牛活体采卵用的操作间的制作方法

本实用新型属于生物技术领域，涉及一种活体采卵的方法，尤其是涉及一种用于牛活体采卵的操作间。

背景技术：

胚胎培养技术对于家畜的繁殖潜力挖掘、快速扩繁以及种质资源保护具有重要的价值。影响胚胎体外培养和体外胚胎保存的因素有很多，其中卵母细胞体外成熟、体外受精、早期胚胎体外培养以及胚胎冷冻是体外胚胎生产过程中的四个个主要环节。

牛活体取卵(opu)是继体外受精(ivf)和胚移植(et)之后的用于牛胚胎实验操作和生产繁殖的一项非常实用的胚胎工程技术。在20世纪80年代报道在b超监视下施行牛活体取卵操作以来，这项技术已被广泛用于牛胚胎体外生产。牛活体取卵这项技术具有应用广泛、操作便利、高效和可重复性以及损伤小等优点。通过联合应用牛活体取卵和体外受精这两种技术，可充分提高良种牛的繁殖潜力和大量生产高质量的胚胎。

牛活体取卵为体外生产高品质牛胚胎提供了一个有价值的方法。随着牛基因组测序的完成，以及新的数量性状位点的绘制，通过牛活体取卵回收具有清晰遗传背景的卵母细胞，将为在分子水平上研究牛胚胎发育提供宝贵的实验材料，并最终为生产优质牛胚胎产生显著的经济和实用价值。

随着现代农业科技的发展，为了更充分利用良种母牛的繁殖潜力，加速遗传育种进程，在生产实践中应用高效的繁殖新技术成为必然。活体采卵(ovumpickup，opu)和体外受精技术(invitrofertilization，ivf)是二十世纪八十年代快速发展起来的胚胎工程新技术，二者相结合可获得大量遗传系谱明确的胚胎，从而缩短世代间隔。目前，这两种技术已经成为欧美和大洋洲等畜牧业发达国家的农场主为扩大良种母牛群而采用的重要繁殖技术。然而，采用常规的牛胚胎培养体系(cr1aa和sof液)，牛体外受精的囊胚发育率较低，而且胚胎质量也远不及体内胚胎，导致胚胎移植受体后的妊娠率低，因此如何提高囊胚发育率及胚胎质量成为体外受精胚胎生产的重点和研究的焦点。

牛活体取卵的一项重要工具是源于人类临床上常用的b超原理设计的兽用b超诊断仪。b超诊断对提高畜牧业的管理水平，促进畜牧业经济发展有重要的意义。使用兽用b超诊断技术来评价水牛繁殖力，可使我们在发情周期和怀孕中了解和认识水牛卵巢与子宫的状态，更好地提高繁殖性能和推进动物遗传进程。

cn208876884u(申请号201820459315.6，奥克斯)公开了一种奶牛活体采卵保定架，据信其解决了现有技术中保定架不能根据奶牛体型进行调整、需要额外配置清洗装置的问题，具有能牢固固定奶牛、自身稳定性高、能与清洗设备结合且能广泛适用于不同体型奶牛的效果；其技术方案为：包括与地面固定的架体，所述架体包括第一固定围栏和第二固定围栏，第一固定围栏和第二固定围栏之间通过具有凹槽的顶部横撑相连；所述凹槽的内部布设连接有淋浴喷头的水管，所述淋浴喷头置于第一固定围栏的上方；第一固定围栏的内侧设有滑动围栏，所述滑动围栏上固定有保定绳，第二固定围栏上具有多个与保定绳配合的螺栓，所述第二固定围栏的内侧设有垫板。

cn208625916u(申请号201820574924.6，川农)涉及一种兽医用器械，具体涉及一种可移动柱栏式牛用保定架，包括左围栏、右围栏、后围栏，其特征是左围栏、右围栏和后围栏围成保定架整体，左围栏和右围栏平行对称，前端均为前柱，后端均为后柱，上端均为上栏，下端均为下栏，上栏和下栏之间均设有一中栏，后围栏上端为上杆，下端为下杆，上杆和下杆之间设有一中杆。据信该装置本身结构简单、移动方便、适用广泛、实用性强。

