甚至难以释放。当温度达到或超过相变温度时,复合脂质体发生凝胶-液晶相转变,流动性增加,进而使通透性增加,包埋于载体内的中药成分释放速度加快。将本发明的中药水剂涂抹于患处,由于患处病变部位温度通常高于人体正常体温,在患处复合脂质体发生相变,释放出中药成分,随着病变部位逐渐恢复正常,温度降低,复合脂质体转变为凝胶态,通透性变小,药物释放变慢,有效成分继续保存在脂质体内,再扩散渗透至其他病变部位,复合脂质体再次发生相变,释放出中药成分,进而达到持续释放的作用,延长了药效的药效。表4、各种中药水剂治疗后复发率比较试验组1试验组2试验组3试验组4对比例1对比例2对照组复发人数2221456未复发人数28282829262524综上所述,经过实施例1-4制备的中药水剂治疗的试验组和对照组首疗程疣体完全脱落、病例复发率及hpv病毒标志物转阴率进行统计,比较结果显示,本发明的中药水剂治疗尖锐湿疣效果显著,hpv病毒标志物转阴率高且复发率低。尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用。它完全可以被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改。因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出。当前第1页12
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