大黄-3颗粒及其制备工艺的制作方法

大黄
‑
3颗粒及其制备工艺
技术领域：
1.本发明涉及蒙药颗粒剂制备技术领域，特别是涉及一种大黄
‑
3颗粒及其制备工艺。


背景技术：
：
2.大黄
‑
3汤由大黄、诃子及碱面(由于现代药物饮片市场中无法获取天然碱，现代药企或医院制备该药物时多数使用碱面代替天然碱)三味药组成，有治疗便秘，疏通肠道和治疗闭经等作用，口服，一次1.5g～3g，一日1次～3次，水煎服，孕妇慎用。方中大黄为缓性泻下药材，蒙古名始载于《智慧之源》，其药用始载于《医经八支》。大黄味苦、酸，性凉、稀、轻、动，主要有泻下、抗菌、止血、利胆、抗肿瘤、抗凝血等药理作用。方中诃子为“蒙药之王”，味涩，性平，祛邪、解毒、调理体素等作用，主治赫依病，希拉病，巴达干病，赫依、希拉、巴达干合并症和聚合症，各种毒症，它主要有抗氧化、抗菌、治疗糖尿病、肝保护、抗炎、抗诱变、抗增殖、辐射保护、心脏保护、抗关节炎、抗过敏、促进胃肠运动以及伤口愈合等多种药理和药用活性，可治疗消化系统疾病、泌尿系统疾病、糖尿病、皮肤病、心脏病、不规则发热、便秘、溃疡、呕吐、绞痛、痔疮；诃子的药理作用主要归因于各种植物化学物质的存在，如主要化学成分包括鞣质类、酚酸类、三萜类、黄酮类；其中属于酚类的单宁类含量丰富，约32％
‑
34％。方中碱面主含碳酸钠的分枝状结晶，质较轻；无臭，味咸苦，微甘；有消化、消滞、泻下、驱虫、防腐、解毒、祛巴达干、具有防止大便干燥之功效。
3.但作为大黄
‑
3的传统剂型
‑
汤剂采用纯水煎煮，存在煎煮麻烦、量大难喝、质量难控等不足。需临用时新制，久置易发霉变质、不便携带；服用容积大，口味难以接受，尤其是儿童难以服用；患者自己煎煮不易提取完全，再加上现代人的生活方式与生活节奏与古代大为不同，将大黄
‑
3汤改制剂型使其更加贴合人们的生活已经成为一种必要手段。


技术实现要素：
：
4.本发明的第一个目的在于通过改变蒙药大黄
‑
3汤的剂型，突破原汤剂量大、难喝、质量难控、患者不易提取完全等弊端，提供一种药材有效成分提取完全，药材利用率高，制剂稳定，服用、携带、贮存方便的大黄
‑
3颗粒的制备工艺。
5.本发明的第二个目的在于通过改变蒙药大黄
‑
3汤的剂型，突破原汤剂量大、难喝、质量难控、患者不易提取完全等弊端，提供一种药材有效成分提取完全，药材利用率高，制剂稳定，服用、携带、贮存方便的大黄
‑
3颗粒。
6.本发明的第一个目的由如下技术方案实施：大黄
‑
3颗粒的制备工艺，其包括如下步骤：(1)水提制备得到大黄
‑
3提取液；(2)大黄
‑
3提取液浓缩干燥制备得到药物提取粉；(3)药物提取粉制粒得到大黄
‑
3颗粒；其中，
7.(1)水提制备得到大黄
‑
3提取液：按大黄
‑
3组方质量比：大黄：诃子：碱面＝1:1:1，分别称取大黄、诃子和碱面，将称取的大黄和诃子粉碎后过10目筛，然后将过筛后的大黄和诃子混合后加水提取1
‑
3次，每次提取加8
‑
16倍大黄和诃子总重量的水，加热沸腾回流提取
10
‑
60min，初次提取前浸泡0.5
‑
1.5h，将每次提取后过滤得到的滤液混合，并在混合后滤液中加入称取的碱面，制备得到大黄
‑
3提取液；由于现代药物饮片市场中无法获取天然碱，现代药企或医院制备该药物时多数使用碱面代替天然碱，故本发明中使用了碱面。
8.(2)大黄
‑
3提取液浓缩干燥制备得到药物提取粉：将大黄
‑
3提取液在60
‑
80℃温度下蒸发浓缩30
‑
60min，然后干燥制得药物提取粉；
9.(3)药物提取粉制粒得到大黄
‑
3颗粒：采用湿法制粒法制备得到大黄
‑
3颗粒。
10.优选的，所述步骤(1)中，提取2次，每次提取加8倍大黄和诃子总重量的水，加热沸腾回流提取60min，初次提取前浸泡1h。
11.优选的，所述步骤(2)中，将大黄
‑
3提取液在60℃温度下蒸发浓缩30min。
12.优选的，所述步骤(1)中采用160目筛过滤得滤液。
13.优选的，所述步骤(3)中，湿法制粒法具体步骤为：将药物提取粉与辅料按比例混匀后过60目筛，然后加入1％的pvp(聚乙烯吡咯烷酮)混匀至握起可成团，撒手可散开的状态后进行制粒，制备得到湿品大黄
‑
3颗粒；将湿品大黄
‑
3颗粒在室内20
‑
28℃下晾干1
‑
