包含芪类化合物的抗球虫组合物及其用途的制作方法

相关申请的交叉引用本技术要求基于2020年9月25日提交的韩国专利申请第10-2020-0125242号的优先权的权益，并且相应的韩国专利申请文件中公开的全部内容并入作为本说明书的一部分。本技术涉及一种包含芪类化合物的抗球虫组合物及其用途。

背景技术：

1、球虫病(coccidiosis)是一种肠道相关的疾病，由称为艾美耳球虫属(eimeria)的属于顶复门原虫(phylum apicomplexan)的原生动物寄生虫引起，并且当感染球虫病时，会出现消化系统紊乱、腹泻和体重减少的症状，此外还会导致家畜死亡。因此，球虫病对全世界的农场产生了重大的经济影响(williams rb.用于估计世界的养鸡业的球虫病花费的分区模型(a compartmentalised model for the estimation of the cost ofcoccidiosis to the world’s chicken production industry)，int j parasitol，1999年；29(8)：1209-1229)。

2、在过去的几年中，许多研究人员开发了抗球虫剂作为治疗球虫病的治疗剂，该抗球虫剂例如离子载体或化学合成的化合物可以阻止原生动物的卵囊细胞壁的形成或无性和有性繁殖。然而，由于长期使用交替地处理出现的离子载体和化学合成的化合物等的穿梭程序，发生了具有耐药性的原生动物的出现等副作用。

3、特别是，由于误用和滥用抗生素使抗生素在动物中积累是严重的问题，因为人类通过肉类食用抗生素，因此，由于畜产品中的抗生素残留问题，世界上许多国家正在禁止施用抗生素。因此，迫切需要开发和研究常规抗球虫剂的替代品，所述常规抗球虫剂表现出副作用，例如耐药菌株的出现和内部残留。

4、因此，本技术的发明人通过证实芪类化合物具有优异的抗球虫活性和对表现球虫病的原生动物的抗原生动物活性而完成了本发明。

5、现有技术

6、专利文献

7、(专利文献1)美国专利公开号2008-0160000

技术实现思路

1、技术问题

2、本技术的一种实施方式提供一种用于预防或缓解球虫病的饲料组合物，包含以下化学式1的化合物或其盐作为活性成分。

3、本技术的另一种实施方式提供一种用于预防或治疗球虫病的药物组合物，包含以下化学式1的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。

4、本发明的其他实施方式提供一种抗艾美耳球虫属(eimeria sp.)原生动物的抗原生动物组合物，包含以下化学式1的化合物或其盐作为活性成分。

5、本技术的其他实施方式提供一种用于预防、缓解或治疗球虫病的方法，包括将所述组合物给药于除人以外的动物的步骤。

6、本技术的其他实施方式提供一种以下化学式1的化合物或其盐用于预防、缓解或治疗球虫病的用途。

7、本技术的其他实施方式提供一种以下化学式1的化合物或其盐在制备用于预防或缓解球虫病的饲料组合物中的用途。

8、本技术的其他实施方式提供一种以下化学式1的化合物或其盐在制备用于预防或治疗球虫病的药物组合物中的用途。

9、本技术的其他实施方式提供一种以下化学式1的化合物或其盐在制备用于预防、缓解和/或治疗球虫病的组合物(例如，饲料组合物、药物组合物)或制备抗原生动物组合物中的用途；化学式1的化合物或其盐用于预防、缓解和/或治疗球虫病的用途；和/或化学式1的化合物或其盐用于对抗艾美耳球虫属原生动物的抗原生动物(例如，杀伤艾美耳球虫属原生动物；和/或抑制艾美耳球虫属原生动物的细胞侵袭和/或增殖)的用途。

10、技术方案

11、本技术涉及一种提供具有预防、缓解或治疗球虫病活性的芪类化合物作为活性成分的技术。在一种实施方式中，所述芪类化合物可以是以下化学式1的化合物。

12、一方面，可以提供一种用于预防或缓解球虫病的饲料组合物，包含以下化学式1的化合物或其盐。

13、[化学式1]

14、

15、在化学式1中，

16、r1和r2可以各自独立地是oh或och3。

17、在一种实施方式中，r1和r2可以各自是och3。

18、在另一种实施方式中，r1和r2可以各自是oh。

19、在另一种实施方式中，r1可以是oh，且r2可以是och3。

20、在一种实施方式中，化学式1的化合物可以是选自由以下化合物所组成的组中的化合物：

21、1)3,5-二甲氧基-4'-羟基芪；

22、2)3,4,5-三羟基芪，以及

23、3)3-甲氧基-4',5-二羟基-反式-芪。

24、3,5-二甲氧基-4'-羟基芪具有化学式c16h16o3，并且可以命名为紫檀芪(pterostilbene)，是具有以下化学式2的结构的化合物，并且可以是cas no.537-42-8。

25、[化学式2]

26、

27、3,4,5-三羟基芪具有化学式c14h12o3，并且可以命名为白藜芦醇(resveratrol)，是具有以下化学式3的结构的化合物，并且可以是cas no.503-36-0。

28、[化学式3]

29、

30、3-甲氧基-4',5-二羟基-反式-芪具有化学式c15h14o3，并且可以命名为松芪(pinostilbene)，是具有以下化学式4的结构的化合物，并且可以是cas no.42438-89-1。

31、[化学式4]

32、

33、所述化学式1的化合物或其盐可以作为市售品购买，或可以通过从天然产物或菌株中提取和分离获得，并通过常用的有机合成方法制备，但不限于此。

34、例如，其可以从属于埃希氏杆菌属(escherichia)、酵母菌属(saccharomyces)、棒状杆菌属(corynebacterium)的物种直接分离获得，或者从本领域的制造商处获得，但不限于此。

