本发明涉及抗-tau抗体和o-glcnacase(“oga”)抑制剂的组合以及使用所述组合治疗以tau介导的神经变性为特征的生理病症(本文还称为“tau病变”(tauopathies))如阿尔茨海默病(ad)、进行性核上麻痹(“psp”)和皮质基底节综合症(“cbs”)的方法。ad、psp和cbs是病理学特征为异常τ聚集的破坏性神经变性疾病，仅仅ad在全世界就影响数百万人。神经变性疾病如ad、psp和cbs中tau聚集的神经解剖学进展表明，tau原纤维聚集沿着神经元网络传播，导致微管不稳定和最终神经元功能局部受损。鉴于目前市场上批准的药物仅给患者提供暂时的、症状性的益处，对于治疗tau病变如ad、psp和cbs存在显著未满足的需要。tau是促进微管组装和稳定性的轴突微管结合蛋白。tau聚集的密度和神经解剖学定位与ad、psp和cbs神经病学症状和疾病进展强烈相关。例如，已经发现患有ad的个体的脑中nft的数量与疾病的严重度密切相关，表明tau在神经元功能障碍和神经变性中起关键作用(nelson等人,jneuropatholexpneurol.,71(5),362-381(2012))。tau病变还已经显示与psp中的疾病持续时间相关；具有更具侵袭性的疾病过程的病例比具有较慢进展的病例具有更高的tau负荷(williams等人,brain,130,1566-76(2007))。而且，动物模型研究已经显示，tau聚集物扩散穿过神经元突触连接并螯合单体(天然或非聚集的)tau，诱导tau聚集物形成。神经变性疾病如ad中tau聚集和积聚的神经解剖学进展表明tau原纤维聚集沿着神经元网络传播，最终导致微管不稳定和神经元功能局部受损。这表明，tau聚集和积聚即使是少量减少也可能导致神经元内神经原纤维缠结(neurofibrillarytangles,nft)长期显著减少，从而提供治疗益处，特别是在ad的治疗中如此。另外，最近的研究(yuzwa等人,natchembiol,4(8),483-490(2008))支持了oga抑制剂限制tau过磷酸化和神经元内聚集成病理性tau如nft、用于治疗ad和相关tau病变的治疗潜力。具体而言，oga抑制剂thiamet-g已经与jnpl3tau小鼠模型中的运动神经元损失减缓(yuzwa等人,natchembiol,8,393-399(2012))和与tg4510tau小鼠模型中的tau病变和营养不良性神经突减少(graham等人,neuropharmacology,79,307-313(2014))相关。特异性结合tau聚集物并减少tau聚集物形成的传播的抗体(本文称为“抗-tau抗体”)与oga抑制剂的组合被期望提供tau病变如ad和psp的治疗。这类组合还优选比单独的任一种分子更有效。例如，与单独使用的每种分子相比，用这类组合进行的治疗可允许使用较低剂量的任一种或两种分子，潜在地导致较少的副作用(或一种或其它疗法更短的持续时间)，同时保持功效。据信，本文提供的新组合将限制tau过磷酸化和减少tau聚集成病理性tau及其传播，用于治疗tau病变。因此，本发明提供了治疗认知或神经变性疾病的方法，该方法包括给需要该治疗的患者施用有效量的抗-tau抗体与有效量的oga抑制剂的组合。本发明进一步提供了治疗临床或临床前ad的方法，该方法包括给需要该治疗的患者施用有效量的抗tau抗体与有效量的oga抑制剂的组合。本发明还提供了治疗前驱期ad(有时也称为轻度认知缺陷或mci)、轻度ad、中度ad和/或重度ad的方法，该方法包括给需要该治疗的患者施用有效量的抗-tau抗体与有效量的oga抑制剂的组合。本发明还提供了在诊断患有临床前ad或临床ad的患者中减缓认知减退的方法，该方法包括给需要该治疗的患者施用有效量的抗tau抗体与有效量的oga抑制剂的组合。本发明进一步提供了在诊断患有临床前ad或临床ad的患者中减缓功能衰退的方法，该方法包括给需要该治疗的患者施用有效量的抗tau抗体与有效量的oga抑制剂的组合。本发明进一步提供了在脑中具有低水平nft的无症状患者中预防记忆丧失或认知减退的方法，该方法包括施用有效量的抗tau抗体与有效量的oga抑制剂的组合。在另一个实施方案中，本发明提供了治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的无症状患者的方法，该方法包括施用有效量的抗tau抗体与有效量的oga抑制剂的组合。本发明的另一个实施方案提供了阻止轻度认知缺陷进展为ad的方法，该方法包括给需要该治疗的患者施用有效量的抗tau抗体与有效量的oga抑制剂的组合。本发明的实施方案还提供了抗tau抗体，其用于与oga抑制剂同时、分开或依次组合，用于在疗法中使用。本发明进一步提供了与oga抑制剂与一种或多种可药用载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物组合的包含抗tau抗体与一种或多种可药用载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。此外，本发明提供了包含抗tau抗体和oga抑制剂的药物。本发明还提供了包含如下的药盒：包含抗tau抗体与一种或多种可药用载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物，和包含oga抑制剂与一种或多种可药用载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。如本文使用的“药盒”包括在单个包装中的各组分的单独容器，其中一种组分是抗tau抗体和另一种组分是oga抑制剂。“药盒”还可以包括在单独包装中的各组分的单独容器和作为组合施用各组分的说明书，其中一种组分是抗tau抗体和另一种组分是oga抑制剂。本发明进一步提供了抗tau抗体在制备药物中的用途，所述药物用于治疗ad、轻度ad、前驱期ad或用于预防轻度认知缺陷向ad的进展，其中所述药物将与oga抑制剂同时、分开或依次施用。在本发明的一个实施方案中，抗tau抗体包含重链(hc)和轻链(lc)，其中hc包含重链可变区(hcvr)和lc包含轻链可变区(lcvr)，所述hcvr包含互补决定区(cdrs)hcdr1、hcdr2和hcdr3，且所述lcvr包含cdrslcdr1、lcdr2和lcdr3。根据本发明的抗tau抗体的特定实施方案，lcdr1的氨基酸序列由seqidno.3给出，lcdr2的氨基酸序列由seqidno.4给出，lcdr3的氨基酸序列由seqidno.5给出，hcdr1的氨基酸序列由seqidno.6给出，hcdr2的氨基酸序列由seqidno.7给出，hcdr3的氨基酸序列由seqidno.8给出。在一个实施方案中，本发明提供了结合人tau的单克隆抗体，包含lcvr和hcvr，其中lcvr的氨基酸序列由seqidno.9给出，且hcvr的氨基酸序列由seqidno.10给出。在进一步的实施方案中，本发明提供了结合人tau的单克隆抗体，包含轻链(lc)和重链(hc)，其中lc的氨基酸序列由seqidno.1给出，且hc的氨基酸序列由seqidno.2给出。本发明的抗tau抗体可以使用已知方法制备和纯化。例如，编码hc(例如由seqidno.2给出的氨基酸序列)的cdna序列、例如由seqidno.11给出的cdna序列和编码lc(例如由seqidno.1给出的氨基酸序列)的cdna序列、例如由seqidno.12给出的cdna序列可以被克隆并工程化到gs(谷氨酰胺合成酶)表达载体中。然后，可以将工程化的免疫球蛋白表达载体稳定转染到cho细胞中。如本领域技术人员将理解的那样，抗体的哺乳动物表达将导致糖基化，通常在fc区中的高度保守n-糖基化位点处。可以检验稳定的克隆用于特异性结合tau聚集物的抗体的表达。可以将阳性克隆扩增到无血清培养基中用于在生物反应器中进行抗体生产。可以通过常规技术纯化其中已经分泌了抗体的培养基。例如，可以方便地将培养基应用于已经用相容的缓冲液如磷酸盐缓冲盐水平衡的proteina或gsepharoseff柱。将柱子进行冲洗以除去非特异性结合成分。洗脱、例如通过ph梯度洗脱结合的抗体，检测、例如通过sds-page检测抗体级分，然后汇集。抗体可以采用常规技术浓缩和/或除菌过滤。可溶性聚集物和多聚物可以通过常规技术、包括尺寸排阻、疏水相互作用、离子交换或羟基磷灰石色谱法来有效地除去。产物可以立即冷冻，例如在-70℃立即冷冻，或者可以进行冻干。本发明的抗tau抗体结合人tau。在一个实施方案中，本发明的抗tau抗体结合人tau的构象表位。在特定实施方案中，人tau的构象表位包括人tau的氨基酸残基7-9和312-322，其中人tau的氨基酸序列由seqidno.13给出。如本文使用的“抗体”是包含通过二硫键相互连接的两条重链(hc)和两条轻链(lc)的免疫球蛋白分子。每条lc和hc的氨基末端部分包括经由包含在其中的互补决定区(cdrs)负责抗原识别的可变区。cdrs中穿插有更保守的称为构架区的区域。将氨基酸分配至本发明的抗体的lcvr和hcvr区域内的cdr结构域是基于熟知的编号惯例，例如如下：kabat等人,ann.nyacad.sci.190:382-93(1971)；kabat等人,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest，第5版，u.s.departmentofhealthandhumanservices,nihpublicationno.91-3242(1991)；和northnumberingconvention(north等人,anewclusteringofantibodycdrloopconformations,journalofmolecularbiology,406:228-256(2011))。在本发明的特定实施方案中，抗体和抗体片段或编码它们的核酸可以以分离的形式提供。