复合植物提取物及其制备方法、应用与流程

1.本发明涉及一种复合植物提取物及其制备方法、应用。


背景技术：

2.随着社会的发展、人们的生活水平不断提高，环境污染也随之加重，来自工作、生活等各方面的社会压力也越来越大，再加上一些高碱性或/和强氧化的外用制剂在临床应用上也越来越多，例如双氧水消毒清创剂、脱毛剂、染发剂等，伴随而来的各类皮肤问题困扰着人们，特别是过敏、瘙痒等皮肤问题，更是让人们苦不堪言。人们对安全有效的天然抗过敏、止痒产品的需求越来越大。
3.人类皮肤病的主要类型之一就是，来自外源或内源的物质，刺激肥大细胞，进而产生组织胺作用于神经末梢，从而产生红斑、丘疹、瘙痒、疼痛、过敏等症状。对此，一方面要抑制组织胺的释放，另一方面要增加皮肤对组织胺的耐受，从而达到抗过敏、止痒的目的。
4.现有的抗过敏、止痒产品，止痒效果不明显，难以实现抑制组织胺释放或者提高皮肤对组织胺的耐受，或者现有部分皮肤外用产品中由于添加了对皮肤刺激性大的成分但抗刺激性不足，导致皮肤出现各类刺激性症状。


技术实现要素：

5.本发明要解决的技术问题是为了克服现有技术中抗过敏、止痒等产品抗敏、止痒效果有待提升的缺陷，提供一种复合植物提取物及其制备方法、应用。本发明的制备方法制得的复合植物提取物安全无刺激，具备良好的抗过敏、止痒效果。
6.本发明是通过下述技术方案来解决上述技术问题：
7.本发明提供一种复合植物提取物的制备方法，其包括如下步骤：
8.以质量份数计，所述复合植物提取物的原料包括：人参25～70份、楤木25～70份和野菊花5～20份；
9.步骤(1)：将人参和楤木用碱性乙醇溶液提取，得人参
‑
楤木提取物；
10.步骤(2)：将野菊花采用水蒸气蒸馏法提取，得野菊花提取物；
11.步骤(3)：将所述人参
‑
楤木提取物和所述野菊花提取物混合，即得，
12.其中，所述步骤(1)和步骤(2)不分先后。
13.本发明中，所述人参
‑
楤木提取物是指将人参和楤木一起用碱性乙醇溶液提取得到的提取物。
14.本发明中，所述人参(panax ginseng c.a.mey.)为五加科植物人参属多年生草本。所述人参可为常规市售可得的人参，例如选自人参干燥根。
15.本发明中，所述楤木(aralia chinensis l.)为五加科楤木属植物，可为常规市售可得的楤木，例如选自楤木的干燥根皮和/或茎皮。
16.本发明中，所述野菊花(ghrysanthemumindicum l.)为菊科植物，可为常规市售可得的野菊花，例如选自野菊花的干燥头状花序。
17.本发明中，所述人参和所述楤木的质量之和与所述野菊花的质量比较佳地为(4
‑
19)：1，例如4：1、9：1或19：1。
18.本发明中，所述人参和所述楤木的质量比较佳地为1：(0.2
‑
5)，例如1：1、1：5或5：1。
19.本发明中，所述人参的质量份数较佳地为35～55份，例如40或45份。
20.本发明中，所述楤木的质量份数较佳地为35～55份，例如40或45份。
21.本发明中，所述野菊花的质量份数较佳地为5～15份，例如5～10份。
22.本发明中，较佳地，以质量份数计，所述复合植物提取物的原料由人参25～70份、楤木25～70份和野菊花5～20份组成。
23.本发明中，较佳地，以质量份数计，所述复合植物提取物的原料包括：人参35～45份、楤木45～55份和野菊花10～15份。更佳地，以质量份数计，所述复合植物提取物的原料由人参35～45份、楤木45～55份和野菊花10～15份组成。
24.在本发明的一个较佳实施方案中，以质量份数计，所述复合植物提取物的原料较佳地包括：人参25份、楤木70份和野菊花5份。
25.在本发明的一个较佳实施方案中，以质量份数计，所述复合植物提取物的原料较佳地包括：人参70份、楤木25份和野菊花5份。
26.在本发明的一个较佳实施方案中，以质量份数计，所述复合植物提取物的原料较佳地包括：人参40份、楤木40份和野菊花20份。
27.在本发明的一个较佳实施方案中，以质量份数计，所述复合植物提取物的原料较佳地包括：人参45份、楤木45份和野菊花10份。
28.本发明中，按本领域常规，所述人参、所述楤木和所述野菊花可为经过粉碎后得到的人参、楤木和野菊花，所述人参、所述楤木和所述野菊花的粒径可为10目～60目，例如为30目。
29.步骤(1)中，所述碱性乙醇溶液的质量较佳地为所述人参和所述楤木的质量之和的20～30倍，例如25或26.7倍。
30.步骤(1)中，所述碱性乙醇溶液可按本领域常规包括碱性物质、乙醇和水。
31.其中，所述碱性物质可为本领域常规的碱性物质，例如氢氧化钠、氢氧化钾、三乙醇胺或浓氨水。
32.步骤(1)中，所述碱性乙醇溶液的ph较佳地为10～12，例如11。所述碱性乙醇溶液的ph由所述碱性物质调节。
33.步骤(1)中，所述碱性乙醇溶液中乙醇的体积百分比较佳地为30～70％，例如50％。