35、因此，本技术的发明人已经证实所述芪类化合物对原生动物表现出抗球虫活性以及对球虫病具有优异的抗原生动物活性，从而完成了本发明。

36、在本技术中的“化学式1的化合物的盐”可以指在阳离子和阴离子是通过静电引力结合的物质的盐中生理上可接受的盐，例如，可以指饲料组合物可接受的盐、药学上可接受的盐和/或抗原生动物组合物可接受的盐。例如，盐可以是选自由金属盐、与有机碱的盐、与无机酸的盐、与有机酸的盐、与碱性或酸性氨基酸的盐等所组成的组中的至少一种。在一种实施方式中，金属盐可以是选自由碱金属盐(钠盐、钾盐等)、碱土金属盐(钙盐、镁盐、钡盐等)、铝盐等所组成的组中的至少一种；与有机碱的盐可以是选自由与三乙胺、吡啶、甲基吡啶、2,6-二甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、环己胺、二环己胺、n,n-二苄基乙二胺等的盐所组成的组中的至少一种；与无机酸的盐可以为选自由盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等所组成的组中的至少一种；与有机酸的盐可以是选自由与甲酸、乙酸、三氟乙酸、邻苯二甲酸、富马酸、草酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等的盐所组成的组中的至少一种；与碱性氨基酸的盐可以是选自由与精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸等的盐所组成的组中的至少一种；和与酸性氨基酸的盐可以是选自由与天冬氨酸、谷氨酸等的盐所组成的组中的至少一种。

37、在本技术中，优异的抗球虫病功效(活性，作用)可以指选自由以下(1)～(5)所组成的组中的至少一种(例如，任何一种、两种以上、三种以上或全部)：

38、(1)与对照组相比，较高的抗球虫病指数(aci)；

39、(2)当对球虫病-诱导的动物受试者给药时，与对照组相比死亡率降低、病变评分(例如，阑尾病变评分)降低和/或粪便卵囊排泄量降低；

40、(3)通过球虫病的诱导而抑制体重减少；

41、(4)与对照组相比，对诱导球虫病的原生动物的杀虫活性较高；以及

42、(5)与对照组相比，诱导球虫病的原生动物的细胞侵袭的抑制作用更高，和/或在细胞中所述原生动物的增殖的抑制作用更高。

43、在本技术中，所述对照组可以指阴性对照组(没有任何处理的组或用水和/或缓冲液处理的组)和/或包含常规已知的抗球虫剂(例如，地克珠利(diclazuril)、盐霉素和/或没食子酸)的阳性对照组。

44、根据一种实施方式的组合物可以具有选自由以下(1)～(6)所组成的组中的至少一种(例如，一种以上、两种以上、三种以上、四种以上、五种以上或全部的六种)特征，并且其特征可以比对照组更优异：

45、(1)优异的抗球虫活性；

46、(2)优异的抗诱发球虫病的原生动物的抗原生动物作用；

47、(3)优异的耐酸性；

48、(4)优异的耐热性；

49、(5)优异的体内稳定性和/或安全性；以及

50、(6)优异的体重增加改善作用。

51、根据一种实施方式的组合物具有优异的耐酸性和/或耐热性，从而当对身体给药时保持长时间的优异的抗球虫活性，并且具有体内稳定性，从而即使在各种温度和/或各种ph范围的环境中，也可以保持优异的抗球虫活性，并且可以适用于各种产品(例如，饲料添加剂)，并且存储稳定性可以是优异的。

52、根据一种实施方式的组合物，当在体内给药时，除了肠以外，不被其他组织和器官(例如，血液、肝脏、肾脏和/或脾脏等)吸收，从而体内具有低残留物，因此所述组合物在体内可以具有优异的安全性。

53、在一种实施方式中，优异的体重增加改善作用可以指当对受试者给药时，增加受试者体重的优异作用，并且在一种实施方式中，体重增加可以指每天的体重增加，所述受试者可以是在其体内诱发球虫病的受试者。

54、根据一种实施方式的组合物表现出等效于或高于常规已知抗球虫病剂(例如，磺胺类药物如磺胺喹喔啉、磺胺氯吡嗪和磺胺甲嘧啶，聚醚离子载体抗生素如盐霉素和莫能霉素钠(monensin sodium)、安普罗铵(amprolium)、地克珠利、没食子酸和/或托曲珠利(toltrazuril))的抗球虫病活性，但所述组合物不会引起副作用或耐药性，因此长时间的使用可以是安全的。

55、在本技术中，“预防”是指通过根据一种实施方式的组合物的施用来抑制或延迟疾病发展的所有行为，“治疗”是指通过根据一种实施方式的组合物的施用来缓解或有益地改变怀疑和发病的受试者的症状的所有行为，并且“缓解”是指通过根据一种实施方式的组合物的施用来降低与治疗疾病的条件相关的参数的所有行为，例如，至少是症状的程度。所述疾病可以指球虫病。

56、在本技术中，“球虫病”是球虫原生动物(可诱发球虫病的原生动物，例如艾美耳球虫属(eimeria sp.)球虫原生动物)寄生于消化道上皮中的粘膜下组织的细胞质中并且破坏上皮而引起肠炎的疾病，并且是一种由于软便、腹泻和血便导致体重增加退化并且延长肉鸡场的出栏年龄而造成经济损失的原生动物疾病。球虫病不仅可以在肉鸡中出现，还可以在鸟类和哺乳类动物中出现，具体地，球虫病可以感染牛、兔、山羊、狗、猫、是实验动物的小鼠和大鼠等，特别地，其可以对鸡等家禽造成致命伤害。在一种实施方式中，球虫病可以包含急性球虫病、亚急性球虫病和慢性球虫病等。急性球虫病可以在感染后48小时内表现出血便、能量损失和贫血，并且感染的受试者可能死亡，亚急性球虫病在感染后可以表现为出血性腹泻和/或贫血症状，慢性球虫病在感染后1～2天内可以表现出软便和/或腹泻后体重下降的症状。

57、当球虫原生动物物种的卵囊(囊、卵)在高湿度和高温度下成熟为有孢子的卵囊时，所述卵囊具有感染性，并且当卵囊在受试者的体内经过一定的生命周期后随粪便排出时，所述卵囊易于传播且所述卵囊的生命周期不断重复。已知球虫原生动物物种的卵母细胞(囊)对外界环境的抵抗力很高，囊壁由内层和外层两层组成。囊壁的外层是明胶物质，该明胶物质强烈地抵抗外部物理压力，内层富含核蛋白，所以可以强烈地抵抗化学刺激，如消毒剂。球虫原生动物物种的卵囊可以包含4个孢子囊，每个孢子囊可以包含2个子孢子，它们以卵囊形式感染动物后，以孢子囊和子孢子的形式释放，在细胞内增殖，经过有性繁殖和/或无性繁殖的子孢子可形成卵囊，并在粪便中提取。在一种实施方式中，所述子孢子可以用于与原生动物相同的含义，并且子孢子(原生动物)可以引起病变。

