用于聚集抑制的Aβ变体的递送

背景技术：

技术实现思路

1、本公开内容的一些方面通过提供用于治疗患有神经退行性疾病、障碍或病症(例如，阿尔茨海默病)的对象的方法和组合物解决了本领域的需求。因此，在一些方面中，本文中提供了用于治疗患有神经退行性疾病、障碍或病症的对象和/或用于体内抑制淀粉样β(aβ)肽的聚集或促进淀粉样β(aβ)肽的解聚的方法和组合物，所述方法包括施用治疗有效量的包含编码aβ肽变体或其片段或功能衍生物的载体的组合物。在一些实施方案中，所公开的方法还包括诊断出对象患有神经退行性疾病、障碍或病症；诊断出对象为具有神经退行性疾病、障碍或病症的症状；或诊断出对象为处于患有神经退行性疾病、障碍或病症的风险中。在一些实施方案中，神经退行性疾病、障碍或病症是阿尔茨海默病、帕金森病(parkinson’sdisease)、帕金森病痴呆、血管性痴呆、脑淀粉样血管病、路易体痴呆、慢性创伤性脑病、唐氏综合征(down syndrome)和/或病理性衰老。在一些实施方案中，神经退行性疾病、障碍或病症是阿尔茨海默病。

2、本公开内容的一些实施方案包括用于治疗患有神经退行性疾病、障碍或病症的对象和/或用于体内抑制aβ肽聚集的方法和组合物。本公开内容的方法可包括1、2、3、4、5个或更多个以下步骤：向对象提供aβ肽变体；向对象提供用于神经退行性疾病、障碍或病症的一种或更多种另外的治疗；诊断出对象患有神经退行性疾病、障碍或病症；诊断出对象为具有神经退行性疾病、障碍或病症的症状；以及诊断出对象为处于患神经退行性疾病、障碍或病症的风险中。本公开内容的某些实施方案可排除一个或更多个前述要素和/或步骤。

3、在一些方面中，本文中公开了在对象中治疗或预防神经退行性疾病、障碍或病症的方法，其包括向对象施用治疗有效量的组合物，所述组合物包含编码aβ肽变体或其片段或功能衍生物的载体。在一些实施方案中，施用编码aβ肽变体或其片段或功能衍生物的载体阻止或降低蛋白质错误折叠、内源性aβ肽聚集、淀粉样斑块形成、神经炎症、神经退行性变、神经元丢失或突触丢失；降低au水平、tau的磷酸化或磷酸化tau的水平；减慢tau的播种或内源性aβ肽的播种；和/或促进认知改善。在一些实施方案中，施用编码aβ肽变体的载体阻止或降低内源性aβ肽寡聚体、初原纤维、原纤维或斑块的形成。在一些实施方案中，施用编码aβ肽变体的载体阻止或降低内源性aβ肽聚集体的细胞毒性。

4、在一些方面中，本文中公开了体内抑制内源性aβ肽聚集的方法，其包括使至少一种这样的肽与治疗有效量的来自编码aβ肽变体的载体的表达的aβ肽变体接触，所述载体在组合物中。在一些实施方案中，抑制内源性aβ肽的聚集在对象中治疗或预防神经退行性疾病、障碍或病症。在一些实施方案中，抑制内源性aβ肽的聚集阻止或降低了内源性aβ肽寡聚体、初原纤维、原纤维或斑块的形成。在一些实施方案中，抑制内源性aβ肽的聚集阻止或降低了内源性aβ肽聚集体的细胞毒性。

5、在一些实施方案中，所述方法还包括诊断出对象患有神经退行性疾病、障碍或病症；诊断出对象为具有神经退行性疾病、障碍或病症的症状；以及诊断出对象为处于患有神经退行性疾病、障碍或病症的风险中。在一些实施方案中，神经退行性疾病、障碍或病症是阿尔茨海默病、帕金森病、帕金森病痴呆、血管性痴呆、脑淀粉样血管病、路易体痴呆、慢性创伤性脑病、唐氏综合征和/或病理性衰老。在一些实施方案中，神经退行性疾病、障碍或病症是阿尔茨海默病。