34.步骤(1)中，所述提取的方式较佳地为循环渗滤法提取或煎煮法提取，更佳地为循环渗滤法提取。在提取过程中，所述人参和楤木在碱性乙醇溶液中发生水解反应。
35.其中，所述循环渗滤法提取的操作一般可包括如下步骤：将待提取物加入渗滤柱中，渗滤液保持一定流速，在一定温度和时间下进行循环渗滤。
36.其中，当所述步骤(1)中的所述提取为循环渗滤法提取，提取的温度较佳地为70～90℃，例如80℃；提取的时间较佳地为1～3h，例如2h。
37.步骤(1)中，在所述提取获得初提液之后，还可按照本领域常规包括陈化、过滤、去
除溶剂的步骤。
38.其中，所述陈化的操作可为本领域常规的陈化的操作，较佳地包括如下步骤：在所述初提液中加入絮凝剂，搅拌，静置。所述絮凝剂可为本领域常规的絮凝剂，所述絮凝剂的质量较佳地为所述初提液的质量的0.1～5％，例如2％或2.5％。所述搅拌的时间较佳地为10min。所述静置的时间较佳地为20min。
39.其中，所述过滤的操作可为本领域常规过滤的操作，所述过滤使用的滤膜的孔径较佳地为0.22～2.00μm，例如0.45μm。
40.其中，所述去除溶剂的方法可为本领域常规的去除溶剂的方法，例如低温减压法。
41.所述低温减压法的操作可为本领域常规的低温减压法的操作，所述低温减压法采用的真空负压值较佳地为
‑
0.04～
‑
0.08mpa，例如
‑
0.06mpa。温度较佳地为55～75℃，例如60或65℃。
42.步骤(2)中，所述水蒸气蒸馏法提取的操作可为本领域常规的水蒸气蒸馏法提取的操作。
43.其中，所述水蒸气蒸馏法提取一般可包括如下步骤：将待提取物与水共蒸馏，使挥发性成分随水蒸气一并馏出，收集蒸馏液。
44.步骤(2)中，所述水蒸气蒸馏法提取过程中，采用的水的质量较佳地为所述野菊花的质量的10～20倍。
45.步骤(2)中，所述水蒸气蒸馏法提取较佳地包括如下步骤：将野菊花与水共蒸馏，保持微沸，使挥发性成分随水蒸气一并馏出，冷凝，收集上层挥发油，即为野菊花提取物。其中，所述保持微沸的时间较佳地为3～8小时；所述冷凝的温度较佳地为15～25℃，例如20℃。
46.步骤(3)中，所述混合可采用本领域常规的方法进行，使所述人参
‑
楤木提取物和所述野菊花提取物混合均匀即可。
47.较佳地，步骤(3)包括如下步骤：将所述人参
‑
楤木提取物、所述野菊花提取物和溶剂混合。
48.其中，所述溶剂较佳地为二丙二醇。所述溶剂、所述人参
‑
楤木提取物和所述野菊花的提取物的质量之和较佳地为所述原料的质量的2～8倍，例如4～5倍。
49.本发明还提供前述制备方法制备得到的复合植物提取物。
50.一种所述复合植物提取物在制备皮肤外用剂中的应用，所述皮肤外用剂可抗过敏、止痒或抗刺激。
51.一种皮肤外用剂，所述皮肤外用剂包括所述复合植物提取物。
52.其中，所述皮肤外用剂可为本领域常规的供皮肤外用或皮肤接触型的制剂，例如皮肤外用或皮肤接触型的药物或化妆品。
53.所述皮肤外用剂还可包括辅料，所述辅料可按本领域常规选自增稠剂、乳化剂、皮肤调理剂、抗氧化剂、保湿剂、美白剂、ph调节剂和防腐剂中的一种或多种。
54.当所述皮肤外用剂还包括辅料时，所述皮肤外用剂中所述复合植物提取物的质量百分比较佳地为1～4％，例如2％或3％。所述质量百分比是指所述复合植物提取物的质量占所述皮肤外用剂质量的比。
55.所述皮肤外用剂的剂型可为水剂、乳液、凝胶或霜剂。
56.在本发明的一个较佳实施方案中，所述皮肤外用剂为一种止痒凝胶，所述止痒凝胶包括如下质量百分比计的成分：
57.a相：2％丁二醇，1％前述复合植物提取物，0.4％卡波姆，余量为去离子水；
58.b相：0.5％对羟基苯乙酮，0.5％1,2已二醇，5％水
59.c相:3.5％精氨酸，
60.总量为100％。
61.较佳地，所述止痒凝胶由如下质量百分比计的成分组成：
62.a相：2％丁二醇，1％前述复合植物提取物，0.4％卡波姆，余量为去离子水；
63.b相：0.5％对羟基苯乙酮，0.5％1,2已二醇，5％水
64.c相:3.5％精氨酸，
65.总量为100％。
66.在本发明的一个较佳实施方案中，所述皮肤外用剂为一种止痒乳液，所述止痒乳液包括如下质量百分比计的成分：
67.a相：75.25％水，0.1％尿囊素，0.05％透明质酸钠，0.15％黄原胶，5.00％丁二醇，0.05％edta二钠，0.30％丙烯酸(酯)类/c10
‑
30烷醇丙烯酸酯交联聚合物；
68.b相：3％tego care 165，1％甘油硬脂酸酯，6％辛酸/癸酸甘油三酯，3％角鲨烷，2％碳酸二辛酯，2％聚二甲基硅氧烷，0.10％生育酚；其中，所述tego care 165是商品名，其包含甘油硬脂酸酯和peg
‑
100硬脂酸酯；
69.d相:1％前述复合植物提取物，1％苯氧乙醇/乙基己基甘油；
70.总量为100％。
71.更佳地，所述止痒乳液由如下质量百分比计的成分组成：