58、根据一种实施方式，所述球虫病可以是由艾美耳球虫属原生动物引起的。在一种实施方式中，艾美耳球虫属原生动物可以是选自由以下所组成的组中的至少一种：堆型艾美耳球虫(eimeria acervulina)、柔嫩艾美耳球虫(eimeria tenella)、巨型艾美耳球虫(eimeria maxima)、毒害艾美耳球虫(eimeria necatrix)、布氏艾美耳球虫(eimeriabrunetti)、哈氏艾美耳球虫(eimeria hagani,)、和缓艾美耳球虫(eimeria mitis)、早熟艾美耳球虫(eimeria praecox)、变位艾美耳球虫(eimeria mivati)、金黄艾美耳球虫(eimeria aurati)、巴氏艾美耳球虫(eimeria baueri)、美洲肺鱼艾美耳球虫(eimerialepidosirenis)、亮氏艾美耳球虫(eimeria leucisci)、金红石艾美耳球虫(eimeriarutile)、范氏艾美耳球虫(eimeria vanasi,)、两型艾美耳球虫(eimeriaamphisbaeniarum)、韦氏艾美耳球虫(eimeria witchery)、也门艾美耳球虫(eimeriayemenensae)、腺艾美耳球虫(eimeria adenoeides)、环颈雉艾美耳球虫(eimeriacolchici)、弯形艾美耳球虫(eimeria curvata)、分散艾美耳球虫(eimeria dispersa)、十二指肠艾美耳球虫(eimeria duodenalis)、羊艾美耳球虫(eimeria fraterculae)、己形艾美耳球虫(eimeria gallopavonis)、无害艾美耳球虫(eimeria innocua)、火鸡艾美耳球虫(eimeria meleagridis)、火鸡和缓艾美耳球虫(eimeria meleagrimitis)、雉艾美耳球虫(eimeria phasiani)、蒲塞艾美球虫(eimeria procera)、库氏艾美耳球虫(eimeriapurpureicephali)、阿沙塔艾美耳球虫(eimeria ahsata)、阿拉巴艾美耳球虫(eimeriaalabamensis)、阿里耶维艾美耳球虫(eimeria alijevi)、阿斯佩尔尼艾美耳球虫(eimeriaaspheronica)、阿氏艾美耳球虫(eimeria arloingi)、阿鲁德里艾美耳球虫(eimeriaarundeli)、巴库艾美耳球虫(eimeria bakuensis)、牛艾美耳球虫(eimeria bovis)、骆驼艾美耳球虫(eimeria cameli)、山羊艾美耳球虫(eimeria caprina)、卡普罗维纳艾美耳球虫(eimeria caprovina)、克里斯滕森艾美耳球虫(eimeria christenseni)、克里米艾美耳球虫(eimeria clethrionomyis)、盲肠艾美耳球虫(eimeria coecicola)、扭形艾美耳球虫(eimeria contorta)、库氏艾美耳球虫(eimeria couesii)、克兰多尔氏艾美耳球虫(eimeria crandallis)、达玛艾美耳球虫(eimeria dammahensis)、道氏艾美耳球虫(eimeria dowleri)、小型艾美耳球虫(eimeria exigua)、镰形艾美耳球虫(eimeriafalciformis)、法拉沙尼艾美耳球虫(eimeria farasanii)、费氏艾美耳球虫(eimeriaferrisi,)、黄艾美耳球虫(eimeria flavescens)、盖氏艾美耳球虫(eimeria gallatii)、细粒艾美耳球虫(eimeria granulosa)、希尔奇艾美耳球虫(eimeria hirci)、肠艾美耳球虫(eimeria intestinalis)、无残艾美耳球虫(eimeria irresidua)、错乱艾美耳球虫(eimeria intricata)、约尔奇艾美耳球虫(eimeria jolchijevi)、克里格斯曼艾美耳球虫(eimeria krijgsmanni)、拉里默森艾美耳球虫(eimeria larimerensis)、马库沙里艾美耳球虫(eimeria macusaniensis)、大型艾美耳球虫(eimeria magna)、马氏艾美耳球虫(eimeria marconii)、中型艾美耳球虫(eimeria media)、美拉内艾美耳球虫(eimeriamelanuri)、米西艾美耳球虫(eimeria myoxi)、那格浦尔艾美耳球虫(eimerianagpurensis)、尼舒尔兹艾美耳球虫(eimeria nieschulzi)、尼纳科利亚基莫瓦艾美耳球虫(eimeria ninakohlyakimovae)、类绵羊艾美耳球虫(eimeria ovinoidalis)、苍白艾美耳球虫(eimeria pallida)、沼泽艾美耳球虫(eimeria palustris)、乳头艾美耳球虫(eimeria papillata)、穿孔艾美耳球虫(eimeria perforans)、福卡艾美耳球虫(eimeriaphocae)、菲勒塔艾美耳球虫(eimeria pileata)、伏翼艾美耳球虫(eimeriapipistrellus)、梨形艾美耳球虫(eimeria piriformis)、普里奥特米艾美耳球虫(eimeriaprionotemni)、普罗西奥尼艾美耳球虫(eimeria procyonis)、点状艾美耳球虫(eimeriapunctate)、罗布罗基艾美耳球虫(eimeria roobroucki)、沙特艾美耳球虫(eimeriasaudiensis)、西兰德里艾美耳球虫(eimeria sealanderi)、分离艾美耳球虫(eimeriaseparata)、兔艾美耳球虫(eimeria stiedae)、乌尔西尼艾美耳球虫(eimeria ursini)、蠕形艾美耳球虫(eimeria vermiformis)、韦布里奇(eimeria weybridgensis)、沃巴蒂艾美耳球虫(eimeria wobati)和邱氏艾美耳球虫(eimeria zuernii)。