5小时，晾干时间根据药粉的量确定，再放进60℃的烘干箱内干燥至颗粒含水量达标，制备得到大黄
‑
3颗粒。
14.优选的，所述辅料为糊精和淀粉，所述药物提取粉、所述糊精和所述淀粉的质量比为95:3.5:1.5。
15.本发明的第二个目的由如下技术方案实施：利用大黄
‑
3颗粒的制备工艺制备得到的大黄
‑
3颗粒。
16.本发明的优点：本发明通过采用并优化传统汤剂的提取工艺，将大黄
‑
3汤剂改制为颗粒剂，一方面，能够将方剂中药物有效成分充分提取，解决了提取不完全问题，提高药材利用率；另一方面，制成颗粒剂克服了煎煮的麻烦，方便服用。本发明制备的颗粒剂型与传统汤剂相比较，药效保持一致，性质更稳定，服用、携带、贮存方便，颗粒剂还可以适当加入一些添加剂，使口味更容易被接受，能更好的发挥传统蒙药的优点，有效的避过缺点。
附图说明：
17.图1为专属性试验中各成分hplc色谱图(图中1.芦荟大黄素；2.大黄酸；3.大黄素；4.大黄酚；5.大黄素甲醚)。
18.图2分别为芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的标准曲线示图。
19.图3精密度试验测试结果(图中1.芦荟大黄素；2.大黄酸；3.大黄素；4.大黄酚；5.大黄素甲醚)。
20.图4稳定性试验测试结果(图中1.芦荟大黄素；2.大黄酸；3.大黄素；4.大黄酚；5.大黄素甲醚)。
21.图5稳定性试验测试结果(图中1.芦荟大黄素；2.大黄酸；3.大黄素；4.大黄酚；5.大黄素甲醚)。
22.图6为制粒试验得到两种颗粒图片，左为(1)号93％的乙醇，右为(2)号1％的pvp。
23.图7为制粒试验得到两种颗粒的溶化性示图左为(1)号93％的乙醇，右为(2)号1％的pvp。
24.图8为试验(6)中辅料与粘合剂空白对照组hplc色谱图。
具体实施方式：
25.实施例1：大黄
‑
3颗粒的制备工艺，其包括如下步骤：(1)水提制备得到大黄
‑
3提取液；(2)大黄
‑
3提取液浓缩干燥制备得到药物提取粉；(3)药物提取粉制粒得到大黄
‑
3颗粒；其中，
26.(1)水提制备得到大黄
‑
3提取液：按大黄
‑
3组方质量比：大黄：诃子：碱面＝1:1:1，分别称取大黄、诃子和碱面，将称取的大黄和诃子粉碎后过10目筛，然后将过筛后的大黄和诃子混合后加水提取1
‑
3次，每次提取加8
‑
16倍大黄和诃子总重量的水，加热沸腾回流提取10
‑
60min，初次提取前浸泡0.5
‑
1.5h，将每次提取后过滤得到的滤液混合，并在混合后滤液中加入称取的碱面，制备得到大黄
‑
3提取液；
27.(2)大黄
‑
3提取液浓缩干燥制备得到药物提取粉：将大黄
‑
3提取液在60
‑
80℃温度下蒸发浓缩30
‑
60min，然后干燥制得药物提取粉；本实施例采用的蒸发浓缩设备为旋转蒸发器；采用干燥设备为喷雾干燥机。
28.(3)药物提取粉制粒得到大黄
‑
3颗粒：采用湿法制粒法制备得到大黄
‑
3颗粒。湿法制粒法具体步骤为：将药物提取粉与辅料按比例混匀后过60目筛，然后加入1％的pvp(聚乙烯吡咯烷酮)混匀至握起可成团，撒手可散开的状态后进行制粒，制备得到湿品大黄
‑
3颗粒；将湿品大黄
‑
3颗粒在室内20
‑
28℃下晾干1
‑
5小时，晾干时间根据药粉的量确定，再放进60℃的烘干箱内干燥至颗粒含水量达标，制备得到大黄
‑
3颗粒。其中，辅料为糊精和淀粉，药物提取粉、糊精和淀粉的质量比为95:3.5:1.5。
29.对于传统药物，在药效物质基础不明确的情况下，一般采取水提法进行提取，水提法以水为提取溶媒，将药材与水混合加热煮沸获得提取液，并重复进行若干次，水提法能较大程度的保证提取完全，保证提取液与汤剂基本一致，从而使药效保持一致。水煎提取法具有操作简单、溶剂成本价格低廉、提取较为完全等优点。故本发明采取纯水提取法制备提取液。
30.按本实施例方法制备得到的大黄
‑
3颗粒药效与大黄
‑
3汤剂保持一致，且药效稳定，服用、携带、贮存方便。
31.实施例2：大黄
‑
3颗粒的制备工艺，其包括如下步骤：(1)水提制备得到大黄
‑
3提取液；(2)大黄
‑
3提取液浓缩干燥制备得到药物提取粉；(3)药物提取粉制粒得到大黄
‑
3颗粒；其中，
