一种具有化疗增效作用的组合物，包括其的药物、制备方法及应用与流程

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种具有化疗增效作用的组合物,包括其的药物、制备方法及应用。

背景技术：

癌症是夺走人们生命的罪魁祸首之一，全世界每年有1/5的死亡是由各种类型的癌症引起的。据国家癌症研究中心2019年最新统计数据：每分钟有7.5个人患癌症，2015年癌症发病率为285.83人/10万，死亡率为170.05人/10万。癌症的发病率和死亡率都呈现逐年上升趋势，已经成为我们国家最为严重的疾病之一。癌症作为一种过度增生型疾病，现代医学常采用多种策略来治疗，如外科手术、放射治疗、化学疗法等。其中外科手术切除肿瘤往往是最直接的治疗方式，但是这种方式对于年龄偏大或者不适宜手术的人群则无法实施，且手术切除常治标不治本，后期时常发生癌细胞转移。放射治疗虽然可直接辐照杀死癌细胞，但会引起诸如放射性皮炎等副作用。相比之下使用细胞毒性的抗肿瘤药物的化学疗法是一种被广泛接受且有效的治疗手段，经常被医生作为治疗癌症的策略首选。但是，很多化学药物在杀伤癌细胞的同时也对正常细胞有毒，导致了一系列诸如呕吐、腹泻、脱发、体重减轻等副作用产生，严重影响了患者的生存质量，降低了患者带瘤生存周期。此外，癌细胞往往分子异质性强，患者在经历一段时间化学药物治疗后，癌细胞便会对药物产生极强的抵抗性，最终使化疗药的治疗功效下降。因此开发能够减轻化疗药毒副作用，增强化疗药的特异性功效的天然化合物对于提高癌症患者的治疗效果，改善其生存质量至关重要。

姜黄素是从植物姜黄中提取出来的一种天然多酚，由于其出色的抗炎、抗氧化、降血脂、降血糖、抗肿瘤、抗抑郁等作用，备受人们关注。美国国立肿瘤研究所更是将其列为第三代癌症化学预防药。大量细胞、体内、体外实验表明姜黄素可以通过调节多种靶点来抑制肿瘤细胞的生长和转移。例如调节细胞核转录因子nf-κb、蛋白激酶c(pkc)和蛋白络氨酸激酶ptk、血管生长因子、细胞凋亡因子等多种信号通路，并且在乳腺癌、结直肠癌、胃癌等肿瘤的治疗方面已有效果良好的临床实验结果。此外，在姜黄素治疗结肠癌时发现，患者对姜黄素的耐受性较好，且在大剂量时未表现出毒性。因此，姜黄素是肿瘤药物领域一个十分有吸引力的潜在候选者。

甘露糖是一种单糖，常存在于某些水果的果皮中，是目前唯一应用于临床的糖质营养素，在体内通常参与免疫调节。最新研究显示(pablosierragonzalez,etal,mannoseimpairstumourgrowthandenhanceschemotherapy,nature,2018,563:719-723)甘露糖可以对肿瘤产生明显的抑制效果，原因在于甘露糖影响了葡萄糖的代谢，从而切断了癌细胞对葡萄糖的利用，抑制肿瘤细胞的生长。此外，动物实验表明甘露糖与化疗联合使用对于提高小鼠的生存期有明显帮助。

辣木是辣木属中最广泛栽培的植物，古罗马时期就已存在食用辣木的记载，辣木无论是叶、花、荚、根、种子、树皮和树胶均有药用功能，因此被称为“神奇之树”。辣木籽具有保肝作用，能改善肝脏和肾脏的功能，对急性肝损伤有治疗作用。其中富含单不饱和omega-9脂肪酸油酸，对降低血液中总胆固醇和有害胆固醇有帮助，此外还含有(14.0±0.6)mg/100g和(24.8±0.7)mg/100g的vc和va，(asgharig.,palizbana.,etal.,quantitativeanalysisofthenutritionalcomponentsinleavesandseedsofthepersianmoringaperegrina(forssk.).pharmacognosyresearch,2015,7(3):242-248.)能有效帮助人们补充人体所需的维生素。

