氯雷他定用于抗金黄色葡萄球菌毒力的用途的制作方法

本发明属于医药技术领域，尤其涉及一种氯雷他定用于抗金黄色葡萄球菌毒力的用途。

背景技术：

金黄色葡萄球菌（以下简称金葡菌）可感染人体不同部位而导致多种感染性疾病，从常见的毛囊炎、痤疮、麦粒肿等皮肤疾病，到肺炎、心内膜炎、骨髓炎和其他转移性并发症等深度、致命性疾病。金葡菌入侵宿主并诱发宿主感染的过程中，能够分泌多种毒力因子如溶血素、胞外蛋白酶、杀白细胞素和酚溶解性蛋白等,从而协助其对宿主的入侵及损伤，进而诱发疾病的发生。目前随着抗菌药物的广泛使用，耐药菌尤其是耐甲氧西林金葡菌（mrsa）的出现，给临床治疗带来了困难。万古霉素和利奈唑胺是现在极少数能够治疗mrsa感染的抗菌药物，但国内外已发现越来越多对万古霉素不敏感的金葡菌(visa/hvisa)和利奈唑胺耐药株，使临床抗菌药物的选择受到严重限制。目前研究发现mrsa等金葡菌耐药株也具有较强的毒力，可使患者发生感染性休克和心内膜炎等严重感染性疾病从而引发较高的病死率。因此为减少这些菌株感染引起的患者死亡，抑制金葡菌毒力已成为近年来亟待解决细菌相关的前沿和热点问题之一。

氯雷他定(loratadine)由美国schering-plough公司于1988年在比利时首次研发上市，是一种长效非镇静三环类抗组胺药。氯雷他定作为第二代抗组胺药物的代表，为选择性外周h1受体拮抗药，和第一代抗组胺药比较，氯雷他定无胆碱能和肾上腺素拮抗作用，也没有中枢抑制和嗜睡的不良反应。氯雷他定作为一种高效的抗过敏类药物，目前主要用于治疗哮喘、过敏性鼻炎、慢性荨麻疹等各种过敏性疾病。

技术实现要素：

针对以上技术问题，本发明公开了一种氯雷他定用于抗金黄色葡萄球菌毒力的用途，该用途为氯雷他定的一种新用途，氯雷他定可明显减弱金黄色葡萄球菌的毒力。

对此，本发明采用的技术方案为：

氯雷他定用于抗金黄色葡萄球菌毒力的用途，所述氯雷他定用于抗金黄色葡萄球菌的毒力。氯雷他定作为抗组胺药，一般用于抗过敏药物用；经过研究发现，氯雷他定还具有用于抗金黄色葡萄球菌毒力的用途，所述氯雷他定可以用于抗金黄色葡萄球菌的毒力的药物中，用于抑制金黄色葡萄球菌的毒力。

作为本发明的进一步改进，所述氯雷他定的浓度为不小于25μm。

作为本发明的进一步改进，所述氯雷他定的浓度为不大于100μm。

本发明公开了氯雷他定用于制备抗金黄色葡萄球菌毒力药物中的应用。进一步的，该药物的形式可以是颗粒、片剂或针剂。

作为本发明的进一步改进，所述氯雷他定的药用浓度为不小于25μm。

作为本发明的进一步改进，所述氯雷他定的药用浓度为不大于100μm。

本发明公开了一种药物组合物在制备抗金黄色葡萄球菌毒力药物中的应用，所述药物组合物包括氯雷他定。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明的技术方案公开了氯雷他定的一个新的用途，其用于抗金黄色葡萄球菌毒力的用途，在有金黄色葡萄球菌的环境中，氯雷他定起到抑制金黄色葡萄球菌毒力的作用，可以减少因为金黄色葡萄球菌感染引起的炎症坏死等不良预后问题。

附图说明

图1是本发明实施例的不同浓度的氯雷他定减弱金黄色葡萄球菌usa300株的金黄色色素浓度的对比图；其中，lor指氯雷他定；与control组比较：**:p<0.01;***:p<0.001(student’sttest)。

图2是本发明实施例的不同浓度的氯雷他定导致金黄色葡萄球菌usa300株的溶血活性降低的结果对比图；其中，lor指氯雷他定；与control组比较：**:p<0.01;***:p<0.001(student’sttest)。