32.(1)水提制备得到大黄
‑
3提取液：按大黄
‑
3组方质量比：大黄：诃子：碱面＝1:1:1，分别称取大黄、诃子和碱面，将称取的大黄和诃子粉碎后过10目筛，然后将过筛后的大黄和诃子混合后加水提取2次，每次提取加8倍大黄和诃子总重量的水，加热沸腾回流提取60min，初次提取前浸泡1h，将每次提取后过滤得到的滤液混合，并在混合后滤液中加入称取的碱面，制备得到大黄
‑
3提取液；
33.(2)大黄
‑
3提取液浓缩干燥制备得到药物提取粉：将大黄
‑
3提取液在60℃温度下蒸发浓缩30min，然后干燥制得药物提取粉；本实施例采用的蒸发浓缩设备为旋转蒸发器；采用干燥设备为喷雾干燥机。
34.(3)药物提取粉制粒得到大黄
‑
3颗粒：采用湿法制粒法制备得到大黄
‑
3颗粒。湿法制粒法具体步骤为：将药物提取粉与辅料按比例混匀后过60目筛，然后加入1％的pvp(聚乙烯吡咯烷酮)混匀至握起可成团，撒手可散开的状态后进行制粒，制备得到湿品大黄
‑
3颗
粒；将湿品大黄
‑
3颗粒在室内20
‑
28℃下晾干1
‑
5小时，晾干时间根据药粉的量确定，再放进60℃的烘干箱内干燥至颗粒含水量达标，制备得到大黄
‑
3颗粒。其中，辅料为糊精和淀粉，药物提取粉、糊精和淀粉的质量比为95:3.5:1.5。
35.按本实施例方法制备得到的大黄
‑
3颗粒药效与大黄
‑
3汤剂保持一致，且药效稳定，服用、携带、贮存方便。
36.实施例3：大黄具多类药效活性成分，其中以蒽醌类、蒽酮类、鞣质、芪类和多糖报道较多，其中蒽类衍生物主要包括大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素和土大黄素等有效成分。其中，蒽醌类化合物药理作用广泛，如泻下、抗菌、抗病毒、抗癌、明目、促智、抗衰老、抗诱变、抗紫外线、保肝利胆等。这些成分中大黄素能够促进胃肠蠕动,其机制可能与升高血液中胃泌素和胃动素水平、胃肠激素水平、降低生长抑素含量、抑制小肠粘膜na
+
‑
k
+
‑
atp酶活性、增加肠道积液、提高结肠中水通道蛋白aqp3的表达水平等众多机制有关。大黄中蒽醌类的药理作用与大黄
‑
3汤的缓泻作用息息相关，故本实验选择总蒽醌含量以及干膏得率作为大黄
‑
3颗粒制备工艺提取效果的对比参数。
37.对比试验设计如下：
38.(1)试验仪器设备：高效液相色谱仪、旋转蒸发器、冷冻干燥机、电热套、圆底烧瓶、纱布、烧杯、超纯水机、微孔滤膜、抽滤装置、有机滤膜、精密电子秤、量筒。
39.(2)试验试剂：大黄素标准品、没食子酸标准品、甲醇、磷酸溶液。
40.(3)确定大黄
‑
3颗粒中总蒽醌含量的检测方法并做方法学考察：
41.①
色谱条件：总蒽醌含有量测定方法采用2020版《中国药典》waters色谱柱(4.6mm
×
250mm，5μm)；以甲醇：0.1％磷酸溶液(85：15)为流动相；检测波长为254nm；柱温30℃；体积流量1ml/min；进样量为10μl。
42.②
供试品溶液制备：取供试品粉末(过四号筛)约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加8％盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
43.③
对照品溶液制备：精密称取各对照品适量，加入甲醇制成每ml分别含芦荟大黄素1.4μg、大黄酸2.75μg、大黄素0.5μg、大黄酚5.5μg和大黄素甲醚3.5μg的溶液，即得。
44.④
阴性对照品制备：按处方比例去除大黄
‑
3方剂中的大黄，按
“②”
项下方法制备阴性对照品溶液.在
“①”
项色谱条件下进样测定，结果见图1可知，方法专属性良好。图1中，1为芦荟大黄素；2为大黄酸；3为大黄素；4为大黄酚；5为大黄素甲醚。
45.⑤
线性关系考察：取
“③”
项下对照品溶液.在
“①”
项色谱条件下进样测定。以溶液质量浓度为横坐标(x)，峰面积积分值为纵坐标(y)进行回归，得芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的方程分别为y＝4,782,603.1750x
‑