72.a相：75.25％水，0.1％尿囊素，0.05％透明质酸钠，0.15％黄原胶，5.00％丁二醇，0.05％edta二钠，0.30％丙烯酸(酯)类/c10
‑
30烷醇丙烯酸酯交联聚合物；
73.b相：3％tego care 165，1％甘油硬脂酸酯，6％辛酸/癸酸甘油三酯，3％角鲨烷，2％碳酸二辛酯，2％聚二甲基硅氧烷，0.10％生育酚；其中，所述tego care 165是商品名，其包含甘油硬脂酸酯和peg
‑
100硬脂酸酯；
74.d相:1％前述复合植物提取物，1％苯氧乙醇/乙基己基甘油；
75.总量为100％。
76.在本发明的一个较佳实施方案中，所述皮肤外用剂为一种止痒洗发水，所述止痒洗发水包括如下质量百分比计的成分：
77.a相：余量为水，12％月桂醇聚醚硫酸酯钠，0.1％聚季铵盐
‑
10，0.2％吡罗克酮乙醇胺盐，0.25％羟丙基瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵；
78.b相：4％月桂酰胺丙基甜菜碱，3％月桂酰两性基二乙酸二钠，0.3％peg
‑
120甲基葡糖二油酸酯，10％月桂酰肌氨酸钠，1％甘油聚醚
‑
26，0.8％乳酸；
79.c相:1.2％椰油酰胺dea，0.4％甘油油酸酯；
80.d相：1％dc1874，2％dc8194，0.8％苯氧乙醇/乙基己基甘油，2％前述复合植物提取物；其中，所述dc1874是商品名，其包含peg
‑
7聚二甲基硅氧烷/月桂醇聚醚
‑
7/聚山梨醇酯
‑
20；所述dc8194是商品名，其包含氨端聚二甲基硅氧烷/十三烷醇聚醚
‑
12/十六烷基三甲基氯化铵；
81.总量为100％。
82.更佳地，所述止痒洗发水由如下质量百分比计的成分组成：
83.a相：余量为水，12％月桂醇聚醚硫酸酯钠，0.1％聚季铵盐
‑
10，0.2％吡罗克酮乙醇胺盐，0.25％羟丙基瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵；
84.b相：4％月桂酰胺丙基甜菜碱，3％月桂酰两性基二乙酸二钠，0.3％peg
‑
120甲基葡糖二油酸酯，10％月桂酰肌氨酸钠，1％甘油聚醚
‑
26，0.8％乳酸；
85.c相:1.2％椰油酰胺dea，0.4％甘油油酸酯；
86.d相：1％dc1874，2％dc8194，0.8％苯氧乙醇/乙基己基甘油，2％前述复合植物提取物；其中，所述dc1874是商品名，其包含peg
‑
7聚二甲基硅氧烷/月桂醇聚醚
‑
7/聚山梨醇酯
‑
20；所述dc8194是商品名，其包含氨端聚二甲基硅氧烷/十三烷醇聚醚
‑
12/十六烷基三甲基氯化铵；
87.总量为100％。
88.本发明中，所述皮肤外用剂还可为具有强碱性和/或强氧化性的皮肤外用制剂，例如染发剂。
89.其中，所述染发剂较佳地包括如下质量百分比计的成分：
90.a相：8％鲸蜡硬脂醇，2％c12
‑
14醇，1％鲸蜡硬脂醇聚醚
‑
20；其中c12
‑
14醇是商品名，其包含月桂醇、肉豆蔻醇；
91.b相：余量为水，0.3％丙烯酸(酯)类/c10
‑
30烷醇丙烯，0.2％edta二钠，0.5％尿囊素，3％甘油，7％rsaw，8％tego；其中，rsaw是商品名，其包含月桂醇聚醚硫酸酯钠和水；tego是商品名，其包含椰油酰胺丙基甜菜碱、水、氯化钠；
92.c相：1.7％间苯二酚，0.2％m
‑
氨基苯酚，0.5％2,4
‑
二氨基，4.1％甲苯
‑
2,5
‑
二胺硫酸盐，0.3％抗坏血酸，0.6％焦亚硫酸钠，5％乙醇胺，0.6％硅酸钠；其中，2,4
‑
二氨基是商品名，其包含2,4
‑
二氨基苯氧基乙醇和hcl；
93.d相:4％前述复合植物提取物；
94.总量为100％。
95.更佳地，所述染发剂由如下质量百分比计的成分组成：
96.a相：8％鲸蜡硬脂醇，2％c12
‑
14醇，1％鲸蜡硬脂醇聚醚
‑
20；其中c12
‑
14醇是商品名，其包含月桂醇、肉豆蔻醇；
97.b相：余量为水，0.3％丙烯酸(酯)类/c10
‑
30烷醇丙烯，0.2％edta二钠，0.5％尿囊素，3％甘油，7％rsaw，8％tego；其中，rsaw是商品名，其包含月桂醇聚醚硫酸酯钠和水；tego是商品名，其包含椰油酰胺丙基甜菜碱、水、氯化钠；
98.c相：1.7％间苯二酚，0.2％m
‑
氨基苯酚，0.5％2,4
‑
二氨基，4.1％甲苯
‑
2,5
‑
二胺硫酸盐，0.3％抗坏血酸，0.6％焦亚硫酸钠，5％乙醇胺，0.6％硅酸钠；其中，2,4
‑
二氨基是商品名，其包含2,4
‑
二氨基苯氧基乙醇和hcl；
99.d相:4％前述复合植物提取物；
100.总量为100％。
101.本发明的积极进步效果在于：
102.(1)本发明提供的复合植物提取物，三种植物的提取物组合后有明显的协同作用，一方面通过抑制组织胺释放的原理，达到了临床抗过敏、止痒的效果，一方面通过增加皮肤
