一种靶向调节防治血栓的活性分子组合物的制作方法

本发明涉及一种靶向调节防治血栓的活性分子组合物。
背景技术：
：心脑血管疾病是心脏血管和脑血管疾病的统称，泛指由于高脂血症、血液黏稠、动脉粥样硬化、高血压等所导致的心脏、大脑及全身组织发生的缺血性或出血性疾病。由国家心血管病中心组织编撰的《中国心血管病报告2018》概要(以下简称“报告”)在《中国循环杂志》发表。报告显示，中国心血管病患病率及死亡率仍处于上升阶段。推算心血管病现患人数2.9亿，心血管病死亡率仍居首位，占居民疾病死亡构成的40％以上，特别是农村近几年来心血管病死亡率持续高于城市。心脑血管病住院总费用也在快速增加，2004年至今，年均增速远高于国民生产总值增速。2016年，心血管病死亡率仍居首位，高于肿瘤及其他疾病。每5例死亡中就有2例死于心血管病。关于心脑血管疾病预防，《健康中国行动》提出了“合理膳食专项行动”，将重点指导家庭饮食“少盐、少糖、少油”。但随着农牧业、加工业的生产条件改变与人们生活方式、社会环境的改变，本发明人认为，找到形成心脑血管疾病新的成因非常重要。本发明人从事15年的微量元素与酶活性、分子营养与基因表达水平研究，发现肠道菌群的多样性与心脑血管疾病发生率呈密切相关。大量施用农药、以及转基因大豆、玉米、杂交水稻等作物根系更容易络合重金属、土壤微生物失活、灭活形成板结，最终通过食物链(包括肉食、牛奶、农作物等药物残留)导致人体肠道菌群失衡，通过共生基因组关联，影响血管生成与发育。研究表明，超过30种不同的微生物dna在粥样硬化斑块的dna中分离出来，这些微生物的因素对粥样硬化斑块之间的关系不容忽视。目前医药机构销售的抗凝血药、抗血小板聚集药和溶血栓药三大抗血栓药如下：a、抗凝血药(anticoagulants)是一类干扰凝血因子，阻止血液凝固的药物，主要用于血栓栓塞性疾病的预防与治疗。b、抗血小板聚集药分为三代：阿司匹林为第一代，噻氯匹啶为第二代，血小板糖蛋白ⅱb/ⅲa受体拮抗剂为第三代。其中，血小板糖蛋白ⅱb/ⅲa受体拮抗剂的问世是抗血小板治疗中的一个重要里程碑。c、凝血中形成的纤维蛋白，可经纤溶酶作用从精氨酸-赖氨酸键上分解成可溶性产物，使血栓溶解。纤维蛋白溶解药(fibrinolyticdrugs)激活纤溶酶而促进纤溶，也称溶栓药(thrombolyticdrugs)，用于治疗急性血栓栓塞性疾病。第一代的溶栓药链激酶(sk)和尿激酶(uk)至今仍然是国内外使用最广泛的品种，随着尿激酶原(pro-uk)等新一代溶栓药的问世，这类药物正在临床逐渐推广应用。这些药物大多数都是迅速短时缓解，有较强依赖性，治标不治本，而且，长期服用均报告有很多副作用，甚至造成血管破损，不能从根本上修复细胞、改善细胞代谢、激活细胞功能，甚至破坏细胞的原生质或能影响原生质中最基本的生化过程。本发明人作为isnn国际营养遗传学/营养基因组学会会员，基于新发现的血栓成因，按照营养基因组学(nutrigenomics)理论，采用真实世界研究(realworldresearch)方法，对细胞修复、改善代谢、激活细胞功能所必须分子营养物质进行补充，从表观遗传机制稳定基因组表达。技术实现要素：本发明提出一种靶向调节防治血栓的活性分子组合物，有助于解决心脑血管疾病缺乏精准有效的营养干预与预防手段，减少“支架”、“搭桥”等物理性、治标不治本、成本高昂的手术介入性治疗。