一种注射用含地加瑞克的药物组合物及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种注射用含地加瑞克的药物组合物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.前列腺癌是工业化国家中成年男性的主要健康杀手。随着生活水平的不断提高，前列腺癌在我国呈高发趋势，发病率和死亡率显著增加。2019年前列腺癌发病率约为10/10万。因此开发预防和治疗前列腺癌的药物具有广泛的市场需求和社会意义。
3.2008年fda批准了丹麦辉凌制药公司研制的注射用醋酸地加瑞克用于治疗晚期前列腺癌的药物。2018年9月，注射用醋酸地加瑞克被cfda批准进入中国市场，作为治疗晚期前列腺癌的一线药物。地加瑞克作为促性腺激素释放激素(gnrh)受体抑制剂类药物，能够可逆性抑制垂体gnrh受体，来减少促性腺激素释放继而抑制睾酮的释放，从而实现对晚期前列腺癌的治疗。
4.目前，丹麦辉凌公司研制的注射用醋酸地加瑞克其处方为：醋酸地加瑞克和甘露醇。该产品以冻干粉形式存在，用注射用水溶解后使用。在国内上市的规格为80mg/瓶和120mg/瓶，该药品全程治疗时间约为12个月。
5.由于地加瑞克本身的药理特点，临床数据显示原研药注射用醋酸地加瑞克使用时有引起qtc间期延长(qtc间期是按心率校正的qt间期，表示心室去极化和复极化总时间，目前国际公认的qtc延长标准为：男性qtc间期》450ms、女性qtc间期》470ms)而引发尖端扭转型室性心动过速，导致患者产生心慌，昏厥，严重时引发心源性猝死。因此该药在临床使用时与易引发心动过速的ia类(奎尼丁)和iii类药物(胺碘酮，索他洛尔，美沙酮，莫西沙星)联用时持非常谨慎态度。此外，临床数据显示原研药醋酸地加瑞克易引起给药部位的肿胀，疼痛，瘙痒及发热症状，在一项国内对地加瑞克和戈舍瑞林的临床对比研究中，142名患者中有57.8％的患者表现出注射部位疼痛或者发热等不良反应症状。因此，有必要开发一种新的地加瑞克组合物以降低地加瑞克的副作用，减少临床不良反应的发生。


技术实现要素：

6.为了解决上述背景技术中所提出的问题，本发明的目的在于提供一种注射用含地加瑞克的药物组合物及其制备方法和应用。申请人偶然发现采用包含k
+
的不同的组合物在心室细胞膜实验中能够改善地加瑞克引起的室性心动过速的不良反应。本发明所保护的包含地加瑞克的药物组合物用于治疗晚期前列腺癌，并且和原研药相比能够显著改善由于地加瑞克引起的室性心动过速症状。
7.为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案为：一种注射用含地加瑞克的药物组合物，包括地加瑞克、甘露醇、ph调节剂；
8.所述ph调节剂包括醋酸和ph缓冲剂；
9.所述ph缓冲剂选自醋酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、柠檬酸钾中的一种。
10.进一步地，所述ph缓冲剂优选为醋酸钾。
11.进一步地，所述地加瑞克的浓度为20mg/ml，所述甘露醇的浓度为50mg/ml，所述ph缓冲剂的浓度为2.0mg/ml-12.0mg/ml，所述醋酸用于调节注射用含地加瑞克的药物组合物ph至4.3-5.3。
12.上述任一所述的注射用含地加瑞克的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：
13.1)将ph缓冲剂搅拌溶解于注射用水中，加入甘露醇充分搅拌后溶解得到第一溶液；
14.2)将地加瑞克溶解于第一溶液中得到第二溶液，然后加注射用水至总体积的90％；
15.3)用醋酸调节第二溶液的ph值至4.3-5.3，用注射用水定容至总体积得到所需要的浓度；
16.4)微孔滤膜过滤，并分装在给药装置中。
17.进一步地，还包括保护剂；
18.所述保护剂包括甘油。
19.进一步地，所述保护剂的浓度为6mg/ml-10mg/ml。
20.上述任一所述的注射用含地加瑞克的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：
21.1)将ph缓冲剂搅拌溶解于注射用水中，加入甘露醇充分搅拌后溶解得到第一溶液；
22.2)将地加瑞克溶解于第一溶液中得到第二溶液；
23.3)将甘油加入第二溶液中，搅拌溶解得到第三溶液，然后加注射用水至总体积的90％；
24.4)用醋酸调节第三溶液的ph值至4.3-5.3，用注射用水定容至总体积得到所需要的浓度；
25.5)微孔滤膜过滤，并分装在给药装置中。
26.进一步地，所述给药装置为西林瓶、预灌封注射器、卡式瓶等，优选为西林瓶。
27.进一步地，所述微孔滤膜的孔径为0.22μm。
28.进一步地，甘油溶解的过程中控制温度为35-45℃。在该温度下甘油能够更好的溶解，且能够和地加瑞克更好的混匀。
29.进一步地，成品为冻干粉时还包括：置于冷冻干燥冻干机中进行冻干得到冻干粉，所述冻干粉使用时加入注射用水至冻干前的体积。
30.上述任一所述的注射用含地加瑞克的药物组合物在制备治疗晚期前列腺癌的药物中的应用。
31.进一步地，注射用含地加瑞克的药物组合物能够显著改善由于地加瑞克引起的室性心动过速症状，从而显著降低发生心衰或心源性猝死的风险。
32.进一步地，注射用含地加瑞克的药物组合物能够降低该药注射部位肿胀，疼痛，瘙痒及发热症状发生的概率。
33.本发明采用甘油包裹地加瑞克的方式，甘油能够增加整个组合物的脂溶性，使其能够较快通过皮下组织，从而减少注射后地加瑞克在皮下组织通透性差而导致皮肤组织组
胺的释放，进而减少注射部位的肿胀，疼痛，瘙痒及发热症状的发生。本发明虽然增加了一种保护剂，但其和整个活性成分和辅料的含量相比，所占的比例偏低，安全性风险较低。本发明地加瑞克组合物中所含k
