一种用于止吐的崂百合提取物及其制备方法和应用与流程

：
1.本发明属中药制备技术领域，涉及一种用于止吐的崂百合提取物及其制备方法和应用，该崂百合提取物具有减少呕吐反应的功效。


背景技术：

2.癌症、放化疗、妊娠、晕动症、感染、脑病和手术后等可引起恶心呕吐，其中癌症放化疗呕吐有多种类型，其反应最为剧烈，导致电解质紊乱、营养不良及酸碱平衡紊乱等，患者因恶心呕吐而情绪沮丧焦虑，甚至抵触治疗，严重影响患者生存质量。临床常用化学止吐药主要有组胺、乙酰胆碱、多巴胺、nk1和5
‑
ht3受体拮抗剂等，剧烈呕吐常需配合能抑制免疫的糖皮质激素抑制呕吐。因化放疗可引起多种毒副反应，因而亟待天然低毒多靶点新型止吐药。
3.崂山百合(lilium tsingtauense gilg)(以下简称崂百合)仅产于山东青岛崂山及黄岛小珠山，是中国一种稀有植物，现已在海拔100米以下平原引种并获得成功。
4.近年百合科各种植物除用作食材外，用于食疗的医疗作用已被关注，尤其是百合提取物和百合提取物酚类等化合物已证明有多种生物活性，具有创制新药的价值。但迄今未见崂百合用于止吐的研究及应用。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于利用中国青岛独一无二的百合科新型天然植物，克服现有技术存在的缺点，寻求提供一种用于止吐的崂百合提取物及其制备方法和应用，该崂百合提取物能减少抗癌化疗药物所致呕吐的毒副作用并减少其它原因所致呕吐症状。
6.为了实现上述目的，本发明涉及一种用于止吐的崂百合提取物的制备方法，以崂百合的鳞茎(去除须根)、百合花和百合籽为原料，具体包括以下工艺步骤：
7.(1)制备崂百合乙醇提取物：取崂百合(包括鳞茎去除须根、百合花和百合籽)，用磨碎机粉碎后，将其置于重量百分比浓度为1
‑
99.7％的乙醇水溶液中，崂百合粉与乙醇水溶液的重量比为1：5
‑
30，匀浆2分钟(速度为1000r/min)，密封避光放置，使其在室温下发酵6小时后，离心5分钟(离心速度为3800r/min)，将上清液用双层滤纸抽滤得到滤液，收集崂百合渣待用；将滤液反复减压蒸馏，回收乙醇，蒸馏温度控制在28℃；蒸馏后的液体再离心5分钟(离心速度为3800r/min)，取上清液，即为崂百合醇提取物；
8.(2)制备崂百合水提取物：将步骤(1)的崂百合渣置于蒸馏水中浸泡30分钟，崂百合渣与蒸馏水的重量百分比为1：1
‑
50，再用加石棉网的电炉加热煎煮90分钟，然后绢布过滤煎煮后的崂百合水溶液，保存滤液，再向过滤后的药渣加入药渣重量6倍的蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，得到崂百合水提取物；
9.(3)将步骤(1)和步骤(2)得到的提取物混合，采用真空干燥箱减压干燥36小时，干燥温度为65
‑
75℃，即为崂百合提取物。
10.本发明涉及的用于止吐的崂百合提取物能够通过现有技术中的制剂工艺制成含
崂百合提取物的100
‑
500mg规格的胶囊，或按现有技术中的湿法制粒工艺制成含有崂百合提取物的500mg规格片剂或口含片，以便经口服用。
11.本发明还提供所述用于止吐的崂百合提取物在制备抗呕吐药物中的应用。
12.本发明与现有技术相比，发明人首次发现中国青岛独有的崂百合提取物具有止吐功效，并证实其对癌症等化学药物治疗引起的呕吐和其它类型的呕吐等毒副反应疗效显著；原料广泛，天然无毒，制备工艺简单，安全可靠，为中国青岛特产的崂百合作为天然止吐新型药物的研发和上市应用打下了基础。