本发明从心脑血管疾病干预机制上有四个重要技术突破点：一、经本发明人研究确定，由于农药残留与作物重金属导致的人肠道硫酸盐还原菌(sulphate-reducingbacteria,srb)中的脱硫弧菌属(desulfovibrio,dsv)增多，导致人体硫元素大量流失，脱硫弧菌代谢产物h2s，在血液中浓度过高，可直接刺激颈动脉窦和主动脉区的化学感受器，致反射性呼吸抑制。h2s又是细胞色素氧化酶(coi基因)的强抑制剂，能与线粒体内膜呼吸链中的氧化型细胞色素氧化酶中的三价铁离子结合，而抑制电子传递和氧的利用，引起细胞内缺氧，造成细胞内窒息。因脑组织对缺氧最敏感，故最易受损。硫酸根作为一些基因的基本活性分子配体，在细胞环境中长期供给不足，解毒功能就会下降，表观出现炎性反应，导致过敏等免疫应答功能紊乱症状流行，同时诱发息肉和溃疡性结肠炎。脱硫弧菌同时会增加长链脂肪酸结合摄取的受体生长，造成血脂增高。另外，农药及重金属络合物也会抑制农作物对微量元素钼的吸收。钼对于至少两种非常重要的酶必不可少：亚硫酸盐氧化酶和黄嘌呤氧化酶。硫酸盐在几乎所有细胞类型的细胞外基质中的硫酸化蛋白聚糖中起着至关重要的作用，亚硫酸盐氧化酶活性受损会导致氧化损伤，同时也会损害硫酸盐对组织(例如小肠中的肠上皮细胞和血管内皮细胞)的供应。作为一氧化氮的来源，无机亚硝酸盐调节组织对局部缺血的反应。硝酸盐还原酶的活性多年来一直被认为是微生物的能力，事实上，哺乳动物也具有正常的硝酸盐还原酶的功能，利用钼依赖性酶从硝酸盐中产生亚硝酸盐。钼缺乏会削弱这种能力，可致畸性巨幼细胞性贫血，导致静脉血栓形成的风险更高。有一组数据值得注意：农村心血管病死亡率从2009年起超过并持续高于城市水平。农村心血管病死亡率为309.33/10万，城市心血管病死亡率为265.11/10万。农村和城市心血管病死亡占全部死因的比率分别为45.5％和43.16％。这可能与劳动、生活环境中的农药暴露水平有关。核心机制：把脱硫弧菌作为靶点，通过胆甾醇甘露糖甙和/或半乳聚糖硫酸酯调节t-myd88蛋白活性增加肠道黏膜免疫球蛋白a(iga抗体)，抑制脱硫弧菌。因此，在本发明的活性组合物中，选择呼伦贝尔樟子松或软骨藻提取物(主要活性成分为胆甾醇甘露糖甙cholesterolmannoside、阿拉伯半乳聚糖和半乳聚糖硫酸酯)，用于抑制脱硫弧菌。本发明通过选择一种或多种植物提取物，提供活性成分胆甾醇甘露糖甙、阿拉伯半乳聚糖、半乳聚糖硫酸酯中的至少一种，用于抑制人肠道内脱硫弧菌。二、本发明人研究发现，心血管疾病风险的增加有一个重要的机制一直未被发现，就是由于三甲胺n-氧化物tmao增强了血小板整合素αiibβ3的反应性和体内血栓形成的潜力。当血液粘稠、tmao积累过高，挤压力施加在血小板表面时将会激活其表面整合素αiibβ3，使其和纤维蛋白之间的耦合速度大幅提升，从而可以轻易实现血小板与纤维蛋白的紧密黏附。本发明人通过整合素αiibβ3蛋白模型还发现，αiibβ3与血管紧张素转换酶ace2(angiotensin-convertingenzyme2)具有很多相同蛋白配体交互分子团，如n-乙酰-d-葡萄糖胺(n-acetyl-d-glucosamine)、甘露糖(beta-d-mannose、alapha-d-mannose)，因此αiibβ3可能通过ace2，参与心脏肾素-血管紧张素-醛固酮系统(raas)内分泌级联反应，影响心脑血管机能。ace2也是sars冠状病毒的受体，ace2受体得到充分的正确供体后，基因结构更加稳定，减少与冠状病毒s蛋白结合，因此，本发明组合物对于预防冠状病毒感染及感染后的血氧降低、心肺功能衰竭将有迅速缓解作用。tmao同时还会抑制血液中胆固醇的降解，胆固醇堆积在血管壁上，粥样斑块慢慢形成，血管壁也变厚变硬。