技术特征：
1.一种用于治疗cd70+实体瘤的方法，该方法包括：(i)对患有cd70+实体瘤的人患者进行第一淋巴细胞清除治疗；以及(ii)在步骤(i)之后向该人患者施用第一剂量的基因工程化t细胞群体，其中该基因工程化t细胞群体包含表达结合cd70的嵌合抗原受体(car)、被破坏的trac基因、被破坏的β2m基因和被破坏的cd70基因的t细胞，并且其中编码该car的核苷酸序列插入该被破坏的trac基因中。2.如权利要求1所述的方法，其中步骤(i)中的该第一淋巴细胞清除治疗包括向该人患者每天静脉内共同施用30mg/m2的氟达拉滨和500mg/m2的环磷酰胺，持续三天。3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中在步骤(i)之前，该人患者不显示以下特征中的一种或多种：(a)临床状态显著恶化，(b)需要补充氧气以维持大于90％的饱和度水平，(c)不受控制的心律失常，(d)需要血管升压药支持的低血压，(e)活动性感染，以及(f)≥2级急性神经毒性。4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中在步骤(ii)之前约2-7天进行步骤(i)。5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中通过将该基因工程化t细胞群体以该第一剂量静脉内施用至该人患者来进行步骤(ii)，该第一剂量是约1x106个car
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细胞至约1x109个car
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细胞，任选地约3x107至约9x108个car
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细胞。6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中在步骤(ii)之前和在步骤(i)之后，该人患者不显示以下特征中的一种或多种：(a)活动性不受控制的感染，(b)与步骤(i)之前的临床状态相比的临床状态恶化，以及(c)≥2级急性神经毒性。7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，该方法进一步包括(iii)在步骤(ii)之后监测该人患者的急性毒性的发展。8.如权利要求7所述的方法，其中急性毒性包括细胞因子释放综合征(crs)、神经毒性、肿瘤溶解综合征、gvhd、中靶脱肿瘤毒性和不受控制的t细胞增殖，任选地其中该神经毒性是免疫效应细胞相关神经毒性(icans)，并且任选地其中该中靶脱肿瘤毒性包括该基因工程化t细胞群体针对激活的t淋巴细胞、b淋巴细胞、树突状细胞、成骨细胞和/或肾小管样上皮细胞的活性。9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，该方法进一步包括(iv)对该人患者进行第二淋巴细胞清除治疗，以及(v)向该人患者施用第二剂量的该基因工程化t细胞群体，其中任选地该第二剂量在该第一剂量之后约8周至约2年、任选地约8-10周或约14-18周施用至该人患者。10.如权利要求9所述的方法，该方法进一步包括(vi)对该人患者进行第三淋巴细胞清除治疗，以及(vii)向该人患者施用第三剂量的该基因工程化t细胞群体，其中任选地该第三剂量是在该第二剂量之后约8周至约2年、任选地约8-10周或约14-18周。
11.如权利要求9或权利要求10所述的方法，其中该人患者在步骤(ii)之后和/或在步骤(v)之后不显示以下中的一种或多种：(a)剂量限制性毒性(dlt)，(b)在步骤(ii)和/或步骤(v)后72小时内未消退至≤2级的≥3级crs，(c)>1级gvhd，(d)≥3级icans，(e)活动性感染，(f)血流动力学不稳定，以及(g)器官功能障碍。12.如权利要求9-11中任一项所述的方法，其中步骤(iv)中的该第二淋巴细胞清除治疗、步骤(vi)中的该第三淋巴细胞清除治疗、或两者包括向该人患者每天静脉内共同施用30mg/m2的氟达拉滨和500mg/m2的环磷酰胺，持续1-3天。13.如权利要求9-12中任一项所述的方法，其中在步骤(iv)之后2-7天进行步骤(v)和/或其中在步骤(vi)之后2-7天进行步骤(vii)。14.如权利要求9-13中任一项所述的方法，其中通过将该基因工程化t细胞群体以该第二剂量和/或该第三剂量静脉内施用至该人患者来进行步骤(v)和/或步骤(vii)，该第二剂量和/或该第三剂量是约1x106个car
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细胞至约1x109个car
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细胞。15.如权利要求14所述的方法，其中该第二剂量和/或该第三剂量是约3x107至约9x108个car+细胞。16.如权利要求9-15中任一项所述的方法，其中该人患者在适用时的步骤(ii)和步骤(v)之后实现部分应答(pr)或完全应答(cr)，并且随后在2年内进展。17.如权利要求9-15中任一项所述的方法，其中该人患者在适用时的步骤(ii)和步骤(v)之后实现pr或疾病稳定(sd)。18.如权利要求9-15中任一项所述的方法，其中该人患者在适用时的步骤(v)和步骤(vii)之前复发时被确认患有cd70
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实体瘤。19.如权利要求9-18中任一项所述的方法，其中该人患者显示出疾病稳定或疾病进展。20.如权利要求1-19中任一项所述的方法，其中该基因工程化t细胞群体的该第一剂量、该第二剂量和/或该第三剂量是1x106个car
