一种手消毒剂及其制备方法与流程

本发明涉及消毒剂技术领域，具体涉及一种手消毒剂及其制备方法。

背景技术：

消毒剂用于杀灭传播媒介上病原微生物，使其达到无害化要求，将病原微生物消灭于人体之外，切断传染病的传播途径，达到控制传染病的目的；目前市面上的大部分手部消毒剂制作简单、售价便宜但同时功能比较单一，只能简单使用。

蚕蛹体内含有多种天然抗菌物质以及柞蚕天然抗菌物质，用重组抗菌肽基因生产只能分离出一种抗菌肽，不能有效的利用蚕蛹体内多种的抗菌物质。

抗菌肽是广泛存在于自然界生物体中的小分子活性肽，与传统的抗生素相比具有分子量小，广谱抗菌，抗菌机理独特等优点。不仅对细菌，真菌，病毒，支原体，衣原体，螺旋体及一些活性细胞具有杀伤活性，还具有抗感染，免疫调节，信号转导等生物学功能，蜂毒肽易溶于水，它在蜂毒中起主要的药理作用，是目前人类所知抗炎性最强的物质之一。它具有类似激素的作用，却不具有激素的不良反应。此外，亦具抑菌、抗辐射、抗病毒等作用；抗菌肽虽然具有极强的抗菌作用，但是其抗菌活性并不能一直保持，抗菌肽的抗菌活性受很多因素的影响，例如：环境因素、温度、复配物等。

技术实现要素：

本发明提供一种手消毒剂及其制备方法，所述的手消毒剂具有良好的杀菌作用，通过家蚕蛹提取物、抗菌肽协同杀菌，并辅以具有一定杀菌能力的表面活性剂，保持家蚕蛹提取物的活性。

本发明解决其技术问题采用以下技术方案：

一种手消毒剂，所述手消毒剂由以下重量份原料组成：5~8份表面活性剂、2~4份聚乙二醇-2000、0.2~0.4份家蚕蛹提取物、0.5~1.5份琥珀酸、0.5~1份海藻酸钠、0.3~0.6份甜菜碱、0.01~0.03份抗菌肽、80~90份去离子水。

作为一种最优选方案，所述手消毒剂由以下重量份原料制成：6份表面活性剂、3份聚乙二醇-2000、0.3份家蚕蛹提取物、0.8份琥珀酸、0.6份海藻酸钠、0.4份甜菜碱、0.02份抗菌肽、85份去离子水。

作为一种优选方案，所述抗菌肽为防御素、蜂毒肽中的一种或两种。

作为一种最优选方案，所述抗菌肽为蜂毒肽。

本发明的申请人在实验中意外发现，蜂毒肽与家蚕蛹提取物具有协同作用，蜂毒肽不仅自身具备杀菌效果，还能提高家蚕蛹提取物的杀菌效果，二者具有协同增效效果。

作为一种优选方案，所述表面活性剂为十二烷基苯磺酸钠、十二烷基磺酸钠、α-烯基磺酸钠、烷基糖苷、吐温60、吐温80中的一种或多种。

作为一种优选方案，所述表面活性剂为烷基糖苷、α-烯基磺酸钠、吐温60按照重量比1：1~1.5：2~3混合。

作为一种最优选方案，所述表面活性剂为烷基糖苷、α-烯基磺酸钠、吐温60按照重量比1：1.2：2.5混合。

作为一种优选方案，所述家蚕蛹提取物的制备方法为：

（1）将家蚕蛹在40~50khz的频率、350~450w的超声波发生器中处理20~40min，超声处理后，将家蚕蛹放入40~60℃恒温箱中4~6d；

（2）将家蚕蛹在8~12wt%的丙酮水溶液中浸泡10~14h，将家蚕蛹冷冻干燥，粉碎至150~250目，得到粗家蚕蛹粉；

（3）将粗家蚕蛹粉加入到无水乙醇中，置于50~70℃水浴中20~40min，离心，干燥，得到家蚕蛹粉；

（4）按照重量比1：3~5将家蚕蛹粉加入到去离子水中，得到混合溶液，按照重量比1：1~1.2在混合溶液加入石油醚萃取，收集萃取相，减压浓缩至1.0~1.5g/ml，干燥，即得所述的家蚕蛹提取物。