尽管专利(公开号cn105476996a)报道了姜黄素与阿法替尼联合可以协同治疗非小细胞肺癌，同时降低其副作用。但是姜黄素潜在的问题在于其是脂溶性的药物，生物利用度低，极大地限制了其在抗肿瘤方面的效果发挥。而甘露糖以及辣木籽与化疗药的联用目前也未见文献报道。

技术实现要素：

为了解决上述问题，本发明提供了一种具有化疗增效作用的组合物，包括其的药物、制备方法以及应用，所述药物组合物与化疗药物联用可以明显提高化疗药物的疗效，改善患者的生存质量。

本发明所述的一种具有化疗增效的组合物，包括其的药物、制备方法及应用。该组合物的药物其特征在于，包括以下重量份数的原料：30-70重量份的纳米姜黄提取物、5-30重量份的甘露糖、10-50重量份的辣木籽仁粉。

本发明所述的具有化疗增效作用的组合物，其特征在于，组合物中还包括1-20重量份的胡椒粉。

本发明所述的具有化疗增效的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

按重量份数称取姜黄、辣木籽、胡椒原料磨碎后，按常规方法提取，加入甘露糖混合后并加入药学可接受的辅料或辅助性成分混合制成可接受的任意剂型：

(1)取姜黄粉碎成粗粉，加5～8倍量浓度80～85％乙醇加热提取三次，每次1.5～2小时，加乙醇浸泡提取液，搅拌、静置24～48小时，取上清液，减压(65～75℃)加热滤液浓缩至饱和溶液，静置，析出晶体，取晶体干燥得姜黄素，取制得的姜黄素粉末加入到含有表面活性剂吐温80的水溶液中，用高压均质技术喷雾干燥得到直径为100-1000纳米的姜黄素纳米颗粒备用。

(2)辣木籽去皮后粉碎成初粉，过50-100目筛，加5-8倍乙醇加热提取三次。减压回收乙醇，浓缩至饱和溶液，静置，析出晶体，取晶体干燥得辣木籽仁粉。

(3)取胡椒粉碎成粗粉，加5～8倍量浓度80～85％乙醇加热提取三次，每次1.5～2小时，合并提取液，过滤，调节ph值至7，回收乙醇至无醇味，再继续浓缩至70℃相对密度1.25～1.30，然后加8～10倍量水，搅匀，静置，滤过，滤液浓缩至70℃相对密度1.15～1.20，然后加乙醇使乙醇浓度达70％，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩，真空干燥得胡椒提取物，备用。

(4)合并步骤(1)得到的纳米姜黄素、步骤(2)得到的辣木籽仁粉和步骤(3)得到的胡椒提取物，加入一定量的甘露糖混合后，再加入药学上可接受的辅料或辅助性成分按制剂学上的通用方法制成各种剂型。

本发明所述的甘露糖，其特征在于以下一种或多种糖类组成：d-甘露糖、低聚甘露糖，优选d-甘露糖。

本发明所述的组合物的制剂，其特征在于所述的组合物制剂为口服制剂，其中，所述口服制剂的剂型为：片剂、胶囊剂、汤剂、丸剂、散剂、膏剂、脂质体及颗粒剂等，优选片剂。本发明所述的制剂，所述片剂为缓控释、速释、含片、口崩片、分散片等。

本发明所述的制剂，其特征在于所述剂型的组成成分还包括制剂学上必要的赋型剂及辅助成分，具体为：糖浆、阿拉伯胶、凝胶、山梨糖醇、黄原胶、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)；乳糖、糖类、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇或无水葡萄糖；硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅；马铃薯淀粉、羧甲基纤维素钠，所述片剂可按照已知的常规制药实践中的方法进行包衣。

本发明所述的组合物的应用，所用化疗药包括以下一种或多种：烷化剂、抗代谢药、抗肿瘤抗生素类药、抗肿瘤动植物成分药、抗肿瘤激素类、杂类、pd-(l)1单抗药物、car-t药物、靶向药物、抗血管生成靶向药物。