对组织胺的耐受，从而达到抗过敏、止痒的目的，抑制瘙痒和抑制组织胺的效果明显优于这三种植物分别单独抑制瘙痒和抑制组织胺的效果。在一定范围内，本发明的复合植物提取物可以替代复方醋酸地塞米松乳膏、复方酮康唑软膏等激素类皮炎药物，作为天然的，相对安全的抗敏、抗刺激、止痒成分，这对化妆品及药品的发展，具有很大的推动作用和指导意义。
103.(2)本发明提供的复合植物提取物，不仅具有很好的抗敏、抗刺激、止痒效果，且其在碱性和强氧化条件下，能够稳定存在，并能够起到较强抗刺激的效果，在具有碱性或/和强氧化性质的制剂中，具有重要的应用价值。
104.(3)本发明的制备方法，通过按照一定质量比的药材，分步提取，保留了热不稳定的野菊花挥发油，进一步地通过循环渗透法对人参和楤木进行提取，陈化除去杂质，还可最大限度地保留植物中的有效成分，减少杂质的提出，充分提取了人参、楤木的碱水解提取物，该组合抑制组织胺的效果制得的复合植物提取物，其抑制组织胺释放的效果，明显高于单味药材。
附图说明
105.图1为效果实施例1中各组(对照组1
‑
1～1
‑
3、实验组1
‑
1～1
‑
11)小鼠30min内的搔抓次数比较。
106.图2为效果实施例1中各组(对照组1
‑
1～1
‑
3、实验组1
‑
1～1
‑
11)对瘙痒的抑制率比较。
具体实施方式
107.下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
108.下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
109.实施例1
110.(1)将25g的人参和70g的楤木加入1900g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是用氢氧化钠调节ph至10的30
°
(即乙醇的体积百分比为30％)乙醇水溶液，循环渗滤法提取水解；
111.(2)70℃循环渗滤提取1小时，降温至40℃之间，加入提取液质量0.1％的絮凝剂，搅拌10分钟，静置20分钟，通过0.22μm的滤膜，过滤至澄清，得滤液；
112.(3)真空负压值为
‑
0.04mpa，温度为75℃条件下，去除溶剂，即得人参、楤木碱水解提取物；
113.(4)将5g的野菊花加入50g水进行水蒸气蒸馏法提取，常压保持微沸，15℃，冷却水冷凝，冷凝液常温下，油水分离，收集上层挥发油得野菊花水蒸气蒸馏提取物；
114.(5)将(3)和(4)合并后，加入二丙二醇定容至200g，即得植物复方提取物。
115.实施例2
116.(1)将70g的人参和25g的楤木加入2850g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是用浓氨水调节ph至12的70
°
(即乙醇的体积百分比为70％)的乙醇水溶液，循环渗滤法提取水解；
117.(2)90℃循环渗滤提取3小时，降温至60℃之间，加入提取液质量5％的絮凝剂，搅拌10分钟，静置20分钟，通过2.00μm的滤膜，过滤至澄清，得滤液；
118.(3)真空负压值为
‑
0.08mpa，温度为55℃条件下，去除溶剂，即得人参、楤木碱水解提取物；
119.(4)将5g的野菊花加入100g水进行水蒸气蒸馏法提取，常压保持微沸，25℃，冷却水冷凝，冷凝液常温下，油水分离，收集上层挥发油得野菊花水蒸气蒸馏提取物；
120.(5)将(3)和(4)合并后，加入二丙二醇定容至800g，即得植物复方提取物。
121.实施例3
122.(1)将40g的人参和40g的楤木加入2000g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是用氢氧化钾调节ph至11的50
°
(即乙醇的体积百分比为50％)乙醇水溶液，循环渗滤法提取水解；
123.(2)80℃循环渗滤提取2小时，降温至50℃之间，加入提取液质量2.5％的絮凝剂，搅拌10分钟，静置20分钟，通过0.45μm的滤膜，过滤至澄清，得滤液；
124.(3)真空负压值为
‑
0.06mpa，温度为60℃条件下，去除溶剂，即得人参、楤木碱水解提取物；
125.(4)将20g的野菊花加入400g水进行水蒸气蒸馏法提取，常压保持微沸，20℃，冷却水冷凝，冷凝液常温下，油水分离，收集上层挥发油得野菊花水蒸气蒸馏提取物；
126.(5)将(3)和(4)合并后，加入二丙二醇定容至500g，即得植物复方提取物。
127.实施例4
128.(1)将45g的人参和45g的楤木加入2400g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是用三乙醇胺调节ph至11的50
°
(即乙醇的体积百分比为50％)乙醇水溶液，循环渗滤法提取水解；
129.(2)80℃循环渗滤提取2小时，降温至50℃之间，加入提取液质量2％的絮凝剂，搅拌10分钟，静置20分钟，通过0.45μm的滤膜，过滤至澄清，得滤液；
130.(3)真空负压值为