59、根据一种实施方式的组合物可以具有预防、缓解和/或治疗由至少一种选自由下表1中描述的艾美耳球虫属原生动物所组成的组中的原生动物引起的球虫病的优异效果，下表1中描述的艾美耳球虫属原生动物可以分别引起表1中所述的动物的球虫病。

60、表1

61、

62、

63、

64、

65、根据一种实施方式的组合物可以对预防、缓解和/或治疗由柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫和/或巨型艾美耳球虫引起的球虫病具有优异的效果。

66、在一种实施方式中，球虫病的预防或缓解可以指选自由以下(1)至(4)所组成的组中的至少一种(例如，任何一种、两种以上、三种以上或全部)，并且例如，与对照组(阴性对照组和/或阳性对照组)相比，选自由以下(1)至(4)所组成的组中的至少一种可以是减少的、抑制的和/或增加的：

67、(1)减少选自由病变评分(例如，阑尾病变评分)、粪便卵囊排泄量和死亡率所组成的组中的至少一种；

68、(2)抑制由于球虫病引起的体重下降；

69、(3)增加抗球虫指数(aci)；以及

70、(4)减少艾美耳球虫属原生动物的细胞侵袭、原生动物在细胞中的增殖，或两者。

71、在一种实施方式中，确定病变评分的病变评分方法可以参照johnson jk和reidwm(1970)的文献进行(joyce johnson和w.malcolm reid，抗球虫药物：准备进行的病变评分技术和鸡的圈舍实验(anticoccidial drugs:lesion scoring techniques in batteryand floor-pen experiments with chickens)，experimental parasitology，1970))，病变评分可以是0～4度。在一种实施方式中，病变评分可指在阑尾、十二指肠和/或空肠中测得的病变评分，并且其可以由在每个器官(阑尾、十二指肠和/或空肠)中测量的每个病变评分之和计算。

72、在一种实施方式中，粪便卵囊提取量可以通过收集受试者排出的粪便，使用显微镜或使用计数室(例如，mcmaster室)等进行测量。

73、在一种实施方式中，死亡率可以指诱发球虫病的动物受试者的死亡率，通过进行尸检，可以排除因球虫病以外的原因死亡的受试者数量。

74、在一种实施方式中，诱导球虫病的受试者的体重可能比未诱导球虫病的受试者的体重减少，根据一种实施方式的组合物可以抑制通过诱导球虫病引起的体重下降。

75、在一种实施方式中，所述抗球虫病指数可按以下等式1计算，并且在等式1中，病变评分可以按前述方法计算。

76、(等式1)

77、抗球虫指数(aci)＝(挑战接种后的存活率(％))+(与阴性对照组相比的每日体重增长(％))-(病变评分×10)-(粪便卵囊排泄量指数)

78、所述挑战接种(challenge inoculation)可以指施用(例如，口服接种等)能够诱发球虫病的原生动物。在一种实施方式中，存活率可以是挑战接种后第5天～第10天、第7天～第10天、第8天～第10天、第7天～第9天、第7天～第8天或第7天测量的存活率，并且通过进行尸检，可以排除因球虫病以外的原因死亡的受试者的数量来测量存活率。

79、上述等式1中与阴性对照组相比的体重增长可以是通过基于阴性对照组(例如，原生动物未感染的阴性对照组)的值计算的百分比计算的值。

80、上述等式1中的病变评分如上所述。

81、在上述等式1中，通过基于阴性对照组(例如，感染原生动物的阴性对照组)的值计算百分比，当计算结果的值在0％以上～小于1％的水平时，粪便卵囊排泄量指数可以是数值0；当计算结果的值在1％以上～小于26％的水平时，粪便卵囊排泄量指数可以是数值5；当计算结果的值在26％以上～小于51％的水平时，粪便卵囊排泄量指数可以是数值10；当计算结果的值在51％以上～小于76％的水平时，粪便卵囊排泄量指数可以是数值20；当计算结果的值在76％以上～100％以下的水平时，粪便卵囊排泄量指数可以是数值40。

82、在一种实施方式中，所述活性成分(化学式1的化合物或其盐)可以以下的量包含在饲料组合物中：1w/w％以下、小于1w/w％、10-1w/w％以下、5×10-2w/w％以下、2.5×10-2w/w％以下、2×10-2w/w％以下、1.25×10-2w/w％以下、10-2w/w％以下、9×10-3w/w％以下、8×10-3w/w％以下、7×10-3w/w％以下、6×10-3w/w％以下、5×10-3w/w％以下、4×10-3w/w％以下、10-7w/w％以上、10-6w/w％以上、10-5w/w％以上、10-4w/w％以上、5×10-4w/w％以上、10-3w/w％以上、1.5×10-3w/w％以上、2×10-3w/w％以上、3×10-3w/w％以上、4×10-3w/w％以上、5×10-3w/w％以上、10-7w/w％～1w/w％、10-7w/w％～10-1w/w％、10-7w/w％～5×10-2w/w％、10-7w/w％～10-2w/w％、10-7w/w％～5×10-3w/w％、10-7w/w％～4×10-3w/w％、10-7w/w％～10-3w/w％、10-7w/w％～5×10-4w/w％、10-7w/w％～10-4w/w％、10-7w/w％～10-5w/w％、10-6w/w％～1w/w％、10-6w/w％～10-1w/w％、10-6w/w％～5×10-2w/w％、10-6w/w％～10-2w/w％、10-6w/w％～5×10-3w/w％、10-6w/w％～4×10-3w/w％、10-6w/w％～10-3w/w％、10-6w/w％～5×10-4w/w％、10-6w/w％～10-4w/w％、10-6w/w％～10-5w/w％、10-5w/w％～1w/w％、10-5w/w％～10-1w/w％、10-5w/w％～5×10-2w/w％、10-5w/w％～10-2w/w％、10-5w/w％～5×10-3w/w％、10-5w/w％～4×10-3w/w％、10-5w/w％～10-3w/w％、10-5w/w％～5×10-4w/w％、10-5w/w％～10-4w/w％、10-4w/w％～1w/w％、10-4w/w％～10-1w/w％、10-4w/w％～5×10-2w/w％、10-4w/w％～10-2w/w％、10-4w/w％～5×10-3w/w％、10-4w/w％～4×10-3w/w％、10-4w/w％～10-3w/w％、10-4w/w％～5×10-4w/w％、10-3w/w％～1w/w％、10-3w/w％～10-1w/w％、10-3w/w％～5×10-2w/w％、10-3w/w％～10-2w/w％、10-3w/w％～5×10-3w/w％、10-3w/w％～4×10-3w/w％、10-3w/w％～2×10-3w/w％或10-3w/w％～1.5×10-3w/w％。在一种实施方式中，所述饲料组合物可以是包含基于总重量的范围内的活性成分的饲料(例如，由动物最终摄取的混杂饲料和/或配合饲料)。

