本发明涉及一种除臭剂，具体涉及一种宠物用复合型生物除臭喷剂及其制备方法。
背景技术：
宠物的口臭、体臭以及排泄物发酵产生的臭味是每个宠物爱好者的烦心事。臭气成分多样复杂，所以去除难度高，且高浓度臭气不仅影响宠物主人的生活品质，还会极大的影响宠物及宠物主人的身体健康，比如影响呼吸系统、免疫系统、消化系统、黏膜健康等等。
臭气的产生大部分是由于腐败菌的滋生，分解了宠物粪尿中、口腔中、皮肤上的碳水化合物、蛋白质和脂肪等有机质，从而伴随产生了氨气、硫化氢、硫醇类等臭气分子。所以根治臭气的关键是杀灭有害微生物等腐败细菌和病毒，同时再吸附溶解空气中的臭气，并通过生物酶和催化剂分解这些臭气分子，从而达到根治除臭的目的。
市场上的除臭剂种类花样繁多，主要有物理遮蔽型除臭剂、化学除臭剂、酶制品除臭剂、植物型除臭剂、微生物型除臭剂。这些除臭方法都各有利弊，其中物理遮蔽型除臭剂居多，主要通过香精等物质达到掩盖臭味的作用，而宠物的嗅觉非常灵敏，用香水遮蔽其臭味不是长久和明智的方法，因此除臭效果只是暂时，只能治标不能治本，只能暂时掩盖，不能长久去除和维持；第二类以二氧化氯、次氯酸盐、硫酸亚铁等为代表的化学除臭剂主要作用就是氧化杀菌，除臭机理主要为对异味分子的脱硫、氧化、缩合和加成反应等，这些杀菌产品杀菌效果强，根除了腐败细菌，铲除了产生臭气的根源，从而辅助的作为除臭剂的作用，其能治本，但空气中原有的臭气不能很快除去，因此其是能治本不能治标，同时其安全性也很差；植物型除臭剂是指从植物的根、茎、叶或花中提取的油、汁或浸膏的萃取液按一定的配方复配而成，植物提取物中有效分子含有化学活性、生物活性及共扼双键等活性基团，可以与不同的异味物质发生反应如酸碱反应、催化氧化反应、路易斯酸碱反应和氧化还原反应等，促使恶臭物质改变原有的分子结构，分解成无毒、无味的小分子，从而达到除臭目的，若其单独作用除臭效果有限，只能对部分臭气分子起作用，同时成本偏高；微生物除臭剂采用筛选获得的除臭微生物构建复合菌剂，对一些由易腐有机物质构成的恶臭源有较好的控制作用，其在除臭上效果不明显很可能是因为微生物只能消除一种或几种恶臭化合物，若消除的这几种化合物与恶臭强度相关性很差，这些菌剂的除臭效果将不明显。
在2016年7月6日公开的中国发明专利申请cn105724439a中披露了一种宠物消毒杀菌除臭剂，该除臭剂包括双十八烷基二甲基氯化铵、双癸基二甲基氯化铵、苯扎溴铵、戊二醛、纯植物提取液、植物精油、蒸馏水。该除臭剂消毒杀菌除臭效果显著，喷洒于宠物笼具、尿液、粪便处，或对需要消毒杀菌除臭的部位空中喷洒，可起到消毒杀菌、消除异味的作用。但是该除臭剂的消毒杀菌作用是因为添加有化学消毒成分，所以安全方面不能保证，同时还需要稀释后使用，所以导致使用不方便。
在2018年7月6日公开的中国发明专利申请cn108245449a中披露了宠物除臭剂，该除臭剂含有乙酸芳樟醇，香茅醇，苯乙醇，对氯间二甲苯酚，甲基丙烯酸月桂酯，香樟提取液，聚山梨酯，柠檬酸，香精，酒精，去离子水。该除臭剂可直接喷到宠物身上，除臭效果显著，持续时间长，具有杀菌功效。但是该除臭剂的制备工艺比较复杂，导致生产成本增加。
针对上述问题，特提出本发明。
技术实现要素：
本发明提供了一种宠物用复合型生物除臭喷剂及其制备方法，解决了市场宠物除臭产品除臭效果差、治标不治本、无杀菌作用、安全性差、危害环境、成本高等问题，提高了除臭效果，提升了安全性，同时成本还低，适于市场推广。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种宠物用复合型生物除臭喷剂，各组分以质量百分比计，包括丝兰提取物5-8％，绿茶提取物4-5％，牛至油提取物6-8％，柿子提取物4-5％，辣根提取物4-5％，蓖麻油酸锌3-4％，乳化剂5-6％，稳定剂1-2％，ph值调节剂1-2％，余量为纯化水。
优选的，所述丝兰提取物包括皂甙、多糖和多酚，其中皂甙含量为10-12％，多糖含量为10-12％，多酚含量为15-17％。
优选的，所述绿茶提取物中包括茶多酚，其中茶多酚的含量为20-25％。
