一种复方妥布霉素滴眼液及其制备方法与流程

1.本发明涉及制药技术领域，具体地说，涉及一种复方妥布霉素滴眼液及其制备方法。


背景技术：

2.复方妥布霉素滴眼液，是由妥布霉素和地塞米松复方配制而成的混悬型滴眼液。主要用于治疗对肾上腺皮质激素具有感受性的眼部疾患及眼部表面细菌感染，尤其适用于眼部绿脓杆菌感染。
3.混悬型滴眼剂是指难溶性固体药物以微粒状态分散于分散介质中形成的无菌眼用液体制剂。相较于溶液型滴眼剂，该剂型具有药物颗粒可在角膜前囊滞留、增加与角膜的接触时间从而提高药效的优势。
4.混悬型滴眼液应既符合混悬剂的质量要求，如粒度、沉降比等项目，又应符合滴眼液的质量要求，如ph值、渗透压、无菌、澄明度、粘度、稳定性等项目。混悬剂属于不稳定的分散体系，目前，在制备过程中通常将药物微粉化，混悬液中药物微粒分散度大，微粒与分散介质之间存在着物理界面，使混悬微粒具有较高的表面自由能，处于不稳定状态。混悬液在贮藏过程中易发生微粒团聚、沉降等物理稳定性问题。同时，悬型滴眼剂中微粒粒径过大时，容易产生异物感，反而使眼部较快排除药物。不同工艺制备的混悬型滴眼液由于微粒大小、滴眼液黏度等存在差异，导致在角膜前囊滞留的时间不同，进而影响疗效。
5.混悬型滴眼剂为无菌眼用液体制剂，但由于其中药物多以微粒状态分散，难以通过滤芯过滤除菌。目前，大多首先通过干热或辐射灭菌方式将药物灭菌，然后再加入药液中。由于眼用制剂包材或其中部分活性成分无法耐受湿热高温灭菌，通常采用除菌过滤法制备。复方妥布霉素滴眼液中的地塞米松以微粒状态分散，难以通过0.22μm孔径除菌滤芯。在湿热灭菌过程中，地塞米松容易因湿热而引起晶体粒径的增长。中国专利cn 1063944c《眼用复方妥布霉素混悬液的制法》采用干热法或紫外光照射或辐射等方法对地塞米松作干法灭菌，用除菌滤膜对妥布霉素作过滤灭菌。但是，上述灭菌法存在灭菌不够彻底或对灭菌设备有特殊要求的缺陷。
6.中国专利cn 105708844 b《一种妥布霉素地塞米松纳米混悬滴眼液及其制备方法》采用高剪切分散乳化技术进行剪切乳化，制得地塞米松混悬液，地塞米松微粒的平均粒径小于120nm，80％的地塞米松微粒粒径在100nm以下，经0.22μm微孔滤膜过滤除菌。但是，上述方法制备的药液中可能仍然会存在部分粒径较大的微粒，在除菌过滤时被截留导致含量损失，同时上述方法将微粒剪切乳化至纳米级别，当药物粒径太细可能减弱混悬液的滞留效应导致疗效降低，且文献报道纳米药物因其细微的尺寸也存在潜在的不良反应，更容易大量的穿过血脑屏障，引起神经毒性等。
7.综上所述，采用常规配制方法制备妥布霉素地塞米松滴眼液，地塞米松微粒粒径过大，在存放期间易发生聚团和沉降，在眼部滞留时间短、疗效差。同时，由于剂型特点地塞米松以微粒状态分散难以通过滤芯过滤除菌。通过干热或辐射灭菌方式，存在灭菌不够彻
底或对灭菌设备有特殊要求的缺陷。通过降低其粒径至纳米级，仍存在部分较大粒径无法通过滤芯，且纳米药物比大粒径药物更容易大量的穿过血脑屏障，引起神经毒性等。
8.因此，急需研发一种新的提高复方妥布霉素滴眼液物理稳定性和生物利用度的方法，同时进一步解决工业化生产灭菌问题。


技术实现要素：

9.为了克服现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种稳定性和生物利用度均理想的复方妥布霉素滴眼液，并进一步提供可解决该滴眼液工业化生产灭菌问题的方案。
10.为了实现该目的，本发明的技术方案如下：
11.一种复方妥布霉素滴眼液，活性成分为硫酸妥布霉素和地塞米松，其包括生物黏附剂、润湿剂和促渗透剂；所述生物黏附剂为黄原胶或聚卡波非；所述润湿剂为十二烷基硫酸钠或四丁酚醛；所述促渗透剂为丙二醇。
12.优选，所述生物黏附剂为聚卡波非；所述润湿剂为四丁酚醛。
13.本发明研究发现常规的混悬型滴眼液，常见缺陷如下：
14.(1)眼部生物相容性低：眼睛具有大量的生物屏障来保护它免受外源性物质的暴露。这些屏障包括眼泪流动的动态屏障和角膜及结膜上皮的静态屏障。这些屏障，限制了药物到达眼内靶组织，传统滴眼液在眼部的滞留时间短、生物利用率低。
15.(2)无菌保障度低：由于眼用制剂包材或其中部分活性成分无法耐受湿热高温灭菌，通常采用除菌过滤法制备。而混悬液中的药物以微粒状态分散，难以通过滤芯过滤除菌。干热或辐射灭菌方式，存在灭菌不够彻底或对灭菌设备有特殊要求的缺陷，而通过湿热灭菌工艺会导致药物粒径增长或发生聚团。
16.(3)药物粒径控制不佳：不同工艺制备的混悬型滴眼液由于微粒大小等存在差异，导致药物稳定性存在差异，贮存过程中容易出现沉降、不易再分散等问题。当药物粒径过大时，容易产生异物感，使眼部较快排除药物，影响在角膜前囊滞留的时间，进而影响疗效。
17.本发明提供的一种特定的复方妥布霉素滴眼液的药物组合物，其通过特定的生物黏附、润湿剂和促渗透剂的配合可以延长药物在眼部的滞留时间，提高药物与角膜的亲和力，增强渗透性，提高生物利用度，进而提高疗效。