cn204581585u(申请号：201520180375.0，牧业)涉及一种多功能可拆卸奶牛用保定架，适于奶牛兽医临床诊断、治疗、手术、修蹄及保定的需要。包括底座和柱栏，其中柱栏由多个竖向固定杆、横向固定杆和纵向固定杆组成，所述底座至少由两部分构成，且相邻两部分之间为可拆卸式固定连接，所述柱栏各固定杆之间通过固定扣及紧固件固定连接，所述底座两侧对应各竖向固定杆匹配设置有插接套管，所述柱栏上同时设有用于头部固定的颈枷、修蹄工具和前、后保定链以及腹带、胸带。本实用新型突破了传统保定栏的固有模式，兽医人员可根据需要调整大小和安装方式，对奶牛进行保定和诊治，并且携带、运输方便；并且占地面积小，灵活性高，适用范围广，使用方便，其造价低，适于推广实施。

然而，由于牛的体量较大，现有的活体采卵操作台/间存在这样或者那样的不足，因此提供一种新型的牛活体采卵用的操作间以克服现有操作间的某种或某些缺点，仍然是本领域技术人员迫切期待的。

技术实现要素：

本申请的目的在于提供一种牛活体采卵用的操作间，期待该种新型的牛活体采卵用的操作间能够克服现有操作间的某种或某些缺点，尤其是例如在对牛进行活体采卵期间由于牛被麻醉而无法站立的情况下如何仍然能够保持牛的身体直立的问题。已经发现，本申请的牛活体采卵用的操作间的设计能够完美地解决上述问题。

为此，本申请一方面提供了一种牛活体采卵用的操作间，(如图1和图2所示，图1是操作间的俯视示意图，图2是保定架中设置的支撑架和后腿定位棒在牛的头部、腹部和后腿部的相对位置示意图)，包括：

采卵室，在其前部外墙设置便于观察的玻璃窗和用于操作人员出入的人行门，采卵室内的前部设置饲牛区和为牛提供饲料的采食槽，采卵室内的中部设置用于固定牛的保定架，采卵室内的后部为采卵操作区；

无菌捡卵室，其与采卵室隔墙设置，无菌捡卵室前部外墙设置便于观察的玻璃窗和用于操作人员出入的人行门，通过推拉门将无菌捡卵室前部隔离设置为更衣间、后部隔离设置为捡卵间，捡卵间与采卵室之间的墙上设置传递窗用于将采卵室采集的牛卵传递到捡卵间进行捡卵，捡卵间设置用于进行捡卵操作的实验台；

