本发明属于天然组合物技术领域，具体涉及一种改善血液微循环障碍而改善型骨质疏松症的天然组合物及其制备方法。
背景技术：
骨质疏松症(osteoporosis，op)是一种全身性的骨代谢疾病，可发生于任何年龄，但多见于绝经后女性和老年男性，主要特征为骨量低，骨组织微结构损坏，导致骨脆性增加，易发生骨折。骨质疏松性骨折的危害巨大，是老年患者致残和致死的主要原因之一。发生髋部骨折后1年之内，20％患者会死于各种并发症，约50％患者致残，生活质量明显下降。骨质疏松症及骨折的治疗和护理，需要投入大量的人力、物力和财力，给患者家庭和社会造成沉重的负担。随着人口老龄化日趋严重，预防和治疗骨质疏松，减少骨质疏松症引起骨折的发生已成为我国面临的重要健康需求。
现代医学关于骨质疏松症发病机制提出了衰老、雌激素和骨内高压等学说，这些学说均与血液微循环障碍存在一定关系。老年患者具有“多虚多瘀”的体质特点，衰老所引起的血液微循环障碍直接影响骨质疏松症患者的骨代谢，是导致骨质疏松的主要原因之一。雌激素缺乏会增加血脂浓度，导致血管内皮舒张因子(no)和血管内皮收缩因子(et)相互拮抗失调，导致微循环血管舒缩功能紊乱，出现血液微循环障碍，而雌激素缺乏是女性发生骨质疏松症的主要因素。此外，骨质疏松症患者骨内高压与血液微循环障碍也密切相关，骨小梁内微血管的激发损伤所引起的血液微循环障碍必将使骨内压升高，造成血液循环中氧、钙等营养物质不能正常进入骨内，骨细胞代谢发生异常，导致骨重建失衡而引起骨质疏松。采用活血化瘀天然药用资源可通过改善骨内微循环障碍，促进氧、钙等营养物质进入骨骼，使骨代谢恢复正常，以有效改善骨质疏松。有必要针对骨质疏松症患者从改善微循环障碍角度开发新的健康产品
目前治疗骨质疏松常用的药物主要有雌激素、双膦酸盐、地诺赛麦等骨吸收抑制剂或骨形成促进剂，虽然有一定疗效，但不良反应较大。骨质疏松症的预防与治疗是一个漫长的过程，天然药材组合物具有多成分、多靶点，配伍适中安全、协同促进增效等特点，更加切合骨质疏松症以预防为主，防治结合的防治要求，使其在防治骨质疏松症方面发挥着巨大的作用。而采用活血化瘀天然药用资源更可通过改善骨内微循环障碍，促进氧、钙等营养物质进入骨骼，使骨代谢恢复正常，对于抗骨质疏松健康产品的开发具有重要意义。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提供了一种改善血液微环境障碍而改善骨质疏松症的天然组合物及其制备方法。本发明采用天然药用资源，含多种有效成分，针对不同的靶点和信号通路协同作用，使各有效成分相互配合，可扩张血管，降低血液粘度，提高血液流动性，改善血液微循环障碍，促进钙、氧等营养物质的运输及吸收进而改善成骨细胞和破骨细胞的代谢紊乱状态，提高骨密度、骨钙和骨磷等骨矿物质含量，对治疗骨质疏松症有良好效果。
本发明第一方面提供了一种改善血液微环境障碍而改善骨质疏松症的天然组合物，组分包括：以质量百分比计，三七提取物10-20％、桃仁提取物10-20％、骨碎补提取物5-15％、红花提取物10-20％、当归提取物10-20％、玛咖提取物10-20％和甘草提取物5-15％。
上述天然组合物中，其原料药的主要功效活性如下：
三七对中枢神经系统、心血管系统、血液系统、免疫系统等方面均有较强的生理活性，能缩短凝血时间，促进血液流动，增加血流量，抗心律失常，并且具有抗高血压、抗炎、镇痛、提高免疫力、抗肿瘤和滋补强壮的作用。其含有的三七总苷能促进成骨细胞分泌igf-1，抑制其分泌il-6，从而促进成骨细胞增长，抑制破骨细胞增殖；还能抑制血小板黏附和聚集，诱导造血细胞gata-1和gata-2转录调控蛋白合成增加，增高其与上游调控区的启动子和增强子结合的活性进而调控造血细胞增殖、分化，改善微循环；促进金属硫蛋白(mt)合成，减轻组织缺氧状态，促进血管生成，改善骨组织内血液微循环障碍，促进骨组织内代谢平衡，进而发挥抗骨质疏松作用。
