一种防血袋离心下坠折叠的脐血分离装置的制作方法

本技术应用于脐血造血干细胞离心、浓缩。该产品作为离心隔板可以提高制备效率，降低对脐血细胞活率的影响，提高脐血制备质量，为血液制备所遇共性问题提供了一种新的解决方法。

背景技术：

使用采血袋制备血液成分，已在我国逐渐普及。脐血作为造血干细胞来源，其中大部分为红细胞。建立脐血库时，为减少冻存体积，需要通过离心去掉大量的红细胞而只保存富含造血干细胞的有核细胞。目前常采用将血袋置于离心机配套的离心杯内进行离心浓缩，但往往出现离心后血袋皱叠的现象。血袋在离心过程中由于血袋与离心杯内壁之间存在空隙，容易下坠和折叠，进而在血袋上部折叠处滞留大量红细胞和其他有形成分，导致达不到预期的分离效果，最终影响产品质量，造成收集脐血有核细胞数过低，达不到应用标准。rubinstein等提出采用三联血袋梯度离心法，即hes对脐带血红细胞沉降后，采用三联血袋在不同离心力作用下，去除多余的红细胞和血浆，浓缩获得白细胞。目前该方法因其实用性和有效性，已在世界范围内广泛应用于脐带血造血干细胞库建设。值得注意的是，在实际工作中存在因血袋与离心杯中存在空隙导致离心后血袋折叠、下坠的现象。郭瑞祥等则提出将海绵泡沫块填塞于血袋与离心杯内壁中作为支撑，降低离心后袋壁挂血现象。方静致等曾介绍采用气包作为支撑。但因气包在实际工作中容易受离心压力而破裂，且操作繁琐，方静致等又提出改进为塑料双联气包夹持血袋，解决离心时血袋下坠和折叠问题。代秀桃等认为采用气包填空隙，无法取得理想的离心效果，进而提出采用水包替代气包来维持平衡离心。我们在实际工作中发现，采用海绵泡沫块无法起到血袋的支撑作用，导致脐带血有核细胞回收率不理想。对于大体积脐血，采用塑料双联袋夹持或者水包放入离心杯，会存在挤压现象，导致离心后血浆、白膜层、红细胞3层分界不明显，进而影响有核细胞的收集。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题是目前常采用将血袋置于离心机配套的离心杯内进行离心浓缩，但往往出现离心后血袋皱叠的现象。血袋在离心过程中由于血袋与离心杯内壁之间存在空隙，容易下坠和折叠，进而在血袋上部折叠处滞留大量红细胞和其他有形成分，导致达不到预期的分离效果，最终影响产品质量，造成收集脐血有核细胞数过低，达不到应用标准。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术手段：

一种防血袋离心下坠折叠的脐血分离装置，包括脐血分离装置本体；其特征在于：所述的脐血分离装置本体为珍珠棉泡沫板、两联血袋，所述的两联血袋分别为大血袋和小血袋，大血袋和小血袋之间设有连接管，所述的珍珠棉泡沫板设置在大血袋的中上部，所述的珍珠泡沫板上设有增强摩擦结构。

作为优选，本发明更进一步的技术方案是：

所述的珍珠棉泡沫板设有上部支撑板和下部支撑板，上部支撑板和下部支撑板之间设有夹固空间。

所述的珍珠棉泡沫板为长方形，珍珠泡沫板的长度为15cm，珍珠棉泡沫的板高度为11cm。

所述的珍珠棉泡沫板设置在大血袋的中上部，位置低于大血袋与连接管的连接部2-3cm。

所述的增强摩擦结构为球形凸起的珍珠颗粒。

所述的一种防血袋离心下坠折叠的脐血分离装置使用方法，其特征在于：

步骤1：放置珍珠泡沫板，将珍珠棉泡沫板放置于两联血袋之间，大血袋穿过珍珠棉泡沫板一侧或夹固空间内，珍珠棉泡沫板放置在大血袋上部2-3cm处；

步骤2：珍珠泡沫板起到离心隔板的作用，两联血袋、珍珠泡沫板放置在离心适配器中，将需要进行压浆一侧的血袋靠近珍珠泡沫板放置，大血袋贴有标签一面与珍珠泡沫板紧密接触；