如本文使用的术语“分离”指在自然界中未发现的蛋白质、肽或核酸，其不含或基本上不含在细胞环境中发现的其它大分子物质。如本文使用的“基本上不含”指感兴趣的蛋白质、肽或核酸包含超过80％(以摩尔计)的存在的大分子物质，优选超过90％，更优选超过95％。在表达和分泌本发明的抗体和抗体片段后，澄清培养基以除去细胞，澄清的培养基使用多种常用技术中的任一种进行纯化。纯化的抗体和抗体片段可以根据配制蛋白质和抗体用于胃肠道外施用、特别是用于皮下、鞘内或静脉内施用的众所周知的方法配制成药物组合物。抗体和抗体片段可以与适当的可药用赋形剂一起冻干，然后在临用前用水基稀释剂重构。或者，抗体和抗体片段可以配制在水性溶液中并在使用之前储存。在任一种情况下，抗体和抗体片段的药物组合物的储存形式和注射形式将含有一种或多种可药用赋形剂，所述赋形剂是除所述抗体和抗体片段之外的成分。一种成分是否是可药用的取决于其对药物组合物的安全性和有效性的影响，或者对药物组合物的安全性、纯度和效力的影响。如果一种成分被判断为对安全性或有效性(或对安全性、纯度或效力)具有足够不利的影响使得其不能用于施用于人的组合物中，则其对于用于抗体和抗体片段的药物组合物中不是药用的或药学上可接受的。本发明的新组合和方法包括oga抑制剂，其为脑渗透剂。在本发明的新组合和方法的一些实施方案中，oga抑制剂包括式i化合物或其可药用盐：在一些实施方案中，本发明的新组合和方法的oga抑制剂是式ia化合物或其可药用盐：构成本发明的新组合和方法的oga抑制剂的实施方案的式i的某些构型进一步包括：及其可药用盐。其中哌啶环上的甲基和氧取代基为顺式或反式构型的式i的5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基化合物或其可药用盐包括在本发明的新组合的oga抑制剂的范围内。本发明的新组合还包括本发明的5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基化合物的所有单个对映异构体和非对映异构体以及对映异构体混合物、包括外消旋物。本文提供的新组合和方法的5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基化合物的绝对构型包括：n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺，及其可药用盐；和n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺是特别优选的。本发明的5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基oga抑制剂化合物或其盐可以通过本领域普通技术人员已知的多种方法制备。本领域普通技术人员知道，所述的每种途径的具体合成步骤可以以不同方式组合或者与来自不同方案的步骤结合，以制备本发明的化合物或其盐。以下各步骤的产物可以通过本领域熟知的常规方法回收，包括萃取、蒸发、沉淀、色谱法、过滤、研磨和结晶。在以下方案中，除非另有说明，否则所有取代基如之前所定义。试剂和起始材料是本领域普通技术人员容易获得的。提供以下制备例和实施例以进一步阐述本发明，而不限制本发明的范围。此外，本领域普通技术人员理解，式ia、ib、ic和id化合物可以通过采用具有相应立体化学构型的起始原料(其可以由本领域技术人员制备)来制备。例如，以下制备例采用具有最终对应于式ia的构型的起始材料。制备例1n-(4-氟-5-甲酰基-噻唑-2-基)氨甲酸叔丁酯的合成于室温将氟化铯(227g,1480mmol)加入到n-(4-氯-5-甲酰基-噻唑-2-基)氨甲酸叔丁酯(38.8g,148mmol；n-(4-氯-5-甲酰基噻唑-2-基)氨甲酸叔丁酯的制备参见例如n.masuda,等人,bioorgmedchem,12,6171-6182(2004))在dmso(776ml)中的溶液中。将反应混合物在145℃加热块中搅拌48小时，内温为133℃，然后将混合物在冰水浴中冷却。向混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液(500ml)、盐水(500ml)和乙酸乙酯(500ml)。将混合物于室温搅拌10分钟，然后用乙酸乙酯(500ml)洗涤过滤通过硅藻土。将滤液转移到分液漏斗，分离各层，然后用乙酸乙酯(1l)萃取水层。将合并的有机层用盐水(1l)洗涤，然后用乙酸乙酯(300ml)萃取盐水层。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到残余物。使残余物用乙酸乙酯在二氯甲烷中的5％溶液(1.5l)洗脱通过硅胶垫(330g)，浓缩滤液，得到残余物(24.2g)。将残余物(32.7g合并的批次，133mmol)溶于异丙醇(303ml)中，过滤，然后通过sfc(超临界流体色谱法)纯化，所述sfc采用ic柱(纤维素多糖衍生物：三(3,5-二氯苯基氨甲酸酯，30×250mm，5u)，用10％ipa(无添加剂)以180ml/分钟洗脱，3ml进样量。将含产物的级分浓缩，得到标题化合物(16.1g.msm/z247.0(m+h)。制备例2n-(4-氟-5-甲酰基-噻唑-2-基)乙酰胺的合成(方法a)在夹套式容器中，于室温将溴化锌(91.9g,408mmol)一次性加入到n-(4-氟-5-甲酰基-噻唑-2-基)氨甲酸叔丁酯(33.5g,136mmol)和二氯甲烷(503ml)的混合物中。将反应混合物在37℃的内温下搅拌过夜，然后将夹套温度设置为-10℃，历经15分钟滴加四氢呋喃(111ml)，同时保持内温低于6℃。然后将夹套温度设置为-30℃，历经5分钟滴加吡啶(110ml,1360mmol)，同时保持内温低于5℃。将夹套温度设置为0℃，历经5分钟滴加乙酸酐(116ml,1220mmol)。将反应混合物在内温37℃下搅拌过夜，然后冷却至室温，用四氢呋喃(500ml)洗脱穿过短硅藻土垫。将滤液转移到烧瓶中，将混合物浓缩得到残余物，将残余物从甲苯(50ml)中浓缩。向残余物中加入柠檬酸一水合物(57.2g,272mmol)在水(400ml)和2-甲基四氢呋喃(400ml)中的溶液，将混合物于40℃搅拌5分钟，然后用2-甲基四氢呋喃(100ml)洗脱通过短硅藻土垫。将滤液转移到分液漏斗，分离各层。用2-甲基四氢呋喃(2×250ml)萃取水层，用水(500ml)稀释合并的有机层。经5分钟向混合物中分批加入固体碳酸氢钠，搅拌直至气体逸出停止。将混合物转移到分液漏斗，分离各层，然后用2-甲基四氢呋喃(200ml和100ml)萃取水层。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其用2-甲基四氢呋喃(100ml)稀释，使混合物用2-甲基四氢呋喃(2.5l)洗脱通过短硅胶垫(250g)。浓缩滤液，得到残余物，将其混悬在二氯甲烷和庚烷的1:1混合物(202ml)中。于室温搅拌混合物30分钟，然后过滤。将过滤的固体在真空下于40℃干燥2小时，得到标题化合物(18.0g,70％)。msm/z189.0(m+h)。n-(4-氟-5-甲酰基-噻唑-2-基)乙酰胺的供选合成(方法b)将二氯甲烷(1325g,15.6mol)加入到2-氨基-4-氯噻唑-5-甲醛(100g,0.61mol)和吡啶(194.6g,2.46mol)中，冷却至0至5℃。滴加乙酸酐(188.4g,1.85mol)，同时保持温度为0至5℃。加入完成后，调节温度至20-25℃，搅拌41小时。在减压下浓缩，接着加入35％的hcl水溶液(200ml)和水(1.5l)，同时保持温度低于40℃。冷却至20-25℃，搅拌18小时。过滤混合物，用水洗涤所收集的固体。在60-65℃下干燥所述固体24小时，得到n-(4-氯-5-甲酰基噻唑-2-基)乙酰胺(75g,0.4mol)。在惰性气氛下，将环丁砜(1000ml)加入到n-(4-氯-5-甲酰基噻唑-2-基)乙酰胺(50g,0.244mol，直接上述制备)、四甲基氯化铵(107.1g,0.977mol)和氟化铯(370.6g,2.44mmol)中。加热至130℃，搅拌23小时。hplc分析显示转化率为75％，原位产率为45％的标题化合物。n-(4-氟-5-甲酰基-噻唑-2-基)乙酰胺的供选合成(方法c)将2-丙醇(150ml)加入到四甲基氟化铵四水合物(10.2g,109.0mmol)中，在真空下浓缩混合物至2-3体积以除去水，同时内温保持在70℃。加入2-丙醇(200ml)，在真空下浓缩混合物至2-3体积。再重复两次。加入dmf(200ml)，在真空下浓缩至2-3体积。加入thf(200ml)，浓缩至2-3体积。再重复两次。加入n-(4-氯-5-甲酰基噻唑-2-基)乙酰胺(1.22g,5.96mmol，上述步骤b中制备)和dmf(12ml)。加热至110℃，搅拌12小时。将反应混合物冷却至25℃。加入2-甲基四氢呋喃(40ml)和水(40ml)。分离各层，用2-甲基四氢呋喃(40ml)萃取水层。分离各层，用水(20ml)洗涤合并的有机层。分离各层，浓缩有机层。加入乙酸乙酯(20ml)和水(5ml)。分离各层，浓缩有机层以除去溶剂。加入乙酸乙酯(2ml)和庚烷(2ml)并过滤。将过滤的固体在真空下于55℃干燥18小时，得到标题化合物，为与n-(4-氯-5-甲酰基噻唑-2-基)乙酰胺的93％混合物。制备例3(2s,4s)-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成向烧瓶中加入(2s)-2-甲基-4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯(50g,234.44mmol)和四氢呋喃(500ml)。将混合物在氮气气氛下于-65℃冷却，经45分钟滴加三(仲丁基)硼氢化锂(304.77ml,304.77mmol；在四氢呋喃中的1m溶液)，同时保持内温低于-60℃。