8-OH-DPAT及其衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用

8
‑
oh
‑
dpat及其衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用
技术领域
1.本发明涉及生物医药用途技术领域，具体涉及8
‑
oh
‑
dpat及其衍生物的抗肿瘤活性及其在制备抗肿瘤药物中的应用。


背景技术：

[0002]8‑
oh
‑
dpat的化学名称为8
‑
羟基
‑2‑
(二
‑
丙基氨基)四氢萘8
‑
oh
‑
dpat(英文名称：8
‑
hydroxy
‑2‑
(di
‑
n
‑
propylamino)tetralin)，该化合物为一淡黄色粉末，化学式为c
16
h
25
no，分子量为247.37600，易溶于甲醇(大约49mg/ml)和dmso(大约49mg/ml)，不溶于水。8
‑
oh
‑
dpat是一种经典的5
‑
ht1a激动剂，pic
50
为8.19。对5
‑
ht1结合位点亚型具有近1000倍选择性，其半衰期为1.5小时。8
‑
oh
‑
dpat对5
‑
ht1b仅有微弱的效果，pic
50
为5.42
±
0.08(n＝5)。在浓度低于100nm时，8
‑
oh
‑
dpat对5
‑
ht1b没有效果。以往的研究发现在人类rpe细胞中，8
‑
oh
‑
dpat能够减少自噬来源和感光细胞外节段来源的脂褐质、增加抗氧化保护能力和减少氧化损伤。在严重出血时，对低血压患者静脉注射8
‑
oh
‑
dpat可快速逆转其心搏徐缓的反应。8
‑
oh
‑
dpat是亲脂性分子，能够穿透血脑屏障，可作为止吐剂发挥中枢作用。