6、在一些方面中，本文中公开了包含编码aβ肽变体的载体的药物组合物。

7、在本文中公开的方法和组合物的一些实施方案中，aβ肽变体包含与seq id no:3、seq id no:4、seq id no:5或seq id no:6或其片段或功能衍生物具有至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少98％或100％序列同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，aβ肽变体包含与seqid no:3、seq id no:4、seq id no:5或seq id no:6或其片段或功能衍生物具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，aβ肽变体包含seq id no:3、seq id no:4、seqid no:5或seq id no:6或其片段或功能衍生物。

8、在一些实施方案中，aβ肽变体包含与seq id no:3或其片段或功能衍生物具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，aβ肽变体包含seq id no:3或其片段或功能衍生物。在一些实施方案中，与seq id no:3具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性或包含seq id no:3的aβ肽变体包含n端截短。在一些实施方案中，n端截短包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21或22个氨基酸截短。在一些实施方案中，与seq id no:3具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性或包含seq id no:3的aβ肽变体包含c端截短。在一些实施方案中，c端截短包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28个氨基酸截短。在一些实施方案中，seq id no:3的片段或功能衍生物包含与klvdfae(seq id no:10)具有至少85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99序列同一性的氨基酸序列。

9、在一些实施方案中，aβ肽变体包含与seq id no:4或其片段或功能衍生物具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，aβ肽变体包含seq id no:4或其片段或功能衍生物。在一些实施方案中，与seq id no:4具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性或包含seq id no:4的aβ肽变体包含n端截短。在一些实施方案中，n端截短包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21或22个氨基酸截短。在一些实施方案中，与seq id no:4具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性或包含seq id no:4的aβ肽变体包含c端截短。在一些实施方案中，c端截短包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28个氨基酸截短。在一些实施方案中，seq id no:4的片段或功能衍生物包含与klvdfae(seq id no:11)具有至少85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99序列同一性的氨基酸序列。

10、在一些实施方案中，aβ肽变体包含与seq id no:5或其片段或功能衍生物具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，aβ肽变体包含seq id no:5或其片段或功能衍生物。在一些实施方案中，与seq id no:5具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性或包含seq id no:5的aβ肽变体包含n端截短。在一些实施方案中，n端截短包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21或22个氨基酸截短。在一些实施方案中，与seq id no:5具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性或包含seq id no:5的aβ肽变体包含c端截短。在一些实施方案中，c端截短包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28个氨基酸截短。在一些实施方案中，seq id no:5的片段或功能衍生物包含与klvdfae(seq id no:10)具有至少85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99序列同一性的氨基酸序列。

11、在一些实施方案中，aβ肽变体包含与seq id no:6或其片段或功能衍生物具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，aβ肽变体包含seq id no:6或其片段或功能衍生物。在一些实施方案中，与seq id no:6具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性或包含seq id no:6的aβ肽变体包含n端截短。在一些实施方案中，n端截短包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21或22个氨基酸截短。在一些实施方案中，与seq id no:6具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性或包含seq id no:6的aβ肽变体包含c端截短。在一些实施方案中，c端截短包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28个氨基酸截短。在一些实施方案中，seq id no:6的片段或功能衍生物包含与klvdfae(seq id no:12)具有至少85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99序列同一性的氨基酸序列。