18.本发明中，所述生物黏附剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为(10-15)：1g/l；所述润湿剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为(2-2.5)：1g/l；所述促渗透剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为(9-11)：1g/l。
19.优选，所述生物黏附剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为10：1g/l；所述润湿剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为2：1g/l；所述促渗透剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为10：1g/l。
20.本发明组分的特定比例配合可保证更佳的综合效果。
21.本发明的复方妥布霉素滴眼液，还包括助悬剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂和ph调节剂；所述助悬剂为聚乙烯吡咯烷酮，所述渗透压调节剂为氯化钠和无水硫酸钠，所述金属离子螯合剂为依地酸二钠，所述抑菌剂为苯扎氯铵，所述ph调节剂为硫酸或氢氧化钠；
22.和/或，所述地塞米松的粒径d(0.9)在5μm以下。
23.本发明特定的地塞米松的粒径可更好地延长药物的滞留时间，保证药效的充分发挥。
24.本发明中，助悬剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为(28-32)：1g/l、渗透压调节剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为(9-10)：1g/l(氯化钠和无水硫酸钠的质量比为1:(2-2.5)，优选为1:2.2)、金属离子螯合剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为(0.5-1)：1g/l、抑菌剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为(0.05-0.1)：1g/l；复方妥布霉素滴眼液的ph为5.0～7.0，优选为5.5。
25.硫酸妥布霉素与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为(4-5)：1g/l；地塞米松与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为(0.5-1)：1g/l。
26.优选，助悬剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为30：1g/l、渗透压调节剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为9.6：1g/l、金属离子螯合剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为1：1g/l、抑菌剂与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为0.1：1g/l；硫酸妥布霉素与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为4.58：1g/l；地塞米松与复方妥布霉素滴眼液的质量体积比为1：1g/l。
27.本发明的复方妥布霉素滴眼液，在制备时，先将地塞米松与占配方量一部分的助悬剂的水溶液混合后在研磨设备中一同进行高温灭菌，之后再进行研磨获得地塞米松混悬液；接着将所述地塞米松混悬液与经过膜过滤除菌的其余组分混合。
28.本发明的滴眼液采用特别的灭菌方式，可既保证活性成分的灭菌效果，又可使得地塞米松的分散性更佳，从而获得疗效更好、稳定性更佳的滴眼液。
29.本发明还提供一种制备上述复方妥布霉素滴眼液的方法，其在制备时，先将地塞米松与占配方量一部分的助悬剂(聚乙烯吡咯烷酮)的水溶液混合后在研磨设备中一同进行高温灭菌，之后再进行研磨获得地塞米松混悬液。
30.本发明在原料准备时，创新地在研磨前先将特定助悬剂与活性成分混合，之后将混合溶液加入研磨设备(如，纳米研磨机腔体)中，在助悬剂溶液的参与下进行高温灭菌，之后，再直接对地塞米松进行研磨。该方式将地塞米松的研磨和高温灭菌统一在同一个设备中进行，既避免了过滤灭菌损失活性成分的问题，又节省了原料处理步骤流程，且尤其是通过特定助悬剂参与高温湿热灭菌过程，可有效避免地塞米松药物颗粒在湿热灭菌过程中发生粒径的增长，结合后续的研磨操作，保证了更佳的地塞米松分散效果，提高了药物微粒的分散度和再分散性，进而保证了滴眼液的稳定性和使用效果。
31.优选，可在纳米研磨机腔体周围设计夹层，用于通过蒸汽，使药液升温实现高温灭菌。之后可将纳米研磨机腔体夹层通冷却水降温，再进行后续的研磨操作，使药物粒径d(0.9)达到一定范围。