骨碎补中的活性成分黄酮类化合物能促进成骨细胞内alp形成，介导组织蛋白酶k在破骨细胞中的成熟和转运；抑制肿瘤坏死因子tnf-α、白细胞介素il-6水平，促进il-4分泌；并可减少血小板的聚集性,使血管扩张,血流加快,血细胞团聚减轻,具有改善血液流变性、微循环障碍的作用，可有效促进骨折愈合，防止骨质疏松。
红花中的有效成分红花黄色素能通过提高runx2、ocn、sox2等成骨分化水平，延长凝血酶原时间，拮抗血小板激活因子与血小板受体的结合，抑制中性粒细胞聚集、黏附及超氧化物的产生，并通过抑制中枢加压反射、激动h1受体、抑制肾素、血管紧张和直接扩张外周血管改善血液黏稠度，降低血压，改善骨组织供血，促进骨形成。
当归中的主要活性成分当归多糖通过作用于jak2和stat5信号转导通路促进促红细胞生成素生成，能增加外周血红细胞、白细胞、血红蛋白及骨髓有核细胞数，促进血液形成，能调节骨髓造血干细胞表面黏附分子表达，降低粘附力，抑制wnt/β-catenin信号通路的过度激活，调节骨代谢平衡，改善骨质疏松。
桃仁中的活性成分苦杏仁苷能增强纤维蛋白的溶解，抑制血清中磷酸肌酸激酶、乳酸脱氢酶的升高，降低栓塞面积，并能能扩张血管、增加器官血流量，抑制血小板聚集，抗凝血，提高纤溶蛋白酶活性，改善血液流变性并促进微循环，促进钙离子吸收进入骨骼中沉淀，促进骨骼强壮。
玛咖中的主要活性物质玛咖酰胺能刺激雌激素的生成，降低血卵泡生成激素、甲状腺素和促肾上腺激素和皮质醇水平，促进骨形成，抑制骨吸收，从而增加骨密度，有效改善骨质疏松；
甘草的主要活性成分甘草酸可促进碱性磷酸酶、雌二醇的分泌，减少骨的重吸收，促进骨钙及骨矿物形成，造成骨盐沉积的增加而拮抗骨质疏松。
优选的，所述三七提取物中三七总苷含量≥100mg/g；所述桃仁提取物中苦杏仁苷含量≥200mg/g；所述骨碎补提取物中总黄酮含量≥50mg/g；所述红花提取物中红花黄色素含量≥50mg/g；所述当归提取物中当归多糖含量≥200mg/g；所述玛咖提取物中玛咖酰胺含量≥40mg/g；所述甘草提取物中甘草酸含量≥400mg/g。
本发明第二方面提供了上述可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物的制备方法，步骤包括：以三七、桃仁、骨碎补、红花、当归、玛咖和甘草为原料，对原料分别进行提取，将提取得到的三七提取物、桃仁提取物、骨碎补提取物、红花提取物、当归提取物、玛咖提取物和甘草提取物按比例混合。
优选的，所述三七提取物的提取方法包括：取干燥三七，粉碎，与65～75％乙醇以质量体积比1:5～10的比例混合，浸润22～26h，70-90℃回流提取3～5小时，减压浓缩至浸膏，将所得浸膏干燥，即得三七提取物。
更加优选的，在上述三七提取物的提取过程中，所述干燥三七粉碎后与70％乙醇以质量体积比1:5～10的比例混合，浸润24h。
优选的，所述桃仁提取物的提取方法包括：取桃仁，粉碎，与乙醇以质量体积比1:5～10的比例混合，浸润2～4h，60-80℃回流提取4～5小时，减压浓缩至浸膏，所得浸膏干燥后即为桃仁提取物。
更加优选的，在上述桃仁提取物的提取过程中，所述桃仁粉碎后与乙醇以质量体积比1:5～10的比例混合，浸润3h。
优选的，所述骨碎补提取物的提取方法包括：取干燥的骨碎补，粉碎，与蒸馏水以质量体积比1:10～20的比例混合，80～90℃浸泡提取4～8小时，水提取液减压浓缩至浸膏，浸膏与乙醇以质量体积比1:5～8的比例混合，收集沉淀物，沉淀物进行干燥后即可得骨碎补提取物。
更加优选的，在上述骨碎补提取物的提取过程中，所述浸膏与体积百分数95％乙醇以质量体积比1:5～8的比例混合后收集沉淀物。