+
能够增加心室细胞外k
+
的浓度，增加心室细胞k
+
通道的通透性，降低心室细胞的兴奋性，从而显著改善地加瑞克所引起的尖端扭转型室性心动过速症状。大大增加了其临床安全性，降低不良反应发生的概率。
34.本发明的有益效果是：本发明注射用含地加瑞克的药物组合物不仅能够治疗晚期前列腺癌，并且和原研药相比能够显著改善由于地加瑞克引起的室性心动过速症状，能够显著降低心衰和心源性猝死发生的风险，降低该药注射部位肿胀，疼痛，瘙痒及发热症状发生的概率，具有很高的临床应用价值。
具体实施方式
35.为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明进行详细说明。通过下述实例将有助于理解本发明，但以下实例仅用于更具体的说明本发明的实施，不用于对本发明技术方案的限定。
36.实施例1
[0037][0038]
制备方法如下：
[0039]
1)将0.90g醋酸钾搅拌溶解于250ml的注射用水中，再加入15g甘露醇搅拌溶解；
[0040]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0041]
3)将2.4g甘油加入2)中，控制温度为40℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0042]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0043]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，半压塞后置于冻干机中冻干，即得。
[0044]
实施例2
[0045][0046]
制备方法如下：
[0047]
1)将1.20g磷酸二氢钾搅拌溶解于250ml的注射用水中，再加入15g甘露醇搅拌溶解；
[0048]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0049]
3)将2.4g甘油加入2)中，控制温度为40℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0050]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0051]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，半压塞后置于冻干机中冻干，即得。
[0052]
实施例3
[0053][0054]
制备方法如下：
[0055]
1)将1.80g磷酸氢二钾搅拌溶解于250ml的注射用水中，再加入15g甘露醇搅拌溶解后；
[0056]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0057]
3)将2.4g甘油加入2)中，控制温度为40℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0058]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0059]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，半压塞后置于冻干机中冻干，即得。
[0060]
实施例4
[0061][0062]
制备方法如下：
[0063]
1)将3.00g柠檬酸钾搅拌溶解于250ml的注射用水中，再加入15g甘露醇搅拌溶解后；
[0064]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0065]
3)将2.4g甘油加入2)中，控制温度为40℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0066]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0067]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，半压塞后置于冻干机中冻干，即得。
[0068]
实施例5
[0069][0070]
制备方法如下：
[0071]
1)将0.60g醋酸钾搅拌溶解于250ml的注射用水中，再加入15g甘露醇搅拌溶解后；
[0072]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0073]
3)将3.0g甘油加入2)中，控制温度为35℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0074]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0075]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，半压塞后置于冻干机中冻干，即得。
[0076]
实施例6
[0077][0078]
制备方法如下：
[0079]
1)将0.90g醋酸钾搅拌溶解于250ml的注射用水中，再加入15g甘露醇搅拌溶解；
[0080]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0081]
3)将1.8g甘油加入2)中，控制温度为45℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0082]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.3，加注射用水定容至300ml；
