防粘连材料
1.本技术是申请日为2017年9月29日、申请号为“201780059811.0”、发明名称为“防粘连材料”的申请的分案申请。
技术领域
2.本发明涉及用于抑制在外科手术后等中发生粘连的防粘连材料。
背景技术：
3.外科手术中，因术中的生物体组织表面的损伤、出血、炎症等，导致在该组织与周围的组织之间可能发生粘连。粘连由于妨碍脏器的正常动作，因此作为术后的并发症而成为问题。例如，在开腹手术中，如果腹腔内的肠管与腹壁或肠管彼此粘连，则肠管的流动性受损，有时引起肠梗阻(粘连性肠梗阻)。因此，大多需要重新手术。
4.因此，开发使用各种防粘连材料。现在使用的防粘连材料在至受损的组织部位治愈为止的时间内，将该受损部位与周围的组织物理隔离，从而防止粘连。此外，认为防粘连材料优选在生物体内的损伤治愈完成的1~4周的时间内溶解或分解。其理由在于，因长期留置而有可能持续引起因异物反应导致的发热和炎症。
5.作为以往的防粘连材料，已知利用普鲁兰多糖等水溶性高分子的防粘连材料。例如，专利文献1中，提出了具有包含水溶性高分子的基体层和包含脂肪族酯的覆盖层、与以往相比润湿时的处理性优异的防粘连材料。此外，已知利用生物降解性聚合物的防粘连材料，特别是通过将生物降解性聚合物与水溶性聚合物层叠从而提高了处理性的防粘连材料。例如，专利文献2中，提出制造在具有柔性的非水溶性树脂片上层叠有非水溶性高分子薄膜、和包含水溶性高分子的水溶性高分子膜的层叠体，提供在对象上应用非水溶性高分子薄膜时的操作性得以提高的片材。专利文献3中，作为生物体适应性优异且处理容易、且适合于防粘连膜等医疗用途的层叠体，提出了层叠包含纤维结构体和聚乳酸系树脂的层的层叠体，所述纤维结构体包含水溶性树脂。
6.现有技术文献专利文献专利文献1：国际公开第2011/081162号专利文献2：日本特开2014-140978号专利文献3：国际公开第2015/194616号。
技术实现要素：
7.发明所要解决的课题但是，以往的防粘连材料中，在作为防粘连材料的功能和使用时的处理性等方面存在应当改良的点。例如，专利文献1所述的防粘连材料中，包含水溶性高分子的基体层被包含脂肪族酯的覆盖层覆盖，且难以去除覆盖层，因此可以认为基体层与生物体组织的粘接变得不充分。此外，专利文献2和3中记载的材料中，针对生物降解性聚合物的生物降解性
的控制未进行充分研究，因此可以认为在生物体内留置时存在长期残留的可能性。因此，本发明的目的在于，提供具有可切实地贴附于生物体组织上的操作性、且组织密合性和生物降解性得到改善的防粘连材料。
8.解决课题的手段本发明人等研究上述那样的问题的结果是，发现强度、处理性优异、且在生物体内留置时的降解性也优异的防粘连材料的结构。本发明的要旨如下所述。
9.(1) 防粘连材料，其具有包含水溶性聚合物的厚度为1~1000μm的水溶性支撑层、和包含生物降解性聚合物且厚度为10~1000nm的防粘连层，上述生物降解性聚合物具有支链型聚亚烷基二醇与聚羟基烷酸键合而成的结构，且上述支链型聚亚烷基二醇相对于总质量的质量比率为1~40%，所述支链型聚亚烷基二醇每1分子具有3~8个末端羟基。
10.(2) 根据(1)所述的防粘连材料，其中，上述支链型聚亚烷基二醇具有直链聚亚烷基二醇键合于多元醇的结构。
11.(3) 根据(1)或(2)所述的防粘连材料，其中，上述聚羟基烷酸是选自乳酸、乙醇酸和己酸中的单体的均聚物、或者含有2种以上的上述单体的共聚物。
12.(4) 根据(1)~(3)中任一项所述的防粘连材料，其中，上述生物降解性聚合物具有下述的式(i)表示的结构：[化1][式中，l、m、n和o各自独立地为24~88的整数，a、b、c和d各自独立为式(ii)表示的基团或式(iii)表示的基团：[化2](式中，x为90~148的整数)；[化3](式中，y为72~132的整数，z为19~39的整数)]。
[0013]
(5) 根据(1)~(4)中任一项所述的防粘连材料，其中，上述生物降解性聚合物具有下述的式(iv)表示的结构，[化4]
[式中，p、q、r、s和t分别且在各重复单元中独立地为5~20的整数，u为0~4的整数，a、b、c、d和e分别且在各重复单元中独立地为式(ii)表示的基团或式(iii)表示的基团：[化5](式中，x为40~80的整数)；[化6](式中，y为35~65的整数，z为9~20的整数)]。
[0014]
(6) 根据(1)~(5)中任一项所述的防粘连材料，其中，上述式(i)和上述式(iv)表示的生物降解性聚合物中的聚羟基烷酸为乳酸与乙醇酸的共聚物，上述生物降解性聚合物中含有的上述乳酸的摩尔数相对于上述乙醇酸的摩尔数的比率为3.0~5.0。
[0015]
(7) 根据(1)~(6)中任一项所述的防粘连材料，其中，上述水溶性聚合物为多糖类或修饰多糖类。
[0016]
(8) 根据(1)~(6)中任一项所述的防粘连材料，其中，上述水溶性聚合物选自普鲁兰多糖、透明质酸、酰化普鲁兰多糖、酰化透明质酸、乙酰化普鲁兰多糖和乙酰化透明质酸以及它们的2种以上的混合物。
[0017]
(9) 根据(1)~(8)中任一项所述的防粘连材料，其中，在基板上设置上述支撑层，上述支撑层以可从基板剥离的强度粘接在基板上，上述防粘连层设置在上述支撑层上。
[0018]
本说明书包括作为本技术优先权基础的日本专利申请第2016-194699号的公开内容。
[0019]
发明的效果本发明的防粘连材料具有对于贴附在生物体内的目标部位而言充分的强度和处理性，并且在生物体内的生物降解性也优异。根据本发明的防粘连材料，与以往相比，能够抑制术后的患者因粘连引起的并发症的发病。
附图说明
[0020]
图1是针对实施例1和2以及比较例1和2的防粘连材料，示出进行使用小鼠的防粘
连能力评价的结果的图。
[0021]
图2是针对实施例2和6~9的防粘连材料和阴性对照组，示出进行使用大鼠的防粘连能力评价的结果的图。
具体实施方式
[0022]
(防粘连材料的结构的概要)本发明的防粘连材料包含：包含水溶性聚合物的水溶性支撑层、和包含生物降解性聚合物的防粘连层。支撑层只要相对于防粘连层存在于上层或下层中的至少一者即可，也可以存在于上层和下层两者而形成通过2个支撑层夹持防粘连层的结构。支撑层与防粘连层优选相邻。2个支撑层夹持防粘连层的结构的情况中，优选至少1个支撑层与防粘连层相邻。然而，在支撑层与防粘连层之间，可以存在例如含有抗炎症剂等药物的层。
[0023]