优选的，所述红花提取物的提取方法包括：取红花，与蒸馏水以质量体积比1:30～40的比例混合，调节ph至2～4，70-90℃回流提取2～4小时，过滤，滤液减压蒸馏浓缩至浸膏状态，浸膏与乙醇以质量体积比1:5～10的比例混合，以1800～2200r/min离心8～12min，所得沉淀物真空干燥，即得红花提取物。
更加优选的，在上述红花提取物的提取过程中，所述红花与蒸馏水混合后调节ph至3。
更加优选的，在上述红花提取物的提取过程中，所述浸膏与乙醇混合后以2000r/min离心10min。
优选的，所述当归提取物的提取方法包括：取干燥的当归适量，粉碎，与水以质量体积比1:5～10的比例混合，70-90℃回流提取3～5小时，减压浓缩，加入乙醇至醇浓度为60～70％，放置22～26h抽滤后干燥即得当归提取物。
更加优选的，在上述当归提取物的提取过程中，减压浓缩后加入体积百分数95％乙醇至醇浓度为65％，放置24h后抽滤、干燥。
优选的，所述玛咖提取物的提取方法包括：取干燥的玛咖，与乙醇以质量体积比1:5～10的比例混合，超声提取2～4小时，醇提取液45～55℃减压浓缩至浸膏，浸膏干燥即得玛咖提取物。
更加优选的，在上述玛咖提取物的提取过程中，所述醇提取液于50℃减压浓缩至浸膏。
优选的，所述甘草提取物的提取方法包括：取干燥的甘草，与蒸馏水以质量体积比1:9～11的比例混合，88～92℃回流提取3.5～4.5小时，提取液浓缩至原体积的1/4～1/6，过滤，滤液加浓盐酸调ph至2～4，静置7～9小时，过滤，滤渣用蒸馏水洗涤，滤渣干燥即得甘草提取物。
更加优选的，在上述甘草提取物的提取过程中，所述干燥的甘草与蒸馏水以质量体积比1:10的比例混合，90℃回流提取4小时，提取液浓缩至原体积的1/5，过滤，滤液加浓盐酸调ph至3，静置8小时，过滤，滤渣用适量蒸馏水洗涤两次，滤渣干燥即得甘草提取物。
本发明第三方面提供了上述可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物在制备骨质疏松症治疗药物中的应用，所述骨质疏松症治疗药物用于降低血液粘度、提高血液流动性，提高骨密度、骨矿物质含量。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供的可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物，可降低血液粘度，提高血液流动性，改善血液微循环障碍，促进钙、氧等营养物质的运输及吸收进而改善成骨细胞和破骨细胞的代谢紊乱状态，提高骨密度、骨钙和骨磷等骨矿物质含量，有效治疗骨质疏松；本发明提供的可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物，制作原料均为天然药用资源，无任何化学添加剂，安全无公害；且该天然组合物多成分多靶点协同作用，标本兼治，效果显著且无毒副作用
具体实施方式
为了便于理解本发明，下文将结合实施例对本发明作更全面、细致地描述，但本发明的保护范围并不限于以下具体的实施例。
除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解的含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。
除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
实施例1
本实施例提供了一种可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物，原料包括：以重量百分比计，三七提取物20％、桃仁提取物15％、骨碎补提取物5％、红花提取物20％、当归提取物15％、玛咖提取物15％和甘草提取物10％。
所述三七提取物中三七总皂苷含量≥100mg/g，制备方法为：
