脂质组合物的制作方法

1.本发明涉及一种包含脂质及核酸的脂质组合物。


背景技术：

2.由于一直开发能够将核酸递送至细胞的技术，因此正在积极进行核酸医药品的开发。作为核酸的递送技术之一，已知有给药在颗粒(脂质体或脂质颗粒)中内含核酸的含核酸颗粒的方法。在该技术中，使用具有氨基等且在低ph下成为阳离子的脂质来制备含核酸颗粒，通过对颗粒赋予适当的电荷来实现核酸的递送。例如，作为含于脂质颗粒中的化合物，在专利文献1中公开有一种具有酯基、缩醛基等来作为连接脂肪族基团和氨基的连接基的化合物。在专利文献2中公开有一种具有乙烯氧基或酰胺基、肟基等来作为连接脂肪族基团和氨基的连接基的化合物。另外，在本说明书中，有时将上述具有氨基等且在低ph下成为阳离子的脂质称为阳离子性脂质。
3.并且，在专利文献3中记载有一种用于将生物学活性剂递送至细胞及组织的阳离子性脂质。在专利文献4中记载有一种包含称为dlin-mc3-dma的化合物的脂质纳米颗粒作为阳离子性脂质。
4.进而，对变更制造含核酸颗粒时使用的脂质化合物的种类及组成比也进行了研究。在专利文献5中记载有一种核酸-脂质颗粒，其包含(a)核酸；(b)构成存在于颗粒中的总脂质的约50mol％～约85mol％的阳离子性脂质；(c)构成存在于颗粒中的总脂质的约13mol％～约49.5mol％的非阳离子性脂质；及(d)构成存在于颗粒中的总脂质的约0.5mol％～约2mol％的阻碍颗粒的凝集的复合化脂质。在专利文献6中记载有一种脂质制剂，其包含40～65％的特定结构的阳离子性脂质、5～10％的中性脂质、25～40％的固醇及0.5～10％的peg或peg修饰脂质。
5.以往技术文献
6.专利文献
7.专利文献1：国际公开公报2010/054401号小册子
8.专利文献2：国际公开公报2010/054405号小册子
9.专利文献3：国际公开公报2015/095340号小册子
10.专利文献4：美国公开公报2013/0245107号小册子
11.专利文献5：国际公开公报2009/127060号小册子
12.专利文献6：国际公开公报2010/144740号小册子


技术实现要素：

13.发明要解决的技术课题
14.如上所述，有关于包含脂质及核酸的脂质组合物的汇报，但期望能够递送广泛种类的核酸的脂质组合物。并且，已知具有氨基的脂质具有毒性，因此要求能够进一步有效地递送核酸的技术。
15.本发明鉴于这种情况，其欲解决的课题在于提供一种对广泛种类的核酸能够实现优异的核酸递送的脂质组合物。
16.用于解决技术课题的手段
17.本发明的发明人为了解决上述课题而进行深入研究的结果确认到，在包含作为式(1)所表示的脂质或其盐的第1脂质、固醇类及核酸的脂质组合物中，通过将脂质组合物中的第1脂质的摩尔数与脂质组合物中的固醇类的摩尔数之比设为0.300以上且小于1.299，能够实现优异的核酸递送，从而完成了本发明。根据本发明，可提供以下发明。
18.＜1＞一种脂质组合物，其包含作为式(1)所表示的脂质或其盐的第1脂质、固醇类及核酸，在所述脂质组合物中，
19.脂质组合物中的第1脂质的摩尔数与脂质组合物中的固醇类的摩尔数之比为0.300以上且小于1.299，
20.[化学式1]
[0021][0022]
式中，x表示-nr
1-或-o-，
[0023]
r1表示氢原子、碳原子数6～24的烃基或r
21-l
1-r
22-所表示的基团，r
21
表示碳原子数1～24的烃基，l1表示-o(co)o-、-o(co)-、-(co)o-、-o-或
[0024]
[化学式2]
[0025][0026]r22
为2价的连接基，表示碳原子数1～18的烃连接基，
[0027]
r2及r3分别独立地表示氢原子、碳原子数3～24的烃基或r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r
31
表示碳原子数1～24的烃基，l2表示-o(co)o-、-o(co)-、-(co)o-、-o-或
[0028]
[化学式3]
[0029][0030]r32
为2价的连接基，表示碳原子数1～18的烃连接基，
[0031]
r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
及r
12
分别独立地表示氢原子或可以被取代的碳原子数1～18的烷基，
[0032]
r4与r5、r
10
与r5、r5与r
12
、r4与r6、r5与r6、r6与r7、r6与r
10
、r
12
与r7、以及r7与r8中的任意一组以上可以相互连接而形成可以包含o原子的4～7元环，
[0033]
可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，
[0034]
取代或未取代的芳基及取代或未取代的杂芳基上的取代基为碳原子数1～18的烷基、羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，
[0035]
a、b、c及d分别独立地表示0～3的整数，其中，a+b为1以上，c+d为1以上。
[0036]
＜2＞根据＜1＞所述的脂质组合物，其中，
[0037]
固醇类为胆固醇或其衍生物。
[0038]
＜3＞根据＜1＞或＜2＞所述的脂质组合物，其进一步包含具有非离子性亲水性高分子结构的脂质。
[0039]
＜4＞根据根据＜3＞所述的脂质组合物，其中，
[0040]
具有非离子性亲水性高分子结构的脂质为具有聚乙二醇结构的脂质。
[0041]
＜5＞根据＜4＞所述的脂质组合物，其中，
[0042]
具有聚乙二醇结构的脂质为具有二酰甘油结构和聚乙二醇结构的脂质。
[0043]
＜6＞根据＜3＞至＜5＞中任一项所述的脂质组合物，其中，
[0044]
具有非离子性亲水性高分子结构的脂质相对于全体脂质的含量为0.2～10摩尔％。
[0045]
＜7＞根据＜1＞至＜6＞中任一项所述的脂质组合物，其中，
[0046]
第1脂质相对于全体脂质的含量为20～55摩尔％。
[0047]
＜8＞根据＜1＞至＜7＞中任一项所述的脂质组合物，其中，
[0048]
固醇类相对于全体脂质的含量为20～70摩尔％。
[0049]
＜9＞根据＜1＞至＜8＞中任一项所述的脂质组合物，其中，
[0050]
核酸相对于全体脂质的含量为1～25质量％。
[0051]
＜10＞根据＜1＞至＜9＞中任一项所述的脂质组合物，其中，
[0052]
式(1)所表示的化合物为式(2)所表示的化合物。
[0053]
[化学式4]
[0054][0055]
式中，r2及r3分别独立地表示氢原子、碳原子数3～24的烃基或r
31-l
2-r
32-所表示的基团，
[0056]r31
表示碳原子数1～24的烃基，
[0057]
l2表示-o(co)o-、-o(co)-、-(co)o-、-o-或
[0058]
[化学式5]
[0059][0060]r32
为2价的连接基，表示碳原子数1～18的烃连接基，
[0061]
r5表示氢原子或可以被取代的碳原子数1～18的烷基，
[0062]
r7及r8分别独立地表示氢原子或可以被取代的碳原子数1～18的烷基，
[0063]
可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，
[0064]
取代或未取代的芳基及取代或未取代的杂芳基上的取代基为碳原子数1～18的烷基、羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，
[0065]
e表示2或3。
[0066]
＜11＞根据＜10＞所述的脂质组合物，其中，
[0067]
式(2)中，
[0068]
r2及r3中的至少一个表示包含一个以上的不饱和键的碳原子数3～24的烃基，或r2及r3分别独立地表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，或r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数3～24的烃基，
[0069]
r5表示未取代的碳原子数1～18的烷基、或者被-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
取代的碳原子数1～18的烷基，
[0070]
r7及r8分别独立地表示碳原子数1～4的烷基，
[0071]r31
、l2、r
32
、r
42
及r
43
的定义与＜8＞的定义相同。
[0072]
＜12＞根据＜1＞至＜11＞中任一项所述的脂质组合物，其还包含药学上可接受的载体。
[0073]
＜13＞根据＜1＞至＜12＞中任一项所述的脂质组合物，其为用于将核酸导入细胞中的组合物。
[0074]
＜14＞根据＜1＞至＜12＞中任一项所述的脂质组合物，其为用于体内核酸递送的组合物。
[0075]
发明效果
[0076]
本发明的脂质组合物能够实现优异的核酸递送。
具体实施方式
[0077]
以下，对本发明进行详细说明。
[0078]
在本说明书中，“～”表示将记载于其前后的数值分别作为最小值及最大值而包含的范围。
[0079]
本发明的脂质组合物为如下脂质组合物：包含作为式(1)所表示的脂质或其盐的第1脂质、固醇类及核酸，该脂质组合物中的第1脂质的摩尔数与脂质组合物中的固醇类的摩尔数之比为0.300以上且小于1.299。
[0080]
＜关于脂质组合物中的第1脂质的摩尔数与脂质组合物中的固醇类的摩尔数之比＞
[0081]
在本发明的脂质组合物中，脂质组合物中的第1脂质的摩尔数与脂质组合物中的固醇类的摩尔数之比为0.300以上且小于1.299，因此本发明的脂质组合物能够实现优异的核酸递送。
[0082]
脂质组合物中的第1脂质的摩尔数与脂质组合物中的固醇类的摩尔数之比的下限
值优选为0.350以上，也可以为0.400以上、0.500以上或0.600以上。
[0083]
脂质组合物中的第1脂质的摩尔数与脂质组合物中的固醇类的摩尔数之比的上限值优选为1.250以下，也可以为1.200以下。
[0084]
＜式(1)所表示的脂质或其盐＞
[0085]
本发明的脂质组合物包含式(1)所表示的脂质或其盐。
[0086]
[化学式6]
[0087][0088]
式中，x表示-nr
1-或-o-，
[0089]
r1表示氢原子、碳原子数6～24的烃基或r
21-l
1-r
22-所表示的基团，r
21
表示碳原子数1～24的烃基，l1表示-o(co)o-、-o(co)-、-(co)o-、-o-或
[0090]
[化学式7]
[0091][0092]r22
为2价的连接基，表示碳原子数1～18的烃连接基，
[0093]
r2及r3分别独立地表示氢原子、碳原子数3～24的烃基或r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r
31
表示碳原子数1～24的烃基，l2表示-o(co)o-、-o(co)-、-(co)o-、-o-或
[0094]
[化学式8]
[0095][0096]r32
为2价的连接基，表示碳原子数1～18的烃连接基，
[0097]
r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
及r
12
分别独立地表示氢原子或可以被取代的碳原子数1～18的烷基，
[0098]
r4与r5、r
10
与r5、r5与r
12
、r4与r6、r5与r6、r6与r7、r6与r
10
、r
12
与r7、以及r7与r8中的任意一组以上可以相互连接而形成可以包含o原子的4～7元环，
[0099]
可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，
[0100]
取代或未取代的芳基及取代或未取代的杂芳基的取代基为碳原子数1～18的烷基、羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，
[0101]
a、b、c及d分别独立地表示0～3的整数，其中，a+b为1以上，c+d为1以上。
[0102]
作为r1中的碳原子数6～24的烃基以及r2及r3中的碳原子数3～24的烃基，优选为
烷基、烯基或炔基，更优选为烷基或烯基。碳原子数6～24的烷基及碳原子数3～24的烷基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数6～24的烷基优选为碳原子数6～20的烷基，碳原子数3～24的烷基更优选为碳原子数6～20的烷基。具体而言，可以举出己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、三甲基十二烷基(优选3,7,11-三甲基十二烷基)、十四烷基、十五烷基、十六烷基、四甲基十六烷基(优选3,7,11,15-四甲基十六烷基)、十七烷基、十八烷基、十九烷基、二十烷基等。碳原子数6～24的烯基及碳原子数3～24的烯基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数6～24的烯基优选为碳原子数6～20的烯基，碳原子数3～24的烯基更优选为碳原子数6～20的烯基。具体而言，可以举出己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基、十一碳烯基、十二碳烯基、十二碳二烯基、十三碳烯基、十四碳烯基、十五碳烯基、十六碳烯基(优选(z)-十六碳-9-烯基)、十六碳二烯基、十七碳烯基(优选(z)-十七碳-8-烯基)、十七碳二烯基(优选(8z,11z)-十七碳-8,11-二烯基)、十八碳烯基(优选(z)-十八碳-9-烯基)、十八碳二烯基(优选(9z,12z)-十八碳-9,12-二烯基)、十九碳烯基、二十碳烯基(优选(z)-二十碳-11-烯基)、二十碳二烯基(优选(11,14)-二十碳-11,14-二烯基)等。碳原子数6～24的炔基优选为碳原子数6～20的炔基，碳原子数3～24的炔基更优选为碳原子数6～20的炔基。具体而言，可以举出己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基、十一炔基、十二炔基、十四炔基、十五炔基、十六炔基、十七炔基、十八炔基等。上述烯基均优选具有1个或2个双键，炔基均优选具有1个或2个三键。
[0103]
作为关于r
21
及r
31
的碳原子数1～24的烃基，优选为碳原子数10～24的烷基、碳原子数10～24的烯基或碳原子数10～24的炔基。碳原子数10～24的烷基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数10～24的烷基优选为碳原子数12～24的烷基。具体而言，可以举出癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、三甲基十二烷基(优选3,7,11-三甲基十二烷基)、十四烷基、十五烷基、十六烷基、四甲基十六烷基(优选3,7,11,15-四甲基十六烷基)、十七烷基、十八烷基、2-丁基己基、2-丁基辛基、1-戊基己基、2-戊基庚基、3-戊基辛基、1-己基庚基、1-己基壬基、2-己基辛基、2-己基癸基、3-己基壬基、1-庚基辛基、2-庚基壬基、2-庚基十一烷基、3-庚基癸基、1-辛基壬基、2-辛基癸基、2-辛基十二烷基、3-辛基十一烷基、2-壬基十一烷基、3-壬基十二烷基、2-癸基十二烷基、2-癸基十四烷基、3-癸基十三烷基、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛基等。碳原子数10～24的烯基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。具体而言，可以举出癸烯基、十一碳烯基、十二碳烯基、十二碳二烯基、十三碳烯基(优选(z)-十三碳-8-烯基)、十四碳烯基(优选十四碳-9-烯基)、十五碳烯基(优选(z)-十五碳-8-烯基)、十六碳烯基(优选(z)-十六碳-9-烯基)、十六碳二烯基、十七碳烯基(优选(z)-十七碳-8-烯基)、十七碳二烯基(优选(8z,11z)-十七碳-8,11-二烯基)、十八碳烯基(优选(z)-十八碳-9-烯基)、十八碳二烯基(优选(9z,12z)-十八碳-9,12-二烯基)等。碳原子数10～24的炔基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。具体而言，可以举出癸炔基、十一炔基、十二炔基、十四炔基、十五炔基、十六炔基、十七炔基、十八炔基等。上述烯基均优选具有1个或2个双键，炔基均优选具有1个或2个三键。
[0104]
作为关于r
22
及r
32
的二价的连接基且碳原子数1～18的烃连接基，优选为碳原子数1～18的亚烷基或碳原子数2～18的亚烯基。碳原子数1～18的亚烷基可以为直链也可以为
支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数优选1～12，更优选1～10，进一步优选2～10。具体而言，可以举出亚甲基、亚乙基、三亚甲基、四亚甲基、五亚甲基、六亚甲基、七亚甲基、八亚甲基、九亚甲基、十亚甲基、十一亚甲基、十二亚甲基等。碳原子数2～18的亚烯基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数优选1～12，更优选2～10。
[0105]
作为l1的优选范围，优选-o(co)o-、-o(co)-或-(co)o-，更优选-o(co)-或-(co)o-。
[0106]
作为l2的优选范围，优选-o(co)o-、-o(co)-或-(co)o-，更优选-o(co)-或-(co)o-。
[0107]
关于r4、r6、r9、r
10
、r
11
及r
12
的可以被取代的碳原子数1～18的烷基的碳原子数1～18的烷基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数优选1～12。具体而言，可以举出甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、戊基、环戊基、己基、环己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。烷基具有取代基时的取代基优选羟基、羧基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，更优选-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
所表示的基团。
[0108]
关于r5、r7及r8的可以被取代的碳原子数1～18的烷基的碳原子数1～18的烷基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数优选1～12，更优选1～8。具体而言，可以举出甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、戊基、环戊基、己基、环己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。烷基具有取代基时的取代基优选羟基、羧基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，更优选-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团。
[0109]
作为可以包含o原子的4～7元环，可以举出吖丁啶环、吡咯烷环、哌啶环、吗啉环、氮杂环庚烷环，优选为6元环，优选哌啶环、吗啉环。
[0110]
关于r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
及r
12
，作为可以被取代的碳原子数1～18的烷基中的取代基为取代或未取代的芳基时的芳基，碳原子数优选6～22，更优选6～18，进一步优选6～10。具体而言，可以举出苯基、萘基、蒽基、菲基等。作为芳基上的取代基，优选碳原子数1～18的烷基、羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，更优选羟基或羧基。作为取代芳基，具体而言，可以举出羟基苯基、羧基苯基等。
[0111]
关于r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
及r
12
，作为可以被取代的碳原子数1～18的烷基中的取代基为取代或未取代的杂芳基时的杂芳基，碳原子数优选1～12，更优选1～6。具体而言，可以举出吡啶基、吡唑基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、噁唑基等。作为杂芳基上的取代基，优选碳原子数1～18的烷基、羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，更优选羟基或羧基。作为取代或未取代的杂芳基，具体而言，可以举出羟基吡啶基、羧基吡啶基、吡啶酮基(pyridonyl group)等。
[0112]
作为关于r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
的碳原子数1～18的烃基，优选为碳原子数1～18的烷基、碳原子数2～18的烯基或碳原子数2～18的炔基，更优选为碳原子数1～18的烷基或碳原子数2～18的烯基。碳原子数1～18的烷基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数优选3～18，更优选5～18。具体而言，可以举出丙基、异丙基、环丙基、丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、戊基、环戊基、己基、环己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷
基、十二烷基、十三烷基、三甲基十二烷基(优选3,7,11-三甲基十二烷基)、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基等。碳原子数2～18的烯基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数优选3～18，更优选5～18。具体而言，可以举出烯丙基、异戊二烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基(优选(z)-2-壬烯基或(e)-2-壬烯基)、癸烯基、十一碳烯基、十二碳烯基、十二碳二烯基、十三碳烯基(优选(z)-十三碳-8-烯基)、十四碳烯基(优选十四碳-9-烯基)、十五碳烯基(优选(z)-十五碳-8-烯基)、十六碳烯基(优选(z)-十六碳-9-烯基)、十六碳二烯基、十七碳烯基(优选(z)-十七碳-8-烯基)、十七碳二烯基(优选(8z,11z)-十七碳-8,11-二烯基)、十八碳烯基(优选(z)-十八碳-9-烯基)、十八碳二烯基(优选(9z,12z)-十八碳-9,12-二烯基)等。碳原子数2～18的炔基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数优选3～18，更优选5～18。具体而言，可以举出炔丙基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基、十一炔基、十二炔基、十四炔基、十五炔基、十六炔基、十七炔基、十八炔基等。
[0113]
当x表示-nr
1-时，优选r1表示碳原子数6～24的烃基或r
21-l
1-r
22-所表示的基团。此时，优选r2及r3中的一个为氢原子；r2及r3中的另一个表示碳原子数6～24的烃基或r
31-l
2-r
32-所表示的基团。
[0114]
当x表示-o-时，优选r2及r3分别独立地表示碳原子数6～24的烃基或r
31-l
2-r
32-所表示的基团。
[0115]
r4、r6、r9、r
10
、r
11
及r
12
优选为氢原子。
[0116]
r5优选为氢原子、碳原子数1～18的烷基、可以被-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
取代的碳原子数1～18的烷基、可以被芳基取代的碳原子数1～18的烷基、可以被羟基取代的碳原子数1～18的烷基，当为烷基时，可以与r4、r6、r
10
及r
12
相互连接而形成可以包含o原子的环。其中，优选为碳原子数1～18的烷基、可以被-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
取代的碳原子数1～18的烷基、可以被芳基取代的碳原子数1～12的烷基、可以被羟基取代的碳原子数1～8的烷基，更优选为碳原子数1～18的烷基、可以被-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
取代的碳原子数1～18的烷基。
[0117]
优选r7及r8分别独立地为氢原子、碳原子数1～18的烃基、可以被-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
取代的碳原子数1～18的烷基、可以被芳基取代的碳原子数1～8的烷基或可以被羟基取代的碳原子数1～8的烷基，或者r7与r8相互连接而形成可以包含o原子的4～7元环。
[0118]
r5与r7或r8不相互连接，且不形成环。
[0119]
a+b优选为1或2，更优选为1。c+d优选为1或2，更优选为1。
[0120]
式(1)所表示的化合物优选为下述式(1-1)所表示的化合物。
[0121]
[化学式9]
[0122][0123]r24
表示氢原子、碳原子数6～24的烃基或r
21-l
1-r
22-所表示的基团，r
21
表示碳原子
数1～24的烃基，l1表示-o(co)o-、-o(co)-、-(co)o-、-o-或
[0124]
[化学式10]
[0125][0126]r22
为2价的连接基，表示碳原子数1～18的烃连接基。
[0127]r25
表示氢原子、碳原子数3～24的烃基或r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r
31
表示碳原子数1～24的烃基，l2表示-o(co)o-、-o(co)-、-(co)o-、-o-或
[0128]
[化学式11]
[0129][0130]r32
为2价的连接基，表示碳原子数1～18的烃连接基。
[0131]
r4、r5、r6、r7、r8、r
10
及r
12
分别独立地表示氢原子或可以被取代的碳原子数1～18的烷基，
[0132]
r4与r5、r
10
与r5、r5与r
12
、r4与r6、r5与r6、r6与r7、r6与r
10
、r
12
与r7、以及r7与r8中的任意一组以上可以相互连接而形成可以包含o原子的4～7元环。其中，优选r5与r7或r8不相互连接，且不形成环。
[0133]
可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，
[0134]
取代或未取代的芳基及取代或未取代的杂芳基上的取代基为碳原子数1～18的烷基、羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基。
[0135]
式(1-1)中的r4、r5、r6、r7、r8、r
10
及r
12
的定义及优选范围与式(1)相同。
[0136]
式(1-1)的r
24
优选为碳原子数6～24的烷基或烯基。碳原子数6～24的烷基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数6～24的烷基优选为碳原子数8～20的烷基。具体而言，可以举出辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、三甲基十二烷基(优选3,7,11-三甲基十二烷基)、十四烷基、十五烷基、十六烷基、四甲基十六烷基(优选3,7,11,15-四甲基十六烷基)、十七烷基、十八烷基、十九烷基、二十烷基等。碳原子数6～24的烯基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数6～24的烯基优选为碳原子数8～20的烯基。具体而言，可以举出辛烯基、壬烯基、癸烯基、十一碳烯基、十二碳烯基、十二碳二烯基、十三碳烯基、十四碳烯基、十五碳烯基、十六碳烯基(优选(z)-十六碳-9-烯基)、十六碳二烯基、十七碳烯基(优选(z)-十七碳-8-烯基)、十七碳二烯基(优选(8z,11z)-十七碳-8,11-二烯基)、十八碳烯基(优选(z)-十八碳-9-烯基)、十八碳二烯基(优选(9z,12z)-十八碳-9,12-二烯基)、十九碳烯基、二十碳烯基(优选(z)-二十碳-11-烯基)、二十碳二烯基(优选(11,14)-二十碳-11,14-二烯基)等。
[0137]
上述烯基均优选具有1个或2个双键。
[0138]
式(1-1)的r
25
优选为碳原子数6～24的烷基或烯基。碳原子数6～24的烷基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数6～24的烷基优选为碳原子数7～20的烷基。具体而言，可以举出己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、三甲基十二烷基(优选3,7,11-三甲基十二烷基)、十四烷基、十五烷基、十六烷基、四甲基十六烷基(优选3,7,11,15-四甲基十六烷基)、十七烷基、十八烷基等。碳原子数6～24的烯基可以为直链也可以为支链，且可以为链状也可以为环状。碳原子数6～24的烯基优选为碳原子数8～20的烯基。具体而言，可以举出辛烯基、壬烯基、癸烯基、十一碳烯基、十二碳烯基、十二碳二烯基、十三碳烯基、十四碳烯基、十五碳烯基、十六碳烯基(优选(z)-十六碳-9-烯基)、十六碳二烯基、十七碳烯基(优选(z)-十七碳-8-烯基)、十七碳二烯基(优选(8z,11z)-十七碳-8,11-二烯基)、十八碳烯基(优选(z)-十八碳-9-烯基)、十八碳二烯基(优选(9z,12z)-十八碳-9,12-二烯基)、十九碳烯基、二十碳烯基(优选(z)-二十碳-11-烯基)、二十碳二烯基(优选(11,14)-二十碳-11,14-二烯基)等。
[0139]
上述烯基均优选具有1个或2个双键。
[0140]
在优选方式中，
[0141]
x表示-o-；
[0142]
r2、r3、r
31
、l2及r
32
的定义与式(1)中的定义相同，
[0143]
r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
及r
12
分别独立地表示氢原子或可以被取代的碳原子数1～18的烷基，
[0144]
可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基及取代或未取代的芳基及取代或未取代的杂芳基上的取代基的定义与式(1)中的定义相同，
[0145]
a+b为1，c+d为1或2。
[0146]
在进一步优选的方式中，式(1)所表示的化合物为下述式(2)所表示的化合物。
[0147]
[化学式12]
[0148][0149]
式中，r2及r3分别独立地表示氢原子、碳原子数3～24的烃基或r
31-l
2-r
32-所表示的基团，
[0150]r31
表示碳原子数1～24的烃基，
[0151]
l2表示-o(co)o-、-o(co)-、-(co)o-、-o-或
[0152]
[化学式13]
[0153][0154]r32
为2价的连接基，表示碳原子数1～18的烃连接基，
[0155]
r5表示氢原子或可以被取代的碳原子数1～18的烷基，
[0156]
r7及r8分别独立地表示氢原子或可以被取代的碳原子数1～18的烷基，
[0157]
可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的
氨基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，
[0158]
取代或未取代的芳基及取代或未取代的杂芳基上的取代基为碳原子数1～18的烷基、羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，
[0159]
e表示2或3。
[0160]
r2、r3、r5、r7及r8的定义与式(1)相同。
[0161]
在式(2)中，优选r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，关于r5的可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为羟基、取代或未取代的芳基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，取代或未取代的芳基上的取代基为碳原子数1～18的烷基、羟基、羧基、-nr
45r46
所表示的氨基、-o(co)o-r
41
、-o(co)-r
42
、-(co)o-r
43
或-o-r
44
所表示的基团，r
41
、r
42
、r
43
、r
44
、r
45
及r
46
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基。
[0162]
式(2)中，进一步优选r2及r3分别独立地表示碳原子数3～24的烃基或r
31-l
2-r
32-所表示的基团，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为未取代的芳基、-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
，r
42
及r
43
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基。
[0163]
式(2)中，进一步优选r2及r3分别独立地表示氢原子或碳原子数3～24的烃基，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为未取代的芳基、-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
所表示的基团，r
42
及r
43
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基。
[0164]
式(2)中，优选r2及r3中的至少一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为未取代的芳基、-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
所表示的基团，r
42
及r
43
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基。
[0165]
式(2)中，进一步优选r2及r3分别独立地表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为未取代的芳基、-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
所表示的基团，r
42
及r
43
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基。
[0166]
式(2)中，优选r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数3～24的烃基，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为未取代的芳基、-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
所表示的基团，r
42
及r
43
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基。
[0167]
式(2)中，进一步优选r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数6的烃基，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，可以被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
所表示的基团，r
42
及r
43
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基。
[0168]
式(2)中，进一步优选r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数6的烃基，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r5表示氢原子或碳原子数1～18的烷