4,510.3556(r2＝0.9995)、y＝2,280,531.7500x+660.7399(r2＝0.9998)、y＝2,741,113.4710x
‑
232.8340(r2＝0.9998)、y＝3,401,413.952x
‑
3,878.0111(r2＝0.9999)、y＝4,667,871.9380x
‑
18,203.0823(r2＝0.9994)。分别在0.0025～0.0375、0.0014～0.0504、0.0016～0.0304、
0.0038～0.057、0.0075～0.24μg/μl范围内线性关系良好。
46.⑥
精密度试验：取一供试品在
“①”
项色谱条件下各进样测定6次，测得芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚峰面积rsd分别为0.48％、1.26％、1.29％、1.30％、1.75％表明仪器精密度良好结果见图3。
47.⑦
稳定性试验：取同一批冻干粉，按
“②”
项下方法制备供试品溶液，在
“①”
项色谱条件下于0、2、4、6、8、12h进样测定，测得芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚含有量rsd分别为0.97％、1.64％、1.47％、1.76％、1.77％，表明溶液在12h内稳定性良好，结果见图4。
48.⑧
重复性试验：同一批冻干粉，按
“②”
项下方法制备6份供试品溶液，在
“①”
项色谱条件下进样测定，测得芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚含有量rsd分别为1.71％、1.61％、1.72％、1.04％、0.82％表明该方法重复性良好，结果见图5。
49.⑨
加样回收率试验：分别取同一批冻干粉0.3g，加入相当于提取粉中成分含有量50％、100％、150％的对照品后，按
“②”
项下方法制备，在
“①”
项色谱条件下进样测定，计算回收率。结果测得芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚平均加样回收率分别为95.68％、103.49％、99.46％、98.59％及101.83％，rsd分别为0.75、0.82、0.95、0.51及0.81。
50.图2分别为芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的标准曲线示图。
51.(4)试验方案
52.1)正交试验1：各组取用5个处方药量，分别设置加水倍数、提取时间、提取次数、浸泡时间四个因素进行正交试验，试验方案设计如表1
‑
2，得到9种大黄
‑
3提取液，将大黄
‑
3提取液用纱布进行过滤，弃去药渣并用旋转蒸发器在60℃温度下蒸发浓缩30min得浸膏，再用冷冻干燥机将所得浸膏进行干燥，得到干膏。分别测量9种干膏中的总蒽醌含量，算出干膏得率。以权重系数y，yi＝(x1i/x1max
×
0.5+x2i/x2max
×
0.5)
×
100为每个试验结果进行打分，结果见表3。
53.表1.水提工艺各因素水平安排l9(34)表
[0054][0055]
表2.水提工艺各因素水平条件安排表
[0056][0057]
表3.正交试验1结果
[0058][0059]
2)正交试验2：各组取用5个处方药量的大黄及诃子，分别设置加水倍数、提取时间、提取次数、浸泡时间四个因素进行正交试验，试验方案设计与正交试验1相同，得到9种提取液，在9种提取液中分别按大黄
‑
3处方中比例添加碱面，得到9种大黄
‑
3提取液，将大黄
‑
3提取液用纱布进行过滤，弃去药渣并用旋转蒸发器在60℃温度下蒸发浓缩30min得浸膏，再用冷冻干燥机将所得浸膏进行干燥，得到干膏。分别测量9种干膏中的总蒽醌含量，算出干膏得率。以权重系数y，yi＝(x1i/x1max
×
0.5+x2i/x2max
×
0.5)
×
100为每个试验结果进行打分，结果见表4。
[0060]
表4.正交试验2结果
[0061][0062]
对表3和表4两组数据进行比较得出两组正交试验结果之间有显著性差异，如表5
‑