本发明所述的应用，所述化疗药的烷化剂为以下一种或多种：尼莫司汀、卡莫司汀、洛莫司汀、环磷酰胺、异环磷酰胺、甘磷酰芥；抗代谢药，为以下一种或多种：去氧氟鸟苷、多西氟鸟啶、5-氟尿嘧啶、巯嘌呤、硫鸟嘌呤、阿糖胞苷、氟鸟苷、替加氟、吉西他滨、卡莫氟、羟基脲、甲氨蝶呤、优福定、安西他滨；抗肿瘤抗生素类，为以下一种或多种：放线菌素d、多柔比星、柔红霉素、表柔比星、丝裂霉素、培洛霉素、平阳霉素、吡柔比星；抗肿瘤动植物成分药，为以下一种或多种：伊立替康、三尖杉酯碱、羟基喜树碱、长春瑞宾、紫杉醇、泰索帝、拓扑替康、长春新碱、长春地辛、长春酰胺、长春碱、替尼泊苷、依托泊苷、榄香烯)；抗肿瘤激素类，为以下一种或多种：阿他美坦、阿那曲唑、氨鲁米特、来曲唑、福美坦、甲他孕酮、他莫昔芬；杂类，为以下一种或多种：门冬酰胺酶、卡铂、顺铂、达卡巴嗪、奥沙利铂、乐沙定、可铂奥沙、米托蒽醌、丙卡巴肼；pd-(l)1单抗药物，为以下一种或多种：keytruda、opdivo、tecentriq；car-t药物，为以下一种或多种：kymriah、yescarta；靶向药物，为以下一种或多种：吉非替尼、克唑替尼、奥沙替尼、阿来替尼；抗血管生成靶向药物，为以下一种或多种：仑伐替尼、安罗替尼、贝伐珠单抗、呋奎替尼、阿帕替尼。

本发明所述的应用，其特征在于，所述癌症包括肺癌、肝癌、白血病、乳腺癌、食道癌、胃癌、宫颈癌、前列腺癌、结直肠癌、胃间质瘤、卵巢癌，优选肺癌、胃癌。

相比现有技术，本发明有益效果在于：通过改进工艺，将姜黄素纳米化并复合胡椒碱，以促进姜黄素的吸收，为实现姜黄素生物利用度的提高，提升其抗肿瘤效果奠定基础。此外，本发明进一步将纳米级的姜黄素与甘露糖、辣木籽粉进行协同，最终实现对化疗出色的协同减毒增效作用。

本发明的特点：

1、本发明从食源植物中筛选出活性物质，进行科学配伍组合而成的化疗增效天然药物组合物，安全低毒、效果优异。

2、本发明选用天然植物化合物可通过调节细胞增殖或者代谢的相关通路，配合化疗药共同使用，有助于提高化疗药的治疗效果。

3、本发明通过工艺改善姜黄素的溶出度，从而提高了姜黄素的生物利用度。

4、本发明疗效高，服用方便，无毒副作用，患者依从性高。可大幅节省癌症患者的治疗成本。

附图说明

图1实施例和姜黄素原料药的溶出度比较

具体实施方式

下述是结合具体实施例和实验例进一步阐述本发明。但这些实例仅限于说明本发明而不是用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体实验条件的实验方法，通常按常规条件进行。

实施例1(胶囊剂)

按重量份数称取姜黄、辣木籽、胡椒原料磨碎后，按照上述方法提取分别得到各自提取物后，取70重量份的纳米姜黄提取物、10重量份的辣木籽仁粉、10重量份的胡椒粉，加入10重量份的甘露糖，再加入硬脂酸镁、微粉硅胶、糊精适量调整总量，混匀，制成颗粒过筛后灌装入胶囊即可。

实施例2(片剂)

按重量份数称取姜黄、辣木籽、胡椒原料磨碎后，按照上述方法提取分别得到各自提取物后，取50重量份的纳米姜黄提取物、20重量份的辣木籽仁粉、5重量份的胡椒粉，加入20重量份的甘露糖，再加入乳糖、玉米淀粉混合均匀，加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，整粒，然后压片制成片剂。