83、在一种实施方式中，所述活性成分(化学式1的化合物或其盐)可以以下浓度包含在饲料组合物中：10000ppm以下、5000ppm以下、2000ppm以下、1000ppm以下、500ppm以下、400ppm以下、300ppm以下、250ppm以下、200ppm以下、125ppm以下、小于125ppm、100ppm以下、90ppm以下、80ppm以下、70ppm以下、65ppm以下、60ppm以下、50ppm以下、40ppm以下、0.001ppm以上、0.01ppm以上、0.1ppm以上、1ppm以上、5ppm以上、10ppm以上、15ppm以上、20ppm以上、30ppm以上、40ppm以上、50ppm以上、0.001ppm～1000ppm、0.001ppm～500ppm、0.001ppm～300ppm、0.001ppm～200ppm、0.001ppm～125ppm、0.001ppm～100ppm、0.001ppm～90ppm、0.001ppm～80ppm、0.001ppm～70ppm、0.001ppm～60ppm、0.001ppm～50ppm、0.001ppm～40ppm、0.001ppm～30ppm、0.003ppm～1000ppm、0.003ppm～500ppm、0.003ppm～300ppm、0.003ppm～200ppm、0.003ppm～125ppm、0.003ppm～100ppm、0.003ppm～90ppm、0.003ppm～80ppm、0.003ppm～70ppm、0.003ppm～60ppm、0.003ppm～50ppm、0.003ppm～40ppm、0.003ppm～30ppm、0.01ppm～1000ppm、0.01ppm～500ppm、0.01ppm～300ppm、0.01ppm～200ppm、0.01ppm～125ppm、0.01ppm～100ppm、0.01ppm～90ppm、0.01ppm～80ppm、0.01ppm～70ppm、0.01ppm～60ppm、0.01ppm～50ppm、0.01ppm～40ppm、0.01ppm～30ppm、0.1ppm～1000ppm、0.1ppm～500ppm、0.1ppm～300ppm、0.1ppm～200ppm、0.1ppm～125ppm、0.1ppm～100ppm、0.1ppm～90ppm、0.1ppm～80ppm、0.1ppm～70ppm、0.1ppm～60ppm、0.1ppm～50ppm、0.1ppm～40ppm、0.1ppm～30ppm、1ppm～1000ppm、1ppm～500ppm、1ppm～300ppm、1ppm～200ppm、1ppm～125ppm、1ppm～100ppm、1ppm～90ppm、1ppm～80ppm、1ppm～70ppm、1ppm～60ppm、1ppm～50ppm、1ppm～40ppm、1ppm～30ppm、3ppm～1000ppm、3ppm～500ppm、3ppm～300ppm、3ppm～200ppm、3ppm～125ppm、3ppm～100ppm、3ppm～90ppm、3ppm～80ppm、3ppm～70ppm、3ppm～60ppm、3ppm～50ppm、3ppm～40ppm、3ppm～30ppm、5ppm～1000ppm、5ppm～500ppm、5ppm～300ppm、5ppm～200ppm、5ppm～125ppm、5ppm～100ppm、5ppm～90ppm、5ppm～80ppm、5ppm～70ppm、5ppm～60ppm、5ppm～50ppm、5ppm～40ppm、5ppm～30ppm、10ppm～1000ppm、10ppm～500ppm、10ppm～300ppm、10ppm～200ppm、10ppm～125ppm、10ppm～100ppm、10ppm～90ppm、10ppm～80ppm、10ppm～70ppm、10ppm～60ppm、10ppm～50ppm、10ppm～40ppm或10ppm～30ppm。

84、在一种实施方式中，当所述活性成分(化学式1的化合物或其盐)包含在上述范围内时，与包含在上述范围外的活性成分的情况相比，其抗球虫活性可以是优异的。

85、在本技术中，“饲料”可指供动物食用、摄取和消化或适合于此的任何天然或人工饮食、一餐食物等，或一餐食物的成分。在根据一种实施方式的饲料组合物中，可以进一步包含浓缩饲料和/或特殊饲料。浓缩饲料是通过纯化种子果实和谷物获得的副产品，所述谷物包括如小麦、燕麦、玉米等谷物，并且可以是糠，所述糠包括米糠、麦糠、大麦糠等；芝麻饼，其是从大豆、流体、芝麻籽、亚麻籽、椰子树等中榨油得到的副产品；以及残留物如残留淀粉，残留淀粉是淀粉残留物的主要成分，是从红薯和土豆去除淀粉后的剩余部分；鱼溶物，其通过浓缩从鱼粉、鱼废料和鱼获得的新鲜液状物获得；动物饲料，如干乳清，其中，乳清是由肉粉、血粉、羽毛粉、脱脂奶粉、奶酪用奶、脱脂奶等生产酪蛋白后的剩余部分；酵母、小球藻和/或海藻等。

86、根据一种实施方式的饲料组合物可以指最终被动物摄取的形式的饲料、能够与饲料混合的膳食补充剂和/或饲料添加剂。膳食补充剂是例如含有向动物提供治疗剂或消化剂的制剂的组合物，并且可以指不是生物体摄入卡路里的普通来源，即能量来源，但在正常动物饲料之外被摄入的组合物。饲料添加剂是指为了例如补充营养和防止体重损失、提高饲料中纤维的消化率、缓解油的品质、预防增殖障碍和增强生育率、预防夏季高温应激等各种效果的目的而添加到饲料中的物质。在一种实施方式中，饲料添加剂可以指为了预防、缓解或治疗球虫病的目的而添加的物质。