取干燥三七适量，粉碎，与70％乙醇以质量体积比1:5的比例混合，浸润24h，80℃回流提取4小时，减压浓缩至浸膏，所得浸膏经干燥箱中干燥，即得三七提取物。
所述桃仁提取物中苦杏仁苷含量≥200mg/g，制备方法为：
取桃仁适量，粉碎，与乙醇以质量体积比1:6的比例混合，浸润3h，70℃回流提取5小时，减压浓缩至浸膏，所得浸膏干燥后即为桃仁提取物。
所述骨碎补提取物中总黄酮含量≥50mg/g，制备方法为：
取干燥的骨碎补适量，粉碎，与蒸馏水以质量体积比1:15的比例混合，85℃浸泡提取6小时，水提取液减压浓缩至浸膏，浸膏与95％乙醇以质量体积比1:8的比例混合，收集沉淀物，沉淀物进行干燥后即可得骨碎补提取物。
所述红花提取物中红花黄色素含量≥50mg/g，制备方法为：
取红花适量，与蒸馏水以质量体积比1:35的比例混合，调节ph至3，80℃回流提取3小时，滤布过滤，滤液减压蒸馏浓缩至浸膏状态，浸膏与乙醇以质量体积比1:8的比例混合，以2000r/min离心10min，所得沉淀物于真空干燥箱中干燥，即得红花提取物。
所述当归提取物中当归多糖含量≥200mg/g，制备方法为：
取干燥的当归适量，粉碎，与水以质量体积比1:8的比例混合，80℃回流提取4小时，减压浓缩，加入95％乙醇至醇浓度为65％，放置一天抽滤后干燥即得当归提取物。
所述玛咖提取物中玛咖酰胺含量≥40mg/g，制备方法为：
取干燥的玛咖适量，与乙醇以质量体积比1:8的比例混合，超声提取3小时，醇提取液50℃减压浓缩至浸膏，浸膏干燥即得玛咖提取物。
所述甘草提取物含甘草酸≥400mg/g，制备方法为：
取干燥的甘草适量，与蒸馏水以质量体积比1:10的比例混合，90℃回流提取4小时，提取液浓缩至原体积的1/5，过滤，滤液加浓盐酸调ph至3，静置8小时，过滤，滤渣用适量蒸馏水洗涤两次，滤渣干燥即得甘草提取物。
将上述提取得到的三七提取物、桃仁提取物、骨碎补提取物、红花提取物、当归提取物、玛咖提取物和甘草提取物按比例混合，即得改善血液微循环障碍并预防骨质疏松症的天然组合物。
实施例2
本实施例提供了一种可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物，原料包括：以重量百分比计，三七提取物20％、桃仁提取物20％、骨碎补提取物10％、红花提取物15％、当归提取物10％、玛咖提取物20％和甘草提取物5％。其制备方法与实施例1基本一致。
实施例3
本实施例提供了一种可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物，原料包括：以重量百分比计，三七提取物15％、桃仁提取物10％、骨碎补提取物15％、红花提取物20％、当归提取物15％、玛咖提取物10％和甘草提取物15％。其制备方法与实施例1基本一致。
实施例4
本实施例提供了一种可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物，原料包括：以重量百分比计，三七提取物10％、桃仁提取物10％、骨碎补提取物10％、红花提取物15％、当归提取物20％、玛咖提取物20％和甘草提取物15％。其制备方法与实施例1基本一致。
实施例5
本实施例提供了一种可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物，原料包括：以重量百分比计，三七提取物15％、桃仁提取物20％、骨碎补提取物15％、红花提取物10％、当归提取物10％、玛咖提取物20％和甘草提取物10％。其制备方法与实施例1基本一致。
对比例1
本对比例提供了一种天然组合物，原料为：以重量份数计，三七20份、桃仁15份、骨碎补5份、红花20份、当归15份、白芍15份和川芎10份。
按上述配比称取三七、桃仁、骨碎补、红花、当归、白芍和川芎后混合配药，研磨，加入与药物质量体积比为1:5的水后煎煮两次，将两次的煎煮液合并。
对比例2