基，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基。
[0169]
式(2)中，进一步优选r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数6的烃基，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r5表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，e表示2。
[0170]
式(2)中，进一步优选r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数3～5的烃基，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r5表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基。
[0171]
式(2)中，进一步优选r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数3～5的烃基，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r5表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，e表示2。
[0172]
式(2)中，进一步优选r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数6的烃基，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r5表示氢原子或被取代的碳原子数1～18的烷基，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
所表示的基团，r
42
及r
43
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基。
[0173]
式(2)中，进一步优选r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数6的烃基，l2表示-o(co)-或-(co)o-，r5表示氢原子或被取代的碳原子数1～18的烷基，r7及r8分别独立地表示氢原子或碳原子数1～18的烷基，被取代的碳原子数1～18的烷基上的取代基为-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
所表示的基团，r
42
及r
43
分别独立地表示碳原子数1～18的烃基，e表示2。
[0174]
式(2)中，优选方式为如下情况：
[0175]
r2及r3中的至少一个表示包含一个以上的不饱和键的碳原子数3～24的烃基，或r2及r3分别独立地表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，或r2及r3中的一个表示r
31-l
2-r
32-所表示的基团，r2及r3中的另一个表示碳原子数3～24的烃基，
[0176]
r5表示未取代的碳原子数1～18的烷基、或者被-o(co)-r
42
或-(co)o-r
43
取代的碳原子数1～18的烷基，
[0177]
r7及r8分别独立地表示碳原子数1～4的烷基，
[0178]
(在此，r
31
、l2、r
32
、r
42
及r
43
的定义与式(2)中的定义相同)
[0179]
式(1)所表示的化合物可以形成盐。
[0180]
作为碱性基团中的盐，例如可以举出与盐酸、氢溴酸、硝酸及硫酸等无机酸的盐；与甲酸、乙酸、柠檬酸、草酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、苹果酸、酒石酸、天冬氨酸、三氯乙酸及三氟乙酸等有机羧酸的盐；以及与甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、均三甲苯磺酸及萘磺酸等磺酸的盐。
[0181]
作为酸性基团中的盐，例如可以举出与钠及钾等碱金属的盐；与钙及镁等碱土金属的盐；铵盐；以及与三甲胺、三乙胺、三丁胺、吡啶、n,n-二甲基苯胺、n-甲基哌啶、n-甲基吗啉、二乙胺、二环己基胺、普鲁卡因、二苄基胺、n-苄基-β-苯乙基胺、1-二苯羟甲胺及n,n
’‑
二苄基乙二胺等含氮有机碱的盐等。
[0182]
在上述盐之中，作为优选的盐，可以举出药学上可接受的盐。
[0183]
作为式(1)所表示的化合物的优选具体例，可以举出后述的实施例1～实施例135
中所记载的化合物，但本发明不应解释为受其限定。
[0184]
将实施例1～实施例135中所记载的化合物分别称为化合物1～化合物135。
[0185]
在上述之中，尤其优选化合物24、化合物30、化合物31、化合物50、化合物56、化合物69、化合物88、化合物89、化合物91、化合物93、化合物103、化合物112、化合物118、化合物119、化合物134及化合物135。
[0186]
对式(1)所表示的化合物的制造方法进行说明。
[0187]
式(1)所表示的化合物能够通过组合公知的方法来进行制造，例如能够按照以下所示的制造方法进行制造。
[0188]
[制造方法1]
[0189]
[化学式14]
[0190][0191]
作为“式中，ra及rb表示离去基；rc、rd及re表示氨基保护基或亚氨基保护基；r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
及r
12
具有与上述相同的含义。”的离去基，例如可以举出氯基、氟基、溴基、三氯甲氧基、4-硝基-苯氧基、2,4-二硝基苯氧基、2,4,6-三氯苯氧基、五氟苯氧基、2,3,5,6-四氟苯氧基、咪唑基、三唑基、3,5-二氧代-4-甲基-1,2,4-噁二唑基、n-羟基琥珀酰亚胺基等。作为氨基保护基或亚氨基保护基，例如可以举出叔丁氧基羰基、苄氧基羰基、2-硝基苯磺酰基、苄基等。
[0192]
(1-1)
[0193]
作为式[3]的化合物，例如已知有氯甲酸4-硝基苯酯、1,1'-羰基二咪唑、三光气及光气等。
[0194]
式[4]的化合物能够通过在碱的存在下使式[2]的化合物与式[3]的化合物反应来进行制造。
[0195]
作为该反应中所使用的溶剂，只要不影响反应，则不受特别限定，例如可以举出卤代烃类、醚类、酯类、酰胺类、腈类、亚砜类及芳香族烃类，这些溶剂可以混合使用。
[0196]
作为优选的溶剂，可以举出醚类，更优选四氢呋喃。
[0197]
溶剂的使用量并不受特别限定，相对于式[2]的化合物为1～500倍量(v/w)即可。
[0198]
作为用于该反应中的碱，可以举出无机碱或有机碱。碱优选有机碱，具体而言，可以举出三乙胺、n,n-二异丙基乙胺、4-甲基吗啉、吡啶或n,n-二甲基氨基吡啶等。
[0199]
碱的使用量相对于式[2]的化合物为1～50倍摩尔、优选1～10倍摩尔即可。
[0200]
式[3]的化合物的使用量并不受特别限定，相对于式[2]的化合物为0.3～10倍量(v/w)即可。
[0201]
该反应在-30～150℃、优选在0～100℃下实施5分钟～48小时即可。
[0202]
(1-2)
[0203]
作为式[5]的化合物，例如已知有(9z,12z)-二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)胺及双十六烷胺等。
[0204]
式[6]的化合物能够通过在碱的存在下使式[4]的化合物与式[5]的化合物反应来进行制造。
[0205]
作为该反应中所使用的溶剂，只要不影响反应，则不受特别限定，例如可以举出卤代烃类、醚类、酯类、酰胺类、腈类、亚砜类及芳香族烃类，这些溶剂可以混合使用。
[0206]
作为优选的溶剂，可以举出醚类，更优选四氢呋喃。
[0207]
溶剂的使用量并不受特别限定，相对于式[4]的化合物为1～500倍量(v/w)即可。
[0208]
作为用于该反应中的碱，可以举出无机碱或有机碱。碱优选有机碱，具体而言，可以举出三乙胺、n,n-二异丙基乙胺、4-甲基吗啉、吡啶或n,n-二甲基氨基吡啶等。
[0209]
碱的使用量相对于式[4]的化合物为1～50倍摩尔、优选1～10倍摩尔即可。
[0210]
式[5]的化合物的使用量并不受特别限定，相对于式[4]的化合物为1～10倍量(v/w)即可。
[0211]
该反应在-30～150℃、优选在0～100℃下实施5分钟～48小时即可。
[0212]
(1-3)
[0213]
作为式[2a]的化合物，例如已知有(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯及(2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯等。
[0214]
式[6a]的化合物能够通过在碱的存在下使式[2a]的化合物与式[3]的化合物反应之后，在碱的存在下使式[4a]的化合物与式[5]的化合物反应来进行制造。
[0215]
该反应遵照制造方法(1-1)及(1-2)进行即可。
[0216]
(1-4)
[0217]
式[6]的化合物能够通过将式[6a]的化合物脱保护来进行制造。
[0218]
该反应例如遵照t.w.格林(t.w.greene)等人、有机合成中的保护基(protective groups in organic synthesis)第4版、第696～926页、2007年、约翰威立国际出版公司(john wiley&sons，inc.)中所记载的方法进行即可。
[0219]
[制造方法2]
[0220]
[化学式15]
[0221]
[0222]
作为“式中，ra及rb表示离去基；rc、rd及re表示氨基保护基或亚氨基保护基；r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
及r
12
具有与上述相同的含义。”的离去基，例如可以举出氯基、氟基、溴基、三氯甲氧基、4-硝基-苯氧基、2,4-二硝基苯氧基、2,4,6-三氯苯氧基、五氟苯氧基、2,3,5,6-四氟苯氧基、咪唑基、三唑基、3,5-二氧代-4-甲基-1,2,4-噁二唑基、n-羟基琥珀酰亚胺基等。作为氨基保护基或亚氨基保护基，例如可以举出叔丁氧基羰基、苄氧基羰基、2-硝基苯磺酰基、苄基等。
[0223]
(2-1)
[0224]
作为式[3]的化合物，例如已知有氯甲酸4-硝基苯酯、1,1'-羰基二咪唑、三光气及光气等。
[0225]
式[8]的化合物能够通过在碱的存在下使式[7]的化合物与式[3]的化合物反应来进行制造。
[0226]
该反应遵照制造方法(1-1)进行即可。
[0227]
(2-2)
[0228]
式[9]的化合物能够通过在碱的存在下使式[8]的化合物与式[2]的化合物反应来进行制造。
[0229]
作为该反应中所使用的溶剂，只要不影响反应，则不受特别限定，例如可以举出卤代烃类、醚类、酯类、酰胺类、腈类、亚砜类及芳香族烃类，这些溶剂可以混合使用。
[0230]
作为优选的溶剂，可以举出醚类，更优选四氢呋喃。
[0231]
溶剂的使用量并不受特别限定，相对于式[8]的化合物为1～500倍量(v/w)即可。
[0232]
作为用于该反应中的碱，可以举出无机碱或有机碱。碱优选有机碱，具体而言，可以举出三乙胺、n,n-二异丙基乙胺、4-甲基吗啉、吡啶或n,n-二甲基氨基吡啶等。
[0233]
碱的使用量相对于式[8]的化合物为1～50倍摩尔、优选1～10倍摩尔即可。
[0234]
式[2]的化合物的使用量并不受特别限定，相对于式[8]的化合物为1～10倍量(v/w)即可。
[0235]
该反应在-30～150℃、优选在0～100℃下实施5分钟～48小时即可。
[0236]
(2-3)
[0237]
式[2a]的化合物例如已知有(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯及(2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯等。
[0238]
式[9]的化合物能够通过在碱的存在下使式[8]的化合物与式[2a]的化合物反应之后，在碱的存在下将式[9a]的化合物脱保护来进行制造。
[0239]
该反应遵照制造方法(2-2)及(1-4)进行即可。
[0240]
[制造方法3]
[0241]
[化学式16]
[0242][0243]
作为“式中，ra、rb及rg表示离去基；rf表示碳原子数1～18的烷基；r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
、r
12
及r
42
具有与上述相同的含义。”离去基，例如可以举出氯基、氟基、溴基、三氯甲氧基、4-硝基-苯氧基、2,4-二硝基苯氧基、2,4,6-三氯苯氧基、五氟苯氧基、2,3,5,6-四氟苯氧基、咪唑基、三唑基、3,5-二氧代-4-甲基-1,2,4-噁二唑基、n-羟基琥珀酰亚胺基等。
[0244]
(3-1)
[0245]
作为式[3]的化合物，例如已知有氯甲酸4-硝基苯酯、1,1'-羰基二咪唑、三光气及光气等。
[0246]
式[8]的化合物能够通过在碱的存在下使式[7]的化合物与式[3]的化合物反应来进行制造。
[0247]
该反应遵照制造方法(1-1)进行即可。
[0248]
(3-2)
[0249]
作为式[2b]的化合物，例如已知有2,2
’‑
((2-(二乙基氨基)乙基)氮烷二基)双(-1-乙醇)及2,2
’‑
((3-(二乙基氨基)丙基)氮烷二基)双(-1-乙醇)等。
[0250]
式[9b]的化合物能够通过在碱的存在下使式[8]的化合物与式[2b]的化合物反应来进行制造。
[0251]
该反应遵照制造方法(2-2)进行即可。
[0252]
(3-3)
[0253]
作为式[10a]的化合物，例如已知有十二烷酸、癸酸、壬酸及辛酸等。
[0254]
式[9c]的化合物能够通过在缩合剂或酰卤的存在下且碱的存在下使式[9b]的化合物与式[10a]的化合物反应来进行制造。
[0255]
作为该反应中所使用的溶剂，只要不影响反应，则不受特别限定，例如可以举出卤代烃类、醚类、酯类、酰胺类、腈类、亚砜类及芳香族烃类，这些溶剂可以混合使用。
[0256]
作为优选的溶剂，可以举出醚类，更优选四氢呋喃。
[0257]
溶剂的使用量并不受特别限定，相对于式[9b]的化合物为1～500倍量(v/w)即可。
[0258]
作为用于该反应中的碱，可以举出无机碱或有机碱。碱优选有机碱，具体而言，可
以举出三乙胺、n,n-二异丙基乙胺、4-甲基吗啉、吡啶或n,n-二甲基氨基吡啶等。
[0259]
碱的使用量相对于式[9b]的化合物为1～50倍摩尔、优选1～10倍摩尔即可。
[0260]
作为该反应中所使用的缩合剂，例如可以举出n,n
’‑
二环己基碳二亚胺及1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺等碳二亚胺类；羰基二咪唑等羰基类；叠氮磷酸二苯酯(diphenylphosphoric acid azide)等酸性叠氮化物(acid azide)类；叠氮磷酸二乙酯等酸性氰化物类；2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉；o-苯并三唑-1-基-1,1,3,3-四甲基脲-六氟磷酸酯以及o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲-六氟磷酸酯等。
[0261]
作为该反应中所使用的酰卤，例如可以举出乙酰氯及三氟乙酰氯等羧酰卤类；甲磺酰氯及甲苯磺酰氯等磺酰卤类；氯甲酸乙酯及氯甲酸异丁酯等氯甲酸酯类等。
[0262]
式[10a]的化合物的使用量并不受特别限定，相对于式[9b]的化合物为1～10倍量(v/w)即可。
[0263]
该反应在-30～150℃、优选在0～100℃下实施5分钟～48小时即可。
[0264]
(3-4)
[0265]
作为式[10b]的化合物，例如已知有十二烷酰氯、癸酰氯、壬酰氯及辛酰氯等。
[0266]
式[9c]的化合物能够通过在碱的存在下使式[9b]的化合物与式[10b]的化合物反应来进行制造。
[0267]
式[10b]的化合物能够通过使式[10a]的化合物与亚硫酰氯或草酰氯等反应来进行制造。
[0268]
作为该反应中所使用的溶剂，只要不影响反应，则不受特别限定，例如可以举出卤代烃类、醚类、酯类、酰胺类、腈类、亚砜类及芳香族烃类，这些溶剂可以混合使用。
[0269]
作为优选的溶剂，可以举出醚类，更优选四氢呋喃。
[0270]
溶剂的使用量并不受特别限定，相对于式[9b]的化合物为1～500倍量(v/w)即可。
[0271]
作为用于该反应中的碱，可以举出无机碱或有机碱。
[0272]
碱的使用量相对于式[9b]的化合物为1～50倍摩尔、优选1～10倍摩尔即可。
[0273]
式[10b]的化合物的使用量并不受特别限定，相对于式[2b]的化合物为1～10倍量(v/w)即可。
[0274]
该反应在-30～150℃、优选在0～100℃下实施5分钟～48小时即可。
[0275]
接着，对作为本发明的化合物的制造原料的式[2]的化合物的合成进行说明。
[0276]
[制造方法4]
[0277]
[化学式17]
[0278][0279]
作为“式中，rh及ri表示离去基；r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
及r
12
具有与上述相同的含义。”的离去基，例如可以举出氯基、溴基、碘基、甲磺酰基、4-甲苯磺酰基、氯甲磺酰基、三氟甲磺酰基等。
[0280]
(4-1)
[0281]
作为式[12]的化合物，例如已知有2-氯-n,n-二甲基乙-1-胺、4-(2-氯乙基)吗啉及2-氯-n,n-二乙基乙-1-胺、2-溴-n,n-二乙基乙-1-胺、3-氯-n,n-二乙基乙-1-胺等。
[0282]
式[2]的化合物能够通过在碱的存在下或不存在下使式[11]的化合物与式[12]的化合物反应来进行制造。
[0283]
作为该反应中所使用的溶剂，只要不影响反应，则不受特别限定，例如可以举出醇类、卤代烃类、醚类、酯类、酰胺类、腈类、亚砜类、芳香族烃类及水，这些溶剂可以混合使用。
[0284]
溶剂的使用量并不受特别限定，相对于式[11]的化合物为1～500倍量(v/w)即可。
[0285]
作为用于该反应中的碱，可以举出无机碱或有机碱。碱的使用量相对于式[11]的化合物为1～10000倍摩尔、优选1～5000倍摩尔即可。
[0286]
式[12]的化合物的使用量并不受特别限定，相对于式[11]的化合物为1～10倍量(v/w)即可。
[0287]
该反应在-30～150℃、优选在0～100℃下实施5分钟～48小时即可。
[0288]
(4-2)
[0289]
作为式[14]的化合物，例如已知有2-溴-1-乙醇及3-溴-1-丙醇等。
[0290]
式[2]的化合物能够通过在碱的存在下或不存在下使式[13]的化合物与式[14]的化合物反应来进行制造。
[0291]
该反应遵照制造方法(4-1)进行即可。
[0292]
[制造方法5]
[0293]
[化学式18]
[0294][0295]
作为“式中，rj表示离去基；rk表示碳原子数1～18的烷基；r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
、r
12
及r
43
具有与上述相同的含义。”离去基，例如可以举出氯基、溴基、碘基、甲磺酰基、4-甲苯磺酰基、氯甲磺酰基、三氟甲磺酰基等。
[0296]
(5-1)
[0297]
作为式[15a]的化合物，例如已知有丙烯酸庚酯等。
[0298]
式[2]的化合物能够通过在碱的存在下或不存在下使式[2c]的化合物与式[15a]的化合物反应来进行制造。
[0299]
作为该反应中所使用的溶剂，只要不影响反应，则不受特别限定，例如可以举出醇类、卤代烃类、醚类、酯类、酰胺类、腈类、亚砜类、芳香族烃类及水，这些溶剂可以混合使用。
[0300]
作为优选的溶剂，可以举出醚类或腈类，更优选四氢呋喃或乙腈。
[0301]
溶剂的使用量并不受特别限定，相对于式[2c]的化合物为1～500倍量(v/w)即可。
[0302]
作为用于该反应中的碱，可以举出无机碱或有机碱。
[0303]
碱的使用量相对于式[2c]的化合物为1～10000倍摩尔、优选1～5000倍摩尔即可。
[0304]
式[15a]的化合物的使用量并不受特别限定，相对于式[13]的化合物为1～10倍量(v/w)即可。
[0305]
该反应在-30～150℃、优选在0～100℃下实施5分钟～48小时即可。
[0306]
(5-2)
[0307]
作为式[15b]的化合物，例如已知有3-氯丙酸庚酯等。
[0308]
式[2]的化合物能够通过在碱的存在下或不存在下使式[2c]的化合物与式[15b]的化合物反应来进行制造。
[0309]
该反应遵照制造方法(4-1)进行即可。
[0310]
[制造方法6]
[0311]
[化学式19]
[0312][0313]
作为“式中，rg及r
l
表示离去基；rm表示碳原子数1～18的烷基；r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
、r
12
及r
42
具有与上述相同的含义。”离去基，例如可以举出氯基、溴基、碘基、甲磺酰基、4-甲苯磺酰基、氯甲磺酰基、三氟甲磺酰基、三氯甲氧基、4-硝基-苯氧基、2,4-二硝基苯氧基、2,4,6-三氯苯氧基、五氟苯氧基、2,3,5,6-四氟苯氧基、咪唑基、三唑基、3,5-二氧代-4-甲基-1,2,4-噁二唑基、n-羟基琥珀酰亚胺基等。
[0314]
(6-1)
[0315]
作为式[10a]的化合物，例如已知有十二烷酸、癸酸、壬酸及辛酸等。
[0316]
式[2]的化合物能够通过在缩合剂或酰卤的存在下且碱的存在下使式[2b]的化合物与式[10a]的化合物反应来进行制造。
[0317]
该反应遵照制造方法(3-3)进行即可。
[0318]
(6-2)
[0319]
作为式[10b]的化合物，例如已知有十二烷酰氯、癸酰氯、壬酰氯及辛酰氯等。
[0320]
式[2]的化合物能够通过在碱的存在下使式[2b]的化合物与式[10b]的化合物反应来进行制造。
[0321]
该反应遵照制造方法(3-4)进行即可。
[0322]
(6-3)
[0323]
作为式[16]的化合物，例如已知有3-氯丙酸庚酯等。
[0324]
式[2]的化合物能够通过在碱的存在下或不存在下使式[2c]的化合物与式[16]的化合物反应来进行制造。
[0325]
该反应遵照制造方法(4-1)进行即可。
[0326]
[制造方法7]
[0327]
[化学式20]
[0328]
[0329]“式中，rn、ro及r
p
表示碳原子数1～17的烷基；r4、r5、r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
、r
12
、r
42
及r
43
具有与上述相同的含义。”[0330]
(7-1)
[0331]
作为式[17a]的化合物，例如已知有甲醛、乙醛、丙醛、丁醛、戊醛、己醛、庚醛及辛醛等。
[0332]
式[2]的化合物能够通过在还原剂的存在下、还原催化剂的存在下或不存在下且酸的存在下或不存在下使式[2c]的化合物与式[17a]的化合物反应来进行制造。
[0333]
作为该反应中所使用的溶剂，只要不影响反应，则不受特别限定，例如可以举出醇类、卤代烃类、醚类、酯类、酰胺类、腈类、亚砜类、芳香族烃类及水，这些溶剂可以混合使用。
[0334]
溶剂的使用量并不受特别限定，相对于式[2c]的化合物为1～500倍量(v/w)即可。
[0335]
作为用于该反应中的酸，可以举出无机酸或有机酸。
[0336]
酸的使用量相对于式[2c]的化合物为0.01～10000倍摩尔、优选0.05～100倍摩尔即可。
[0337]
作为该反应中所使用的还原剂，例如可以举出三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢化钠、2-甲基吡啶硼烷、甲酸及氢等。
[0338]
作为该反应中所使用的还原催化剂，例如可以举出钯-碳、氢氧化钯-碳、铂-碳、铑-碳及钌-碳等。
[0339]
式[17a]的化合物的使用量并不受特别限定，相对于式[13]的化合物为1～10倍量(v/w)即可。
[0340]
该反应在-30～150℃、优选在0～100℃下实施5分钟～48小时即可。
[0341]
(7-2)
[0342]
作为式[17b]的化合物，例如已知有2-氧代乙基辛酸酯及2-氧代乙基壬酸酯等。
[0343]
式[2]的化合物能够通过在还原剂的存在下、还原催化剂的存在下或不存在下且酸的存在下或不存在下使式[2c]的化合物与式[17b]的化合物反应来进行制造。
[0344]
该反应遵照制造方法(7-1)进行即可。
[0345]
(7-3)
[0346]
作为式[17c]的化合物，例如已知有3-氧代丙酸庚酯及3-氧代丙酸辛酯等。
[0347]
式[2]的化合物能够通过在还原剂的存在下、还原催化剂的存在下或不存在下且酸的存在下或不存在下使式[2c]的化合物与式[17c]的化合物反应来进行制造。
[0348]
该反应遵照制造方法(7-1)进行即可。
[0349]
当在上述制造方法中所使用的化合物中存在异构体(例如，光学异构体、几何异构体及互变异构体等)时，也能够使用这些异构体。
[0350]
并且，当存在溶剂化物、水合物及各种形状的晶体时，也能够使用这些溶剂化物、水合物及各种形状的晶体。
[0351]
在上述制造方法中所使用的化合物中，例如具有氨基、羟基或羧基等的化合物能够预先用通常的保护基保护这些基团，反应后，利用本身公知的方法使这些保护基脱离。
[0352]
利用上述制造方法得到的化合物例如能够通过进行缩合、加成、氧化、还原、重排、取代、卤化、脱水或水解等本身公知的反应，或者通过适当地组合这些反应来被诱导为其他化合物。
[0353]
在本发明的脂质组合物中，式(1)所表示的脂质或其盐相对于全体脂质的含量优选为20摩尔％以上且55摩尔％以下，更优选为22摩尔％以上且55摩尔％以下。当核酸为mrna时，式(1)所表示的脂质或其盐相对于全体脂质的含量更优选为25摩尔％以上且52摩尔％以下，进一步优选为32摩尔％以上且48摩尔％以下。当核酸为sirna时，式(1)所表示的脂质或其盐相对于全体脂质的含量更优选为32摩尔％以上且55摩尔％以下，进一步优选为37摩尔％以上且55摩尔％以下，尤其优选为47摩尔％以上且55摩尔％以下。
[0354]
＜固醇类＞
[0355]
本发明的脂质组合物包含固醇类。
[0356]
在本发明的脂质组合物中，通过在油相中包含固醇类，能够降低膜流动性而得到脂质颗粒的稳定化效果。
[0357]
作为固醇类并不受特别限定，能够举出胆固醇、植物甾醇(phytosterol)(谷甾醇、豆甾醇、岩藻甾醇、菠菜甾醇、菜籽甾醇等)、麦角固醇、胆甾烷酮、胆甾烯酮、粪甾醇、胆固醇基-2
’‑
羟基乙醚、胆固醇基-4
’‑
羟基丁醚等。在这些之中，优选为胆固醇或其衍生物。
[0358]
在本发明的脂质组合物中，固醇类相对于全体脂质的含量优选为20摩尔％～70摩尔％。当核酸为mrna时，固醇类相对于全体脂质的含量更优选为30摩尔％～66摩尔％，进一步优选为30～60摩尔％。当核酸为sirna时，固醇类相对于全体脂质的含量更优选为45摩尔％～68摩尔％，进一步优选为45摩尔％～63摩尔％，尤其优选为45摩尔％～52摩尔％。
[0359]
＜具有非离子性亲水性高分子结构的脂质＞
[0360]
本发明的脂质组合物包含具有非离子性亲水性高分子结构的脂质。
[0361]
通过在油相中包含具有非离子性亲水性高分子结构的脂质，能够得到脂质颗粒的分散稳定化效果。
[0362]
作为非离子性亲水性高分子的例子并不受特别限定，可以举出非离子性的乙烯基类高分子、非离子性聚氨基酸、非离子性聚酯、非离子性聚醚、非离子性天然高分子、非离子性改性天然高分子、以这些中的两种以上的高分子为结构单元的嵌段聚合物或接枝共聚物。
[0363]
在这些非离子性亲水性高分子中，优选为非离子性聚醚、非离子性聚酯、非离子性聚氨基酸或非离子性合成多肽，进一步优选为非离子性聚醚或非离子性聚酯，进一步优选为非离子性聚醚或非离子性单烷氧基聚醚，尤其优选为聚乙二醇(以下，聚乙二醇也称为peg)。即，作为具有非离子性亲水性高分子结构的脂质，优选为具有聚乙二醇结构的脂质。
[0364]
作为具有非离子性亲水性高分子的脂质并不受特别限定，可以举出peg修饰的磷酸乙醇胺(phosphoethanolamine)、二酰甘油peg衍生物、二烷基甘油peg衍生物、胆固醇peg衍生物、神经酰胺peg衍生物等。在这些之中，优选二酰甘油peg。即，作为具有聚乙二醇结构的脂质，优选为具有二酰甘油结构和聚乙二醇结构的脂质。二酰甘油部分的酰基更优选为碳原子数12～22的酰基。
[0365]
当具有非离子性亲水性高分子的脂质具有peg链时，peg链的重均分子量优选500～5000，更优选750～3000。
[0366]
非离子性亲水性高分子链可以分支，也可以具有如羟基甲基那样的取代基。
[0367]
在本发明的脂质组合物中，具有非离子性亲水性高分子结构的脂质相对于全体脂质的含量优选为0.2摩尔％～10摩尔％，更优选为0.2摩尔％～5摩尔％。当核酸为mrna时，
具有非离子性亲水性高分子结构的脂质相对于全体脂质的含量更优选为0.2摩尔％～5摩尔％，进一步优选为0.2～3摩尔％，最优选为0.5摩尔％～2.5摩尔％。当核酸为sirna时，具有非离子性亲水性高分子结构的脂质相对于全体脂质的含量更优选为0.2摩尔％～2.3摩尔％，进一步优选为1.2摩尔％～2.3摩尔％。
[0368]
＜两性离子性脂质＞
[0369]
本发明的脂质组合物可以包含两性离子性脂质，或者也可以不包含两性离子性脂质。
[0370]
作为两性离子性脂质，优选磷脂。作为磷脂并不受特别限定，可以举出磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine)、鞘磷脂等，优选磷脂酰胆碱及磷脂酰乙醇胺。并且，作为两性离子性脂质，可以单独使用，也可以组合多种不同的两性离子性脂质。
[0371]
作为磷脂酰胆碱并不受特别限定，可以举出大豆卵磷脂(spc)、氢化大豆卵磷脂(hspc)、蛋黄卵磷脂(epc)、氢化蛋黄卵磷脂(epc)、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dmpc)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dppc)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dspc)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(popc)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dopc)等。
[0372]
在上述之中，更优选为1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dmpc)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dppc)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dspc)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dopc)。
[0373]
作为磷脂酰乙醇胺并不受特别限定，可以举出1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dmpe)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dppe)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dspe)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dope)、1,2-二亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dlope)、1,2-二植烷酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(d(phy)pe)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(pope)、1,2-双十四烷基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-双十六烷基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-双十八烷基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二植烷基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺等。
[0374]
在上述之中，更优选1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dope)。
[0375]
作为鞘磷脂并不受特别限定，可以举出源自蛋黄的鞘磷脂、源自牛奶的鞘磷脂等。
[0376]
在本发明的脂质组合物中，两性离子性脂质相对于全体脂质的含量优选为0摩尔％～35摩尔％。当核酸为mrna时，两性离子性脂质相对于全体脂质的含量优选为0摩尔％～35摩尔％，更优选为0摩尔％～30摩尔％，进一步优选为0摩尔％～25摩尔％。当核酸为sirna时，两性离子性脂质相对于全体脂质的含量优选为0摩尔％。
[0377]
当本发明的脂质组合物包含两性离子性脂质时，两性离子性脂质相对于全体脂质的含量的下限并不受特别限定，但通常为0.5摩尔％以上，优选为1摩尔％以上，进一步优选为2摩尔％以上。
[0378]
＜核酸＞
[0379]
本发明的脂质组合物包含核酸。作为核酸，可以举出质粒、单链dna、双链dna、sirna(small interfering rna：小干扰rna)、mirna(micro rna：微rna)、mrna、反义核酸、核酶、适体、sarna、sgrna等，可以包含其中任何一种。并且，也可以包含修饰的核酸。
[0380]
在本发明的脂质组合物中，核酸相对于全体脂质的含量优选为0.5～50质量％，更
优选为1～25质量％，进一步优选为1.5～20质量％，尤其优选为2～15质量％。并且，全体脂质相对于核酸的含有率优选为2～200，更优选为4～200，进一步优选为6～100，尤其优选为8～75。
[0381]
＜脂质组合物的制造方法＞
[0382]
对本发明的脂质组合物的制造方法进行说明。
[0383]
脂质组合物的制造方法并不受特别限定，能够通过如下进行制造：将脂质组合物的构成成分的全部或一部分油溶性成分溶解于有机溶剂等而制成油相，并将水溶性成分溶解于水而制成水相，将油相和水相进行混合。混合中可以使用微混合器，也可以使用均质机等乳化机、超声波乳化机、高压喷射乳化机等进行乳化。
[0384]
或者，也能够通过如下进行制造：使用包含脂质的溶液，通过基于蒸发器等的减压干固或基于喷雾干燥机等的喷雾干燥等来制备包含脂质的干燥的混合物，将该混合物添加到水类溶剂中，用前述乳化机等进一步进行乳化。
[0385]
作为包含核酸的脂质组合物的制造方法的一例，可以举出包括以下工序的方法：
[0386]
将脂质组合物的构成成分溶解于有机溶剂而得到油相的工序(a)；
[0387]
混合在工序(a)中得到的油相及包含核酸等水溶性成分的水相的工序(b)；
[0388]
稀释在工序(b)中得到的包含油相及水相的混合液而得到脂质颗粒的分散液的工序(c)；
[0389]
从在工序(c)中得到的脂质颗粒的分散液去除上述有机溶剂的工序(d)；及
[0390]
调节在工序(d)中得到的脂质颗粒的分散液的浓度的工序(e)。
[0391]
在工序(a)中，包括将分类为脂质的构成成分溶解于有机溶剂(乙醇等醇或酯等)中。溶解于有机溶剂之后的总脂质浓度并不受特别限定，但通常为1mmol/l～100mmol/l，优选为5mmol/l～50mmol/l，更优选为10mmol/l～30mmol/l。
[0392]
在工序(b)中，水相能够通过将核酸(例如，sirna、反义核酸、mirna(微rna)、mrna等)溶解于水或缓冲液而得到。根据需要，能够添加抗氧化剂等成分。将水相和油相进行混合的比率(质量比)优选5:1～1:1，更优选4:1～2:1。
[0393]
在工序(d)中，作为从脂质颗粒的分散液中去除有机溶剂的方法并不受特别限定，能够使用通常的方法，例如能够通过使用磷酸缓冲生理盐水、蔗糖
·
tris(三羟甲基氨基甲烷)缓冲液等溶液进行渗析来去除有机溶剂。