[0083]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，半压塞后置于冻干机中冻干，即得。
[0084]
实施例7
[0085][0086]
制备方法如下：
[0087]
1)将0.90g醋酸钾搅拌溶解于250ml的注射用水中，再加入15g甘露醇搅拌溶解；
[0088]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0089]
3)将3.0g甘油加入2)中，控制温度为45℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0090]
4)加适量冰醋酸调节ph至5.3，加注射用水定容至300ml；
[0091]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，半压塞后置于冻干机中冻干，即得。
[0092]
实施例8
[0093][0094]
制备方法如下：
[0095]
1)将3.60g醋酸钾加入250ml注射用水中搅拌溶解，再加入15g甘露醇搅拌溶解；
[0096]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0097]
3)将3.0g甘油加入2)中，控制温度为40℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0098]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0099]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，密封待用。
[0100]
实施例9
[0101][0102]
制备方法如下：
[0103]
1)将1.2g醋酸钾加入250ml的注射用水中搅拌溶解，再加入15g甘露醇搅拌溶解；
[0104]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0105]
3)将3.0g甘油加入2)中，控制温度为35℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0106]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0107]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，密封待用。
[0108]
实施例10
[0109][0110]
制备方法如下：
[0111]
1)将2.25g醋酸钾加入250ml的注射用水中搅拌溶解，再加入15g甘露醇搅拌溶解；
[0112]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0113]
3)将3.0g甘油加入2)中，控制温度为45℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0114]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0115]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，密封待用。
[0116]
实施例11
[0117][0118]
制备方法如下：
[0119]
1)将2.4g醋酸钾加入250ml的注射用水中搅拌溶解，再加入15g甘露醇搅拌溶解；
[0120]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0121]
3)将3.0g甘油加入2)中，控制温度为40℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0122]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0123]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，密封待用。
[0124]
实施例12
[0125][0126]
制备方法如下：
[0127]
1)将0.9g醋酸钾加入250ml的注射用水中搅拌溶解，再加入15g甘露醇搅拌溶解；
[0128]
2)将6g地加瑞克溶解于1)中；
[0129]
3)将3.0g甘油加入2)中，控制温度为40℃，搅拌溶解，加注射用水至总体积的90％；
[0130]
4)加适量冰醋酸调节ph至4.8，加注射用水定容至300ml；
[0131]
5)用0.22μm过滤器除菌过滤；过滤除菌后的药液分装于100瓶注射用西林瓶中(每瓶3ml)，密封待用。
[0132]
对比例1
[0133]
费蒙格(注射用醋酸地加瑞克)
[0134]
购买市售原研药品费蒙格(注射用醋酸地加瑞克)作为参比制剂，进行考察。
[0135]
实施例13实施例1-12制得的注射用含地加瑞克的药物组合物的脂溶性，渗透性考察
[0136]
测试样品：实施例1-12制得的注射用含地加瑞克的药物组合物和对比例1。
[0137]
采用分配系数(脂溶性)和渗透压作为地加瑞克注射部位不适症状(具体的包括给药部位的肿胀，疼痛，瘙痒及发热症状)缓解情况的考察指标。地加瑞克组合物脂溶性越好，地加瑞克组合物皮下组织相容性更好，刺激组胺释放的量会变少，给药部位的肿胀，瘙痒和发热症状会得到缓解。渗透压较大时，地加瑞克组合物和周围组织液的压差变大，易导致患者注射处痛感加剧。
[0138]
