一种儿童润肤乳及其制备方法与应用

本发明属于化妆品
技术领域：
，具体涉及一种儿童润肤乳及其制备方法与应用。
背景技术：
：儿童生长过程，由于免疫系统发育尚不完善。较易被病菌侵染引起流鼻涕、咳嗽、发烧等感冒症状。据统计发现，儿童6岁以前感冒疾病发生率占95％以上。市面现有润肤乳效果单一，主要以保湿、护肤为主，且丙二醇类成份作为敏化剂，刺激皮肤，易引起过敏反应，羧基苯酯类成分干扰正常内分泌，引起女童青春期提前。目前针对改善儿童体质、提高免疫功能的润肤乳种类较少，市面上存在的治疗感冒以口服药物、打针、输液和贴退烧剂为主，舒适度差、儿童排斥性高、易引起抗生素滥用风险，贴剂使用的胶带易引起皮肤过敏等问题。技术实现要素：针对上述的不足，本发明的第一目的是提供一种儿童润肤乳。本发明的第二目的是提供一种儿童润肤乳的制备方法。本发明的第三目的是探讨一种儿童润肤乳在改善儿童体质，增强免疫力等方面的应用。为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：一种儿童润肤乳，所述润肤乳按照重量份数包括有如下原料组分：水50～54份；甘油5～7份；山梨糖醇4～7份；矿油4～7份；羊毛脂3～7份；聚二甲基硅氧烷2～6份；蜂蜡3～8份；辛甘醇2.5～7份；甘油硬脂酸酯se3～8份；鲸蜡硬脂醇3～8份；edta二钠2.5～5.5份；卡波姆9402～3份；1,2-己二醇0.2～0.8份；肉桂叶提取物0.1～1.2份；互生叶白千层叶提取物0.1～1.1份；人参根提取物0.06～0.12份；柠檬酸0.08～0.12份；柠檬酸钠0.06～0.14份；氢氧化钠0.19～0.21份进一步，所述水53份、甘油6份、山梨糖醇5份、矿油5份、羊毛脂4份、聚二甲基硅氧烷4份、蜂蜡4份、辛甘醇4份、甘油硬脂酸酯se4份、鲸蜡硬脂醇4份、edta二钠3份、卡波姆9402.5份、1,2-己二醇0.5份、肉桂叶提取物0.3份、互生叶白千层叶提取物0.2份、人参根提取物0.1份、柠檬酸0.1份、柠檬酸钠0.1份、氢氧化钠0.2份。进一步，具体步骤如下：1)两次分子蒸馏提取肉桂叶原料中的挥发油，得到肉桂叶提取物；2)配置水相：取水ⅲ50～54份、甘油5～7份混合，得到混合液，将混合液置于旋转搅拌器中，室温条件下，以1500～2500rpm的转速高速旋转，再缓慢加入卡波姆9402～3份，搅拌均匀，待混合液与卡波姆940完全溶解后，依次加入山梨糖醇4～7份、柠檬酸0.08～0.12份、edta二钠2.5～5.5份、柠檬酸钠0.06～0.14份、人参根提取物0.06～0.12份，在室温条件下以100～400rpm的转速低速搅拌溶解，卡波姆溶胀反应55～100min，得到呈通明无颗粒的凝胶，用浓度为6％～10％的naoh溶液0.19～0.21份调节ph，直至凝胶变为中性；3)配置油相：称取矿油4～7份、羊毛脂3～7份、聚二甲基硅氧烷2～6份、蜂蜡3～8份于混合设备中进行混溶，在常温条件下，以100～400rpm的转速低速搅拌溶解，待蜂蜡完全溶解后，再依次添加甘油硬脂酸酯se3～8份、辛甘醇2.5～7份、鲸蜡硬脂醇3～8份、互生叶白千层叶提取物0.1～1.1份及步骤1)中得到的肉桂叶提取物0.1～1.2份进行混溶；4)将步骤2和步骤3中配置的水相和油相进行混合乳化，得到润肤乳。