[0394]
在工序(e)中，能够调整工序(d)中所得到的分散液的浓度。当稀释时，能够将磷酸缓冲生理盐水、生理盐水、蔗糖
·
tris(三羟甲基氨基甲烷)缓冲液等溶液用作稀释液而稀释成适当的浓度。当进行浓缩时，能够通过使用超滤膜的超滤来浓缩工序(d)中所得到的分散液。优选直接使用浓缩的分散液，也优选浓缩之后使用所述稀释液调整为所期望的浓度。
[0395]
作为在工序(d)中的渗析或工序(e)中的稀释中能够使用的溶液，可以添加赋形剂及缓冲剂。作为赋形剂可以举出糖类。作为糖类，例如可以举出蔗糖、海藻糖、麦芽糖、葡萄糖、乳糖、果糖、甘露糖醇、山梨糖醇、肌糖、木糖醇等。作为缓冲剂，例如可以举出aces、bes、bicine、caps、ches、dipso、epps、hepes、heppso、mes、mops、mopso、taps、tapso、tes、tricine等。
[0396]
为了将本发明的脂质颗粒的分散液制成医药组合物，优选进行无菌过滤。作为过滤方法，能够使用中空纤维膜、反渗透膜、膜过滤器等从脂质颗粒的分散液中去除不需要的
物质。在本发明中，虽然不受特别限定，但优选利用具有能够进行灭菌的孔径的过滤器(优选0.2μm的过滤灭菌过滤器)来进行过滤。并且，优选在工序(c)或工序(d)之后进行无菌过滤。
[0397]
进而，根据需要能够对本发明的脂质颗粒的分散液实施冷冻或冷冻干燥。对于本发明的脂质颗粒的分散液，能够通过通常的方法实施冷冻或冷冻干燥，其方法并不受特别限定。
[0398]
＜关于脂质组合物＞
[0399]
本发明的组合物优选由脂质颗粒构成。脂质颗粒是指由脂质构成的颗粒，包括脂质聚集而成的脂质聚集体、胶束、具有选自脂质体中的任一种的结构的组合物，但只要为包含脂质的组合物，则脂质颗粒的结构并不限定于这些。作为脂质体，有如下：具有脂质双层结构，在内部具有水相，双重膜为单层的脂质体；以多层状重叠的多重层脂质体。本发明中可以包括任何脂质体。
[0400]
脂质颗粒的形态能够通过电子显微镜观察或使用x射线的结构分析等来进行确认。例如，通过使用cryo透射型电子显微镜观察(cryotem法)的方法，能够确认是否如脂质体那样，为脂质颗粒具有脂质双分子膜结构(薄片结构)及内水层的结构，或者，是否具有在颗粒内部具有电子密度高的芯部且填充有以脂质为首的构成成分的结构等。通过x射线小角散射(saxs)测定，也能够对脂质颗粒确认有无脂质双分子膜结构(薄片结构)。
[0401]
脂质颗粒的粒径并不受特别限定，但优选为10～1000nm，更优选为30～500nm，进一步优选为50～250nm，尤其优选为50～200nm。脂质颗粒的粒径能够通过通常的方法(例如，动态光散射法、激光衍射法等)进行测定。
[0402]
＜脂质组合物的利用＞
[0403]
作为利用本发明中的脂质组合物的一例，能够通过将包含核酸的脂质组合物导入细胞中来向细胞中导入核酸(例如，基因等)。并且，当在本发明中的脂质组合物中包含具有药物用途的核酸时，脂质组合物能够作为核酸药物给药于活体。即，本发明的脂质组合物优选为用于将核酸导入细胞中的组合物。
[0404]
当将本发明中的脂质组合物用作核酸药物时，本发明的脂质组合物能够单独或与药学上可接受的载体(也称为给药介质，例如，生理盐水或磷酸缓冲液)进行混合而给药于活体。
[0405]
在与药学上可接受的载体的混合物中的脂质组合物(脂质颗粒)的浓度并不受特别限定，通常能够设为0.05质量％至90质量％。并且，包含本发明的脂质组合物的核酸药物可以添加药学上可接受的其他添加物质，例如ph调节缓冲剂、渗透压调节剂等。
[0406]
给药包含本发明的脂质组合物的核酸药物时的给药途径并不受特别限定，能够利用任意的方法给药。作为给药方法，可以举出经口给药、非经口给药(关节内给药、静脉内给药、动脉内给药、皮下给药、皮内给药、玻璃体内给药、腹膜内给药、肌肉内给药、阴道内给药、膀胱内给药、鞘内给药、肺部给药、直肠给药、结肠给药、颊部给药、鼻腔给药、脑池内给药、吸入等)。优选非经口给药，作为给药方法，优选静脉注射、皮下注射、皮内注射或肌肉内注射。包含本发明的脂质组合物的核酸药物也能够通过直接注射到疾病部位来给药。
[0407]
本发明的脂质组合物的剂型并不受特别限定，当进行经口给药时，本发明的脂质组合物能够与适当的赋形剂组合而以片剂、含剂、胶囊剂、丸剂、悬浮剂、糖浆剂等形态使
用。并且，当进行非经口给药时，能够适当组合本发明的脂质组合物与抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂及等渗无菌注射剂、助悬剂、助溶剂、增稠剂、稳定化剂或防腐剂等添加剂。
[0408]
＜核酸递送载体＞
[0409]
本发明的脂质组合物能够以高内含率保持核酸，因此作为核酸递送载体非常有用。根据利用本发明的核酸递送载体，例如能够通过将脂质组合物体外(in vitro)或体内(in vivo)转染至细胞来向细胞中导入核酸等。并且，利用本发明的核酸递送载体也作为核酸药物中的核酸递送载体而有用。即，本发明的脂质组合物作为用于体外或体内(优选体内)核酸递送的组合物而有用。
[0410]
接着，举出实施例对本发明进行说明，但本发明并不限定于这些。
[0411]
实施例
[0412]
当没有特别记载时，基于柱色谱法的纯化中使用了自动纯化装置isolera(biotage公司)或中压液相色谱仪yflc w-prep 2xy(yamazen corporation)。
[0413]
当没有特别记载时，硅胶柱色谱法中的载体使用了chromatorex q-pack si50(fuji silysia chemical ltd.)、high-flash column w001、w002、w003、w004或w005(yamazen corporation)。
[0414]
nh硅胶使用了chromatorex q-pack nh 60(fuji silysia chemical ltd.)。
[0415]
使用四甲基硅烷作为内标物，使用bruker av300(bruker公司制造)或bruker av400(bruker公司制造)来测定nmr光谱，并以ppm表示了总δ值。
[0416]
使用acquity sqd lc/ms system(waters公司制造)测定了ms光谱。
[0417]
＜化合物的合成＞
[0418]
[实施例1]
[0419]
(1)
[0420]
[化学式21]
[0421][0422]
向(6z,9z)-18-溴十八碳-6,9-二烯(131g)、2-硝基苯磺酰胺(34.4g)的n,n-二甲基甲酰胺(830ml)溶液中加入碳酸钾(70.4g)、碘化钠(2.54g)，并在80℃下搅拌了5小时。将反应混合物冷却至室温，并加入了己烷(300ml)及水(600ml)。分取有机层之后，利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的混合物，得到了2-硝基-n,n-二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)苯磺酰胺(96.7g)。
[0423]1h-nmr(cdcl3)δ:8.03-7.99(1h,m),7.69-7.58(3h,m),5.43-5.28(8h,m),3.26(4h,t,j＝6.0hz),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.09-2.00(8h,m),1.56-1.45(4h,m),1.40-1.19(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0424]
(2)
[0425]
[化学式22]
[0426]
[0427]
向2-硝基-n,n-二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)苯磺酰胺(96.7g)、十二烷硫醇(54.9ml)、乙腈(400ml)及四氢呋喃(400ml)的混合物中加入10.0mol/l氢氧化钾水溶液(47.5ml)，并在40℃下搅拌了2小时。将反应混合物冷却至室温，并加入己烷(400ml)、叔丁基甲基醚(100ml)及水(200ml)，分取有机层之后，用无水硫酸镁进行干燥，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了(9z,12z)-二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)胺57.7g。
[0428]1h-nmr(cdcl3)δ:5.43-5.28(8h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.58(4h,t,j＝6.0hz),2.09-1.99(8h,m),1.56-1.45(4h,m),1.40-1.19(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0429]
msm/z(m+h):514.
[0430]
(3)
[0431]
[化学式23]
[0432][0433]
向氯甲酸4-硝基苯酯(11.7g)的四氢呋喃(150ml)溶液中加入2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇(9.36ml)，并在室温下搅拌了1小时。向反应混合物中加入(9z,12z)-二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)胺(15.0g)、三乙胺(16.3ml)，并在50℃下搅拌了4小时。将反应混合物冷却至室温，并加入乙酸乙酯(150ml)及水(100ml)，分取有机层之后，用无水硫酸镁进行干燥，减压蒸馏除去溶剂，并利用硅胶柱色谱法(甲醇-氯仿)纯化了所得到的残留物。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的油状物，得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)乙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯(11.2g)。
[0434]1h-nmr(cdcl3)δ:5.42-5.23(8h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),3.26-3.08(4h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.67(2h,t,6.0hz),2.54(2h,t,j＝6.0hz),2.39(2h,t,j＝6.0),2.32(3h,s),2.24(6h,s),2.12-1.97(8h,m),1.57-1.43(4h,m),1.42-1.18(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0435]
msm/z(m+h):687.
[0436]
[实施例2]
[0437]
(1)
[0438]
[化学式24]
[0439][0440]
向3-溴-1-丙醇(1.67ml)的乙醇(10ml)溶液中加入n,n,n
’‑
三甲基乙烷-1,2-二胺(5ml)，并在60℃下搅拌了8小时。减压蒸馏除去反应混合物的溶剂，并利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-丙醇(1.2g)。
[0441]
msm/z(m+h):161.
[0442]
(2)
[0443]
[化学式25]
[0444][0445]
在实施例1(3)中，使用3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-丙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯。
[0446]1h-nmr(cdcl3)δ:5.44-5.27(8h,m),4.09(2h,t,j＝6.0hz),3.25-3.09(4h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.50-2.34(6h,m),2.25(3h,s),2.24(6h,s),2.10-1.99(8h,m),1.86-1.74(2h,m),1.58-1.43(4h,m),1.42-1.18(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz)
[0447]
msm/z(m+h):701.
[0448]
[实施例3]
[0449]
(1)
[0450]
[化学式26]
[0451][0452]
向哌啶-4-醇(2.0g)、2-氯-n,n-二甲基乙-1-胺盐酸盐(5.69g)的水(5ml)溶液中加入12.0mol/l氢氧化钠水溶液(5ml)，并在室温下搅拌了9小时。向反应混合物中加入二氯甲烷及水，分取有机层，并用二氯甲烷提取了水层。合并有机层和提取液，用无水硫酸钠进行干燥，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了1-(2-(二甲基氨基)乙基)哌啶-4-醇(1.3g)。
[0453]
msm/z(m+h):173.
[0454]
(2)
[0455]
[化学式27]
[0456][0457]
在实施例1(3)中，使用1-(2-(二甲基氨基)乙基)哌啶-4-醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了1-(2-(二甲基氨基)乙基)哌啶-4-基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯。
[0458]1h-nmr(cdcl3)δ:5.43-5.28(8h,m),4.75-4.66(1h,m),3.24-3.10(4h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.72-2.60(2h,m),2.50-2.39(4h,m),2.37-2.27(2h,m),2.24(6h,s),2.09-1.99(8h,m),1.97-1.85(2h,m),1.76-1.65(2h,m),1.66-1.58(8h,m),1.56-1.43(4h,m),1.41-1.19(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0459]
msm/z(m+h):713.
[0460]
[实施例4]
[0461]
(1)
[0462]
[化学式28]
[0463][0464]
在实施例3(1)中，使用哌啶-3-醇来代替使用哌啶-4-醇，除此以外，利用与实施例3(1)相同的方法得到了1-(2-(二甲基氨基)乙基)哌啶-3-醇。
[0465]
msm/z(m+h):173.
[0466]
(2)
[0467]
[化学式29]
[0468][0469]
在实施例1(3)中，使用1-(2-(二甲基氨基)乙基)哌啶-3-醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了1-(2-(二甲基氨基)乙基)哌啶-3-基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯。
[0470]1h-nmr(cdcl3)δ:5.43-5.28(8h,m),4.78-4.68(1h,m),3.26-3.06(4h,m),2.94-2.87(1h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.70-2.61(1h,m),2.52-2.38(4h,m),2.24(6h,s),2.16-1.99(10h,m),1.97-1.87(1h,m),1.77-1.43(7h,m),1.41-1.19(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0471]
msm/z(m+h):713.
[0472]
[实施例5]
[0473]
(1)
[0474]
[化学式30]
[0475][0476]
向2-(甲基氨基)-1-乙醇(3.0g)、碳酸钾(22.1g)的乙醇(60ml)悬浮液中加入4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐(14.9g)，并在60℃下搅拌4小时，在回流下搅拌了3小时。将反应混合物冷却至室温之后，滤除不溶物，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了2-(甲基(2-吗啉基乙基)氨基)-1-乙醇(5.5g)。
[0477]
msm/z(m+h):189.
[0478]
(2)
[0479]
[化学式31]
[0480]
[0481]
在实施例1(3)中，使用2-(甲基(2-吗啉基乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了2-(甲基(2-吗啉基乙基)氨基)乙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯。
[0482]1h-nmr(cdcl3)δ:5.46-5.25(8h,m),4.16(2h,t,j＝6.0hz),3.71(4h,t,j＝6.0hz),3.25-3.09(4h,m),2.27(4h,t,j＝6.0hz),2.67(2h,t,j＝6.0hz),2.62-2.53(2h,m),2.52-2.42(6h,m),2.32(3h,s),2.11-1.97(8h,m),1.55-1.44(4h,m),1.42-1.17(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0483]
msm/z(m+h):729.
[0484]
[实施例6]
[0485]
(1)
[0486]
[化学式32]
[0487][0488]
在实施例5(1)中，使用2-(乙基氨基)-1-乙醇来代替使用2-(甲基氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例5(1)相同的方法得到了2-(乙基(2-吗啉基乙基)氨基)-1-乙醇。
[0489]
msm/z(m+h):203.
[0490]
(2)
[0491]
[化学式33]
[0492][0493]
在实施例1(3)中，使用2-(乙基(2-吗啉基乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了2-(乙基(2-吗啉基乙基)氨基)乙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯。
[0494]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.24(8h,m),4.12(2h,t,j＝6.0hz),3.70(4h,t,j＝6.0hz),3.27-3.06(4h,m),2.82-2.69(6h,m),2.69-2.54(4h,m),2.52-2.39(6h,m),2.12-1.97(8h,m),1.55-1.42(4h,m),1.41-1.17(32h,m),1.03(3h,t,j＝6.0hz),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0495]
msm/z(m+h):743.
[0496]
[实施例7]
[0497]
(1)
[0498]
[化学式34]
[0499][0500]
在实施例5(1)中，使用2-氯-n,n-二乙基乙-1-胺盐酸盐来代替使用4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐，除此以外，利用与实施例5(1)相同的方法得到了2-((2-(二乙基氨基)乙基)
(甲基)氨基)-1-乙醇。
[0501]
msm/z(m+h):175.
[0502]
(2)
[0503]
[化学式35]
[0504][0505]
在实施例1(3)中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了2-((2-(二乙基氨基)乙基)(甲基)氨基)乙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯。
[0506]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.26(8h,m),4.16(2h,t,j＝6.0hz),3.25-3.09(4h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.67(2h,t,j＝6.0hz),2.60-2.49(8h,m),2.32(3h,s),2.12-1.96(8h,m),1.56-1.44(4h,m),1.42-1.17(32h,m),1.02(6h,t,j＝6.0hz),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0507]
msm/z(m+h):715.
[0508]
[实施例8]
[0509]
(1)
[0510]
[化学式36]
[0511][0512]
在实施例2(1)中，使用2-溴-1-乙醇来代替使用3-溴-1-丙醇，使用n,n,n
’‑
三甲基丙烷-1,3-二胺来代替使用n,n,n
’‑
三甲基乙烷-1,2-二胺，除此以外，利用与实施例2(1)相同的方法得到了2-((3-(二甲基氨基)丙基)(甲基)氨基)-1-乙醇。
[0513]
msm/z(m+h):161.
[0514]
(2)
[0515]
[化学式37]
[0516][0517]
在实施例1(3)中，使用2-((3-(二甲基氨基)丙基)(甲基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了2-((3-(二甲基氨基)丙基)(甲基)氨基)乙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯。
[0518]1h-nmr(cdcl3)δ:5.43-5.28(8h,m),4.16(2h,t,j＝6.0hz),3.25-3.10(4h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.63(2h,t,j＝6.0hz),2.42(2h,t,j＝6.0hz),2.28(3h,s),2.27(2h,t,j＝6.0hz),2.21(6h,s),2.04(8h,q,j＝6.0ha),1.67-1.58(2h,m),1.56-1.43(4h,m),1.40-1.19(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0519]
msm/z(m+h):701.
[0520]
[实施例9]
[0521]
(1)
[0522]
[化学式38]
[0523][0524]
在实施例1(3)中，使用(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了2-((叔丁氧基羰基)(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)氨基)乙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯。
[0525]1h-nmr(cdcl3)δ:5.44-5.27(8h,m),4.20-4.09(1h,m),3.51-3.10(10h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.10-1.99(8h,m),1.64-1.48(4h,m),1.41-1.23(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0526]
(2)
[0527]
[化学式39]
[0528][0529]
向2-((叔丁氧基羰基)(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)氨基)乙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯(0.6g)、水(0.2ml)及二氯甲烷(0.5ml)的混合物中加入三氟乙酸(2ml)，并在室温下搅拌了30分钟。向反应混合物中加入甲苯，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(甲醇-氯仿、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了2-((2-氨基乙基)氨基)乙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯(0.3g)。
[0530]1h-nmr(cdcl3)δ:5.43-5.28(8h,m),4.18(2h,t,j＝6.0hz),3.24-3.11(4h,m),2.87(2h,t,j＝6.0hz),2.80(2h,t,j＝6.0hz),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.70(2h,t,j＝6.0hz),2.09-2.00(8h,m),1.59-1.44(4h,m),1.40-1.19(32h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0531]
msm/z(m+h):645.
[0532]
[实施例10]
[0533]
[化学式40]
[0534][0535]
在实施例1(3)中，使用双十六烷胺来代替使用(9z,12z9-二((9z,12z)-十八碳-9、12-二烯-1-基)胺，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)乙基双十六烷基氨基甲酸酯。
[0536]1h-nmr(cdcl3)δ:4.17(2h,t,j＝6.0hz),3.23-3.12(4h,m),2.67(2h,t,j＝6.0hz),2.54(2h,t,j＝6.0hz),2.39(2h,t,j＝6.0hz),2.32(3h,s),2.24(6h,s),1.55-1.38(4h,m),1.35-1.18(52h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0537]
msm/z(m+h):639.
[0538]
[实施例11]
[0539]
[化学式41]
[0540][0541]
在实施例1(3)中，使用按照wo2016/081029a1中所记载的方法合成的二((z)-酮-2-烯-1-基)8,8
’‑
氮烷二基(azanediyl)二辛酸酯来代替使用(9z,12z9-二((9z,12z)-十八碳-9、12-二烯-1-基)胺，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了(z)-酮-2-烯-1-基2,5-二甲基-10-(8-(((z)-酮-2-烯-1-基)氧基)-8-氧代辛基)-9-氧代-8-氧代-2,5,10-三氮杂十八烷-18-酸酯。
[0542]1h-nmr(cdcl3)δ:5.70-5.46(4h,m),4.61(4h,d,j＝6.0hz),4.16(2h,t,j＝6.0hz),3.23-3.09(4h,m),2.66(2h,t,j＝6.0hz),2.61-2.45(2h,m),2.42-2.25(2h,m),2.31(3h,s),2.23(6h,s),2.15-2.05(4h,m),1.65-1.56(4h,m),1.55-1.43(4h,m),1.39-1.20(32h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0543]
msm/z(m+h):723.
[0544]
[实施例12]
[0545]
[化学式42]
[0546][0547]
在实施例1(3)中，使用按照wo2016/081029a1中所记载的方法合成的二((e)-酮-2-烯-1-基)8,8
’‑
氮烷二基二辛酸酯来代替使用(9z,12z9-二((9z,12z)-十八碳-9、12-二烯-1-基)胺，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了(e)-酮-2-烯-1-基2,5-二甲基-10-(8-(((e)-酮-2-烯-1-基)氧基)-8-氧代辛基)-9-氧代-8-氧代-2,5,10-三氮杂十八烷-18-酸酯。
[0548]1h-nmr(cdcl3)δ:5.83-5.70(2h,m),5.61-5.49(2h,m),4.50(4h,d,j＝6.0hz),4.16(2h,t,j＝6.0hz),3.24-3.09(4h,m),2.67(2h,t,j＝6.0hz),2.54(2h,t,j＝6.0hz),2.38(2h,t,j＝6.0hz),2.31(3h,s),2.24(6h,s),2.09-2.00(4h,m),1.65-1.56(4h,m),1.55-1.44(4h,m),1.41-1.23(32h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0549]
msm/z(m+h):723.
[0550]
[实施例13]
[0551]
[化学式43]
[0552][0553]
在实施例1(3)中，使用按照wo2016/081029a1中所记载的方法合成的二壬基8,8
’‑
氮烷二基二辛酸酯来代替使用(9z,12z9-二((9z,12z)-十八碳-9、12-二烯-1-基)胺，除此
以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了壬基2,5-二甲基-10-(8-(壬氧基)-8-氧代辛基)-9-氧代-8-氧代-2,5,10-三氮杂十八烷-18-酸酯。
[0554]1h-nmr(cdcl3)δ:4.20-4.01(6h,m),3.24-3.09(4h,m),2.71-2.51(4h,m),2.44-2.38(2h,m),2.31(3h,s),2.26(6h,s),1.79-1.43(12h,m),1.37-1.23(40h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0555]
msm/z(m+h):727.
[0556]
[实施例14]
[0557]
(1)
[0558]
[化学式44]
[0559][0560]
在实施例1(1)中，使用6-溴-1-己醇来代替使用(6z,9z)-18-溴十八碳-6,9-二烯，除此以外，利用与实施例1(1)相同的方法得到了n,n-双(6-羟基己基)-2-硝基苯磺酰胺。
[0561]
向所得到的n,n-双(6-羟基己基)-2-硝基苯磺酰胺(2.13g)、三乙胺(0.58ml)及四氢呋喃(5ml)的混合物中加入(z)-酮-2-烯-1-基氯甲酸酯(carbonochloridate)(3.15g)，并在室温下搅拌了1小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用水清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去溶剂，得到了(z)-6-((n-(6-羟基己基)-2-硝基苯基)磺酰胺基)己基酮-2-烯-1-基碳酸酯(1.67g)。
[0562]1h-nmr(cdcl3)δ:8.04-7.97(1h,m),7.71-7.59(3h,m),5.72-5.51(2h,m),4.68(2h,d,j＝6.0hz),4.12(2h,t,j＝6.0hz),3.65-3.59(2h,m),3.30-3.24(4h,m),2.14-2.07(2h,m),1.66-1.48(8h,m),1.40-1.22(16h,m),0.88(3h,t,j＝6.0hz).
[0563]
向所得到的(z)-6-((n-(6-羟基己基)-2-硝基苯基)磺酰胺基)己基酮-2-烯-1-基碳酸酯(1.67g)、(z)-4-硝基苯基酮-2-烯-1-基碳酸酯(1.84g)、三乙胺(1.7ml)及四氢呋喃(17ml)的混合物中加入4-二甲基氨基吡啶(0.37g)，并在50℃下搅拌了6小时。将反应混合物冷却至室温之后，在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了(((2-硝基苯基)磺酰基)氮烷二基)双(己烷-6,1-二基)二((z)-酮-2-烯-1-基)双(碳酸酯)(1.96g)。
[0564]1h-nmr(cdcl3)δ:8.04-7.97(1h,m),7.71-7.59(3h,m),5.72-5.51(4h,m),4.68(4h,d,j＝6.0hz),4.12(4h,t,j＝6.0hz),3.27(4h,t,j＝6.0hz),2.14-2.07(4h,m),1.66-1.48(8h,m),1.40-1.22(24h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0565]
(2)
[0566]
[化学式45]
[0567]
[0568]
向(((2-硝基苯基)磺酰基)氮烷二基)双(己烷-6,1-二基)二((z)-酮-2-烯-1-基)双(碳酸酯)(1.01g)、十二烷-1-硫醇(1.05ml)及乙腈(10ml)的混合物中加入碳酸铯(2.51g)，并在50℃下搅拌了10小时。将反应混合物冷却至室温，并加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用无水硫酸钠进行干燥之后，在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了氮烷二基双(己烷-6,1-二基)二((z)-酮-2-烯-1-基)双(碳酸酯)(1.59g)。
[0569]1h-nmr(cdcl3)δ:5.73-5.50(4h,m),4.68(4h,d,j＝6.0hz),4.12(4h,t,j＝6.0hz),2.61(4h,t,j＝6.0hz),2.15-2.05(4h,m),1.73-1.46(8h,m),1.42-1.24(24h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0570]
(3)
[0571]
[化学式46]
[0572][0573]
在实施例1(3)中，使用氮烷二基双(己烷-6,1-二基)二((z)-酮-2-烯-1-基)双(碳酸酯)来代替使用(9z,12z9-二((9z,12z)-十八碳-9、12-二烯-1-基)胺，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)乙基双(6-(((((z)-酮-2-烯-1-基)氧基)羰基)氧基)己基)氨基甲酸酯。
[0574]1h-nmr(cdcl3)δ:5.73-5.50(4h,m),4.67(4h,d,j＝6.0hz),4.20-4.08(6h,m),3.24-3.10(4h,m),2.66(2h,d,j＝6.0hz),2.53(2h,t,j＝6.0hz),2.38(2h,t,j＝6.0hz),2.31(3h,s),2.24(6h,s),2.15-2.06(4h,m),1.72-1.45(8h,m),1.42-1.23(24h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0575]
msm/z(m+h):727.
[0576]
[实施例15]
[0577]
(1)
[0578]
[化学式47]
[0579][0580]
向1-壬胺(1.95g)及碳酸钾(1.87g)的n,n-二甲基甲酰胺(20ml)悬浮液中加入(z)-1-溴十八碳-9-烯(4.53g)，并在80℃下搅拌了9小时。将反应混合物冷却至室温，并加入了水(40ml)及己烷(40ml)。分取有机层之后，在减压下蒸馏除去溶剂，利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了(z)-n-壬基十八碳-9-烯-1-胺(1.72g)。
[0581]
msm/z(m+h):394.
[0582]
(2)
[0583]
[化学式48]
[0584][0585]
在实施例1(3)中，使用(z)-n-壬基十八碳-9-烯-1-胺来代替使用(9z,12z9-二
1.43(4h,m),1.34-1.19(20h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0605]
msm/z(m+h):414.