32.本发明的方法中，所述地塞米松与占配方量一部分的助悬剂的水溶液的质量体积比为1：(180-220)g/ml；所述地塞米松与占配方量一部分的助悬剂的水溶液中的助悬剂的质量比为1:(7～8)，优选为1:7.5，可更好地在灭菌时实现避免地塞米松粒径增长的效果。
33.高温灭菌的温度为121℃，时间为10-12min；
34.和/或，所述研磨的转速为1000rpm～3000rpm，时间为20min～60min；
35.优选，研磨的转速为2000rpm，时间为40min，可兼顾研磨效果和生产成本、效率。
36.本发明研磨具体条件的选择用以使地塞米松的粒径d(0.9)在5μm以下，本领域技
术人员可根据本领域常识进行具体选择。
37.本发明的方法还包括：将所述地塞米松混悬液与经过膜过滤除菌的其余组分混合。
38.具体可将剩余配方量的助悬剂的水溶液、抑菌剂、ph调节剂等溶液一并通过0.22μm滤膜过滤除菌，之后再与无菌的地塞米松混悬液混合后按照所需体积进行灌装。
39.本发明的有益效果至少在于：
40.1、本发明发现现有技术制备的混悬型滴眼液，虽然相较于溶液型滴眼剂，具有药物颗粒可在角膜前囊滞留、增加与角膜的接触时间从而提高药效的优势。但是，由于泪液的不断稀释和泪道引流等原因，只有大约10％的药物能够进入眼内组织，因此药物的生物利用度很低。现有技术大多只在处方中利用一些增稠剂作为助悬成分，仅解决了混悬液本身物理稳定性等问题。
41.而本发明针对特定活性成分的滴眼液，通过加入特定的水溶性生物黏附剂改善了特定制剂的生物粘附性，延长了药物眼角膜滞留的时间，降低了鼻泪管引流造成的药物清除；且配合特定润湿剂，提高了药物与角膜的亲和力；配合特定促渗透剂，以与角质层脂质相互作用以改变其排列结构，从而增强了该特定滴眼液的渗透性，提高了生物利用度。最终制得的复方妥布霉素滴眼液，生物利用度高，生物相容性好，药物滞留时间长，疗效佳。
42.2、在制备方法方面，本发明研究发现现有技术多采用干热或辐射灭菌工艺处理混悬液中的活性成分。而本发明创新地采用将地塞米松在研磨设备中与特定助悬剂共同原位湿热灭菌的工艺，既保证产品的灭菌效果，又一定程度上避免了地塞米松颗粒湿热灭菌时存在的粒径增长问题，进一步配合研磨工艺，整体使药物以更佳的固体微粒状态分散于介质中，一方面可改善药液存放过程中的物理稳定性，另一方面可避免因眼部异物感导致药液被较快排除，延长了药液在眼部的滞留时间。且制备工艺简单，成本可控、安全环保、易于产业化。
附图说明
43.图1为实验例1中各样品静置24小时后的性状照片。
具体实施方式
44.下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。
45.下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到或按本领域常规方法制备。
46.实施例1复方妥布霉素滴眼液1#
47.本实施例提供一种复方妥布霉素滴眼液。由于地塞米松在水溶液中的溶解度低，故复方妥布霉素滴眼液中地塞米松为混悬液状态。处方组成见表1。
48.表1
49.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分
地塞米松1活性成分聚卡波非10生物黏附剂四丁酚醛2润湿剂丙二醇10促渗透剂聚乙烯吡咯烷酮30助悬剂氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
50.复方妥布霉素滴眼液的制备：
51.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
52.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
53.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
54.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、润湿剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
55.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
56.6.灌装。
57.实施例2复方妥布霉素滴眼液2#
58.本实施例提供一种复方妥布霉素滴眼液。处方组成见表2。
59.表2
60.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分地塞米松1活性成分聚卡波非10生物黏附剂十二烷基硫酸钠2.5润湿剂丙二醇10促渗透剂聚乙烯吡咯烷酮30助悬剂氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
61.复方妥布霉素滴眼液的制备：
62.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