步骤3：小血袋放置，小血袋放置在大血袋上方，小血袋的标签面压住血袋上部2-3cm的部分；

步骤4：取出两联血袋，离心后应缓慢取出离心适配器，拽住血袋连接管，将离心下沉的血袋缓慢拉出，进而可使分层效果明显清晰。

本发明材料相对于海绵泡沫块有一定的支撑硬度，在离心过程中不会下坠折叠，保证细胞分层效果。本发明材料具有较强的弹性及防震效果，常用于各种运输保护，避免在离心机制动过程中产生的震动引起细胞分层浑浊。本发明材料具有良好的吸附性，若血袋发生破损，可及时将血液吸附，避免血液飞溅污染。

早期的脐血分离操作方法均为开放式，步骤较为繁琐，容易造成污染。针对此问题，rubinstein等提出采用三联血袋梯度离心法，即hes对脐血红细胞沉降后，采用三联血袋在不同离心力作用下，去除多余的红细胞和血清，浓缩获得白细胞。目前该方法因其实用性和有效性，已在世界范围内广泛应用于脐血干细胞库建设。

值得注意的是，在实际工作中，因血袋与离心杯中存在空隙导致离心后血袋折叠、下坠的现象已成为共性问题。郭瑞祥则提出将海绵泡沫块填塞于血袋与离心杯内壁中作为支撑，降低离心后袋壁挂血现象。方静致曾介绍采用气包作为支撑。但因气包在实际工作中容易由于离心压力破裂，且操作繁琐，方静致等又提出改进为塑料双联气包夹持血袋，解决离心时血袋下坠和折叠问题。代秀桃认为采用气包填空隙，无法取得理想的离心效果，其提出采用水包替代气包维持平衡离心。我们在实际工作中发现采用海绵泡沫块无法起到血袋的支撑作用，导致脐血有核细胞回收率不理想。对于大体积脐血，采用塑料双联袋夹持或者水包放入离心杯，会存在挤压现象，导致离心后血浆、白膜层、红细胞三层分界不明显，进而影响有核细胞的收集。反复论证后，我们提出采用本发明作为血袋支撑，有以下几点优势：（1）本发明材料相对于海绵泡沫块有一定的支撑硬度，在离心过程中不会下坠折叠，不影响细胞分层效果。（2）本发明材料具有较强的弹性及防震效果，常用于各种运输保护，避免在离心机制动过程中产生的震动引起细胞分层浑浊。（3）本发明材料具有良好的吸附性，若血袋发生破损，可及时将血液吸附，避免血液飞溅污染。

脐血中含有大量造血干细胞，目前在治疗血液疾病、自身免疫性疾病等多种危及生命的疾病中发挥重大的潜能。脐血移植的成功率高度依赖输注的脐血总有核细胞（tnc）的数量或者患者每公斤体重获得的cd34+细胞的数量。因此，脐血tnc回收率、红细胞回收率及cd34+细胞数成为脐血库进行过程控制的要素。本实验采用本发明后，如图2结果显示，血袋表面平整，血袋未下坠折叠。细胞分层较为清晰，可清楚看见血浆、白细胞、红细胞分层，同时tnc平均回收率由（82.13±7.73）%增至（84.27±5.96）%，rbc平均回收率由（38.8±20.87）%降至（32.49±14.23）%，cd34+细胞数由（3.05±2.51）*106增至（3.86±2.51）*106。在脐血质量影响因素的研究中，yangh等提出从采集到处理完成的小时数对脐血有核细胞的活率有显著影响。采用本发明，单次离心血量由6份增至12份，日均制备量由（16.6±6.89）份增至（21.1±8.26）份，而单份制备时间则由（18.22±11.46）min降至（13.46±5.86）min，大大提高了制备效率，同时降低了对脐血有核细胞活率的影响。

为进一步确定新方法对大体积样本的影响，分别筛选采用两种不同方法制备大于100ml的脐血样本，分析对比发现采用本发明后tnc回收率及rbc回收率均显著提高（p＜0.05），但cd34+细胞数无差异（p＞0.05）。临床认为复温后的脐血含有大量被破坏的红细胞，脐血移植时会出现不同程度的溶血反应。采用本发明后cd34+细胞数虽未有明显改善，但显著降低了冻存脐血中含红细胞的数量，一定程度可降低脐血移植时溶血反应等不良反应。

因此，采用本发明作为离心隔板可以提高制备效率，降低对脐血细胞活率的影响，提高脐血制备质量，为血液制备所遇共性问题提供了一种新的解决方法。

附图说明

图1为本发明的珍珠棉泡沫板的结构示意图。

图2为本发明的两联血袋的结构示意图。

图3为本发明的离心适配器的结构示意图。

图4为本发明的珍珠棉泡沫板的另一种结构示意图。

附图标记说明：1－珍珠棉泡沫板；2－夹固空间；3－小血袋；4－连接管；5－两联血袋；6－离心适配器；7－大血袋；8-球形凸起的珍珠颗粒；9-大血袋上部2-3cm处。