作为一种优选方案，所述步骤（3）中粗家蚕蛹粉与无水乙醇的重量比为1：4~6。

作为一种最优选方案，所述步骤（3）中粗家蚕蛹粉与无水乙醇的重量比为1：5。

本发明还提供了一种手消毒剂的制备方法，包含以下步骤：

（1）将表面活性剂加入到去离子水中，加热到70~90℃，搅拌均匀；

（2）降温至50~65℃，加入琥珀酸、海藻酸钠、甜菜碱，搅拌均匀；

（3）降温至35~45℃，加入聚乙二醇-2000、家蚕蛹提取物、抗菌肽，搅拌均匀，即得所述的手消毒剂。

蜂毒肽与家蚕蛹提取物的最佳配比确认，先定量家蚕蛹提取物的份数0.3份，按照重量份配比称取6份表面活性剂、3份聚乙二醇-2000、0.3份家蚕蛹提取物、0.8份琥珀酸、0.6份海藻酸钠、0.4份甜菜碱、85份去离子水，所述表面活性剂为十二烷基苯磺酸钠、烷基糖苷、吐温80按照重量比1:2:3混合；在上述配方的基础上，分别添加0份蜂毒肽、0.005份蜂毒肽、0.010份蜂毒肽、0.015份蜂毒肽、0.020份蜂毒肽、0.025份蜂毒肽、0.030份蜂毒肽、0.35份蜂毒肽，分别制备成消毒剂，测试其对依据2008年版《消毒技术规范》规定的悬液定量杀菌试验，上述制备的消毒剂对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌的杀菌效果，具体检测方法及结果如下。

实验菌种：白色葡萄球菌(8032)、金黄色葡萄球菌（atcc6538）、。

操作方法：将上述四种菌的12小时液体培养物，用无菌棉签分别均匀涂布于普通平板表面，稍干，以无菌镊子夹取吸有定量样品药液的药敏纸片，平铺于上述已接种细菌的平板表面，一个平板放3块药敏纸片，置37℃培养，2小时后观察并记录结果。试验结果见图1；其中，杀菌率=（消毒前样本平均菌数-消毒后样本平均菌数）/消毒前样本平均菌数。

结果表明，虽然，在蜂毒肽的重量份在0.010份、0.015份时已经达到很好效果，但是还没有达到最高的峰值，蜂毒肽的重量份在0.020时达到峰值，所以最佳配比为蜂毒肽重量份为0.020份。

本发明的有益效果：（1）本发明所述的手消毒剂由表面活性剂、聚乙二醇-2000、家蚕蛹提取物、琥珀酸、海藻酸钠、甜菜碱、抗菌肽、去离子水制成，对大肠杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的杀菌率均能达到99.99%；（2）所述的手消毒剂有效杀菌成分为家蚕蛹提取物、抗菌肽，本发明所述的表面活性剂本身对细菌具有一定的杀伤力，更大作用体现在能够辅助家蚕蛹提取物对于细菌的杀伤能力，且能够很好的保护其有效成分长期存在不失活，在配方中能起到活性保护剂的作用，家蚕蛹提取物、抗菌肽、表面活性剂三者具有协同增效作用；（3）所述的手消毒剂配比科学，杀菌效果好，且不会产生抗药性。

附图说明

图1为不同蜂毒肽配比下的杀菌率，其中柱状图左柱为白色葡萄球菌杀菌率，右柱为金黄色葡萄球菌杀菌率。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明所述的防御素购于广州和仕康生物技术有限公司；所述蜂毒肽购于广州思益生物科技有限公司代理的浙江湃肽生物有限公司产品。