87、在一种实施方式中，所述饲料组合物可以是饲料添加剂，并且当根据一种实施方式的饲料添加剂被混合到饲料中(例如，动物最终摄入的混合饲料和/或配合饲料)时，基于总饲料的重量，饲料添加剂可以以0.001％(w/w)以上、0.005％(w/w)以上、0.01％(w/w)以上、0.05％(w/w)以上、0.1％(w/w)以上、0.5％(w/w)以上、1％(w/w)以下、0.5％(w/w)以下、0.1％(w/w)以下、0.05％(w/w)以下、0.01％(w/w)以下、0.005％(w/w)以下、0.001％～1％(w/w)、0.001％～0.5％(w/w)、0.001％～0.1％(w/w)、0.001％～0.05％(w/w)、0.001％～0.01％(w/w)、0.001％～0.005％(w/w)、0.005％～1％(w/w)、0.005％～0.5％(w/w)、0.005％～0.1％(w/w)、0.005％～0.05％(w/w)、0.005％～0.01％(w/w)、0.01％～1％(w/w)、0.01％～0.5％(w/w)、0.01％～0.1％(w/w)、0.01％～0.05％(w/w)、0.05％～1％(w/w)、0.05％～0.5％(w/w)、0.05％～0.1％(w/w)、0.1％～1％(w/w)、0.1％～0.5％(w/w)或0.5％～1％(w/w)的重量加入，并且根据一种实施方式，饲料添加剂可以与除活性成分之外的饲料原料、补充饲料、助剂和/或其他种类的添加剂等混合。

88、在一种实施方式中，当饲料添加剂包含在上述范围内时，与包含在上述范围外的饲料添加剂的情况相比，其抗球虫活性可以是优异的。

89、一方面，可以提供一种用于预防或治疗球虫病的药物组合物，包含化学式1的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。所述化学式1的化合物或其药学上可接受的盐如上所述。

90、根据一种实施方式的药物组合物可以作为单一制剂使用，并且可以通过进一步包含已知具有预防或治疗球虫病作用的批准药物组合物来制备混合制剂来使用。可以通过加入药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂来制成药物的单位给药形式。

91、在本技术中，“药学上可接受的”是指对生物体无显著刺激作用，不抑制给药活性物质的生物学活性和性质。包含根据一种实施方式的药学上可接受的载体的药物组合物可以具有选自由片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、混悬剂、内溶液、乳剂、糖浆剂、灭菌水溶液、非水溶液、混悬液、乳液、冷冻干燥制剂和栓剂所组成的组中的任何一种制剂。

92、药物组合物可以是各种口服或肠胃外制剂。在制剂的情况下，可以使用常用的填充剂、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、稀释剂例如表面活性剂或赋形剂来制备。

93、用于口服给药的固体制剂包含片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂等，这些固体制剂可以通过将至少一种赋形剂例如淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖、明胶等混合到一种或多种化合物中制备。另外，除了单纯的赋形剂以外，可以使用润滑剂例如硬脂酸镁、滑石等。口服给药的液体制剂除了通常使用的简单稀释剂水和液体石蜡之外，还可以包含混悬剂、内部溶液、乳剂、糖浆剂等，以及各种赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、香料、防腐剂等。

94、用于肠胃外给药的制剂可以包含无菌水溶液、非水溶液、混悬剂、乳剂、冷冻干燥制剂和栓剂。作为非水溶液和混悬剂，可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄榄油等和注射用酯如油酸乙酯等。作为栓剂的基质，可以使用聚乙二醇脂肪酸酯、吐温61、可可脂、月桂脂、甘油明胶等。

95、在一种实施方式中，药物组合物可以根据各种使用目的的常用方法，通过配制成多种形式使用，例如粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、气雾剂等口服制剂，灭菌注射溶液等的可注射制剂，并且可以口服给药，或通过包含静脉内给药、腹腔内给药、皮下给药、直肠内给药、局部给药等各种途径来给药。

96、在一种实施方式中，药物组合物中还可以另外包含载体、赋形剂或稀释剂等，并且可以包含的合适的载体、赋形剂或稀释剂的实例可以包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯树胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、无定形纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油等。此外，药物组合物还可以另外地包含填充剂、抗凝剂、润滑剂、润湿剂、调味剂、乳化剂、防腐剂等。

97、在一种实施方式中，药物组合物中活性成分(化学式1的化合物或其药学上可接受的盐)的有效量可以根据患者(受试者)的年龄、性别和体重而不同，一般而言，0.0001mg/kg～100mg/kg、0.0001mg/kg～50mg/kg、0.0001mg/kg～30mg/kg、0.0001mg/kg～20mg/kg、0.0001mg/kg～10mg/kg、0.0001mg/kg～1mg/kg、0.0001mg/kg～0.1mg/kg、0.0001mg/kg～0.01mg/kg、0.0001mg/kg～0.001mg/kg、0.001mg/kg～100mg/kg、0.001mg/kg～50mg/kg、0.001mg/kg～30mg/kg、0.001mg/kg～20mg/kg、0.001mg/kg～10mg/kg、0.001mg/kg～1mg/kg、0.001mg/kg～0.1mg/kg、0.001mg/kg～0.01mg/kg、0.01mg/kg～100mg/kg、0.01mg/kg～50mg/kg、0.01mg/kg～30mg/kg、0.01mg/kg～20mg/kg、0.01mg/kg～10mg/kg、0.01mg/kg～1mg/kg、0.01mg/kg～0.1mg/kg、0.1mg/kg～100mg/kg、0.1mg/kg～50mg/kg、0.1mg/kg～30mg/kg、0.1mg/kg～20mg/kg、0.1mg/kg～10mg/kg、0.1mg/kg～1mg/kg、1mg/kg～100mg/kg、1mg/kg～50mg/kg、1mg/kg～30mg/kg、1mg/kg～20mg/kg、1mg/kg～10mg/kg、10mg/kg～100mg/kg、10mg/kg～50mg/kg、10mg/kg～30mg/kg、10mg/kg～20mg/kg、20mg/kg～100mg/kg、20mg/kg～50mg/kg、20mg/kg～30mg/kg、30mg/kg～100mg/kg、30mg/kg～50mg/kg或50mg/kg～100mg/kg的每kg体重可以每日或隔日给药，或每日分1～3次给药。然而，由于其可以根据给药途径、疾病的严重程度、性别、体重、年龄等增加或减少，因此该剂量不以任何方式限制本技术的范围。在一种实施方式中，当组合物是腹膜内给药时，所述组合物可以以0.001mg/kg～30mg/kg的浓度给药。