具体实施方式

下面结合实施例，进一步说明本发明。

具体实施例1：

参见图1、图2可知，本发明一种防血袋离心下坠折叠的脐血分离装置，包括脐血分离装置本体；其特征在于：所述的脐血分离装置本体为珍珠棉泡沫板、两联血袋，所述的两联血袋分别为大血袋和小血袋，大血袋和小血袋之间设有连接管，所述的珍珠棉泡沫板设置在大血袋的中上部，所述的珍珠泡沫板上设有增强摩擦结构，珍珠棉泡沫板设有上部支撑板和下部支撑板，上部支撑板和下部支撑板之间设有夹固空间，珍珠棉泡沫板为长方形，珍珠泡沫板的长度为15cm，珍珠棉泡沫的板高度为11cm，珍珠棉泡沫板设置在大血袋的中上部，位置低于大血袋与连接管的连接部2-3cm，增强摩擦结构为球形凸起的珍珠颗粒。

具体实施例2：

一种防血袋离心下坠折叠的脐血分离装置使用方法，其特征在于：

步骤1：放置珍珠泡沫板，将珍珠棉泡沫板放置于两联血袋之间，大血袋穿过珍珠棉泡沫板一侧或夹固空间内，珍珠棉泡沫板放置在大血袋上部2-3cm处；

步骤2：珍珠泡沫板起到离心隔板的作用，两联血袋、珍珠泡沫板放置在离心适配器中，将需要进行压浆一侧的血袋靠近珍珠泡沫板放置，大血袋贴有标签一面与珍珠泡沫板紧密接触；

步骤3：小血袋放置，小血袋放置在大血袋上方，小血袋的标签面压住血袋上部2-3cm的部分；

步骤4：取出两联血袋，离心后应缓慢取出离心适配器，拽住血袋连接管，将离心下沉的血袋缓慢拉出，进而可使分层效果明显清晰。

具体实施例3：

参见图1、图2可知，将珍珠棉泡沫板1放置于两联袋之间，将需要进行压浆一侧的血袋靠近离心隔板10放置，血袋贴有标签一面与泡沫棉紧密接触，增大摩擦力，防止血袋下滑。并将血袋上部2cm左右绕过泡沫板并用另一个血袋压住，如图2所示。离心后应缓慢取出离心适配器11，拽住血袋连接管8，将离心下沉的血袋缓慢拉出，进而可使分层效果明显清晰。泡沫珍珠棉作为血袋支撑，有以下几点优势：1）泡沫珍珠棉取材方便，不需进行其他制作，仅需剪裁至合适尺度即可；2）泡沫珍珠棉相对于海绵泡沫块有一定的支撑硬度，在离心过程中不会下坠折叠，不影响细胞分层效果；3）泡沫珍珠棉具有较强的弹性及防震效果，常用于各种运输保护，避免在离心机制动过程中产生的震动引起细胞分层浑浊；4）泡沫珍珠棉具有良好的吸附性，若血袋发生破损，可及时将血液吸附，避免血液飞溅污染。

2018年7月-9月共进行1474例脐血，其中737例采用珍珠棉泡沫板1作为支撑，进行三步离心分离浓缩脐血有核细胞，计算有核细胞回收率及红细胞回收率，并与传统方法进行对比分析。结果：采用设计方式放置采血袋进行离心后血袋表面平整，血袋未下坠折叠，细胞分层较为清晰。相较传统方法，日均制备量由16.6±6.89份增至21.1±8.26份，而单份制备时间则由（18.22±11.46）min降至（13.46±5.86）min，差异有统计学意义（p＜0.05）。有核细胞回收率达到（84.27±5.96）%，红细胞回收率（32.49±14.23）%，差异有统计学意义（p＜0.01）。筛选大于100ml的大体积样本，平均tnc回收率达（83.06±5.71）%，rbc平均回收率为（23.68±8.06）%，质量显著提升（p＜0.05），但cd34+细胞数无显著提高（p＞0.05）。

因此，采用珍珠泡沫棉作为离心隔板可以提高制备效率，降低对脐血细胞活率的影响，提高脐血制备质量，为血液制备所遇共性问题提供了一种新的解决方法。

由于以上所述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护不限于此，任何本技术领域的技术人员所能想到本技术方案技术特征的等同的变化或替代，都涵盖在本发明的保护范围之内。