具体实施方式：
13.下面通过具体实施例对本发明进行详细说明。
14.实施例1：
15.本实施例涉及一种用于止吐的崂百合提取物的制备方法，以崂百合的鳞茎(去除须根)、百合花和百合籽为原料，具体包括以下工艺步骤：
16.(1)制备崂百合醇提取物：取崂百合(包括鳞茎去除须根、百合花和百合籽)，用磨碎机粉碎后，将其置于重量百分比浓度为50％的乙醇水溶液中，崂百合粉与乙醇水溶液的重量比为1：20，匀浆2分钟(速度为1000r/min)，密封避光放置，使其在室温下发酵6小时后，离心5分钟(离心速度为3800r/min)，将上清液用双层滤纸抽滤得到滤液，收集崂百合渣待用；将滤液反复减压蒸馏，回收乙醇，蒸馏温度控制在28℃；蒸馏后的液体再离心5分钟(离心速度为3800r/min)，取上清液，即为崂百合醇提取物；
17.(2)制备崂百合水提取物：将步骤(1)的崂百合渣置于蒸馏水中浸泡30分钟，崂百合渣与蒸馏水的重量比为1：30，再用加石棉网的电炉加热煎煮90分钟，然后绢布过滤煎煮后的崂百合水溶液，保存滤液，再向过滤后的药渣加入药渣重量6倍的蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，得到崂百合水提取物；
18.(3)将步骤(1)和步骤(2)得到的提取物混合，采用真空干燥箱减压干燥36小时，干燥温度为65
‑
75℃，即为崂百合提取物。
19.实施例2：
20.本实施例涉及一种用于止吐的崂百合提取物的制备方法，以崂百合的鳞茎(去除须根)、百合花和百合籽为原料，具体包括以下工艺步骤：
21.(1)制备崂百合醇提取物：取崂百合(包括鳞茎去除须根、百合花和百合籽)，用磨碎机粉碎后，将其置于重量百分比浓度为1％的乙醇水溶液中，崂百合粉与乙醇水溶液的重量比为1：5，匀浆2分钟(速度为1000r/min)，密封避光放置，使其在室温下发酵6小时后，离心5分钟(离心速度为3800r/min)，将上清液用双层滤纸抽滤得到滤液，收集崂百合渣待用；将滤液反复减压蒸馏，回收乙醇，蒸馏温度控制在28℃；蒸馏后的液体再离心5分钟(离心速度为3800r/min)，取上清液，即为崂百合醇提取物；
22.(2)制备崂百合水提取物：将步骤(1)的崂百合渣置于蒸馏水中浸泡30分钟，崂百合渣与蒸馏水的重量比为1：1，再用加石棉网的电炉加热煎煮90分钟，然后绢布过滤煎煮后的崂百合水溶液，保存滤液，再向过滤后的药渣加入药渣重量6倍的蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，得到崂百合水提取物；
23.(3)将步骤(1)和步骤(2)得到的提取物混合，采用真空干燥箱减压干燥36小时，干
燥温度为65
‑
75℃，即为崂百合提取物。
24.实施例3：
25.本实施例涉及一种用于止吐的崂百合提取物的制备方法，以崂百合的鳞茎(去除须根)、百合花和百合籽为原料，具体包括以下工艺步骤：
26.(1)制备崂百合乙醇提取物：取崂百合(包括鳞茎去除须根、百合花和百合籽)，用磨碎机粉碎后，将其置于重量百分比浓度为99.7％的乙醇水溶液中，崂百合粉与乙醇水溶液的重量比为1：30，匀浆2分钟(速度为1000r/min)，密封避光放置，使其在室温下发酵6小时后，离心5分钟(离心速度为3800r/min)，将上清液用双层滤纸抽滤得到滤液，收集崂百合渣待用；将滤液反复减压蒸馏，回收乙醇，蒸馏温度控制在28℃；蒸馏后的液体再离心5分钟(离心速度为3800r/min)，取上清液，即为崂百合醇提取物；