实施例1

一种手消毒剂，所述手消毒剂由以下重量份原料制成：6份表面活性剂、3份聚乙二醇-2000、0.3份家蚕蛹提取物、0.8份琥珀酸、0.6份海藻酸钠、0.4份甜菜碱、0.02份抗菌肽、85份去离子水。

所述抗菌肽为蜂毒肽。

所述表面活性剂为烷基糖苷、α-烯基磺酸钠、吐温60按照重量比1：1.2：2.5混合。

所述家蚕蛹提取物的制备方法为：

（1）将家蚕蛹在45khz的频率、400w的超声波发生器中处理30min，超声处理后，将家蚕蛹放入50℃恒温箱中5d；

（2）将家蚕蛹在10wt%的丙酮水溶液中浸泡12h，将家蚕蛹冷冻干燥，粉碎至200目，得到粗家蚕蛹粉；

（3）将粗家蚕蛹粉加入到无水乙醇中，所述粗家蚕蛹粉与无水乙醇的重量比为1：5，置于60℃水浴中30min，离心，干燥，得到家蚕蛹粉；

（4）按照重量比1：4将家蚕蛹粉加入到去离子水中，得到混合溶液，按照重量比1：1.1在混合溶液加入石油醚萃取，收集萃取相，减压浓缩至1.2g/ml，干燥，即得所述的家蚕蛹提取物。

所述的手消毒剂的制备方法，包含以下步骤：

（1）将表面活性剂加入到去离子水中，加热到80℃，搅拌均匀；

（2）降温至60℃，加入琥珀酸、海藻酸钠、甜菜碱，搅拌均匀；

（3）降温至40℃，加入聚乙二醇-2000、家蚕蛹提取物、抗菌肽，搅拌均匀，即得所述的手消毒剂。

实施例2

一种手消毒剂，所述手消毒剂由以下重量份原料组成：5份表面活性剂、2份聚乙二醇-2000、0.2份家蚕蛹提取物、0.5份琥珀酸、0.5份海藻酸钠、0.3份甜菜碱、0.01份抗菌肽、80份去离子水。

所述抗菌肽为防御素、蜂毒肽按照重量比1:1混合。

所述表面活性剂为十二烷基苯磺酸钠、烷基糖苷、吐温80按照重量比1:2:3混合。

所述家蚕蛹提取物的制备方法为：

（1）将家蚕蛹在40khz的频率、350w的超声波发生器中处理20min，超声处理后，将家蚕蛹放入40℃恒温箱中4d；

（2）将家蚕蛹在8wt%的丙酮水溶液中浸泡10h，将家蚕蛹冷冻干燥，粉碎至150目，得到粗家蚕蛹粉；

（3）将粗家蚕蛹粉加入到无水乙醇中，所述粗家蚕蛹粉与无水乙醇的重量比为1：4，置于50℃水浴中20min，离心，干燥，得到家蚕蛹粉；

（4）按照重量比1：3将家蚕蛹粉加入到去离子水中，得到混合溶液，按照重量比1：1在混合溶液加入石油醚萃取，收集萃取相，减压浓缩至1.0g/ml，干燥，即得所述的家蚕蛹提取物。

所述的手消毒剂的制备方法，包含以下步骤：

（1）将表面活性剂加入到去离子水中，加热到80℃，搅拌均匀；

（2）降温至60℃，加入琥珀酸、海藻酸钠、甜菜碱，搅拌均匀；

（3）降温至40℃，加入聚乙二醇-2000、家蚕蛹提取物、抗菌肽，搅拌均匀，即得所述的手消毒剂。

实施例3

一种手消毒剂，所述手消毒剂由以下重量份原料组成：7份表面活性剂、4份聚乙二醇-2000、0.4份家蚕蛹提取物、1.5份琥珀酸、1份海藻酸钠、0.5份甜菜碱、0.03份抗菌肽、90份去离子水。