优选的，所述牛至油提取物中包括百里香酚、聚酚、香荆芹酚，其中百里香酚含量为10-11％、聚酚含量为7-8％、香荆芹酚含量为8-10％。
优选的，所述柿子提取物中包括柿子单宁，其中柿子单宁含量为15-18％。
优选的，所述辣根提取物包括辣根过氧化物酶，其中辣根过氧化物酶含量为7-10％。
优选的，所述蓖麻油酸锌为液体状，其有效成分含量为30-35％。
优选的，所述乳化剂为tween-80、span-80的混合物，二者配比为tween-80：span-80＝6：4。
优选的，所述稳定剂为醋酸盐缓冲液、溶菌酶和甘油的混合物，所述ph值调节剂为柠檬酸或乳酸或其组合。
一种制备上述宠物用复合型生物除臭喷剂的方法，包括以下步骤：
步骤1，先取一定量的纯化水，然后按配比依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a；
步骤2，称取乳化剂，依次加入牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，搅拌使其溶解,即得溶液b；
步骤3，将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为3000-4000转/分，搅拌时间为15-20min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
步骤4，加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至规定体积，即得除臭喷剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
1、本发明的除臭喷剂对宠物口臭、体臭、便臭等多种来源的臭味分子都具有较好的除臭特性。这些臭味的主要成分为氨气、硫化氢、甲硫醇、三甲胺等，本发明的除臭喷剂中所含的多种除臭成分通过捕捉、吸附、分解等多种不同的作用机理可有效的去除多种臭味分子，显著提升除臭效率。
2、本发明的除臭喷剂具有杀菌特性，能够从根源上去除臭味。本发明的除臭喷剂所含有的多种植物提取物中酚类化合物，均具有明显的抗菌、杀菌、抗氧化及防腐作用。
3、本发明的除臭喷剂反应迅速、除臭效率高。本发明的除臭喷剂能治标且治本的快速除臭，杀灭细菌消除病毒，通过喷雾法，将所含的有效成分雾化，在空间扩散液滴的半径≤0.04mm，液滴具有很大的比表面积，具有很大的表面能，平均每摩尔约为几十千卡，溶液的表面能大不仅能有效地吸咐空气中的异味分子，同时也能使被吸附的异味分子的立体构型发生改变，削弱了异味分子中的化合键，使得异味分子的不稳定性增加，容易与其他分子和植物液中的酸性缓冲液发生化学反应，最后生成无味、无毒的物质，5分钟内消除宠物粪便垃圾等恶臭，抑制蚊蝇产卵，净化环境，减少疾病。
4、本发明的除臭喷剂除臭效果好、持续时间长。本发明的除臭喷剂能够从根源上抑制臭味的产生，除臭持续时间长，除臭效果可维持72h以上。
5、本发明的除臭喷剂是一款安全、环保的绿色产品。本发明的除臭喷剂所选用的都是无毒、无害、无刺激的原料，不含酒精、香精等成分，可安全的用于口腔除臭、身体除臭、粪便除臭等，对人、宠物及环境都没有任何危害，可安全放心地用于宠物的口腔环境、粪便、身体异味、笼舍、食钵、宠物毛发等处的消毒杀菌除臭。同时本品无腐蚀性，无氧化性，可减轻消毒剂、化学药剂等危害宠物健康，为人和动物营造生态、无毒、清香的生长环境。
6、本发明的除臭喷剂稳定性强。本发明的除臭喷剂所含的乳化剂、稳定剂能使配方中的所有组分都能保持溶解状态，不出现分层、沉淀、浑浊等性状，产品稳定性更强。
7、本发明的除臭喷剂产品使用方便。该除臭喷剂的杀菌成分主要为植物提取成分，所以该除臭喷剂不需稀释，可直接喷洒使用，便于宠物主人及宠物医师使用。
8、本发明的除臭喷剂的成本低。该除臭喷剂是植物型除臭喷剂及生物酶型除臭喷剂的结合，同时制备方法简单，成本较低，适宜市场推广。
