蛋白质岩藻糖基化抑制剂及其用途

本发明涉及蛋白质岩藻糖基化抑制剂。更具体地，本发明涉及可用作蛋白质岩藻糖基化抑制剂的碳环化合物。

背景技术：

1、岩藻糖基化是一种常见的修饰，涉及在岩藻糖基转移酶(futs)的催化下，将岩藻糖残基从gdp-岩藻糖转移到n-聚糖、o-聚糖或糖脂，futs催化岩藻糖的转移如下：fut 1和2催化α1，2-键；fut3至7和fut9至11催化α1，3-键；fut3和fut5催化α1，4-键；fut8催化α1，6-键(“核心岩藻糖基化”)；pofut1催化与egf样重复序列的丝氨酸/苏氨酸残基的直接连接；并且pofut1催化与血小板反应蛋白重复序列的丝氨酸/苏氨酸残基的直接连接。岩藻糖基化涉及多种细胞过程。

2、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)涉及免疫系统的效应细胞对细胞的选择性靶向和裂解。adcc对于抗癌抗体的功效至关重要，并且由抗体的fc区与效应自然杀伤(nk)细胞上的fc受体(fcγr)的结合以及抗体与癌细胞上的膜暴露抗原之间的结合介导。大多数食品和药物管理局(fda)批准的单克隆抗体是igg1同种型，并且在其fc区中掺入两个n-连接的复合寡糖。通过循环非特异性竞争结合效应nk细胞上的fcγr的iggs来减弱抗癌抗体的adcc。为了克服此限制，已探索聚焦于改变抗体fc区中的n-聚糖结构的若干策略。最值得注意的是，发现岩藻糖缺陷型(fd)抗体的产生改善了与fcγr的结合并导致adcc的显著增加(～50倍)。因此，对开发岩藻糖缺陷型(fd)抗体存在兴趣。fd-抗体的产生可以通过小分子抑制或遗传敲除参与岩藻糖基化的关键酶(例如gdp-甘露糖脱水酶(gmd)、gdp-岩藻糖合酶(gfs)或fut8)来实现。一种或多种这些酶的小分子抑制剂提供了明显的优势，因为不需要昂贵且耗时的细胞系工程化，并且对现有制造过程的破坏最小化。

3、抗体岩藻糖基化的几种碳水化合物抑制剂已证明可用作fd抗体生产中的添加剂，然而，这些碳水化合物抑制剂本身不同程度地掺入抗体n-聚糖中。此类抑制剂可能存在显著的药物一致性风险并且可能是免疫原性的。

技术实现思路

1、本发明涉及蛋白质岩藻糖基化抑制剂。更具体地，本发明涉及可用作蛋白质岩藻糖基化抑制剂的碳环化合物。

2、在一个方面，本发明提供了抑制蛋白质或其片段或衍生物的岩藻糖基化的方法，其通过使真核细胞或哺乳动物与式(i)化合物或其盐接触：

3、

4、其中，

5、r1是任选取代的c1-c10烷基、任选取代的c1-c10烯基或任选取代的c1-c10炔基；

6、r2是h或-c(＝o)(c1-c6)烷基；

7、r3是卤素、oh或o-c(＝o)(c1-c6)烷基；以及

8、r4是h、–c(＝o)(c1-c6)烷基、或-p(＝o)(or5)(or6)，其中，r5和r6各自独立地为h、(c1-c6)烷基、(ch2)2sc(＝o)ch3、ch2oc(＝o)or7或ch2oc(＝o)r7，其中r7是c1-c8烷基、或其中r5和r6连接形成环，