于室温搅拌反应混合物1小时，然后冷却至-30℃。向反应混合物中加入水(25.34ml)和四氢呋喃(100.16ml)的混合物，同时保持内温低于-20℃。经1小时滴加过氧化氢(118.88ml,1.17mol,30wt/wt％)在水(126.70ml)中的水溶液，同时保持内温低于10℃。向混合物中加入氯化氢水溶液(46.89ml，234.44mmol，5m)和甲基叔丁基醚(1.00l)，使混合物升温至室温。分离各层，将有机相于室温用焦亚硫酸钠(222.84g,1.17mol)在水(500ml)中的溶液搅拌10分钟。分离各层，将有机相经硫酸镁干燥并浓缩。通过快速色谱法(0-50％的甲基叔丁基醚/异己烷，硅胶)纯化残余物，将含产物的级分合并和浓缩，得到标题化合物(40.4g,78％)。es/ms(m/e)238(m+na)。(2s,4s)-4-羟基-2-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯的供选合成于20℃，向含有去离子水(460l)和磷酸二氢钾(6.5kg,0.41当量)的玻璃衬里反应器中加入dmso(27.4kg,1.0vol)和d-(+)-葡萄糖一水合物(28.9kg,1.25当量)。调节内温至30℃，通过加入氢氧化钠水溶液(8％,15l,0.28当量)调节反应物的ph至6.9。向反应器中装入(2s)-2-甲基-4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯(24.9kg,1.0当量(99.1％ee))，将混合物于30℃搅拌15分钟。经由开口将酮还原酶(kred-130,250g,1％w/w)、葡萄糖脱氢酶(gdh-101,250g,1％w/w)和nadp钠盐(63g,0.25％w/w)直接加入反应混合物中。将混合物保持在30℃的温度和经由添加8％nahco3水溶液使ph为7.0±0.2。搅拌16.5小时后(转化率99.5％)，向反应物中加入celitetm(12.5kg,50w/w％)和甲苯(125l,5vol)。于30℃搅拌30分钟后，历经1小时经由在线gaf-过滤器(4sock)将混合物转移到另一个2000l反应器中。使混合物在无搅拌下静置30分钟，分离各层，用甲苯(2×125l)反萃取水层。过滤合并的有机层(在线gaf-过滤器)，于25℃用氯化钠水溶液(25％，125l,5vol)洗涤甲苯混合物。将得到的甲苯溶液共沸干燥(部分真空，内温＜60℃)至0.10w/w％水，冷却至20℃。在正氮气压力下，经由过滤筒将混合物从所述反应器过滤出到干净的筒中。然后，将反应混合物从所述筒转移到500l玻璃衬里容器中，在真空下浓缩(＜60℃)至目标残余体积56l(2.25vol)。于40℃加入正庚烷(169kg,10vol)，将混合物用25g(2s,4s)-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯接种。将得到的浓浆液用另外的正庚烷(25l,1vol)稀释，经4小时冷却至16℃。经离心用正庚烷(每次旋转25l；需要4次旋转)洗涤分离产物，于30℃在盘式干燥器中干燥11小时后，得到20.3kg(81％；>99.9％ee)。es/ms(m/e)238(m+na)。制备例4(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成于室温将3-(氯甲基)-5-甲基-1,2,4-噁二唑(43.5g,301mmol)加入到(2s,4s)-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(29.5g,137mmol)在乙腈(590ml)中的溶液中。在冰水浴中搅拌反应混合物，经10分钟分批加入叔丁醇钠(54.3g,548mmol)，同时保持温度低于10℃。在5℃的内温下在冰水浴中搅拌反应混合物9小时，然后缓慢升至室温，并搅拌过夜。将反应混合物在冰水浴中冷却，经5分钟加入饱和氯化铵水溶液(200ml)，同时在加入期间保持内温低于10℃。然后将混合物用水(100ml)稀释，升温至室温。用甲基叔丁基醚(2×300ml)萃取混合物，用盐水(300ml)洗涤合并的有机层。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物。使残余物用甲基叔丁基醚(1l)洗脱快速穿过硅胶垫(300g)，浓缩滤液，得到标题化合物(46.5g,109％)。msm/z334.0(m+na)。(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的供选合成于0℃在氮气下，经5分钟向(2s,4s)-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25g,1.16mmol)和3-(氯甲基)-5-甲基-1,2,4-噁二唑(0.308g,2.32mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(3ml)中的溶液中分批加入叔丁醇钠(0.35g,3.5mmol)。将反应混合物于室温搅拌10分钟，然后于40℃搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温，然后用水(10ml)淬灭。分离各层，用甲基叔丁基醚(2×10ml)萃取水相。将合并的有机萃取物用氯化锂水溶液(5％)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，在减压下浓缩，得到呈褐色油状物的标题化合物(0.49g,0.7mmol，产率81％，纯度60％)。msm/z334.0(m+na)。制备例55-甲基-3-[[(2s,4s)-2-甲基-4-哌啶基]氧基甲基]-1,2,4-噁二唑盐酸盐的合成将含有(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3基)甲氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.03g,12.9mmol)的烧瓶浸入冰水浴中。经5分钟，在搅拌下向烧瓶中滴加氯化氢在1,4-二噁烷中的4m溶液(25.9ml,104mmol)，在加入期间保持内温低于20℃。于室温搅拌反应混合物1小时，然后浓缩，得到标题化合物(3.56g,基于通过1hnmr测量的83％纯度计产率92％)。msm/z212.0(m+h)。5-甲基-3-[[(2s,4s)-2-甲基-4-哌啶基]氧基甲基]-1,2,4-噁二唑盐酸盐的供选合成将甲醇(50ml)加入到(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(12.9g,0.041mol)中。将混合物冷却至0℃。向冷却的混合物中滴加氯化氢在甲醇中的4m溶液(80ml)，同时保持内温低于20℃。然后，于室温搅拌反应混合物18小时。然后浓缩混合物以除去溶剂。加入丙酮(10ml)，搅拌混合物20分钟。加入四氢呋喃(40ml)，搅拌混合物3小时。在氮气下过滤收集固体，用四氢呋喃洗涤过滤的固体饼。然后，于45℃在真空下干燥过滤的固体2小时，得到90％纯度的标题化合物。使用丙酮重结晶可以提高标题化合物的纯度至95％。制备例65-甲基-3-[[(2s,4s)-2-甲基-4-哌啶基]氧基甲基]-1,2,4-噁二唑的合成在氮气下，向(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.49g,1.6mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入三氟乙酸(1.8ml,23mmol)。于室温搅拌混合物3小时。在减压下浓缩混合物，得到黄色油状物。将残余物溶于甲醇(5ml)中，倾倒在阳离子交换柱上，用甲醇(2×10ml)洗脱，然后用氨在甲醇中的2m溶液(10ml)洗脱。在减压下浓缩滤液，得到标题化合物(0.3g,1.4mmol,91％)。msm/z212.0(m+h)。在本发明的新组合和方法的其它实施方案中，oga抑制剂为式x化合物或其可药用盐：另外，本发明提供了式xa化合物或其可药用盐：构成本发明的新组合和方法的oga抑制剂的实施方案的式x的某些构型进一步包括：及其可药用盐。其中哌啶环上的甲基和氧取代基为顺式或反式构型的式x的5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基化合物或其可药用盐包括在本发明的新组合的oga抑制剂的范围内。本发明的新组合还包括本发明的5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基化合物的所有单个对映异构体和非对映异构体以及对映异构体混合物、包括外消旋物。本文提供的新组合和方法的5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基化合物的绝对构型包括：n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺及其可药用盐，包括游离碱，包括结晶形式。本发明的新组合和方法的5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基化合物或其盐可以通过本领域普通技术人员已知的多种方法制备，其中一些方法在以下方案、制备例和实施例中阐述。本领域普通技术人员知道，所述的每种途径的具体合成步骤可以以不同方式组合或者与来自不同方案的步骤结合，以制备本发明的化合物或其盐。以下各步骤的产物可以通过本领域熟知的常规方法回收，包括萃取、蒸发、沉淀、色谱法、过滤、研磨和结晶。