一种抗菌消炎的石斛牙膏的制作方法

本发明涉及日用品领域，具体涉及一种抗菌消炎的石斛牙膏。
背景技术：
：慢性萎缩性胃炎的主要病理改变为黏膜腺体萎缩、变薄、炎症，可伴有肠腺上皮化生及不典型增生，发病率占全部慢性胃炎的10～20％，世界卫生组织已将其列为胃癌前状态。牙膏是人们日常生活中不可缺少的口腔清洁卫生用品，随着人们保健意识的增强，消费者对牙膏的要求越来越高，添加中药活性成分的功能型牙膏成为了市场的一个主流发展方向，但现有的一些以中药为活性成分的牙膏的功效并不明显。石斛是一种名贵中药材，《神农本草经》曰“主伤中；除痹，下气；补五脏虚劳赢，强阴，久服厚肠胃”，可滋阴益胃、清热生津；石斛富含多糖、黄酮、生物碱、游离氨基酸、维生素以及各种酶等成分；研究发现石斛多糖具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、增强免疫等作用；在对主药为石斛的枫斗晶的研究中发现，该药能促进大鼠分泌胃液，增加胃酸、胃蛋白酶的排出量；且外用可以止血、促进伤口愈合；将石斛的活性成分与牙膏有效结合，可以实现口腔的疾病预防和护理保健，同时预防慢性萎缩性胃炎，降低胃癌的发生率。现有的石斛提取物制备方法多为水提取或醇提、有机溶剂提取、超声提取以及超临界提取等方法制得；单纯采用水提取或醇提的方法，提取时间长，耗费试剂，且不能完全的将石斛中具有生物活性成分完全提取出来，不能充分体现石斛的功效作用；采用超声方法提取，存在超声波衰减、噪音大、辐射强等缺点，不适宜工业化生产；采用超临界萃取的方法制得的石斛提取物使得分子量大、极性大的化学成分提取不出来，提取率低，且生产成本过高。中药材有效成分的溶出还与其粉碎程度具有密切的关系，随着破壁率的提高可以改善有效成分的溶出，提高中药材的利用价值，改善产品的质量；将石斛加入牙膏中，有望提高疾病预防和护理保健；然而，如何最大限度的发挥石斛的功效及深加工应用成为人们近年来致力于研究的难题；目前，较为常见的石斛添加方式是将其制成石斛粉末，添加在药剂中，但是，普通方式制成石斛粉末的方式细胞破壁率低，导致药材的整体利用率较低，在人体及中药制剂中的释放速率低，进一步影响药效的发挥。技术实现要素：本发明的目的是针对现有技术存在的问题，提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，其抗菌消炎效果好，对于牙龈发炎、出血、口腔溃疡均具有很好的疗效，且长期使用能够提高对慢性萎缩性胃炎的疾病预防。为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种抗菌消炎的石斛牙膏，按重量份数包括以下组分：石斛提取物2～20份、润湿剂5～15份、摩擦剂5～10份、山梨酸钾0.5～0.8份、增稠剂0.5～1.0份、十二烷基硫酸钠2～5份、甜味剂0.2～0.5份、纳米羟基磷灰石5～15份、去离子水15～25份。作为上述方案的进一步限定，所述石斛提取物的提取方法，包括如下步骤：s1、将新鲜石斛，洗净后放入低温干燥箱进行冷冻干燥；s2、将冷冻的石斛倒入破碎机进行破碎；s3、取粉碎后的石斛粉，用模拟胃液提取，提取液离心；s4、在步骤s3所得的滤渣中添加磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，调节体系ph值为3.0～5.0，加入破坏植物细胞壁的酶，振荡提取；s5、在步骤s4所得的滤渣溶于模拟肠液进行提取，提取液离心；s6、将步骤s3～s5离心后得到的上清液液合并，减压浓缩至原液体积的1/3～1/5；s7、将步骤s3～s6得到的药渣合并，烘干、粉碎、过筛后制得石斛药渣粉。作为上述方案的进一步限定，步骤s1中，冷冻干燥温度为-30～-50℃。作为上述方案的进一步限定，步骤s3中，按照1g：10～50ml的料液比，加入磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液作为模拟胃液提取剂，调节体系ph值为2.0～3.0，充分震荡均匀，于40～60℃水浴提取1～2h后过滤。作为上述方案的进一步限定，步骤s4中，破坏植物细胞壁的酶用量为滤渣质量的0.5～1％，震荡提取温度为35～40℃，时间为1～2h。作为上述方案的进一步限定，所述破坏植物细胞壁的酶为纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶与β-葡聚糖酶中的一种或多种的组合。