肠道菌群失衡，细菌分解胆碱、卵磷脂和肉毒碱(这些化合物在高脂肪乳制品、蛋黄、肝脏和红肉中含量特别高)的过程产生过高的三甲胺n-氧化物tmao。核心机制：抑制细菌tmao合成，作为第二个重要作用靶点。在本发明的活性组合物中，选择菠菜，甜菜头，枸杞提取物中的三甲基甘氨酸(c5h11no2)、l-甲硫氨酸作为胆碱样化合物供体，作为细菌的胆碱能量来源替代物，以抑制胆碱利用蛋白质c的酶，减少肠道菌群合成tmao；因此，本发明还通过选择一种或多种植物提取物，提供三甲基甘氨酸(c5h11no2)、l-甲硫氨酸中的至少一种，以抑制胆碱利用蛋白质c的酶，减少肠道菌群合成tmao。同时从菠菜提取物提供硝酸根、从软骨藻提取物提供胆甾醇甘露糖甙、棕榈酰胆甾醇甘露糖甙活性成分，从砖茶、芝麻、肉桂提取物中提供酚基或糖酸基有机结合态mn2+离子，作为稳定整合素αiibβ3蛋白活性的结合分子基团。本发明还通过选择一种或多种植物提取物，提供硝酸基、胆甾醇甘露糖甙、棕榈酰胆甾醇甘露糖甙、酚基或糖酸基有机复合态mn2+离子中的至少一种，以结合整合素αiibβ3蛋白达到稳定整合素αiibβ3蛋白活性的目的。三、本发明人研究过程中同时发现，αiibβ3整合素激活需要钙离子和磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinosito13-kinase,pi3k)进行信号传递，而糖尿病正是通过增强这一信号传递过程造成血小板表面整合素αiibβ3的过度活化和血小板黏附能力的过度强化。实验表明，正常治疗剂量的阿司匹林、氯吡格雷均不能对这种生物力学机制产生抑制作用，但是如果抑制磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)则可以对其产生有效的阻断。核心机制：抑制磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)活性，作为第三个作用靶点，本发明的活性组合物选择药食同源的绿咖啡或可可提取物单宁酸，控制pi3k表达活性。本发明还选择一种或多种植物提取物，提供活性成分单宁酸，以抑制磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)活性。四、本发明人最新研究证据表明，血栓形成的一个重要机制是由于血管壁细胞死亡累积造成的，这种机制，类似皮肤表皮生成的“老茧”。与过氧化体增殖体受体(ppar)活性不足和基质金属蛋白酶mmps过度表达，引起血管内皮细胞功能障碍有关，动脉硬化斑块，并非仅仅来自血液中的血小板与不溶性纤维蛋白的凝集。过氧化体增殖体受体(ppar)是配体激活的核转录因子，通过调控靶基因表达而调节多种炎症细胞的功能，其中γ亚群在脂肪形成与脂质代谢中发挥核心作用，活化的ppar-γ能抑制多种与斑块进展相关促炎症因子、粘附分子的基因表达以及减少mmps的产生。这个过程中，整合素αiibβ3蛋白抑制过氧化体增殖体受体(ppar)活性，是关键靶点。激活免疫吞噬细胞，及时清除血小板及细胞表面累积过多的整合素αiibβ3蛋白，以及血管壁凋亡细胞残留，才是解决动脉硬化斑块形成的根本途径。核心机制：激活t细胞转录因子eb基因tfeb(transcriptionfactoreb)活性，tfeb在溶酶体基因的表达中起着核心作用。通过促进参与自噬的基因表达，充当自噬的正向调节剂。在正常血管形成所需的信号转导过程中发挥作用，通过促进pip4p1(磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸4-磷酸酶1)的表达来调节对营养缺乏的溶酶体定位。