12、在本文中公开的方法和组合物的一些实施方案中，aβ肽变体是编码aβ肽变体的多肽或多核苷酸。在一些实施方案中，载体编码多核苷酸，所述多核苷酸编码aβ肽变体。

13、在一些实施方案中，载体或由载体编码的多核苷酸编码aβ肽变体或其片段或功能衍生物。在一些实施方案中，载体或由载体编码的多核苷酸编码小基因，该小基因编码aβ肽变体或其片段或功能衍生物。在一些实施方案中，编码aβ肽变体的小基因编码对应于包含淀粉样前体蛋白的截短的β-羧基末端片段(β-ctf)的氨基酸序列的核苷酸序列。在一些实施方案中，截短的β-ctf与信号肽序列融合。在一些实施方案中，信号肽序列包含对应于包含高斯(gaussia)萤光素酶信号肽的氨基酸序列的核苷酸序列，或包含对应于包含小鼠免疫球蛋白重链信号肽的氨基酸序列的核苷酸序列。在一些实施方案中，截短的β-ctf包含aβ肽变体序列、跨膜结构域序列和胞质序列。在一些实施方案中，跨膜结构域序列包含对应于包含seq id no:9、seq id no:18、seq id no:86或seq id no:87的氨基酸序列的核苷酸序列。在一些实施方案中，胞质序列包含对应于用于膜锚定、促进γ-分泌酶切割和/或aβ肽变体的胞外释放的氨基酸序列的核苷酸序列。在一些实施方案中，胞质序列对应于包含两个赖氨酸残基的氨基酸序列。在一些实施方案中，胞质序列对应于包含三个赖氨酸残基的氨基酸序列。在一些实施方案中，胞质序列对应于在5’至3’方向上包含一个精氨酸残基随后是两个赖氨酸残基的氨基酸序列。

14、在一些实施方案中，小基因包含与seq id no:8、seq id no:35、seq id no:36、seq id no:37或seq id no:38具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，小基因包含seq id no:8、seq id no:35、seq id no:36、seq id no:37或seq id no:38。在一些实施方案中，小基因包含与seq id no:66、seq idno:67、seq id no:68、seq id no:69或seq id no:70具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，小基因包含seq id no:66、seq idno:67、seq id no:68、seq id no:69或seq id no:70。在一些实施方案中，小基因包含与seq id no:71、seq id no:72、seq id no:73、seq id no:74或seq id no:75具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，小基因包含seq id no:71、seq id no:72、seq id no:73、seq id no:74或seq id no:75。在一些实施方案中，小基因包含与seq id no:76、seq id no:77、seq id no:78、seq id no:79或seqid no:80具有至少85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，小基因包含seq id no:76、seq id no:77、seq id no:78、seq id no:79或seqid no:80。

15、在一些实施方案中，小基因的表达受组成型启动子的调节。在一些实施方案中，小基因的表达受组织特异性或细胞特异性启动子的调节。在一些实施方案中，细胞特异性启动子是神经元特异性启动子。在一些实施方案中，神经元特异性启动子是突触蛋白启动子。在一些实施方案中，组织特异性启动子是脉络丛特异性启动子。在一些实施方案中，组织特异性启动子是prlr、spint2或f5。

16、在一些实施方案中，编码aβ肽或其片段或功能衍生物的多核苷酸包含在载体中。在一些实施方案中，载体是病毒载体或非病毒载体。在一些实施方案中，载体是腺病毒、慢病毒、逆转录病毒或腺相关病毒载体。在一些实施方案中，载体是aav载体。在一些实施方案中，载体是aav1、aav2、aav3、aav4、aav5、aav6、aav7、aav8、aav9、aav10、aav11、aav12、aav2.5、aav-dj、aavrhlo.xx、aavrh.8、aavrh.10、aavrh.43、aavpi.2、aavhu.11、aavhu.32、aavhu.37或php.eb aav。在一些实施方案中，载体是aav9、php.eb、aavrh.8、aavrh.10或aavrh.43。

17、在一些实施方案中，向对象施用1×108至1×1018载体基因组/kg对象体重的剂量。在一些实施方案中，向对象施用约1×1011至约1×1014载体基因组/kg对象体重的剂量。在一些实施方案中，向对象施用约1×1012至约1×1015载体基因组/kg对象体重的剂量。在一些实施方案中，载体转导对象的细胞，且对象的细胞表达小基因。