作为上述方案的进一步限定，步骤s5中，加入磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液作为模拟肠液提取液，调节体系ph值为7.5～9.0，充分混匀，在40～60℃下回流提取1～2h。作为上述方案的进一步限定，步骤s7中，烘干温度为40℃，粉碎后过200目筛。作为上述方案的进一步限定，所述摩擦剂为石斛药渣粉、三七粉、绿茶粉按质量比为1：0.5～1：1～2混合而成。作为上述方案的进一步限定，所述润湿剂为甘油、山梨醇按重量比为1：1～3的混合物。作为上述方案的进一步限定，所述纳米羟基磷灰石为粒径为20～50nm的纳米羟基磷灰石、粒径为50～80nm的纳米羟基磷灰石、粒径为80-200nm的纳米羟基磷灰石按重量比为1：1～3：1～3的混合物。作为上述方案的进一步限定，所述增稠剂为卡拉胶、海藻酸钠按重量比为1：2～5的混合物。与现有技术相比，本发明的有益效果是：(1)本发明同时将半仿生法和生物酶结合起来提取石斛中的活性成分，模拟石斛口服后在体内胃肠道内吸收转运过程，本方法与单独使用半仿生法或酶法相比，提取效率高，有利于充分发挥石斛有效成分的功效，且操作简单，环境友好，适合工业化大规模生产，具有较好的应用价值。(2)本发明原料成本低，配方简单科学，工艺简便，成本低廉，配方科学，性价比高。(3)本发明将石斛提取后的药渣粉碎后用作摩擦剂，并与其它天然成分合理配伍作为摩擦剂，可起到避免牙齿损伤和牙龈出血的功效，使得石斛的药用价值得到了充分利用，同时减少了石斛药渣对环境的污染。(4)采用低温冷冻干燥及破碎机进行破碎，使细胞破壁率达99％以上，充分保留了其生物活性成分，同时对于单一中草药粉碎方式而言是一种技术上的突破，提高了药材的利用率、增加了其附加值。附图说明图1为实施例实施例1～3与对比例1～2制得的牙膏作用于生物膜后不同时间的活菌数。图2为实施例1、实施例4～11制得的石斛提取物对慢性萎缩性胃炎大鼠治疗12周大鼠血清胃泌素gas、白介素il-6含量。图3为实施例1、实施例12～15制得的石斛提取物对慢性萎缩性胃炎大鼠治疗12周大鼠血清胃泌素gas、白介素il-6含量。图4为实施例14～29制得的石斛提取物对慢性萎缩性胃炎大鼠治疗12周大鼠血清胃泌素gas、白介素il-6含量。图5为实施例30～35制得的石斛提取物对慢性萎缩性胃炎大鼠治疗12周大鼠血清胃泌素gas、白介素il-6含量。具体实施方式为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明；应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明；除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本
技术领域：
常规试剂、方法和设备。以下具体实施例中，牙膏的抗菌消炎效果测定方法如下：在厌氧工作站中培养ms、ss、lgg、av、fn和pg等与龋病、牙龈炎、牙周炎及口臭病相关的口腔厌氧致病菌，形成口腔厌氧菌混合菌生物膜；将按照本发明实施例制得的牙膏用无菌水配制成质量浓度为0.5g/l悬浮液，取1ml加入生物膜孔板的小孔中，保留3min，用生理盐水轻轻洗3次(1ml/次)；继续进行生物膜的培养，每1h换液一次，即吸去体系所有溶液，再加入1ml脑心浸出液肉汤(bhi)富集培养基，分别于0，2，4，6和8h用平板活菌计数法对小孔底部的生物膜进行活菌计数。实施例1一种抗菌消炎的石斛牙膏，按重量份数包括以下组分：石斛提取物12份、润湿剂10份、摩擦剂8份、山梨酸钾0.6份、增稠剂0.8份、十二烷基硫酸钠4份、甜味剂0.3份、纳米羟基磷灰石10份、去离子水20份。所述石斛提取物的提取方法，包括如下步骤：s1、将新鲜石斛，洗净后放入低温干燥箱中，于-40℃进行冷冻干燥；s2、将冷冻的石斛倒入破碎机进行破碎；s3、取粉碎后的石斛粉，按照1g：30ml的料液比，加入磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液作为模拟胃液提取剂，调节体系ph值为2.5，充分震荡均匀，于50℃水浴提取1.5h后过滤；s4、在步骤s3所得的滤渣中添加磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，调节体系ph值为4.0，加入滤渣质量0.8％的破坏植物细胞壁的酶，于37℃振荡提取1.5h；其中，所述破坏植物细胞壁的酶为纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶与β-葡聚糖酶按质量比为1:1:1:1组成的复合酶；s5、在步骤s4所得的滤渣加入磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液作为模拟肠液提取液，调节体系ph值为8.0，充分混匀，在50℃下回流提取1.5h，提取液离心；s6、将步骤s3～s5离心后得到的上清液液合并，减压浓缩至原液体积的1/4；s7、将步骤s3～s6得到的药渣合并，40℃烘干、粉碎后过200目筛后制得石斛药渣粉。