采卵室后部墙外设置牛群区，通过升降门将牛群区与采卵室分隔开，牛群区设置待采牛群区和已采牛群区，二者通过活动门分隔开；

其特征在于，

保定架并排设置有1～5套(例如1～4套，例如2～3套，图1中显示的是2套，可以同时进行两头牛的采卵操作)；

保定架中部位于牛腹部处设置有支撑架以用于在牛被麻醉时将牛托举；

保定架后部设置后腿定位棒以用于在对牛进行采卵时通过移动该后腿定位棒使得牛的两条后腿向身体前部倾摆(如图2中箭头示意的)。

根据本申请所述牛活体采卵用的操作间，其特征在于，在所述采卵室前部的人行门入口的墙角处设置水池(以便于进行清洁)。

根据本申请所述牛活体采卵用的操作间，其特征在于，在所述采卵室前部的另一墙角处设置置物台。

根据本申请所述牛活体采卵用的操作间，其特征在于，在所述采卵室后部的墙角处设置采卵设备台。

根据本申请所述牛活体采卵用的操作间，其特征在于，在所述采卵室后部的采卵操作区与保定架之间通过升降门分隔开。

根据本申请所述牛活体采卵用的操作间，其特征在于，在所述采卵室后部通过活动门将所述采卵操作区分隔成不同的小区域。

根据本申请所述牛活体采卵用的操作间，其特征在于，在所述保定架前部设置颈夹以用于采卵时将牛的颈部夹牢。

根据本申请所述牛活体采卵用的操作间，其特征在于，在所述无菌捡卵室前部的人行门入口的墙角处设置水池(以便于进行清洁)。

根据本申请所述牛活体采卵用的操作间，其特征在于，在所述无菌捡卵室前部的另一墙角处设置衣帽柜。

根据本申请所述牛活体采卵用的操作间，其特征在于，在捡卵间实验台的一端设置水池(以便于进行清洁)。

本申请的保定架可以采用本领域已知的设计方案，然而在本申请的保定架中还设置支撑架和后腿定位棒，前者用于在牛被麻醉时将牛托举，后者用于在对牛进行采卵时通过移动该后腿定位棒使得牛的两条后腿向身体前部倾摆(如图2中箭头示意的)。已经出人意料地发现，通过设置后腿定位棒，使其预先于置于后腿的后部，然后使后腿定位棒向牛身体前方移动，使得后腿向前倾摆，牛处理这种状态时在用b超诊断仪配合活体采卵时能够更容易地使采卵针接近卵泡。另一方面，由于在进行采卵时会向牛注射麻醉剂，牛失去知觉后在其腹部提供将牛托举的支撑架是有益的。

采卵操作可以参照本领域公知的方法进行。

本申请任一方面或该任一方面的任一实施方案所具有的任一技术特征同样适用其它任一实施方案或其它任一方面的任一实施方案，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。下面对本申请的各个方面和特点作进一步的描述。

本申请所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本申请不一致时，以本申请的表述为准。此外，本申请使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本申请仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本申请所表述的含义为准。

在本申请中，表示方向的术语，可以结合说明书描述和附图来理解，例如表述牛的“前”方向时，是指牛身体头部方向为“前”，又例如在在描述采卵室的“前”和“后”时，相对而言，饲牛区是“前”，而采卵操作区为“后”。

附图说明

图1是本申请的牛活体采卵用的操作间的俯视示意图。

图2是保定架中设置的支撑架18和后腿定位棒24在牛的头部、腹部和后腿部的相对位置示意图。

本申请涉及的一些附图标记汇总如下：采卵室1、玻璃窗11、人行门12、饲牛区13、水池14、置物台15、采食槽16、颈夹17、支撑架18、采卵设备台19、升降门20、活动门21、待采牛群区22、已采牛群区23、后腿定位棒24、保定架25、采卵操作区26、无菌捡卵室3、玻璃窗31、人行门32、更衣间33、水池34、衣帽柜35、推拉门36、实验台37、捡卵间38、水池39、传递窗40。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本申请进行进一步的描述，然而，本申请的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本申请的精神和范围的前提下，可以对本申请进行各种变化和修饰。本申请对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本申请目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本申请仍然在此作尽可能详细描述。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。

结合附图来进一步对本申请进行描述。图1是本申请的牛活体采卵用的操作间的俯视示意图。图2是保定架中设置的支撑架18和后腿定位棒24在牛的头部、腹部和后腿部的相对位置示意图。

一个示例性的牛活体采卵用的操作间，如图1和图2所示，包括：采卵室1，在其前部外墙设置便于观察的玻璃窗11和用于操作人员出入的人行门12，采卵室1内的前部设置饲牛区13和为牛提供饲料的采食槽16，采卵室1内的中部设置用于固定牛的保定架25，采卵室1内的后部为采卵操作区26；无菌捡卵室3，其与采卵室1隔墙设置，无菌捡卵室3前部外墙设置便于观察的玻璃窗31和用于操作人员出入的人行门32，通过推拉门36将无菌捡卵室3前部隔离设置为更衣间33、后部隔离设置为捡卵间38，捡卵间38与采卵室1之间的墙上设置传递窗40用于将采卵室1采集的牛卵传递到捡卵间38进行捡卵，捡卵间38设置用于进行捡卵操作的实验台37；采卵室1后部墙外设置牛群区，通过升降门20将牛群区与采卵室1分隔开，牛群区设置待采牛群区22和已采牛群区23，二者通过活动门21分隔开；其中，保定架25并排设置有1～5套(例如1～4套，例如2～3套，图1中显示的是2套，可以同时进行两头牛的采卵操作，还可以根据牛群规模、操作人员数量、操作间大小进行调整)；保定架25中部位于牛腹部处设置有支撑架18以用于在牛被麻醉时将牛托举；保定架25后部设置后腿定位棒24以用于在对牛进行采卵时通过移动该后腿定位棒24使得牛的两条后腿向身体前部倾摆(如图2中箭头示意的，已经出人意料地发现，通过设置后腿定位棒24，使其预先于置于后腿的后部，然后使后腿定位棒24向牛身体前方移动，使得后腿向前倾摆，牛处理这种状态时在用b超诊断仪配合活体采卵时能够更容易地使采卵针接近卵泡。还发现，倾摆的后腿与地面呈40～50度角时，能够达到最佳的采卵操作效果)。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在所述采卵室1前部的人行门12入口的墙角处设置水池14(以便于进行清洁)。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在所述采卵室1前部的另一墙角处设置置物台15。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在所述采卵室1后部的墙角处设置采卵设备台19。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在所述采卵室1后部的采卵操作区26与保定架25之间通过升降门20分隔开。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在所述采卵室1后部通过活动门21将所述采卵操作区26分隔成不同的小区域。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在所述保定架25前部设置颈夹17以用于采卵时将牛的颈部夹牢。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在所述无菌捡卵室3前部的人行门32入口的墙角处设置水池34(以便于进行清洁)。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在所述无菌捡卵室3前部的另一墙角处设置衣帽柜35。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在捡卵间38实验台37的一端设置水池39(以便于进行清洁)。