(防粘连层)防粘连层最终留置在生物体内，是发挥防粘连功能的层。防粘连层包含生物降解性聚合物，厚度为10~1000nm。防粘连层的厚度从提高强度和处理性的观点出发，优选为25nm以上、特别是50nm以上、尤其是70nm以上，从在生物体中的密合性和在生物体内的降解性的观点出发，优选为500nm以下、特别是300nm以下、尤其是200nm以下。防粘连层的厚度可以通过利用原子力显微镜观察例如在硅晶片上载置的防粘连层与硅晶片的高低差来测定。
[0024]
防粘连层相对于防粘连层的总质量优选包含90质量%以上、特别优选包含95质量%以上的生物降解性聚合物。防粘连层可以仅由生物降解性聚合物组成。但是，防粘连层中，在不损害其物性的范围内，可以包含各种的添加剂。添加剂的量相对于防粘连层的总质量优选为0~5质量%的范围。作为添加剂，可以举出例如抗氧化剂、耐候稳定剂、热稳定化剂、润滑剂、结晶成核剂、紫外线吸收剂、着色剂等。添加剂可以包含多种。此外，除了上述的添加剂之外，可以包含含有无机或有机化合物的颗粒。颗粒的量相对于防粘连层的总质量优选为0~5质量%的范围。作为这样的颗粒，可以举出例如包含碳酸钙、二氧化钛、二氧化硅、氟化钙、氟化锂、氧化铝、硫酸钡、氧化锆和磷酸钙等的颗粒以及交联聚苯乙烯系颗粒、金属纳米颗粒等。
[0025]
防粘连层如后述那样，在溶解水溶性支撑层后，优选形成膜状。应予说明，本说明书中，“膜”是指具有二维广度的全部结构物，是也包括被称为片、板的形态的概念。膜可以通过部分具有缺损而不连续，或者可以为多孔性的。
[0026]
防粘连层包含具有生物体适应性的材料。本说明书中，具有“生物体适应性”或“生物体亲和性”的材料是指对生物体组织几乎或者完全不造成刺激、负面影响。更具体而言，是指该材料不会产生或溶出对生物体组织有害的物质，与该材料接触的生物体组织不会将该材料判断为异物而示出炎症、血液凝固等防御反应。
[0027]
(生物降解性聚合物)生物降解性聚合物具有支链型聚亚烷基二醇与聚羟基烷酸键合而成的结构、即嵌段共聚物结构，所述支链型聚亚烷基二醇每1分子具有3~8个末端羟基。生物降解性聚合物的平均分子量如果过小，则分子间的相互作用变弱而制膜性降低，无法得到充分的强度，另一方面，如果过大，则溶解于溶剂中时粘度变高，可能难以制膜。
[0028]
聚羟基烷酸可以是由一种单体形成的均聚物(均聚物)，或者可以是由二种以上的
单体形成的共聚物(共聚物)。聚羟基烷酸为共聚物时，可以为无规共聚物和嵌段共聚物中任一者。作为构成聚羟基烷酸的单体的具体例，可以举出乳酸、3-羟基丁酸、乙醇酸和己酸。此外，作为生成聚羟基烷酸的原料单体的具体例，可以举出ε-己内酯。优选地，聚羟基烷酸为选自乳酸、乙醇酸和己酸中的单体的均聚物，或者是包含2种以上的上述单体的共聚物。从确保充分的生物降解性的观点出发，聚羟基烷酸优选为乳酸与乙醇酸的共聚物、特别是无规共聚物。此外，该情况中，上述共聚物中的上述乳酸的摩尔数相对于上述乙醇酸的摩尔数1.0的比率更优选为3.0~5.0。构成聚羟基烷酸的单体可以为l体或d体中任一者，根据情况，可以在聚合物中混合存在d体和l体(dl体)，但从机械强度等物性优异的观点等出发，优选仅由d体或l体组成。
[0029]
支链型聚亚烷基二醇优选具有多元醇所具有的多个羟基之中的至少一部分、优选全部羟基上键合有聚亚烷基二醇的结构。但是，不限于此，在多元醇的部分羟基上不键合聚亚烷基二醇也可以。支链型聚亚烷基二醇如果具有在多元醇上键合有直链聚亚烷基二醇的结构，则机械强度提高，故而优选。多元醇优选具有3个以上、更优选4个以上的羟基。作为多元醇的具体例，可以举出丙三醇、聚丙三醇(特别是丙三醇的2~6聚体)、季戊四醇以及葡萄糖、果糖、木糖、半乳糖、甘露糖、赤藓糖、阿拉伯糖、蔗糖、麦芽糖乳糖、海藻糖和纤维二糖等糖类。这些多元醇具有生物体适应性，因此特别优选作为防粘连材料的原料。
[0030]
键合于多元醇的羟基的聚亚烷基二醇链的数量如果过少，则分子间相互作用变弱，另一方面，在过多的情况中发生立体位阻，在使末端羟基与羟基烷酸聚合的反应的反应性、或者生物降解性聚合物的膜成型性、机械特性方面有可能产生问题。因此，在一分子的多元醇上键合的聚亚烷基二醇链的数量优选为3~8的范围、更优选为3~6的范围、进一步优选为3~5的范围、特别优选为3~4的范围。
[0031]
生物降解性聚合物的支链型聚亚烷基二醇相对于总质量的质量比率为1~40%。支链型聚亚烷基二醇的含有比率如果过少，则膜的柔软性变得不充分，难以追随生物体组织，另一方面，如果过多，则不仅制膜性降低，而且水溶性变得过高，在生物体组织上贴附膜后立刻溶解。从这样的观点出发，嵌段共聚物的支链型聚亚烷基二醇嵌段相对于总质量的质量比率优选为1%以上、特别是5%以上，优选为40%以下、特别是25%以下，例如优选为5~40%的范围。
[0032]
应予说明，包含聚羟基烷酸嵌段和聚亚烷基二醇嵌段的嵌段共聚物的各嵌段相对于总质量的质量比率和数均分子量可以进行嵌段共聚物的1h-nmr测定，由源自聚羟基烷酸和聚亚烷基二醇各自的特征性化学结构的质子的化学位移的信号的积分值、重复单位中含有的氢原子的数量和重复单体的数均分子量而算出。
[0033]
例如，包含支链聚乙二醇嵌段和聚(乳酸-乙醇酸)共聚物的嵌段共聚物的情况中，源自聚乙二醇的亚乙基的4个氢原子的化学位移3.4~3.7ppm的信号的相对积分值为a，源自乳酸的甲基的3个氢原子的化学位移1.4~1.6ppm的信号的相对积分值为b，源自乙醇酸的亚甲基的2个氢原子的化学位移4.7~4.9ppm的信号的相对积分值为c时，嵌段共聚物的支链聚乙二醇和聚羟基烷酸相对于总质量的质量比率使用各重复单体的分子量44、72、58，分别用下述的计算式1和2表示。此外，聚支链乙二醇和聚烷酸的数均分子量可以通过对嵌段共聚物的数均分子量乘以各自的质量比率而算出。
[0034]
支链聚乙二醇的质量比率(%)=100
×
(44
×
a/4)/((44
×
a/4)＋(72
×
b/3)＋(58
×
c/2))
ꢀ…
计算式1聚羟基烷酸的质量比率(%)=100
×
((72
×
b/3)＋(58
×
c/2))/((44
×
a/4)＋(72
×
b/3)＋(58
×
c/2))
ꢀ…
计算式2此外，对于共聚物中含有的聚羟基烷酸嵌段中含有的构成单体的各摩尔数的比率，可以进行嵌段共聚物的1h-nmr测定，由源自聚羟基烷酸和聚亚烷基二醇各自的特征性化学结构的质子的化学位移的信号的积分值、重复单位中含有的氢原子的数量和重复单体的数均分子量而算出。
[0035]