在以下方案中，除非另有说明，否则所有取代基如之前所定义。试剂和起始材料是本领域普通技术人员容易获得的。提供以下方案、制备例和实施例以进一步阐述本发明，而不限制本发明的范围。此外，本领域普通技术人员理解，式xa、xb、xc和xd化合物可以通过采用具有相应立体化学构型的起始原料(其可以由本领域技术人员制备)来制备。例如，以下制备例采用具有最终对应于式xa的构型的起始材料。制备例72-[[(2s,4s)-1-叔丁氧基羰基-2-甲基-4-哌啶基]氧基]乙酸的合成于室温将2-氯-1-吗琳代基-乙酮(59.4g,363mmol)加入到(2s,4s)-4-羟基-2-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(52.1g,242mmol)在乙腈(521ml)中的溶液中。在冰水浴中搅拌反应混合物，经10分钟分批加入叔丁醇钠(48.0g,484mmol)，同时保持内温低于15℃。于室温搅拌反应混合物2小时，然后经5分钟加入到用冰水浴冷却的含有饱和氯化铵水溶液(250ml)和水(250ml)的另一个烧瓶中，在加入期间保持内温低于15℃。使混合物升至室温，用甲基叔丁基醚(2×500ml)萃取，然后用盐水(300ml)洗涤合并的有机层。接着，将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到残余物，将其于室温与2-丙醇(414ml)和2m氢氧化钠水溶液(303ml，605mmol)混合。将反应混合物在47℃加热块中搅拌过夜，内温为45℃。将反应混合物冷却至室温，浓缩以除去2-丙醇，然后用水(50ml)稀释混合物。用甲基叔丁基醚(250ml)萃取混合物，然后在冰水浴中冷却水层，用乙酸(55.6ml,968mmol)酸化。用乙酸乙酯(4×250ml)萃取水性混合物，然后将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其从甲苯(3×100ml)中浓缩，得到标题化合物(79.8g)。msm/z272.0(m-h)。制备例8(2s,4s)-4-[2-(2-乙酰基肼基)-2-氧代-乙氧基]-2-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成将四氢呋喃(798ml)加入到含有2-[[(2s,4s)-1-叔丁氧基羰基-2-甲基-4-哌啶基]氧基]乙酸(79.8g,224mmol，76.6质量％)的烧瓶中，在冰水浴中搅拌混合物，内温为5℃。向混合物中一次性加入1,1'-羰基二咪唑(43.5g,268mmol)，于室温搅拌反应混合物2小时。加入另一份1,1'-羰基二咪唑(7.25g,44.7mmol)，于室温搅拌反应混合物30分钟。将反应混合物浸入冰水浴中，一次性加入乙酰肼(21.5g,291mmol)，然后于室温搅拌反应混合物过夜。在冰水浴中搅拌反应混合物，经2分钟加入饱和碳酸氢钠水溶液(500ml)，同时保持内温低于15℃。将混合物用水(300ml)稀释，然后浓缩以除去四氢呋喃。用2-甲基四氢呋喃(4×500ml)萃取水性混合物。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其与乙酸乙酯(200ml)和庚烷(200ml)混合。于室温搅拌混合物30分钟，然后用庚烷(200ml)稀释，于室温强力搅拌混合物另外30分钟，然后过滤。将过滤的固体于40℃在真空下干燥2小时，得到标题化合物的第一批物料(71.5g)。再次过滤滤液，于室温在氮气流下干燥过滤的固体15分钟，得到标题化合物的第二批产物(1.98g)。将第一批产物(71.1g,216mmol，纯度未知)和第二批产物(1.97g,5.98mmol，纯度未知)的大部分与叔丁基甲基醚(731ml)混合，在45℃加热块中搅拌混合物30分钟，内温为40℃，然后经1小时在搅拌下冷却至室温，过滤混合物。于室温在氮气流下将过滤的固体真空干燥30分钟，得到标题化合物(53.7g)。msm/z352.0(m+na)。制备例9(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成于室温在氮气下，向(2s,4s)-4-羟基-2-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g,2mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中的溶液中分批加入叔丁醇钠(0.92g,9.28mmol)。于室温搅拌得到的反应混合物40分钟。将反应混合物冷却至0℃，加入2-(氯甲基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑(0.416g,3.14mmol)。于室温搅拌得到的溶液过夜。在真空中浓缩反应混合物，用水稀释残余物。用3份乙酸乙酯萃取混合物。将合并的有机萃取物经硫酸镁干燥，过滤，在减压下浓缩，得到粗油状物。将残余物溶于二甲亚砜(至总体积2ml)中，通过制备型-hplc(phenomenexgemini-nx10micron30*100mmc-18)(ch3cn&用氢氧化铵调节至ph9的含10mm碳酸氢铵的水，经7min从15％至100％ch3cn，50ml/min)(1次进样)(204nm)纯化，得到标题化合物(0.028g,0.089mmol,4％)。msm/z312.0(m+h)。(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的供选合成向烧瓶中加入(2s,4s)-4-[2-(2-乙酰基肼基)-2-氧代-乙氧基]-2-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(53.7g,163mmol)和乙腈(537ml)，于室温搅拌浆液。在冰浴冷却下，经5分钟向混合物中一次性加入n,n-二异丙基乙胺(114ml,652mmol)和分三次加入对甲苯磺酰氯(77.7g,408mmol)。于室温搅拌反应混合物过夜，然后在冰水浴中冷却，经10分钟滴加n',n'-二甲基乙烷-1,2-二胺(21.8g,245mmol)，同时保持内温低于15℃。于室温搅拌反应混合物30分钟，然后于室温用饱和柠檬酸水溶液(50ml)、乙酸乙酯(500ml)和水(450ml)稀释。分离各层，用饱和柠檬酸水溶液(50ml)和水(450ml)的混合物洗涤。用饱和碳酸氢钠水溶液(500ml)洗涤有机层，然后用乙酸乙酯(500ml)萃取水层。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，使其用乙酸乙酯在庚烷中的25％溶液洗脱(2×500ml级分)穿过短硅胶垫(400g)，然后用乙酸乙酯洗脱(5×500ml级分)。浓缩含产物的级分，得到标题化合物(53.3g)。msm/z312.2(m+h)。制备例105-甲基-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-哌啶基]氧基甲基]-1,3,4-噁二唑-2,2,2-三氟乙酸的合成在氮气下，向(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.0275g,0.0883mmol)在二氯甲烷(3ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.035ml,0.45mmol)。于室温搅拌混合物过夜。在减压下浓缩混合物，得到标题化合物(0.04g,84％)。msm/z212.0(m+h)。制备例112-甲基-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-哌啶基]氧基甲基]-1,3,4-噁二唑的合成于室温向烧瓶中加入(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(52.9g,170mmol)和二氯甲烷(265ml)。在冰水浴中在内温5℃下搅拌反应混合物，经5分钟滴加三氟乙酸(3500mmol,265ml)，同时保持内温低于10℃。于室温搅拌反应混合物15分钟，然后浓缩，得到残余物，将其用水(300ml)和甲基叔丁基醚(300ml)稀释。分离各层，在冰水浴中搅拌水层，用50％氢氧化钠水溶液(20ml)碱化，在加入期间保持内温低于10℃。用二氯甲烷(4×300ml)萃取混合物，将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物(30.5g)。msm/z212.2(m+h)。应当理解，在本文中作为本发明的新组合和方法的一部分提供的oga抑制剂化合物的单个异构体、对映异构体和非对映异构体可以由本领域普通技术人员在本发明化合物合成中的任意方便的点、通过诸如选择性结晶技术或手性色谱法的方法进行分离或拆分(参见例如j.jacques,等人,"enantiomers,racemates,andresolutions",johnwileyandsons,inc.,1981,和e.l.eliel和s.h.wilen,"stereochemistryoforganiccompounds",wiley-interscience,1994)。本发明的oga抑制剂化合物的可药用盐可以例如通过在本领域熟知的标准条件下、在适宜的溶剂中使本发明的化合物的适当游离碱与适当的可药用酸反应来形成。这类盐的形成是本领域熟知的和公认的。