9、本发明的除臭喷剂应用范围广。该除臭喷剂不仅能消除空气中的各种异味臭味，还能消除宠物口腔内及身体产生的异味，同时还能抑菌杀菌，所以该除臭喷剂的应用范围更广。
具体实施方式
下面将结合本发明具体实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明的宠物用复合型生物除臭喷剂是以丝兰提取物，绿茶提取物，牛至油提取物，柿子提取物，辣根提取物，蓖麻油酸锌为主要活性成分，辅以乳化剂，稳定剂，ph值调节剂等，经过科学组方制备成的一种稳定、杀菌除臭同步高效、无刺激性、使用方便的安全绿色的新型复合型生物除臭喷剂。乳化剂为tween-80、span-80的混合物，二者配比为tween-80：span-80＝6：4，稳定剂为醋酸盐缓冲液、溶菌酶和甘油的混合物，ph值调节剂为柠檬酸或乳酸或其组合。
丝兰提取物包括皂甙、多糖和多酚，其中皂甙含量为10-12％，多糖含量为10-12％，多酚含量为15-17％，b50值＜4mg，b50值是用来衡量麟凤属丝兰提取物结合氨气能力的，测定结合50％的氨气所需要的麟凤属丝兰提取物的数量，这个数值越低越好。丝兰提取物中的丝兰皂甙可有效结合宠物排泄物产生的氨气、硫化氢等臭气分子，同时它还是一种脲酶抑制剂，可从源头有效抑制氨气的产生；丝兰提取物中的多糖成分与氨气有非常强的亲和力，很容易与之结合，从而抑制氨的有害作用并把它转化为无害的氮化物；丝兰提取物中的多酚具有较强的抗氧化性以及清除自由基的能力。
绿茶提取物包括茶多酚，其中茶多酚的含量为20-25％，绿茶提取物中的茶多酚对口腔微生物产生的臭气成分甲硫醇(ch3sh)具有很好的清除效果。牛至油提取物包括百里香酚、聚酚、香荆芹酚，其中百里香酚含量为10-11％、聚酚含量为7-8％、香荆芹酚含量为8-10％。柿子提取物包括柿子单宁，其中柿子单宁含量为15-18％，柿子提取物中的柿子单宁是一种多酚类物质，其具有良好的抗氧化活性，具有较强的脱臭性能，对三甲胺脱臭性能较强。并且牛至油提取物中所含的百里香酚、聚酚、香荆芹酚等，柿子单宁中的多元酚结构能与蛋白质、多糖和生物碱等发生反应，使其理化行为发生改变，所以在微生物抑制方面具有其独特的优势。
辣根提取物包括辣根过氧化物酶，其中辣根过氧化物酶含量为7-10％，辣根提取物中的辣根过氧化氢酶对12种致臭物质具有去除效果，辣根过氧化氢酶能够完全去除酚类恶臭物质，除臭效果可维持72h以上，而且辣根过氧化氢酶对挥发性脂肪酸也具有较好的去除效果。蓖麻油酸锌为液体状，有效成分含量为30-35％，蓖麻油酸锌最大优点是经皮肤、口及呼吸道的吸收毒性低，使用安全可靠，它可有效地消除主要臭气成分氨气、硫化氢和有机硫化物，明显地降低臭气强度。本发明的除臭喷剂的制备方法包括以下步骤：
步骤1，先取一定量的纯化水，然后按配比依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a；
步骤2，称取乳化剂，依次加入牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，搅拌使其溶解,即得溶液b；
步骤3，将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为3000-4000转/分，搅拌时间为15-20min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
步骤4，加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至规定体积，即得除臭喷剂。
通过上述制备方法制备的除臭喷剂除臭效果好、持续时间长，性状稳定。为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明提供的宠物用复合型生物除臭喷剂及其制备方法进行具体的描述。
实施例1
一种宠物用复合型生物除臭喷剂，各组分以质量百分比计：
其制备方法，包括以下步骤：
(1)先取一定量的纯化水，依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a待用；