其中，所述摩擦剂为石斛药渣粉、三七粉、绿茶粉按质量比为1：0.8：1.5混合而成；所述润湿剂为甘油、山梨醇按重量比为1：2的混合物；所述纳米羟基磷灰石为粒径为20～50nm的纳米羟基磷灰石、粒径为50～80nm的纳米羟基磷灰石、粒径为80-200nm的纳米羟基磷灰石按重量比为1：2：2的混合物；所述增稠剂为卡拉胶、海藻酸钠按重量比为1：3的混合物。实施例2本实施例提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，按重量份数包括以下组分：石斛提取物2份、润湿剂15份、摩擦剂5份、山梨酸钾0.8份、增稠剂1份、十二烷基硫酸钠5份、甜味剂0.2份、纳米羟基磷灰石5份、去离子水25份。实施例3本实施例提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，按重量份数包括以下组分：石斛提取物20份、润湿剂5份、摩擦剂10份、山梨酸钾0.5份、增稠剂0.5份、十二烷基硫酸钠2份、甜味剂0.5份、纳米羟基磷灰石15份、去离子水15份。实施例4-11实施例4-11提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述石斛提取物的提取方法，步骤s3中反应条件具体如下表所示，其余与实施例1均相同。实施例12-15实施例12-15提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述石斛提取物的提取方法，步骤s1中，冷冻干燥条件如下表所示，其余与实施例1均相同。实施例温度(℃)实施例12-20实施例13-30实施例14-50实施例15-60实施例16-29实施例16-29提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述石斛提取物的提取方法，步骤s4中，反应条件具体如下表所示，其余与实施例1均相同。实施例30-35实施例30-35提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述石斛提取物的提取方法，步骤s5中，反应条件具体如下表所示，其余与实施例1均相同。实施例ph值温度(℃)时间(h)实施例307.5501.5实施例319501.5实施例328401.5实施例338601.5实施例348501实施例358502实施例36-38实施例36-38提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述摩擦剂为石斛药渣粉、三七粉、绿茶粉按下表中的质量比混合而成，具体如下表所示，其余与实施例1均相同。实施例质量比实施例361：0.5：2实施例371：1：1实施例380：1.8：1.5发明人经过大量实验发现：当所述摩擦剂为石斛药渣粉、三七粉、绿茶粉按质量比为1：0.8:1.5混合时，实施例1条件下制得的牙膏的抗菌消炎效果最佳，而改变摩擦剂的成分及质量配比均会对牙膏的抗菌消炎效果产生影响，且在本发明限定的范围内，当摩擦剂由石斛药渣粉、三七粉、绿茶粉按质量比为1：0.5～1：1～2混合时，制得的石斛牙膏均具有较好的抗菌消炎效果。实施例39-42实施例39-42提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述润湿剂为甘油、山梨醇按下表格中的重量比的混合物，具体如下表所示，其余与实施例1均相同。发明人经过大量实验发现：当所述润湿剂为甘油、山梨醇按重量比为1：2的混合物时，实施例1条件下制得的牙膏的抗菌消炎效果最佳，而改变甘油、山梨醇的重量配比均会对牙膏的抗菌消炎效果产生影响，且在本发明限定的范围内，当甘油、山梨醇按重量比为1：1～3的混合物时，制得的石斛牙膏均具有较好的抗菌消炎效果。实施例43-47实施例43-47提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述纳米羟基磷灰石为粒径为20～50nm的纳米羟基磷灰石、粒径为50～80nm的纳米羟基磷灰石、粒径为80-200nm的纳米羟基磷灰石按如下重量比的混合物，具体如下表所示，其余与实施例1均相同。