一种锦灯笼提取物的制备方法及其锦灯笼提取物和应用

1.本发明属于医药技术领域，尤其是涉及一种锦灯笼提取物的制备方法及其锦灯笼提取物和应用。


背景技术：

2.急性咽炎(acute pharyngitis,ap)是累及咽部黏膜、黏膜下组织及周围淋巴组织的急性炎症,属于自限性疾病，病情温和，但如果持续的未进行相关干预，可诱发一些严重的并发症诸如耳和鼻窦感染、心肌炎等。据目前最新的调查数据表明，全球范围内每年有6.16亿人罹患急性咽炎。目前主要用于炎症治疗的药物有糖皮质激素和非甾体类抗炎药，这些西药分别有着水钠潴留/胃肠道等副作用。而锦灯笼作为东北的特色中药，副作用小，具有很大的开发前景。
3.锦灯笼，又名红菇娘，酸浆属、茄科类，是一种从日本引进的红果酸浆(physalis alkekengi l.var.franchetii masf)。锦灯笼风味独特，具有很高的食用价值和药用价值，全身皆可入药，在《神农百草经》和《中华人民共和国药典》中均有提及。目前已有报导证实其具有抗炎、抗菌、抗肿瘤、强心、治疗乙肝等药理作用，如相关专利(长白山锦灯笼抗炎药物及其制备方法，cn1742875a；一种锦灯笼抗咽炎有效部位及其总甾体提取和精制的方法，cn105816569a)公开了锦灯笼在制备抗炎药物中的应用。而迄今为止只有上述两篇具体公开了锦灯笼提取物在制备抗咽炎药物领域应用的应用，且均只关注酸浆苦素a等总甾体类物质而忽略了锦灯笼含有的木犀草素等总黄酮类物质在制备抗炎药物方面的应用。目前尚未有相关文献报道或公开同时获得富含木犀草素等总黄酮类和酸浆苦素a等总甾体类的锦灯笼提取物。


技术实现要素：

4.发明目的：针对现有技术存在的提取的有效成分含量低、种类提取不完全等问题，本发明提供一种锦灯笼提取物的制备方法，本发明的制备方法可以高效的从新鲜的锦灯笼中提取酸浆苦素a等总甾体类及木犀草素等总黄酮类物质得到锦灯笼提取物。因此本发明的提取物可以在富含的两种药效成份的共同作用下，更充分的发挥锦灯笼抗炎作用。
5.本发明还提出一种锦灯笼提取物和应用。
6.技术方案：为了实现上述目的，本发明所述一种锦灯笼提取物的制备方法，包括如下步骤：
7.(1)以锦灯笼为原料，洗净并充分干燥后用打粉机打粉，过筛，混匀，作为待提粉；
8.(2)将步骤(1)所得的锦灯笼待提粉投入含复合酶、表面活性剂的提取溶剂中，调节ph，超声提取；
9.(3)将步骤(2)所得的提取液过滤，滤液减压浓缩后冻干，得到提取物a，滤渣干燥；
10.(4)将步骤(3)所得滤渣加入含抗氧化剂的水中，调节ph，回流提取；
11.(5)将步骤(4)所得的提取液过滤，滤液减压浓缩后冻干，得到提取物b；
12.(6)将步骤(3)所得提取物a步骤(5)所得提取物b混合均匀，即得锦灯笼提取物。
13.其中，步骤(1)所述的筛分粒径为80
‑
100目。
14.其中，步骤(2)所述的复合酶包括纤维素酶和木瓜蛋白酶，质量比例为0.5：1
‑
2：1，酶总用量为提取溶剂质量的1％
‑
3％，所述表面活性剂包括吐温
‑
80、司盘
‑
80或者triton x
‑
100，表面活性剂用量为提取溶剂体积的4
‑
6％，所述提取溶剂为浓度50％
‑
90％的乙醇水溶液，待提粉与提取溶剂料液比为1：12
‑
1：40(g/ml)。
15.其中，步骤(2)调节ph的范围为3
‑
5；超声功率为100
‑
200w，超声时间为20
‑
40min。
16.其中，步骤(4)所述抗氧化剂包括焦亚硫酸钠、亚硫酸钠或者硫代硫酸钠，抗氧化剂剂用量为滤渣质量的0.1
‑
0.5％；滤渣与提取溶剂的液比为1：12
‑
1：40(g/ml)。
17.其中，步骤(4)调节ph的范围为8