技术实现要素：

[0003]
本发明采用了以下技术方案：
[0004]
本发明提供了8
‑
oh
‑
dpat或其衍生物在制备预防和/或治疗抗肿瘤药物中的用途；
[0005]
本发明还提供了包含了8
‑
oh
‑
dpat的药物组合物在制备预防和/或治疗抗肿瘤药物中的用途；
[0006]
进一步的，所述8
‑
oh
‑
dpat或其衍生物的药物组合物包括但不限于片剂、胶囊剂、口服溶液剂、丸剂、颗粒剂、散剂、气雾剂、贴剂、软膏剂、涂剂、栓剂和/或注射剂；
[0007]
进一步的，所述8
‑
oh
‑
dpat如式(i)所示：
[0008][0009]
进一步的，所述8
‑
oh
‑
dpat的衍生物包括但不限于其药学上可接受的盐、其醚类、酯类、其前药、其代谢物、其溶剂化物或其晶体；
[0010]
进一步任选地，所述药物组合物还包括常规抗肿瘤药物；进一步优选的，所述常规抗肿瘤药物包括但不限于化学治疗药物、生物靶向治疗药物、代谢类治疗药物或免疫治疗药物；或更进一步的，所述化学治疗药物包括但不限于阿霉素、紫杉醇或铂类；或更进一步的，所述生物靶向治疗药物包括但不限于单克隆抗体或小分子抑制剂类；或更进一步的，所述代谢类治疗药物包括二甲双胍或他汀类；或更进一步的，所述免疫类治疗药物包括靶向pd
‑
1、pd
‑
l1或靶向ctla
‑
4等药物；
[0011]
进一步的，所述抗肿瘤药物用于手术切除、化学治疗或放射治疗；
[0012]
进一步的，所述抗肿瘤药物的作用包括但不限于抑制肿瘤生长和/或转移；
[0013]
进一步的，所述抗肿瘤药物的作用包括但不限于对乳腺癌、肠癌、卵巢癌、肺癌、肝癌细胞具有抑制作用；更进一步的，所述肠癌包括但不限于结、肠癌；
[0014]
更进一步的，对乳腺癌的抑制作用包括但不限于对乳腺癌细胞mda
‑
mb
‑
231或mda
‑
mb
‑
231lm2的抑制作用；
[0015]
更进一步的，对卵巢癌的抑制作用包括但不限于对卵巢癌细胞a2870的抑制作用；
[0016]
更进一步的，对肺癌的抑制作用包括但不限于对肺癌细胞a549或肺癌细胞hct1299的抑制作用；
[0017]
更进一步的，对肠癌的抑制作用包括但不限于对肠癌细胞hct116的抑制作用；
[0018]
更进一步的，对肝癌的抑制作用包括但不限于对肝癌细胞mhcc
‑
97l的抑制作用。
附图说明
[0019]
图1表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对乳腺癌细胞mda
‑
mb
‑
231lm224h及48h的生长抑制曲线；
[0020]
图2表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对乳腺癌细胞mda
‑
mb
‑
231 24h及48h的生长抑制曲线；
[0021]
图3表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对卵巢癌细胞a2870 24h及48h的生长抑制曲线；
[0022]
图4表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对肺癌细胞a549 24h及48h的生长抑制曲线；
[0023]
图5表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对肺癌细胞hct1299 24h及48h的生长抑制曲线；
[0024]
图6表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat不同浓度对肠癌细胞hct116 24h及48h的生长抑制曲线；
[0025]
图7表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对肝癌细胞mhcc
‑
97l 24h及48h的生长抑制曲线；
[0026]
图8表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对裸鼠体内mda
‑
mb
‑
231lm2细胞生长的不同时间点瘤体积曲线；
[0027]
图9表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对裸鼠体内mda
‑
mb
‑
231lm2细胞生长终点的瘤重量统计图；
[0028]
图10表示不同浓度8
‑
oh
‑
dpat对裸鼠体重的影响。
[0029]
有益效果
[0030]
1. 8
‑
oh
‑
dpat具有明显而广泛的抗肿瘤活性，对体外培养的多种人体肿瘤细胞如乳腺癌、结直肠癌、卵巢癌、肺癌、肝癌等生长具有抑制作用，其中48h的ic
50
分别为119.4
±
4.97μm(乳腺癌细胞mda
‑
mb
‑
231lm2)、468.03
±
19.37μm(乳腺癌细胞mda
‑
mb
‑
231)、29.00
±
20.46μm(卵巢癌细胞a2870)、494.36
±
142.16μm(肺癌细胞a549)、583
±
146.90μm(肺癌细胞hct1299)、88.23
±
3.90μm(肠癌细胞hct116)以及333.77
±
38.73μm(肝癌细胞mhcc
‑
97l)。
[0031]
2. 8
‑
oh
‑
dpat能显著抑制乳腺癌细胞mda
‑
mb
‑
231lm2细胞在裸小鼠体内成瘤能力，其抑制率可达74.87
±
14.08％，肿瘤体积及重量均差异显著，具有统计学意义(p<0.01)。
具体实施方式
[0032]
实施例1：cck8比色法考察8
‑
oh
‑
dpat的细胞毒毒性
[0033]
采用cck8比色法比较8
‑
oh
‑
dpat对人结直肠癌hct116细胞及sw480细胞、卵巢癌a2780细胞、肺癌h1299细胞、乳腺癌mda
‑
mb
‑
231及mda
‑
mb
‑
231lm2细胞、肝癌细胞mhcc
‑
97l细胞的细胞毒性8
‑
oh
‑
dpat对生长抑制的影响。各种细胞分别以8000个/孔的密度接种于96孔板，接种24h后，将药物分别稀释至0、0.01、0.1、1、10、20、40、80、160、320、640μm后，弃原孔中的培养基，每孔100μl加入对应孔，每组4个重复孔。分别在处理24h及48h时每孔加入10μl cck8孵育3h后，利用多功能酶标仪检测a450时的od值并计算抑制率。
[0034]
结果见图1
‑
7，结果提示可以显著抑制细胞增殖。图1表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat处理乳腺癌细胞mda
‑
mb
‑
231lm2 24h及48h的生长抑制曲线，其中48h的ic
50
为119.4
±
4.97μm；图2表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat处理乳腺癌细胞mda
‑
mb
‑
231 24h及48h的生长抑制曲线，其中48h的ic
50
为468.03
±
19.37μm；图3表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat处理卵巢癌细胞a2870 24h及48h的生长抑制曲线，其中48h的ic
50
为29.00
±
20.46μm；图4表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat处理肺癌细胞a54924h及48h的生长抑制曲线，其中48h的ic
50
为494.36
±
142.16μm；图5表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat处理肺癌细胞hct1299 24h及48h的生长抑制曲线，其中48h的ic
50
为583
±
146.90μm；图6表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat不同浓度处理肠癌细胞hct116 24h及48h的生长抑制曲线，其中48h的ic
50
为88.23
±
3.90μm；图7表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat处理肝癌细胞mhcc
‑
97l 24h及48h的生长抑制曲线，其中48h的ic
50
为333.77
±
38.73μm。
[0035]
实施例2：8
‑
oh
‑
dpat对荷人乳腺癌细胞mda
‑
mb
‑
231lm2原位移植瘤裸小鼠肿瘤生长的影响
[0036]
将6
‑
8周龄balb/c雌性裸小鼠适应环境1周左右，将mda
‑
mb
‑
231lm2细胞利用胰酶消化后，1000rpm离心5min，加入5ml新鲜无fbs的dmem洗一遍后计数，将浓度调整至2
×
107个细胞/ml，以100μl每只接种至小鼠的脂肪垫。待瘤体积长至1～20mm3后开始给药。
[0037]
随机分2组，每组10只，分别为8
‑
oh
‑
dpat(5mg/kg)给药组，溶剂空白对照。裸小鼠编号，接瘤后按组别进行8
‑
oh
‑
dpat腹腔注射给药，每日给药1次，每只小鼠给100μl药物(1mg/ml溶于5％dmso+30％peg300+10％吐温
‑
80+55％无菌水)或溶剂空白对照(5％dmso+30％peg300+10％吐温80+55％无菌水)，连续3周。小鼠于末次给药当晚禁食不禁水，第二天解剖。实验过程中每三天记录裸小鼠体重和瘤体积，观察裸小鼠生长情况。实验终点以co2窒息法处死裸鼠，取肿瘤组织，测量肿瘤重量并计算抑制率，抑制率＝(对照组瘤重量
‑
加药组瘤重量/对照组瘤重量)
×
100％。结果见图8和9，8
‑
oh
‑
dpat组可以明显抑制接种mda
‑
mb
‑
231lm2的裸小鼠肿瘤的生长，但并不影响小鼠体重：图8表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对裸鼠体内mda
‑
mb
‑
231lm2肿瘤体积的影响，结果显示能显著抑制肿瘤的生长；图9表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对裸鼠体内mda
‑
mb
‑
231lm2肿瘤重量的影响，结果显示能显著抑制肿瘤的生长；图10表示不同浓度的8
‑
oh
‑
dpat对裸鼠体重的影响，结果显示不影响小鼠的体重，可见8
‑
oh
‑
dpat无明显的毒副作用。
[0038]
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，所做各种的改动与修饰，均在本发明的保护范围内。