进一步，所述步骤1)中两次分子蒸馏提取肉桂叶中的挥发油，得到肉桂叶提取物的具体步骤如下：称量肉桂叶原料与水ⅰ混合，搅拌均匀，加入到短程分子蒸馏器中，设置温度为86.5～87.2℃，控制蒸馏器真空压力为2.8～3.8pa，转速为100～400rpm，通过分子蒸馏的方法，第一次蒸馏时间为3～5.5小时，第一次蒸馏结束后补充原肉桂叶原料2～5倍的水ⅱ，进行第二次蒸馏，设置温度为91.5～92.7℃，控制蒸馏器真空压力为4～6.5pa，转速为100～400rpm，时间为1～3小时，提取肉桂叶原料中残余的挥发油，最终得到肉桂叶提取物；所述肉桂叶原料、水ⅰ的重量份数分别为：肉桂叶原料100～160份、水ⅰ1000～1250份。进一步，所述肉桂叶原料150份、水ⅰ1050份；所述第一次蒸馏的温度为87℃、真空压力为3.5pa、转速为200rpm、蒸馏时间为3.5小时、水ⅱ为3倍；所述第二次蒸馏的温度为92℃、真空压力为5pa、转速为200rpm、蒸馏时间为2.5小时。进一步，所述步骤2)中水ⅲ53份、甘油6份、卡波姆9402.5份、山梨糖醇5份、柠檬酸0.1份、edta二钠3份、柠檬酸钠0.1份、人参根提取物0.1份、naoh溶液0.2份、高速转速为2000rpm、低速转速为200rpm、卡波姆溶胀反应时间为60min、naoh溶液浓度为5％；所述步骤3)中矿油5份、羊毛脂4份、聚二甲基硅氧烷4份、蜂蜡4份、甘油硬脂酸酯se4份、辛甘醇4份、鲸蜡硬脂醇4份、互生叶白千层叶提取物0.2份、肉桂叶提取物0.3份、低速转速为200rpm；进一步，所述步骤4)中将步骤2和步骤3中配置的水相和油相进行混合乳化，得到润肤乳的具体步骤如下：将配置的水相与油相分别置于温度ⅰ为73.5～78℃的旋转搅拌器中，以100～400rpm低转速ⅰ搅拌溶解，待水相、油相充分溶解且温度相同后，在60～120rpm低转速ⅱ条件下，用蠕动泵将油相缓慢加至水相中混合乳化，均质后搅拌25～60min后冷却，于38～50℃的温度ⅱ条件下加入1，2-己二醇0.3～0.6份，贮放、蒸汽灭菌、包装，即得到润肤乳。进一步，所述1，2-己二醇为40份、温度ⅰ为75℃、温度ⅱ为40℃、低转速ⅰ为200rpm、低转速ⅱ为100rpm。进一步，所述的一种儿童润肤乳在改善儿童体质、增强免疫力，预防儿童感冒、抗炎、杀菌、保湿等方面的应用。采用以上方案，本发明具有如下优点：1、本发明中的制备得到的润肤乳，通过家庭日常使用润肤乳，在中医未病先防，内病外治理念下，可以改善儿童免疫功能。2、本发明通过日常家庭使用润肤乳，按摩舒适度高，透皮吸收的方式促进血液循环，对皮肤表层病菌进行抗菌杀菌，有效避免皮肤过敏、舒适度差等缺点。3、本发明采用国际化妆品添加许可的植物精粹，天然绿色无副作用，通过两次分子蒸馏萃取技术获得植物功能因子，结合复合配方技术制备改善儿童体质，增强免疫力的润肤乳，且不引起过敏等症状。4、所述采用短程分子蒸馏技术比普通蒸馏方法常压相比，由于具有更低的真空度，在低压强下有助于物料在低沸点的温度下进行提取，节约能源，且物料停留时间短，低温和与外界氧气隔绝也有助于保持提取挥发油的稳定性。5、本发明优化了肉桂叶的提取条件和固液比例，通过两次分子蒸馏可获得更大的提取率、经济有效、所用时间短。6、本发明针对可以有效杀菌、抗菌、改善免疫系统的举措，结合中医配伍理念挑选功效原料，根据协同增效原理将多种具有保湿、促进血液循环、增强免疫、抗菌、抗炎功效的活性成分进行科学配伍，制备出真正多效预防儿童感冒功能的润肤乳霜，并对产品的感官、理化指标进行测试，对其改善皮肤体质、增强免疫力等功效进行研究，通过志愿者试用、小鼠动物实验对产品性能进行较为全面的评价。