‑
0.06mpa，温度为65℃条件下，去除溶剂，即得人参、楤木碱水解提取物；
131.(4)将10g的野菊花加入200g水进行水蒸气蒸馏法提取，常压保持微沸，20℃，冷却水冷凝，冷凝液常温下，油水分离，收集上层挥发油得野菊花水蒸气蒸馏提取物；
132.(5)将(3)和(4)合并后，加入二丙二醇定容至400g，即得植物复方提取物。
133.对比例1仅人参
134.(1)将100g的人参加入2000g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是ph为11的30
°
(即乙醇的体积百分比为30％)乙醇水溶液，循环渗滤法提取；
135.(2)70℃循环渗滤提取1小时，陈化，过滤，取滤液；
136.(3)真空负压值为
‑
0.06mpa，温度为65℃条件下，去除溶剂，即得碱水解人参提取物，加入二丙二醇，定容至200g，即得对比例人参提取物。
137.对比例2仅人参ph中性
138.(1)将100g的人参加入2000g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是ph为7的30
°
(即乙醇的体积百分比为30％)乙醇水溶液，循环渗滤法提取；
139.(2)70℃循环渗滤提取1小时，陈化，过滤，取滤液；
140.(3)真空负压值为
‑
0.06mpa，温度为65℃条件下，去除溶剂，即得碱水解人参提取物，加入二丙二醇，定容至200g，即得对比例人参提取物。
141.对比例3仅楤木中性
142.(1)将100g的楤木加入2000g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是ph为7的30
°
(即乙醇的体积百分比为30％)乙醇水溶液，循环渗滤法提取；
143.(2)70℃循环渗滤提取1小时，陈化，过滤，取滤液；
144.(3)真空负压值为
‑
0.06mpa，温度为65℃条件下，去除溶剂，即得楤木提取物，加入二丙二醇，定容至200g，即得对比例楤木提取物。
145.对比例4仅野菊花
146.(1)100g野菊花加入2000g水进行水蒸气蒸馏法提取；
147.(2)常压保持微沸，20℃，冷却水冷凝，冷凝液常温下，油水分离，收集上层挥发油得野菊花水蒸气蒸馏提取物，加入二丙二醇，定容至200g，即得野菊花提取物。
148.对比例5三成份ph中性
149.(1)将45g的人参和45g的楤木加入2400g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是用三乙醇胺调节ph至7的29
°
(即乙醇的体积百分比为29％)乙醇水溶液，循环渗滤法提取水解；
150.(2)80℃循环渗滤提取2小时，降温至38℃之间，加入提取液质量2％的絮凝剂，搅拌10分钟，静置20分钟，通过0.22μm的滤膜，过滤至澄清，得滤液；
151.(3)真空负压值为
‑
0.03mpa，温度为65℃条件下，去除溶剂，即得人参、楤木碱水解提取物；
152.(4)将10g的野菊花加入200g水进行水蒸气蒸馏法提取，常压保持微沸，20℃，冷却水冷凝，冷凝液常温下，油水分离，收集上层挥发油得野菊花水蒸气蒸馏提取物；
153.(5)将(3)和(4)合并后，加入二丙二醇定容至400g，即得对比例植物复方提取物。
154.对比例6野菊花过少
155.(1)将24.5g的人参和75g的楤木加入3000g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是用氢氧化钠调节ph至13的80
°
(即乙醇的体积百分比为80％)乙醇水溶液，循环渗滤法提取水解；
156.(2)95℃循环渗滤提取4小时，降温至65℃之间，加入提取液质量5.5％的絮凝剂，搅拌10分钟，静置20分钟，通过2.5μm的滤膜，过滤至澄清，得滤液；
157.(3)真空负压值为
‑
0.09mpa，温度为50℃条件下，去除溶剂，即得人参、楤木碱水解提取物；
158.(4)将0.5g的野菊花加入15g水进行水蒸气蒸馏法提取，常压保持微沸，30℃，冷却水冷凝，冷凝液常温下，油水分离，收集上层挥发油得野菊花水蒸气蒸馏提取物；
159.(5)将(3)和(4)合并后，加入二丙二醇定容至900g，即得植物复方提取物。
160.对比例7三成份分开提取
161.(1)将45g的人参加入1200g碱性乙醇溶液，该碱性乙醇溶液是用三乙醇胺调节ph至11的50
°
(即乙醇的体积百分比为50％)乙醇水溶液，循环渗滤法提取水解，80℃循环渗滤提取2小时，降温至50℃之间，加入提取液质量2.5％的絮凝剂，搅拌10分钟，静置20分钟，通过0.45μm的滤膜，过滤至澄清，得人参碱水解滤液；
162.(2)将45g的楤木加入1200g用三乙醇胺调节ph至11的50
°