(2)再称取乳化剂，依次加入以下原料：牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，并搅拌使其依次溶解，即得溶液b待用；
(3)将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为3000转/分，搅拌时间为20min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
(4)加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至至1l，即得除臭喷剂。
实施例2
一种宠物用复合型生物除臭喷剂，各组分以质量百分比计：
其制备方法，包括以下步骤：
(1)先取一定量的纯化水，依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a待用；
(2)再称取乳化剂，依次加入以下原料：牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，并搅拌使其依次溶解，即得溶液b待用；
(3)将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为4000转/分，搅拌时间为15min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
(4)加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至至1l，即得除臭喷剂。
实施例3
一种宠物用复合型生物除臭喷剂，各组分以质量百分比计：
其制备方法，包括以下步骤：
(1)先取一定量的纯化水，依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a待用；
(2)再称取乳化剂，依次加入以下原料：牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，并搅拌使其依次溶解，即得溶液b待用；
(3)将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为3500转/分，搅拌时间为20min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
(4)加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至至1l，即得除臭喷剂。
实施例4
一种宠物用复合型生物除臭喷剂，各组分以质量百分比计：
其制备方法，包括以下步骤：
(1)先取一定量的纯化水，依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a待用；
(2)再称取乳化剂，依次加入以下原料：牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，并搅拌使其依次溶解，即得溶液b待用；
(3)将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为4000转/分，搅拌时间为20min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
(4)加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至至1l，即得除臭喷剂。
实施例5
一种宠物用复合型生物除臭喷剂，各组分以质量百分比计：
其制备方法，包括以下步骤：
(1)先取一定量的纯化水，依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a待用；