本对比例提供了一种天然组合物，原料为：以重量份数计，三七20份、酸枣仁15份、骨碎补5份、玛咖20份、甘草15份、白芍15份和龙眼肉10份。
按上述配比称取三七、酸枣仁、骨碎补、玛咖、甘草、白芍和龙眼肉后混合配药，研磨，加入与药物质量体积比为1:5的水后煎煮两次，将两次的煎煮液合并。
实施例6
本实施例对实施例1-3和对比例1、2所提供的五组天然组合物的功效进行了测评，具体过程如下：
1.分组与给药
选取雌性sd大鼠为试验对象，体重180-200g，饲养于spf级动物房，室温20-22℃，相对湿度为60％-70％，灯照周期为12h(7：00-9:00灯照，19:00-7:00黑暗)，适应性喂养1周后，随机分为各实施例组、对比例组、模型组与空白组，每组10只。各组大鼠每日按常规方法分笼喂养，各实施例组和对比例组以3g/kg·bw剂量灌胃，模型组与空白组灌胃蒸馏水。
2.模型制作
各实施例组、对比例组与模型组每日皮下注射肾上腺素0.8mg//kg·bw，2h后将大鼠置于冰水浴中游泳4min，4h后再次皮下注射盐酸肾上腺素0.8mg//kg·bw，持续4周。空白组不做处理。
3.各实施例组对血液微循环障碍大鼠血液流变性能的影响
给药结束后，取血2ml用edta·k2抗凝，静置40min后，在全自动血液流变仪上进行全血黏度(高、中、低切)、血浆粘度等血液流变学参数的检测；取血约3.6ml，用3.8％枸橼酸钠抗凝(9:1)，150g离心10min，分离出富血小板血浆(prp)，再以1500g离心10min，取上清液得到贫血小板血浆(ppp)。取prp0.3ml于比浊管内，以ppp调透光度，二磷酸腺苷(adp)作诱导剂(终浓度为2μmol/l)，用血液凝聚仪检测prp中血小板在5min内的最大聚集程度，测定血小板聚集率。采用spss16.0软件进行数据分析，结果以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析及最小显著差异法，p<0.05为差异有统计学意义。结果见表2。
表1各实施例天然组合物对大鼠血液流变性能的影响
注：a表示与模型组比较有显著差异；b表示与空白组比较有显著差异。
由表1可见，造模后，大鼠血液全血高切粘度、中切粘度、低切粘度、血浆粘度和血小板聚集率均增加，血液流动性减弱，出现血瘀症状，给予各实施例组合物后，血液流动性增加，血液微循环症状出现一定程度好转，各对比例组虽有一定效果但均弱于实施例组。
4.各实施例对大鼠骨质状况的影响
给药结束后处死大鼠，取大鼠双侧股骨小心剔除肌肉及其他组织，其中一侧股骨在双能x线骨密度仪上做骨密度扫描，测出骨密度(g/cm2)，一侧股骨测骨长，110℃烘干1小时，称股骨重，再置马弗炉内800℃灰化6小时，灰化结束，冷却称灰重，用浓硝酸提取后测骨灰钙、磷含量。采用spss18.0软件进行数据分析，结果以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析及最小显著差异法，p<0.05为差异有统计学意义。结果见表3、4。
表2各实施例对大鼠股骨骨密度及股骨骨指数的影响
注：a表示与模型组比较有显著差异；b表示与空白组比较有显著差异。
表3各实施例对大鼠股骨骨灰分、骨钙、骨磷的影响
注：a表示与模型组比较有显著差异；b表示与空白组比较有显著差异。
由表2和3可见，血液微循环障碍可造成大鼠骨密度、骨灰分、骨钙和骨磷含量下降，显示出骨质疏松症状，给予各实施例天然组合物后，可提高大鼠的骨骼质量，在一定程度上缓解骨质疏松症状。各对比例组虽有一定效果但均弱于实施例组。
由此可以看出，本发明提供的一种可改善血液微循环障碍和骨质疏松症的天然组合物可有效改善血液微循环障碍和骨质疏松症状。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。