98、在一种实施方式中，药物组合物的剂量可以根据患者的体重、年龄、性别、健康状况、饮食、给药时间、给药方式、排泄率和疾病的严重程度等而在各种范围内。

99、在一种实施方式中，所述化学式1的化合物或其药学上可接受的盐可以以下的量包含在药物组合物中：1w/w％以下、小于1w/w％、10-1w/w％以下、5×10-2w/w％以下、2.5×10-2w/w％以下、2×10-2w/w％以下、1.25×10-2w/w％以下、10-2w/w％以下、9×10-3w/w％以下、8×10-3w/w％以下、7×10-3w/w％以下、6×10-3w/w％以下、5×10-3w/w％以下、4×10-3w/w％以下、10-7w/w％以上、10-6w/w％以上、10-5w/w％以上、10-4w/w％以上、5×10-4w/w％以上、10-3w/w％以上、1.5×10-3w/w％以上、2×10-3w/w％以上、3×10-3w/w％以上、4×10-3w/w％以上、5×10-3w/w％以上、10-7w/w％～1w/w％、10-7w/w％～10-1w/w％、10-7w/w％～5×10-2w/w％、10-7w/w％～10-2w/w％、10-7w/w％～5×10-3w/w％、10-7w/w％～4×10-3w/w％、10-7w/w％～10-3w/w％、10-7w/w％～5×10-4w/w％、10-7w/w％～10-4w/w％、10-7w/w％～10-5w/w％、10-6w/w％～1w/w％、10-6w/w％～10-1w/w％、10-6w/w％～5×10-2w/w％、10-6w/w％～10-2w/w％、10-6w/w％～5×10-3w/w％、10-6w/w％～4×10-3w/w％、10-6w/w％～10-3w/w％、10-6w/w％～5×10-4w/w％、10-6w/w％～10-4w/w％、10-6w/w％～10-5w/w％、10-5w/w％～1w/w％、10-5w/w％～10-1w/w％、10-5w/w％～5×10-2w/w％、10-5w/w％～10-2w/w％、10-5w/w％～5×10-3w/w％、10-5w/w％～4×10-3w/w％、10-5w/w％～10-3w/w％、10-5w/w％～5×10-4w/w％、10-5w/w％～10-4w/w％、10-4w/w％～1w/w％、10-4w/w％～10-1w/w％、10-4w/w％～5×10-2w/w％、10-4w/w％～10-2w/w％、10-4w/w％～5×10-3w/w％、10-4w/w％～4×10-3w/w％、10-4w/w％～10-3w/w％、10-4w/w％～5×10-4w/w％、10-3w/w％～1w/w％、10-3w/w％～10-1w/w％、10-3w/w％～5×10-2w/w％、10-3w/w％～10-2w/w％、10-3w/w％～5×10-3w/w％、10-3w/w％～4×10-3w/w％、10-3w/w％～2×10-3w/w％或10-3w/w％～1.5×10-3w/w％。

100、在一种实施方式中，所述化学式1的化合物或其药学上可接受的盐可以以下浓度包含在药物组合物中：10000ppm以下、5000ppm以下、2000ppm以下、1000ppm以下、500ppm以下、400ppm以下、300ppm以下、250ppm以下、200ppm以下、125ppm以下、小于125ppm、100ppm以下、90ppm以下、80ppm以下、70ppm以下、65ppm以下、60ppm以下、50ppm以下、40ppm以下、0.001ppm以上、0.01ppm以上、0.1ppm以上、1ppm以上、5ppm以上、10ppm以上、15ppm以上、20ppm以上、30ppm以上、40ppm以上、50ppm以上、0.001ppm～1000ppm、0.001ppm～500ppm、0.001ppm～300ppm、0.001ppm～200ppm、0.001ppm～125ppm、0.001ppm～100ppm、0.001ppm～90ppm、0.001ppm～80ppm、0.001ppm～70ppm、0.001ppm～60ppm、0.001ppm～50ppm、0.001ppm～40ppm、0.001ppm～30ppm、0.003ppm～1000ppm、0.003ppm～500ppm、0.003ppm～300ppm、0.003ppm～200ppm、0.003ppm～125ppm、0.003ppm～100ppm、0.003ppm～90ppm、0.003ppm～80ppm、0.003ppm～70ppm、0.003ppm～60ppm、0.003ppm～50ppm、0.003ppm～40ppm、0.003ppm～30ppm、0.01ppm～1000ppm、0.01ppm～500ppm、0.01ppm～300ppm、0.01ppm～200ppm、0.01ppm～125ppm、0.01ppm～100ppm、0.01ppm～90ppm、0.01ppm～80ppm、0.01ppm～70ppm、0.01ppm～60ppm、0.01ppm～50ppm、0.01ppm～40ppm、0.01ppm～30ppm、0.1ppm～1000ppm、0.1ppm～500ppm、0.1ppm～300ppm、0.1ppm～200ppm、0.1ppm～125ppm、0.1ppm～100ppm、0.1ppm～90ppm、0.1ppm～80ppm、0.1ppm～70ppm、0.1ppm～60ppm、0.1ppm～50ppm、0.1ppm～40ppm、0.1ppm～30ppm、1ppm～1000ppm、1ppm～500ppm、1ppm～300ppm、1ppm～200ppm、1ppm～125ppm、1ppm～100ppm、1ppm～90ppm、1ppm～80ppm、1ppm～70ppm、1ppm～60ppm、1ppm～50ppm、1ppm～40ppm、1ppm～30ppm、3ppm～1000ppm、3ppm～500ppm、3ppm～300ppm、3ppm～200ppm、3ppm～125ppm、3ppm～100ppm、3ppm～90ppm、3ppm～80ppm、3ppm～70ppm、3ppm～60ppm、3ppm～50ppm、3ppm～40ppm、3ppm～30ppm、5ppm～1000ppm、5ppm～500ppm、5ppm～300ppm、5ppm～200ppm、5ppm～125ppm、5ppm～100ppm、5ppm～90ppm、5ppm～80ppm、5ppm～70ppm、5ppm～60ppm、5ppm～50ppm、5ppm～40ppm、5ppm～30ppm、10ppm～1000ppm、10ppm～500ppm、10ppm～300ppm、10ppm～200ppm、10ppm～125ppm、10ppm～100ppm、10ppm～90ppm、10ppm～80ppm、10ppm～70ppm、10ppm～60ppm、10ppm～50ppm、10ppm～40ppm或10ppm～30ppm。