图3是本发明实施例的小鼠攻毒实验的金黄色葡萄球菌usa300株肺部感染小鼠的生存率的对比图；其中，loratadine(15mg/kgtotally)；**:p<0.01(log-ranktest)。

图4是本发明实施例的不同浓度的氯雷他定对金黄色葡萄球菌usa300株浮游菌生长的影响结果对比图。

具体实施方式

下面对本发明的较优的实施例作进一步的详细说明。

实施例1

葡萄球菌金黄色色素检测：

菌株用tsb培养基在37°c下培养48h（含或不含氯雷他定），转速250rpm/min，3ml细菌培养物离心并用0.01m磷酸盐缓冲盐水（pbs）洗涤两次。菌体沉淀pbs洗涤后，弃上清，向菌体沉淀加入300ul甲醇（100%），吹打重悬菌液，重悬之后震荡5分钟，离心（12000r/min，离心1-2分钟），然后把上清萃取液吸到干净ep管里，然后再向菌体沉淀加入300-350ul甲醇（100%），重复2次，每次均吸出萃取液，最后把这3次吸到一起去的萃取液约1ml充分混匀后，取200ul加到96孔板内（3复孔），在酶标仪上测od450值。

不同浓度的氯雷他定减弱金黄色葡萄球菌usa300株的金黄色色素的结果如图1所示。可见，氯雷他定在浓度≥25μm时，可明显抑制金黄色葡萄球菌usa300株金黄色色素的生成。

实施例2

葡萄球菌溶血活性检测：

菌株1:200接种于4mltsb培养基37℃，220rpm，培养12h（活化细菌），活化后细菌1:200接种至6mltsb，37℃，220rpm培养12h，4000rpm，4℃离心10min，取上清，经0.22μm过滤器去除上清培养液中的细菌，转移到无菌试管中备用。将菌株上清与1%的兔红细胞各500μl混合于1.5mlep管中，tritonx-100做为阳性对照(100％溶血)，1×pbs做为阴性对照，37℃孵育15min，离心15min，将100μl上清液移至新的96孔板中，并在550nm处读取吸光度。不同浓度的氯雷他定均能导致金黄色葡萄球菌usa300株的溶血活性降低，对比图如图2所示，可见，与对照control对比，添加氯雷他定，可抑制金黄色葡萄球菌usa300株的溶血活性。当氯雷他定的浓度≥25μm时，可明显抑制金黄色葡萄球菌usa300株的溶血活性。

实施例3

小鼠攻毒实验：

构建c57bl/6j小鼠金黄色葡萄球菌肺部感染模型，以评估氯雷他定对金黄色葡萄球菌的作用。方法如下：选择6-8周龄c57bl/6j小鼠（18-20g/只），每组15只。小鼠经14mg/ml戊巴比妥钠100ul腹腔注射麻醉，麻醉后1小时，用金黄色葡萄球菌usa300株(2.0x10⁹cfu)进行滴鼻，20ul菌液/只，随后实验组小鼠开始腹腔注射氯雷他定，1天2次，持续1周，总剂量达到15mg/kg。每天观察小鼠的存活情况。

有无氯雷他定对金黄色葡萄球菌usa300株肺部感染小鼠的生存率的对比图如图3所示，可见，本实施例的氯雷他定15mg/kg可明显提高金黄色葡萄球菌usa300株肺部感染小鼠的生存率。

实施例4

菌株浮游菌生长检测：

菌株在mhb培养基中37℃，220rpm/min摇菌过夜培养10-12h后，用新鲜的mhb培养基1:200稀释（含或不含氯雷他定），37℃，220rpm/min培养24h，每隔1h在酶标仪上读取od600值，得到不同浓度的氯雷他定对金黄色葡萄球菌usa300株浮游菌生长的影响结果，如图4所示，可见，氯雷他定的浓度在≤50μm时，对金黄色葡萄球菌usa300株浮游菌的生长无影响。

通过上述实验结果可见，氯雷他定具有抗金黄色葡萄球菌毒力的作用，能提高金黄色葡萄球菌usa300株肺部感染小鼠的生存率，特别在氯雷他定的浓度≥25μm时，可明显抑制金黄色葡萄球菌usa300株金黄色色素的生成。

以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。