‑
12，60
‑
80℃回流提取时间为40min
‑
1.5h，提取次数为2
‑
3次，
18.本发明所述的锦灯笼提取物的制备方法所制备的锦灯笼提取物。
19.其中，所述锦灯笼提取物中提取物a为酸浆苦素a等甾体类，提取物b为木犀草素等黄酮类，锦灯笼提取物中含锦灯笼总甾体72.5％
‑
91.6％，锦灯笼总黄酮61.0％
‑
86.7％。
20.本发明中酸浆苦素a和木犀草素分别是锦灯笼中总甾体和总黄酮中的主要有效成分，通过测定总甾体和总黄酮的提取率来反应酸浆苦素a和木犀草素在不同条件下的提取情况。
21.本发明所述的锦灯笼提取物在制备抗炎症药物中的应用。
22.其中，所述炎症包括人急性咽炎，人慢性咽炎和人肠胃炎等。
23.机理：本发明在酶和超声的作用下可以充分破坏植物的细胞壁，同时在含表面活性剂的复合溶剂中，锦灯笼中的有效成份可以更充分的释放。同时在第一步中调节ph使得黄酮类成份的提取受到抑制而优先超声提取酸浆苦素类物质，随后再调节ph使已被预处理过后的锦灯笼滤渣能在水溶液中即可高效提取黄酮类物质，以节省资源。本发明利用的不同ph下锦灯笼不同有效成份的提取效率的不同，先在酸性条件下提取出酸浆苦素的同时，超声破坏了植物的细胞壁，有利于后续的黄酮类物质在水中的提取。
24.本发明第一步调ph是为了保护酸浆苦素的药效，第二步调ph是为了充分提取现有技术中未提取的木犀草素，同时经过超声处理后的锦灯笼药材，可在水溶液中实现总黄酮的碱提，减少乙醇使用。同时先超声后提取并引入酶的方法，能更有效的提取出含纤维较多的锦灯笼宿萼中的有效成分，且后续可采用水提方法，节约成本。
25.本发明制备方法所获得的锦灯笼提取物，同时富含抗菌的木犀草素和抗炎的酸浆苦素a，充分提高了锦灯笼的药效。
26.本发明创新开发了基于ph响应的酶催化混合溶剂超声
‑
水回流提取方法，先在酸性环境下提取酸浆苦素a，后在碱性环境下提取木犀草素，以更充分的提取锦灯笼中的两类抗炎物质，从而更好发挥锦灯笼这一特色药材在治疗炎症领域的应用。目前现有技术均无法高效的同时得到抗菌的木犀草素和抗炎的酸浆类物质。
27.本发明的提取过程中ph值的调整对整个体系十分重要，其不仅影响各物质的提取效果，同时还会影响各提取物的活性，本发明实验发现在特定提取方法下，采用特定的ph值效果最好，其中步骤(2)中调节ph为5，步骤(4)中调节ph为10。本发明中锦灯笼提取物中锦灯笼总甾体提取率随ph变化不大，锦灯笼总黄酮提取率随ph变化较大。若不对溶液ph进行
调节，不利于锦灯笼总黄酮的提取，如一直保持溶液ph为10时，可导致总甾体提取后总黄酮提取率下降，并且发现在碱性条件下提取的总甾体虽然提取率降低不多，但是活性受到了明显的影响，所以必须采用酸性条件(ph 3
‑
5)提取总甾体，再采用碱性条件(ph 8
‑
12)提取总黄酮。
28.此外，本发明中必须先按特定的方法提取酸浆苦素a等甾体类，再以提取酸浆苦素a等甾体类中形成的滤渣为原料按特定的方法提取物b为木犀草素等黄酮类才能高效的得到酸浆苦素a等甾体类、木犀草素等黄酮类，有效节约原料和试剂；而以锦灯笼的粉末为原料按同样的方法进行分开提取效果反而不好，得到的木犀草素等黄酮类含量较低，并且容易浪费原材料。
29.有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点：
30.(1)本发明所选用材料为锦灯笼，锦灯笼为药食同源材料，本发明充分利用原料的入药部分，提取率高，提取粉易保存，提取过程绿色卫生，适合工业化大生产，大大提高了锦灯笼经济效益；
