本发明涉及治疗真菌性皮肤病的药物领域，具体为一种抑制真菌的含姜喷剂。
背景技术：
：生姜醇提物中含有6-姜酚、姜黄素等能够抑制真菌存活且一定程度上能杀死真菌的化学成分，具有多种药用价值。研究表明，生姜提取物对革兰氏阳性菌有抑制性，对沙门氏菌有强毒性，强烈抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，此外对枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、青霉、黑曲霉、黄曲霉菌、串珠镰刀菌、禾谷镰刀菌等真菌均有一定的抑制作用，姜能起到某些抗生素的作用，尤其对多种细菌抑制效果明显，还具有显著抑制皮肤真菌和杀灭阴道滴虫的功效，可抑制毛细血管通透性,消肿镇痛，对创伤愈合有明显的促进作用。体外抗皮肤癣菌效果良好，稳定性良好，对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌、絮状表皮癣菌均有抑制作用。生姜参与细胞免疫的过程，提高溶菌酶活性，改变菌类细胞膜通透性，影响细胞壁合成，水解危害菌细胞壁中的粘多肽，使其死亡或裂解，从而起到抗菌作用。芦荟对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等常见菌类的生长均有一定抑制作用，芦荟提取物具有抑菌抗炎的作用，对产朊假丝酵母、酿酒酵母、米曲霉、木霉均有抑制作用。杭白菊具有抗多种菌类如金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的强烈作用，有抗菌抗炎作用。金银花提取物对临床分离多种致病真菌具有较强的抑菌作用，对黑曲霉、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、沙门菌有抑制作用。陈皮的抑菌实验表明，12.5％陈皮提取液对红色毛癣菌、单毛状小孢子菌、絮状表皮癣菌均有抑制作用。决明子对红色发癣菌、须发癣菌、大小孢子菌、石膏样小孢子菌和地丝念珠菌等均有抑制作用。花椒提取物对11种皮肤癣菌和4种深部真菌均有一定的抑制作用和杀灭作用，如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念球菌、青霉菌，其中对红色癣菌最敏感。配方抑菌汇总表：植物名称抑制菌生姜沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、幽门螺旋菌、青霉、黑曲霉、黄曲霉菌、串珠镰刀菌、禾谷镰刀菌、红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌、絮状表皮癣菌、玫瑰毛癣菌等芦荟大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母米曲霉、木霉等杭白菊金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌等金银花黑曲霉、大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌以及临床分离的多种致病真菌陈皮总状毛菌、多籽毛菌、桔青霉、产黄青霉、黑根霉、黑曲霉、米曲霉、灰绿犁头霉、红色毛癣菌、单毛状小孢子菌、絮状表皮癣菌等决明子红色毛癣菌、须发癣菌、大小孢子菌、石膏样小孢子菌、地丝念珠菌等花椒金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、青霉菌、沙门氏菌、李斯特菌、黑曲霉、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌等抗生素的滥用是我国乃至全世界面临的严重问题，不合理的使用抗生素真正的危害在于加剧真菌的耐药性，抗生素在杀死真菌之外也起到了筛选耐药菌的作用。目前在抗真菌新药物的研发过程中，通过开发新的抗生素来解真菌耐药菌的同时，也起到了筛选耐药真菌的作用，但现在开发新抗生素的速度已经远远赶不上真菌耐药的脚步了，造成绝大多数抗菌药物不能杀死的“超级菌”悄然问世的后果。在皮肤问题的治疗中，使用抗生素不仅杀死了有害菌，也抑制了皮肤表面有益菌的繁殖，破坏了皮肤表面的稳态，使维护皮肤健康的微环境平衡被彻底打乱，皮肤疾患陷入到了治疗—复发—恶化的恶性循环当中。随着重工业的快速发展，地球环境遭到了大面积不可挽回的破环。空气和水质污染严重，不计其数的病菌附着于我们的皮肤表面，其中不乏如皮肤癣菌等真菌性皮肤病病菌，这也是近年来皮肤病发病率逐年递增的重要原因之一。因此，在追求高品质生活的当下，给皮肤即时安全的抑菌和保护是非常必要的。