参见例如gould,p.l.,“saltselectionforbasicdrugs,”internationaljournalofpharmaceutics,33:201-217(1986)；bastin,r.j.,等人“saltselectionandoptimizationproceduresforpharmaceuticalnewchemicalentities,”organicprocessresearchanddevelopment,4:427-435(2000)；和berge,s.m.,等人,“pharmaceuticalsalts,”journalofpharmaceuticalsciences,66:1-19,(1977)。实施例以下实施例旨在说明而不是限制本发明。工程化抗-tau抗体的表达本发明的工程化抗tau抗体可以基本上如下表达和纯化。使用含有seqidno.12的dna序列(编码seqidno.1的lc氨基酸序列)和seqidno.11的dna序列(编码seqidno.2的hc氨基酸序列)的谷氨酰胺合成酶(gs)表达载体通过电穿孔转染中国仓鼠卵巢细胞系(cho)。该表达载体编码svearly(simianvirus40e)启动子和gs的基因。gs的表达允许生物化学合成谷氨酰胺，谷氨酰胺是cho细胞所需的氨基酸。转染后，用50μml-甲硫氨酸磺基肟(msx)对细胞进行整体选择。使用msx对gs的抑制提高选择的严格性。针对表达gs的内源性水平的cho野生型细胞，可以选择其中表达载体cdna整合到宿主细胞基因组的转录活性区中的细胞。将转染物以低密度铺板，以允许稳定表达细胞的近克隆生长(close-to-clonaloutgrowth)。筛选主孔用于抗体表达，然后在无血清混悬培养基中放大规模用于生产。将其中已经分泌了抗体的澄清培养基应用于已经用相容缓冲液如磷酸盐缓冲盐水(ph7.4)平衡的proteina亲和柱。用1mnacl洗涤柱以除去非特异性结合的组分。将结合的抗tau抗体例如用ph(约)3.5的柠檬酸钠洗脱，用1mtris缓冲液中和级分。检测抗tau抗体级分，例如通过sds-page或分析型尺寸排阻进行检测，然后合并。可溶性聚集物和多聚物可以通过常用技术、包括尺寸排阻、疏水相互作用、离子交换或羟基磷灰石色谱法来有效地除去。使用常用技术浓缩和/或除菌过滤本发明的抗tau抗体。这些色谱步骤后的抗tau抗体的纯度大于95％。本发明的抗tau抗体可以立即冷冻于-70℃或在4℃下储存数月。抗tau抗体的结合动力学和亲和性将采用2000仪器(于25℃用hbs-ep+运行缓冲液(gehealthcare,10mmhepesph7.4+150mmnacl+3mmedta+0.05％表面活性剂p20)事先准备)测量的表面等离振子共振(spr)分析用于测量示例的抗tau抗体(具有两条seqidno.2的hcs和两条seqidno.1的lcs)与人单体(例如天然或非聚集物)tau和人tau聚集物两者(均具有如seqidno.13中所示的氨基酸序列)的结合。除非另有说明，否则所有试剂和材料都来自ab(upsala,瑞典)。使用在所有四个流动池(fc)上的含固定蛋白质a的cm5芯片(采用标准nhs-edc胺偶联产生)来应用捕获方法。通过稀释到运行缓冲液中制备了0.5μg/ml的抗体样品。通过稀释到运行缓冲液中将单体tau和原纤维tau制备成2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、15.63、7.82、3.91、1.95和0(空白)nm的浓度。每个分析循环由如下组成：(1)在分开的流动池(fc2、fc3和fc4)上捕获抗体样品；(2)以50μl/分钟的速率在各个fc上注入250μl(300秒)单体tau或tau原纤维聚集物；(3)返回缓冲液流20分钟以监测解离期；(4)注入25μl(30秒)甘氨酸ph1.5来再生芯片表面；(5)注入50μl(60秒)hbs-ep+对芯片表面进行平衡。将结合至tau聚集物的数据采用标准双参考进行加工，并采用biacore2000evaluation4.1版软件拟合至1:1结合模型，以确定结合速率(kon,m-1s-1单位)、解离速率(koff,s-1单位)和rmax(ru单位)。由kd＝koff/kon关系计算了平衡解离常数(kd)，以摩尔单位表示。由于快速的结合和解离速率，不能通过如上所述的spr准确测定与单体tau结合的数据。因此，通过采用稳态结合拟合模型由抗原浓度对响应单位的曲线获得与单体tau结合的kd。所得结合数据提供在表1中。表1：与人单体和聚集tau两者的spr结合数据*kd结果被视为相对值，因为结果未针对亲和力的影响标准化。表1中提供的结果证实，示例的抗tau抗体对tau聚集物确实具有显著的结合亲和力，而对单体tau不具有可测量的结合，使得可以通过biacore分析准确测定亲和力值(由于快速的结合和解离速率)。使用酶联免疫吸附测定法(elisa)测定示例的抗tau抗体(具有两条seqidno.2的hcs和两条seqidno.1的lcs)与来自ad脑匀浆的聚集物tau原纤维的相对结合亲和力。由ad患者的脑的约80g皮质制备ad脑匀浆。简言之，以约10ml/1g(组织)将缓冲液(tbs/1mmpmsf/1x蛋白酶抑制剂混合物(roche,p/n.11697498001)和磷酸酶抑制剂(thermofischer,p/n.78428))加入到ad脑组织中。使用手持式kinematicapolytron以速度6-7使组织匀浆化。然后，使用parrbomb(parrinstrument,p/n.4653)以1500psi氮气使组织进一步匀浆化30分钟。将匀浆于4℃以28,000g(j14beckman转子)旋转30分钟。收集上清液，合并，在sepharose400superflow的4cm高保护柱上运行以除去较大碎片，然后以每小时50-60ml的流速在25mlmc1-affigel10柱上运行以纯化结合mc1的tau原纤维。为了使纯化回收最大化，历经18-20小时将上清液于4℃循环通过mc-1柱。除去保护柱，用至少40柱体积的tbs冲洗mc1柱。然后，用2柱体积的3mkscn洗脱结合的tau聚集物，以约1ml级分收集。通过微量滴定板bradford测定检查各洗脱级分中的蛋白质浓度。将包含阳性蛋白质水平的级分合并，于4℃采用centricon(milliporeultracel-30k)浓缩至约2ml，使用slide-a-lyzer透析盒(10kmwco3-12ml,pierce)针对1升tbs透析过夜。采用da-9捕获抗体和cp27检测抗体、通过夹心elisa测量由ad脑匀浆纯化的tau原纤维内的tau浓度。以对应于0.7μg/ml总tau的浓度将pbs中的纯化tau原纤维(50μl)涂布在96孔板(coastar,p/n.3690)的孔上。将板于4℃孵育过夜，然后用150μlpbst(含0.05％tween-20的pbs)洗涤三次，于室温在100μlbb3(immunochemistrytechnology,p/n.643)中封闭至少1小时(通常2小时)。在封闭后，从各孔除去封闭缓冲液。将示例的抗tau抗体(具有两条seqidno.2的hcs和两条seqidno.1的lcs)在0.25％酪蛋白缓冲液中稀释至1000nm储备液，然后以两倍稀释系列稀释23次。将50μl储备液和系列稀释抗体加至分开的孔中，于室温孵育2小时，然后用200μl/孔pbst洗涤所述板4次。加入50μl抗人igg-hrp抗体(以1:4000稀释到0.25％酪蛋白缓冲液中)，于室温孵育1小时，然后用200μl/孔pbst洗涤所述板4次。加入50μltmb/h2o2，于室温孵育约10分钟。通过加入50μl终止液(2nh2so4)终止反应，在450nm测量比色信号。将数据输入prism6(graphpad)程序，使用非线性回归曲线拟合和s型剂量响应产生ec50值。结果显示在表2中。表2.与纯化的adtau原纤维结合的ec50比较所测定的抗体ec50(pm)示例的抗-taumab6.8如表2中所反映，本发明的示例的tau单克隆抗体证实了对纯化tau原纤维的显著亲和力(如通过ec50测量)。活体外靶向参与(targetengagement)研究通过福尔马林固定石蜡包埋(ffpe)脑切片的免疫组织化学染色来测定示例的抗tau抗体(具有两条seqidno.2的hcs和两条seqidno.1的lcs)与源自人脑的聚集tau的结合，所述切片获自：“正常”个体(显示出最小的tau聚集)；ad患者(显示出严重的tau聚集和nft形成病理)；pd患者(显示出严重的tau聚集)。还对源自不具有人tau的“对照”野生型小鼠的脑切片进行染色，以确定背景非特异性染色水平。将ffpe切片脱蜡和再水化。此后，对切片进行抗原修复(采用labvisionpt模块系统，thermoscientific)，其包括将切片于100℃在柠檬酸缓冲液(thermoscientific,p/n.ta-250-pm1x)中加热20分钟，然后将切片在dh2o中冷却。然后，使切片暴露于以下7个孵育步骤(室温)：(1)在0.03％h2o2中10分钟；(2)在稀释于pbst中的正常山羊血清(vectorlabs.,p/n.s-1000)的1:20稀释液中30分钟；(3)在示例的抗tau抗体(在与切片孵育之前，标准化至1mg/ml，然后稀释于pbst中至1:4000的稀释液)中60分钟；(4)在浓度为1.1μg/mlpbst的兔抗人igg4(对抗示例的抗体的fc区产生)中30分钟；(5)在稀释于pbst中的生物素化山羊抗兔igg(vectorlabs.,p/n.ba-1000)的1:200稀释液中30分钟；(6)在抗生物素蛋白-生物素复合物溶液(vectorlabs.,p/n.pk-7100)中30分钟；(7)在3,3′-二氨基联苯胺(vectorlabs.,p/n.sk-4105)中5分钟。在以上7个步骤的各步骤之间用pbst洗涤切片。在上述7个孵育步骤后，用苏木精复染切片，脱水，盖上盖玻片。对于小鼠“对照”组织切片，如下修改上述试验设计：在孵育步骤(3)中使用示例的抗tau抗体的1:8000稀释液(与1:4000稀释液相对)；将孵育步骤(4)和(5)替换为在生物素化山羊抗兔igg(vectorlabs.,p/n.ba-3000)在pbst中的1:200稀释液中单个30分钟。