31.(2)本发明的产品富含丰富的酸浆苦素a和木犀草素，具有显著的抗炎效果，可单独作为有效成分或者与其他化合物组合使用，同时配以临床上接受的辅料，制成相应的口服制剂或非口服制剂用于炎症的治疗。
32.(3)本发明提出了一种新的提取方法，即在复合酶的参与下超声提取一段时间可以使细胞壁疏松、破裂，减小传质阻力，从而使被细胞壁包裹的有效成分得到充分释放；同时加入一定量的表面活性剂可使液体介质的表面张力和粘度降低、扩散系数增大；在不同的ph的响应作用下，同时提取得到两类抗炎物质，且可减少乙醇的使用。本发明的锦灯笼总甾体提取率可高达72.5％
‑
91.6％，总黄酮提取率可达61.0％
‑
86.7％。
附图说明
33.图1为本发明的提取物对急性咽炎小鼠咽部组织的伊文思蓝染色；
34.图2为本发明的提取物对急性咽炎小鼠咽部组织的伊文思蓝渗漏量紫外定量图。
具体实施方式
35.为了使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步说明本发明，并不以任何方式限制本发明，这些实施例只用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在不背离本发明的技术解决方案的前提下，对本发明所做的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。
36.下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂家建议的条件。
37.复合酶中纤维素酶和木瓜蛋白酶均购买于阿拉丁，其中纤维素酶10000u/g、木瓜蛋白酶2000u/mg。
38.实施例中对锦灯笼中总黄酮进行测定，按照文献：廖梅.复方锦灯笼片的制备工艺及总黄酮的含量测定[j].广东化工,2020,47(15):159
‑
161。
[0039]
实施例中对锦灯笼中总甾体进行测定，按照文献：廖梅.锦灯笼中总酸浆苦素的含量测定及其质量评价[j].山东化工,2020,49(16):88
‑
91
[0040]
对实施例中酸浆苦素a含量进行测定，按照文献：邹兵,袁野,周翎,许枬.hplc法测定锦灯笼中酸浆苦素类成分的含量[j].中国药房,2011,22(15):1393
‑
1395。
[0041]
对实施例中木犀草素含量进行测定，按照文献：闫平,何昊,姚奕,梁康,刘静,薛鹏燕.超声酶法对锦灯笼中黄酮和木犀草素提取工艺的优化[j].现代中药研究与实践,2018,32(04):40
‑
43+48。
[0042]
实施例1
[0043]
以锦灯笼为原材料，按照以下工艺制备锦灯笼总甾体提取物
[0044]
(1)以锦灯笼为原料，洗净并充分干燥后用打粉机打粉，过80目筛，混匀，作为待提粉；
[0045]
(2)将锦灯笼待提粉按料液比1：20mg/ml投入质量分数70％的乙醇溶液中，乙醇溶液中含体积分数5％的吐温
‑
80，质量分数2％的复合酶，复合酶中纤维素酶和木瓜蛋白酶质量比例为1：1；采用ph为1的盐酸溶液调节混合溶液ph为5，在功率为150w条件下超声提取30min；
[0046]
(3)将步骤(2)所得的提取液抽滤，滤液减压浓缩后冻干，得到酸浆苦素a等总甾体提取物，提取率为91.6％，含酸浆苦素a量为2.18mg/g，滤渣干燥。
[0047]
实施例2
[0048]
以锦灯笼为原材料，按照以下工艺制备锦灯笼总甾体提取物
[0049]
(1)以锦灯笼为原料，洗净并充分干燥后用打粉机打粉，过80目筛，混匀，作为待提粉；
[0050]
(2)将锦灯笼待提粉按料液比1：12mg/ml投入质量分数90％的乙醇溶液中，乙醇溶液中含体积分数4％的司盘
‑