本发明的其他优点、目标和特征在某种程度上将在随后的说明书中进行阐述，并且在某种程度上，基于对下文的考察研究对本领域技术人员而言将是显而易见的，或者可以从本发明的实践中得到教导。本发明的目标和其他优点可以通过下面的说明书和权利要求书来实现和获得。附图说明图1为本发明的流程图。图2为本发明的产品外观图。图3为本发明对大肠杆菌(g-)的抑菌效果。图4为本发明对金黄色葡萄球菌(g+)的抑菌效果。具体实施方式下面结合附图和实施例对本发明的进行详细的描述，但实施例并不对本发明作任何形式的限定，除非特别说明，本发明所涉及的试剂、方法和设备为本
技术领域：
常规试剂、方法和设备。实施例1：儿童的润肤乳的制备，如图1所示产品1：一种儿童的润肤乳的制备，具体步骤如下：1)两次分子蒸馏提取肉桂叶原料中的挥发油，得到肉桂叶提取物；称量肉桂叶原料与水ⅰ混合，搅拌均匀，加入到短程分子蒸馏器中，设置温度为86.5℃，控制蒸馏器真空压力为2.8pa，转速为100rpm，通过分子蒸馏的方法，第一次蒸馏时间为3小时，第一次蒸馏结束后补充原肉桂叶原料2倍的水ⅱ，进行第二次蒸馏，设置温度为91.5℃，控制蒸馏器真空压力为4pa，转速为100rpm，时间为1小时，提取肉桂叶原料中残余的挥发油，最终得到肉桂叶提取物；所述肉桂叶原料、水ⅰ的重量份数分别为：肉桂叶原料100份、水ⅰ1000份；2)配置水相：取水ⅲ50份、甘油5份混合，得到混合液，将混合液置于旋转搅拌器中，室温条件下，以1500rpm的转速高速旋转，再缓慢加入卡波姆9402份，搅拌均匀，待混合液与卡波姆940完全溶解后，依次加入山梨糖醇4份、柠檬酸0.08份、edta二钠2.5份、柠檬酸钠0.06份、人参根提取物0.06份，在室温条件下以100rpm的转速低速搅拌溶解，卡波姆溶胀反应55min，得到呈通明无颗粒的凝胶，用浓度为6％的naoh溶液0.19份调节ph，直至凝胶变为中性；3)配置油相：称取矿油4份、羊毛脂3份、聚二甲基硅氧烷2份、蜂蜡3份于混合设备中进行混溶，在常温条件下，以100rpm的转速低速搅拌溶解，待蜂蜡完全溶解后，再依次添加甘油硬脂酸酯se3份、辛甘醇2.5份、鲸蜡硬脂醇3份、互生叶白千层叶提取物0.1份及步骤1)中得到的肉桂叶提取物0.1份进行混溶；4)将步骤2和步骤3中配置的水相和油相进行混合乳化，得到润肤乳；将配置的水相与油相分别置于温度ⅰ为73.5℃的旋转搅拌器中，以100rpm低转速ⅰ搅拌溶解，待水相、油相充分溶解且温度相同后，在60rpm低转速ⅱ条件下，用蠕动泵将油相缓慢加至水相中混合乳化，均质后搅拌25min后冷却，于38℃的温度ⅱ条件下加入1，2-己二醇0.3份，贮放、蒸汽灭菌、包装，即得到润肤乳。产品2：一种儿童润肤乳的制备，具体步骤如下：1)两次分子蒸馏提取肉桂叶原料中的挥发油，得到肉桂叶提取物；称量肉桂叶原料与水ⅰ混合，搅拌均匀，加入到短程分子蒸馏器中，设置温度为87.2℃，控制蒸馏器真空压力为3.8pa，转速为400rpm，通过分子蒸馏的方法，第一次蒸馏时间为5.5小时，第一次蒸馏结束后补充原肉桂叶原料5倍的水ⅱ，进行第二次蒸馏，设置温度为92.7℃，控制蒸馏器真空压力为6.5pa，转速为400rpm，时间为3小时，提取肉桂叶原料中残余的挥发油，最终得到肉桂叶提取物；所述肉桂叶原料、水ⅰ的重量份数分别为：肉桂叶原料160份、水ⅰ1250份；2)配置水相：取水ⅲ54份、甘油7份混合，得到混合