9、其中相对于不施用化合物时蛋白质的岩藻糖基化的量，真核细胞或哺乳动物中蛋白质的岩藻糖基化降低至少5％。

10、在一些实施方案中，蛋白质可以是n-聚糖。

11、在一些实施方案中，化合物可以不掺入n-聚糖中。

12、在一些实施方案中，蛋白质可以是抗体。

13、在一些实施方案中，r1可以是ch3或chch2，r2可以是h，r3可以是oh，和r4可以是h或-p(＝o)(or5)(or6)，其中r5和r6可以是h。

14、在一些实施方案中，所述化合物可以是

15、

16、在一些实施方案中，哺乳动物可能患有癌症、自身免疫疾病、炎性疾病或传染病。

17、在一些实施方案中，所述方法可以进一步包括将癌症相关抗原或其抗原性片段作为免疫原给予患有癌症的哺乳动物。

18、在一些实施方案中，哺乳动物可以是人。

19、在一些实施方案中，盐可以是药学上可接受的盐。

20、另一方面，本发明提供哺乳动物细胞培养基，其包含有效量的式(i)化合物或其盐：

21、

22、其中，

23、r1是任选取代的c1-c10烷基、任选取代的c1-c10烯基或任选取代的c1-c10炔基；

24、r2是h或-c(＝o)(c1-c6)烷基；

25、r3是卤素、oh或o-c(＝o)(c1-c6)烷基；以及

26、r4是h、–c(＝o)(c1-c6)烷基、或-p(＝o)(or5)(or6)，其中，r5和r6各自独立地为h、(c1-c6)烷基、(ch2)2sc(＝o)ch3、ch2oc(＝o)or7或ch2oc(＝o)r7，其中r7是c1-c8烷基、或其中r5和r6连接形成环。

27、在一些实施方案中，所述培养基可用于生产岩藻糖缺陷型蛋白质或其片段或衍生物。

28、在一些实施方式中，有效量可以是化合物的量，其足以将岩藻糖掺入岩藻糖缺乏的蛋白质或其片段或衍生物的糖链中减少至少50％。

29、在一些实施方案中，培养基可以是中国仓鼠卵巢细胞培养基。

30、在另一方面，本发明提供了治疗癌症、自身免疫性疾病、传染病、炎性疾病或镰状细胞病的方法，其通过给予有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐：

31、

32、其中，

33、r1是任选取代的c1-c10烷基、任选取代的c1-c10烯基或任选取代的c1-c10炔基；

34、r2是h或-c(＝o)(c1-c6)烷基；

35、r3是卤素、oh或o-c(＝o)(c1-c6)烷基；以及

36、r4是h、–c(＝o)(c1-c6)烷基、或-p(＝o)(or5)(or6)，其中，r5和r6各自独立地为h、(c1-c6)烷基、(ch2)2sc(＝o)ch3、ch2oc(＝o)or7或ch2oc(＝o)r7，其中，r7是c1-c8烷基、或其中r5和r6连接形成环，给有需要的哺乳动物。

37、在另一个方面，本发明提供式(i)化合物或其药学上可接受的盐的应用：

38、

39、其中，

40、r1是任选取代的c1-c10烷基、任选取代的c1-c10烯基或任选取代的c1-c10炔基；

41、r2是h或-c(＝o)(c1-c6)烷基；

42、r3是卤素、oh或o-c(＝o)(c1-c6)烷基；以及

43、r4是h、–c(＝o)(c1-c6)烷基、或-p(＝o)(or5)(or6)，其中，r5和r6各自独立地为h、(c1-c6)烷基、(ch2)2sc(＝o)ch3、ch2oc(＝o)or7或ch2oc(＝o)r7，其中，r7是c1-c8烷基、或其中r5和r6连接形成环，

44、用于抑制蛋白质或其片段或衍生物的岩藻糖基化，其中相对于不存在蛋白质的岩藻糖基化的量，所述蛋白质的岩藻糖基化在所述真核细胞或哺乳动物中减少至少5％，或用于治疗癌症、自身免疫性疾病、传染病、炎性疾病或镰状细胞病。

45、在另一个方面，本发明提供了式(ii)所示的化合物或药学上可接受的盐：

46、

47、其中，

48、r1是任选取代的c1-c10烷基、任选取代的c1-c10烯基或任选取代的c1-c10炔基；

49、r2是h或-c(＝o)(c1-c6)烷基；

50、r3是卤素、oh或o-c(＝o)(c1-c6)烷基；以及

51、r4是h、–c(＝o)(c1-c6)烷基、或-p(＝o)(or5)(or6)，其中，r5和r6各自独立地为h、(c1-c6)烷基、(ch2)2sc(＝o)ch3、ch2oc(＝o)or7或ch2oc(＝o)r7，其中，r7是c1-c8烷基、或其中r5和r6连接形成环，其中r1是ch3，r2不是h，r3不是oh，和r4不是h。

52、在另一方面，本发明提供了包含式ii化合物的组合物。

53、本发明的概述不一定描述本发明的所有特征。