本发明的活性组合物选择软骨藻中提取的半乳聚糖硫酸酯和甘露糖甙，通过tfeb翻译后的糖基化进行激活。本发明中主要活性成分均提取自药食同源及常见食物，食、饮用安全，不具毒副作用。对于降低血液粘稠度、提高血氧水平、降解血小板表面的整合素与动脉硬化斑块、清除血管壁凋亡细胞、疏通肿瘤并发症引起的组织外周大小动静脉癌栓具有显著作用，特别是在大健康领域具有重要的预防意义。附图说明图1为效果例1中患者关于血氧情况的末梢血影像对比照片；图2为效果例1中患者关于血栓和脱落斑块的降解情况的末梢血影像对比照片；图3为效果例2中患者服用本发明的组合物前的超声诊断报告照片；图4为效果例2中患者服用本发明的组合物后的超声诊断报告照片；图5为效果例3中患者服用本发明的组合物前的超声诊断报告照片；图6为效果例3中患者服用本发明的组合物前的脚部位照片；图7为效果例3中患者服用本发明的组合物后的超声诊断报告照片；图8为效果例4中患者服用本发明的组合物前的医学检验报告照片；图9为效果例4中患者服用本发明的组合物前的出院记录照片；图10为效果例4中患者服用本发明的组合物前的疾病诊断证明书照片；图11为效果例4中患者服用本发明的组合物后的体检报告单照片。具体实施方式为让本领域的技术人员更加清晰直观的了解本发明，下面将对本发明作进一步的说明。本发明的活性组合物防治血栓从如下几个方面着手：抑制脱硫弧菌：可选择樟子松、软骨藻提取物，提供主要活性成分胆甾醇甘露糖甙(cholesterolmannoside)、阿拉伯半乳聚糖和半乳聚糖硫酸酯活性成分，用于抑制脱硫弧菌；用量范围是0.5-50g；减少肠道菌群合成tmao：可选择菠菜提取物、甜菜头提取物、枸杞提取物，提供主要活性成分三甲基甘氨酸(c5h11no2)、l-甲硫氨酸，作为胆碱样化合物供体，作为细菌的胆碱能量来源替代物，以抑制胆碱利用蛋白质c的酶；用量范围是0.2g-50g；稳定整合素αiibβ3蛋白活性：(1)可选择菠菜提取物，提供硝酸基no3-；软骨藻提取物提供胆甾醇甘露糖甙、棕榈酰胆甾醇甘露糖甙等活性成分，用量范围是2mg-50g。(2)可从砖茶、芝麻、肉桂提取物中提供酚基或糖酸基有机结合态mn2+离子，用量范围是2mg-50g；抑制磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)活性：可选择绿咖啡、可可提取物，提供单宁酸，用量范围是2g-30g；激活免疫吞噬细胞：软骨藻中提取的半乳聚糖硫酸酯和甘露糖甙，还可通过tfeb翻译后的糖基化进行激活免疫吞噬细胞。原料均来委托加工：陕西森弗天然制品有限公司广东省阳春市信德生物科技发展有限公司本发明的组合物以食品生产批文，从2017年开始，以营养补充形式，在新疆、青海、西藏、云南、黑龙江等心脑血管疾病高发地区、在第一健康体检连锁机构、深圳靶向基因赞诗诊所用于1200多位心脑血管疾病康复客户，营养干预效果非常显著。实施例1本实施例的组合物制备成口服液的剂型，具体的各组分组成和含量如下：每瓶50ml，每天早晚各饮用一瓶。实施例2本实施例的组合物制备成固体冲饮(颗粒剂)的剂型，具体的各组分组成和含量如下：每袋15g，每天早晚各温水冲饮一袋。