实施例重量比实施例431:1:3实施例441:3:1实施例451:0:4实施例461:4:0实施例475:0:0发明人经过大量实验发现：当所述纳米羟基磷灰石为粒径为20～50nm的纳米羟基磷灰石、粒径为50～80nm的纳米羟基磷灰石、粒径为80-200nm的纳米羟基磷灰石按重量比为1：2：2时，实施例1条件下制得的牙膏的抗菌消炎效果最佳，而改变纳米羟基磷灰石不同粒径的重量配比均会对牙膏的抗菌消炎效果产生影响，且纳米羟基磷灰石为粒径为20～50nm的纳米羟基磷灰石、粒径为50～80nm的纳米羟基磷灰石、粒径为80-200nm的纳米羟基磷灰石按重量比为1：1～3：1～3的混合物时，制得的石斛牙膏均能产生较好的抗菌消炎效果。实施例48-51实施例48-51提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述增稠剂为卡拉胶、海藻酸钠按以下重量比的混合物，具体如下表所示，其余与实施例1均相同。实施例重量比实施例481:2实施例491:5实施例501:1实施例511:6发明人经过大量实验发现：当增稠剂为卡拉胶、海藻酸钠按按重量比为1：3的混合物时，实施例1条件下制得的牙膏的抗菌消炎效果最佳，而改变卡拉胶、海藻酸的重量配比均会对牙膏的抗菌消炎效果产生影响，且卡拉胶、海藻酸钠按重量比为1：2～5的混合物时均能产生较好的抗菌消炎效果。对比例1本对比例提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述石斛提取物的提取方法，步骤s3中未添加破坏植物细胞壁的酶，其余与实施例1均相同。对比例2本对比例提供一种抗菌消炎的石斛牙膏，与实施例1相比，不同之处在于，所述石斛提取物的提取方法，包括如下步骤：s1、将新鲜石斛，洗净后放入低温干燥箱中，于-40℃进行冷冻干燥；s2、将冷冻的石斛倒入破碎机进行破碎；s3、取粉碎后的石斛粉，按照1g：30ml的料液比，加入去离子水，充分震荡均匀，于50℃水浴提取1.5h后过滤；s4、在步骤s3所得的滤渣中添加磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，调节体系ph值为4.0，加入滤渣质量0.8％的破坏植物细胞壁的酶，于37℃振荡提取1.5h；其中，所述破坏植物细胞壁的酶为纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶与β-葡聚糖酶按质量比为1:1:1:1组成的复合酶；s5、在步骤s4所得的滤渣加入去离子水，充分混匀，在50℃下回流提取1.5h，提取液离心；s6、将步骤s3～s5离心后得到的上清液液合并，减压浓缩至原液体积的1/4；s7、将步骤s3～s6得到的药渣合并，40℃烘干、粉碎后过200目筛后制得石斛药渣粉。试验例1在厌氧工作站中培养ms、ss、lgg、av、fn和pg等与龋病、牙龈炎、牙周炎及口臭病相关的口腔厌氧致病菌，形成口腔厌氧菌混合菌生物膜；将按实施例1～3、对比例1～2配方量制得的牙膏用无菌水配制成质量浓度为0.5g/l悬浮液，取1ml加入生物膜孔板的小孔中，保留3min，用生理盐水轻轻洗3次(1ml/次)；继续进行生物膜的培养，每1h换液一次，即吸去体系所有溶液，再加入1ml脑心浸出液肉汤(bhi)富集培养基，分别于0，2，4，6和8h用平板活菌计数法对小孔底部的生物膜进行活菌计数。图1为实施例1～3制得的牙膏作用于生物膜后不同时间的活菌数结果图，由图中结果可知，随着时间的延长，细菌不断繁殖，导致活菌数不断增加；使用实施例1制得的牙膏作用生物膜3min后，在0和2h时，活菌数比较少，随着的时间的延长，活菌数不断增加；使用实施例2、实施例3牙膏作用生物膜3min后，在0和2h时，活菌数要高于实施例1作用后的活菌数，但随着时间的延长，实施例1～3牙膏作用生物膜后的活菌数均增加缓慢，说明本发明制得的牙膏具有长效抑菌效果；而对比例1、对比例2制得的牙膏活菌数较多、且随时间延长，活菌数迅速增加，说明与单独使用半仿生法或酶法相比，本发明通过半仿生法和生物酶结合起来提取石斛中的活性成分，提取效率更高，有利于充分发挥石斛有效成分的功效。