液，将混合液置于旋转搅拌器中，室温条件下，以2500rpm的转速高速旋转，再缓慢加入卡波姆9403份，搅拌均匀，待混合液与卡波姆940完全溶解后，依次加入山梨糖醇7份、柠檬酸0.12份、edta二钠5.5份、柠檬酸钠0.14份、人参根提取物0.12份，在室温条件下以400rpm的转速低速搅拌溶解，卡波姆溶胀反应100min，得到呈通明无颗粒的凝胶，用浓度为10％的naoh溶液0.21份调节ph，直至凝胶变为中性；3)配置油相：称取矿油7份、羊毛脂7份、聚二甲基硅氧烷6份、蜂蜡8份于混合设备中进行混溶，在常温条件下，以400rpm的转速低速搅拌溶解，待蜂蜡完全溶解后，再依次添加甘油硬脂酸酯se8份、辛甘醇7份、鲸蜡硬脂醇8份、互生叶白千层叶提取物1.1份及步骤1)中得到的肉桂叶提取物1.2份进行混溶；4)将步骤2和步骤3中配置的水相和油相进行混合乳化，得到润肤乳；将配置的水相与油相分别置于温度ⅰ为78℃的旋转搅拌器中，以400rpm低转速ⅰ搅拌溶解，待水相、油相充分溶解且温度相同后，在120rpm低转速ⅱ条件下，用蠕动泵将油相缓慢加至水相中混合乳化，均质后搅拌60min后冷却，于50℃的温度ⅱ条件下加入1，2-己二醇0.6份，贮放、蒸汽灭菌、包装，即得到润肤乳。产品3：一种儿童润肤乳的制备，具体步骤如下：1)两次分子蒸馏提取肉桂叶原料中的挥发油，得到肉桂叶提取物；称量肉桂叶原料与水ⅰ混合，搅拌均匀，加入到短程分子蒸馏器中，设置温度为87℃，控制蒸馏器真空压力为3.5pa，转速为200rpm，通过分子蒸馏的方法，第一次蒸馏时间为3.5小时，第一次蒸馏结束后补充原肉桂叶原料3倍的水ⅱ，进行第二次蒸馏，设置温度为92℃，控制蒸馏器真空压力为5pa，转速为200rpm，时间为2.5小时，提取肉桂叶原料中残余的挥发油，最终得到肉桂叶提取物；所述肉桂叶原料、水ⅰ的重量份数分别为：肉桂叶原料150份、水ⅰ1050份；2)配置水相：取水ⅲ53份、甘油6份混合，得到混合液，将混合液置于旋转搅拌器中，室温条件下，以2000rpm的转速高速旋转，再缓慢加入卡波姆9402.5份，搅拌均匀，待混合液与卡波姆940完全溶解后，依次加入山梨糖醇5份、柠檬酸0.1份、edta二钠3份、柠檬酸钠0.1份、人参根提取物0.1份，在室温条件下以200rpm的转速低速搅拌溶解，卡波姆溶胀反应60min，得到呈通明无颗粒的凝胶，用浓度为5％的naoh溶液0.2份调节ph，直至凝胶变为中性；3)配置油相：称取矿油5份、羊毛脂4份、聚二甲基硅氧烷4份、蜂蜡4份于混合设备中进行混溶，在常温条件下，以200rpm的转速低速搅拌溶解，待蜂蜡完全溶解后，再依次添加甘油硬脂酸酯se4份、辛甘醇4份、鲸蜡硬脂醇4份、互生叶白千层叶提取物0.2份及步骤1)中得到的肉桂叶提取物0.3份进行混溶；4)将步骤2和步骤3中配置的水相和油相进行混合乳化，得到润肤乳。将配置的水相与油相分别置于温度ⅰ为75℃的旋转搅拌器中，以200rpm低转速ⅰ搅拌溶解，待水相、油相充分溶解且温度相同后，在100rpm低转速ⅱ条件下，用蠕动泵将油相缓慢加至水相中混合乳化，均质后搅拌25～60min后冷却，于40℃的温度ⅱ条件下加入1，2-己二醇0.5份，贮放、蒸汽灭菌、包装，即得到润肤乳。实施例2：肉桂叶提取物组份含量测定1、实验材料以实施例1中产品3的条件下制得的肉桂叶提取物、气相色谱仪(日本岛津：gc-14c)2、实验方法取适量肉桂叶提取物，通过气相色谱测定，获得各组份含量。