按照基本如上所述的方法，进行了示例的抗tau抗体与源自人脑的tau的结合的分析。结果提供在表3中。表3.与ffpead脑切片中的聚集tau结合的半定量分析表3提供的结果反映：与对照样品相比，示例的抗tau抗体在海马脑切片中显示出更高水平的对来自ad和pd患者的聚集tau的染色。进一步，由于ad和pd的特征是基因编码tau的不同剪接变体，这些结果支持如下结论：示例的抗tau抗体特异性结合包含ad和pd两者的tau聚集物所共同的人tau的氨基酸残基7-9和312-322(基于seqidno.13的示例的人tau编号残基)的构象表位。tau聚集物传播的体内中和已知来自约5月龄p301s小鼠的匀浆脑干制备物当注射到正常10周龄雌性p301s小鼠时诱导天然非聚集tau的聚集，证实tau聚集物的传播样效应。与上述基本相同，制备来自4.5至5月龄p301s小鼠的脑干组织的匀浆制备物。给正常10周龄雌性p301s小鼠的海马左半球注射5μl匀浆脑制备物和如下之一：7.5μg示例的抗tau抗体(具有两条seqidno.2的hcc和两条seqidno.1的lcc)(n＝12)或7.5μg对照人igg4抗体(n＝11)。注射之后4周，处死小鼠，收集左半球和右半球，石蜡包埋，将6μm连续切片封固在载玻片上。将含有前卤点(a-p＝-2.30)的载玻片脱蜡，使包埋的组织再水合，通过在柠檬酸缓冲液中加热载玻片至100℃达20分钟来进行抗原修复。将载玻片在dh2o中冷却，根据以下步骤于室温孵育：(a)在(0.03％)h2o2中10分钟；(b)在正常山羊血清的1:20稀释液中30分钟；(c)在pg-5抗体(稀释于pbst中)(pg-5抗体获自dr.peterdavies的实验室,alberteinsteincollegeofmedicineofyeshivauniversity；pg-5抗体特异性结合磷酸化时的tau的残基409处的丝氨酸，残基编号基于seqidno:13的示例的人tau)的1:8000稀释液60分钟；(d)在生物素化山羊抗-小鼠igg抗体(稀释于pbst中)的1:200稀释液中30分钟；(e)在抗生物素蛋白-生物素复合物溶液中30分钟；和(f)在3,3′-二氨基联苯胺中5分钟。在各步骤之间使用pbst进行洗涤。在3,3′-二氨基联苯胺中孵育5分钟后，用苏木精复染切片，然后再水合，盖上盖玻片。以20x放大倍率通过scanscopeatslidescanner(aperio)测量染色信号。使用imagescope软件(v.11.1.2.780,aperio)的正像素算法对pg-5免疫反应性进行定量并表示为百分比。结果提供在表4中。表4.左海马和右海马中各自的平均％pg-5免疫反应性表4提供的结果证明：与对照igg4抗体相比，示例的抗tau抗体降低了左海马和右海马二者中的tau聚集水平。如所示那样，与对照igg4抗体相比，示例的抗tau抗体分别使左海马中的tau聚集减少60.5％以上和使右海马中的tau聚集减少66.5％以上。这些结果证实，示例的抗tau抗体具有对抗tau聚集传播的中和活性。5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基oga抑制剂实施例1n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺的合成于室温将n-(4-氟-5-甲酰基-噻唑-2-基)乙酰胺(28.3g,150mmol)加入到在乙酸乙酯(707ml)中的5-甲基-3-[[(2s,4s)-2-甲基-4-哌啶基]氧基甲基]-1,2,4-噁二唑盐酸盐(48.7g,185mmol,94％纯度)中。于室温搅拌反应混合物，经1分钟滴加n,n-二异丙基乙胺(34.1ml,195mmol)，然后一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠(98.5g,451mmol)。在31℃加热块中搅拌反应混合物过夜，内温为30℃，然后在冰水浴中冷却至内温为5℃。经15分钟向混合物中加入2m盐酸水溶液(226ml)，同时保持内温低于10℃。向混合物中加入水(250ml)，于室温搅拌混合物5分钟。分离各层，用2m盐酸水溶液(28ml)在水(50ml)中的混合物萃取有机层。在冰水浴中搅拌第一个水层，经10分钟滴加50％氢氧化钠水溶液(25.7ml)，同时保持内温低于10℃。将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)稀释，然后于室温搅拌10分钟，之后用乙酸乙酯(3×400ml)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物。用2-甲基四氢呋喃(200ml)稀释来自盐酸水溶液萃取的第二个水层，使混合物通过短硅藻土垫。将滤液转移到分液漏斗，分离各层。在冰水浴中搅拌水层，经5分钟滴加50％氢氧化钠水溶液(3.15ml)，同时保持内温低于10℃。用饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)稀释混合物，然后于室温搅拌5分钟，之后用乙酸乙酯(3×40ml)和异丙醇在乙酸乙酯中的10％溶液(100ml)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其与来自处理的第一部分的残余物合并。使合并的残余物用乙酸乙酯(3.5l)洗脱通过硅胶垫(350g)，浓缩滤液，得到残余物(45.8g)。通过快速色谱法用乙酸乙酯在庚烷中的50-100％溶液洗脱纯化残余物(47.5g合并的批次，123.9mmol)。将含产物的级分浓缩至残余物，将残余物混悬于甲基叔丁基醚和庚烷(448ml)的1:1混合物中。在46℃加热块中搅拌混合物30分钟，内温为45℃，然后在搅拌下经2小时冷却至室温。过滤混合物，将固体用甲基叔丁基醚和庚烷的1:1混合物(30ml)洗涤。将过滤的固体于40℃在真空下干燥过夜，得到标题化合物(28.5g)。msm/z384.0(m+h)；[α]d20＝+33.4°(c＝0.26,甲醇)。n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺的供选合成在氮气下，向n-(4-氟-5-甲酰基-噻唑-2-基)乙酰胺(0.05g,0.28mmol)和5-甲基-3-[[(2s,4s)-2-甲基-4-哌啶基]氧基甲基]-1,2,4-噁二唑(0.04g,0.19mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(0.1ml,0.57mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.12g,0.57mmol)。于室温搅拌反应混合物12小时。将反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)中。分离各层，用二氯甲烷(2×10ml)萃取水相。将合并的有机萃取物经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到橙色油状物。将残余物加入甲醇中(至总体积9.8ml)，过滤，通过制备型-hplc(phenomenexgemini-nx10micron50*150mmc-18)(ch3cn&含10mm碳酸氢铵的水，用氢氧化铵调节至ph9，经10分钟从15％至100％ch3cn，110ml/min)(1次进样)(271/204nm)纯化，得到标题化合物(0.02g,0.05mmol，28％)。msm/z384.2(m+h)。实施例1a结晶n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺于46℃将粗的n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺(29.9g)混悬于448ml甲基叔丁基醚在庚烷中的50％溶液中30分钟。搅拌混合物，经2小时冷却至19℃，然后过滤，接着用30ml甲基叔丁基醚在庚烷中的50％溶液洗涤，得到标题化合物(28.5g,产率95％)。实施例1a的x射线粉末衍射(xrpd)在装配有cuka源和vantec检测器的brukerd4endeavorx射线粉末衍射仪上获得结晶固体的xrpd图，所述检测器在35kv和50ma下操作。样品在2θ为4至40°之间扫描，2θ的步长为0.0087°，扫描速率为0.5秒/步，发散狭缝为0.6mm，固定的抗散射5.28mm，检测器狭缝9.5mm。将干燥粉末装在石英样品持器上，用载玻片获得光滑表面。在晶体学领域熟知的是，对于任意给定的晶型，衍射峰的相对强度可能由于由诸如晶体形态学和习性的因素导致的择优取向而变化。当存在择优取向的影响时，峰强度改变，但是多晶型物的特征峰位置不变。(参见例如theu.s.pharmacopeia38-nationalformulary35第941章characterizationofcrystallineandpartiallycrystallinesolidsbyx-raypowderdiffraction(xrpd)official,2015年5月1日)。而且，在晶体学领域还熟知的是，对于任意给定的晶形，角峰位置可以稍微变化。例如，峰位置可能由于分析样品时的温度或湿度的变化、样品放置或内标存在与否而偏移。在本案中，2θ的±0.2的峰位置变化将考虑这些可能的变化，不妨碍所指示晶型的明确鉴别。晶型确认可以基于区别峰(以°2θ为单位)、通常是更显著的峰的任意独特组合来进行。在环境温度和相对湿度下收集的晶型衍射图基于在2θ8.85和26.77度的nist675标准峰进行调整。