(2)再称取乳化剂，依次加入以下原料：牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，并搅拌使其依次溶解，即得溶液b待用；
(3)将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为3300转/分，搅拌时间为20min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
(4)加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至至1l，即得除臭喷剂。
实施例6
一种宠物用复合型生物除臭喷剂，各组分以质量百分比计：
其制备方法，包括以下步骤：
(1)先取一定量的纯化水，依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a待用；
(2)再称取乳化剂，依次加入以下原料：牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，并搅拌使其依次溶解，即得溶液b待用；
(3)将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为3800转/分，搅拌时间为17min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
(4)加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至至1l，即得除臭喷剂。
实施例7
一种宠物用复合型生物除臭喷剂，各组分以质量百分比计：
其制备方法，包括以下步骤：
(1)先取一定量的纯化水，依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a待用；
(2)再称取乳化剂，依次加入以下原料：牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，并搅拌使其依次溶解，即得溶液b待用；
(3)将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为3500转/分，搅拌时间为18min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
(4)加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至至1l，即得除臭喷剂。
实施例8
一种宠物用复合型生物除臭喷剂，各组分以质量百分比计：
其制备方法，包括以下步骤：
(1)先取一定量的纯化水，依次加入丝兰提取物，绿茶提取物，柿子提取物，蓖麻油酸锌，加入后搅拌使其依次溶解，即得溶液a待用；
(2)再称取乳化剂，依次加入以下原料：牛至油提取物，辣根过氧化物酶，稳定剂，并搅拌使其依次溶解，即得溶液b待用；
(3)将溶液b及溶液a均倒入高剪切均质真空混合搅拌乳化机中搅拌，搅拌速度为3000转/分，搅拌时间为15min，得颜色均一的淡黄色透明液体；
(4)加入ph值调节剂调节溶液a与溶液b的混合液至ph值为6.5-7.5，最后补加纯化水至至1l，即得除臭喷剂。
试验例1
除臭喷剂的外观检查试验，检查除臭喷剂的外观，是否均匀，有无分层或沉淀。
将实施例1～实施例8的除臭喷剂在原包装容器内充分摇匀后取不少于500ml的原液，从中取100ml除臭喷剂原液放于100ml具塞量筒内，在15～35℃下放置24h后，依据《中华人民共和国兽药典》液体外观检查标准，观察除臭喷剂原液的外观。
除臭喷剂的外观检查试验结果如表1所示，由表1可见，实施例1～实施例8除臭喷剂的外观性状均均匀、且无分层和沉淀，均符合液体的外观检查标准。
表1不同实施例配方的外观检查结果
试验例2
除臭喷剂的ph值考察试验，检测除臭喷剂原液的ph值。