例如，共聚物中含有的聚羟基烷酸嵌段为乳酸和乙醇酸的共聚物时，上述乳酸的摩尔数相对于上述乙醇酸的摩尔数的比率使用上述计算式1和2中使用的源自乳酸的甲基的3个氢原子的化学位移1.4~1.6ppm的信号的相对积分值b、源自乙醇酸的亚甲基的2个氢原子的化学位移4.7~4.9ppm的信号的相对积分值c，用下述的计算式3表示。
[0036]
共聚物中含有的乳酸的摩尔数相对于乙醇酸的摩尔数的比率=(b/3)/(c/2)
ꢀ…
计算式3作为支链型聚亚烷基二醇，具体而言，可以适合使用由日油株式会社市售的“sunbright(注册商标)pte”系列(具有在季戊四醇的羟基上键合有聚乙二醇链的结构)和“sunbright(注册商标)hgeo”系列(具有在具有8个羟基的聚丙三醇的羟基上键合有聚乙二醇的结构)。
[0037]
优选的一个实施方式中，生物降解性聚合物是具有下述的式(i)表示的结构的聚合物。
[0038]
[化7]式(i)中，l、m、n和o各自独立地为24~88的整数，a、b、c和d各自独立地为式(ii)表示的基团或式(iii)表示的基团：[化8](式中，x为90~148的整数)[化9](式中，y为72~132的整数，z为19~39的整数)。
[0039]
应予说明，式(iii)中，大括号包围的部分是指小括号包围的单体单元无规聚合(以下在本说明书中皆同)。
[0040]
优选的另一个实施方式中，生物降解性聚合物是具有下述的式(iv)表示的结构的聚合物。
[0041]
[化10]
式(iv)中，p、q、r、s和t分别且在各重复单元中独立地为5~20的整数，u为0~4的整数，a、b、c、d和e分别且在各重复单元中独立地为式(ii)表示的基团或式(iii)表示的基团：[化11](式中，x为40~80的整数)[化12](式中，y为35~65的整数，z为9~20的整数)。
[0042]
(生物降解性聚合物的制造方法)支链型聚亚烷基二醇与聚羟基烷酸的键合可以通过任意方法进行。例如，可以举出以聚亚烷基二醇链的末端羟基作为起点而将羟基烷酸聚合的方法；将支链型聚亚烷基二醇与聚羟基烷酸通过缩合反应而键合的方法。更具体而言，例如在支链型聚亚烷基二醇的存在下，将丙交酯等羟基烷酸的环状酯中间体使用辛酸锡那样的催化剂在减压下进行开环聚合，由此可以得到生物降解性聚合物。可以利用在用于进行聚合反应的有机溶剂中进行加热回流的过程中通过调节条件而去除水分、低分子化合物的方法、或者在聚合反应结束后使催化剂失活而抑制解聚反应的方法等针对聚羟基烷酸的制造而公知的方法。例如，如果将所得嵌段共聚物在减压下进行热处理，则可以使未反应的环状酯中间体升华而去除。
[0043]
(防粘连层的生物降解性)本发明的防粘连材料中，在生物体内留置而发挥防粘连功能的防粘连层的特征特别在于生物降解性优异。应予说明，生物降解性是指包括水解和利用在生物体内存在的酶的酶解两者的概念。
[0044]
即使是具有生物体适应性的聚合物，留置数月~数年时，发生因异物反应而引起的炎症等的风险也变高。因此，在生物体内留置的防粘连层优选具有在留置开始起28天左右
质量达到最初的一半左右的生物降解性。从这样的观点出发，防粘连层的生物降解性可以优选地具有的特征是，在37℃的磷酸缓冲生理食盐水(phosphate buffered saline，以下称为“pbs”)中以相对于试样1mg为10ml的比例浸渍，以50rpm左右的速度缓慢地持续振荡时，经过28天后的质量减少率以浸渍前的质量为基准计为50%以上、特别是55%以上、尤其是60%以上。上述的经过28天后的质量减少率更优选为70%以上、特别优选为95%以上、特别是100%以上。
[0045]
(支撑层)支撑层是包含水溶性聚合物的层，厚度为1~1000μm。支撑层具有移送至贴附对象的生物体组织为止时支撑防粘连材料的形态的功能，且具有在贴附在生物体组织上时能够通过给予水分而溶解、能够不进行剥离等操作而去除的性质。支撑层的厚度从提高防粘连材料的强度和处理性的观点出发，优选为10μm以上，从适度缩短在水中的溶解时间的观点出发，优选为500μm以下、特别是300μm以下。例如，支撑层的厚度更优选为10~300μm。应予说明，支撑层的厚度可以通过例如使用刻度为0.001mm或者0.01mm的指针式厚度仪而测定任意的10点的值，算出其平均值而求出。
[0046]
支撑层优选包含90质量%以上、特别优选95质量%以上的水溶性聚合物。支撑层可以仅由水溶性聚合物组成。作为水溶性聚合物，优选在生物体内具有生物体适应性，以使得该水溶液不引起炎症。作为具有生物体适应性的水溶性聚合物的例子，可以举出多糖类、修饰多糖类、蛋白质和其他水溶性合成聚合物。作为具体例，可以举出普鲁兰多糖、透明质酸、藻酸、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、羧基甲基纤维素、酰化普鲁兰多糖、酰化透明质酸、乙酰化普鲁兰多糖、乙酰化透明质酸、聚乙烯醇、聚乙烯醇缩乙醛、聚乙烯醇缩甲醛、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚乙二醇、聚丙烯酰胺、瓜尔胶、刺槐豆胶、α化淀粉、聚乙烯基吡咯烷酮和聚乙烯基吡咯烷酮-乙酸乙烯酯嵌段共聚物以及它们的盐等。这些之中，优选以特别是生物体适应性优异的普鲁兰多糖、透明质酸、酰化普鲁兰多糖、酰化透明质酸、乙酰化普鲁兰多糖和乙酰化透明质酸、尤其是普鲁兰多糖和透明质酸作为水溶性聚合物。
[0047]
支撑层与水接触至溶解为止的时间如果为10秒以上、特别是15秒以上、尤其是30秒以上，则能够在生物体组织上重贴防粘连材料，因此从处理性的观点出发是优选的。此外，至溶解为止的时间如果为5分钟以下、特别是3分钟以下、尤其是2分钟以下，则能够在生物体组织上贴附后迅速去除支撑层，使得处理时间缩短，故而优选。应予说明，在本说明书中，支撑层与水接触至溶解为止的时间是指从水溶性支撑层的表面滴加一滴(约0.04ml)水起，至水到达另一个表面所需要的时间。水到达另一个表面是指从对支撑层滴加了水的表面起缓慢溶解，无法保持另一个表面的形状而溶解。
[0048]
支撑层可以包含均质的单一的层，或者可以包含多个层。此外，支撑层只要包含水溶性聚合物、且具有充分的水溶性，则可以为膜状、无纺布状、网格状、水凝胶状等任意的形态。支撑层包含多个层时，只要支撑层整体达到上述的范围的厚度，则各层可以具有任意的厚度、例如0.1μm以上、特别是1μm以上、且800μm以下、特别是500μm以下的范围的厚度。