80，质量分数1％的复合酶，复合酶中纤维素酶和木瓜蛋白酶质量比例为1：2；盐酸溶液调节混合溶液ph为3，在功率为100w条件下超声提取20min；
[0051]
(3)将步骤(2)所得的提取液抽滤，滤液减压浓缩后冻干，得到酸浆苦素a等总甾体提取物，提取率为72.5％，滤渣干燥。
[0052]
实施例3
[0053]
以锦灯笼为原材料，按照以下工艺制备锦灯笼总甾体提取物
[0054]
(1)以锦灯笼为原料，洗净并充分干燥后用打粉机打粉，过80目筛，混匀，作为待提粉；
[0055]
(2)将锦灯笼待提粉按料液比1：40mg/ml投入质量分数50％的乙醇溶液中，乙醇溶液中含体积分数6％的triton x
‑
100，质量分数3％的复合酶，复合酶中纤维素酶和木瓜蛋白酶质量比例为2：1；盐酸溶液调节混合溶液ph为4，在功率为200w条件下超声提取40min；
[0056]
(3)将步骤(2)所得的提取液抽滤，滤液减压浓缩后冻干，得到酸浆苦素a等总甾体提取物，提取率为82.4％，滤渣干燥。
[0057]
试验例1
[0058]
采用实施例1的制备方法，步骤(2)中采用不同含量的复合酶，0.5％、1％、2％、3％、3.5％；提取率见表1。
[0059]
表1
[0060][0061]
本发明试验例考察结果选用2％的质量比例为1：1的纤维素酶和木瓜蛋白酶用量相较无酶的提取方法提取率提高显著，主要原因在于初期随着酶用量的增加，有利于酶与药材的相互接触从而发挥作用，而随着酶用量的提升到饱和时，一方面导致接触几率降低，同时酶之间存在着竞争性抑制的关系，故本发明优选2％的质量比例为1：1的纤维素酶和木瓜蛋白酶作为复合酶的用量，并且酶量过高过低效果均不好。
[0062]
实施例4
[0063]
以实施例1所得的干燥后滤渣为原材料，按照以下工艺制备锦灯笼总黄酮提取物
[0064]
(1)将实施例1所得滤渣按料液比1：40mg/ml投入水中，水溶液中含质量分数0.1％的亚硫酸钠；氢氧化钠溶液调节混合溶液ph为10，将混合溶液80℃回流提取1.5h，一共重复提两次。
[0065]
(2)将步骤(1)所得的提取液抽滤，滤液减压浓缩后冻干，得到木犀草素等总黄酮类提取物，总黄酮提取率为86.7％，含木犀草素量为1.63mg/g。
[0066]
试验例2
[0067]
采用实施例4的制备方法，步骤(1)中采用不同抗氧化剂，焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、硫代硫酸钠以及不加抗氧化剂以水代替；提取率见表2。
[0068]
表2
[0069][0070]
本试验例考察结果选用亚硫酸钠作为锦灯笼总黄酮类提取物的抗氧化剂相较于无抗氧化剂时提取率提高显著。
[0071]
试验例3
[0072]
以实施例1所得的干燥后滤渣为原材料，按照以下步骤考察锦灯笼总黄酮提取物的制备工艺
[0073]
按料液比1：12
‑
40mg/ml投入水中；水溶液中含质量分数0.1％的亚硫酸钠；调节混合溶液ph为8
‑
12，将混合溶液回流提取40min
‑
1.5h，一共提两次。结果见表3
‑
4。
[0074]
表3提取所考察的因素和水平如表
[0075][0076]
表4正交实验结果
[0077][0078]
注：k为平均因素水平
[0079]
由极差r分析可知，四种因素对锦灯笼木犀草素等总黄酮类的提取率影响顺序为：料液比＞ph＞提取时间，并且由正交表可知最佳组合为a3b3c2。即最优选地组合为实施例1
所得滤渣作为提取原料，与40倍的水溶液混合，加入0.1％的亚硫酸钠，并用氢氧化钠溶液调节混合溶液ph为10，将混合溶液80℃回流提取1.5h，一共提两次。将所得的提取液抽滤，滤液减压浓缩后冻干，得到木犀草素等黄酮类提取物。