本申请的保定架可以采用本领域已知的设计方案，然而在本申请的保定架中还设置支撑架18和后腿定位棒24，前者用于在牛被麻醉时将牛托举，后者用于在对牛进行采卵时通过移动该后腿定位棒24使得牛的两条后腿向身体前部倾摆(如图2中箭头示意的)。已经出人意料地发现，通过设置后腿定位棒24，使其预先于置于后腿的后部，然后使后腿定位棒24向牛身体前方移动，使得后腿向前倾摆，牛处理这种状态时在用b超诊断仪配合活体采卵时能够更容易地使采卵针接近卵泡。另一方面，由于在进行采卵时会向牛注射麻醉剂，牛失去知觉后在其腹部提供将牛托举的支撑架18是有益的。

在本申请牛活体采卵用的操作间的一个优选实例中，在采卵室1和无菌捡卵室3中还可以安装空调，以备在气温低的时期使用。可以参照如下方法使用本申请的牛活体采卵用操作间。首先打开采卵间和捡卵间空调，将室内温度升高到20-25度(针对春秋冬季)，夏季可在室温下操作，做好采卵前相关准备工作，如在采卵间采食槽内添加可口饲草料，连接好采卵设备，无菌捡卵室可以采用紫外照射杀菌处理10-15分钟，打开捡卵室水浴锅、显微镜、加热台预热；将待采卵牛只赶入待采区，调整好采卵间内活动门，打开保温升降门，依次将2头待采卵牛只赶入相应保定架内，关闭升降门，调整保定架使牛只完全保定；麻醉牛只，按照流程进行采卵操作，第1头牛采集完毕后，通过传递窗将回收液送入捡卵室后，第2头牛开始采卵；捡卵室拿到回收液之后标记好牛号，开始冲洗等捡卵操作，第1头牛完成后即可放入培养箱进行预成熟培养；待第2头牛采卵完成之后，打开升降门，调整门外活动门，将两头牛放出到已采区，然后调整活动门，再次赶入2头待采牛只，依次完成所有采卵操作；最后结束后将所有已采牛只赶回原牛舍。

目前牛活体采卵工作主要是在牛舍内通过移动式保定架或者固定式保定架保定好牛只之后，进行采卵操作，完成之后将回收液送到实验室进行捡卵，一般存在一定的运送距离，本申请将活体采卵操作间和捡卵操作间设计在一起，一方面保证活体采卵工作全程在室内完成，避免室内外温度变化对卵母细胞质量的影响，另一方面减少回收液室外运输时间，保证卵母细胞采集出体外之后能够尽快被捡出并放入培养箱。通过使用本申请的牛活体采卵用的操作间，能够减少每头牛的平均处理时间(每头牛可减少5-10分钟处理时间)，提高卵母细胞可用率(提高10％-20％)，提高卵裂率(提高5％-10％)。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本申请作了详尽的描述，但在本申请基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本申请精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本申请要求保护的范围。