采用cuka辐射通过xrpd图表征了制备的结晶n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺样品，其具有如下表1所述的衍射峰(2-θ值)。具体地，所述图包含在12.1°的峰以及选自15.3°、21.6°、22.2°、22.7°、23.5°、24.3°和26.8°的一个或多个峰的组合，其中衍射角的容限为0.2度。表5：结晶n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺，实施例1a的x射线粉末衍射峰5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基化合物oga抑制剂实施例2n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺的合成在氮气下，向2-甲基-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-哌啶基]氧基甲基]-1,3,4-噁二唑2,2,2-三氟乙酸(0.16g,0.7mmol)在乙酸乙酯(1ml)中的溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(0.021ml,0.12mmol)，搅拌溶液5分钟。加入n-(4-氟-5-甲酰基-噻唑-2-基)乙酰胺(0.04g,0.122mmol)并搅拌5分钟，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.055g,0.25mmol)，将反应混合物温热至40℃并搅拌过夜。将混合物在减压下浓缩，得到褐色固体。将残余物加入二甲亚砜中(至总体积1ml)，通过制备型-hplc(phenomenexgemini-nx10micron30*100mmc-18)(ch3cn&含10mm碳酸氢铵的水，用氢氧化铵调节至ph9，经12分钟从15％至100％ch3cn，100ml/分钟)(1次进样)(271/204nm)纯化，得到标题化合物(0.007g,14％)。msm/z384.2(m+h)。结晶n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺的供选合成于室温将三乙酰氧基硼氢化钠(59.1g,279mmol)加入到2-甲基-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-哌啶基]氧基甲基]-1,3,4-噁二唑(23.3g,93.0mmol)、乙酸乙酯(438ml)和n,n-二异丙基乙胺(32.4ml,186mmol)的混合物中。以内温30℃将反应混合物在31℃加热块中搅拌15分钟，然后经5分钟分批加入n-(4-氟-5-甲酰基-噻唑-2-基)乙酰胺(17.5g,93.0mmol)。以内温30℃将反应混合物在31℃加热块中搅拌过夜，然后在冰水浴中冷却至内温为5℃。经15分钟向混合物中加入2m盐酸水溶液(140ml)，同时保持内温低于10℃。于室温搅拌混合物15分钟，然后用水(50ml)和乙酸乙酯(20ml)稀释，分离各层。用2m盐酸水溶液(35ml)在水(100ml)中的混合物萃取有机层。将合并的水层在冰水浴中搅拌，经10分钟滴加50％氢氧化钠水溶液(19.5ml)，同时保持内温低于10℃。将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)稀释，然后用2-甲基四氢呋喃(3×200ml)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过快速色谱用2-丙醇在二氯甲烷中的0-15％溶液洗脱纯化。浓缩含有产物的级分，得到残余物，将其从庚烷(100ml)中浓缩。将浓缩的物质与乙酸乙酯在庚烷中的40％溶液(457ml)合并，在50℃加热块中搅拌混合物1小时，然后冷却至室温并过滤。于40℃在真空下干燥过滤的固体1小时，得到第一批产物(22.9g)。浓缩滤液，得到残余物，将其与乙酸乙酯在庚烷中的40％溶液(50ml)合并，将混合物在50℃加热块中搅拌30分钟，然后冷却至室温并过滤。将过滤的固体与乙酸乙酯在庚烷中的50％溶液(33ml)合并，在50℃加热块中搅拌混合物1小时，然后冷却至室温并过滤。于40℃在真空下干燥过滤的固体1小时，得到第二批产物(2.50g)。于室温将包括第一批和第二批产物(29.3g,76.4mmol)的合并批次与乙酸乙酯(117ml)和庚烷(117ml)混合。以内温50℃在51℃加热块中搅拌混合物30分钟，然后冷却至室温并过滤。于40℃在真空下将过滤的固体干燥过夜，得到呈结晶固体的标题化合物(26.7g)。msm/z384.0(m+h),[α]d20＝+39°(c＝0.2,甲醇)。结晶n-[4-氟-5-[[(2s，4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺的x-射线粉末衍射(xrpd)于60℃将结晶n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺(218mg)溶于1.25ml甲醇中5分钟。在搅拌下将溶液冷却至环境温度20分钟。通过真空过滤分离得到的固体。最终固体产物为163mg或75％收率。在brukerd4endeavorx射线粉末衍射仪上获得结晶固体的xrd图，所述衍射仪装备有cuka源和vantec检测仪，在35kv和50ma下操作。样品在2θ为4至40°之间扫描，2θ的步长为0.0087°，扫描速率为0.5秒/步，发散狭缝为0.6mm，固定的抗散射5.28mm，检测器狭缝9.5mm。将干燥粉末装在石英样品持器上，用载玻片获得光滑表面。在晶体学领域熟知的是，对于任意给定的晶型，衍射峰的相对强度可能由于由诸如晶体形态学和习性的因素导致的择优取向而变化。当存在择优取向的影响时，峰强度改变，但是多晶型物的特征峰位置不变。参见例如theu.s.pharmacopeia38-nationalformulary35第<941>章characterizationofcrystallineandpartiallycrystallinesolidsbyx-raypowderdiffraction(xrpd)official,2015年5月1日。而且，在晶体学领域还熟知的是，对于任意给定的晶形，角峰位置可以稍微变化。例如，峰位置可能由于分析样品时的温度或湿度的变化、样品放置或内标存在与否而偏移。在本案中，2θ的±0.2的峰位置变化将考虑这些可能的变化，不妨碍所指示晶型的明确鉴别。晶型确认可以基于区别峰(以°2θ为单位)、通常是更显著的峰的任意独特组合来进行。在环境温度和相对湿度下收集的晶型衍射图基于在2θ8.85和26.77度的nist675标准峰进行调整。因此，采用cuka辐射通过xrd图表征了结晶n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺，具有如表1所述的衍射峰(2θ值)。更具体地，所述图优选包含在13.5°的峰以及选自5.8°、13.0°、14.3°、17.5°、20.4°、21.4°和22.2°的一个或多个峰的组合，其中衍射角的容限为0.2度。表6：结晶n-[4-氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲氧基]-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺的x射线粉末衍射峰体外人oga酶测定oga蛋白质的产生将编码全长人o-glcnac-β-n-乙酰氨基葡糖苷酶(nm_012215)的核苷酸序列插入到具有n-末端多组氨酸(his)标记的pfastbac1(invitrogen)载体中。根据bac-to-bac杆状病毒表达系统(invitrogen)方案进行杆状病毒产生。采用每升培养物10mlp1病毒以1.5×106个细胞/ml感染sf9细胞，于28℃孵育48小时。将细胞旋转沉降，用pbs洗涤，将沉淀物储存在-80℃。如下纯化上述oga蛋白质(his-oga)：于4℃将4l细胞在200ml含有50mmtrisph8.0、300mmnacl、10％甘油、10mm咪唑、1mm二硫苏糖醇(dtt)、0.1％tritontmx-100、4片蛋白酶抑制剂(完全不含edta，roche)的缓冲液中裂解45分钟，然后将该细胞裂解物于4℃以16500rpm旋转40分钟，上清液于4℃与6mlni-nta树脂(镍-次氮基三乙酸)孵育2小时。然后将树脂装到柱上，用50mmtrisph8.0、300mmnacl、10％甘油、10mm咪唑、0.1％tritontmx-100、1mmdtt洗涤，然后用50mmtrisph8.0、150mmnacl、10mm咪唑、10％甘油、1mmdtt洗涤。用50mmtrisph8.0、150mmnacl、300mm咪唑、10％甘油、1mmdtt洗脱蛋白质。将合并的含his-oga的级分浓缩至6ml，装载到superdex75(16/60)上。用50mmtrisph8.0、150mmnacl、10％甘油、2mmdtt洗脱蛋白质。合并含有his-oga的级分，用bca(bradford比色测定法)测量蛋白质浓度。oga酶测定oga酶催化o-glcnac从核质蛋白中的除去。为了测定该活性，使用荧光素二-n-乙酰基-β-n-乙酰基-d-氨基葡糖苷(fd-glcnac，kim，eunju；kang,daeook；love，donac；hanover，johna.carbohydrateresearch(2006)，341(8)，971-982)作为底物，终浓度为10μm(在96孔分析模式中)或6.7μm(在384孔分析模式中)。