将实施例1～实施例8的除臭喷剂在原包装容器内充分摇匀后取一定量除臭喷剂原液，在室温条件下(25℃±2℃)，用ph计测试除臭喷剂原液的ph值，精确到0.1ph单位，试验结果如表2所示，由表2可见，实施例1～实施例8的除臭喷剂原液的ph均在6.5～7.5之间，均为中性，使用安全，无腐蚀性，可安全用于口腔、身体、环境喷洒。
表2不同实施例配方的ph值检测结果
试验例3
除臭喷剂的高、低温稳定性试验，将除臭喷剂样品经高温、低温处理后，观察是否有分层和沉淀等现象。
高温稳定性试验的试验方法为将除臭喷剂倒入50ml具塞量筒至50ml刻度，加塞后放入60±2℃的恒温水浴中，水面应高于刻度20mm，6h后，取出，待恢复至室温后，观察外观，结果如表3所示。
低温稳定性试验的试验方法将经高温试验无变化的试样(如有变化需另取新样)，放入-5±2℃冰箱里保持2h，取出，待其自然恢复至室温，观察外观，结果如表3所示。
由表3可见，实施例1～实施例8的除臭喷剂样品在高温和低温条件下性状均稳定、均匀、不分层，且无结晶或沉淀析出。
表3不同实施例配方的高、低温稳定性变化试验结果
试验例4
除臭喷剂的除臭效果测试试验，通过对宠物常见的几种臭气分子的除臭效果，来评定实施例1～实施例8各除臭喷剂配方的除臭效果。
除臭喷剂的除臭效果测试试验所用的试验试剂为氨水、硫化氢、甲硫醇、甲硫醚、二甲二硫醚。除臭喷剂的除臭效果测试试验所用的试验仪器为氨、硫化氢气体检测管、hp5840a气相色谱仪、5.5l玻璃瓶、注射器。
1、臭气仪器分析法
在5.5l玻璃瓶中分别配制不同浓度的氨气、硫化氢和3种有机硫化物，以硼酸吸收固定氨气测评除臭效果，以顶空气相色谱法测评除臭喷剂对硫化氢、甲硫醇、甲硫醚、二甲二硫醚祛除效果。气相色谱条件：柱db-1，进样口温度170℃，柱温40℃，检验器250℃，载氨气等气体(60ml/min)，以氢气为燃料，压力1kg/cm2，空气助燃，压力1.5kg/cm2。称取0.01g样品溶解于有1ml水的顶空瓶，密封注入一定量臭气物质，留置1h吸取1ml顶空气进样。测定作用1h前后各气体的浓度，计算其消除率，试验同时做空白对照组(纯化水)。
对单一臭气分子的除臭效果如表4所示，由表4可知，本发明的除臭喷剂能有效、快速的去除氨气、硫化氢、甲硫醇、甲硫醚、二甲二硫醚等臭气，使这5种单一臭气分子的消除率都能达到85％以上。
表4不同实施例配方对5种臭气单独的除臭效果
2、嗅觉评价法
在瓶中配制氨气、硫化氢、甲硫醇、甲硫醚和二甲二硫醚的混合气体，用六级臭气强度表示法(见表5)，聘请5名经过培训合格的嗅辨员测定消除前后的臭气强度，求其平均值，同时计算其消除率。
将5种臭气进行混合，通过人工嗅觉评价法测评本发明实施例1～实施例8的除臭喷剂的除臭效果，以纯化水作为对照实验，结果如表6所示，由表6可以看出，本除臭喷剂的除臭效果极佳，对于复合臭气分子的消除率比例也能达到85％以上。
表5依据嗅觉的臭气程度表
表6不同实施例配方对5种混合臭气的除臭效果表
试验例5
除臭喷剂的安全性测试试验，通过急性毒性试验、亚急性毒性试验、皮肤毒性试验、动物眼结合膜刺激试验、人体皮肤局部刺激试验，来评定实施例1～实施例8各除臭喷剂配方的安全性。
1、试验材料与试验对象
试验材料：急性毒性试验用鱼肝油(含1500u维生素a、500u维生素d/g)除臭喷剂混悬液；亚急性试验用含有0.5％除臭喷剂的混合饲料；皮肤毒性试验用25％除臭喷剂的甘油混悬液；眼结膜刺激试验用5％除臭喷剂的鱼肝油混悬液；人体皮肤刺激试验用15％除臭喷剂凡士林混合物。
试验对象：急性毒性试验用wistar雌性大鼠40只，亚急性毒性试验用wistar大鼠40只(雄、雌性各半)，皮肤毒性和刺激试验用雌性豚鼠15只，眼结膜刺激试验用豚鼠、家兔各10只，人体皮肤局部刺激试验请健康男女青壮年各5名参加。
2、急性毒性试验
根据预试验中灌胃给药6.8g/kg和8g/kg实施例1的除臭喷剂，动物全部活存。将试验剂量定为9.0g/kg除臭喷剂，即5～8ml鱼肝油混悬液。对照动物给等量鱼肝油。试验前禁食1夜，第2天灌药，之后，观察动物的一般情况和活存情况，第8天将动物断头活杀，取肺、肝、肾，在光学显微镜下观察组织形态学变化。活杀动物后，立即取肺、心、肝、肾和血液(分离血清)分别放入25ml的烧杯中，加入硝酸5ml、高氯酸2ml，硝化后，用原子吸收光谱仪测定锌含量。