所述抗菌肽为防御素。

所述表面活性剂为吐温60。

所述家蚕蛹提取物的制备方法为：

（1）将家蚕蛹在50khz的频率、450w的超声波发生器中处理40min，超声处理后，将家蚕蛹放入60℃恒温箱中6d；

（2）将家蚕蛹在12wt%的丙酮水溶液中浸泡14h，将家蚕蛹冷冻干燥，粉碎至250目，得到粗家蚕蛹粉；

（3）将粗家蚕蛹粉加入到无水乙醇中，所述粗家蚕蛹粉与无水乙醇的重量比为1：4~6；置于70℃水浴中40min，离心，干燥，得到家蚕蛹粉；

（4）按照重量比1：5将家蚕蛹粉加入到去离子水中，得到混合溶液，按照重量比1：1.2在混合溶液加入石油醚萃取，收集萃取相，减压浓缩至1.5g/ml，干燥，即得所述的家蚕蛹提取物。

所述的手消毒剂的制备方法，包含以下步骤：

（1）将表面活性剂加入到去离子水中，加热到80℃，搅拌均匀；

（2）降温至60℃，加入琥珀酸、海藻酸钠、甜菜碱，搅拌均匀；

（3）降温至40℃，加入聚乙二醇-2000、家蚕蛹提取物、抗菌肽，搅拌均匀，即得所述的手消毒剂。

对比例1

对比例1与实施例1不同之处在于，对比例1不含有家蚕蛹提取物，其它都相同。

对比例2

对比例2与实施例1不同之处在于，对比例2不含有抗菌肽，其它都相同。

对比例3

对比例3与实施例1不同之处在于，对比例3不含有表面活性剂，其它都相同。

对比例4

对比例4与实施例1不同之处在于，对比例4所述的家蚕蛹提取物与实施例1不同，其它都相同。

所述家蚕蛹提取物的制备方法为：

（1）将家蚕蛹在12wt%的丙酮水溶液中浸泡14h，将家蚕蛹冷冻干燥，粉碎至250目，得到粗家蚕蛹粉；

（2）将粗家蚕蛹粉加入到无水乙醇中，所述粗家蚕蛹粉与无水乙醇的重量比为1：4~6；置于70℃水浴中40min，离心，干燥，得到家蚕蛹粉；

（3）按照重量比1：5将家蚕蛹粉加入到去离子水中，得到混合溶液，按照重量比1：1.2在混合溶液加入石油醚萃取，收集萃取相，减压浓缩至1.5g/ml，干燥，即得所述的家蚕蛹提取物。

对比例5

对比例5与实施例1不同之处在于，对比例5所述的家蚕蛹提取物与实施例1不同，其它都相同。

（1）将家蚕蛹在45khz的频率、400w的超声波发生器中处理30min，超声处理后，将家蚕蛹放入50℃恒温箱中5d；

（2）将家蚕蛹在10wt%的丙酮水溶液中浸泡12h，将家蚕蛹冷冻干燥，粉碎至200目，得到粗家蚕蛹粉；

（3）按照重量比1：4将粗家蚕蛹粉加入到去离子水中，得到混合溶液，按照重量比1：1.1在混合溶液加入石油醚萃取，收集萃取相，减压浓缩至1.2g/ml，干燥，即得所述的家蚕蛹提取物。

为了进一步证明本发明的效果，提供了以下测试方法：

测试时，将所述的手消毒剂与去离子水按照重量比1：9混合，装于喷雾瓶中。

1.刺激性测试

取小白鼠40只，随机分成8组，每组5只，分别用毛刷沾取实施例1~3、对比例1~5所述的消毒剂于背部涂擦，直至被毛湿透为止，涂擦面积为3.5×3.5cm，2h后观察皮肤反应；若某组有小白鼠涂擦处出现充血、水肿、红肿现象即视为消毒剂有刺激性。