18、在本文中公开的方法和组合物的一些实施方案中，组合物还包含可药用载体。在一些实施方案中，可药用载体包含脂质体、聚合物胶束、微球或纳米粒。

19、在一些实施方案中，组合物经全身或局部递送。在一些实施方案中，通过外周注射将组合物全身性地递送至中枢神经系统。在一些实施方案中，外周注射是静脉内注射。在一些实施方案中，组合物被递送至脑脊液(csf)。在一些实施方案中，通过非手术注射将组合物递送至csf。在一些实施方案中，向csf的非手术注射包括非手术鞘内注射。在一些实施方案中，通过神经外科注射将组合物递送至csf。在一些实施方案中，向csf的神经外科注射包括向小脑延髓池(cisterna magna)的神经外科注射。在一些实施方案中，组合物被递送至脑室系统。在一些实施方案中，通过神经外科注射将组合物递送至脑室系统。在一些实施方案中，组合物穿过血脑屏障。

20、在一些实施方案中，将组合物递送给对象一次。在一些实施方案中，组合物在aβ肽寡聚体、初原纤维或原纤维形成开始之前递送。在一些实施方案中，组合物在aβ肽寡聚体、初原纤维或原纤维形成开始之后递送。在一些实施方案中，组合物在淀粉样斑块形成开始之前递送。在一些实施方案中，组合物在淀粉样斑块发生开始之后递送。

21、在一些实施方案中，向对象提供有效量的用于神经退行性疾病、障碍或病症的一种或更多种另外的治疗。在一些实施方案中，一种或更多种另外的治疗包括阿尔茨海默病药物。在一些实施方案中，阿尔茨海默病药物包括阿杜那单抗(aducanumab)、多奈哌齐(donepezil)、利凡斯的明(rivastigmine)、加兰他敏(galantamine)、美金刚(memantine)或他克林(tacrine)。

22、“个体”、“对象”和“患者”可互换使用，并且可指人或非人。

23、在本技术通篇，术语“约”用于指示这样的值，其包括用于测量或定量方法的误差的固有变化。

24、当与术语“包含/包括”结合使用时，没有数量词修饰的名词的使用可意指“一个/种”，但是其也符合“一个/种或更多个/种”、“至少一个/种”和“一个/种或多于一个/种”的含义。

25、短语“和/或/或者”意指“和”或者“或/或者”。举例来说，a、b和/或c包括：单独的a、单独的b、单独的c、a和b的组合、a和c的组合、b和c的组合、或者a、b和c的组合。换句话说，“和/或/或者”作为包含性的或来使用。

26、词语“包含”(及其任何变化形式)，“具有”(及其任何变化形式)，“包括”(及其任何变化形式)或“含有”(及其任何变化形式)是包含性的或开放式的，并且不排除另外的未列举的要素或方法步骤。

27、所述组合物和方法根据其用途可“包含/包括”在本说明书通篇公开的任何成分或步骤、“基本上由其组成”或“由其组成”。“基本上由”任何公开的成分或步骤组成的组合物和方法将权利要求书的范围限制在不实质影响要求保护的发明的基本特征和新特征的特定材料或步骤。

28、在治疗性、诊断性或生理性目的或作用的背景下的任何方法也可以以“用途”权利要求语言描述，例如本文中所讨论的任何化合物、组合物或药剂用于实现或实施所描述的治疗性、诊断性或生理性目的或作用的“用途”。

29、预期本说明书中讨论的任何实施方案可相对于本发明的任何方法或组合来实施，反之亦然。此外，本发明的组合物可用于实现本发明的方法。

30、根据以下详细描述，本发明的其他目的、特征和优点将变得明显。然而，应理解，尽管具体实施方式和具体实施例指示了本发明的一些具体实施方案，但是它们仅以举例说明的方式给出，因为从该详细描述中，本发明的精神和范围内的多种变化和修改对本领域技术人员而言将变得明显。