[0049]
(基板)本发明的防粘连材料可以进一步具有通过基板而将支撑层进行支撑的结构。此时，优选支撑层以可剥离的强度粘接在基板上，另一方面，防粘连层与支撑层形成一体，以无法剥离的强度彼此粘接。通过具有这样的结构，例如可以至即将贴附在生物体组织上之
前为止，在包含支撑层和防粘连层的层叠体被基板支撑的状态下处理防粘连材料，可以在贴附时从基材上剥离包含支撑层和防粘连层的层叠体而使用，处理性进一步提高，故而优选。
[0050]
基板的材质没有特别限定，可以使用包含玻璃基材、金属基材、树脂基材等任意的材质的基材。然而，从经济性、表面平滑性的观点出发，优选使用树脂基材、例如塑料膜等。基材如果具有柔软性，则处理性提高，故而更优选。作为基材，优选为例如包含聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(pbt)等聚酯的膜，进一步如果厚度为0.1~300μm的范围，则具有柔软性，故而优选。
[0051]
(防粘连材料的制造方法)本发明的防粘连材料可以通过例如在基材上涂布包含水溶性聚合物的溶液而形成支撑层，在其上涂布包含生物降解性聚合物的溶液而形成防粘连层，从而制造。本发明在另一方式中，涉及防粘连材料的制造方法，其包括：在基材上涂布包含水溶性聚合物的溶液而形成支撑层的步骤、和进一步涂布包含生物降解性聚合物的溶液而形成防粘连层的步骤。溶解聚合物的溶剂可以使用任意溶剂，如果是水溶性聚合物，则可以适合使用水或乙醇等水混溶性有机溶剂，如果是生物降解性聚合物，则可以适合使用例如乙酸乙酯、丙酮、二氯甲烷等极性有机溶剂。
[0052]
包含聚合物的溶液的涂布方法没有特别限定，可以使用例如旋涂、凹版辊涂布、直接唇模涂布（
ダイレクトリップコーティング
）、狭缝涂布（
スロットコーティング
）、逗点涂布（
コンマコーティング
）、喷墨和丝网印刷等公知的技术而进行。基材如上述那样，可以使用包含任意的材质的基材。基材根据需要，可以在包含聚合物的溶液的涂布之前，实施粘接促进处理、例如在空气中、氮气中、氮/二氧化碳的混合气体中或其他氛围下的电晕放电处理、减压下的等离子体处理、火焰处理、紫外线处理等，可以实施使用聚氨酯树脂、环氧树脂、聚乙烯亚胺等锚固处理剂的锚固处理。
[0053]
(防粘连材料的使用方法)本发明在另一方面，涉及通过将上述那样的防粘连材料贴附在生物体组织从而预防粘连的方法。该方法在存在基材的情况中，包括：从基材上剥离包含支撑层和防粘连层的层叠体的步骤、使该层叠体与需要预防生物体组织的粘连的部分接触而贴附的步骤、和对贴附的层叠体给予水分而溶解支撑层的步骤。层叠体可以贴附以使得支撑层或防粘连层中任一者与生物体组织接触，但如果以防粘连层直接与生物体组织接触的方式贴附，则能够更切实地将防粘连层贴附在生物体组织上，故而优选。如果对在生物体组织上贴附的层叠体施加水等而给予水分，则支撑层迅速溶解，仅防粘连层在生物体组织中留置。留置的防粘连层在生物体组织内发挥防粘连功能。根据本发明的使用防粘连材料的方法，能够应用包含生物体降解性优异的聚合物、且具有对生物体组织的追随性、附着性而言优异的薄度、对生物体的负担低的防粘连材料，例如能够抑制因手术后的粘连而引起的并发症发生。
实施例
[0054]
以下，使用实施例更详细地说明本发明，但本发明不限于这些实施例。
[0055]
1.防粘连材料的制造(实施例1)
使4支链型聚乙二醇衍生物(季戊四醇聚乙二醇、sunbright(注册商标)pte-10t、日油株式会社制)(以下将该4支链型聚乙二醇衍生物称为“4peg”)的各末端羟基与l-丙交酯(purasorb(注册商标)l、corbion制)聚合，合成4peg-plla嵌段共聚物，所述4peg-plla嵌段共聚物通过1h-nmr(装置名：ex-270、测定频率：400mhz、测定溶剂：氘代氯仿、累算次数：8次、测定温度：室温(约25℃))，将pte-10t的分子量假定为10000而算出的数均分子量达到约40000。所得4peg-plla具有下述的通式(i)和(ii)表示的结构。
[0056]
[化13]在此，式(i)中，l、m、n和o各自独立地为50~60的整数，a、b、c和d各自独立地为式(ii)表示的基团，[化14](式(ii)中，x各自独立地为100~125的整数)。
[0057]
将重均分子量为约200000的普鲁兰多糖(日本药典普鲁兰多糖、株式会社 林原制)的水溶液(固体成分浓度10质量%水溶液、温度30℃下粘度为100~180mm2/秒)通过凹版辊法涂布在双轴拉伸聚酯(pet)膜(
ルミラー
(注册商标)
タイプ
：t60、厚度100μm、东
レ
株式会社制)(以下将该膜称为pet基板)上，设置膜厚为10μm的水溶性支撑层。应予说明，支撑层的膜厚使用指针式厚度仪(sm-1201l、株式会社
テクロック
制、刻度0.001mm、测定力1.5n以下)，由在任意的10点测定的平均值减去pet基板的厚度而算出。
[0058]
接着，在如上所述地设置的水溶性支撑层上，通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将上述得到的4peg-plla嵌段共聚物溶解于升温至70℃的乙酸乙酯中所得溶液，设置膜厚为120nm的防粘连层。
[0059]
应予说明，防粘连层的膜厚以下述方式测定。将由所得防粘连材料制作的试验片浸渍于水中，溶解水溶性支撑层，将剥离的防粘连层载置在裁切为40mm
×
40mm的尺寸的硅晶片(p型硅晶片、
ケイ
·
エス
·
ティ
·
ワールド
株式会社制、直径：100
±
0.5mm、整体的厚度：525
±
25μm、氧化膜的厚度：200nm、晶体的晶面指数：100、使用前在以3:1的体积比混合硫酸和过氧化氢水而得到的溶液中浸渍10分钟后，用去离子水(电阻率18ωcm)清洗)上，充分干燥后，使用原子力显微镜(纳米尺度混合显微镜vn-8000(
タッピングモード
)、株式会社
キーエンス
制)，扫描其一个区域(100μm
×
25μm)，将硅晶片与防粘连层的高低差测定为膜厚。
[0060]
(实施例2)使4peg(sunbright(注册商标)pte-10t、日油株式会社制)的各末端羟基与l-丙交酯(purasorb(注册商标)l、corbion制)和乙交酯(purasorb(注册商标)g、corbion公司制)无规聚合，合成4peg-plga嵌段共聚物，所述4peg-plga嵌段共聚物通过在与实施例1相同的条件下测定的1h-nmr，将pte-10t的分子量假定为10000而算出的数均分子量达到约46000。