实施例3(颗粒剂)

按重量份数称取姜黄、辣木籽、胡椒原料磨碎后，按照上述方法提取分别得到各自提取物后，取30重量份的纳米姜黄提取物、30重量份的辣木籽仁粉、20重量份的胡椒粉，加入20重量份的甘露糖，再加入稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂即可。

实施例4(胶囊剂)

按重量份数称取姜黄、辣木籽、胡椒原料磨碎后，按照上述方法提取分别得到各自提取物后，取40重量份的纳米姜黄提取物、20重量份的辣木籽仁粉、10重量份的胡椒粉，加入30重量份的甘露糖，再加入硬脂酸镁、微粉硅胶、糊精适量调整总量，混匀，制成颗粒过筛后灌装入胶囊即可。

实施例5(片剂)

按重量份数称取姜黄、辣木籽、胡椒原料磨碎后，按照上述方法提取分别得到各自提取物后，取45重量份的纳米姜黄提取物、18重量份的辣木籽仁粉、17重量份的胡椒粉，加入20重量份的甘露糖，再加入乳糖、玉米淀粉混合均匀，加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，整粒，然后压片制成片剂。

实施例6(颗粒剂)

按重量份数称取姜黄、辣木籽、胡椒原料磨碎后，按照上述方法提取分别得到各自提取物后，取33重量份的纳米姜黄提取物、40重量份的辣木籽仁粉、15重量份的胡椒粉，加入12重量份的甘露糖，加入稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂即可。

以下通过实验来进一步阐述本发明的天然化学药物组合物在生物利用度方面的改善，以及与癌症化疗药联用增效作用。

一、本发明的生物利用度改善

分别取本发明实施例1、实施例2、实施例3以及分别与实施例1、实施例2、实施例3同等姜黄素含量的姜黄素原料药(分别为姜黄素-1、姜黄素-2、姜黄素-3)，按照中国药典2015版第四部附录xc溶出度测定方法第二法测定姜黄素的溶出度。采用ph值6.8磷酸盐缓冲液900ml作为溶出介质，转速50r/min，温度(37±0.5)℃，分别于0、10、20、30、40、50、60、80min取样5ml，过滤，精密量取过滤液10μl按色谱条件进样，计算出各时间点的累积溶出率，并同时补加相同体积、温度的溶出介质。结果见图1。从图中可以看出，相比姜黄素原料药，本发明的实施例拥有更快的溶出速率以及更大的累积溶出度。

二、本发明与化疗药联用对小鼠移植性肿瘤的影响

1、实验方法

1.1实验目的：确定本发明实施案例1对小鼠移植性肿瘤的影响

2材料和方法：

2.1受试物及模型对照

受试物名称及来源：本发明实施案例1。

模型对照：蒸馏水

2.2实验动物

4～8周龄balb/c小鼠，80只，18-22g，雌雄各半，spf级，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。试验开始前给予常规基础饲料适应5天～7天。人肺癌a549细胞购于中科院上海细胞所，细胞以含10％胎牛血清的rpmi-1640培养基,常规消化后，rpmi-1640培养液洗涤。实验均取对数生长期的细胞，计数并调成215×10⁷/ml浓度，取200μl,即5×10⁶细胞。

2.3饲养环境

饲养于屏障环境，温度为26～28℃(78～820f)，相对湿度40～60％。

2.4肿瘤接种、分组及给药

每只动物皮下接种肺癌a549细胞5×10⁶个，然后分组。分为以下八组：

1、空白对照组(每天按0.05ml/10g注射1次生理盐水)

2、化疗组(用易瑞沙用生理盐水稀释后变为0.2mg/ml，每天按0.05ml/10g注射1次含药物的生理盐水)