[0606]
[实施例18]
[0607]
[化学式52]
[0608][0609]
在实施例1(3)中，使用二壬胺来代替使用(9z,12z9-二((9z,12z)-十八碳-9、12-二烯-1-基)胺，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)乙基二壬基氨基甲酸酯。
[0610]1h-nmr(cdcl3)δ:4.17(2h,t,j＝6.0hz),3.24-3.12(4h,m),2.68(2h,t,j＝6.0hz),2.54(2h,t,j＝6.0hz),2.39(2h,t,j＝6.0hz),2.32(3h,s),2.24(6h,s),1.55-1.43(4h,m),1.34-1.19(24h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0611]
msm/z(m+h):442.
[0612]
[实施例19]
[0613]
[化学式53]
[0614][0615]
在实施例1(3)中，使用二癸胺来代替使用(9z,12z9-二((9z,12z)-十八碳-9、12-二烯-1-基)胺，除此以外，利用与实施例1(3)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)乙基二癸基氨基甲酸酯。
[0616]1h-nmr(cdcl3)δ:4.17(2h,t,j＝6.0hz),3.23-3.12(4h,m),2.67(2h,t,j＝6.0hz),2.54(2h,t,j＝6.0hz),2.39(2h,t,j＝6.0hz),2.32(3h,s),2.24(6h,s),1.55-1.38(4h,m),1.35-1.18(28h,m),0.88(6h,t,j＝6.0hz).
[0617]
msm/z(m+h):470.
[0618]
[实施例20]
[0619]
(1)
[0620]
[化学式54]
[0621][0622]
向按照wo2010/054401a1中所记载的方法合成的(6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-醇(5.0g)、三乙胺(4.0ml)及四氢呋喃(25ml)的混合物中加入氯甲酸4-硝基苯酯(3.8g)，并在室温下搅拌了6小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用水清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了(6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基(4-硝基苯基)碳酸酯(6.25g)。
[0623]1h-nmr(cdcl3)δ:8.31-8.24(2h,m),7.42-7.35(2h,m),5.44-5.27(8h,m),4.87-4.76(1h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.11-1.99(8h,m),1.74-1.57(4h,m),1.44-1.21(36h,
6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0640]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.26(8h,m),4.74-4.60(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),3.71(4h,t,j＝6.0hz),2.84-2.72(6h,m),2.70-2.54(4h,m),2.52-2.39(6h,m),2.12-1.94(8h,m),1.66-1.47(4h,m),1.44-1.18(36h,m),1.03(3h,t,j＝6.0hz),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0641]
msm/z(m+h):758.
[0642]
[实施例23]
[0643]
[化学式58]
[0644][0645]
在实施例20(2)中，使用实施例7(1)中所合成的2-((2-(二乙基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了2-((2-(二乙基氨基)乙基)(甲基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0646]1h-nmr(cdcl3)δ:5.44-5.27(8h,m),4.72-4.61(1h,m),4.21(2h,t,j＝6.0hz),2.77(4h,t,j＝6.0),2.70(2h,t,j＝6.0hz),2.59-2.49(8h,m),2.31(3h,s),2.14-1.94(8h,m),1.64-1.47(4h,m),1.43-1.19(36h,m),1.02(6h,t,j＝6.0hz),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0647]
msm/z(m+h):730.
[0648]
[实施例24]
[0649]
(1)
[0650]
[化学式59]
[0651][0652]
在实施例5(1)中，使用2-氯-n,n-二甲基乙-1-胺盐酸盐来代替使用4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐，使用2-(乙基氨基)-1-乙醇来代替使用2-(甲基氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例5(1)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇。
[0653]
msm/z(m+h):161.
[0654]
(2)
[0655]
[化学式60]
[0656][0657]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,
9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0658]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.26(8h,m),4.73-4.61(1h,m),4.18(2h,t,j＝6.0hz),2.83-2.71(6h,m),2.67-2.55(4h,m),2.42-2.33(2h,m),2.24(6h,s),2.12-1.98(8h,m),1.64-1.50(4h,m),1.45-1.19(36h,m),1.03(3h,t,j＝6.0hz),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0659]
msm/z(m+h):716.
[0660]
[实施例25]
[0661]
(1)
[0662]
[化学式61]
[0663][0664]
在实施例5(1)中，使用2-氯-n,n-二甲基乙-1-胺盐酸盐来代替使用4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐，使用2-(异丙基氨基)-1-乙醇来代替使用2-(甲基氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例5(1)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇。
[0665]
msm/z(m+h):175.
[0666]
(2)
[0667]
[化学式62]
[0668][0669]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(异丙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0670]1h-nmr(cdcl3)δ:5.46-5.26(8h,m),4.73-4.61(1h,m),4.10(2h,t,j＝6.0hz),2.98-2.85(1h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.69(2h,t,j＝6.0hz),2.60-2.52(2h,m),2.37-2.29(2h,m),2.24(6h,s),2.10-1.99(8h,m),1.58-1.49(4h,m),1.45-1.20(36h,m),0.99(6h,d,j＝6.0hz),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0671]
msm/z(m+h):730.
[0672]
[实施例26]
[0673]
(1)
[0674]
[化学式63]
[0675][0676]
在实施例5(1)中，使用(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯来代替使用4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐，除此以外，利用与实施例5(1)相同的方法得到了(2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。
[0677]
msm/z(m+h):219.
[0678]
(2)
[0679]
[化学式64]
[0680][0681]
在实施例20(2)中，使用(2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了(2-((2-(((((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)氧基)乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。
[0682]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.26(8h,m),5.04(1h,bs),4.76-4.62(1h,m),4.20(2h,t,j＝6.0hz),3.25-3.12(2h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.68(2h,t,j＝6.0hz),2.52(2h,t,j＝6.0hz),2.28(3h,s),2.12-1.96(8h,m),1.62-1.50(4h,m),1.45(9h,s),1.62-1.50(36h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0683]
msm/z(m+h):774.
[0684]
(3)
[0685]
[化学式65]
[0686][0687]
在实施例9(2)中，使用实施例26(2)中所合成的(2-((2-(((((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)氧基)乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯来代替使用2-((叔丁氧基羰基)(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)氨基)乙基二((9z,12z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氨基甲酸酯，除此以外，利用与实施例9(2)相同的方法得到了2-((2-氨基乙基)(甲基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0688]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.26(8h,m),4.73-4.61(1h,m),4.22(2h,t,j＝6.0hz),2.82-2.72(6h,m),2.68(2h,t,j＝6.0hz),2.47(2h,t,j＝6.0hz),2.29(3h,s),2.11-1.98(8h,m),1.62-1.44(4h,m),1.42-1.19(36h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0689]
msm/z(m+h):674.
[0690]
[实施例27]
[0691]
(1)
[0692]
[化学式66]
[0693][0694]
向n,n
’‑
二甲基乙烷-1,2-二胺(5.0g)及碳酸钾(17.2g)的乙醇(50ml)悬浮液中加入2-溴-1-乙醇(14.2g)，并在60℃下搅拌了5小时。将反应混合物冷却至室温，滤除不溶物之后，减压蒸馏除去溶剂，得到了2,2
’‑
(乙烷-1,2-二基双(甲基氮烷二基))双(-1-乙醇)(10.2g)。
[0695]
msm/z(m+h):177.
[0696]
(2)
[0697]
[化学式67]
[0698][0699]
在实施例20(2)中，使用2,2
’‑
(乙烷-1,2-二基双(甲基氮烷二基))双(-1-乙醇)来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了(6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基(2-((2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)乙基)碳酸酯。
[0700]1h-nmr(cdcl3)δ:5.44-5.27(8h,m),4.73-4.61(1h,m),4.23(2h,t,j＝6.0hz),3.56(2h,t,j＝6.0hz),2.82-2.67(6h,m),2.58-2.52(6h,m),2.31(6h,s),2.11-1.99(8h,m),1.63-1.46(4h,m),1.42-1.20(36h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0701]
msm/z(m+h):732.
[0702]
[实施例28]
[0703]
(1)
[0704]
[化学式68]
[0705][0706]
在实施例5(1)中，使用2,2
’‑
氮烷二基双(-1-乙醇)来代替使用2-(甲基氨基)-1-乙醇，使用2-氯-n,n-二甲基乙-1-胺盐酸盐来代替使用4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐，除此以外，利用与实施例5(1)相同的方法得到了2,2
’‑
((2-(二甲基氨基)乙基)氮烷二基)双(-1-乙醇)。
[0707]
msm/z(m+h):177.
[0708]
(2)
[0709]
[化学式69]
[0710][0711]
在实施例20(2)中，使用2,2
’‑
((2-(二甲基氨基)乙基)氮烷二基)双(-1-乙醇)来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基)乙基)((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0712]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.25(8h,m),4.73-4.62(1h,m),4.21(2h,t,j＝6.0hz),3.53(2h,t,j＝6.0hz),2.89(2h,t,j＝6.0hz),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.73-2.64(4h,m),2.37(2h,t,j＝6.0hz),2.23(6h,s),2.10-1.98(8h,m),1.65-1.46(4h,m),1.43-1.18(36h,m),0.89(6h,t,j＝6.0hz).
[0713]
msm/z(m+h):732.
[0714]
[实施例29]
[0715]
(1)
[0716]
[化学式70]
[0717][0718]
向按照wo2015/005253a1中所记载的方法合成的((19z，22z)-二十八碳-19,22-二烯-11-醇(1.0g)、三乙胺(1.0ml)及四氢呋喃(5.0ml)的混合物中加入氯甲酸4-硝基苯酯(1.0g)，并在室温下搅拌了2小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用无水硫酸钠进行干燥之后，减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了4-硝基苯基((19z，22z)-二十八碳-19,22-二烯-11-基)碳酸酯(2.0g)。
[0719]1h-nmr(cdcl3)δ:8.28(2h,d,j＝9.0hz),7.38(2h,d,j＝9.0hz),5.43-5.28(4h,m),4.87-4.77(1h,m),2.77(2h,t,j＝6.0hz),2.10-1.99(4h,m),1.76-1.60(4h,m),1.43-1.20(32h,m),0.92-0.83(6h,m).
[0720]
(2)
[0721]
[化学式71]
[0722][0723]
在实施例20(2)中，使用4-硝基苯基((19z，22z)-二十八碳-19,22-二烯-11-基)碳酸酯来代替使用(6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基(4-硝基苯基)碳酸酯，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)乙基((19z，22z)-二十八碳-19,22-二烯-11-基)碳酸酯。
[0724]1h-nmr(cdcl3)δ:5.44-5.26(4h,m),4.73-4.62(1h,m),4.22(2h,t,j＝6.0hz),2.77(2h,t,j＝6.0hz),2.71(2h,t,j＝6.0hz),2.54(2h,t,j＝6.0hz),2.39(2h,t,j＝6.0hz),2.31(3h,s),2.24(6h,s),2.11-1.97(4h,m),1.65-1.45(4h,m),1.42-1.19(32h,m),0.93-0.84(6h,m).
[0725]
msm/z(m+h):580.
[0726]
[实施例30]
[0727]
(1)
[0728]
[化学式72]
[0729][0730]
向2-(乙基氨基)-1-乙醇(4.0g)、2-溴-n,n-二乙基乙-1-胺氢溴酸盐(17.6g)及乙醇(80ml)的混合物中加入碳酸钾(18.6g)，并在加热回流下搅拌了7小时。将反应混合物冷却至室温，滤除不溶物，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了淡黄色油状物的2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇(6.5g)。
[0731]
msm/z(m+h):189.
[0732]
(2)
[0733]
[化学式73]
[0734][0735]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0736]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.26(8h,m),4.72-4.60(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),2.83-2.69(6h,m),2.65-2.46(10h,m),2.13-1.96(8h,m),1.65-1.47(4h,m),1.43-1.20(36h,m),1.09-0.98(9h,m),0.89(6h,t,j＝6.6hz).
[0737]
msm/z(m+h):744.
[0738]
[实施例31]
[0739]
(1)
[0740]
[化学式74]
[0741][0742]
向2-(丙基氨基)-1-乙醇(2.0g)、2-氯-n,n-二甲基乙-1-胺盐酸盐(4.2g)及乙醇(40ml)的混合物中加入碳酸钾(8.0g)，并在加热回流下搅拌了9小时。将反应混合物冷却至室温，滤除不需要的物质，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了黄色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(丙基)氨基)-1-乙醇(0.87g)。msm/z(m+h):175.
[0743]
(2)
[0744]
[化学式75]
[0745][0746]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(丙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0747]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.26(8h,m),4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),2.85-2.70(6h,m),2.66-2.56(2h,m),2.51-2.41(2h,m),2.41-2.32(2h,m),2.24(6h,s),2.12-1.95(8h,m),1.66-1.18(42h,m),0.96-0.81(9h,m).
[0748]
msm/z(m+h):730.
[0749]
[实施例32]
[0750]
(1)
[0751]
[化学式76]
[0752][0753]
在实施例31(1)中，使用2-(环己基氨基)-1-乙醇来代替使用2-(丙基氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例31(1)相同的方法得到了黄色油状物的2-(环己基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇。
[0754]
msm/z(m+h):215.
[0755]
(2)
[0756]
[化学式77]
[0757][0758]
在实施例20(2)中，使用2-(环己基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-(环己基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0759]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.25(8h,m),4.74-4.59(1h,m),4.08(2h,t,j＝6.6hz),2.85-2.70(6h,m),2.68-2.57(2h,m),2.48-2.37(1h,m),2.37-2.29(2h,m),2.24(6h,s),2.13-1.94(8h,m),1.85-1.69(4h,m),1.66-1.49(4h,m),1.46-1.09(42h,m),0.89(6h,t,j＝6.6hz).
[0760]
msm/z(m+h):770.
[0761]
[实施例33]
[0762]
[化学式78]
[0763][0764]
在实施例29(2)中，使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例29(2)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙基((19z,22z)-二十八碳-19,22-二烯-11-基)碳酸酯。
[0765]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.27(4h,m),4.73-4.62(1h,m),4.18(2h,t,j＝4.8hz),2.83-2.71(4h,m),2.67-2.55(4h,m),2.42-2.34(2h,m),2.24(6h,s),2.12-1.97(4h,m),1.67-1.47(4h,m),1.43-1.19(32h,m),1.03(3h,t,j＝5.4hz),0.95-0.82(6h,m).
[0766]
msm/z(m+h):594.
[0767]
[实施例34]
[0768]
[化学式79]
4.13(4h,m),2.83-2.72(6h,m),2.66-2.55(4h,m),2.42-2.28(6h,m),2.24(6h,s),2.13-1.95(8h,m),1.68-1.50(4h,m),1.42-1.23(28h,m),1.03(3h,t,j＝5.4hz),0.89(6h,t,j＝5.4hz).
[0780]
msm/z(m+h):804.
[0781]
[实施例36]
[0782]
(1)
[0783]
[化学式81]
[0784][0785]
在冰冷下，向苯甲醛(30.0g)、6-溴-1-己醇(56.1g)、三乙基硅烷(67.5ml)、甲苯(300ml)的混合物中加入三氟化硼乙醚络合物(46.2ml)，并在相同温度下搅拌了40分钟。向反应混合物中加入水，分取有机层，用饱和碳酸氢钠水溶液清洗之后，在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的(((6-溴己基)氧基)甲基)苯(73.5g)。
[0786]1h-nmr(cdcl3)δ:7.38-7.23(5h,m),4.50(2h,s),3.47(2h,t,j＝6.6hz),3.40(2h,t,j＝6.6hz),1.92-1.81(2h,m),1.68-1.58(2h,m),1.52-1.35(4h,m).
[0787]
将(((6-溴己基)氧基)甲基)苯(66.7g)与四氢呋喃(200ml)的混合物滴加到镁(7.5g)与四氢呋喃(40ml)的混合物中，并在室温下搅拌了1小时。在冰冷下，向反应混合物中加入甲酸乙酯(8.3g)与四氢呋喃(100ml)的混合物，并在相同温度下搅拌了1小时。在冰冷下，将反应混合物注入到10％硫酸水溶液(330ml)之后，加入己烷(300ml)，分取有机层，用无水硫酸镁进行干燥之后，在减压下蒸馏除去了溶剂。向所得到的残留物中加入四氢呋喃(200ml)、乙醇(100ml)及10mol/l氢氧化钾水溶液，并在40℃下搅拌了1小时。向反应混合物中加入己烷(200ml)及水(100ml)，分取有机层之后，用无水硫酸镁进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的1,13-双(苄氧基)-7-十三烷醇(25.3g)。
[0788]1h-nmr(cdcl3)δ:7.36-7.24(10h,m),4.50(4h,s),3.61-3.54(1h,m),3.46(4h,t,j＝6.6hz),1.68-1.56(4h,m),1.48-1.26(16h,m).
[0789]
在氢环境气体下，将1,13-双(苄氧基)-7-十三烷醇(24.0g)、10％氢氧化钯-碳(10.0g)及甲醇(240ml)的混合物在50℃下搅拌了3小时。将反应混合物冷却至室温，用硅藻土滤除不溶物之后，在减压下蒸馏除去了溶剂。向所得到的残留物中加入乙酸乙酯(40ml)，滤取固体物质，用乙酸乙酯清洗之后，在减压下进行干燥，得到了白色固体的1,7,13-十三烷三醇(11.7g)。
[0790]1h-nmr(cdcl3)δ:3.70-3.55(5h,m),1.64-1.24(20h,m).
[0791]
(2)
[0792]
[化学式82]
[0793][0794]
向1,7,13-十三烷三醇(5.0g)、油酸(13.4g)、三乙胺(18.2ml)、4-二甲基氨基吡啶(0.26g)及n,n-二甲基甲酰胺(25ml)的混合物中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(10.3g)，并在室温下搅拌了15小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的7-羟基十三烷-1,3-二基二油酸酯(3.6g)。
[0795]1h-nmr(cdcl3)δ:5.41-5.28(4h,m),4.06(4h,t,j＝6.6hz),3.63-3.53(1h,m),2.29(4h,t,j＝7.2hz),2.06-1.96(8h,m),1.68-1.20(64h,m),0.88(6h,t,j＝7.2hz).
[0796]
向7-羟基十三烷-1,3-二基二油酸酯(400mg)、三乙胺(0.22ml)及四氢呋喃(4ml)的混合物中加入氯甲酸4-硝基苯酯(161mg)，并在室温下搅拌了5小时。向反应混合物中加入2-((2-(二甲基氨基)乙基)(乙基)氨基)
[0797]-1-乙醇(0.26g)、三乙胺(0.22ml)及4-二甲基氨基吡啶(0.19g)，并在70℃下搅拌了4小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(甲醇-乙酸乙酯)及硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二甲基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯(138mg)。
[0798]1h-nmr(cdcl3)δ:5.41-5.26(4h,m),4.72-4.63(1h,m),4.18(2h,t,j＝6.4hz),4.04(4h,t,j＝6.8hz),2.77(2h,t,j＝6.8hz),2.66-2.56(4h,m),2.43-2.34(2h,m),2.34-2.25(4h,m),2.24(6h,s),2.09-1.94(8h,m),1.70-1.47(12h,m),1.44-1.19(52h,m),1.03(3h,t,j＝7.2),0.88(6h,t,j＝6.8hz).
[0799]
msm/z(m+h):948.
[0800]
[实施例37]
[0801]
(1)
[0802]
[化学式83]
[0803]
[0804]
向2-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇(250mg)、己醛(0.35ml)、乙酸(0.16ml)及四氢呋喃(2.5ml)的混合物中加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.8g)，并在室温下搅拌了2小时。在冰冷下，向反应混合物中加入甲醇，利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化，得到了无色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(己基)氨基)-1-乙醇(400mg)。
[0805]
msm/z(m+h):217.
[0806]
(2)
[0807]
[化学式84]
[0808][0809]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(己基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(己基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0810]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.27(8h,m),4.72-4.62(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.4hz),2.84-2.71(6h,m),2.65-2.57(2h,m),2.53-2.54(2h,m),2.41-2.32(2h,m),2.23(6h,s),2.12-1.97(8h,m),1.68-1.49(4h,m),1.48-1.20(44h,m),0.97-0.83(9h,m).
[0811]
msm/z(m+h):772.
[0812]
[实施例38]
[0813]
(1)
[0814]
[化学式85]
[0815][0816]
在实施例31(1)中，使用2-(丁基氨基)-1-乙醇来代替使用2-(丙基氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例31(1)相同的方法得到了黄色油状物的2-(丁基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇。
[0817]
msm/z(m+h):189.
[0818]
(2)
[0819]
[化学式86]
[0820][0821]
在实施例20(2)中，使用2-(丁基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-(丁基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0822]1h-nmr(cdcl3)δ:5.44-5.26(8h,m),4.72-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.4hz),2.84-2.71(6h,m),2.67-2.57(2h,m),2.54-2.44(2h,m),2.42-2.33(2h,m),2.23(6h,s),2.12-1.96(8h,m),1.67-1.48(4h,m),1.48-1.19(40h,m),0.97-0.84(9h,m).
[0823]
msm/z(m+h):744.
[0824]
[实施例39]
[0825]
(1)
[0826]
[化学式87]
[0827][0828]
在实施例30(1)中，使用2-(丁基氨基)-1-乙醇来代替使用2-(乙基氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例30(1)相同的方法得到了淡黄色油状物的2-(丁基(2-(二乙基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇。
[0829]
msm/z(m+h):217.
[0830]
(2)
[0831]
[化学式88]
[0832][0833]
在实施例20(2)中，使用2-(丁基(2-(二乙基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-(丁基(2-(二乙基氨基)乙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0834]1h-nmr(cdcl3)δ:5.43-5.28(8h,m),4.71-4.62(1h,m),4.16(2h,t,j＝6.4hz),2.83-2.70(6h,m),2.65-2.43(10h,m),2.11-1.96(8h,m),1.65-1.49(4h,m),1.46-1.19(40h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.96-0.83(9h,m).
[0835]
msm/z(m+h):772.
[0836]
[实施例40]
[0837]
(1)
[0838]
[化学式89]
[0839][0840]
在实施例31(1)中，使用2-(戊基氨基)-1-乙醇来代替使用2-(丙基氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例31(1)相同的方法得到了褐色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(戊基)氨基)-1-乙醇。
[0841]
msm/z(m+h):203.
[0842]
(2)
[0843]
[化学式90]
[0844][0845]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(戊基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(戊基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0846]1h-nmr(cdcl3)δ:5.43-5.26(8h,m),4.72-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),2.83-2.70(6h,m),2.65-2.57(2h,m),2.53-2.43(2h,m),2.41-2.32(2h,m),2.23(6h,s),2.11-1.97(8h,m),1.65-1.49(4h,m),1.48-1.19(42h,m),0.95-0.83(9h,m).
[0847]
msm/z(m+h):758.
[0848]
[实施例41]
[0849]
(1)
[0850]
[化学式91]
[0851][0852]
向1,7,13-十三烷三醇(5.0g)、油酸(13.4g)、三乙胺(18.2ml)、4-二甲基氨基吡啶(0.26g)及n,n-二甲基甲酰胺(25ml)的混合物中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(10.3g)，并在室温下搅拌了15小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的7-羟基十三烷-1,3-二基二油酸酯(3.6g)。
[0853]1h-nmr(cdcl3)δ:5.41-5.28(4h,m),4.06(4h,t,j＝6.6hz),3.63-3.53(1h,m),2.29(4h,t,j＝7.2hz),2.06-1.96(8h,m),1.68-1.20(64h,m),0.88(6h,t,j＝7.2hz).
[0854]
向7-羟基十三烷-1,3-二基二油酸酯(3.6g)、三乙胺(2.0ml)及四氢呋喃(36ml)的混合物中加入氯甲酸4-硝基苯酯(1.4g)，并在室温下搅拌了1小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了淡黄色油状物的7-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯(4.1g)。
[0855]1h-nmr(cdcl3)δ:8.28(2h,dd,j＝7.2h,2.1hz),7.39(2h,dd,j＝7.2hz,2.1hz),5.40-5.28(4h,m),4.86-4.76(1h,m),4.06(4h,t,j＝6.6hz),2.29(4h,t,j＝7.2hz),2.05-1.96(8h,m),1.74-1.56(12h,m),1.42-1.21(52h,m),0.88(6h,t,j＝7.2hz).
[0856]
(2)
[0857]
[化学式92]
[0858][0859]
向7-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯(2.0g)、2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇(1.2g)、三乙胺(0.91ml)及四氢呋喃(20ml)的混合物中加入4-二甲基氨基吡啶(0.79g)，并在加热回流下搅拌了8小时。将反应混合物冷却至室温，并加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(甲醇-乙酸乙酯)及硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯(1.7g)。
[0860]1h-nmr(cdcl3)δ:5.39-5.27(4h,m),4.71-4.62(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.4hz),4.04(4h,t,j＝6.8hz),2.76(2h,t,j＝6.0hz),2.66-2.46(10h,m),2.29(4h,t,j＝7.6hz),2.08-1.94(8h,m),1.69-1.48(12h,m),1.41-1.19(52h,m),1.07-0.97(9h,m),0.88(6h,t,j＝7.2hz).
[0861]
msm/z(m+h):976.
[0862]
[实施例42]
[0863]
(1)
[0864]
[化学式93]
[0865][0866]
向2-(异丙基氨基)-1-乙醇(2.0g)、2-溴-n,n-二乙基乙-1-胺氢溴酸盐(7.6g)及乙醇(20ml)的混合物中加入碳酸钾(8.0g)，并在加热回流下搅拌了7小时。将反应混合物冷却至室温，滤除不需要的物质，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了淡黄色油状物的2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇(3.5g)。
[0867]
msm/z(m+h):203.
[0868]
(2)
[0869]
[化学式94]
[0870][0871]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0872]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.27(8h,m),4.72-4.61(1h,m),4.10(2h,t,j＝6.8hz),2.96-2.85(1h,m),2.83-2.74(4h,m),2.68(2h,t,j＝6.8hz),2.60-2.41(8h,m),2.12-1.96
(8h,m),1.65-1.48(4h,m),1.45-1.19(36h,m),1.10-0.95(12h,m),0.89(6h,t,j＝6.8hz).
[0873]
msm/z(m+h):758.
[0874]
[实施例43]
[0875]
[化学式95]
[0876][0877]
在实施例41(2)中，使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(己基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例41(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二甲基氨基)乙基)(己基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯)。
[0878]1h-nmr(cdcl3)δ:5.42-5.26(4h,m),4.73-4.60(1h,m),4.17(2h,t,j＝5.7hz),4.04(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.67-2.56(2h,m),2.55-2.44(2h,m),2.42-2.34(2h,m),2.29(4h,t,j＝7.5hz),2.23(6h,s),2.10-1.93(8h,m),1.69-1.49(12h,m),1.48-1.19(60h,m),0.95-0.81(9h,m).
[0879]
msm/z(m+h):1004.
[0880]
[实施例44]
[0881]
(1)
[0882]
[化学式96]
[0883][0884]
在实施例30(1)中，使用2-(丙基氨基)-1-乙醇来代替使用2-(乙基氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例30(1)相同的方法得到了淡黄色油状物的2-((2-(二乙基氨基)乙基)(丙基)氨基)-1-乙醇。
[0885]
msm/z(m+h):203.
[0886]
(2)
[0887]
[化学式97]
[0888][0889]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二乙基氨基)乙基)(丙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0890]1h-nmr(cdcl3)δ:5.46-5.24(8h,m),4.73-4.61(1h,m),4.16(2h,t,j＝6.6hz),2.83-2.70(6h,m),2.65-2.41(10h,m),2.11-1.96(8h,m),1.64-1.51(4h,m),1.49-1.21(38h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.95-0.81(9h,m).
[0891]
msm/z(m+h):758.
[0892]
[实施例45]
[0893]
[化学式98]
[0894][0895]
在实施例41(1)及(2)中，使用(9z,12z)-十八碳-9,12-二烯酸来代替使用油酸，除此以外，利用与实施例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基(9z,9’z,12z,12’z)-双(十八碳-9,12-二烯酸酯)。
[0896]1h-nmr(cdcl3)δ:5.46-5.24(8h,m),4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.04(4h,t,j＝6.6hz),2.83-2.71(6h,m),2.66-2.47(10h,m),2.29(4h,t,j＝8.1hz),2.13-1.96(8h,m),1.69-1.50(12h,m),1.44-1.21(40h,m),1.08-0.97(9h,m),0.89(6h,t,j＝6.6hz).
[0897]
msm/z(m+h):972.
[0898]
[实施例46]
[0899]
[化学式99]
[0900][0901]
在实施例41(1)及(2)中，使用(z)-十六碳-9-烯酸来代替使用油酸，除此以外，利用与实施例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基(9z,9’z)-双(十六碳-9-烯酸酯)。
[0902]1h-nmr(cdcl3)δ:5.40-5.27(4h,m),4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.04(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.66-2.45(10h,m),2.29(4h,t,j＝7.2hz),2.09-1.93(8h,m),1.70-1.48(12h,m),1.43-1.20(44h,m),1.11-0.97(9h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[0903]
msm/z(m+h):920.
[0904]
[实施例47]
[0905]
[化学式100]
[0906][0907]
在实施例41(1)及(2)中，使用(z)-十四碳-9-烯酸来代替使用油酸，除此以外，利
用与实施例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基(9z,9’z)-双(十四碳-9-烯酸酯)。
[0908]1h-nmr(cdcl3)δ:5.44-5.24(4h,m),4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),4.04(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.67-2.46(10h,m),2.29(4h,t,j＝7.8hz),2.11-1.92(8h,m),1.71-1.47(12h,m),1.45-1.21(36h,m),1.09-0.96(9h,m),0.95-0.83(6h,m).