采用分配系数法评估地加瑞克组合物脂溶性的差异。用10ml离心管分别盛装3ml的水和4ml的氢化植物油，加入1ml的测试样品(其中实施例1-7所得的冻干样品和对比例1样品加入1ml注射用水复溶，复溶后地加瑞克的浓度为20mg/ml)，充分震荡10min后，静置至出现两相明显分层，分别取水中和氢化植物油中的少量样品，采用高效液相色谱法测定地加瑞克在水中和氢化植物油中的含量，得到分配系数f(氢化植物油中地加瑞克的含量/水中地加瑞克的含量)的大小，结果如表1所示。
[0139]
表1.测试样品分配系数的测定结果
[0140]
样品分配系数(f)实施例10.326实施例20.417实施例30.458实施例40.423
实施例50.487实施例60.375实施例70.443实施例80.463实施例90.459实施例100.477实施例110.491实施例120.482对比例10.187
[0141]
实施例1-4结果表明不同种类的钾盐对地加瑞克组合物的脂溶性影响不大，由于醋酸钾更易和处方中加入的冰醋酸形成缓冲离子对，优选醋酸钾作为ph调节剂。从表1可以看出，实施例1-12制得的注射用含地加瑞克的药物组合物的分配系数高于市售原研组(对比例1)，说明本发明注射用含地加瑞克的药物组合物脂溶性优于原研处方。本发明注射用含地加瑞克的药物组合物脂溶性增加，使其能够较快通过皮下组织，从而减少注射后地加瑞克在皮下组织通透性差而导致的组胺的释放，进而减少注射部位的肿胀，瘙痒及发热症状。
[0142]
以渗透压作为指标考察地加瑞克组合物的渗透性行为。将实施例1-7所得的冻干样品和对比例1样品加入3ml注射用水复溶待测(复溶后地加瑞克的浓度为20mg/ml)，取实施例8-12样品3ml待测，分别使用渗透压测定仪测定测试样品的渗透压，结果如表2所示。
[0143]
表2.测试样品渗透压的测定结果
[0144]
样品渗透压(mosmol/kg)实施例1356实施例2298实施例3258实施例4316实施例5287实施例6335实施例7297实施例8276实施例9282实施例10296实施例11290实施例12274对比例1395
[0145]
从表2可以看出，实施例1-12制得的注射用含地加瑞克的药物组合物的渗透压低于对比例1，低于市售原研组。当渗透压较低时，其和皮下组织体液的压差变小，体液渗透现象得到缓解，能够有效缓解由于产品注射导致的注射部位疼痛症状的发生。实施例1-12相比于对比例1渗透压较低的原因主要有两点：1)加入甘油后，地加瑞克的溶解性得到提高，地加瑞克分子不会相互交联聚集，而是形成单个分子，和聚集形成的大分子相比，单个分子
产生的渗透压更小；2)加入甘油后，地加瑞克的溶解性得到提高，粘度降低，表面张力变小，更易透过皮肤表层的细胞，使得在皮肤表层暂时形成的溶液浓度偏低，渗透压下降。
[0146]
此外，实施例1-12制得的注射用含地加瑞克的药物组合物渗透压的测定结果与分配系数的测定结果也具有较好的一致性。
[0147]
实施例14实施例1-12制得的注射用含地加瑞克的药物组合物对室性心律失常改善作用的考察(心室细胞的qtc间期时长)
[0148]
测试样品：实施例1-12制得的注射用含地加瑞克的药物组合物和对比例1。
[0149]
利用犬心室组织细胞电生理活动模型开展室性心律失常的相关电生理研究，通过增高细胞外na
+
浓度构建心室细胞心动过速模型，考察实施例1-12制得的注射用含地加瑞克的药物组合物对心室细胞心律失常症状的缓解作用。采用膜片钳技术记录膜电位电势，从而测量心室细胞心律失常模型的症状，将qtc间期时间大于450ms记录为尖端扭转型室性心动过速症状的考察指标。
[0150]
使用膜电位电势法测量qtc间期时间。采用单细胞膜片钳技术构建犬心室细胞离子通道电势变化的细胞模型。具体步骤如下：
[0151]
选取纹理清晰，大小适中的细胞在细胞池(细胞池内充满台氏液：nacl 140mmol/l，kcl4mmol/l，cacl
2 1.8mmol/l，mgcl
2 0.5mmol/l，nah2po
4 0.33mmol/l)中培养，取单个细胞用10％的nacl溶液充分淋洗；将细胞置于通畅稳定的灌流槽内，玻璃电极连接注射器，使用注射器缓慢抽气从而在电极与细胞表面形成负压，形成高电阻封接后将电极探头刺破细胞膜，记录细胞电势(采用美国axon instrument的pclamp软件控制电势脉冲和数据采集)。当电势突然升高时，表面细胞膜破膜，电极片已经与细胞紧密接触，系统连接完成。采用市售原研组处方的溶液，实施例1-7和对比例1所得冻干粉配制的溶液(复溶后地加瑞克的浓度为20mg/ml)和实施例8-12所得溶液分别进行灌流，灌流速度为1.5ml/min。膜片钳接信号放大器(美国dagan 8900)，并将信号变化记录于电脑中。结果如表3所示。
[0152]
表3.测试样品qtc间期时间的测定结果
[0153]
样品qtc间期(ms)实施例1460实施例2461实施例3468实施例4455实施例5460实施例6465实施例7452实施例8357实施例9420实施例10399实施例11381实施例12450对比例1482
[0154]
通常认为qtc间期超过450ms即可认为存在尖端扭转型室性心动过速的风险。从表
3可以看出，实施例1-12制得的注射用含地加瑞克的药物组合物的qtc间期时间均低于市售原研组(对比例1)，和对照组相比qtc间期显著缩短，对由于地加瑞克引起的尖端扭转型室性心动过速症状具有显著的改善作用。当注射用含地加瑞克的药物组合物中醋酸钾的浓度为12-24mg/3ml，且用冰醋酸调节ph值至4.3-5.3时，心室细胞的qtc间期不会超过450ms。
[0155]
以上所述仅为本发明的具体实施方式，不是全部的实施方式，本领域普通技术人员通过阅读本发明说明书而对本发明技术方案采取的任何等效的变换，均为本发明的权利要求所涵盖。