27.(2)制备崂百合水提取物：将步骤(1)的崂百合渣置于蒸馏水中浸泡30分钟，崂百合渣与蒸馏水的重量百分比为1：50，再用加石棉网的电炉加热煎煮90分钟，然后绢布过滤煎煮后的崂百合水溶液，保存滤液，再向过滤后的药渣加入药渣重量6倍的蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，得到崂百合水提取物；
28.(3)将步骤(1)和步骤(2)得到的提取物混合，采用真空干燥箱减压干燥36小时，干燥温度为65
‑
75℃，即为崂百合提取物。
29.实施例4：
30.本实施例涉及一种含崂百合提取物的止吐药物，剂型为片剂，由以下成分构成：崂百合提取物100mg、乳糖250mg、微晶纤维素110mg、羧甲醛纤维素钙10mg、无水硅酸10mg、羧基丙酰纤维素15mg和硬脂酸镁5mg。
31.所述片剂的制备方法为：将崂百合提取物、乳糖、微晶纤维素、羧甲醛纤维素钙和无水硅酸均匀混合，然后用异丙醇溶解羧基丙酰纤维素，混合以上成分，用湿法制粒、干燥，整粒后与硬脂酸镁混合，压片，制成每片质量为500mg的片剂，每个片剂含崂百合提取物100mg。
32.实施例5：
33.本实施例涉及一种含崂百合提取物的止吐药物，剂型为胶囊，由以下成分构成：崂百合提取物100mg、药用淀粉395mg和硬脂酸镁5mg。
34.采用现有技术的胶囊制备工艺，将上述成分各自称重混合均匀，填充胶囊，制成每个质量为500mg的胶囊剂，每个胶囊中含崂百合提取物100mg。
35.实施例6：
36.本实施例涉及一种含崂百合提取物的止吐药物，剂型为口含片，由以下成分构成：崂百合提取物100mg、药用淀粉385mg、硬脂酸镁5mg和橙粉10mg。
37.采用现有技术的口含片制备工艺，将上述成分各自称重混合均匀，干燥，制成每个质量为500mg的口含片，每个口含片中含崂百合提取物100mg。
38.实施例7：
39.本实施例针对常用抗癌药物顺铂所致的呕吐，应用崂百合提取物进行治疗，相关药效学试验如下：
40.1、试验材料：
41.(1)崂百合，由青岛大学药学系技术室鉴定为百合科植物崂山百合。
42.(2)顺铂(cisplatin)，山东齐鲁制药厂生产。
43.(3)盐酸昂丹司琼注射液，奥赛康制药。
44.(4)健康成年水貂，体重(1.3
‑
1.8)kg，为避免雌性激素影响呕吐测定指标，均用雄性水貂，由青岛特种养殖动物饲养中心提供，每只动物单独置于75cm
×
50cm
×
50cm的铁笼中，24小时昼夜自然光照射，实验前自由进食饮水。
45.2、试验方法：
46.按照实施例1方法制备得到崂百合提取物。
47.将雄性水貂24只随机分为4组(n＝6)，构建顺铂(7.5mg
·
kg
‑1)呕吐模型，分别为对照组、昂丹司琼组、崂百合提取物低剂量组、崂百合提取物高剂量组。对照组给予生理盐水5ml灌胃；昂丹司琼组以昂丹司琼2mg
·
kg
‑1腹腔注射(ip)预处理；崂百合提取物低剂量组给予5g
·
kg
‑1灌胃预处理；崂百合提取物高剂量组给予10g
·
kg
‑1。给药30min后，各组动物均给予顺铂7.5mg
·
kg
‑1ip；观察水貂给药后6h内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期、干呕及呕吐次数，结果见表1。
48.3、试验结果：与对照组相比，崂百合提取物低、高剂量组均明显延长顺铂致呕水貂模型的呕吐潜伏期及呕吐次数(p﹤0.05，p﹤0.01)，崂百合提取物高剂量组能够减轻干呕次数(p﹤0.05)(见表1)。