乙醇，循环渗滤法提取水解，80℃循环渗滤提取2小时，降温至50℃之间，加入提取液质量2.5％的絮凝剂，搅拌10分钟，静置20分钟，通过0.45μm的滤膜，过滤至澄清，得楤木碱水解滤液；
163.(3)分别真空负压值为
‑
0.06mpa，温度为65℃条件下，去除溶剂，即得人参碱水解
提取物和楤木碱水解提取物；
164.(4)将10g的野菊花加入200g水进行水蒸气蒸馏法提取，常压保持微沸，20℃，冷却水冷凝，冷凝液常温下，油水分离，收集上层挥发油得野菊花水蒸气蒸馏提取物；
165.(5)将(3)和(4)合并后，加入二丙二醇定容至400g，即得对比例植物复方提取物。
166.效果实施例1瘙痒抑制实验的具体方法及测试结果
167.1.1材料
168.1.1.1主要仪器
169.al204型电子分析天平，梅特勒—托利多仪器(上海)有限公司；
170.1.1.2试药
171.各实施例及对比例提取物；复方醋酸地塞米松乳膏，惠州市九惠制药股份有限公司生产，批号1310002h；二丙二醇(溶剂)。
172.1.1.3实验动物
173.昆明种小鼠，18
‑
22g，由复旦大学医学院实验动物中心提供。
174.1.2方法
175.待测样制备：将实施例1
‑
4和对比例1
‑
7制得的提取物加二丙二醇，定容至1000ml，得各待测样，全部配制成1％(质量分数)的凝胶用于给药(将实施例1
‑
4制备的待测样编号为待测样1
‑
1～1
‑
4；对比例1
‑
7制备的待测样编号为待测样1
‑
5～1
‑
11)。
176.小鼠分组：选体重18
‑
22g的昆明小白鼠1400只雌雄各半，随机分为14组，每组100只，每组分10批且每批中雌雄各5只。
177.给药：将小鼠背部毛用剪刀剪掉，再用脱毛膏，洗干净使其露出皮肤，然后分别对14组小鼠给药，给药方法见表1。14组均是涂抹给药，每天各给药1次(给药量见表1)，连续给药5天，末次给药1h后，对每只小鼠尾静脉注射0.02％右旋糖酐生理盐水注射液0.2ml，观察小鼠出现以瘙痒、咬尾、挠背等为瘙痒特征的潜伏期以及30min内的搔抓次数，统计每批平均值(注：实验组1
‑
1～1
‑
11：给药分别为由实施例1～4、对比例1～7制备的待测样；对照组1
‑
1：给药为空白凝胶组，对照组1
‑
2：给药为1％(质量分数)的二丙二醇凝胶，对照组1
‑
3：给药复方醋酸地塞米松乳膏。
178.表1各组给药情况和给药量
179.[0180][0181]
1.3实验结果
[0182]
统计各组小鼠30min内各批的搔抓次数均值，并作比较，见表2、图1、图2。对照组1
‑
1出现剧烈抓挠，次数高达70次以上，说明造模成功；对照组1
‑
2与对照组1
‑
1比较，其抓挠次数相当，说明溶剂本身不具有止痒效果；与对照组1
‑
1比较，对照组1
‑
3、实验组1
‑
1～1
‑
11均能明显减少右旋糖酐酐所致小鼠瘙痒次数，说明均具有止痒效果；其中，对照组1
‑
3瘙痒抑制率约为54％，实施例1～3抑制约为43％，实施例4抑制率约为54％，与对照组1
‑
3相当，说明实施例具有较好的止痒效果，相比较之下实施例4更佳。各对比例的瘙痒抑制率均小于33％，远低于各实施例的瘙痒抑制率；对比例1抑制率约为31％、对比例2抑制率约为12％，说明对比例1碱水解后的人参提取物止痒效果明显提高；各实施例明显优于对比实施例1、2、3、4的止痒效果，说明三种植物提取物之间在止痒方面，有协同作用；实施例4明显优于对比例5的止痒效果，说明，本发明中碱水解步骤非常重要，能够大幅度提高复方提取物的止痒效果；对比例6的效果也远不如各实施例的效果，说明实施例的工艺条件和用量是更佳的；对比例7瘙痒抑制率约为33％，远低于实施例4的54％抑制率，说明人参、楤木要在一起水解，才能发挥出最佳功效。可见，在三种植物提取物的协同作用下，实现了良好的止痒效果。
[0183]
表2各组小鼠30min内的搔抓次数比较(原始数据)
[0184][0185]
[0186]
效果实施例2抑制组胺释放实验方法及测试结果
[0187]
2.1主要仪器
[0188]
co2培养箱(日本三洋)；405型酶标仪(美国bio
‑
rad公司)；微量加样器(eppendorf)；离心机(eppendorf)。
[0189]
2.2试药
[0190]
待测样品配制：将实施例1
‑
4和对比例1
‑
7制备的复合植物提取物加二丙二醇，定容至1000ml，得各待测样，用pbs溶液稀释为10mg/ml作为待测样品(分别编号为待测样2
‑
1～2
‑
11)，置冰箱置冰箱中于2
‑
8℃保存；牛血清白蛋白(bsa)(上海生工)；二甲基苯二醛(opt)(sigma)；compound 48/80(sigma)。
[0191]
tyrode培养液(1l)：葡萄糖1g、nacl 8g、kcl 0.2g、cacl2·
2h2o 0.2g、mgcl
2 0.1g、nah2po
4 0.5g、hepes 2.4g，115℃20min高压灭菌。
[0192]
2.3实验动物