结果显示实施例1~3、对比例1~5所述的小白鼠都没有出现充血、水肿、红肿现象，可见实施例1~3、对比例1~5所述的消毒剂都没有刺激性。

2.杀菌试验

依据2008年版《消毒技术规范》规定的悬液定量杀菌试验，检测实施例1~3、对比例1~5制备的消毒剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的杀菌效果，具体检测方法及结果如下。

实验菌种：大肠杆菌(8099)、白色葡萄球菌(8032)、金黄色葡萄球菌（atcc6538）、铜绿假单胞菌（atcc15442）。

操作方法：将上述四种菌的12小时液体培养物，用无菌棉签分别均匀涂布于普通平板表面，稍干，以无菌镊子夹取吸有定量样品药液的药敏纸片，平铺于上述已接种细菌的平板表面，一个平板放3块药敏纸片，置37℃培养，2小时后观察并记录结果。试验结果见表1；其中，杀菌率=（消毒前样本平均菌数-消毒后样本平均菌数）/消毒前样本平均菌数。

表1杀菌率

从表1中可看出，本发明所述的消毒剂具有良好的灭菌效果，能有效的对大肠杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌进行杀菌，对比实施例1~3可知，家蚕蛹提取物制备参数和消毒剂原料的配比能在一定范围内影响消毒剂的杀菌效果；对比实施例1、对比例1可知，本发明所述的家蚕蛹提取物能够显著影响消毒剂对于大肠杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的灭杀；对比实施例1与对比例2可知，本发明所述的抗菌肽能够显著的提升本发明所述的消毒剂对于大肠杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的灭杀的灭杀；对比实施例1与对比例3可知，本发明所述的表面活性剂能够较为显著的提升本发明所述的消毒剂对于大肠杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的灭杀；其中抗菌肽的影响大于表面活性剂；可见，其中家蚕蛹提取物、抗菌肽、表面活性剂对于大肠杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的灭杀具有协同增效作用；对比实施例1与对比例4、5可知，本发明所述的家蚕蛹提取物的制备方法对于大肠杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌具有显著提升作用。

3.稳定性测试

将将实施例1~3、对比例1~5所述的消毒剂放置在55℃条件下30天再次测定其杀菌效果，测试方法为上述所述的方法，测试结果见表2。

表2稳定性测试结果

将表2的数据和表1的数据进行对比，可看出，实施例1~3、对比例1~2、对比例4~5所述的消毒剂在经过在55℃条件下30天后，对大肠杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的杀菌率几乎不会下降，但是对比例3所述的消毒剂下降显著，可见，本发明所述的表面活性剂的选取能够辅助家蚕蛹提取物、抗菌肽的杀菌，能够是家蚕蛹提取物保持活性。

4.耐药性测试

消毒试验场所为饲养者居室，首先以自然沉降法分别采集各试验场所空气中细菌样品，即各取5个普通琼脂平板，(每个平板表面积为58mm²)，分别放在上述场所的四周和中央，打开平板盖暴露10min后，盖好平板盖，置37℃恒温箱培养48h，计算菌落数并求出每立方米空气中所含细菌数。然后，用实施例1所述的消毒剂消毒，2h后再按上法测定细菌数一次，计算杀菌率，连续使用同一种消毒剂对饲养者居室进行消毒，连续使用时间为30天（从第一天试验起，隔三天对饲养者居室进行消毒一次），测定30天后消毒后2h内的杀菌率，测试结果见表3。

表3耐药性测试

从表3中看出，本发明所述的消毒剂能够有效的对室内进行消毒，第1天的消杀率达到了99.89%，在每隔三天使用一次的情况下，第31天的消杀率为99.82%，可见使用本发明所述的消毒剂不会产生抗药性。

以上述依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。