乳酸的摩尔数相对于乙醇酸的摩尔数1.0的比率为4.1。所得4peg-plga嵌段共聚物具有下述的通式(i)和(iii)表示的结构。
[0061]
[化15]在此，式(i)中，l、m、n和o各自独立地为50~60的整数，a、b、c和d各自独立地为式(iii)表示的基团，[化16](式(iii)中，y各自独立地为90~120的整数，z各自独立地为23~33的整数)。
[0062]
以与实施例1相同的方式，在pet基板上设置水溶性支撑层，在其上通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将上述得到的4peg-plga嵌段共聚物溶解于升温至55℃的乙酸乙酯中所得溶液，设置膜厚为150nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0063]
(实施例3)使8支链型聚乙二醇衍生物(sunbright(注册商标)hgeo-50h、日油株式会社制)(以下将该8支链型聚乙二醇衍生物称为“8peg”)的各末端羟基与l-丙交酯(purasorb(注册商标)l、corbion公司制)聚合，合成8peg-plla嵌段共聚物，所述8peg-plla嵌段共聚物通过在与实施例1相同的条件下测定的1h-nmr，将hgeo-50h的分子量假定为5000而算出的数均分子量达到约43000。所得8peg-plla嵌段共聚物具有下述的通式(iv)和(ii)表示的结构。
[0064]
[化17]在此，式(iv)中、p、q、r、s和t各自独立地为10~15的整数，u为4，a、b、c、d和e分别且在各重复单元中独立地为式(ii)表示的基团，[化18](式(ii)中，x各自独立地为50~70的整数)。
[0065]
以与实施例1相同的方式，在pet基板上设置水溶性支撑层，在其上通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将上述得到的8peg-plla嵌段共聚物溶解于常温的二氯甲烷中所得溶液，设置膜厚为150nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0066]
(实施例4)使用与实施例1相同的普鲁兰多糖和pet基板，在pet基板上通过凹版辊法设置膜厚为5μm的第1水溶性支撑层。支撑层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0067]
接着，在如上所述地设置的第1水溶性支撑层上，通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将实施例2中得到的4peg-plga嵌段共聚物溶解于升温至55℃的乙酸乙酯中所得溶液，设置膜厚为150nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0068]
首先，在设置了防粘连层和第1水溶性支撑层的pet基板之外另行准备pet基板。使用与实施例1相同的普鲁兰多糖和pet基板，在pet基板上通过干式纺丝法设置膜厚为300μm、单位面积质量50g/m2的无纺布状的第2水溶性支撑层。第2水溶性支撑层的膜厚的测定与实施例1同样地进行，单位面积质量的测定通过jis l 1096 8.3.2(1999)中记载的方法测定。
[0069]
从pet基板上，将第1的水溶性支撑层与防粘连层一起剥离。从剥离的第1水溶性支撑层侧，通过蓄压式喷雾(
マルハチ
产业株式会社制)吹附5g/m2的纯水。其后迅速与第2水溶性支撑层贴合。
[0070]
(实施例5)以与实施例4相同的方式，在设置在pet基板上的包含普鲁兰多糖的膜厚5μm的水溶性支撑层上，作为防粘连层，以膜厚达到150nm的方式设置实施例2中得到的4peg-plga嵌段共聚物。各层的膜厚的测定分别与实施例1同样地进行。
[0071]
以与实施例4相同的方式，在pet基板上通过干式纺丝法设置膜厚为800μm、160g/m2的无纺布状的第2水溶性支撑层。第2水溶性支撑层的膜厚和单位面积质量的测定分别与实施例4同样地进行。
[0072]
与实施例4同样地，从pet基板上，将第1水溶性支撑层与防粘连层一起剥离，从剥离的第1水溶性支撑层侧，通过蓄压式喷雾吹附5g/m2的纯水。其后迅速与第2水溶性支撑层贴合。
[0073]
(实施例6)与实施例2同样地，使4peg(sunbright(注册商标)pte-10t、日油株式会社制)的各末端羟基与l-丙交酯(purasorb(注册商标)l、corbion公司制)和乙交酯(purasorb(注册商标)g、corbion公司制)无规聚合，合成4peg-plga嵌段共聚物，所述4peg-plga嵌段共聚物通过在与实施例1相同的条件下测定的1h-nmr，将pte-10t的分子量假定为10000而算出的数均分子量达到约30000。乳酸的摩尔数相对于乙醇酸的摩尔数1.0的比率为4.2。所得4peg-plga嵌段共聚物具有下述的通式(i)和(iii)表示的结构。
[0074]
[化19]
在此，式(i)中，l、m、n和o各自独立地为50~60的整数，a、b、c和d各自独立地为式(iii)表示的基团，[化20](式(iii)中，y各自独立地为40~80的整数，z各自独立地为9~20的整数)。
[0075]
以与实施例4相同的方式，设置在pet基板上设置的包含普鲁兰多糖的膜厚5μm的水溶性支撑层，作为防粘连层，将上述得到的4peg-plga嵌段共聚物溶解于升温至60℃的丙酸乙酯中，将所得溶液通过凹版辊法进行涂布，以膜厚达到150nm的方式设置。各层的膜厚的测定分别与实施例1同样地进行。
[0076]
以与实施例4相同的方式，在pet基板上通过干式纺丝法设置膜厚为300μm、160g/m2的无纺布状的第2水溶性支撑层。第2水溶性支撑层的膜厚和单位面积质量的测定分别与实施例4同样地进行。
[0077]
与实施例4同样地，从pet基板上将第1水溶性支撑层与防粘连层一起剥离，从剥离的第1水溶性支撑层侧，通过蓄压式喷雾吹附5g/m2的纯水。其后迅速与第2水溶性支撑层贴合。
[0078]