[0193]
sd大鼠：雄性，体重约200克(购买于上海西普尔
‑
必凯实验动物有限公司)
[0194]
2.4实验方法
[0195]
2.4.1肥大细胞分离纯化
[0196]
采用anna nemeth等的方法略加改进，正常sd大鼠放血脱颈椎处死，腹腔注射预冷的pbs(含1％fcs)15ml，轻轻按摩腹部2min，吸取腹腔灌洗液并置入细胞培养皿中，于37℃，5％co2细胞培养箱静置30min，等待巨噬细胞附壁后轻轻吸取细胞悬液离心(4℃，1500r/min)10min，调节细胞悬液约0.5ml。7mlp
‑
f10(percoll
‑
hamf10)在4℃，3000r/min离心20min形成梯度，将浓缩的细胞悬液轻轻铺入梯度之上4℃，2000r/min离心20min分离细胞，收集界面下1/3细胞，用pbs洗涤2次(1000r/min，离心10min)后重悬，锥虫蓝染色检测细胞活力，甲苯胺蓝染色检测细胞纯度，得纯度大于95％的肥大细胞。调节细胞密度约106/ml，置于含10％fcs的dmem培养基中待用。
[0197]
2.4.2药物处理
[0198]
将肥大细胞调整为13组，每组约含rpmcs5
×
104个/组，加入待测样品(实验组2
‑
1～2
‑
11：加入待测样2
‑
1～2
‑
11；对照组2
‑
1：加入pbs；对照组2
‑
2：不加样品)，置入37℃，5％co2孵箱中孵育20分钟，取出后立即加入compound48/80(0.5ug/ml)，置入37℃，5％co2孵箱中孵育10分钟，取出立即放入冰水浴中5min终止反应。注：对照组2
‑
1：以pbs取代药物，对照组2
‑
2：未加入药物且未进行compound48/80处理组。2.4.3样品准备
[0199]
将各管以4℃，6000r/min离心10分钟，吸取上清液测定释放到胞外的组胺量a；沉淀用pbs重悬，100℃煮沸10min裂解细胞，测定残留在细胞内的组胺量a。
[0200]
2.4.4组胺的测定
[0201]
上述各样品加入高氯酸(0.4mol/l)，离心(4℃，6000r/min)10分钟取上清。采用shore等荧光测定改良法进行测定：取1.6ml上清夜置于已经加入1.5gnacl的具塞试管中，再加入4.0ml正丁醇和0.2ml2.5nnaoh，立即混匀，置康氏震荡器震荡5分钟，静置分层后取出3.6ml正丁醇相到已经加入1.2ml0.1nhcl和2.0ml正庚烷的10ml具塞试管中，震荡5分钟，弃有机相，取1.0mlhcl相到试管中，用三蒸水稀释一倍，加0.5ml0.4nnaoh碱化，混匀并迅速加入0.1％opt甲醇液0.1ml，立即混匀并在21
‑
22℃反应10分钟，加0.5ml 0.5nhcl酸化终止缩合反应，并使荧光物质稳定。
[0202]
每个数据均为3个平行复管的平均数。根据测得的荧光强度，分别按下式计算各组细胞的组胺释放率(p释放)和组胺释放抑制率(p抑制)。
[0203]
p释放＝(上清液组胺量a
‑
自发分泌组胺量)/(上清液组胺量a+细胞内组胺量b)
×
100％；
[0204]
p抑制＝(1
‑
药物组组胺释放量/对照组2
‑
1的组胺释放量)
×
100％。
[0205]
其中自发分泌组胺量＝正常细胞上清液中的组胺量。
[0206]
2.5实验结果
[0207]
由表3可知，10mg/ml各实施例及对比例都明显具有抑制组胺释放的作用；各实施例在抑制组胺释放效果上明显优于各对比例；其中对比例1优于对比例2，说明水解后的人参效果更佳；实施例4的效果明显优于对比例5，说明碱水解后的复方提取物效果明显优于没有水解的复方提取物；实施例4效果明显优于对比例7，说明人参和楤木混合水解提取物效果优于单独水解提取后混合的工艺。
[0208]
表3各待测组组胺释放率
[0209][0210]
效果实施例3耐碱、耐氧化刺激测试
[0211]
3.1材料
[0212]
3.1.1主要仪器
[0213]
al204型电子分析天平，棉签，剪刀，小动物剃毛机，体重秤。
[0214]
3.1.2试药
[0215]
实施例4及对比例1、2、3、4、6提取物；复方醋酸地塞米松乳膏，惠州市九惠制药股份有限公司生产，批号1310002h；二丙二醇(溶剂)，氢氧化钠，1.5％双氧水，无菌生理盐水，脱毛膏等。
[0216]
3.1.3实验动物
[0217]
豚鼠(雌/雄)，350g
‑
450g，由复旦大学医学院实验动物中心提供。
[0218]
3.2方法
[0219]
制备待测样：将实施例4及对比例1、2、3、4、6的提取物加二丙二醇，定容至1000ml，得各待测样，全部用双氧水配制成ph为10的3％(质量分数)的水剂用于给药(分别编号为待测样3
‑
1～3
‑
6)。
[0220]
小鼠分组：选体重350g
‑
450g的豚鼠90只雌雄各半，随机分为9组，每组10只，雌雄各5只。
[0221]