3、实验结果表1肉桂叶精油提取物的化学组分及含量序号名称含量(w％)1丁香酚75％2芳香酯8％3单萜烯6％4单萜烯醇5％5倍半萜稀5％6肉桂醛1％7芳香醛1％由表1可知，经过二次分子蒸馏，肉桂叶提取物中肉桂醛含量较低，可有效避免传统用肉桂精油中易引起皮肤过敏的肉桂醛成分。实施例2：一种预防儿童感冒的润肤乳指标检验1、实验材料培养皿、微生物培养箱、全自动双道氢化物发生原子荧光光度计、原子吸收分光光度计、以实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳。2、实验过程按照《化妆品安全技术规范》(2015版)标准进行微生物检验和卫生化学检验。3、实验结果表2微生物检验结果表3卫生化学检验结果由表2和表3可知，润肤乳产品微生物和卫生化学检验均符合化妆品质量要求。实施例3：动物实验1、实验材料实验小鼠、以实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳、环磷酰胺、绵羊红细胞(srbc)悬液、补体。2、实验过程给小鼠注射环磷酰胺，剂量为60mg/(kgbw·d，制造免疫低下的动物模型。对小鼠免疫低下的模型开展腹部皮肤涂抹实验，选择17-21g左右小鼠，每组6只，雌雄各3只，去除腹部皮肤后，按不同剂量涂抹润肤乳为实验组，同时对照组不处理；2.1对免疫器官的影响：断颈法处死实验组和对照组小鼠，剥离胸腺和脾脏，用电子天平测定免疫器官重量。采用如下公式计算，比较实验组和对照组差异。脾脏指数＝脾脏重量/体重量胸腺指数＝胸腺重量/体重量2.2对体液免疫的影响：实验处理15天后，处理组和对照组小鼠眼眶取血,于离心管静置1h，通过高速离心机以转速20000rpm离心20min获得血清。实验时取血清用生理盐水稀释100倍后进行实验。各组样品管中分别加入1:100小鼠血清1.0ml，1:10补体血清1.0ml，以及10％srbc0.5ml混匀，同时取空白管,分别加入等量的补体、srbc和1.0ml生理盐水。然后各管于37℃水浴中保温10min，冰浴终止反应,2000r/min离心10min。取上清液1ml、都氏试剂3ml于试管内,混匀放37℃水浴中10min。紫外分光光度计540nm波长比色，记录吸光度。同时取上述绵羊红细胞稀释液0.25ml、都氏试剂4ml于另一试管中,充分摇匀,放置10min后于540nm波长比色测定。按下列公式计算每只小鼠样品的半数溶血值(hc50)其中，a为羊红细胞半数溶血时的吸光度。hc50＝a样品/asrbc半数溶血×稀释倍数小鼠白介素2(il-2)、可溶性白介素2受体(sil-2r)均通过试剂盒检测，检测试剂盒购自江苏南京建成生物工程研究所，所有实验操作都是根据制造商的说明进行操作。2.3对免疫细胞的影响：cd4+t淋巴细胞亚群、cd8+t淋巴细胞亚群检测通过商品化试剂盒检测，试剂盒购自江苏南京建成生物工程研究所，所有实验操作都是根据制造商的说明进行操作。