[0909]
msm/z(m+h):864.
[0910]
[实施例48]
[0911]
[化学式101]
[0912][0913]
在实施例41(1)及(2)中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯。
[0914]1h-nmr(cdcl3)δ:5.41-5.27(4h,m),4.72-4.61(1h,m),4.17-3.99(6h,m),2.95-2.86(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.4hz),2.60-2.42(8h,m),2.28(4h,t,j＝8.0hz),2.08-1.93(8h,m),1.69-1.48(12h,m),1.43-1.20(52h,m),1.09-0.95(12h,m),0.88(6h,t,j＝6.8hz).
[0915]
msm/z(m+h):990.
[0916]
[实施例49]
[0917]
(1)
[0918]
[化学式102]
[0919][0920]
在实施例30(1)中，使用n-(2-溴乙基)-n-丙基丙-1-胺氢溴酸盐来代替使用2-溴-n,n-二乙基乙-1-胺氢溴酸盐，除此以外，利用与实施例30(1)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二丙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇。
[0921]
msm/z(m+h):217.
[0922]
(2)
[0923]
[化学式103]
[0924][0925]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二丙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的
方法得到了无色油状物的2-((2-(二丙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0926]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.26(8h,m),4.74-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),2.84-2.70(6h,m),2.65-2.46(6h,m),2.43-2.31(4h,m),2.13-1.97(8h,m),1.66-1.52(4h,m),1.50-1.21(40h,m),1.03(3h,t,j＝6.6hz),0.95-0.80(12h,m).
[0927]
msm/z(m+h):772.
[0928]
[实施例50]
[0929]
(1)
[0930]
[化学式104]
[0931][0932]
在加热回流下，将10-乙氧基-10-氧代癸酸(22.0g)、亚硫酰氯(22.0ml)及n,n-二甲基甲酰胺(0.1ml)的混合物搅拌了1小时30分钟。减压蒸馏除去溶剂，作为粗产物而得到了淡黄色油状物的10-氯-10-氧代癸酸乙酯。
[0933]
在-78℃下，向氯化锌(ii)(13.0g)的四氢呋喃(284ml)悬浮液中滴加1.0mol/l十二烷基溴化镁-二乙醚溶液(190ml)，升温至0℃之后，在相同温度下搅拌了30分钟。向反应混合物中加入四(三苯基膦)钯(0)(2.8g)及10-氯-10-氧代癸酸乙酯，并在0℃下搅拌了1小时。向反应混合物中加入1.0mol/l盐酸水溶液(50ml)及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了褐色油状物的乙基10-氧代二十二烷酸(13.2g)。
[0934]
向乙基10-氧代二十二烷酸(22.0g)及2-丁基-1-辛醇(31.9g)的混合物中加入原钛酸四异丙酯(1.7g)，并在110℃下搅拌了17小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用无水硫酸钠进行干燥之后，减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了淡黄色固体的2-丁基辛基10-氧代二十二烷酸(11.7g)。
[0935]
在冰冷下，向2-丁基辛基10-氧代二十二烷酸(11.7g)、甲醇(47ml)及四氢呋喃(47ml)的混合物中加入硼氢化钠(4.2g)，并在室温下搅拌了1小时。将反应混合物注入到冰及水的混合物之后，加入1.0mol/l盐酸水溶液(22ml)，分取有机层，用无水硫酸钠进行干燥之后，减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了白色固体的2-丁基辛基10-羟基二十二烷酸酯(7.8g)。
[0936]1h-nmr(cdcl3)δ:3.96-3.98(2h,d),3.58(1h,s),2.27-2.31(2h,t),1.60-1.63(2h,t),1.38-1.43(6h,d),1.26-1.29(46h,m),0.86-0.89(9h,m).
[0937]
(2)
[0938]
[化学式105]
[0939][0940]
向2-丁基辛基10-羟基二十二烷酸酯(500mg)、三乙胺(0.43ml)及四氢呋喃(5ml)的混合物中加入氯甲酸4-硝基苯酯(408mg)，并在室温下搅拌了3小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用硫酸钠进行干燥，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)二十二烷酸酯(750mg)。
[0941]1h-nmr(cdcl3)δ:8.28(2h,dd,j＝7.2h,2.1hz),7.39(2h,dd,j＝7.2hz,2.1hz),4.86-4.77(1h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.30(2h,t,j＝7.2hz),1.74-1.55(7h,m),1.40-1.21(46h,m),0.92-0.85(9h,m).
[0942]
(3)
[0943]
[化学式106]
[0944][0945]
在实施例41(2)中，使用2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)二十二烷酸酯来代替使用7-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯，除此以外，利用与实施例41相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基12-十二烷基-3,6-二乙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[0946]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.67-2.46(10h,m),2.29(2h,t,j＝7.8hz),1.67-1.48(7h,m),1.39-1.18(46h,m),1.10-0.98(9h,m),0.96-0.82(9h,m).
[0947]
msm/z(m+h):740.
[0948]
[实施例51]
[0949]
(1)
[0950]
[化学式107]
[0951][0952]
在实施例30(1)中，使用2-(苄基氨基)-1-乙醇来代替使用2-(乙基氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例30(1)相同的方法得到了淡黄色油状物的2-(苄基(2-(二乙基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇。
[0953]
msm/z(m+h):251.
[0954]
(2)
[0955]
[化学式108]
[0956][0957]
在实施例20(2)中，使用2-(苄基(2-(二乙基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-(苄基(2-(二乙基氨基)乙基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0958]1h-nmr(cdcl3)δ:7.36-7.19(5h,m),5.46-5.27(8h,m),4.72-4.61(1h,m),4.18(2h,t,j＝6.0hz),3.68(2h,s),2.84-2.73(6h,m),2.69-2.42(8h,m),2.13-1.97(8h,m),1.65-1.49(4h,m),1.42-1.19(36h,m),0.98(6h,t,j＝7.2hz),0.89(6h,t,j＝6.6hz).
[0959]
msm/z(m+h):806.
[0960]
[实施例52]
[0961]
(1)
[0962]
[化学式109]
[0963][0964]
在实施例37(1)中，使用辛醛来代替使用己醛，除此以外，利用与实施例37(1)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-二甲基氨基)乙基)(辛基)氨基)-1-乙醇。
[0965]
msm/z(m+h):245.
[0966]
(2)
[0967]
[化学式110]
[0968][0969]
在实施例20(2)中，使用2-((2-二甲基氨基)乙基)(辛基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(辛基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0970]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.24(8h,m),4.73-4.62(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),2.84-2.71(6h,m),2.67-2.56(2h,m),2.53-2.43(2h,m),2.43-2.31(2h,m),2.23(6h,s),2.12-1.96(8h,m),1.66-1.51(4h,m),1.47-1.19(48h,m),0.96-0.80(9h,m).
[0971]
msm/z(m+h):800.
[0972]
[实施例53]
[0973]
(1)
[0974]
[化学式111]
[0975][0976]
在实施例37(1)中，使用十二醛来代替使用己醛，除此以外，利用与实施例37(1)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(十二烷基)氨基)-1-乙醇。
[0977]
msm/z(m+h):301.
[0978]
(2)
[0979]
[化学式112]
[0980][0981]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(十二烷基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-((2-(二甲基氨基)乙基)(十二烷基)氨基)乙基((6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[0982]1h-nmr(cdcl3)δ:5.46-5.25(8h,m),4.72-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),2.85-2.70(6h,m),2.66-2.57(2h,m),2.54-2.43(2h,m),2.42-2.32(2h,m),2.23(6h,s),2.11-1.97(8h,m),1.66-1.50(4h,m),1.47-1.17(56h,m),0.97-0.81(9h,m).
[0983]
msm/z(m+h):856.
[0984]
[实施例54]
[0985]
[化学式113]
[0986][0987]
在实施例41(2)中，使用2-((2-(二丙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例41(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二丙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯。
[0988]1h-nmr(cdcl3)δ:5.41-5.26(4h,m),4.73-4.60(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),4.04(4h,t,j＝6.6hz),2.75(2h,t,j＝6.6hz),2.65-2.46(6h,m),2.43-2.34(4h,m),2.28(4h,t,j＝7.2hz),2.10-1.95(8h,m),1.69-1.51(12h,m),1.50-1.19(56h,m),1.03(3h,t,j＝7.5hz),0.94-0.81(12h,m).
[0989]
msm/z(m+h):1004.
[0990]
[实施例55]
[0991]
[化学式114]
[0992][0993]
在实施例41(2)中，使用2-(苄基(2-(二乙基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用
2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例41(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-(苄基(2-(二乙基氨基)乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯。
[0994]1h-nmr(cdcl3)δ:7.36-7.17(5h,m),5.42-5.27(4h,m),4.71-4.61(1h,m),4.19(2h,t,j＝6.6hz),4.04(4h,t,j＝7.2hz),3.68(2h,s),2.79(2h,t,j＝6.0hz),2.67-2.42(8h,m),2.28(4h,t,j＝8.1hz),2.08-1.93(8h,m),1.69-1.49(12h,m),1.42-1.20(52h,m),0.97(6h,t,j＝7.2hz),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[0995]
msm/z(m+h):1038.
[0996]
[实施例56]
[0997]
(1)
[0998]
[化学式115]
[0999][1000]
在实施例41(1)中，使用2-己基癸酸来代替使用油酸，除此以外，利用与实施例41(1)相同的方法得到了无色油状物的7-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-己基癸酸酯)。
[1001]1h-nmr(cdcl3)δ:8.28(2h,dd,j＝7.2h,2.1hz),7.39(2h,dd,j＝7.2hz,2.1hz),4.86-4.76(1h,m),4.07(4h,t,j＝6.6hz),2.36-2.25(2h,m),1.72-1.20(68h,m),0.87(12h,t,j＝6.0hz).
[1002]
(2)
[1003]
[化学式116]
[1004][1005]
在实施例41(2)中，使用7-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-己基癸酸酯)来代替使用7-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯，除此以外，利用与实施例41(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-己基癸酸酯)。
[1006]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.05(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.67-2.46(10h,m),2.36-2.23(2h,m),1.68-1.16(68h,m),1.09-0.97(9h,m),0.94-0.81(12h,m).
[1007]
msm/z(m+h):924.
[1008]
[实施例57]
[1009]
[化学式117]
[1010][1011]
在实施例41(1)及(2)中，使用按照european journal of medicinal chemistry,2016,109,p134-145中所记载的方法合成的8-(2-辛基环丙基)辛酸来代替使用油酸，除此以外，利用与实施例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(8-(2-辛基环丙基)辛酸))。
[1012]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.62(1h,m),4.18(2h,t,j＝6.6hz),4.05(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.66-2.47(10h,m),2.29(4h,t,j＝8.1hz),1.69-1.48(12h,m),1.45-1.08(60h,m),1.08-0.97(9h,m),0.88(6h,t,j＝7.2hz),0.71-0.51(6h,m),-0.29
‑‑
0.38(2h,m).
[1013]
msm/z(m+h):1004.
[1014]
[实施例58]
[1015]
[化学式118]
[1016][1017]
在实施例41(1)及(2)中，使用2-庚基十一烷酸来代替使用油酸，除此以外，利用与实施例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-庚基十一烷酸)。
[1018]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.62(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.05(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝5.7hz),2.65-2.47(10h,m),2.36-2.24(2h,m),1.69-1.17(76h,m),1.08-0.98(9h,m),0.88(12h,t,j＝7.5hz).
[1019]
msm/z(m+h):980.
[1020]
[实施例59]
[1021]
[化学式119]
[1022][1023]
在实施例41(1)及(2)中，使用2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酸来代替使用油酸，除此以外，利用与实施例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酸酯)。
[1024]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.62(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.11-3.95(4h,m),2.76(2h,t,j＝6.0hz),2.65-2.46(10h,m),2.19-2.06(2h,m),1.86-1.13(40h,m),1.10-0.79(57h,m).
[1025]
msm/z(m+h):980.
[1026]
[实施例60]
[1027]
[化学式120]
[1028][1029]
在实施例41(1)及(2)中，使用2-戊基庚酸来代替使用油酸，除此以外，利用与实施例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-戊基庚酸酯)。
[1030]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.05(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.0hz),2.65-2.47(10h,m),2.37-2.25(2h,m),1.69-1.19(52h,m),1.07-0.98(9h,m),0.87(12h,t,j＝6.6hz).
[1031]
msm/z(m+h):812.
[1032]
[实施例61]
[1033]
[化学式121]
[1034][1035]
在实施例50(3)中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例50(3)相同
的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基12-十二烷基-3-乙基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1036]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.60(1h,m),4.10(2h,t,j＝6.6hz),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.97-2.85(1h,m),2.68(2h,t,j＝7.2hz),2.60-2.41(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.8hz),1.66-1.48(7h,m),1.40-1.20(46h,m),1.07-0.95(12h,m),0.94-0.81(9h,m).
[1037]
msm/z(m+h):754.
[1038]
[实施例62]
[1039]
[化学式122]
[1040][1041]
在实施例56(2)中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例56(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-己基癸酸酯)。
[1042]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.15-3.99(6h,m),2.97-2.84(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.60-2.41(8h,m),2.37-2.23(2h,m),1.69-1.16(68h,m),1.10-0.95(12h,m),0.87(12h,t,j＝6.6hz).
[1043]
msm/z(m+h):938.
[1044]
[实施例63]
[1045]
(1)
[1046]
[化学式123]
[1047][1048]
将2-(甲基氨基)-1-乙醇(3g)、碳酸钾(6.6g)、1-溴丙烷(5.6ml)及乙腈(30ml)的混合物在60℃下搅拌了9小时30分钟。向反应混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液，并用氯仿进行了提取。用饱和食盐水清洗有机层，并用无水硫酸钠进行了干燥。在减压下蒸馏除去溶剂，得到了无色油状物的2-(甲基(丙基)氨基)-1-乙醇(4.3g)。
[1049]
msm/z(m+h):118.
[1050]
在冰冷下，向2-(甲基(丙基)氨基)-1-乙醇(1.2g)及乙腈(10ml)的混合物中滴加甲磺酸酐(1.9g)，并在0℃下搅拌30分钟之后，在室温下搅拌了30分钟。向反应混合物中加入2-(异丙基氨基)-1-乙醇(2.0g)及n,n-二异丙基乙胺(2.0ml)，并在70℃下搅拌了25小时30分钟。将反应混合物冷却至室温之后，加入碳酸钾及水，并用乙酸乙酯进行了提取。用饱和食盐水清洗有机层，并用无水硫酸钠进行了干燥。在减压下蒸馏除去溶剂，并利用硅胶柱色谱法(甲醇-氯仿)纯化所得到的残渣，得到了黄色油状物的2-(异丙基(2-(甲基(丙基)氨基)乙基)氨基)-1-乙醇(0.3g)。
[1051]
msm/z(m+h):203.
[1052]
(2)
[1053]
[化学式124]
[1054][1055]
在实施例20(2)中，使用2-(异丙基(2-(甲基(丙基)氨基)乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的(6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基(2-(异丙基(2-(甲基(丙基)氨基)乙基)氨基)乙基)碳酸酯。
[1056]1h-nmr(cdcl3)δ:5.45-5.26(8h,m),4.73-4.62(1h,m),4.09(2h,t,j＝6.6hz),2.97-2.86(1h,m),2.77(4h,t,j＝6.0hz),2.69(2h,t,j＝7.2hz),2.62-2.51(2h,m),2.44-2.35(2h,m),2.35-2.27(2h,m),2.23(3h,s),2.11-1.96(8h,m),1.66-1.20(42h,m),0.98(6h,d,j＝6.6hz),0.94-0.82(9h,m).
[1057]
msm/z(m+h):758.
[1058]
[实施例64]
[1059]
(1)
[1060]
[化学式125]
[1061][1062]
在冰冷下，向2-(异丙基氨基)-1-乙醇(3g)的二氯甲烷(30ml)溶液中滴加了碘甲烷(1.9ml)。在相同温度下搅拌1小时15分钟之后，在室温下搅拌了6小时50分钟。向反应混合物中加入碳酸钾及水，并用氯仿进行了提取。用饱和食盐水清洗有机层，并用无水硫酸钠进行了干燥。在减压下蒸馏除去溶剂，并利用硅胶柱色谱法(甲醇-氯仿、nh硅胶)纯化所得到的残渣，得到了无色油状物的2-(异丙基(甲基)氨基)-1-乙醇(2.2g)。
[1063]
msm/z(m+h):118.
[1064]
在冰冷下，向2-(异丙基(甲基)氨基)-1-乙醇(1.5g)、n,n-二异丙基乙胺(2.5ml)及乙腈(15ml)的混合物中加入甲磺酸酐(2.6g)，并在室温下搅拌了4小时50分钟。向反应混合物中加入2-(丙基氨基)-1-乙醇(4.3ml)，并在70℃下搅拌了23小时30分钟。将反应混合物冷却至室温之后，加入饱和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯进行了提取。用饱和食盐水清洗有机层，并用无水硫酸钠进行了干燥。在减压下蒸馏除去溶剂，并利用硅胶柱色谱法(甲醇-氯仿)纯化所得到的残渣，得到了黄色油状物的2-((2-(异丙基(甲基)氨基)乙基)(丙基)氨基)-1-乙醇(0.7g)。
[1065]
msm/z(m+h):203.
[1066]
(2)
[1067]
[化学式126]
[1068][1069]
在实施例20(2)中，使用2-((2-(异丙基(甲基)氨基)乙基)(丙基)氨基)-1-乙醇来
代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的(6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基(2-((2-(异丙基(甲基)氨基)乙基)(丙基)氨基)乙基)碳酸酯。
[1070]1h-nmr(cdcl3)δ:5.46-5.26(8h,m),4.74-4.60(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),2.87-2.70(7h,m),2.65-2.54(2h,m),2.51-2.40(4h,m),2.21(3h,s),2.12-1.95(8h,m),1.64-1.20(42h,m),1.00(6h,d,j＝6.6hz),0.94-0.81(9h,m).
[1071]
msm/z(m+h):758.
[1072]
[实施例65]
[1073]
(1)
[1074]
[化学式127]
[1075][1076]
在冰冷下，向60％wt氢化钠(1.7g)的四氢呋喃(60ml)悬浮液中滴加2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(9.4ml)，并在相同温度下搅拌了30分钟。向反应混合物中加入9-十七酮(1.5g)，并在加热回流下搅拌了16小时。将反应混合物冷却至室温，并将反应混合物注入到冰水之后，加入了乙酸乙酯。分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，在减压下蒸馏除去溶剂，并利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的乙基3-辛基十一碳-2-烯酸酯(1.2g)。
[1077]1h-nmr(cdcl3)δ:5.61(1h,s),4.14(2h,q,j＝6.6hz),2.58(2h,t,j＝7.2hz),2.12(2h,t,j＝7.2hz),1.50-1.20(27h,m),0.91-0.85(6h,m).
[1078]
向乙基3-辛基十一碳-2-烯酸酯(1.2g)、10％钯-碳(0.35g)及甲醇(24ml)的混合物中加入甲酸铵(1.4g)，并在加热回流下搅拌了4小时。将反应混合物冷却至室温，用硅藻土滤除不溶物之后，在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的3-辛基十一烷酸乙酯(1.1g)。
[1079]1h-nmr(cdcl3)δ:4.12(2h,q,j＝7.2hz),2.21(2h,d,j＝6.6hz),2.05-2.04(1h,m),1.34-1.20(31h,m),0.88(6h,6.6hz).
[1080]
向3-辛基十一烷酸乙酯(1.1g)与乙醇(10ml)的混合物中加入5mol/l氢氧化钠水溶液(5ml)，并在80℃下搅拌了5小时。将反应混合物冷却至室温，并加入1mol/l盐酸水溶液直至成为酸性之后，加入了乙酸乙酯。分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，在减压下蒸馏除去溶剂，并利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的3-辛基十一烷酸(1.1g)。
[1081]1h-nmr(cdcl3)δ:2.28(2h,d,j＝6.6hz),1.90-1.79(1h,m),1.35-1.19(28h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1082]
(2)
[1083]
[化学式128]
[1084][1085]
在实施例41(1)及(2)中，使用3-辛基十一烷酸来代替使用油酸，除此以外，利用与实施例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(3-辛基十一烷酸)。
[1086]1h-nmr(cdcl3)δ:4.74-4.62(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.04(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.66-2.47(10h,m),2.22(4h,d,j＝6.6hz),1.90-1.76(2h,m),1.70-1.17(76h,m),1.10-0.97(9h,m),0.88(12h,t,j＝6.6hz).
[1087]
msm/z(m+h):1008
[1088]
[实施例66]
[1089]
[化学式129]
[1090][1091]
在实施例50(1)、(2)及(3)中，使用12-乙氧基-12-氧代十二烷酸来代替使用10-乙氧基-10-氧代癸酸，使用1.0mol/l癸基溴化镁-二乙醚溶液来代替使用1.0mol/l十二烷基溴化镁-二乙醚溶液，除此以外，利用与实施例50(1)、(2)及(3)相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基12-癸基-3,6-二乙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十三烷-23-酸酯。
[1092]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),3.97(2h,d,j＝5.7hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.66-2.46(10h,m),2.30(2h,t,j＝7.2hz),1.70-1.47(7h,m),1.41-1.20(46h,m),1.11-0.98(9h,m),0.95-0.82(9h,m).
[1093]
msm/z(m+h):740.
[1094]
[实施例67]
[1095]
[化学式130]
[1096][1097]
在实施例65(1)及(2)中，使用7-十三酮来代替使用9-十七酮，除此以外，利用与实
施例65(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(3-己基壬酸)。
[1098]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.62(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.04(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.67-2.45(10h,m),2.22(4h,d,j＝6.6hz),1.89-1.77(2h,m),1.67-1.17(60h,m),1.08-0.98(9h,m),0.88(12h,t,j＝6.6hz).
[1099]
msm/z(m+h):896.
[1100]
[实施例68]
[1101]
[化学式131]
[1102][1103]
在实施例50(1)、(2)及(3)中，使用1.0mol/l癸基溴化镁-二乙醚溶液来代替使用1.0mol/l十二烷基溴化镁-二乙醚溶液，除此以外，利用与实施例50(1)、(2)及(3)相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基12-癸基-3,6-二乙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1104]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.60(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),3.97(2h,j＝5.4hz),2.76(2h,t,j＝6.0hz),2.67-2.46(10h,m),2.29(2h,t,j＝7.8hz),1.68-1.50(7h,m),1.39-1.20(42h,m),1.07-0.98(9h,m),0.94-0.83(9h,m).
[1105]
msm/z(m+h):712.
[1106]
[实施例69]
[1107]
[化学式132]
[1108][1109]
在实施例68中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例68相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基12-癸基-3-乙基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1110]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.10(2h,t,j＝6.6hz),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.99-2.83(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.62-2.41(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.69-1.47(7h,m),1.40-1.19(42h,m),1.10-0.96(12h,m),0.94-0.83(9h,m).
[1111]
msm/z(m+h):726.
[1112]
[实施例70]
[1113]
(1)
[1114]
[化学式133]
[1115][1116]
在实施例65(1)中，使用8-十五酮来代替使用9-十七酮，除此以外，利用与实施例65(1)相同的方法得到了无色油状物的3-庚基癸酸。
[1117]1h-nmr(cdcl3)δ:2.28(2h,d,j＝6.6hz),1.90-1.79(1h,m),1.35-1.19(24h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1118]
(2)
[1119]
[化学式134]
[1120][1121]
向3-庚基癸酸(974mg)、1,7,13-十三烷三醇(2.49g)、三乙胺(3.5ml)、4-二甲基氨基吡啶(51mg)及二氯甲烷(20ml)的混合物中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(1.07g)，并在室温下搅拌了4天。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的7-羟基十三烷-1,13-二基双(3-庚基癸酸酯)(1.03g)及无色油状的7,13-二羟基十三烷基3-庚基癸酸酯(1.03g)。
[1122]
7-羟基十三烷-1,13-二基双(3-庚基癸酸酯)1h-nmr(cdcl3)δ:4.05(4h,t,j＝6.6hz),3.61-3.54(1h,m),2.22(4h,d,j＝7.2hz),1.88-1.20(70h,m),0.88(12h,t,j＝6.6hz).
[1123]
7,13-二羟基十三烷基3-庚基癸酸酯1h-nmr(cdcl3)δ:4.05(2h,t,j＝6.6hz),3.68-3.55(3h,m),2.22(2h,d,j＝6.6hz),1.88-1.77(1h,m),1.68-1.20(44h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1124]
(3)
[1125]
[化学式135]
[1126][1127]
在实施例20(1)及(2)中，使用7-羟基十三烷-1,13-二基双(3-庚基癸酸酯)来代替使用(6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-醇，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(3-庚基癸酸酯)。
[1128]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.04(4h,t,j＝7.2hz),2.76(2h,t,j＝6.0hz),2.66-2.46(10h,m),2.22(4h,d,j＝7.2hz),1.91-1.76(2h,m),1.67-1.15(68h,m),1.08-0.97(9h,m),0.88(12h,t,j＝6.6hz).
[1129]
msm/z(m+h):952.
[1130]
[实施例71]
[1131]
(1)
[1132]
[化学式136]
[1133][1134]
在实施例36(1)中，使用5-溴-1-戊醇来代替使用6-溴-1-己醇，除此以外，利用与实施例36(1)相同的方法得到了白色固体的1,6,11-十一烷三醇。
[1135]1h-nmr(cdcl3)δ:3.70-3.55(5h,m),1.64-1.24(16h,m).
[1136]
(2)
[1137]
[化学式137]
[1138][1139]
在实施例56(1)及(2)中，使用1,6,11-十一烷三醇来代替使用1,7,13-十三烷三
醇，除此以外，利用与实施例56(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的6-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十一烷-1,11-二基双(2-己基癸酸酯)。
[1140]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.63(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.05(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.66-2.47(10h,m),2.37-2.23(2h,m),1.71-1.18(64h,m),1.10-0.98(9h,m),0.88(12h,t,j＝7.2hz).
[1141]
msm/z(m+h):896.
[1142]
[实施例72]
[1143]
(1)
[1144]
[化学式138]
[1145][1146]
将3-氧代戊二酸二乙酯(4.0g)与20％乙醇钠-乙醇溶液(6.7g)的混合物在80℃下搅拌20分钟之后，加入8-溴辛酸乙酯(5.0g)，并搅拌了4小时。向反应混合物中加入20％乙醇钠-乙醇溶液(6.7g)，搅拌5分钟之后，加入8-溴辛酸乙酯(5.0g)，并搅拌了3小时。将反应混合物冷却至室温之后，加入己烷及20％氯化铵水溶液(10ml)，分离有机层之后，在减压下蒸馏除去溶剂，作为粗产物而得到了四乙基9-氧代十七烷-1,8,10,17-四羧酸酯(10.3g)。
[1147]
将所得到的9-氧代十七烷-1,8,10,17-四羧酸四乙酯(2.5g)、乙酸(4.0ml)及30％盐酸水溶液(8.0ml)的混合物在115℃下搅拌了6小时。将反应混合物冷却至室温之后，在减压下蒸馏除去溶剂，并加入了水及丙酮。滤取固体物质，用水及丙酮清洗之后，在减压下进行干燥，得到了白色固体的10-氧代十九烷二酸(0.6g)。
[1148]1h-nmr(dmso-d6)δ:2.38(4h,t,j＝7.2hz),2.18(4h,t,j＝7.2hz),1.54-1.38(8h,m),1.31-1.18(16h,m).
[1149]
向10-氧代壬烷癸二酸(610mg)、2-丁基-1-辛醇(663mg)、三乙胺(1.25ml)、4-二甲基氨基吡啶(217mg)及二氯甲烷(6ml)的混合物中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(853mg)，并在室温下搅拌了2天。向反应混合物中加入10％硫酸氢钾水溶液(12ml)、己烷(6ml)及乙酸乙酯(6ml)，分取有机层之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的双(2-丁基辛基)10-氧代壬烷癸二酸(612mg)。
[1150]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(4h,d,j＝6.0hz),2.38(4h,t,j＝7.2hz),2.30(4h,t,j＝7.2hz),1.66-1.49(10h,m),1.36-1.23(48h,m),0.92-0.83(12h,m).
[1151]
在冰冷下，向双(2-丁基辛基)10-氧代壬烷癸二酸(612mg)及甲醇(6ml)的混合物中加入硼氢化钠(35mg)，并在相同温度下搅拌了1小时。在冰冷下，向反应混合物中加入10％硫酸氢钾水溶液(6ml)及己烷(6ml)，分取有机层，用无水硫酸钠进行干燥之后，减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的双(2-丁基辛基)10-羟基十九烷二酸(369mg)。
[1152]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(4h,d,j＝6.0hz),3.62-3.52(1h,m),2.30(4h,t,j＝
7.2hz),1.66-1.53(10h,m),1.45-1.20(52h,m),0.92-0.83(12h,m).
[1153]
向双(2-丁基辛基)10-羟基十九烷二酸(369mg)、三乙胺(0.30ml)及四氢呋喃(2ml)的混合物中加入氯甲酸4-硝基苯酯(218mg)，并在室温下搅拌了17小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用水清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的双(2-丁基辛基)10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十九烷二酸酯(436mg)。
[1154]1h-nmr(cdcl3)δ:8.28(2h,dd,j＝7.2hz,1.8hz),7.38(2h,dd,j＝7.2hz,1.8hz),4.86-4.74(1h,m),3.97(4h,d,j＝6.0hz),2.30(4h,t,j＝7.2hz),1.66-1.53(10h,m),1.45-1.20(52h,m),0.92-0.83(12h,m).