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细胞、3x107个car
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细胞、1x108个car
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细胞或1x109个car
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细胞，任选地其中该基因工程化t细胞群体的该第一剂量、该第二剂量和/或该第三剂量是1.5x108个car
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细胞、4.5x108个car
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细胞、6x108个car
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细胞、7.5x108个car
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细胞或9x108个car
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细胞。21.如权利要求9-20中任一项所述的方法，其中该基因工程化t细胞群体的该第一剂量与该基因工程化t细胞群体的该第二和/或第三剂量相同。22.如权利要求9-20中任一项所述的方法，其中该基因工程化t细胞群体的该第一剂量低于该基因工程化t细胞群体的该第二和/或第三剂量。23.如权利要求1-22中任一项所述的方法，其中该人患者是成人。24.如权利要求1-23中任一项所述的方法，其中该人患者已经受过先前抗癌疗法。25.如权利要求1-23中任一项所述的方法，其中该cd70+实体瘤是复发性或难治性的。26.如权利要求1-25中任一项所述的方法，其中该人患者患有cd70+肿瘤细胞。
27.如权利要求26所述的方法，其中该人患者在从该人患者获得的生物样品中具有cd70+肿瘤细胞。28.如权利要求26或权利要求27所述的方法，其中该方法进一步包括在步骤(i)之前，鉴定具有cd70+肿瘤细胞的人患者。29.如权利要求1-28中任一项所述的方法，其中对该人患者进行抗细胞因子疗法。30.如权利要求1-29中任一项所述的方法，其中在用该基因工程化t细胞群体治疗之后对该人患者进行自体或同种异体造血干细胞移植。31.如权利要求1-30中任一项所述的方法，其中该人患者具有以下特征中的一种或多种：(a)卡诺夫斯基性能状态(kps)≥80％，以及(b)足够的器官功能，(c)未接受用先前抗cd70或过继t细胞或nk细胞疗法的治疗，(d)没有对淋巴细胞清除疗法的禁忌症，(e)没有恶性肿瘤的中枢神经系统(cns)表现，(f)没有先前中枢神经系统障碍，(g)没有胸膜积液或腹水或心包输注，(h)没有不稳定型心绞痛、心律失常和/或心肌梗塞，(i)没有糖尿病，(j)没有不受控制的感染，(k)没有需要免疫抑制疗法的免疫缺陷障碍或自身免疫性障碍，(l)未接受活疫苗或草药，以及(m)未接受实体器官移植或骨髓移植。32.如权利要求1-31中任一项所述的方法，其中在该基因工程化t细胞群体的每次施用之后，监测该人患者的毒性的发展至少28天。33.如权利要求32所述的方法，其中如果观察到毒性的发展，则对该人患者进行毒性管理。34.如权利要求1-33中任一项所述的方法，其中该结合cd70的car包含细胞外结构域、cd8跨膜结构域、4-1bb共刺激结构域和cd3ζ细胞质信号传导结构域，并且其中该细胞外结构域是结合cd70的单链抗体片段(scfv)。35.如权利要求34所述的方法，其中该scfv包含含有seq id no:49的重链可变结构域(v
h
)和含有seq id no:50的轻链可变结构域(v
l
)。36.如权利要求35所述的方法，其中该scfv包含seq id no:48。37.如权利要求34-36中任一项所述的方法，其中该car包含seq id no:46。38.如权利要求1-37中任一项所述的方法，其中该被破坏的trac基因通过crispr/cas9基因编辑系统产生，该基因编辑系统包括含有seq id no:8或9的间隔子序列的指导rna。39.如权利要求38所述的方法，其中该被破坏的trac基因具有由seq id no:8或9的间隔子序列靶向的区域或其一部分的缺失。40.如权利要求1-39中任一项所述的方法，其中该被破坏的β2m基因通过crispr/cas9基因编辑系统产生，该基因编辑系统包括含有seq id no:12或13的间隔子序列的指导rna。
41.如权利要求1-40中任一项所述的方法，其中该被破坏的cd70基因通过crispr/cas9基因编辑系统产生，该基因编辑系统包括含有seq id no:4或5的间隔子序列的指导rna。42.如权利要求1-41中任一项所述的方法，其中该cd70+实体瘤是肺癌、胃癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和/或其组合。
技术总结
本披露的方面涉及包含表达结合CD70的嵌合抗原受体(CAR)的基因工程化T细胞群体的组合物、和使用此类组合物用于治疗CD70+实体瘤的方法。的方法。的方法。
技术研发人员：J.A.特雷特 M-L.德奎安特 M.威尔
受保护的技术使用者：克里斯珀医疗股份公司
技术研发日：2020.11.13
技术公布日：2022/8/2