3、实验结果表4不同剂量润肤乳使用15天对免疫器官的影响(n＝6)注：***表示与对照组相比，差异极显著(p≤0.01)；*表示与对照组相比，差异显著(p≤0.05)表5不同剂量润肤乳使用15天对小鼠血清溶血素生成的影响(n＝6)注：***表示与对照组相比，差异极显著(p≤0.01)；*表示与对照组相比，差异显著(p≤0.05)表6不同剂量润肤乳使用15天对小鼠血清免疫因子的影响(n＝6)注：***表示与对照组相比，差异极显著(p≤0.01)；*表示与对照组相比，差异显著(p≤0.05)表7不同剂量功能性护肤品使用15天对小鼠血清免疫细胞的影响(n＝6)注：***表示与对照组相比，差异极显著(p≤0.01)；*表示与对照组相比，差异显著(p≤0.05)对免疫器官的影响：将处理后的小鼠断颈法处死，剥离胸腺和脾脏，用电子天平测定重量，通过公式：脾脏指数＝脾脏重量/体重量进行结果处理，由表4可知，和对照组相比，在实验组中，使用0.1g/cm2和1g/cm2剂量润肤乳15天的小鼠脾脏指数和胸腺指数得到显著提高，其中在0.1g/cm2组中达到极显著差异，说明以实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳可提高小鼠免疫器官脾胀指数和胸腺指数；对体液免疫的影响：由表5可知，和对照组相比，在实验组中，使用0.1g/cm2和1g/cm2剂量润肤乳15天的小鼠血清溶血素含量显著提高，其中在0.1g/cm2组中极显著提高；由表6可知，0.1g/cm2和1g/cm2剂量润肤乳显著提高血清中免疫因子中il-2的含量，显著降低sil-2r的含量，其中在0.1g/cm2组中具有极显著作用。表明以实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳可促进小鼠体液免疫功能；对免疫细胞的影响：由表7可知，和对照组相比，在实验组中，使用0.1g/cm2和1g/cm2剂量润肤乳15天的小鼠血清cd4+含量显著增加，cd8+含量显著降低，cd4+/cd8+比值显著增加。提高的cd4+/cd8+比值对免疫平衡至关重要，cd4+/cd8+比值增加有助于免疫细胞快速做出免疫响应。表明以实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳可促进小鼠体液免疫功能。实施例4：志愿者试用实验1、实验材料实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳2、实验过程为获得志愿者试用效果，实验征集了100名儿童(半岁～5岁)家庭开展试用。受试志愿者被详细记录近2个月的医院儿保数据、感冒次数及时间、饮食情况等体征情况，进而将受试志愿者被分成体质羸弱和体质正常两组。为确保润肤乳样品志愿者试用规范一致性及实验结果的可靠性，试用前志愿者被详细告知皮肤涂抹试用操作说明及注意事项，并由监护人签署书面知情同意书。用法用量：a.取适量润肤乳，均匀涂抹在面部及脖颈处皮肤；b.鱼际轻揉搓涂抹部位至发热c.每天三次，饭后休息时，或睡前使用，连续试用1个月。使用时：a.先喝适量热水；并轻揉，使宝宝放松；b.均匀涂抹后再用鱼际揉搓至发热；c.不能用力使劲搓，避免弄疼宝宝；d.手掌离揉搓处1-2cm处能感受到热度即可。使用后：a.再次喝适量热水；b.不要立即洗澡；c.不要立刻出去玩耍，最好使休息睡觉；d.禁食辛辣实物3、实验结果表8志愿者试用润肤乳的情况志愿者试用结束后，统计表8的反馈试用结果发现，86％的志愿者反馈试用效果较好，试用后儿童生长状态更好，更活跃，感冒次数更少，特别是对大便稀薄效果显著。9％的志愿者反馈和未试用前差不多，无明显的变化；4％的志愿者表示儿童不喜欢涂抹，有抵触情绪。通过使用志愿者实验验证说明以实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳可提高儿童免疫功能，减少儿童感冒次数和解决大便稀薄等问题。