试验期间，9.0g/kg体重灌胃实验组和对照组大鼠各20只，无一死亡，由此可以肯定其ld50值(半数致死量)远在9.0g/kg以上，由于胃容量有限，难以得出ld50的具体数值。
实验组和对照组动物在灌胃后呼吸都比原来加快，不爱活动，持续1天左右，在此期间食欲有所下降。一周后，实验组体重由试验前的平均178.4g增加至216.3g，平均增加21.2％；对照组由试验前的182.6g增加至217.8g，平均增加19.3％，统计学处理两组无显著差别，详见表7。
组织形态学观察肝细胞、窦状隙、窦壁，肾脏的皮质、髓质；肺脏的肺泡壁等处均未见特异性病理改变。
灌胃一周后，动物主要脏器及血清锌含量大体相近，统计学处理无显著差别，说明无锌蓄积，详见表8。
实施例2～实施例8的急性毒性试验结果与实施例1的急性毒性试验结果相同，此处不再重复赘述。
表7急性毒性试验动物体重变化情况(g)
n＝20
表8急性毒性试验脏器和血清中的锌含量(ug/g)
n＝10(m±sd)*单位umol/l
3、亚急性毒性试验
试验动物随机分为实验和对照两组，分别饲养在4个笼中。试验动物喂含有0.5％实施例1除臭喷剂的普通饲料，对照喂普通饲料，随意饮水。每月称一次体重，3个月后用2.2％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(1m1左右)腹部切开，腹主动、静脉放血、取肺、肝、肾组织，一部分做常规病理检查，观察组织形态学变化，另取一部分用于组织中锌含量测定。
在90d的实验期间，两组动物全部活存，体重增加，结果如表9所示，由表9可以看出，实验组3个月体重增加96.9％，对照组体重增加87.2％，两组无明显差别。
组织形态学观察肝细胞、窦状隙、窦壁，肾脏的皮质、髓质；肺脏的肺泡壁等处均未见特异性病理改变。组织形态学观察结果表明实验组和对照组比较肺、肝、肾组织病理改变无明显差别。
亚急性毒性试验动物主要脏器锌含量测定的结果如表10所示，由表10可知，动物主要脏器锌含量大体相近，统计学处理无显著差别，说明无锌蓄积。
实施例2～实施例8的亚急性毒性试验结果与实施例1的亚急性毒性试验结果相同，此处不再重复赘述。
表9亚急性毒性试验动物变化情况
n＝40(m±sd)p＞0.5
表10试验动物主要脏器中的锌含量(ug/g)
n＝10(m±sd)p＞0.2
4、皮肤毒性试验
试验前将豚鼠剪短背部长毛，涂上脱毛剂(10％硫化钠和阿拉伯胶配成)，5—7min后刮毛，冲洗后观察24h，选用无明显红肿及皮肤损伤的豚鼠作为试验对象。以豚鼠背部正中线为界，两侧分别为试验区和对照区，各约6cm2，试验区涂25％实施例1配方的除臭喷剂甘油(1:1水剂)，以覆盖皮肤和短毛为度，每日涂1次，连续5d。对照涂50％甘油水剂，逐日观察表皮有无红肿斑点等。第6天断头活杀，分别采取两区皮肤常规染色，在光学显微镜下观察组织形态学变化。
实施例1配方的除臭喷剂涂药后5d的观察结果表明，试验区和对照区皮肤表面均未见有任何明显的刺激症状以及红、肿、斑点等损伤。光镜下组织形态学观察两组动物皮肤均属正常皮肤。
实施例2～实施例8的皮肤毒性试验结果与实施例1的皮肤毒性试验结果相同，此处不再重复赘述。
5、动物眼结合膜刺激试验
给家兔或豚鼠左眼滴5％实施例1配方的除臭喷剂鱼肝油混悬液2滴，右眼只滴鱼肝油2滴，分别于滴后立即、10min、30min、lh和4h观察眼结膜有无充血、流泪等情况。
实施例1配方的除臭喷剂经动物眼结合膜刺激试验结果表明，家兔中有2只用药眼和1只对照眼，点药后30min内有轻度的粘膜充血，随即恢复正常，豚鼠眼点药后均未见明显刺激反应。
实施例2～实施例8的动物眼结合膜刺激试验结果与实施例1的动物眼结合膜刺激试验结果基本相同，此处不再重复赘述。
6、人体皮肤局部刺激试验
配制含15％实施例1配方除臭喷剂的凡士林膏，涂在受试者的一侧前臂皮肤上，用油纸盖上纱布包好，每天1次，连续5d，对照只涂凡士林膏，观察对皮肤的刺激作用。