101、在一种实施方式中，药物组合物可以通过多种途径给药于受试者。给药可以指通过任何合适的方法将某种物质提供给受试者(患者)，药物组合物的给药途径可以是口服给药和/或肠胃外给药，通过所有常规途径，只要到达目标组织即可。胃肠外给药的情况，可以选择外用于皮肤、腹腔注射、直肠内注射、皮下注射、静脉注射、肌肉注射和/或胸腔注射。此外，根据一种实施方式的组合物可以使用能够将活性成分递送到靶细胞中的任何装置来给药。

102、一个方面可以提供一种抗艾美耳球虫属原生动物的抗原生动物组合物，包含选自由化学式1的化合物及其盐所组成的组中的至少一种。所述化学式1的化合物、其盐和/或艾美耳球虫属原生动物如上所述。

103、在一种实施方式中，抗艾美耳球虫属原生动物的抗原生动物活性(作用、功效)是优异的，可以指以下(1)和/或(2)的特征，例如与对照组(阴性对照组和/或阳性对照组)相比，它可能表现出以下(1)和/或(2)的特征：

104、(1)杀伤艾美耳球虫属原生动物的效果优异；和/或

105、(2)抑制艾美耳球虫属原生动物的细胞侵袭作用和/或抑制原生动物在细胞中的增殖作用。

106、在一种实施方式中，在饲料组合物和/或药物组合物中，化学式1的化合物或其盐可以在上述的浓度范围内包含在抗原生动物组合物中。在一种实施方式中，与包含浓度范围以外的活性成分的情况相比，包含上述浓度范围内的活性成分的组合物可以具有优异的抗原生动物活性。

107、另一方面可以提供一种用于预防、缓解或治疗球虫病的方法，包括将所述组合物(例如饲料组合物、饲料添加剂、药物组合物和/或抗原生动物组合物)给药至动物的步骤。在一种实施方式中，在所述组合物给药之前，还可以包括确认(选择)需要预防、缓解或治疗球虫病的受试者(患者)。所述组合物和球虫病如上所述。根据一种实施方式，确认受试者可以包括检测从受试者分离的粪便中能够诱发球虫的原生动物的卵囊。

108、在根据一种实施方式的预防、缓解或治疗球虫病的方法中，组合物的给药方法、给药途径和/或给药剂量如上所述。

109、根据一种实施方式，所述组合物可以以药学有效剂量来给药。在本技术中，“药学有效剂量”是指在适用于医学治疗的合理受益/风险比下，足以治疗疾病的量，并且有效剂量水平可以根据患者的疾病类型、严重程度、药物活性、对药物的敏感性、给药时间、给药途径和排泄比、治疗周期、同时使用的包含药物的元件以及医疗领域熟知的其他元件来确定。根据一种实施方式，所述组合物可以作为单独的治疗剂给药或与其他抗球虫剂联合给药，并且可以与常规治疗剂同时给药、分开给药或依次给药，并且可以单次或多次给药。考虑到所有的因素，重要的是给予在没有副作用的情况下能够以最小量获得最大作用的量，并且这可以被本领域技术人员简单地确定。

110、在一种实施方式中，预防、减缓或治疗球虫病的方法所应用的受试者是指发生或可能发生球虫病的动物，该动物可以是哺乳动物，包括人、马、牛、小鼠、大鼠、狗、猫等、包括家禽(例如种鸡，肉鸡和/或蛋鸡等)等的鸟类、鱼类、两栖类动物和/或爬行类动物等。

111、在一种实施方式中，用于预防、缓解或治疗球虫病的方法所应用的动物可以是选自由上表1中描述的动物所组成的组中的至少一种，例如所述动物可以是选自由人类、鸡、鸭、鹅、火鸡、鹌鹑、野鸡、鸽子、鹦鹉、牛、猪、山羊、绵羊、马、羚羊、大羚羊、猴子、猫、狗、小鼠、大鼠、兔子、浣熊、松鼠、蝙蝠、豚鼠、骆驼、美洲驼、羊驼、袋熊、蜥蜴、金鱼、鲫鱼、罗非鱼、杠铃鱼、肺鱼和欧洲白鲑所组成的组中的至少一种。在一种实施方式中，所述动物可以是除人之外的动物。

112、其他方面，提供一种化学式1的化合物或其盐在制备用于预防、缓解和/或治疗球虫病的组合物(例如，饲料组合物、药物组合物)或制备抗原生动物组合物中的用途；化学式1的化合物或其盐用于预防、缓解和/或治疗球虫病的用途；和/或化学式1的化合物或其盐用于抗艾美耳球虫属原生动物的抗原生动物(例如，杀伤艾美耳球虫属原生动物；和/或抑制艾美耳球虫属原生动物的细胞侵袭和/或增殖)的用途。在上述用途中，所述化学式1的化合物或其盐、球虫病、抗原生动物和艾美耳球虫属原生动物如上所述。

113、有益效果

114、根据一种实施方式的包含所述化合物或其盐的组合物对能够诱发球虫病的原生动物具有优异的直接杀伤作用、具有原生动物的细胞侵袭抑制作用和/或在细胞中原生动物的增殖抑制作用，并且对体内球虫病具有优异的预防、缓解和治疗作用。