实施例5：感官评价实验，如图2所示实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳外观呈乳白色、有轻微的芳香气味、肉眼及显微镜观察无颗粒物存在。实施例6：抗菌实验1、实验材料大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、以实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳、牛津杯、生理盐水等。2、实验方法2.1培养基配制按照7.5％nacl肉汤和lb肉汤分别配制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌液体增菌培养基；按照lb营养琼脂方法配制双菌固体培养基，溶解分装后，置于121℃高压灭菌20分钟，备用；2.2菌种复苏及保藏用75％消毒酒精消毒菌种瓶口、管外壁和陶瓷片，用陶瓷片锯开菌种安瓿瓶，吸取0.5ml相对应的液体培养基注入被启开的安瓿瓶中并吹打,使安瓿瓶中的冻干菌种溶解成菌悬液。全部吸出上述菌悬液，分别接种到对应液体培养管和固体斜面中，放置于37℃培养箱培养18-24h.观察各菌种的生长状况，如菌种未生长,应继续培养至72h。复苏后的菌种在传1-2代后使用,保藏菌种斜面置于4℃保藏；2.3菌液的制备分别取用培养基斜面保存的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌种,将其接种于培养基斜面试管上,于37℃培养18-20h,连续传种3-4次,用0.85％的生理盐水洗下,离心后,菌体用生理盐水洗涤1-2次,再将其稀释至一定浓度(约109/ml,或用光电比色皿计测定,在波长600nm处透光率为20％左右)；2.4扩散平板的制备各取10套无菌培养皿，分别加入约20ml固体培养基后，置水平玻璃板上凝固，作为底层。另取冷却至50℃左右的50ml固体培养基，分别加入1ml稀释至一定浓度的菌悬液，迅速摇匀后，取5ml混菌培养基倒在底层平板上，作为菌层,并放置在水平玻璃板上凝固；2.5放置牛津杯在培养基平板底部做好相应标记，用弯头镊子在每个培养皿中等距离放入4个牛津杯；2.6滴加试样和对照品分别将不同剂量的润肤乳样品以生理盐水配制成等体积试样，吸取200μl再加入到牛津杯中,以生理盐水作为对照，盖上陶瓦盖；2.7恒温培养将培养皿平稳送入恒温箱,37℃下培养16～18h。2.8抑菌测定观察培养后抑菌效果。3、实验结果由图3和图4可知，以实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳产品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌都有抑制作用，即对革兰氏阳性菌(g+)和阴性菌(g-)都有抑制作用。相比较而言，其对革兰氏阴性菌(如大肠杆菌所示)的抑菌效果更好。即实施例1中产品3的条件下制得的润肤乳具有抗菌效果。最后用说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行同等替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、同等替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12