实施例1配方的除臭喷剂经人体皮肤局部刺激试验结果发现，10名受试者在涂药过程中3人身上一共出现5次一过性发红、痒、小疹等反应，其中试验一侧3次，对照一侧2次，未见明显差别。
实施例2～实施例8的人体皮肤局部刺激试验结果与实施例1的人体皮肤局部刺激试验结果基本相同，此处不再重复赘述。
根据以上结果可见，作为一种宠物外用用品，我们所选取的实施例1～实施例8各配方产品安全性极好，经急性毒性试验、亚急性毒性试验、皮肤毒性试验、动物眼结合膜刺激试验、人体皮肤局部刺激试验等试验验证，对宠物眼睛、皮肤、口腔等几乎无毒性，安全性极佳，宠物可安全舔舐。
试验例6
除臭喷剂对狗厂现场除臭效果测试试验。本试验选取山东某大型狗厂，在通风条件差的冬季，通过仪器检测验证实施例1～实施例8各除臭喷剂配方对狗厂的除臭效果。
在此大型狗厂内选取10栋狗舍，分别于除臭前和除臭5分钟后用便携式氨气检测仪进行圈舍氨现场检测，具体方法为在测试前2小时同时关闭各门窗，分别在每栋狗舍的3个不同分布点、距地面0.9米的高度进行氨气值的检测，并取平均值。
试验结果如表11所示，由表11可知，实施例1～实施例8各配方除臭喷剂对狗厂现场除臭效果很好，能在作用5分钟后快速消除氨气，降氨百分比均达到75％以上，使狗舍内空气得到有效净化，减少呼吸系统疾病的发生，且本发明除臭喷剂的降氨除臭效果优于市场同类除臭喷剂。
表11不同实施例配方对狗厂除臭效果测试结果
试验例7
除臭喷剂对狗厂现场杀菌消毒测试试验。本试验选取山东某大型狗厂，验证实施例1～实施例8各除臭喷剂配方对狗厂表面自然菌的杀灭作用。
1、试验试剂与材料
磷酸盐缓冲液(pbs，0.03mol/l，ph7.2)、稀释液(含0.1％吐温80的pbs溶液)、无菌棉拭子、规格板(用不锈钢材料制备，中央留有5.0cm×5.0cm的空格作为采样部位)和营养琼脂培养基。
2、试验方法
(1)随机取墙壁表面，用规格板标定3块面积各为25cm2的区块，一供消毒前采样，一供化学消毒后采样，一供除臭喷剂消毒采样。
(2)将纯化水喷雾于采样区，然后将无菌棉拭子于含5ml稀释液试管中沾湿，对一区块涂抹采样，横竖往返各8次。采样后，以无菌操作方式将棉拭子采样端剪入原稀释液试管内，震荡20s或振打80次，做适当稀释后，作为阴性对照组样本。
(3)将化学消毒剂按说明书用量稀释后喷雾于采样区进行消毒，然后将无菌棉拭子于含5ml稀释液试管中沾湿，对一区块涂抹采样，横竖往返各8次。采样后，以无菌操作方式将棉拭子采样端剪入原稀释液试管内，震荡20s或振打80次，做适当稀释后，作为阳性对照组样本。
(4)将除臭喷剂直接喷雾于采样区进行除臭消毒，然后将无菌棉拭子于含5ml稀释液试管中沾湿，对除臭消毒区块涂抹采样，横竖往返各8次。采样后，以无菌操作方式将棉拭子采样端剪入原释液试管内，电动混匀器震荡20s或振打80次，作为除臭消毒组样本。
(5)将阳性对照组、阴性对照组和除臭消毒组样本，每份吸取1.0ml，以琼脂倾注法接种平皿，每个样本接种2个平皿，放37℃恒温箱中培养48h，观察最终结果。
(6)计算杀灭对数值
试验重复3次，计算各组的菌落数量(cfu)，并换算为对数值(n)，然后按下式计算杀灭对数值:
杀灭对数值(kl)＝对照组平均活菌浓度的对数值(no)－实验组活菌浓度对数值(nx)
试验重复3次，阳性对照组应有较多细菌生长，阴性对组应无菌生长，消毒样本的平均杀灭对数值≥1，可判为消毒合格。
3、试验结果
除臭喷剂对狗厂现场杀菌消毒测试试验的试验结果如表12所示，由表12可知，实施例1～实施例8各配方除臭喷剂对狗厂现场杀菌消毒效果很好，各组平均杀灭对数值均大于等于1，与阳性对照组(化学消毒剂)效果相似。由此，我们可以得出实施例1～实施例8各配方除臭喷剂在除臭的同时，还能高效杀菌消毒，从而能从本质上、从源头上解决臭味问题。
表12不同实施例配方对狗厂现场杀菌消毒测试结果
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。