[0080]
试验例4
[0081]
以实施例1制得的待提粉和滤渣，采用实施例4的方法进行提取，得到木犀草素等总黄酮类提取物，计算提取率，结果如表5。
[0082]
表5
[0083][0084][0085]
本试验例锦灯笼总黄酮提取物的原料影响考察，结果表明相同质量的锦灯笼待提粉经实施例1处理后，可显著提高木犀草素等总黄酮类提取物提取率，并能对锦灯笼原料进行充分利用，并将该试验例下的滤渣提取所得的锦灯笼提取物用于后续药效学实验。
[0086]
试验例5
[0087]
以实施例1制得的滤渣，采用实施例4的方法进行提取，但将提取溶剂水替换成体积分数70％的乙醇溶液，得到木犀草素等总黄酮类提取物，计算提取率，结果如表6。
[0088]
表6
[0089][0090]
本试验例锦灯笼总黄酮提取物的提取溶剂影响考察，结果表明在经实施例1方法处理后的锦灯笼，水提相较醇提而言效率明显较好，可采用水提的方式提取锦灯笼总黄酮不仅效率高，而且节省资源。
[0091]
试验例6
[0092]
锦灯笼待提粉采用实施例1的方法进行提取后，再取滤渣按实施例4的方法进行提取。两次提取过程中均调节溶液ph分别为4、7、10，各ph条件下的提取液混匀后，浓缩，冻干，得到锦灯笼提取物，计算提取率。结果如表7。
[0093]
表7
[0094][0095][0096]
表7说明，本试验例锦灯笼提取物中锦灯笼总甾体提取率随ph变化不大，锦灯笼总黄酮提取率随ph变化较大。同时表明若不对溶液ph进行调节，不利于锦灯笼总黄酮的提取。并且后续试验例7发现在碱性条件下提取的总甾体虽然提取率降低不多，但是活性受到了明显的影响，同时总黄酮的提取率相较实施例4也有所下降。所以必须采用酸性条件提取总甾体，一方面防止总甾体活性受损失，另一方面提高后续总黄酮的提取率，再采用碱性条件提取总黄酮。此外，第一次提取时ph为7，第二次提取时ph为10，总黄酮提取率为78.3％，相较实施例4而言仍有所下降，说明第一次提取时调节ph为酸性是必要的。
[0097]
取按实施例1的制备方法，其中改用ph为10时提取的锦灯笼总甾体提取物适量作为锦灯笼提取物a，及调节ph分别为4、7、10时所得锦灯笼提取物适量作为锦灯笼提取b、c、d用于实施例7。
[0098]
实施例7
[0099]
药效学实验
[0100]
1、体内抗咽炎作用实验方案如下：
[0101]
取icr小鼠60只，雄性，体重30
±
2g，分为10组，每组6只。各组小鼠分别为空白组、模型组、锦灯笼提取物组1、锦灯笼提取物组2、锦灯笼提取物组3、锦灯笼提取物组4、锦灯笼提取物组5、锦灯笼提取物组6、锦灯笼提取物组7、阳性对照组。
[0102]
采用喉头喷雾器连续3天朝小鼠咽部喷质量分数为7.5％的氨水，每日一次，每次两钦，制备急性咽炎小鼠模型，空白组喷生理盐水。
[0103]
取实施例1的锦灯笼提取物冻干粉适量、实施例4的锦灯笼提取物冻干粉适量、试验例6中锦灯笼提取物a、b、c、d，将上述6组分别用生理盐水(0.9％的氯化钠溶液)配制成药液，锦灯笼组1药液(实施例1总甾体)、锦灯笼提取物组2药液(实施例2总黄酮)、锦灯笼提取物组3药液(提取物a，ph为10时提取的总甾体)、锦灯笼提取物组4药液(提取物b，两次提取ph均为4提取)、锦灯笼提取物组5药液(提取物c，两次提取ph均为7提取)、锦灯笼提取物组6药液(提取物d，两次提取ph均为10提取)。同时将实施例1和实施例4的提取物冻干粉按质量比1：1比例混合均匀，用生理盐水配制成锦灯笼提取物组7药液(本发明的锦灯笼提取物)。
[0104]