[1155]
(2)
[1156]
[化学式139]
[1157][1158]
在实施例41(2)中，使用双(2-丁基辛基)10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十九烷二酸酯来代替使用7-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基二油酸酯，除此以外，利用与实施例41(2)相同的方法得到了无色油状物的双(2-丁基辛基)10-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十九烷二酸酯。
[1159]1h-nmr(cdcl3)δ:4.71-4.62(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),3.96(4h,d,j＝6.0hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.64-2.48(10h,m),2.29(4h,t,j＝7.2hz),1.66-1.50(10h,m),1.36-1.20(52h,m),1.03(3h,t,j＝7.2hz),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.93-0.84(12h,m).
[1160]
msm/z(m+h):896.
[1161]
[实施例73]
[1162]
(1)
[1163]
[化学式140]
[1164][1165]
在实施例36(1)中，使用4-溴-1-丁醇来代替使用6-溴-1-己醇，除此以外，利用与实施例36(1)相同的方法得到了白色固体的1,5,9-壬三醇。
[1166]1h-nmr(cdcl3)δ:3.70-3.55(5h,m),1.64-1.24(12h,m).
[1167]
(2)
[1168]
[化学式141]
[1169][1170]
在实施例56(1)及(2)中，使用1,5,9-壬三醇来代替使用1,7,13-十三烷三醇，除此以外，利用与实施例56(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的5-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)壬烷-1,9-二基双(2-己基癸酸酯)。
[1171]1h-nmr(cdcl3)δ:4.74-4.63(1h,m),4.17(2h,t,j＝5.7hz),4.05(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.66-2.48(10h,m),2.36-2.24(2h,m),1.70-1.16(60h,m),1.09-0.98(9h,m),0.88(12h,t,j＝6.6hz).
[1172]
msm/z(m+h):868.
[1173]
[实施例74]
[1174]
(1)
[1175]
[化学式142]
[1176][1177]
在冰冷下，向60％wt氢化钠的四氢呋喃(30ml)悬浮液中滴加癸酸(3.0g)，并在相同温度下搅拌了30分钟。在相同温度下，向反应混合物中加入1.5mol/l二异丙酰胺锂-四氢呋喃-庚烷-乙苯溶液(13.9ml)，并在室温下搅拌30分钟之后，滴加1-碘辛烷(3.8ml)，并在45℃下搅拌了6小时。
[1178]
在冰冷下，将反应混合物注入到1mol/l盐酸水溶液与乙酸乙酯的混合物之后，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗，并用无水硫酸镁进行干燥之后，在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了黄色油状物的2-辛基癸酸(2.62g)。
[1179]1h-nmr(cdcl3)δ:2.43-2.30(1h,m),1.72-1.20(28h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1180]
(2)
[1181]
[化学式143]
[1182][1183]
在实施例41(1)及(2)中，使用2-辛基癸酸来代替使用油酸，除此以外，利用与实施
例41(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-辛基癸酸酯)。
[1184]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.60(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.05(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.0hz),2.66-2.47(10h,m),2.37-2.24(2h,m),1.70-1.16(76h,m),1.11-0.98(9h,m),0.88(12h,t,j＝6.6hz).
[1185]
msm/z(m+h):980.
[1186]
[实施例75]
[1187]
[化学式144]
[1188][1189]
在实施例50中，使用1.0mol/l壬基溴化镁-二乙醚溶液来代替使用1.0mol/l十二烷基溴化镁-二乙醚溶液，除此以外，利用与实施例50相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3,6-二乙基-12-壬基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1190]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.60(1h,m),4.18(2h,t,j＝6.6hz),3.97(2h,d,j＝5.7hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.66-2.47(10h,m),2.30(2h,t,j＝7.8hz),1.69-1.47(7h,m),1.41-1.19(40h,m),1.09-0.97(9h,m),0.94-0.83(9h,m).
[1191]
msm/z(m+h):698.
[1192]
[实施例76]
[1193]
[化学式145]
[1194][1195]
在实施例74(1)及(2)中，使用壬酸来代替使用癸酸，使用1-碘庚烷来代替使用1-碘辛烷，除此以外，利用与实施例74(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-庚基壬酸)。
[1196]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.18(2h,t,j＝6.6hz),4.05(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.66-2.48(10h,m),2.37-2.23(2h,m),1.68-1.16(68h,m),1.08-0.97(9h,m),0.87(12h,t,j＝6.6hz).
[1197]
msm/z(m+h):924.
[1198]
[实施例77]
[1199]
[化学式146]
[1200][1201]
在实施例74(1)及(2)中，使用辛酸来代替使用癸酸，使用1-碘己烷来代替使用1-碘辛烷，除此以外，利用与实施例74(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的7-(((2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)乙氧基)羰基)氧基)十三烷-1,13-二基双(2-己基辛酸酯)。
[1202]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.60(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.6hz),4.05(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.67-2.45(10h,m),2.37-2.24(2h,m),1.72-1.15(60h,m),1.12-0.96(9h,m),0.87(12h,t,j＝6.6hz).
[1203]
msm/z(m+h):868.
[1204]
[实施例78]
[1205]
(1)
[1206]
[化学式147]
[1207][1208]
向实施例70(1)及(2)中所合成的7,13-二羟基十三烷基3-庚基癸酸酯(500mg)、癸酸(195mg)、三乙胺(0.43ml)、4-二甲基氨基吡啶(38mg)及二氯甲烷(10ml)的混合物中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(126mg)，并在室温下搅拌了18小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的13-(癸酰氧基)-7-羟基十三烷基3-庚基癸酸酯(469mg)。
[1209]1h-nmr(cdcl3)δ:4.06(4h,t,j＝6.6hz),3.63-3.53(1h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),2.22(2h,d,j＝7.2hz),1.88-1.78(1h,m),1.68-1.20(60h,m),0.88(9h,t,j＝6.6hz).
[1210]
(2)
[1211]
[化学式148]
[1212]
[1213]
在实施例20(1)及(2)中，使用13-(癸酰氧基)-7-羟基十三烷基3-庚基癸酸酯来代替使用(6z,9z,28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-醇，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的12-(6-(癸酰氧基)己基)-3,6-二乙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-重氮基十八烷-18-基3-庚基癸酸酯。
[1214]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),4.04(4h,t,j＝6.6hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.67-2.45(10h,m),2.29(2h,t,j＝8.1hz),2.22(2h,d,j＝7.2hz),1.87-1.78(1h,m),1.70-1.18(58h,m),1.11-0.97(9h,m),0.93-0.82(9h,m).
[1215]
msm/z(m+h):854.
[1216]
[实施例79]
[1217]
(1)
[1218]
[化学式149]
[1219][1220]
在冰冷下，向2-(甲基氨基)-1-乙醇(3.0g)的乙腈溶液(30ml)中滴加碘乙烷(3.4ml)，并在相同温度下搅拌1小时45分钟之后，在60℃下搅拌了3小时10分钟。向反应混合物中加入碳酸钾及水，并用氯仿进行了提取。用饱和食盐水清洗有机层，并用无水硫酸钠进行了干燥。在减压下蒸馏除去溶剂，得到了无色油状物的2-(乙基(甲基)氨基)-1-乙醇(3.4g)。
[1221]
msm/z(m+h):104.
[1222]
在冰冷下，向2-(乙基(甲基)氨基)-1-乙醇(3.0g)、4-二甲基氨基吡啶(0.36g)、n,n-二异丙基乙胺(9.9ml)及四氢呋喃(60ml)的混合物中滴加甲磺酸酐(7.6g)的四氢呋喃溶液(20ml)，并在0℃下搅拌15分钟之后，在室温下搅拌了3小时45分钟。向反应混合物中加入2-(叔丁基氨基)-1-乙醇(6.0g)、碘化钠(0.45g)及水(1ml)，并在75℃下搅拌了30小时。将反应混合物冷却至室温之后，在减压下蒸馏除去溶剂，然后加入水及2mol/l氢氧化钠水溶液，并用乙酸乙酯进行了提取。用饱和食盐水清洗有机层，并用无水硫酸钠进行了干燥。在减压下蒸馏除去溶剂，并利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了黄色油状物的2-(叔丁基(2-(乙基(甲基)氨基)乙基)氨基)-1-乙醇(0.15g)。
[1223]
msm/z(m+h):203.
[1224]
(2)
[1225]
[化学式150]
[1226][1227]
在实施例20(2)中，使用2-(叔丁基(2-(乙基(甲基)氨基)乙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例20(2)相同的方法得到了无色油状物的2-(叔丁基(2-(乙基(甲基)氨基)乙基)氨基)乙基((6z,9z,
28z,31z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基)碳酸酯。
[1228]1h-nmr(cdcl3)δ:5.44-5.25(8h,m),4.73-4.62(1h,m),4.06(2h,t,j＝7.5hz),2.84-2.73(6h,m),2.72-2.59(2h,m),2.50-2.34(4h,m),2.25(3h,s),2.11-1.97(8h,m),1.65-1.48(4h,m),1.43-1.19(36h,m),1.12-1.01(12h,m),0.89(6h,t,j＝6.6hz).
[1229]
msm/z(m+h):758.
[1230]
[实施例80]
[1231]
(1)
[1232]
[化学式151]
[1233][1234]
在冰冷下，向戊二酸酐(27.3g)的四氢呋喃(273ml)溶液中滴加1mol/l己基溴化镁-四氢呋喃溶液(200ml)，并在相同温度下搅拌了1小时。在冰冷下，向反应混合物中加入2mol/l盐酸水溶液(240ml)之后，加入乙酸乙酯(270ml)，分取有机层，用水及饱和氯化钠水溶液清洗，并用无水硫酸镁进行干燥之后，减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物之后，加入己烷(10ml)，滤取固体物质，用己烷清洗之后，在减压下进行干燥，得到了白色固体的5-氧代十一烷酸(16.0g)。
[1235]1h-nmr(cdcl3)δ:2.50(2h,t,j＝7.2hz),2.40(4h,t,j＝7.2hz),2.02-1.80(2h,m),1.63-1.48(2h,m),1.37-1.20(6h,m),0.88(3h,t,j＝6.6hz).
[1236]
向5-氧代十一烷酸(4.0g)、2-丁基-1-辛醇(3.7g)、三乙胺(8.4ml)、4-二甲基氨基吡啶(1.22g)及二氯甲烷(40ml)的混合物中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(5.8g)，并在40℃下搅拌了3小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用水清洗之后，用无水硫酸镁进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-丁基辛基5-氧代十一烷酸(7.3g)。
[1237]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(2h,d,j＝5.1hz),2.47(2h,t,j＝7.2hz),2.39(2h,t,j＝7.2hz),2.33(2h,t,j＝7.2hz),1.95-1.83(2h,m),1.66-1.49(3h,m),1.36-1.20(22h,m),0.92-0.82(9h,m).
[1238]
在冰冷下，向2-丁基辛基5-氧代十一烷酸(7.3g)、四氢呋喃(35ml)及甲醇(35ml)的混合物中加入硼氢化钠(1.1g)，并在相同温度下搅拌了30分钟。在冰冷下，向反应混合物中加入2.0mol/l盐酸水溶液(35ml)及己烷(35ml)，分取有机层之后，用饱和氯化钠水溶液清洗，并用无水硫酸钠进行干燥之后，减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-丁基辛基5-羟基十一烷酸酯(6.3g)。
[1239]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(2h,d,j＝5.7hz),3.65-3.53(1h,m),2.35(2h,t,j＝7.2hz),1.87-1.20(32h,m),0.92-0.84(9h,m).
[1240]
向2-丁基辛基5-羟基十一烷酸酯(1.62g)、三乙胺(2.38ml)及四氢呋喃(16ml)的
混合物中加入氯甲酸4-硝基苯酯(1.71g)，并在室温下搅拌了4小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用水清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-丁基辛基5-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十一烷酸(1.99g)。
[1241]1h-nmr(cdcl3)δ:8.28(2h,d,j＝9.3hz),7.39(2h,d,j＝9.3hz),4.88-4.77(1h,m),3.99(2h,d,j＝6.0hz),2.41-2.31(2h,m),1.80-1.48(7h,m),1.44-1.20(24h,m),0.92-0.83(9h,m).
[1242]
(2)
[1243]
[化学式152]
[1244][1245]
向2-丁基辛基5-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十一烷酸(500mg)、2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇(527mg)、三乙胺(0.787ml)及四氢呋喃(2.5ml)的混合物中加入4-二甲基氨基吡啶(342mg)，并在60℃下搅拌了10小时。将反应混合物冷却至室温，并加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(甲醇-乙酸乙酯)及硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-丁基辛基3,6-二乙基-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯(356mg)。
[1246]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.64(1h,m),4.22-4.12(2h,m),3.97(2h,d,j＝5.1hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.64-2.49(10h,m),2.32(2h,t,j＝6.6hz),1.73-1.50(7h,m),1.36-1.20(24h,m),1.06-0.99(9h,m),0.92-0.84(9h,m).
[1247]
msm/z(m+h):586.
[1248]
[实施例81]
[1249]
[化学式153]
[1250][1251]
在实施例80(2)中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例80(2)相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1252]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.64(1h,m),4.15-4.04(2h,m),3.97(2h,d,j＝5.4hz),2.97-2.83(1h,m),2.68(2h,t,6.6hz),2.58-2.43(8h,m),2.32(2h,t,j＝6.6hz),1.73-1.50(7h,m),1.36-1.20(24h,m),1.06-0.96(12h,m),0.92-0.84(9h,m).
[1253]
msm/z(m+h):600.
[1254]
[实施例82]
[1255]
(1)
[1256]
[化学式154]
[1257][1258]
在实施例80(1)中，使用2-己基-1-癸醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例80(1)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基5-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十一烷酸。
[1259]1h-nmr(cdcl3)δ:8.27(2h,dd,j＝6.6hz,1.8hz),7.38(2h,dd,j＝6.6hz,1.8hz),4.88-4.78(1h,m),3.98(2h,d,j＝6.0hz),2.41-2.30(2h,m),1.79-1.53(7h,m),1.42-1.20(32h,m),0.92-0.83(9h,m).
[1260]
(2)
[1261]
[化学式155]
[1262][1263]
在实施例80(2)中，使用2-己基癸基5-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十一烷酸来代替使用2-丁基辛基5-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十一烷酸，除此以外，利用与实施例80(2)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3,6-二乙基-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1264]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.64(1h,m),4.23-4.12(2h,m),3.97(2h,d,j＝5.7hz),2.76(2h,t,j＝6.6hz),2.64-2.48(10h,m),2.32(2h,t,j＝6.6hz),1.75-1.50(7h,m),1.36-1.20(32h,m),1.06-0.99(9h,m),0.92-0.84(9h,m).
[1265]
msm/z(m+h):642.
[1266]
[实施例83]
[1267]
[化学式156]
[1268][1269]
在实施例82(2)中，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例82(2)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1270]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.64(1h,m),4.17-4.03(2h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.97-2.84(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.57-2.42(8h,m),2.32(2h,t,j＝6.6hz),1.73-1.50(7h,m),1.38-1.19(32h,m),1.06-0.96(12h,m),0.92-0.84(9h,m).
[1271]
msm/z(m+h):656.
[1272]
[实施例84]
[1273]
(1)
[1274]
[化学式157]
[1275][1276]
在加热回流下，将10-甲氧基-10-氧代癸酸(47.6g)、亚硫酰氯(47.6ml)及n,n-二甲基甲酰胺(0.1ml)的混合物搅拌了1小时。减压蒸馏除去溶剂，得到了褐色油状物的10-氯-10-氧代癸酸甲酯(59.7g)。
[1277]1h-nmr(cdcl3)δ:3.67(3h,s),2.88(2h,t,j＝7.2hz),2.30(2h,t,j＝7.2hz),1.75-1.57(4h,m),1.38-1.25(8h,m).
[1278]
在-78℃下，向氯化锌(ii)(30.0g)的四氢呋喃(500ml)悬浮液中滴加1.0mol/l己基溴化镁-二乙醚溶液(440ml)，升温至0℃之后，在相同温度下搅拌了30分钟。在冰冷下，向反应混合物中加入四(三苯基膦)钯(0)(6.4g)之后，在相同温度下滴加10-氯-10-氧代癸酸甲酯(59.7g)，并在相同温度下搅拌了1小时。向反应混合物中加入1.0mol/l盐酸水溶液(200ml)及乙酸乙酯(600ml)，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液(560ml)清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了白色固体的10-氧代十六烷酸甲酯(50.6g)。
[1279]1h-nmr(cdcl3)δ:3.67(3h,s),2.38(4h,t,j＝7.2hz),2.30(2h,t,7.2hz),1.65-1.49(6h,m),1.35-1.20(14h,m),0.88(3h,t,j＝7.2hz).
[1280]
向10-氧代十六烷酸甲酯(15.0g)与2-丁基-1-辛醇(14.7g)的混合物中加入原钛酸四异丙酯(1.5g)，并在110℃下搅拌了1小时。向反应混合物中加入水(1ml)，并在室温下搅拌15分钟之后，利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化，得到了无色油状物的2-丁基辛基10-氧代十六烷酸酯(21.6g)。
[1281]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(2h,d,j＝5.6hz),2.38(4h,t,j＝7.6hz),2.29(2h,t,j＝7.6hz),1.65-1.50(7h,m),1.35-1.20(30h,m),0.92-0.83(9h,m).
[1282]
在冰冷下，向2-丁基辛基10-氧代十六烷酸酯(21.6g)、甲醇(86ml)及四氢呋喃(86ml)的混合物加入硼氢化钠(2.8g)，并在相同温度下搅拌了30分钟。将反应混合物注入到冰(80g)与水(80g)的混合物之后，加入1.0mol/l盐酸水溶液(110ml)及乙酸乙酯(200ml)，分取有机层之后，用饱和氯化钠水溶液(200ml)清洗，并用无水硫酸钠进行干燥之后，减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-丁基辛基10-羟基十六烷酸酯(18.0g)。
[1283]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(2h,d,j＝6.0hz),3.61-3.54(1h,m),2.30(2h,t,j＝7.6hz),1.65-1.56(3h,m),1.48-1.22(38h,m),0.92-0.83(9h,m).
[1284]
向2-丁基辛基10-羟基十六烷酸酯(1.50g)、三乙胺(1.43ml)及四氢呋喃(15ml)的混合物中加入氯甲酸4-硝基苯酯(1.03g)，并在室温下搅拌了4小时。向反应混合物中加入
水及乙酸乙酯，分取有机层，用水清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸(2.07g)。
[1285]1h-nmr(cdcl3)δ:8.28(2h,dd,j＝7.2hz,2.1hz),7.39(2h,dd,j＝7.2hz,2.1hz),4.86-4.76(1h,m),3.97(2h,d,j＝5.7hz),2.30(2h,t,j＝7.2hz),1.74-1.20(41h,m),0.92-0.85(9h,m).
[1286]
(2)
[1287]
[化学式158]
[1288][1289]
向2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸(300mg)、2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇(304mg)、三乙胺(0.211ml)及四氢呋喃(6ml)的混合物中加入4-二甲基氨基吡啶(183mg)，并在80℃下搅拌了8小时。将反应混合物冷却至室温，并加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(甲醇-乙酸乙酯)及硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯(296mg)。
[1290]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.10(2h,t,j＝6.6hz),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.97-2.85(1h,m),2.68(2h,t,j＝7.2hz),2.63-2.40(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.68-1.47(7h,m),1.40-1.19(34h,m),1.10-0.96(12h,m),0.95-0.79(9h,m).
[1291]
msm/z(m+h):670.
[1292]
[实施例85]
[1293]
(1)
[1294]
[化学式159]
[1295][1296]
向2,2
’‑
氮烷二基双(-1-乙醇)(2.0g)、2-溴-n,n-二乙基乙-1-胺氢溴酸盐(7.4g)及乙醇(40ml)的混合物中加入碳酸钾(7.9g)，并在加热回流下搅拌了8小时。将反应混合物冷却至室温，滤除不需要的物质，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了淡黄色油状物的2,2
’‑
((2-(二乙基氨基)乙基)氮烷二基)双(-1-乙醇)(2.3g)。
[1297]
msm/z(m+h):205.
[1298]
(2)
[1299]
[化学式160]
[1300][1301]
在实施例84(2)中，使用2,2
’‑
((2-(二乙基氨基)乙基)氮烷二基)双(-1-乙醇)来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例84(2)相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1302]1h-nmr(cdcl3)δ:4.75-4.61(1h,m),4.21(2h,t,j＝6.6hz),3.97(2h,d,j＝5.7hz),3.55(2h,t,j＝5.1hz),2.89(2h,t,j＝6.6hz),2.76-2.65(4h,m),2.64-2.41(6h,m),2.30(2h,t,j＝8.1hz),1.72-1.45(7h,m),1.40-1.20(34h,m),1.13-0.98(6h,m),0.96-0.81(9h,m).
[1303]
msm/z(m+h):672.
[1304]
[实施例86]
[1305]
[化学式161]
[1306][1307]
向实施例85(2)中所合成的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯(250mg)、十二烷酸(112mg)、三乙胺(0.31ml)、4-二甲基氨基吡啶(136mg)及二氯甲烷(5ml)的混合物中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(142mg)，并在室温下搅拌了6小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用水清洗之后，用无水硫酸镁进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(甲醇-乙酸乙酯)及硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-丁基辛基6-(2-(十二烷酰氧基)乙基)-3-乙基-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯(177mg)。
[1308]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.60(1h,m),4.21-4.08(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.88-2.75(4h,m),2.73-2.43(8h,m),2.29(4h,t,j＝7.5hz),1.70-1.46(9h,m),1.39-1.18(50h,m),1.12-0.97(6h,m),0.95-0.81(12h,m).
[1309]
msm/z(m+h):854.
[1310]
[实施例87]
[1311]
[化学式162]
[1312][1313]
在实施例86中，使用癸酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基6-(2-(癸酰氧基)乙基)-3-乙基-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1314]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.22-4.07(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.89-2.77(4h,m),2.74-2.43(8h,m),2.30(4h,t,j＝8.1hz),1.68-1.46(9h,m),1.40-1.18
(46h,m),1.13-0.97(6h,m),0.95-0.80(12h,m).
[1315]
msm/z(m+h):826.
[1316]
[实施例88]
[1317]
[化学式163]
[1318][1319]
在实施例86中，使用辛酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-(辛酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1320]1h-nmr(cdcl3)δ:4.71-4.62(1h,m),4.20-4.08(4h,m),3.97(2h,d,j＝5.6hz),2.89-2.77(4h,m),2.73-2.42(8h,m),2.29(4h,t,j＝7.6hz),1.68-1.48(9h,m),1.39-1.18(42h,m),1.10-0.98(6h,m),0.94-0.81(12h,m).
[1321]
msm/z(m+h):798.
[1322]
[实施例89]
[1323]
(1)
[1324]
[化学式164]
[1325][1326]
在实施例84(1)中，使用2-己基-1-癸醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例84(1)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸酯。
[1327]1h-nmr(cdcl3)δ:8.28(2h,dd,j＝7.2hz,2.4hz),7.39(2h,dd,j＝7.2hz,2.4hz),4.85-4.77(1h,m),3.97(2h,d,j＝5.6hz),2.30(2h,t,j＝7.6hz),1.72-1.20(49h,m),0.92-0.85(9h,m).
[1328]
(2)
[1329]
[化学式165]
[1330][1331]
在实施例84(2)中，使用2-己基癸基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸酯来代替使用2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸，除此以外，与实施例84(2)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1332]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.10(2h,t,j＝6.6hz),3.97(2h,d,j＝5.7hz),2.97-2.87(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.62-2.40(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.69-1.49(7h,m),1.40-1.19(42h,m),1.12-0.95(12h,m),0.93-0.82(9h,m).
[1333]
msm/z(m+h):726.
[1334]
[实施例90]
[1335]
(1)
[1336]
[化学式166]
[1337][1338]
在实施例85(1)中，使用3-氯-n,n-二乙基丙-1-胺来代替使用2-溴-n,n-二乙基乙-1-胺氢溴酸盐，除此以外，利用与实施例85(1)相同的方法得到了无色油状物的2,2
’‑
((3-(二乙基氨基)丙基)氮烷二基)双(-1-乙醇)。
[1339]
msm/z(m+h):219.
[1340]
(2)
[1341]
[化学式167]
[1342][1343]
在实施例85(2)中，使用2,2
’‑
((3-(二乙基氨基)丙基)氮烷二基)双(-1-乙醇)来代替使用2,2
’‑
((2-(二乙基氨基)乙基)氮烷二基)双(-1-乙醇)，除此以外，利用与实施例85(2)相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-13-己基-7-(2-羟基乙基)-11-氧代-10,12-二氧杂-3,7-二氮杂二十二烷-22-酸酯。
[1344]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.17(2h,t,j＝6.0hz),3.97(2h,d,j＝6.0hz),3.58(2h,t,j＝5.4hz),2.76(2h,t,j＝5.7hz),2.67-2.40(10h,m),2.30(2h,t,j＝8.1hz),1.76-1.46(9h,m),1.38-1.19(34h,m),1.12-0.98(6h,m),0.94-0.82(9h,m).
[1345]
msm/z(m+h):686.
[1346]
[实施例91]
[1347]
[化学式168]
[1348][1349]
在实施例86中，使用油酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-(油酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1350]1h-nmr(cdcl3)δ:5.38-5.28(2h,m),4.72-4.63(1h,m),4.21-4.06(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.90-2.76(4h,m),2.74-2.44(8h,m),2.29(4h,t,j＝7.8hz),2.07-1.93(4h,m),1.68-1.45(9h,m),1.38-1.17(54h,m),1.11-0.96(6h,m),0.94-0.81(12h,m).
[1351]
msm/z(m+h):936.
[1352]
[实施例92]
[1353]
[化学式169]
[1354][1355]
在实施例84(1)及(2)中，使用8-甲氧基-8-氧代辛酸来代替使用10-甲氧基-10-氧代癸酸，除此以外，利用与实施例84(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十九烷-19-酸酯。
[1356]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.59(1h,m),4.17-4.04(2h,m),3.97(2h,d,j＝5.4hz),2.97-2.84(1h,m),2.69(2h,t,j＝6.6hz),2.64-2.42(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.68-1.46(7h,m),1.40-1.18(30h,m),1.14-0.94(12h,m),0.93-0.82(9h,m).
[1357]
msm/z(m+h):642.
[1358]
[实施例93]
[1359]
[化学式170]
[1360][1361]
在实施例86中，使用2-丁基辛基3-乙基-13-己基-7-(2-羟基乙基)-11-氧代-10,12-二氧杂-3,7-二氮杂二十二烷-22-酸酯来代替使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯，使用油酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-13-己基-7-(2-(油酰氧基)乙基)-11-氧代-10,12-二氧杂-3,7-二氮杂二十二烷-22-酸酯。
[1362]1h-nmr(cdcl3)δ:5.42-5.27(2h,m),4.72-4.59(1h,m),4.21-4.07(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.86-2.71(4h,m),2.65-2.35(8h,m),2.29(4h,t,j＝7.2h),2.07-1.94(4h,m),1.70-1.48(11h,m),1.41-1.19(54h,m),1.11-0.97(6h,m),0.96-0.82(12h,m).
[1363]
msm/z(m+h):950.
[1364]
[实施例94]
[1365]
[化学式171]
[1366][1367]
在实施例92中，使用2-己基-1-癸醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例92相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十九烷-19-酸酯。
[1368]1h-nmr(cdcl3)δ:4.71-4.62(1h,m),4.16-4.04(2h,m),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.97-2.85(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.64-2.41(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.5hz),1.70-1.47(7h,m),1.41-1.19(38h,m),1.11-0.95(12h,m),0.93-0.83(9h,m).
[1369]
msm/z(m+h):698.
[1370]
[实施例95]
[1371]
[化学式172]
[1372][1373]
在实施例84(1)及(2)中，使用6-甲氧基-6-氧代己酸来代替使用10-甲氧基-10-氧代癸酸，除此以外，利用与实施例84(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十七烷-17-酸酯。
[1374]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.16-4.04(2h,m),3.96(2h,d,j＝5.7hz),2.97-2.85(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.63-2.42(8h,m),2.30(2h,t,j＝8.1hz),1.69-1.49(7h,m),1.44-1.20(26h,m),1.12-0.95(12h,m),0.94-0.82(9h,m).
[1375]
msm/z(m+h):614.
[1376]
[实施例96]
[1377]
[化学式173]
[1378][1379]
在实施例95中，使用2-己基-1-癸醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例95相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十七烷-17-酸酯。
[1380]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.62(1h,m),4.17-4.04(2h,m),3.96(2h,d,j＝5.7hz),2.98-2.83(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.62-2.41(8h,m),2.30(2h,t,j＝7.8hz),1.69-1.49(7h,m),1.42-1.18(34h,m),1.12-0.96(12h,m),0.93-0.81(9h,m).
[1381]
msm/z(m+h):670.