从天然植物中提取有效成分经过合理配制制成高效抑菌、安全温和的抑菌喷剂，在当今国内外市场上有空缺，极具发展前景。技术实现要素：下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚完整地描述，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明中所述的提取液具体制备方法如下：原料预处理：将生姜、芦荟、杭白菊、金银花、陈皮、花椒、决明子分别进行净选，将有缺陷的药材拣出；净选结束后，用流动水进行分类冲洗1小时，烘干备用。将鲜姜用研钵捣碎后，在97℃用20-25倍体积的95%乙醇提取1h，过滤后在50℃下进行浓缩，作为生姜醇提取液。将鲜芦荟放入榨汁机，以10-15体积水为提取液，用灭菌纱布过滤残渣，得到芦荟提取液。将杭白菊用研钵捣碎后，用10-15倍体积无水乙醇提取1h，过滤后在50℃下进行浓缩，作为杭白菊醇提取液。将上述金银花、陈皮、花椒、决明子研磨成粉末，用5-10倍体积的水煎煮3h，过滤药渣，得到混合药液。将生姜醇提取液、芦荟提取液、杭白菊醇提取液和混合药液按配方所述比例混合获得抗真菌喷剂原液。具体实施方案抑菌试验：本发明采用《2008年版美国临床实验室标准化委员会产孢丝状真菌药敏试验方案》：培养基的配制：土豆葡萄糖琼脂培养基(potatodextroseagar，pda)：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15~20g，水1000ml，ph值自然，称取去皮土豆，土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15~20g，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。麦片琼脂培养基：燕麦片30g，水1000ml，在60℃水浴1h，双层纱布过滤去渣。上清液补足水至1000ml，加入琼脂20g，煮沸待琼脂熔化后装瓶。121℃，20min高压蒸汽灭菌后使用。rpmi-1640液体培养基（含谷氨酰胺，不含碳酸氢盐，含有酚红作为ph值试剂），以终浓度为0.165mmol/l的mops为缓冲液，该培养基在25℃ph为7.0±0.1。皮肤癣菌在pda培养基中能产生充足的孢子，使用pda培养基作为诱导须癣毛癣菌菌丝结构的选择性生长培养基。但红色毛癣菌的分生孢子在pda中的产量非常贫乏，使用麦片琼脂培养基作为诱导红色毛癣菌菌丝结构的选择性生长培养基。将红色毛癣菌接种在麦片琼脂培养基上，置于30℃环境中生长4~5d或至孢子生成良好，须癣毛癣菌接种在pda培养基上，置于35℃环境中生长7d或至孢子生成良好，在菌落表面加入约1ml的无菌生理盐水，轻微地用移液管尖端或者无菌拭子轻刮菌落，将菌悬液吸出静置5-10min，弃去沉淀，用血细胞数器进行孢子计数，调整菌悬液浓度。菌悬液最终的浓度应为试验所需度的2倍。精确的菌悬液浓度可通过培养基菌落计数获得。红色毛癣菌用rpmi.1640培养基稀释50倍后，经0.22pm微孔滤膜过滤除菌，再用该培养基进行倍比稀释，使起始浓度为0.0256%(v/v)，末浓度为0.00005%。须癣毛癣菌用rpmi.1640培养基稀释50倍后，经0.22pm微孔滤膜过滤除菌，再用该培养基进行倍比稀释，使起始浓度为0.0256%(v/v)，末浓度为0.00005%。氟康唑浓度溶液的配制：氟康唑系自生产厂家直接购买的药物粉末，不使用药店药品或临床药剂。适量氟康唑药粉溶于定量蒸馏水中，rpmi.1640培养基稀释10倍，过滤除菌后，再用该培养基进行倍比稀释，使起始浓度为128μg/ml，末浓度为0.25μg/ml。真菌接种液的制备将受试真菌转种于麦片琼脂培养基中，35℃，活化7天。然后在菌落上滴加无菌生理盐水lml，用无菌移液管尖端轻轻探划受试菌落，制备悬液。将悬液转移至无菌试管中，静置3～5min，取上层均质液体至无菌玻璃管中，涡旋l5s，用比浊仪控制菌液浓度使其相当于0.57麦氏管的浑浊度，再以l:100的浓度稀释备用。试验方法：在一次性无菌96孔板上进行药敏试验。每排第1～l0孔加入100μl上述倍比稀释为不同浓度的抗真菌喷剂原液，再依次加入真菌接种液100μl。第11孔为阴性对照，只加200μlrpmi.1640稀释液。第l2孔为阳性对照，100μl稀释液+100μl真菌接种液。同时用氟康唑对红色毛癣菌的药敏试验作为本次实验的质量控制。微孔板置35℃培养箱中孵育24h，然后判读mic结果。每株受试菌重复3次。结果判读：结果是肉眼可见的抑制真菌生长的mic值。