对各组进行灌胃，分别为生理盐水、锦灯笼提取物组1药液、锦灯笼提取物组2药液、锦灯笼提取物组3药液、锦灯笼提取物组4药液、锦灯笼提取物组5药液、锦灯笼提取物组
6药液、锦灯笼提取物组7药液，各药液组按提取物1.2g/kg小鼠体重灌胃，生理盐水与各药液等体积灌胃，同时按5mg/kg小鼠体重灌胃的地塞米松溶液。连续7天，每天两次，并每天记录小鼠体重变化。
[0105]
于治疗结束后一天，各组小鼠尾静脉注射1.2％的伊文思蓝溶液0.1ml，于1h后处死，将小鼠仰卧固定在手术台上，剪刀剪去小鼠下颌骨至颈部的被毛，用手术刀沿中线划开下颌骨至颈部的皮肤，并用镊子向两侧分离。钝性分离颈部肌肉，用剪刀剪去暴露出的下颌骨关节连接，向下掀开下颌骨，暴露出小鼠硬腭、咽部及会厌。拍照记录并记录小鼠咽部组织伊文思蓝渗漏情况。
[0106]
在手术显微镜的辅助下，小心取出小鼠咽部黏膜组织并加入1ml的甲酰胺溶液中，放入37℃培养箱中保温24h，于620nm处测定紫外吸收。
[0107]
精密称取8mg伊文思蓝溶于10ml甲酰胺中，配置成0.8mg/ml的伊文思蓝母液。将母液稀释10倍后，倍比稀释配置伊文思蓝
‑
甲酰胺标准溶液，于620nm处测定吸光值，确定标准曲线。
[0108]
2、实验结果
[0109]
小鼠经造模后，与空白组相比进食、饮水量下降，精神萎靡，活动不振，颈部被毛因搔抓明显脱落，可观察到明显咳喘、咽部红肿及体重显著下降现象，说明通过氨水刺激小鼠咽部制造急性咽炎模型成功。
[0110]
在经过锦灯笼提取或地塞米松治疗后的小鼠，与模型组相比，身体状况得到极大的改善。体重回升明显，进食、饮水量大幅增加，颈部被毛茂盛，无明显咳喘，咽部组织不再出现红肿情况。各组小鼠造模后及治疗7天后体重变化情况如下表6所示：
[0111]
表8各组小鼠造模后及治疗后体重变化情况
[0112][0113][0114]
与模型对照组相比较，*p＜0.05
[0115]
钝性分离颈部肌肉，用剪刀剪去暴露出的下颌骨关节连接，向下掀开下颌骨，暴露出小鼠硬腭、咽部及会厌。空白组咽部被均匀染成浅蓝色，无伊文思蓝渗漏情况，模型组因为咽部黏膜受炎症影响出现损伤，上皮细胞脱落，可见明显伊文思蓝渗漏。锦灯笼组和地塞米松组相对于模型组咽部黏膜上皮细胞完整，无明显染液渗漏(渗漏量越多代表粘膜受损越严重，炎症情况越深)。空白组、模型组、锦灯笼提取物组7和地塞米松组伊文思蓝染色情况如图1所示，各组小鼠伊文思蓝渗漏量如表9、图2所示。
[0116]
各组小鼠伊文思蓝渗漏量如表9所示。
[0117]
表9各组小鼠咽部伊文思蓝(eb)渗漏量
[0118][0119]
与模型对照组相比，*p＜0.05
[0120]
上述表8、表9的试验结果表明，本发明制备的7种锦灯笼提取物均有明显的抗炎效果。锦灯笼提取物组1和组3相比结果表明，在碱性环境下，锦灯笼酸浆苦素的抗炎活性受到明显抑制，说明本发明不适合在碱性条件下提取总酸浆苦素a等总甾体类会导致活性的显著降低。锦灯笼提取物组1、组2和组7相比，结果表明，在酸浆苦素a等总甾体类物质和木犀草素等总黄酮类物质的共同参与下，相比单独的酸浆苦素a等总甾体类物质和单独的木犀草素等总黄酮类物质具有明显更好的抗炎效果。锦灯笼提取物组4、组5、组6和组7相比，结果表明，不对溶液ph进行调节，或者各个提取过程中溶液ph为碱性、中性或者酸性，同时提取两类物质的药效，均不如本发明制备的锦灯笼提取物组7，原因与锦灯笼总黄酮的提取率较低、酸浆苦素a活性受到抑制等有关。因此说明本发明制备的富含酸浆苦素a和木犀草素的锦灯笼提取物，只有按照本发明的特定的方法进行提取的提取物，才可实现对急性咽炎小鼠的最佳治疗效果，具有显著的抗炎效果，适用于缓解咽炎等口腔疾病。