给药：将豚鼠背部毛用剪刀剪掉露出皮肤，注意不能损伤皮肤，然后分别对8组豚鼠涂抹给药，给药方法见表4。具体测试及观察评分方法参照化妆品技术规范(2015版)cfda(注：对照组3
‑
1：涂抹不含双氧水ph为7的空白凝胶；对照组3
‑
2：涂抹3％的二丙二醇的ph为10.0的双氧水凝胶组；对照组3
‑
3：涂抹3％复方醋酸地塞米松乳膏ph为10的双氧水凝胶组，其中3％是指质量分数)。
[0222]
表4各组给药情况和给药量
[0223][0224]
3.3实验结果
[0225]
参照化妆品技术规范(2015版)cfda方法评分，1天的累积数据评分结果如表5，从结果中可以看出，对照组3
‑
1，累积0分，说明中性空白凝胶无刺激；对照组3
‑
2，累计积分19分，说明，强碱强氧化的凝胶对皮肤具有强烈刺激；对照组3
‑
3累计积分9分，说明复方地塞米松乳膏对强碱强氧化刺激皮肤具有一定的对抗作用；实验组3
‑
1～3
‑
6均能降低累计积分，说明均具有一定的抗刺激作用。其中实施例4累计积分只有1分，说明其具有显著抗碱及氧化刺激效果；对比例都比实施例积分高，说明其抗碱及氧化刺激效果明显弱于实施例4；对比例6累计积分明显低于其他4个对比例，说明三者之间具有协同抗强碱强氧化刺激的效果；对比例2累计积分明显低于对比例1的累计积分，说明碱水解能够明显提高人参提取物抗强碱强氧化刺激。
[0226]
表5皮肤累积刺激情况
[0227][0228]
结论：
[0229]
1、这三个植物提取物在联合使用后具有较好的抑制瘙痒的功效、抑制组胺效果及抵抗强碱刺激和强氧化刺激的效果，并且具有明显的协同作用。
[0230]
2、碱水解工艺非常关键，是影响植物复方提取物抑制瘙痒、抑制组胺效果及抵抗强碱强化刺激的，具有决定性意义的工艺步骤之一。
[0231]
3、人参、楤木混合水解的工艺也非常重要，是影响植物复方提取物抑制瘙痒和抑制组胺效果的重要工艺步骤之一。
[0232]
应用实施例1止痒凝胶
[0233]
表6止痒凝胶配方
[0234][0235][0236]
按配比称量好上诉物料，先把a相中ultrez 30 polymer(美国路博润公司)分散与丁二醇中，然后加入植物提取物1和去离子水，搅拌均匀，可适当加热，水温低
于60℃。b相微防腐剂，微加热溶解后倒入主烧杯，搅拌溶解均匀后用c相中和，ph值控制在5.5
‑
7.0。搅拌均匀出料，获得止痒凝胶。临床测试蚊虫叮咬30例，明显缩短止痒及消肿时间，有效率100％。
[0237]
应用实施例2止痒乳液的制备
[0238]
表7止痒乳液配方
[0239][0240][0241]
按配比称量好上述物料，水浴锅水温问85℃
‑
90℃，a相ultrez 21 polymer(美国路博润公司)和透明质酸钠用丁二醇预分散，然后加入其它料加热搅拌均匀。
b相称好，dm10和天然ve避免长时间加热。放水浴锅加热搅拌溶解均匀，等烧杯内料体温度有85℃时做乳化，a相搅拌，b相入a相，搅拌3分钟后打均质3分钟，转速7000rpm/分钟。降温至45℃后加入d相。ph值控制在5.5
‑
7.0。搅拌均匀出料，获得止痒乳液。临床测试蚊虫叮咬30例，明显缩短止痒及消肿时间，有效率100％。
[0242]
应用实施例3止痒洗发水的制备
[0243]
表8止痒洗发水配方
[0244][0245][0246]
按配比称量好上述物料，将a相加入乳化锅，加热至80度，慢速搅拌至完全溶解；降温至度65度加入b相，搅拌至完全溶解；降温至60度，加入预先加热溶解的c相，搅拌均匀即可；降温至45度，加入d相，搅拌均匀。10％水溶液ph值：约5.0～5.5，得止痒洗发水。
[0247]
临床测试30例有头痒症状患者，连续使用1周，不改变其原有洗发习惯，28例反馈效果显著，2例反馈有效。
[0248]
应用实施例4温和染发剂的制备
[0249]
表9温和染发剂的制备
[0250][0251][0252]
按配比称量好上述物料，将a相加入乳化锅的油相锅中，加热至80
‑
85℃，搅拌至熔解完全；将b相依次加入主乳化锅，搅拌至完全溶解，然后加热至82
‑
88℃保温。将a相抽入主乳化锅中，开启真空和均质，均质5
‑
7分钟，均质结束后保温一段时间再降温，降温至规定温度时加入预混合好的c相，搅拌均匀，继续降温，降温至38
‑
40℃时加入d相物料，搅拌均匀。
10％水溶液ph值：约9.0～10.0的温和染发剂。
[0253]
动物测试结果反馈，不加实施例3的空白产品小鼠抓挠次数的平均值为：30.7次，加入实施例3的产品小鼠抓挠次数的平均值为：21次，具有显著效果。
[0254]
虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域的技术人员应当理解，这仅是举例说明，本发明的保护范围是由所附权利要求书限定的。本领域的技术人员在不背离本发明的原理和实质的前提下，可以对这些实施方式做出多种变更或修改，但这些变更和修改均落入本发明的保护范围。