将每个受试孔中真菌生长情况与阳性对照相比较，进行评分。4分，生长无抑制；3分，生长轻微减少或相当于生长对照的75％；2分，生长明显减少或相当于生长对照的50％；1分，轻微生长或相当于生长对照的25％；0分，肉眼观察澄清或未见生长，对于红色毛癣菌，mic则判定为相比生长对照孔，菌的生长被抑制了80％或更多时的最低药物浓度。表1液基稀释法中质控菌株和参考菌株mic和mic范围几率菌株目的抗真菌药物mic范围（μg/ml）mic范围几率（%）孵育时间红色毛癣菌mrl666参考菌株环匹罗司0.5~297.54d红色毛癣菌atcc参考菌株氟康唑0.5~495.24d红色毛癣菌mya-4438参考菌株伏立康唑0.008~0.0696.14d须癣毛癣菌mrl1957、参考菌株环匹罗司0.5296.24d须癣毛癣菌mrl1957参考菌株灰黄霉素0.12~0.595.24d须癣毛癣菌atcc参考菌株伊曲康唑0.03~0.2597.54d须癣毛癣菌atcc参考菌株泊沙康唑0.03~0.2596.34d须癣毛癣菌mya-4439参考菌株特比萘芬0.002~0.00897.94d须癣毛癣菌mya-4439参考菌株伏立康唑0.03~0.2595.24d实例一：取生姜25份、芦荟15份、杭白菊15份、金银花10份、陈皮10份、花椒10份、决明子10份，分别进行净选，将有缺陷的药材拣出；净选结束后，用流动水进行分类冲洗1小时，烘干备用。将25份姜用研钵捣碎后，在97℃用20倍体积的95%乙醇提取1h，过滤后在50℃下进行浓缩，作为生姜醇提取液。将15份鲜芦荟放入榨汁机，以15体积水为提取液，用灭菌纱布过滤残渣，得到芦荟提取液。将15份杭白菊用研钵捣碎后，用15倍体积无水乙醇提取1h，过滤后在50℃下进行浓缩，作为杭白菊醇提取液。将上述金银花、陈皮、花椒、决明子研磨成粉末，用10倍体积的水煎煮3h，过滤药渣，得到混合药液。将生姜醇提取液、芦荟提取液、杭白菊醇提取液和混合药液按配方所述比例混合获得抗真菌喷剂原液。在一次性无菌96孔板上进行药敏试验。每排第1～l0孔加入100μl上述倍比稀释为不同浓度的抗真菌喷剂原液，再依次加入真菌接种液100μl。第11孔为阴性对照，只加200μlrpmi.1640稀释液。第l2孔为阳性对照，100μl稀释液+100μl真菌接种液。同时用氟康唑对红色毛癣菌的药敏试验作为本次实例的质量控制，微孔板置35℃培养箱中孵育24h，然后判读mic结果。每株受试菌重复3次。得到抗菌数据如下表：试验菌株抗真菌药物mic（μg/ml）mic范围（μg/ml）抑菌率(%)红色毛癣菌氟康唑3.80.5~4对照为100红色毛癣菌抗菌原液3.0-78.9须癣毛癣菌灰黄霉素0.420.12~0.5对照为100须癣毛癣菌抗菌原液0.35-83.3对比可见，所制备的含姜抑菌喷剂对常见的两种皮肤真菌有抑制效果。实例二：取生姜22份、芦荟11份、杭白菊13份、金银花5份、陈皮8份、花椒9份、决明子7份，分别进行净选，将有缺陷的药材拣出；净选结束后，用流动水进行分类冲洗1小时，烘干备用。将22份姜用研钵捣碎后，在97℃用20倍体积的95%乙醇提取1h，过滤后在50℃下进行浓缩，作为生姜醇提取液。将11份鲜芦荟放入榨汁机，以15体积水为提取液，用灭菌纱布过滤残渣，得到芦荟提取液。将13份杭白菊用研钵捣碎后，用15倍体积无水乙醇提取1h，过滤后在50℃下进行浓缩，作为杭白菊醇提取液。将上述金银花、陈皮、花椒、决明子研磨成粉末，用10倍体积的水煎煮3h，过滤药渣，得到混合药液。将生姜醇提取液、芦荟提取液、杭白菊醇提取液和混合药液按配方所述比例混合获得抗真菌喷剂原液。在一次性无菌96孔板上进行药敏试验。每排第1～l0孔加入100μl上述倍比稀释为不同浓度的抗真菌喷剂原液，再依次加入真菌接种液100μl。第11孔为阴性对照，只加200μlrpmi.1640稀释液。第l2孔为阳性对照，100μl稀释液+100μl真菌接种液。同时用氟康唑对红色毛癣菌的药敏试验作为本次实例的质量控制，微孔板置35℃培养箱中孵育24h，然后判读mic结果。每株受试菌重复3次。得到抗菌数据如下表：试验菌株抗真菌药物mic（μg/ml）mic范围（μg/ml）抑菌率(%)红色毛癣菌氟康唑3.80.5~4对照为100红色毛癣菌抗菌原液2.5-65.79须癣毛癣菌灰黄霉素0.420.12~0.5对照为100须癣毛癣菌抗菌原液0.30-71.4对比可见，所制备的含姜抑菌喷剂对常见的两种皮肤真菌有抑制效果。以上所述，仅是本发明的实施例，并非是对本发明作其他任何形式的限制，而依据本发明所提出的实施例所作的任何修改或等同变化，仍属于本发明所要求保护的范围。当前第1页12