(实施例7)与实施例2同样地，使4peg(sunbright(注册商标)pte-10t、日油株式会社制)的各末端羟基与l-丙交酯(purasorb(注册商标)l、corbion制)和乙交酯(purasorb(注册商标)g、corbion公司制)无规聚合，合成4peg-plga嵌段共聚物，所述4peg-plga嵌段共聚物通过在与实施例1相同的条件下测定的1h-nmr，将pte-10t的分子量假定为10000而算出的数均分子量达到约40000。乳酸的摩尔数相对于乙醇酸的摩尔数1.0的比率为4.0。所得4peg-plga嵌段共聚物具有下述的通式(i)和(iii)表示的结构。
[0079]
[化21]在此，式(i)中，l、m、n和o各自独立地为50~60的整数，a、b、c和d各自独立地为式(iii)表示的基团，[化22](式(iii)中，y各自独立地为70~110的整数，z各自独立地为16~28的整数)。
[0080]
以与实施例4相同的方式，在pet基板上设置包含普鲁兰多糖的膜厚5μm的水溶性支撑层，作为防粘连层，将上述得到的4peg-plga嵌段共聚物溶解于升温至60℃的丙酸乙酯中，将所得溶液通过凹版辊法进行涂布，以膜厚达到150nm的方式设置。各层的膜厚的测定分别与实施例1同样地进行。
[0081]
以与实施例4相同的方式，在pet基板上通过干式纺丝法设置膜厚为300μm、160g/
plga嵌段共聚物具有下述的通式(i)和(iii)表示的结构。
[0089]
[化25]在此，式(i)中，l、m、n和o各自独立地为50~60的整数，a、b、c和d各自独立地为式(iii)表示的基团，[化26](式(iii)中，y各自独立地为90~125的整数，z各自独立地为20~30的整数)。
[0090]
以与实施例4相同的方式，在pet基板上设置包含普鲁兰多糖的膜厚5μm的水溶性支撑层，作为防粘连层，将上述得到的4peg-plga嵌段共聚物溶解于升温至60℃的丙酸乙酯中，将所得溶液通过凹版辊法进行涂布，以膜厚达到150nm的方式设置。各层的膜厚的测定分别与实施例1同样地进行。
[0091]
以与实施例4相同的方式，在pet基板上通过干式纺丝法设置膜厚为300μm、160g/m2的无纺布状的第2水溶性支撑层。第2水溶性支撑层的膜厚和单位面积质量的测定分别与实施例4同样地进行。
[0092]
与实施例4同样地，从pet基板上，将第1水溶性支撑层与防粘连层一起剥离，从剥离的第1水溶性支撑层侧，通过蓄压式喷雾吹附5g/m2的纯水。其后迅速与第2水溶性支撑层贴合。
[0093]
(实施例10)与实施例2同样地，使4peg(sunbright(注册商标)pte-10t、日油株式会社制)的各末端羟基与l-丙交酯(purasorb(注册商标)l、corbion公司制)和乙交酯(purasorb(注册商标)g、corbion公司制)无规聚合，合成4peg-plga嵌段共聚物，所述4peg-plga嵌段共聚物通过在与实施例1相同的条件下测定的1h-nmr，将pte-10t的分子量假定为10000而算出的数均分子量达到约46000。乳酸的摩尔数相对于乙醇酸的摩尔数1.0的比率为3.7。所得4peg-plga嵌段共聚物具有下述的通式(i)和(iii)表示的结构。
[0094]
[化27]在此，式(i)中，l、m、n和o各自独立地为50~60的整数，a、b、c和d各自独立地为式(iii)表示的基团，[化28](式(iii)中，y各自独立地为88~118的整数，z各自独立地为24~32的整数)。
[0095]
以与实施例4相同的方式，在pet基板上设置包含普鲁兰多糖的膜厚5μm的水溶性支撑层，作为防粘连层，将上述得到的4peg-plga嵌段共聚物溶解于常温的乙腈中，将所得溶液通过凹版辊法进行涂布，以膜厚达到150nm的方式设置。各层的膜厚的测定分别与实施例1同样地进行。
[0096]
以与实施例4相同的方式，在pet基板上通过干式纺丝法设置膜厚为300μm、160g/m2的无纺布状的第2水溶性支撑层。第2水溶性支撑层的膜厚和单位面积质量的测定分别与实施例4同样地进行。
[0097]
与实施例4同样地，从pet基板上，将第1水溶性支撑层与防粘连层一起剥离，从剥离的第1水溶性支撑层侧，通过蓄压式喷雾吹附5g/m2的纯水。其后迅速与第2水溶性支撑层贴合。
[0098]
(比较例1)以与实施例1相同的方式，在pet基板上设置水溶性支撑层，在其上通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液为将聚乳酸(purasorb(注册商标)pdl20、corbion公司制)溶解于常温的乙酸乙酯中所得溶液，设置膜厚为150nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0099]
(比较例2)以与实施例1相同的方式，在pet基板上设置水溶性支撑层，在其上通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将聚乳酸-乙醇酸无规共聚物(purasorb(注册商标)pdlg5010、corbion公司制)溶解于升温至55℃的乙酸乙酯中所得溶液，设置膜厚为300nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0100]
(比较例3)使在一个末端具有甲基、且在另一个末端具有羟基的直链型的聚乙二醇(sunbright(注册商标)mek-20t、日油株式会社制)的羟基与l-丙交酯(purasorb(注册商标)l、corbion公司制)聚合，合成peg-plla嵌段共聚物，所述peg-plla嵌段共聚物通过在与实施例1相同的条件下测定的1h-nmr，将mek-20t的分子量假定为20000而算出的数均分子量达到约40000。所得peg-plla嵌段共聚物具有下述的通式(v)表示的结构。
[0101]
[化29]在此，式(v)中，a为200~250的整数，b为260~310的整数。
[0102]
以与实施例1相同的方式，在pet基板上设置水溶性支撑层，在其上通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将上述得到的peg-plla嵌段共聚物溶解于常温的二氯甲烷中所得溶液，设置膜厚为150nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0103]