试验例2大鼠根据体重随机分为正常组、模型组、石斛剂量组、养胃舒组，每组20只；模型组、石斛剂量组、养胃舒组，给予167μg/mlmnng饮用液(装入500ml黑色水瓶中，自由饮用)，正常组自由饮用蒸馏水，造模8周，在病理组织学检查确定造模成功后，石斛剂量组每日灌胃给予本发明制得的石斛提取物，给药量为1.34g/kg；养胃舒组每日灌胃给予养胃舒颗粒4.0g/kg；模型组给予生理盐水灌胃，正常组不予干预，给药12周后，对4组大鼠进行腹腔麻醉，取出胃组织，固定并浸泡在福尔马林中保存。参照酶联免疫吸附测定法(elisa)检测试剂盒检测小鼠血清中的胃泌素gas、白介素il-6含量。图2为实施例1、实施例4～11制得的石斛提取物对慢性萎缩性胃炎大鼠治疗12周大鼠血清胃泌素gas、白介素il-6含量，由图中结果可知，正常组、本发明实施例制得的石斛提取物剂量组、养胃舒组的gas含量均高于模型组；且正常组、本发明实施例制得的石斛提取物剂量组的il-6含量低于模型组；与实施例4～11实验组大鼠相比，经过实施例1制得的石斛提取物剂量组治疗后，大鼠血清中的胃泌素gas、白介素il-6含量于正常大鼠血清中含量接近，说明实施例1制得的石斛提取物对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果最佳，而改变石斛提取物提取方法中步骤s3中的任意条件，均会对石斛提取物的提取效率造成影响，从而影响石斛提取物对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果。图3为实施例1、实施例12～15制得的石斛提取物对慢性萎缩性胃炎大鼠治疗12周大鼠血清胃泌素gas、白介素il-6含量，由图中结果可知，正常组、本发明实施例制得的石斛提取物剂量组、养胃舒组的gas含量均高于模型组；且正常组、本发明实施例制得的石斛提取物剂量组的il-6含量低于模型组；与实施例12～15实验组大鼠相比，经过实施例1制得的石斛提取物剂量组治疗后，大鼠血清中的胃泌素gas、白介素il-6含量于正常大鼠血清中含量接近，说明实施例1制得的石斛提取物对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果最佳，且实施例13～14制得的石斛提取物对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果优于实施例12、实施例15，说明改变石斛提取方法中步骤s1冷冻干燥温度，会对石斛提取物的提取效率造成影响，从而影响石斛提取物对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果。图4为实施例14～29制得的石斛提取物对慢性萎缩性胃炎大鼠治疗12周大鼠血清胃泌素gas、白介素il-6含量，由图中结果可知，本发明实施例制得的石斛提取物剂量组均高于模型组；且本发明实施例制得的石斛提取物剂量组的il-6含量低于模型组；且实施例1制得的石斛提取物对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果优于实施例14～29，说明改变石斛提取方法中步骤s4中反应条件，会对石斛提取物的提取效率造成影响，从而影响石斛提取物对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果。图5为实施例30～35制得的石斛提取物对慢性萎缩性胃炎大鼠治疗12周大鼠血清胃泌素gas、白介素il-6含量，由图中结果可知，本发明实施例制得的石斛提取物剂量组均高于模型组；且本发明实施例制得的石斛提取物剂量组的il-6含量低于模型组；且实施例1制得的石斛提取物对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果优于实施例30～35，说明改变石斛提取方法中步骤s5模拟肠液进行提取过程中反应条件，会对石斛提取物的提取效率造成影响，从而影响石斛提取物对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果。以上所述，仅为本发明的说明实施例，并非对本发明任何形式上和实质上的限制，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，做出的若干改进和补充也应视为本发明的保护范围；凡熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明精神和范围的情况下，利用以上所揭示的技术内容做出的些许更改、修饰与演变的等同变化，均为本发明的等效实施例；同时，凡依据本发明的实质技术对上述实施例所做的任何等同变化的更改、修饰与演变，均仍属于本发明的保护范围。当前第1页12