3、样品组：样品组分为姜黄素原料药组、辣木籽组、甘露糖组、联合高剂量组、联合中剂量组、联合低剂量组六个组。

样品组除每日按化疗组进行给药外，同时按姜黄素原料组100mg/kg给予姜黄素原料药、辣木籽组100mg/kg给予辣木籽，纯甘露糖组100mg/kg给予甘露糖，按联合高剂量组200mg/kg、联合中剂量组100mg/kg、联合低剂量组50mg/kg给予小鼠用相应样品连续给药30天，在15天和30天分别观察给药后的体重变化。各组连续灌胃给药30天，1次/天，观察30天内动物的毒性反应及死亡情况，30天后脱颈处死小鼠，解剖肿瘤、称重并计算抑瘤率和进行统计学检验。实验结果分别如表1和表2所示。

3、实验结果

从表1可以看出，化疗组在15天和30天后体重明显下降，而联合组在中高剂量时体重变化不明显，在低剂量时体重虽有下降但仍旧高于化疗组，且中剂量组抑制体重下降的效果要比单纯用同等含量的姜黄素原料药组、辣木籽组、甘露糖组好。因此联合组要更有利于减轻化疗药的体重下降(p<0.01)，尤其以高剂量给药更为显著。

表1组合物对移植a549肺癌的小鼠体重的影响

注：**与空白对照组相比p<0.01▲▲与化疗组相比p<0.01

表2则是组合物联合化疗药对肿瘤活性抑制的影响，计算各组荷瘤小鼠的平均瘤重及抑瘤率。可以看出，联合组高剂量组抑瘤率要远高于其他组，高达70.7％。联合组中低剂量组抑瘤率也明显高于化疗组、空白对照组、姜黄素原料药组、辣木籽组、甘露糖组。由此可见本发明的效果。

表2组合物对移植a549肺癌的小鼠瘤重以及抑瘤率的影响

注：**与空白对照组相比p<0.01▲▲与化疗组相比p<0.01

三、采用本发明药物联合化疗药治疗50例癌症患者，取得一定疗效。

1资料与方法

1.1一般资料

服用患者50例，其中男患者为28例，女患者为22例，患者年龄35～81岁，平均年龄为61.7岁，且病程为1～3年。采取自身对照试验，即选取确诊为癌症，目前正在进行化疗的患者采用本发明药物进行治疗。癌症分型：肺癌25例，乳腺癌18例，肝癌7例。

1.2治疗方法

口服本发明实施案例5，每日3次，每次5粒，或遵医嘱。服药3个月时复查血常规、肝肾功、腹部ct评价疗效。有效者继续服用，并在6个月时复查相关内容，评价疗效。之后继续服用药物者，观察生存期。

1.3疗效标准

参照who疗效判定标准，

完全缓解(cr)：肿瘤病灶完全吸收；

部分缓解(pr)：肿瘤病灶不断缩小，但是缩小体积大于50％；

稳定(sd)：肿瘤病灶不断缩小，但是缩小体积小于50％；

进展(pd)：肿瘤病灶呈现不断扩大趋势，且体积扩大了25％以上。

患者治疗客观有效率＝(完全缓解+部分缓解)/可评价病例数×100％，

患者疾病控制率＝(完全缓解+部分缓解+轻度缓解)/可评价病例数×100％。

生存期指标3个月(人)、6个月(人)、1年(人)、2年(人)、3年(人)。

2、结果

2.1临床疗效

治疗50例患者中，完全缓解患者为20例，部分缓解患者为18例，轻度缓解患者为4例，无效患者8例。客观有效率为76.00％，疾病控制率为84.00％。

生存期指标3个月8人、6个月12人、1年10人、2年12人、3年8人。

上述数据表明，本发明药物治疗客观有效率和疾病控制率均较高。

病例1：张某军，男、69岁，肺癌；经北京大学肿瘤医院诊断为肺癌后，每日服用实施例9粒，配合服用易瑞沙(吉非替尼片)半年后，肺部病灶消失。

病例2：周某华，女、70岁，肝癌，配合化疗药索拉菲尼服用本发明后6个月，主诉感觉良好，化疗通常的副作用不明显。

病例3：李某红，女、67岁，肺癌。在化疗期间服用本发明5个月后，瘤体缩小为2.5公分；同年12月份瘤体缩小为1.4公分。至今b超检查没有发生转移，也未见新生肿瘤。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。