该荧光底物在通过oga切割时变成发荧光的，使得酶活性可以通过在535nm(在485nm激发)检测的荧光的增加来测量。制备测定缓冲液以得到在水中50mmh2napo3-hna2po3、0.01％牛血清白蛋白和0.01％tritontmx-100的终浓度，ph7。最终的酶浓度是3nm(在96孔分析模式中)或3.24nm(在384孔分析模式中)。两种分析模式产生基本上相同的结果。使用十点浓度响应曲线，将待测化合物稀释在纯二甲亚砜(dmso)中。反应混合物中化合物的最大浓度为30μm。在加入底物开始反应之前，将适合浓度的化合物与oga酶预孵育30分钟。允许反应于室温进行60分钟。然后，在不停止反应的情况下读取荧光。通过绘制标准化数据相对于化合物的log的曲线并采用四参数逻辑方程拟合数据来计算ic50值。基本上如上所述测试了实施例1的化合物，显示出ic50为2.36nm±0.786(n＝8)。该数据证实，实施例1的化合物在体外抑制oga酶活性。还基本上如上所述测试了实施例2的化合物，显示出ic50为2.13nm±0.89(n＝5)。该结果证实，实施例2的化合物在体外抑制oga酶活性。用于测量oga酶活性抑制的全细胞分析细胞铺板：利用本领域已知的标准条件，产生被修饰用于微管相关蛋白tau的p301s-1n4r形式的诱导型表达的trex-293细胞，并保持在生长培养基中，所述生长培养基由补充有10％无四环素的胎牛血清(fbs，sigmaf2442)、20mmhepes、5μg/ml杀稻瘟素(lifetechnologies#a11139-03)和200μg/mlzeocin(lifetechnologies#r250-01)的dmem高葡萄糖(sigma#d5796)组成。对于实验，在涂有聚-d-赖氨酸的corningbiocoat(356663)384孔板中将细胞以10,000-14,000个细胞/孔铺在生长培养基中，在细胞培养箱中于37℃/5％co2中培养20-24小时。在不诱导tau表达的情况下进行实验。化合物处理：使用十点浓度响应曲线，将待测试化合物在纯dmso中连续稀释1/3，在生长培养基中进一步稀释。在铺板后20-24小时，用测试化合物在生长培养基中处理细胞；化合物的最大浓度为15μm(0.15％dmso)。最大抑制通过15μmthiametg的重复测量来定义，最小抑制通过0.15％dmso处理的重复测量来定义。将细胞放回37℃/5％co2的培养箱中20-24小时。在每个板中一式两份测试化合物。免疫染色：在化合物处理20-24小时后，从分析板上除去培养基，向各孔中加入25μl在dpbs(sigma#d8537；dulbecco’s磷酸盐缓冲盐水)中的3.7％甲醛溶液(sigma#f1635)，孵育30分钟。然后用dpbs洗涤细胞一次，之后用0.1％tritontmx-100(sigma#t9284)渗透化。30分钟后，用dpbs洗涤细胞两次，然后向每孔中加入封闭溶液(1％bsa/dpbs/0.1％tritontmx-100)，孵育60分钟。除去封闭溶液，向细胞中加入0.40-0.33μg/mlo-glcnac蛋白质抗体(rl2克隆，thermo，ma1072)在封闭溶液中的溶液，使其于2-8℃静置过夜。第二天，用dpbs洗涤细胞两次，向各孔中加入在dpbs中的2μg/ml的二级抗体alexafluor488山羊抗小鼠igg(lifetechnologies#a11001)，使其于室温静置90分钟。除去二级抗体，用dpbs洗涤细胞两次，向每孔中加入dapi(sigma#d9564；4',6-二脒基-2-苯基吲哚双乳酸盐)和rnase(sigma，r6513)在dpbs中的溶液，浓度分别为1和50μg/ml。将板密封，孵育一小时，在acumenex3hci(ttplabtech)上分析。除了一级抗体之外，上述所有的孵育和洗涤步骤都于室温进行。分析和结果：在acumenex3仪器上使用488和405nm激发激光和两个发射滤光片fl2(500-530nm)和fl1(420-490nm)分析板子。fl2滤光片是对应于o-glcnac蛋白质抗体(rl2克隆)的信号，fl1滤光片是对应于细胞核(dapi)的信号。使用总fl2/总fl1(每个孔的总荧光，没有对象或群体选择)的比率进行数据分析。将数据标准化为由15μmthiametg处理所参照的最大抑制和由0.15％dmso处理所获得的最小抑制。用非线性曲线拟合应用(4参数对数方程)拟合数据，计算并报告ic50值。基本上如上所述测试了实施例1的化合物，显示出ic50为21.9nm±7.3(n＝5)。该数据证实，实施例1的化合物在细胞测定中抑制oga酶活性。还基本上如上所述测试了实施例2的化合物，显示出ic50为22.6nm±7.3(n＝3)。该结果证实，实施例2的化合物在细胞测定中抑制oga酶活性。体内鼠科动物组合研究以下实施例显示了可如何设计研究来验证(在动物模型中)本发明的抗tau抗体与本发明的oga抑制剂的组合可用于治疗特征为异常tau聚集的疾病，如ad、psp和cbs。然而，应当理解，以下描述是以说明而非限制的方式来阐述的，并且本领域普通技术人员可以进行各种改变。为了评价在如本文所述的组合疗法中示例的oga抑制剂对tau过磷酸化和聚集减少的影响以及示例的抗tau抗体对tau聚集传播中和的影响，使用tau转基因小鼠(例如jnpl3或tg4510)(或者，可以使用tau/app转基因小鼠系的后代，其源自tau转基因系与app转基因小鼠系(例如tg2576或pdapp或app敲入)的杂交)。如本领域已知，本发明的tau抗体在tg4510小鼠中诱导免疫原性应答，因此应当使用替代的鼠科动物tau抗体，优选相对于实施例1的示例的tau单克隆抗体而言靶向于相同构象表位并反映相似水平的亲和力提高的那些。小鼠可以分为由以下组成的处理组：(a)对照抗体(例如15mg/kg)或媒介物；(b)oga抑制剂和对照；(c)抗tau抗体(例如15mg/kg)和对照；和(d)oga抑制剂和抗tau抗体(例如15mg/kg)。抗体可以经腹膜内施用，例如每周两次。在治疗期后，可以处死小鼠，收集脑和脊髓组织。tau聚集病理可以如上所述或用容积mri评估。该研究可以显示，oga抑制剂与抗tau抗体的组合疗法导致tau病理(例如在小鼠海马中)、过磷酸化和聚集的减少以及tau聚集传播的减少，优选具有协同相互作用。体内组合研究以下实施例显示了可如何设计研究来验证本发明的oga抑制剂与本发明的抗tau抗体的组合可用于治疗特征为异常tau聚集的疾病，如ad、psp和cbs。然而，应当理解，以下描述是以说明而非限制的方式来阐述的，并且本领域普通技术人员可以进行各种改变。为了评价在如本文所述的组合疗法中示例的oga抑制剂对tau过磷酸化和聚集减少的影响以及示例的抗tau抗体对tau聚集传播中和的影响，可以通过生物标记和/或采用经验证的评级量表的认知和功能衰退评估来评估疾病进展的延缓。患者可以被分为由双盲安慰剂和组合治疗组组成的处理组。组合疗法组施用有效量的oga抑制剂与有效量的抗tau抗体。可以包括单一疗法分组(与组合组中的oga抑制剂相同剂量的oga抑制剂的单一疗法组；和与组合疗法组中的抗tau抗体相同剂量的抗tau抗体的单一疗法组)以进一步阐明每种单独分子对疾病改变的贡献。而且，处理组可以基于临床前或临床ad的诊断或基于患者(尽管对ad而言是无症状的)具有导致ad疾病的基因突变的诊断来表征。例如，组可以包括以下的一个或多个：(a)无症状，但是引起ad的遗传突变阳性；(b)前驱期ad；(c)轻度ad；(d)中度ad；和(e)重度ad。每个处理组可以接受各自的处理(例如每月一次抗tau抗体和每天一次oga抑制剂)，达9个月至18个月的处理期。在处理期后，可以通过以下生物标记物评估中的一种或多种来评估ad神经变性：(a)taupet成像(nft聚集的评估)；(b)容积mri(神经解剖萎缩的评估)；(c)fdg-pegpet成像(代谢减退的评价)；(d)氟贝他吡(florbetapir)灌注pet成像(代谢减退的评估)；(e)csftau浓度(神经变性的评估)；和/或(f)csf磷酸化-tau浓度(神经变性的评估)。另外，可以应用评估每个处理组的认知和功能衰退的一个或多个经验证的评级量表，例如adas-cog、mmse、cdr-sb、adcs-adl和功能活动问卷(faq)。在一些实施方案中，对于诊断为psp或cbs的患者的临床试验，患者可以接受6个月至18个月的处理。神经变性可以通过以下生物标志物评估中的一种或多种来评估：(a)dat或av-133成像(多巴胺能系统变性)；(b)容积mri(神经解剖萎缩的评估)；(c)fdg-pegpet成像(代谢减退的评价)；和/或(d)csf神经丝轻链、神经颗粒素(neurogranin)、tau、p-tau(神经变性的评估)。另外，可以应用评估每个处理组的认知和功能衰退的一个或多个经验证的评级量表，例如psp-rs、mmse、seadl、cgi-c、moca。该研究可以证明，本发明的oga抑制剂和本发明的抗tau抗体的组合疗法可导致tau过磷酸化和聚集的减少以及tau聚集传播的减少。序列seqidno:1–示例的抗-tau抗体的lcseqidno:2–示例的抗-tau抗体的hcseqidno:3–示例的抗-tau抗体的lcdr1seqidno:4–示例的抗-tau抗体的lcdr2seqidno:5–示例的抗-tau抗体的lcdr3seqidno:6–示例的抗-tau抗体的hcdr1seqidno:7–示例的抗-tau抗体的hcdr2seqidno:8–示例的抗-tau抗体的hcdr3seqidno:9–示例的抗-tau抗体的lcvrseqidno:10–示例的抗-tau抗体的hcvrseqidno:11–编码示例的hc(seqidno:2)的核苷酸序列seqidno:12–编码示例的lc(seqidno:1)的核苷酸序列seqidno:13–人全长tau的氨基酸序列当前第1页12