49.表1崂百合在水貂顺铂(7.5mg
·
kg
‑1)呕吐模型的抑制作用
[0050][0051]
注：与对照组比较，
﹡
p＜0.05，
﹡﹡
p＜0.01
[0052]
实施例8：
[0053]
本实施例针对中枢性致吐药阿朴吗啡所致的呕吐，使用崂百合提取物进行给药治疗，相关药效学试验如下：
[0054]
1、试验材料：
[0055]
(1)崂百合，由青岛大学药学系技术室鉴定为百合科植物崂山百合。
[0056]
(2)盐酸阿朴吗啡，sigma生产。
[0057]
(3)健康成年水貂，体重(1.3
‑
1.8)kg，为避免雌性激素影响呕吐测定指标，均用雄性水貂，由青岛特种养殖动物饲养中心提供，每只动物单独置于75cm
×
50cm
×
50cm的铁笼中，24h昼夜自然光照射，实验前自由进食饮水。
[0058]
2、试验方法：
[0059]
按照实施例1方法制备得到崂百合提取物。
[0060]
构建阿扑吗啡所致呕吐模型，将雄性水貂18只随机分为三组，分别为对照组、崂百合提取物低剂量组和崂百合提取物高剂量组。对照组给予生理盐水5ml灌胃；崂百合提取物
低剂量组给予5g
·
kg
‑1灌胃预处理；崂百合提取物高剂量组给予10g
·
kg
‑1。给药30min后，各组动物给予阿扑吗啡0.25mg
·
kg
‑1ip，观察水貂给药后6h内的呕吐反应，记录呕吐潜伏期、干呕次数、呕吐次数，结果见表2。
[0061]
3、试验结果：与对照组相比，崂百合低、高剂量组均明显延长阿扑吗啡致呕水貂模型的呕吐潜伏期(p﹤0.05，p﹤0.01)，崂百合低、高剂量组均明显减轻干呕及呕吐次数(p﹤0.05，p﹤0.01)(见表2)。
[0062]
表2崂百合在阿朴吗啡(0.25mg
·
kg
‑1)水貂呕吐模型的抑制作用
[0063][0064]
注：与灌胃给药的空白对照组比较，﹡p＜0.05，﹡﹡p＜0.01
[0065]
试验例9：
[0066]
本实施例涉及实施例1制备的崂百合提取物的急性毒性试验，具体如下：
[0067]
1、试验动物：
[0068]
昆明种小鼠，雌雄兼用，体重(20
±
2)g，由青岛市药检所实验动物中心提供。
[0069]
2、药物：
[0070]
崂百合提取物、西黄蓍胶(常规急性毒性实验助溶辅料)。
[0071]
3、试验方法：
[0072]
按国家药品监督管理局“中药新药研究技术要求”，对崂百合进行急性毒性实验。因受药物浓度及体积限制，无法测定ld
50
，故进行最大给药量实验。取昆明种小鼠30只，雌性各半，ig，给予崂百合提取物，每只0.8ml，即小鼠的最大灌胃体积，用药后观察小鼠活动状态、饮食、粪便、呼吸、体重及死亡情况，连续观察14d。
[0073]
4.试验结果：
[0074]
小鼠灌胃给予崂百合提取物后生长良好，体重增加，行为正常，均未见死亡及明显反应。将动物处死后，肉眼观察各主要脏器无异常现象。
[0075]
综上所述，崂百合是世界独一无二的中国青岛特有的新型百合植物，其在外周和中枢致吐模型均有抗呕吐作用，其提取制备包括有机物乙醇和水，价廉易提取，但不限于乙醇和水这两种物质进行提取，在其它本发明说明的比例范围内和对药配比范围内的崂百合提取物制剂的制备。在两种呕吐动物模型和小鼠的安全性评价结果表明，本发明的崂百合最大剂量口服应用，对动物无明显损害，未发现崂百合对机体产生的毒性反应，说明崂百合的毒性很小，是一种安全可靠的天然医疗保健药物。