[1382]
[实施例97]
[1383]
[化学式174]
[1384][1385]
在实施例85中，使用2-己基癸基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸酯来代替使用2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸，除此以外，利用与实施例85相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1386]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.20(2h,t,j＝6.6hz),3.96(2h,d,j＝5.4hz),3.54(2h,t,j＝5.4hz),2.89(2h,t,j＝6.0hz),2.76-2.63(4h,m),2.62-2.42(6h,m),2.29(2h,t,j＝7.5hz),1.72-1.46(7h,m),1.39-1.18(42h,m),1.04(6h,t,j＝7.2hz),0.94-0.80(9h,m).
[1387]
msm/z(m+h):728.
[1388]
[实施例98]
[1389]
[化学式175]
[1390][1391]
在实施例86中，使用2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯来代替使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯，使用癸酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基6-(2-(癸酰氧基)乙基)-3-乙基-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1392]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.63(1h,m),4.22-4.08(4h,m),3.96(2h,d,j＝5.4hz),2.88-2.76(4h,m),2.75-2.43(8h,m),2.29(4h,t,j＝7.2hz),1.68-1.50(9h,m),1.39-1.16(54h,m),1.03(6h,t,j＝6.6hz),0.95-0.82(12h,m).
[1393]
msm/z(m+h):882.
[1394]
[实施例99]
[1395]
[化学式176]
[1396][1397]
在实施例98中，使用辛酸来代替使用癸酸，除此以外，利用与实施例98相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-(2-(辛酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1398]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.21-4.07(4h,m),3.96(2h,d,j＝5.1hz),2.90-2.76(4h,m),2.76-2.42(8h,m),2.29(4h,t,j＝7.8hz),1.68-1.47(9h,m),1.39-1.19(50h,m),1.12-0.96(6h,m),0.95-0.82(12h,m).
[1399]
msm/z(m+h):854.
[1400]
[实施例100]
[1401]
[化学式177]
[1402][1403]
在实施例98中，使用己酸来代替使用癸酸，除此以外，利用与实施例98相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-6-(2-(己酰氧基)乙基)-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1404]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.21-4.07(4h,m),3.96(2h,d,j＝5.7hz),2.90-2.77(4h,m),2.73-2.41(8h,m),2.29(4h,t,j＝7.2hz),1.70-1.46(9h,m),1.42-1.18(46h,m),1.13-0.97(6h,m),0.95-0.81(12h,m).
[1405]
msm/z(m+h):826.
[1406]
[实施例101]
[1407]
[化学式178]
[1408][1409]
在实施例80(2)中，使用2,2
’‑
((2-(二乙基氨基)乙基)氮烷二基)双(1-乙醇)来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例80(2)相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1410]1h-nmr(cdcl3)δ:4.75-4.64(1h,m),4.25-4.15(2h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),3.54(2h,t,j＝5.4hz),2.89(2h,t,j＝6.6hz),2.75-2.63(4h,m),2.60-2.42(6h,m),2.33(2h,t,j＝6.6hz),1.73-1.50(7h,m),1.39-1.20(24h,m),1.03(6h,t,j＝7.2hz),0.95-0.81(9h,m).
[1411]
msm/z(m+h):602.
[1412]
[实施例102]
[1413]
[化学式179]
[1414][1415]
在实施例85(2)中，使用2-己基癸基5-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十一烷酸来代替使用2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸，除此以外，利用与实施例85(2)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1416]1h-nmr(cdcl3)δ:4.75-4.63(1h,m)4.25-4.14(2h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),3.54(2h,t,j＝4.8hz),2.89(2h,t,j＝6.0hz),2.76-2.63(4h,m),2.60-2.43(6h,m),2.33(2h,t,j＝7.5hz),1.73-1.48(7h,m),1.40-1.17(32h,m),1.03(6h,t,j＝7.2hz),0.96-0.78(9h,m).
[1417]
msm/z(m+h):658.
[1418]
[实施例103]
[1419]
[化学式180]
[1420][1421]
在实施例86中，使用壬酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-(壬酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1422]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.21-4.09(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.88-2.47(4h,m),2.72-2.62(2h,m),2.58-2.46(6h,m),2.29(4h,t,j＝7.8hz),1.69-1.50(9h,m),1.40-1.19(44h,m),1.01(6h,t,j＝7.2hz),0.95-0.82(12h,m).
[1423]
msm/z(m+h):812.
[1424]
[实施例104]
[1425]
[化学式181]
[1426][1427]
在实施例86中，使用庚酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-6-(2-(庚酰氧基)乙基)-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1428]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.60(1h,m),4.20-4.06(4h,m),3.97(2h,d,j＝5.1hz),2.89-2.76(4h,m),2.71-2.62(2h,m),2.58-2.46(6h,m),2.30(4h,t,j＝8.1hz),1.68-1.47(9h,m),1.39-1.19(40h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.95-0.83(12h,m).
[1429]
msm/z(m+h):784.
[1430]
[实施例105]
[1431]
[化学式182]
[1432][1433]
在实施例86中，使用己酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-6-(2-(己酰氧基)乙基)-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1434]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.21-4.08(4h,m),3.97(2h,d,j＝5.4hz),2.89-2.76(4h,m),2.72-2.62(2h,m),2.59-2.45(6h,m),2.30(4h,t,j＝8.1hz),1.71-1.47(9h,m),1.40-1.19(38h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.94-0.82(12h,m).
[1435]
msm/z(m+h):770.
[1436]
[实施例106]
[1437]
[化学式183]
[1438][1439]
在实施例86中，使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯来代替使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基6-(2-(十二烷酰氧基)乙基)-3-乙基-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1440]1h-nmr(cdcl3)δ:4.74-4.64(1h,m),4.21-4.07(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.89-2.76(4h,m),2.72-2.63(2h,m),2.58-2.46(6h,m),2.37-2.25(4h,m),1.74-1.50(9h,m),1.39-1.19(40h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.95-0.83(12h,m).
[1441]
msm/z(m+h):784.
[1442]
[实施例107]
[1443]
[化学式184]
[1444][1445]
在实施例106中，使用癸酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例106相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基6-(2-(癸酰氧基)乙基)-3-乙基-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1446]1h-nmr(cdcl3)δ:4.74-4.64(1h,m),4.22-4.07(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.88-2.75(4h,m),2.72-2.62(2h,m),2.58-2.46(6h,m),2.37-2.25(4h,m),1.74-1.52(9h,m),1.40-1.19(36h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.94-0.82(12h,m).
[1447]
msm/z(m+h):756.
[1448]
[实施例108]
[1449]
[化学式185]
[1450][1451]
在实施例106中，使用辛酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例106相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-(辛酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1452]1h-nmr(cdcl3)δ:4.74-4.64(1h,m),4.21-4.08(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.88-2.76(4h,m),2.72-2.62(2h,m),2.58-2.46(6h,m),2.37-2.27(4h,m),1.74-1.50(9h,m),1.40-1.19(32h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.95-0.83(12h,m).
[1453]
msm/z(m+h):728.
[1454]
[实施例109]
[1455]
[化学式186]
[1456][1457]
在实施例86中，使用2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯来代替使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基6-(2-(十二烷酰氧基)乙基)-3-乙基-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1458]1h-nmr(cdcl3)δ:4.74-4.64(1h,m),4.21-4.06(4h,m),3.97(2h,d,j＝5.4hz),2.88-2.76(4h,m),2.71-2.63(2h,m),2.57-2.46(6h,m),2.36-2.25(4h,m),1.72-1.52(9h,m),1.39-1.20(48h,m),1.02(6h,t,j＝7.5hz),0.95-0.81(12h,m).
[1459]
msm/z(m+h):840.
[1460]
[实施例110]
[1461]
[化学式187]
[1462][1463]
在实施例109中，使用癸酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例109相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基6-(2-(癸酰氧基)乙基)-3-乙基-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1464]1h-nmr(cdcl3)δ:4.75-4.63(1h,m),4.21-4.07(4h,m),3.97(2h,d,j＝5.7hz),2.88-2.76(4h,m),2.71-2.62(2h,m),2.58-2.45(6h,m),2.36-2.26(4h,m),1.73-1.52(9h,m),1.38-1.19(44h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.95-0.81(12h,m).
[1465]
msm/z(m+h):812.
[1466]
[实施例111]
[1467]
[化学式188]
[1468][1469]
在实施例109中，使用辛酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例109相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-(2-(辛酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1470]1h-nmr(cdcl3)δ:4.75-4.63(1h,m),4.22-4.07(4h,m),3.96(2h,d,j＝5.1hz),2.88-2.76(4h,m),2.71-2.63(2h,m),2.58-2.45(6h,m),2.37-2.24(4h,m),1.74-1.52(9h,m),1.39-1.19(40h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.96-0.83(12h,m).
[1471]
msm/z(m+h):784.
[1472]
[实施例112]
[1473]
[化学式189]
[1474][1475]
在实施例80(1)及(2)中，使用2-辛基-1-十二烷醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(乙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例80(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的2-辛基十二烷基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1476]1h-nmr(cdcl3)δ:4.75-4.63(1h,m),4.18-4.02(2h,m),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.97-2.83(1h,m),2.68(2h,t,j＝7.2hz),2.60-2.41(8h,m),2.32(2h,t,j＝6.6hz),1.74-1.50(7h,m),1.39-1.16(40h,m),1.09-0.95(12h,m),0.93-0.80(9h,m).
[1477]
msm/z(m+h):712.
[1478]
[实施例113]
2.85(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.60-2.42(8h,m),2.31(2h,t,j＝7.2hz),2.08-1.94(4h,m),1.74-1.50(10h,m),1.41-1.19(28h,m),1.07-0.95(12h,m),0.92-0.82(6h,m).
[1495]
msm/z(m+h):682.
[1496]
[实施例116]
[1497]
[化学式193]
[1498][1499]
在实施例84(1)及(2)中，使用7-乙氧基-7-氧代庚酸来代替使用10-甲氧基-10-氧代癸酸，使用2-己基-1-癸醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例84(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-重氮基十八烷-18-酸酯。
[1500]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.62(1h,m),4.17-4.03(2h,m),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.97-2.85(1h,m),2.68(2h,t,j＝7.5hz),2.60-2.41(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.8hz),1.68-1.48(7h,m),1.41-1.18(36h,m),1.08-0.95(12h,m),0.93-0.81(9h,m).
[1501]
msm/z(m+h):684.
[1502]
[实施例117]
[1503]
[化学式194]
[1504][1505]
在实施例84(1)及(2)中，使用9-甲氧基-9-氧代壬酸来代替使用10-甲氧基-10-氧代癸酸，使用2-己基-1-癸醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例84(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十烷-20-酸酯。
[1506]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.15-4.03(2h,m),3.96(2h,d,j＝5.1hz),2.98-2.84(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.60-2.42(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.68-1.47(7h,m),1.40-1.19(40h,m),1.08-0.95(12h,m),0.93-0.81(9h,m).
[1507]
msm/z(m+h):712.
[1508]
[实施例118]
[1509]
[化学式195]
[1510][1511]
在实施例98中，使用油酸来代替使用癸酸，除此以外，利用与实施例98相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-(2-(油酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1512]1h-nmr(cdcl3)δ:5.38-5.28(2h,m),4.71-4.61(1h,m),4.21-4.08(4h,m),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.87-2.76(4h,m),2.71-2.63(2h,m),2.57-2.45(6h,m),2.29(4h,t,j＝7.2hz),2.06-1.94(4h,m),1.67-1.49(9h,m),1.39-1.18(62h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.95-0.82(12h,m).
[1513]
msm/z(m+h):992.
[1514]
[实施例119]
[1515]
[化学式196]
[1516][1517]
在实施例106中，使用油酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例106相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-(油酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1518]1h-nmr(cdcl3)δ:5.40-5.28(2h,m),4.74-4.63(1h,m),4.22-4.07(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.88-2.76(4h,m),2.73-2.62(2h,m),2.59-2.45(6h,m),2.37-2.25(4h,m),2.08-1.94(4h,m),1.73-1.50(9h,m),1.41-1.18(44h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.96-0.82(12h,m).
[1519]
msm/z(m+h):866.
[1520]
[实施例120]
[1521]
[化学式197]
[1522][1523]
在实施例109中，使用油酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例109相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-12-己基-6-(2-(油酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1524]1h-nmr(cdcl3)δ:5.40-5.28(2h,m),4.73-4.64(1h,m),4.21-4.07(4h,m),3.96(2h,d,j＝5.1hz),2.88-2.76(4h,m),2.72-2.62(2h,m),2.58-2.45(6h,m),2.37-2.24(4h,m),2.07-1.94(4h,m),1.73-1.51(9h,m),1.39-1.19(52h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.94-0.81(12h,m).
[1525]
msm/z(m+h):922.
[1526]
[实施例121]
[1527]
[化学式198]
[1528][1529]
在实施例84(1)及(2)中，使用2-辛基-1-十二烷醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例84(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的2-辛基十二烷基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1530]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.15-4.06(2h,m),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.97-2.84(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.59-2.42(8h,m),2.29(2h,t,j＝8.1hz),1.68-1.48(7h,m),1.38-1.19(50h,m),1.09-0.96(12h,m),0.93-0.82(9h,m).
[1531]
msm/z(m+h):782.
[1532]
[实施例122]
[1533]
(1)
[1534]
[化学式199]
[1535][1536]
在冰冷下，向1-庚醇(0.86ml)、三乙胺(1.55ml)及四氢呋喃(5.00ml)的混合物中加入丙烯酰氯(0.45ml)，并在室温下搅拌了2小时。向反应混合物中加入水及乙酸乙酯，分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的丙烯酸庚酯(0.57g)。
[1537]
向所得到的丙烯酸庚酯(0.57g)、2-((2-(二乙基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇二盐酸盐(0.52g)及四氢呋喃(10ml)的混合物中加入三乙胺(1.24ml)，并在加热回流下搅拌了8小时。将反应混合物冷却至室温，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的3-((2-(二乙基氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基)丙酸庚酯(0.21g)。
[1538]
msm/z(m+h):331.
[1539]
(2)
[1540]
[化学式200]
[1541][1542]
在实施例84(2)中，使用3-((2-(二乙基氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基)丙酸庚酯来代替使用2-((2-(二乙基氨基)乙基)(异丙基)氨基)-1-乙醇，除此以外，利用与实施例84(2)相同的方法得到了无色油状物的2-丁基辛基3-乙基-6-(3-(庚氧基)-3-氧代丙基)-12-己基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1543]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.20-4.11(2h,m),4.06(2h,t,j＝6.6hz),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.87(2h,t,j＝6.6hz),2.77(2h,d,j＝6.0hz),2.64-2.41(10h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.66-1.50(9h,m),1.37-1.22(42h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.92-0.84(12h,m).
[1544]
msm/z(m+h):798.
[1545]
[实施例123]
[1546]
(1)
[1547]
[化学式201]
[1548][1549]
在冰冷下，向60％wt氢化钠(3.3g)的四氢呋喃(80ml)悬浮液中滴加2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(18.8ml)，并在相同温度下搅拌了30分钟。向反应混合物中加入6-十一酮(2.0g)，并在加热回流下搅拌了5小时。将反应混合物冷却至室温，并将反应混合物注入到冰水之后，加入了乙酸乙酯。分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，在减压下蒸馏除去溶剂，利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的3-戊基辛-2-烯酸乙酯(2.8g)。
[1550]1h-nmr(cdcl3)δ:5.61(1h,s),4.14(2h,q,j＝6.6hz),2.58(2h,t,j＝7.2hz),2.12(2h,t,j＝7.2hz),1.50-1.20(15h,m),0.89(6h,t,j＝6.6hz).
[1551]
向3-戊基辛-2-烯酸乙酯(2.8g)、10％钯-碳(0.84g)及甲醇(56ml)的混合物中加入甲酸铵(4.4g)，并在加热回流下搅拌了3小时。将反应混合物冷却至室温，用硅藻土滤除不溶物之后，在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的3-戊基辛酸乙酯(2.8g)。
[1552]1h-nmr(cdcl3)δ:4.12(2h,q,j＝7.2hz),2.22(2h,t,j＝6.6hz),2.05-2.04(1h,m),1.34-1.20(19h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1553]
在冰冷下，向2.5mol/l氢化锂铝-四氢呋喃溶液(9.3ml)与四氢呋喃(50ml)的混合物中滴加3-戊基辛酸乙酯(2.8g)的四氢呋喃(10ml)溶液，并在相同温度下搅拌30分钟之后，在室温下搅拌了2小时。向反应混合物中加入乙酸乙酯，并在冰冷下注入到冰水之后，用硅藻土滤除了不溶物。分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的3-戊基-1-辛醇(2.2g)。
[1554]1h-nmr(cdcl3)δ:3.71-3.62(2h,m),1.57-1.49(2h,m),1.35-1.20(17h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1555]
(2)
[1556]
[化学式202]
[1557][1558]
在实施例84(1)中，使用3-戊基-1-辛醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例84(1)相同的方法得到了无色油状物的3-戊基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸。
[1559]1h-nmr(cdcl3)δ:8.31-8.25(2h,m),7.41-7.36(2h,m),4.86-4.77(1h,m),3.97(2h,d,j＝5.4hz),2.30(2h,t,j＝7.5hz),1.72-1.20(43h,m),0.92-0.85(9h,m).
[1560]
(3)
[1561]
[化学式203]
[1562][1563]
在实施例85(2)中，使用3-戊基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸来代替使用2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸，除此以外，利用与实施例85(2)相同的方法得到了无色油状物的3-戊基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1564]1h-nmr(cdcl3)δ:4.74-4.06(1h,m),4.20(2h,t,j＝6.0hz),4.08(2h,t,j＝6.6hz),3.54(2h,t,j＝4.5hz),2.88(2h,,t,j＝5.7hz),2.75-2.63(4h,m),2.60-2.41(6h,m),2.28(2h,t,j＝7.8hz),1.72-1.47(8h,m),1.44-1.14(35h,m),1.03(6h,t,j＝7.2hz),0.94-0.81(9h,m).
[1565]
msm/z(m+h):686.
[1566]
[实施例124]
[1567]
(1)
[1568]
[化学式204]
[1569][1570]
在实施例74(1)中，使用十一烷酸来代替使用癸酸，使用1-碘壬烷来代替使用1-碘辛烷，除此以外，利用与实施例74(1)相同的方法得到了无色油状物的2-壬基十一烷酸。
[1571]1h-nmr(cdcl3)δ:2.29-2.41(1h,m),1.68-1.20(32h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1572]
(2)
[1573]
[化学式205]
[1574][1575]
在冰冷下，向2.5mol/l氢化锂铝-四氢呋喃溶液(7.6ml)与四氢呋喃(60ml)的混合物中滴加2-壬基十一烷酸(3.0g)的四氢呋喃(10ml)溶液，并在相同温度下搅拌30分钟之后，在室温下搅拌了6小时。向反应混合物中加入乙酸乙酯，并在冰冷下注入到冰水之后，用硅藻土滤除了不溶物。分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-壬基-1-十一烷醇(2.8g)。
[1576]1h-nmr(cdcl3)δ:3.57-3.51(2h,m),1.50-1.20(33h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1577]
(3)
[1578]
[化学式206]
[1579][1580]
在实施例84(1)及(2)中，使用2-壬基-1-十一烷醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例84(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的2-壬基十一烷基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂十六烷-16-酸酯。
[1581]1h-nmr(cdcl3)δ:4.76-4.62(1h,m),4.18-4.02(2h,m),3.96(2h,d,j＝5.7hz),2.97-2.84(1h,m),2.68(2h,t,j＝7.2hz),2.60-2.42(8h,m),2.36-2.27(2h,m),1.76-1.49(7h,m),1.39-1.19(40h,m),1.09-0.94(12h,m),0.93-0.83(9h,m).
[1582]
msm/z(m+h):712.
[1583]
[实施例125]
[1584]
[化学式207]
[1585][1586]
在实施例86中，使用3-戊基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯来代替使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯，使用辛酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的3-戊基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-(辛酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1587]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.21-4.02(6h,m),2.88-2.75(4h,m),2.71-2.62(2h,m),2.58-2.45(6h,m),2.34-2.22(4h,m),1.68-1.48(10h,m),1.44-1.17(43h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.94-0.81(12h,m).
[1588]
msm/z(m+h):812.
[1589]
[实施例126]
[1590]
[化学式208]
[1591][1592]
在实施例86中，使用3-戊基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯来代替使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯，使用壬酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的3-戊基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-(壬酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1593]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.59(1h,m),4.23-4.01(6h,m),2.90-2.76(4h,m),2.72-2.62(2h,m),2.58-2.45(6h,m),2.35-2.22(4h,m),1.69-1.47(10h,m),1.44-1.18(45h,m),
1.02(6h,t,j＝7.5hz),0.96-0.80(12h,m).
[1594]
msm/z(m+h):826.
[1595]
[实施例127]
[1596]
(1)
[1597]
[化学式209]
[1598][1599]
在实施例84(1)中，使用1.0mol/l戊基溴化镁-四氢呋喃溶液来代替使用1.0mol/l己基溴化镁-二乙醚溶液，使用2-己基-1-癸醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例84(1)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十五烷酸。
[1600]1h-nmr(cdcl3)δ:8.31-8.25(2h,m),7.41-7.35(2h,m),4.87-4.75(1h,m),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.30(2h,t,j＝7.2hz),1.72-1.20(47h,m),0.93-0.83(9h,m).
[1601]
(2)
[1602]
[化学式210]
[1603][1604]
在实施例84(2)中，使用2-己基癸基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十五烷酸来代替使用2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸，除此以外，利用与实施例84(2)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-6-异丙基-10-氧代-12-戊基-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1605]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.62(1h,m),4.10(2h,t,j＝6.6hz),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.98-2.82(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.6hz),2.59-2.42(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.66-1.47(7h,m),1.40-1.18(40h,m),1.06-0.96(12h,m),0.92-0.84(9h,m).
[1606]
msm/z(m+h):712.
[1607]
[实施例128]
[1608]
(1)
[1609]
[化学式211]
[1610][1611]
在实施例124(2)中，使用2-戊基庚酸来代替使用2-壬基十一烷酸，除此以外，利用与实施例124(2)相同的方法得到了无色油状物的2-戊基-1-庚醇。
[1612]1h-nmr(cdcl3)δ:3.57-3.51(2h,m),1.50-1.20(17h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1613]
(2)
[1614]
[化学式212]
[1615][1616]
在实施例84(1)中，使用2-戊基-1-庚醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例84(1)相同的方法得到了无色油状物的2-戊基庚基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸。
[1617]1h-nmr(cdcl3)δ:8.28(2h,dd,j＝7.2hz,2.1hz),7.39(2h,dd,j＝7.2hz,2.1hz),4.86-4.76(1h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.30(2h,t,j＝7.2hz),1.74-1.20(41h,m),0.92-0.85(9h,m).
[1618]
(3)
[1619]
[化学式213]
[1620][1621]
在实施例85(2)中，使用2-戊基庚基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸来代替使用2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸，除此以外，利用与实施例85(2)相同的方法得到了无色油状物的2-戊基庚基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1622]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.20(2h,t,j＝6.0hz),3.97(2h,d,j＝5.4hz),3.54(2h,t,j＝4.5hz),2.88(2h,t,j＝6.6hz),2.74-2.64(4h,m),2.59-2.44(6h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.75-1.45(7h,m),1.40-1.19(34h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.92-0.84(9h,m).
[1623]
msm/z(m+h):672.
[1624]
[实施例129]
[1625]
[化学式214]
[1626][1627]
在实施例86中，使用2-戊基庚基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯来代替使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯，使用辛酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-戊基庚基3-乙基-12-己基-6-(2-(辛酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1628]1h-nmr(cdcl3)δ:4.73-4.61(1h,m),4.21-4.07(4h,m),3.97(2h,d,j＝5.4hz),2.88-2.77(4h,m),2.72-2.62(2h,m),2.58-2.45(6h,m),2.29(4h,t,j＝7.2hz),1.69-1.48(9h,m),1.41-1.18(42h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.94-0.82(12h,m).
[1629]
msm/z(m+h):798.
[1630]
[实施例130]
[1631]
[化学式215]
[1632][1633]
在实施例86中，使用2-戊基庚基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯来代替使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯，使用壬酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-戊基庚基3-乙基-12-己基-6-(2-(壬酰氧基)乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1634]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.22-4.08(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.88-2.75(4h,m),2.72-2.62(2h,m),2.60-2.46(6h,m),2.29(4h,t,j＝7.5hz),1.70-1.47(9h,m),1.41-1.18(44h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.95-0.81(12h,m).
[1635]
msm/z(m+h):812.
[1636]
[实施例131]
[1637]
[化学式216]
[1638][1639]
在实施例85(2)中，使用2-己基癸基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十五烷酸来代替使用2-丁基辛基10-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)十六烷酸，除此以外，利用与实施例85(2)相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-12-戊基-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1640]1h-nmr(cdcl3)δ:4.74-4.62(1h,m),4.20(2h,t,j＝6.0hz),3.96(2h,d,j＝5.7hz),3.54(2h,t,j＝4.5hz),2.89(2h,t,j＝6.0hz),2.75-2.64(4h,m),2.60-2.43(6h,m),2.29(2h,t,j＝7.8hz),1.67-1.49(7h,m),1.41-1.19(40h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.94-0.82(9h,m).
[1641]
msm/z(m+h):714.
[1642]
[实施例132]
[1643]
[化学式217]
[1644][1645]
在实施例86中，使用2-己基癸基3-乙基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-12-戊基-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯来代替使用2-丁基辛基3-乙基-12-己基-6-(2-羟基乙基)-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯，使用辛酸来代替使用十二烷酸，除此以外，利用与实施例86相同的方法得到了无色油状物的2-己基癸基3-乙基-6-(2-(辛酰氧基)乙基)-10-氧代-12-戊基-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1646]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.61(1h,m),4.22-4.06(4h,m),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.88-2.76(4h,m),2.72-2.62(2h,m),2.58-2.45(6h,m),2.29(4h,t,j＝7.2hz),1.68-1.48
(9h,m),1.39-1.18(48h,m),1.02(6h,t,j＝6.6hz),0.94-0.82(12h,m).
[1647]
msm/z(m+h):840.
[1648]
[实施例133]
[1649]
(1)
[1650]
[化学式218]
[1651][1652]
在实施例124(1)及(2)中，使用壬酸来代替使用十一烷酸，使用1-碘庚烷来代替使用1-碘壬烷，除此以外，利用与实施例124(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的2-庚基-1-壬醇。
[1653]1h-nmr(cdcl3)δ:3.57-3.51(2h,m),1.50-1.20(25h,m),0.88(6h,t,j＝6.6hz).
[1654]
(2)
[1655]
[化学式219]
[1656][1657]
在实施例84(1)及(2)中，使用2-庚基-1-壬醇来代替使用2-丁基-1-辛醇，除此以外，利用与实施例84(1)及(2)相同的方法得到了无色油状物的2-庚基壬基3-乙基-12-己基-6-异丙基-10-氧代-9,11-二氧杂-3,6-二氮杂二十一烷-21-酸酯。
[1658]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.62(1h,m),4.10(2h,t,j＝6.6hz),3.96(2h,d,j＝6.0hz),2.97-2.85(1h,m),2.68(2h,t,j＝6.9hz),2.60-2.41(8h,m),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.67-1.47(7h,m),1.39-1.19(42h,m),1.08-0.95(12h,m),0.94-0.82(9h,m).
[1659]
msm/z(m+h):726.
[1660]
[实施例134]
[1661]
(1)
[1662]
[化学式220]
[1663][1664]
在室温下，向10-溴癸酸(4.0g)的二氯甲烷(80ml)溶液中加入2-己基-1-辛醇(4.4g)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(3.9g)、4-二甲基氨基吡啶(0.9g)及三乙胺(8.6ml)，并在该温度下搅拌了一夜。向反应混合物中加入了乙酸乙酯及水。分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的10-溴癸酸2-己基辛酯(3.4g)。
[1665]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(2h,d,j＝6.0hz),3.41(2h,t,j＝6.6hz),2.30(2h,t,j＝7.5hz),1.91-1.78(2h,m),1.69-1.19(33h,m),0.89(6h,t,j＝7.5hz).
[1666]
(2)
[1667]
[化学式221]
[1668][1669]
在室温下，向10-溴癸酸2-己基辛酯(1.0g)的n,n-二甲基甲酰胺(5ml)溶液中加入n-辛胺(1.1ml)及碳酸钾(1.9g)，并在60℃下搅拌了4小时。将反应混合物冷却至室温之后，加入了乙酸乙酯及水。分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(甲醇-乙酸乙酯)纯化所得到的残留物，得到了淡黄色油状物的10-(辛基氨基)癸酸2-己基辛酯(806mg)。
[1670]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(2h,d,j＝6.0hz),2.58(4h,t,j＝7.2hz),2.29(2h,t,j＝7.2hz),1.68-1.20(47h,m),0.92-0.84(9h,m).
[1671]
(3)
[1672]
[化学式222]
[1673][1674]
在室温下，向2,2
’‑
((2-(二乙基氨基)乙基)氮烷二基)双(乙烷-1-醇)(1.0g)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入辛酸(0.79ml)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(1.4g)、4-二甲基氨基吡啶(1.2g)及三乙胺(2.1ml)，并在该温度下搅拌了12小时。向反应混合物中加入了乙酸乙酯及水。分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并在减压下蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-((2-(二乙基氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基)乙基辛酸酯(541mg)。
[1675]1h-nmr(cdcl3)δ:4.15(2h,t,j＝5.4hz),3.54(2h,t,j＝5.4hz),2.84(2h,t,j＝6.0hz),2.72-2.63(4h,m),2.59-2.44(6h,m),2.30(2h,t,j＝7.2hz),1.78-1.19(10h,m),1.03(6h,t,j＝7.2hz),0.88(3h,t,j＝6.6hz).