6，且正交试验2结果明显优于正交试验1结果。从正交试验2结果可看出a因素的k2、b因素的k1、c因素的k3及d因素的k2在三个水平中最高，且r值的顺序为a>c>b>d，所以最终筛选出的条件为a2c3b1d2，即加入8倍水，浸泡1h，提取1h，提取次数2次，将这个结果与正交试验2中的最高评分的结果进行比较，得出以k值筛选出的结果比正交试验所得最高评分结果更好，故选择该结果。对此结果进行验证结果见表7，结果证明，筛选出的结果干膏率与总蒽醌含量都符合正交结果，且相对稳定。
[0063]
表5.组统计
[0064][0065]
表6.独立样本检测
[0066]
[0067]
表7 验证正交试验结果
[0068][0069][0070]
3)浓缩工艺试验：在正交试验2最优结果(即水提步骤中加入8倍水，浸泡1h，提取1h，2次)的基础上进行浓缩试验，试验条件安排见表8与表9。
[0071]
表8 浓缩工艺各因素水平安排
[0072][0073]
表9 浓缩工艺各因素水平条件安排表
[0074][0075]
从浓缩试验结果(表10)可看出浓缩温度在60℃，浓缩时间为30min的时候，干膏率与蒽醌含量最高。
[0076]
表10 浓缩试验结果
[0077][0078]
4)制粒工艺：在提取工艺与浓缩工艺的基础上进行制粒。制粒时使用湿法制粒法，考虑到本方提取时的干膏率偏高选取药粉与辅料的比例为，药提粉(过60目筛)：糊精：淀粉
＝95:3.5:1.5，粘合剂选取93％的乙醇与1％pvp，进行平行试验进行对比试验。
[0079]
制粒方法:事先将所选辅料(糊精，淀粉)烘干好，取药物提取粉94.46g，加入3.5g糊精，1.5g淀粉混匀过60目筛，分为两份。在一份中加入93％的乙醇(1)，另一份中加入1％的pvp(2)，揉匀至握起可成团，撒手可散开的状态后进行制粒。在室内温度(20
‑
28℃)下晾干1
‑
5小时(根据药粉的量)，再放进60℃的烘干箱内干燥至颗粒含水量达标。结果：如图3所示，显然1％pvp粘合的细粉更少。
[0080]
对所制颗粒进行检查对比：
[0081]ⅰ.性状：应是干燥、均匀、色泽一致、无软化结块。
[0082]
结果：(1)有少许软化结块(2)符合标准
[0083]ⅱ.粒度：即取供试品30g，称定重量，置规定的摇筛中，保持水平状态过筛，左右往返，边筛动边轻叩3分钟，称定不能通过一号筛和能通过五号筛的颗粒及粉末重量，计算百分比(不超过总重15％)。由于颗粒量少本次选取了28g做试验，结果：(1)100％(是指1号样样品全部通过五号筛)(2)11.69％(是指2号样样品11.69％通过五号筛)。
[0084]ⅲ.水分测定：取供试品2
‑
5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，精密称定，打开瓶盖在100～105℃干燥5h，将瓶盖盖好，移植干燥器中，冷却30min，精密称定，再在上述温度干燥1h冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止，根据减失的重量，计算供试品中含水量(％)。
[0085]
结果：(1)4.22％(2)4.26％
[0086]ⅳ.溶化性测定：称取供试品10g，加热水200ml，搅拌年5min，立即观察是否全部溶化，允许有轻微浑浊。结果：均能融化，如图4所示。
[0087]
从两组试验结果对比可知试验(2)明显优于试验(1)，故选取试验(2)的方法进行制粒。
[0088]
5)用药量确定：取蒙药大黄
‑
3提取粉212g(从360g生药提取所得)，加入7.81g糊精，3.35g淀粉，按照上述制粒方法(2)进行制粒，得到214g颗粒(200812)，故按生药粉一次用量5g计算，该颗粒的一次用量约为3g。
[0089]
6)总蒽醌含量测定：按照上述总蒽醌含量测定方法对加入的辅料粘合剂(空白对照)与200812颗粒进行提取测定总蒽醌含量。如图5所示，可知所加入辅料与粘合剂对该测定方法无影响。该颗粒总蒽醌含量为1.76mg/g，按含量不低于80％计算，颗粒总蒽醌含量至少1.408mg/g，见表11。
[0090]
表11 200812颗粒蒽醌含量
[0091][0092]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。