植物提取物所含活性分子提取比例每袋用量肉桂有机复合mn2+10：12g砖茶有机复合mn2+10：11g可可单宁酸10：12g菠菜硝酸盐10：13g枸杞三甲基甘氨酸20：12g甜菜三甲基甘氨酸20：12g软骨藻胆甾醇甘露糖甙20：13g环己胺磺酸钠甜味辅料——1.5mg效果例1在本发明的活性组合物与深圳靶向基因所属赞诗诊所医学检测科、深圳第一健康体检连锁机构合作，3年间与1000多位报告有血栓、末梢循环不畅或确诊动脉硬化斑块客户签订知情同意书，进行末梢血液细胞影像采集观测，在征得客户知情同意的前提下，饮用本发明实施例2中的活性组物产品30分钟后，进行末梢血液显微影像对照，98％的患者红细胞压积、粘附状态、血液中循环游离状态的脱落斑块与胆固醇、甘油三酯、血小板聚合物、未乳化充分的脂肪颗粒等降解显著。血氧状况显著改善，特别是一些已经在体检中发现颈动脉硬化斑块、脑供血不足、经常感觉心胸憋闷、并有哮喘久咳病史的自愿试用者，均反馈在一个小时左右即可感觉到明显改善。服用该活性组合物1小时后对患者的末梢血进行影像对比，包括血氧情况(图1)、血栓和脱落斑块的降解情况(图2)。经持续2-3个月饮用该活性组合物产品后进行红细胞影像跟踪观测，按血液病理学(hematology)所描述的镰状、柠檬状、靶形、芒果形等具临床诊断意义的异形红细胞均能明显改善。效果例2陶某某，女，52岁，是一位左肺腺癌ivb期患者，2019年6月在昆明医科大学第三附属医院进行颈部血管、四肢血管检查，发现左侧小腿肌间静脉管腔增宽，其内实质回声填塞，范围约53*7mm，彩色多普勒显示，管腔内可见稀疏流血信号，考虑肌间静脉栓塞(急性期可能)，超声诊断报告如图3所示。2019年10月份，陶女士经人推荐食用实施例2的活性组合物，两个月后进行复查(2019年12月6日)，肌间静脉栓塞完全消失，双侧小腿肌丛内未见明显异常回声。上下肢动、静脉全面检查，均管壁光滑，未见异常回声，超声诊断报告单如图4所示(图中患者年龄不统一为医院输入错误)。患者本人反馈，食用活性组合物产品后感觉精神好、全身轻松了很多。效果例3吴某某，女，70岁。经广州萝岗区中医医院彩色多普勒超声诊断，左下肢股浅静脉中段局部血栓致不完全栓塞如图5所示，腿脚严重肿大，如图6所示，用药难以奏效。食用实施例2的活性组合物一个月，彻底消肿，经中山大学附属第一医院于2020年1月19日超声检查，下肢动静脉均未见明显异常。特别是左下肢深静脉血流畅通，未见血栓形成，如图7所示。效果例4陆某某，现居广州，患高血压、糖尿病，2019年1月(32岁)因“突发左侧肢体无力”，被确诊为脑出血，先后在南方医科大学中西医结合医院、暨南大学附属第一医院、中山大学附属孙逸仙纪念医院、解放军四二一医院诊治。出院后，左侧肢体始终不能伸展，走路一瘸一拐。多项与心脑血管相关的体验指标异常，检查结果如图8、9、10所示。2019年9月经亲戚推荐，饮用实施例2的活性组织物产品，第12天，突然意识到走路速度明显加快，之前到地铁口需要半个小时，现只需要12分钟就可到达，腿部明显不再严重瘸拐，基本恢复到正常行走状态。两个月后，血糖、血压、血脂、低密度脂蛋白、尿素、胱抑素等指标，均恢复正常。可能由于微循环改善的原因，在两个月的时间内，视力也由左眼近视150度，改善到近视75度，右眼近视100度，改善到近视50度，体检报告单如图11所示。上述对实施例的描述是为便于该
技术领域：
的普通技术人员能理解和应用本发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于这里的实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，对于本发明做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。当前第1页12