[1676]
(4)
[1677]
[化学式223]
[1678][1679]
在室温下，向2-((2-(二乙基氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基)乙基辛酸酯(500mg)的四氢呋喃(6ml)溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯(311mg)，并在该温度下搅拌了1小时。在室温下，向反应混合物中加入10-(辛基氨基)癸酸2-己基辛酯(300mg)及三乙胺(0.34ml)，
并在60℃下搅拌了3小时。将反应混合物冷却至室温之后，加入了乙酸乙酯及水。分取有机层，用饱和氯化钠水溶液清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥，并减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(甲醇-乙酸乙酯)及硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷、nh硅胶)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-己基辛基3-乙基-6-(2-(辛酰氧基)乙基)-11-辛基-10-氧代-9-氧杂-3,6,11-三氮杂二十一烷-21-酸酯(117mg)。
[1680]1h-nmr(cdcl3)δ:4.16-4.07(4h,m),3.97(2h,d,j＝6.0hz),3.24-3.09(4h,m),2.84-2.75(4h,m),2.71-2.61(2h,m),2.58-2.46(6h,m),2.34-2.23(4h,m),1.68-1.42(5h,m),1.36-1.18(52h,m),1.02(6h,t,j＝7.5hz),0.93-0.83(12h,m).
[1681]
msm/z(m+h):853.
[1682]
[实施例135]
[1683]
(1)
[1684]
[化学式224]
[1685][1686]
在冰冷下，向戊二酸酐(27.3g)的四氢呋喃(273ml)溶液中滴加1mol/l己基溴化镁-四氢呋喃溶液(200ml)，并在相同温度下搅拌了1小时。在冰冷下，向反应混合物中加入2mol/l盐酸水溶液(240ml)之后，加入乙酸乙酯(270ml)，分取有机层，用水(80ml)及饱和氯化钠水溶液(80ml)清洗，并用无水硫酸镁进行干燥之后，减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物之后，加入己烷(10ml)，滤取固体物质，用己烷(10ml)清洗之后，在减压下进行干燥，得到了白色固体的5-氧代十一烷酸(16.0g)。
[1687]1h-nmr(cdcl3)δ:2.50(2h,t,j＝7.2hz),2.40(4h,t,j＝7.2hz),2.02-1.80(2h,m),1.63-1.48(2h,m),1.37-1.20(6h,m),0.88(3h,t,j＝6.6hz).
[1688]
向5-氧代十一烷酸(2.8g)、2-戊基-1-庚醇(2.3g)及甲苯(5.6ml)的混合物，添加对甲苯磺酸一水化物(0.13g)，并在110℃下搅拌了1.5小时。将反应混合物冷却至室温后，利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化，得到了无色油状物的2-戊基庚基5-氧代十一烷酸酯(3.8g)。
[1689]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(2h,d,j＝5.1hz),2.47(2h,t,j＝7.2hz),2.39(2h,t,j＝7.2hz),2.33(2h,t,j＝7.2hz),1.95-1.83(2h,m),1.66-1.49(3h,m),1.36-1.20(22h,m),0.92-0.82(9h,m).
[1690]
在冰冷下，向2-戊基庚基5-氧代十一烷酸盐(3.8g)、甲醇(15ml)及甲苯(15ml)的混合物加入硼氢化钠(0.47g)，并在相同温度下搅拌了30分钟。在相同温度下，向反应混合物添加水(6ml)，添加1.0mol/l盐酸水溶液(6ml)，分取有机层，用无水硫酸钠干燥后，减压蒸馏除去了溶剂。利用硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了淡黄色
油状物的2-戊基庚基5-羟基十一烷酸酯(3.5g)。
[1691]1h-nmr(cdcl3)δ:3.97(2h,d,j＝5.7hz),3.65-3.53(1h,m),2.35(2h,t,j＝7.2hz),1.87-1.20(32h),0.92-0.84(9h,m).
[1692]
向2-戊基庚基5-羟基十一烷酸酯(0.50g)的四氢呋喃(5.0ml)溶液，添加1，1'-羰基二咪唑(0.33g)，并在室温下搅拌了30小时。向反应混合物添加水(10ml)及己烷(20ml)，分取有机层后，利用水及饱和氯化钠水溶液清洗，并利用无水硫酸钠干燥后，减压蒸馏除去溶剂，得到淡黄色油状物的1-氧代-1-((2-戊基庚基)氧基)十一烷-5-基1h-咪唑-1-羧酸酯(0.64g)。
[1693]1h-nmr(cdcl3)δ:8.14-8.12(1h,m),7.43-7.41(1h,m),7.08-7.06(1h,m),5.11-5.04(1h,m),3.97(2h,d,j＝5.6hz),2.38-2.32(2h,m),1.80-1.54(7h,m),1.40-1.22(24h,m),0.91-0.85(9h,m).
[1694]
(2)
[1695]
[化学式225]
[1696][1697]
向癸酸(15.8g)、2-溴乙醇(10.0g)及甲苯(30ml)的混合物，添加对甲苯磺酸一水化物(0.41g)，并在130℃下搅拌了2小时。将反应混合物冷却至室温后，添加水(100ml)，分取了有机层。利用10％碳酸氢钠水溶液(55ml)及饱和氯化钠水溶液(50ml)清洗，并利用无水硫酸钠干燥后，减压蒸馏除去溶剂，得到了淡黄色油状物的癸酸2-溴乙基(22.2g)。
[1698]1h-nmr(cdcl3)δ:4.38(2h,t,j＝6.4hz),3.51(2h,t,j＝6.4hz),2.35(2h,t,j＝7.6hz),1.68-1.60(2h,m),1.35-1.20(12h,m),0.88(3h,t,j＝7.2hz).
[1699]
向2-((2-(二乙基氨基)乙基)氨基)-1-乙醇(5.0g)、碳酸钾(8.6g)及乙腈(25ml)的混合物，添加癸酸2-溴乙基(9.6g)，并在80℃下搅拌了1.5小时。将反应混合物冷却至室温后，添加水(25ml)及乙酸乙酯(50ml)，分取有机层，减压蒸馏除去了溶剂。向所得到的残留物添加30％盐酸水溶液(12.5ml)、水(12.5ml)及乙酸乙酯(50ml)，分取了水层。向所得到的水层添加10％氢氧化钠水溶液(55ml)，调整为ph 10后，添加乙酸乙酯，分取有机层，利用无水硫酸钠进行了干燥。减压蒸馏除去溶剂后，利用硅胶柱色谱法(nh氧化硅胶、乙酸乙酯-己烷)纯化所得到的残留物，得到了无色油状物的2-((2-(二乙基氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基)癸酸乙酯(2.54g)。
[1700]1h-nmr(cdcl3)δ:4.15(2h,t,j＝6.0hz),3.55-3.53(2h,m),2.84(2h,t,j＝6.0hz),2.71-2.64(4h,m),2.58-2.45(6h,m),2.30(2h,t,j＝7.2hz),1.64-1.57(2h,m),1.35-1.22(12h,m),1.03(6h,t,j＝7.2hz),0.88(3h,t,j＝7.2hz).
[1701]
(3)
[1702]
[化学式226]
[1703][1704]
向1-氧代-1-((2-戊基庚基)氧基)十一烷-5-基1h-咪唑-1-羧酸酯(0.64g)、2-((2-(二乙基氨基)乙基)(2-羟基乙基)氨基)癸酸乙酯(0.56g)及乙腈(2.5ml)的混合物添加碳酸钾(0.20g)，并在80℃下搅拌了2小时。将反应混合物冷却至室温之后，添加乙酸乙酯(5ml)，滤除不溶物，并减压蒸馏除去了溶剂。向所得到的残留物添加乙酸乙酯(20ml)后，利用水(10ml)及饱和氯化钠水溶液清洗，并利用无水硫酸钠干燥后，减压蒸馏除去溶剂，将所得到的残留物利用硅胶柱色谱法(甲醇-乙酸乙酯-己烷)纯化，得到了2-戊基庚基6-(2-(癸酰氧基)乙基)-3-乙基-12-戊基-10-氧代-9，11-二氧杂-3，6-二氮杂十六烷-16-酸酯(0.68g)作为无色油状物。
[1705]1h-nmr(cdcl3)δ:4.72-4.65(1h,m),4.22-4.09(4h,m),3.97(2h,d,j＝5.6hz),2.86-2.77(4h,m),2.70-2.64(2h,m),2.55-2.48(6h,m),2.35-2.27(4h,m),1.71-1.55(9h,m),1.36-1.20(36h,m),1.02(6h,t,j＝7.2hz),0.94-0.82(12h,m).
[1706]
msm/z(m+h):755.
[1707]
试验例1：核酸脂质颗粒的制作与小鼠中的报告蛋白敲落率的测定
[1708]
＜核酸脂质颗粒的制备＞
[1709]
将在上述实施例中所制造的化合物24、化合物30、化合物31、化合物50、化合物56、化合物69、化合物88、化合物89、化合物103、化合物112、化合物118、化合物119及化合物134用作第1脂质。
[1710]
并且，为了比较，利用专利文献6中所记载的方法合成并使用了具有以下结构的脂质(比较化合物c)。
[1711]
[化学式227]
[1712][1713]
而且，为了比较，利用专利文献3中所记载的方法合成并使用了具有以下结构的脂质(比较化合物d)。
[1714]
wo2015/95340的实施例13的化合物的结构
[1715]
[化学式228]
[1716]
[1717]
将上述第1脂质、dspc(1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine)、产品名：coatsome mc-8080；nof corporation)、胆固醇(产品名：cholesterol hp；nippon fine chemical co.,ltd.)、dmg-peg2000(产品名：sunbright(r)gm-020；nof corporation)以表1中所记载的摩尔比在乙醇中溶解成使总脂质浓度成为20mmol/l而得到了油相。
[1718]
将molecular therapy(2009)17、878页中所记载的序列的sifvii5mg溶解于无菌水1ml中，用ph4的10mmol/l乙酸缓冲液稀释成使核酸浓度成为19.7μmol/l而得到了水相。随后，使用注射器泵，用微混合器(参考日本专利第5288254号公报)混合成使水相与油相的体积比成为水相:油相＝3:1，并且用磷酸缓冲生理盐水(pbs)将混合液稀释2倍而得到了核酸脂质颗粒的分散物。
[1719]
将脂质组合物中的第1脂质的摩尔数与脂质组合物中的固醇类的摩尔数之比记载于表1。
[1720]
混合时核酸相对于全体脂质的重量比也记载于表1。
[1721]
[表1]
[1722][1723]
＜粒径的测定＞
[1724]
对脂质颗粒分散液以原液的状态测定了脂质颗粒的粒径。
[1725]
将测定结果示于表2。
[1726]
＜sirna的内含率的评价＞
[1727]
(总核酸浓度定量)
[1728]
向保持核酸的脂质颗粒60μl中添加3mol/l乙酸钠水溶液30μl和糖原9μl，随后，添加乙醇1.5ml，由此溶解脂质，仅使核酸沉淀。然后，进行离心分离，去除了上清液。风干15分钟以上之后，加入水使其再溶解，并使用nanodrop nf1000(thermo fisher scientific)测定浓度，由此对总核酸浓度进行了定量。
[1729]
(外水相中的核酸浓度的定量)
[1730]
使用quant-it ribogreen rna assay kit(thermo fisher scientific)，按照协议(protocol)进行了定量。首先，用水稀释上述试剂盒中所包含的20
×
te缓冲液，将其制成1
×
te缓冲液。另外，te表示tris/edta(乙二胺四乙酸)。为了仅对外水相的核酸进行定量，
用1
×
te缓冲液将保持核酸的脂质颗粒分散液稀释了10000倍。
[1731]
将稀释了10000倍的脂质颗粒分散液100μl放入96孔板，随后，将用1
×
te缓冲液稀释了2000倍的ribogreen试剂(上述quanti-it ribogreen rna assay kit中所包含的试剂)100μl加入到样品中，通过使用酶标仪infinit ef200(tecan)测定荧光(激发波长：485nm、荧光波长：535nm)来对外水相中的核酸浓度进行了定量。
[1732]
(内含率的计算)
[1733]
使用上述工序中所得到的总核酸浓度及外水相中的核酸浓度的定量结果，按照下述式计算出核酸脂质颗粒的核酸内含率。
[1734]
核酸内含率(％)＝(总核酸浓度-外水相中的核酸浓度)
÷
总核酸浓度
×
100
[1735]
将计算结果示于表2。
[1736]
＜factor vii(fvii)蛋白测定＞
[1737]
按照nature biotechnology(2010)28，172-176中所记载的方法进行了factor vii(fvii)蛋白测定。将c57bl6/j小鼠随机分组(n＝3)。以成为0.1mg/kg的方式尾静脉给药了在＜核酸脂质颗粒的制备＞中所制备的核酸脂质颗粒的分散液。并且，为了比较，尾静脉给药了相同体积的pbs。给药24小时之后，从后腔静脉进行采血，得到了血浆。使用所得到的血浆，使用biophen fvii assay kit(aniara)对fvii蛋白量进行了定量。
[1738]
将pbs给药组的各个体的血浆样品中的fvii量设为100％，将各个体的血浆样品中的fvii量的相对比率作为测定值。将结果示于表2。
[1739]
[表2]
[1740] 粒径(nm)内含率(％)相对fvii蛋白质量(％)比较例20165.97430比较例20168.48344比较例20365.98235比较例20473.78223实施例20179.18118实施例20276.88013实施例20376.87410
ꢀꢀꢀꢀ
比较例20566.78634比较例20666.28223实施例20473.38116
ꢀꢀꢀꢀ
实施例20581.9641实施例20677.4533实施例20774.5645实施例20873.2563实施例20974.6744实施例21081.76214实施例21172.5654
microrna加尾法逆转录试剂盒)(applied biosystems,4366597)、factorvii逆转录引物(applied biosystems)进行了逆转录。将逆转录的样品使用taqman mgb基因表达试剂盒(applied biosystems,4324036)、taqman universal pcr master mix,no amperase ung(applied biosystems,4364341)并通过real-time pcr进行了定量。
[1758]
将测定结果示于表4。
[1759]
[表4]
[1760] 粒径(nm)内含率(％)肝积比较例30172.0655.2实施例30181.9646.3比较例30277.6445.7实施例30277.4539.0比较例30374.5613.5实施例30374.5643.9
[1761]
相较于比较例的核酸脂质组合物，本发明的核酸脂质组合物显示出对肝脏的较强的堆积性。
[1762]
试验例3：mrna内含脂质颗粒的制备及小鼠中的报告蛋白表达率的测定
[1763]
＜epo mrna内含脂质颗粒的制备＞
[1764]
将表5中所记载的化合物、1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(产品名：coatsome(r)mc-8080；nof corporation)、l-α-磷脂酰乙醇胺(产品名：coatsome(r)mc-8181；nof corporation)、胆固醇(产品名：cholesterol hp；nippon fine chemical co.,ltd.)、1，2-二肉豆蔻酰基-rac-甘油-3-(甲基聚氧乙烯2000)(以下，dmg-peg2000)(产品名：sunbright(r)gm-020；nof corporation)，以表5中所记载的摩尔比，以总脂质浓度成为20mmol/l的方式，溶解于乙醇中而得到了油相。
[1765]
将epo mrna(产品名：cleancap fluc mrna(5mou)；trilink)利用ph4的50mmol/l柠檬酸缓冲液，以总脂质浓度相对于mrna浓度的重量比成为约16:1～64:1的方式稀释而得到了水相。随后，以水相与油相的体积比成为水相:油相＝3:1的方式，使用nanoassemblr(precision nanosystems)来进行混合，并将混合液利用磷酸缓冲生理盐水(pbs)稀释成1.5倍而得到了mrna脂质颗粒的分散液。将该分散液利用10％蔗糖水溶液并使用渗析力成套(slide-a-lyzer g2，mwco：10kd，thermo fisher scientific)来进行渗析，由此进行乙醇的去除，得到了epo mrna内含脂质颗粒。
[1766]
＜fluc mrna内含脂质颗粒的制备＞
[1767]
将表6中所记载的化合物、1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(产品名：coatsome(r)mc-8080；nof corporation)、l-α-磷脂酰乙醇胺(产品名：coatsome(r)mc-8181；nof corporation)、胆固醇(产品名：cholesterol hp；nippon fine chemical co.,ltd.)、1，2-二肉豆蔻酰基-rac-甘油-3-(甲基聚氧乙烯2000)(以下，dmg-peg2000)(产品名：sunbright(r)gm-020；nof corporation)，以表6中所记载的摩尔比，以总脂质浓度成为20mmol/l的方式，溶解于乙醇中而得到了油相。
[1768]
将fluc mrna(产品名：cleancap epo mrna(5mou)；trilink)利用ph4的50mmol/l柠檬酸缓冲液，以总脂质浓度相对于mrna浓度的重量比成为约19：1～64：1的方式稀释而得
到了水相。随后，以水相与油相的体积比成为水相:油相＝3:1的方式，使用nanoassemblr(precision nanosystems)来进行混合，并将混合液利用磷酸缓冲生理盐水(pbs)稀释成1.5倍而得到了mrna脂质颗粒的分散液。将该分散液利用10％蔗糖水溶液并使用渗析力成套(slide-a-lyzer g2，mwco：10kd，thermo fisher scientific)来进行渗析，由此进行乙醇的去除，得到了fluc mrna内含脂质颗粒。
[1769]
[表5]
[1770][1771]
[表6]
[1772][1773]
＜粒径的测定＞
[1774]
对脂质颗粒分散液，使用zeta电位
·
粒径测定系统els-z2(otsuka electronics co.,ltd.)，并利用磷酸缓冲生理盐水(pbs)稀释成10倍而测定了mrna内含脂质颗粒的粒径。将结果示于表7及表8。
[1775]
＜mrna的内含率的评价＞
[1776]
(总mrna浓度定量)
[1777]
向保持mrna的脂质颗粒30～60μl中添加3mol/l乙酸钠水溶液15～30μl和糖原4.5～9μl，随后，添加乙醇0.75～1.5ml，由此溶解脂质，仅使mrna沉淀。然后，进行离心分离，去除了上清液。风干15分钟以上之后，加入水使其再溶解，并使用nanodrop nf1000(thermo fisher scientific)测定浓度，由此对总mrna浓度进行了定量。
[1778]
(外水相中的mrna浓度的定量)
[1779]
使用quant-it ribogreen rna assay kit(thermo fisher scientific)，按照协议(protocol)进行了定量。首先，用水稀释上述试剂盒中所包含的20
×
te缓冲液，将其制成1
×
te缓冲液。另外，te表示tris/edta(乙二胺四乙酸)。为了仅对外水相的mrna进行定量，用1
×
te缓冲液将保持mrna的脂质颗粒分散液稀释了10000倍。将稀释了10000倍的脂质颗粒分散液100μl放入96孔板，随后，将用1
×
te缓冲液稀释了2000倍的ribogreen试剂(上述quanti-it ribogreen rna assay kit中所包含的试剂)100μl加入到样品中，通过使用酶标仪infinit ef200(tecan)测定荧光(激发波长：485nm、荧光波长：535nm)来对外水相中的mrna浓度进行了定量。
[1780]
(内含率的计算)
[1781]
使用上述工序中所得到的总mrna浓度及外水相中的mrna浓度的定量结果，按照下述式计算出mrna脂质颗粒的mrna内含率。将结果示于表7及表8。
[1782]
mrna内含率(％)＝(总mrna浓度-外水相中mrna浓度)
÷
总mrna浓度
×
100
[1783]
＜epo酶活性测定＞
[1784]
对c57bl/6j小鼠，以0.1mg/kg的mrna给药量静脉给药了在上述＜epo mrna内含脂质颗粒的制备＞中制备的mrna脂质颗粒的分散液。给药20～24小时之后，从后腔静脉进行采血，得到了血浆。使用所得到的血浆并使用ab119522erythropoietin(红细胞生成素)(epo)human elisa kit(人elisa试剂盒)(abcam)而定量了人epo酶活性。
[1785]
将结果示于表7。
[1786]
＜luciferase(荧光素酶)发光测定＞
[1787]
对c57bl/6j小鼠，以成为0.1mg/kg的方式，尾静脉给药了在上述＜fluc mrna内含脂质颗粒的制备＞中制备的mrna脂质颗粒的分散液。给药5小时后，向腹膜内给药150mg/kg的d-荧光素钾(fujifilm wako pure chemical corporation)，实施基于放血的安乐死措施后，提取了肝脏。使用ivis imaging system(perkinelmer)定量了其发光强度。
[1788]
将结果示于表8。表8中的luciferase[p/s]表示photons/sec(光强度)。
[1789]
[表7]
[1790] 粒径(nm)内含率(％)epo[mu/ml]比较例40165.0861100实施例401126.09162717实施例402108.09339146
ꢀꢀꢀꢀ
比较例402132.586-实施例40369.0903812实施例40485.99111202
比较例403111.390
‑ꢀꢀꢀꢀ
比较例404186.7100369实施例40570.91006222实施例40678.010029879实施例407134.010064968实施例40867.79331451实施例40959.99125468实施例41064.4934455实施例41184.1952378
ꢀꢀꢀꢀ
实施例41279.1913863实施例41386.89821632比较例40560.377852实施例41498.89740213实施例415101.59619728
[1791]
[表8]
[1792] 粒径(nm)内含率(％)luciferase[p/s]实施例501111.9573.8.e+09实施例502139.3731.3.e+09比较例50156.6911.0.e+08
ꢀꢀꢀꢀ
实施例503116.7822.9.e+09实施例50474.8854.4.e+09实施例50559.3819.0.e+08实施例50653.3759.1.e+08实施例507134.4912.9.e+09实施例50882.9891.4.e+09比较例502139.2766.9.e+08
[1793]
相较于比较例的核酸脂质组合物，本发明的核酸脂质组合物显示出较强的报告蛋白表达率的抑制活性。
[1794]
试验例4：mrna内含脂质颗粒的制备及小鼠中的报告蛋白表达率的测定
[1795]
＜核酸脂质颗粒的制备＞
[1796]
将在上述实施例中所制造的化合物107、129、135用作第1脂质。
[1797]
＜epo mrna内含脂质颗粒的制备＞
[1798]
将表9中所记载的化合物、1，2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(产品名：coatsome(r)mc-8080；nof corporation)、1,2-磷脂酰乙醇胺(产品名：coatsome(r)me-8181；nof corporation)、胆固醇(产品名：cholesterol hp；nippon fine chemical co.,ltd.)、1，2-二肉豆蔻酰基-rac-甘油-3-(甲基聚氧乙烯2000)(以下，dmg-peg2000)(产品
名：sunbright(r)gm-020；nof corporation)，以表10中所记载的摩尔比，以总脂质浓度成为12.5mmol/l的方式，溶解于乙醇中而得到了油相。
[1799]
将epo mrna(产品名：cleancap epo mrna(5mou)；trilink)利用ph4的50mmol/l柠檬酸缓冲液，以在与油相混合后总脂质与mrna的重量比成为约16:1～64:1的方式，将mrna溶解于ca缓冲液而得到了水相。随后，以水相与油相的体积比成为水相:油相＝3:1的方式，使用nanoassemblr(precision nanosystems)来进行混合，并将混合液利用磷酸缓冲生理盐水(pbs)稀释成1.5倍而得到了mrna脂质颗粒的分散液。将该分散液对包含8％蔗糖的20mmtris缓冲液，使用渗析力成套(slide-a-lyzer g2，mwco：10kd，thermo fisher scientific)进行渗析，从而去除乙醇，得到了epo mrna内含脂质颗粒。
[1800]
[表9]
[1801][1802]
＜fluc mrna内含脂质颗粒的制备＞
[1803]
将表10中所记载的化合物、1,2-磷脂酰乙醇胺(产品名：coatsome(r)me-8181；nof corporation)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(以下，dopc)(产品名：coatsome(r)mc-8181；nof corporation)、胆固醇(产品名：cholesterol hp；nippon fine chemical co.,ltd.)、1，2-二肉豆蔻酰基-rac-甘油-3-(甲基聚氧乙烯2000)(以下，dmg-peg2000)(产品名：sunbright(r)gm-020；nof corporation)，以表10中所记载的摩尔比，以总脂质浓度成为12.5mmol/l的方式，溶解于乙醇中而得到了油相。
[1804]
将fluc mrna(产品名：cleancap fluc mrna；trilink)利用ph4的50mmol/l柠檬酸缓冲液，以在与油相混合后总脂质与mrna的重量比成为约16:1～64:1的方式，将mrna溶解于ca缓冲液而得到了水相。随后，以水相与油相的体积比成为水相:油相＝3:1的方式，使用nanoassemblr(precision nanosystems)来进行混合，并将混合液利用磷酸缓冲生理盐水(pbs)稀释成1.5倍而得到了mrna脂质颗粒的分散液。将该分散液对包含8％蔗糖的20mmtris缓冲液，使用渗析力成套(slide-a-lyzer g2，mwco：10kd，thermo fisher scientific)进行渗析，从而去除乙醇，得到了fluc mrna内含脂质颗粒。
[1805]
[表10]
[1806][1807]
＜粒径的测定＞
[1808]
对脂质颗粒分散液，使用zeta电位
·
粒径测定系统els-z2(otsuka electronics co.,ltd.)，并利用磷酸缓冲生理盐水(pbs)稀释成5倍而测定了mrna内含脂质颗粒的粒径。将结果示于表11及表12。
[1809]
＜mrna的内含率的评价＞
[1810]
(总mrna浓度定量)
[1811]
向内含mrna及mrna的脂质颗粒100μl，添加甲醇900μl而溶解脂质，并使用吸光度仪(thermo fisher scientific)测定260nm的吸光度，从而定量了总mrna浓度。
[1812]
(外水相中的mrna浓度的定量)
[1813]
使用quant-it ribogreen rna assay kit(thermo fisher scientific)，按照协议(protocol)进行了定量。首先，用水稀释上述试剂盒中所包含的20
×
te缓冲液，将其制成1
×
te缓冲液。另外，te表示tris/edta(乙二胺四乙酸)。为了仅对外水相的mrna进行定量，用1
×
te缓冲液将保持mrna的脂质颗粒分散液稀释了50倍。将稀释了50倍的脂质颗粒分散液100μl放入96孔板，随后，将用1
×
te缓冲液稀释了2000倍的ribogreen试剂(上述quanti-it ribogreen rna assay kit中所包含的试剂)100μl加入到样品中，通过使用酶标仪infinite f200(tecan)测定荧光(激发波长：485nm、荧光波长：535nm)来对外水相中的mrna浓度进行了定量。
[1814]
(内含率的计算)
[1815]
使用上述工序中所得到的总mrna浓度及外水相中的mrna浓度的定量结果，按照下述式计算出mrna脂质颗粒的mrna内含率。将结果示于表11及表12。
[1816]
mrna内含率(％)＝(总mrna浓度-外水相中mrna浓度)
÷
总mrna浓度
×
100
[1817]
＜epo酶活性测定＞
[1818]
对icr小鼠，以0.1mg/kg的mrna给药量静脉给药了在上述＜epo mrna内含脂质颗粒的制备＞中制备的mrna脂质颗粒的分散液。给药6小时之后，从后腔静脉进行采血，得到了血浆。使用所得到的血浆并使用ab119522erythropoietin(epo)human elisa kit(abcam)定量了人epo酶活性。
[1819]
将结果示于表11。
[1820]
[表11]
[1821] 粒径(nm)内含率(％)epo[mu/ml]比较例60197.693.21.02.e+05实施例60188.998.12.69.e+05实施例60290.299.52.53.e+05实施例60382.599.66.49.e+05实施例604109.699.76.10.e+05实施例60590.899.63.90.e+05实施例606118.399.34.17.e+05实施例607106.297.55.30.e+05
[1822]
相较于比较例的核酸脂质组合物，本发明的核酸脂质组合物显示出较高的报告蛋白表达率。
[1823]
＜luciferase(荧光素酶)发光测定＞
[1824]
对icr小鼠的比背侧更靠股直肌内的位置，以1μg的mrna给药量单给药了在上述＜fluc mrna内含脂质颗粒的制备＞中制备的mrna脂质颗粒的分散液。给药5小时50后，向腹膜内给药150mg/kg的d-荧光素钾(fujifilm wako pure chemical corporation)，并在异氟醚气体的麻醉下，给药6小时后使用俯卧位下的ivis imaging system(perkinelmer)而测定了发光。以给药侧的下肢全部进入的方式设定roi，并利用living image software(实时图像软件)(perkinelmer)定量了发光量(photons/sec)。
[1825]
将结果示于表12。
[1826]
[表12]
[1827] 粒径(nm)内含率(％)total flux(总通量)(p/s)实施例60883.91003.79e+08实施例60983.51004.60e+08实施例61082.91001.69e+09实施例611126.498.81.08e+09实施例612114.897.51.50e+09实施例61385.999.77.74.e+08实施例61483.799.48.62.e+08实施例615148.698.57.03.e+08实施例61693.698.81.21.e+09实施例61786.698.41.08.e+09实施例618148.397.63.96.e+08
[1828]
相较于比较例的核酸脂质组合物，本发明的核酸脂质组合物显示出良好的发光。