(比较例4)使在一个末端具有甲基、且在另一个末端具有羟基的直链型的聚乙二醇(sunbright(注册商标)mek-20t、日油株式会社制)的羟基与l-丙交酯(purasorb(注册商标)l、corbion公司制)和乙交酯(purasorb(注册商标)g、corbion公司制)无规聚合，合成peg-plga嵌段共聚物，所述peg-plga嵌段共聚物通过在与实施例1相同的条件下测定的1h-nmr，将mek-20t的分子量假定为20000而算出的数均分子量达到约40000。乳酸的摩尔数相对于乙醇酸的摩尔数1.0的比率为2.4。所得peg-plga嵌段共聚物具有下述的通式(vi)表示
的结构。
[0104]
[化30]在此，式(vi)中，c为200~250的整数，d为200~210的整数，e为80~90的整数。
[0105]
以与实施例1相同的方式，在pet基板上设置水溶性支撑层，在其上通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将上述得到的peg-plga嵌段共聚物溶解于常温的二氯甲烷中所得溶液，设置膜厚为150nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0106]
(比较例5)使在末端具有羟基的直链型的聚乙二醇(sunbright(注册商标)dkh-20t、日油株式会社制)的各羟基与l-丙交酯(purasorb(注册商标)l、corbion公司制)和乙交酯(purasorb(注册商标)g、corbion公司制)无规聚合，合成plga-peg-plga嵌段共聚物，所述plga-peg-plga嵌段共聚物通过在与实施例1相同的条件下测定的1h-nmr，将dkh-20t的分子量假定为20000而算出的数均分子量达到约60000。乳酸的摩尔数相对于乙醇酸的摩尔数1.0的比率为1.8。所得plga-peg-plga嵌段共聚物具有下述的通式(vii)表示的结构。
[0107]
[化31]在此，式(vii)中，h为200~250的整数，g和i各自独立地为300~320的整数，f和k各自独立地为170~190的整数。
[0108]
以与实施例1相同的方式，在pet基板上设置水溶性支撑层，在其上通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将上述得到的plga-peg-plga嵌段共聚物溶解于常温的二氯甲烷中所得溶液，设置膜厚为150nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0109]
(比较例6)使用与实施例1相同的普鲁兰多糖和pet基板，在pet基板上通过凹版辊法设置膜厚为0.5μm的水溶性支撑层。支撑层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0110]
接着，在如上所述地设置的水溶性支撑层上通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将实施例2中得到的4peg-plga嵌段共聚物溶解于升温至55℃的乙酸乙酯中所得溶液，设置膜厚为150nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0111]
(比较例7)使用与实施例1相同的普鲁兰多糖和pet基板，在pet基板上通过流延法设置膜厚为20μm的水溶性支撑层。支撑层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0112]
接着，在如上所述地设置的水溶性支撑层上通过凹版辊法涂布溶液，所述溶液是将实施例2中得到的4peg-plga嵌段共聚物溶解于升温至55℃的乙酸乙酯中所得溶液，设置膜厚为150nm的防粘连层。防粘连层的膜厚的测定与实施例1同样地进行。
[0113]
以与实施例4相同的方式，在pet基板上通过干式纺丝法设置膜厚为6000μm、1500g/m2的无纺布状的第2水溶性支撑层。第2水溶性支撑层的膜厚和单位面积质量的测定分别与实施例4同样地进行。
[0114]
与实施例4同样地，从pet基板上，将第1水溶性支撑层与防粘连层一起剥离，从剥离的第1水溶性支撑层侧，通过蓄压式喷雾吹附5g/m2的纯水。其后迅速与第2水溶性支撑层
贴合。
[0115]
2.水溶性支撑层的溶解性试验(1)试验片的准备由按照实施例1~10和比较例1~7制造的防粘连材料，制作具有4cm2的面积的试验片，从pet基板上剥离包含防粘连层的水溶性支撑层，以水溶性支撑层为气相侧的方式配置。
[0116]
(2)试验方法水溶性支撑层的溶解性评价通过下述方法评价。从支撑层和防粘连层层叠的状态测定水溶性材料的层的溶解性时，首先进行防粘连层的去除。具体而言，向小皿(tpx小皿深型、
サンプラテック
株式会社制)中投入12g氯仿，将取样为5cm见方的层叠体(以下称为试验片)以水溶性材料的层不会浸渍在氯仿中的方式悬空固定，将防粘连层浸渍于氯仿中。其后，密闭而在35℃的升温状态下静置30分钟，进行3次左右的交换氯仿的作业后，取出试验片，进行自然干燥，由此进行防粘连层的去除。
[0117]
进行调整以使得试验片的水溶性支撑层的表面至滴定管的前端达到10mm的高度。从滴定管向水溶性支撑层的表面滴加1滴(约0.04ml)的常温的水时记作开始时间，水浸透至另一个表面而溶解时记作结束时间，测定从开始时间至结束时间所需要的时间。水到达另一个表面是指从对水溶性支撑层滴加了水的表面起缓慢溶解，无法保持另一个表面的形状而溶解。
[0118]
评价指标如下所述。
[0119]
评价a：至溶解结束所需要的时间为15秒以上且低于3分钟评价b：至溶解结束所需要的时间为10秒以上且低于15秒、或者3分钟以上且低于5分钟评价c：低于10秒、或者5分钟以上。
[0120]
(3)试验结果试验结果总结于下述的表1。实施例1~4、实施例6~10和比较例1~5的水溶性支撑层的溶解性均迅速溶解，溶解性优异。实施例5的水溶性支撑层的溶解性由于第2水溶性支撑层的厚度增加，因此存在水溶性延迟的倾向，但在5分钟以内溶解。另一方面，比较例6的水溶性支撑层由于厚度过薄，因此溶解过快，故而溶解性差。此外，对于比较例7的水溶性支撑层的溶解性，由于第1水溶性支撑层和第2水溶性支撑层各自的厚度大，因此未在5分钟以内溶解，溶解性差。
[0121]
[表1]试样水溶性评价实施例1a实施例2a实施例3a实施例4a实施例5b实施例6a实施例7a
实施例8a实施例9a实施例10a比较例1a比较例2a比较例3a比较例4a比较例5a比较例6c比较例7c
[0122]
3.防粘连层在水中的形态维持性的评价防粘连层在生物体内使用，因此在水中的形态维持性差时难以应用。因此，针对按照实施例1~10和比较例1~5而制造的试样，进行评价防粘连层在水中的形态维持性的试验。
[0123]
(1)试验片的准备由按照实施例1~10和比较例1~5而制造的防粘连材料，制作具有4cm2的面积的试验片。
[0124]
(2)试验方法向玻璃小皿中加入常温的去离子水，投入各试验片。使水溶性支撑层充分溶解，观察1天防粘连层的形态变化。
[0125]
(3)试验结果实施例1~10以及比较例1、2的防粘连层的形态维持性优异，没有确认到断裂、拉伸等变化。另一方面，比较例3和4的防粘连层在水溶性支撑层溶解后立刻断裂，形态维持性差。此外，比较例5的防粘连层在水溶性支撑层溶解后，先沿着横向拉伸后断裂，形态维持性也差。试验结果总结于下述的表2。
[0126]
[表2]试样形态维持性实施例1无变化实施例2无变化实施例3无变化实施例4无变化实施例5无变化实施例6无变化实施例7无变化实施例8无变化实施例9无变化实施例10无变化比较例1无变化比较例2无变化比较例3支撑层溶解后立刻断裂
比较例4支撑层溶解后立刻断裂比较例5支撑层溶解后，沿着横向拉伸，断裂
[0127]
4.防粘连层在pbs中的降解性评价(1)试验片的准备由按照实施例1和2以及比较例1和2制造的防粘连材料，制作具有250cm2的面积的试验片。使试验片浸渍在水中而溶解支撑层后，将残留的膜状的防粘连层通过pbs(dpbs、thermo fisher制)清洗3次，最终浸渍在50ml的pbs中。
[0128]
(2)试验方法将浸渍了防粘连层的pbs(50ml)升温至37℃，在50rpm下平稳地持续振荡。浸渍开始起28天后取出防粘连层，用氯仿萃取。进行过夜真空干燥后，测定质量。基于pbs浸渍前后的质量变化，按照下述的计算式4算出质量变化率。
[0129]
防粘连材料的质量减少率(%)=100
×
{(浸渍前的防粘连材料质量)-(浸渍后的防粘连材料质量)}/(浸渍前的防粘连材料质量)
ꢀ…
计算式4(3)试验结果试验结果总结于下述的表3。导入了peg的实施例1和2的防粘连层随着导入peg而亲水性提高，因此水解速度优异，28天后的质量减少率均为60%以上。另一方面，比较例1和2的防粘连层的水解速度差，28天后的质量减少率低，暗示在生物体内长期残留。
[0130]
[表3]试样在37℃、pbs中28天后的质量减少率(%)实施例161实施例265比较例14比较例226
[0131]
5.使用小鼠的防粘连能力评价(1)试验片的准备由按照实施例1和2以及比较例1和2制造的防粘连材料，制作具有4cm2的面积的试样，分别裁切为各1cm2，制成防粘连试验用的试验片。
[0132]
(2)试验方法将小鼠(c57bl/6系统、雌性、12~15周龄)在全身麻醉下通过约2cm的腹部正中切开而开腹，露出消化道。接着，用钳子提起单侧的腹壁，制作φ5mm的腹膜的缺损。其后，将从缺损部起1mm以内的附近提起并与盲肠的一端缝合，以盲肠与腹膜缺损部密切接近的方式配置。在盲肠与腹膜缺损部之间，配置从pet基板剥离的试验片，用0.5ml的生理食盐水溶解支撑层，配置在缺损部(贴附组)。针对相反侧的腹壁，也通过相同的操作制作腹膜缺损部，不贴附试验片，以消化管达到原始配置的方式返回体内，使用吸收性缝合线关腹(未贴附组)。应予说明，对实施例1和2以及比较例1和2所涉及的试样各自制作各7只以上的粘连模型小鼠。
[0133]
(3)粘连评分的评价从制作起7天后，将粘连模型小鼠通过颈椎脱臼处死，开腹而采集腹膜缺损部，按照规定的基准，由肉眼所见评价粘连评分。粘连评分进行1至5的5阶段评价，按照关于粘连
部位的剥离的下述评价基准打出评分。
[0134]
评分1：无粘连评分2：有粘连，但能够通过重力等而容易地剥离评分3：需要缓慢的剥离评分4：需要剧烈的剥离评分5：剥离时组织缺损(4)评价结果评价结果总结于下述的表4和图1的图中。各实施例或比较例内，进行贴附组与未贴附组间的平均粘连评分的显著性差异检验。显著性差异检验中，使用mann-whitney的u检验，通过ryan的方法进行多重比较。此外，一并在实施例与比较例间进行显著性差异检验。
[0135]
显著性差异检验的结果是，在实施例1和2以及比较例1和2的全组中，在贴附组与未贴附组间分别得到显著性差异。此外，各实施例和比较例间不存在显著性差异，显示任一试验片均表现同等的防粘连能力。
[0136]
[表4]。
[0137]
6.使用大鼠的防粘连能力评价(1)试验片的准备由按照实施例2、和实施例6~9制造的防粘连材料，制作具有9cm2的面积的试样，制成防粘连试验用的试验片。
[0138]
(2)试验方法将大鼠(crl：cd(sd)系统、雄性、6~7周龄)在全身麻醉下，通过约3~4cm的腹部正中切开而开腹，露出盲肠。接着，针对露出的盲肠的小肠侧的约2cm2，使用灭菌纱布擦蹭直至产生点状出血。在擦蹭部位配置试验片，用0.5ml的生理食盐水溶解支撑层，配置在缺损部(贴附组)。以盲肠达到原始配置的方式返回体内，使用吸收性缝合线关腹。应予说明，对实施例2和实施例6~9所涉及的试样各自制作各8只粘连模型大鼠。应予说明，作为阴性对照组，设置未贴附受试物质的组。
[0139]
(3)粘连评分的评价从制作起14天后，将粘连模型大鼠在麻醉下通过放血而处死，评价粘连引起部位的粘连评分。粘连评分进行1~5的5阶段评价，通过下述评价基准打出评分。
[0140]
评分1：无粘连评分2：细微、能够容易分离程度的粘连评分3：为窄范围但能够耐受轻度的牵引的程度的弱粘连评分4：相当牢固地粘连、或在至少2个部位粘连
评分5：在3个以上的部位粘连。
[0141]
(4)评价结果评价结果总结于下述的表5和图2的图中。关于实施例2和6~9，与阴性对照组相比，成功减少了粘连评分，各实施例示出了作为防粘连材料的有用性。
[0142]
[表5]试样平均粘连评分实施例21.9实施例62.3实施例71.5实施例81.6实施例91.5阴性对照组3.0
[0143]
产业实用性本发明的防粘连材料的生物体降解性优异，因此即使留置在体内，也迅速分解，安全性优异。此外，容易应用于需要防止、减少粘连的生物体组织的损伤部。因此，作为在医疗现场使用的防粘连材料有用性可以说非常高。
[0144]
本说明书中引用的全部出版物、专利和专利申请直接通过引用而并入本说明书中。