63.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
64.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
65.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、润湿剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
66.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
67.6.灌装。
68.实施例3复方妥布霉素滴眼液3#
69.本实施例提供一种复方妥布霉素滴眼液。处方组成见表3。
70.表3
71.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分地塞米松1活性成分黄原胶15生物黏附剂四丁酚醛2润湿剂丙二醇10促渗透剂聚乙烯吡咯烷酮30助悬剂氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
72.复方妥布霉素滴眼液的制备：
73.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
74.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
75.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
76.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、润湿剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
77.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
78.6.灌装。
79.对比例1
80.本对比例提供一种复方妥布霉素滴眼液，与实施例1相比，区别仅在于不添加生物黏附剂。处方组成见表4。
81.表4
82.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分地塞米松1活性成分四丁酚醛2润湿剂丙二醇10促渗透剂聚乙烯吡咯烷酮30助悬剂氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
83.复方妥布霉素滴眼液的制备：
84.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
85.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
86.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
87.4.将硫酸妥布霉素、润湿剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
88.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
89.6.灌装。
90.对比例2
91.本对比例提供一种复方妥布霉素滴眼液，与实施例1相比，区别仅在于不添加润湿剂。处方组成见表5。
92.表5
93.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分地塞米松1活性成分聚卡波非10生物黏附剂丙二醇10促渗透剂聚乙烯吡咯烷酮30助悬剂
氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
94.复方妥布霉素滴眼液的制备：
95.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
96.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
97.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
98.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
99.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
100.6.灌装。
101.对比例3
102.本对比例提供一种复方妥布霉素滴眼液，与实施例1相比，区别仅在于不添加促渗透剂。处方组成见表6。
103.表6
104.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分地塞米松1活性成分聚卡波非10生物黏附剂四丁酚醛2润湿剂聚乙烯吡咯烷酮30助悬剂氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
105.复方妥布霉素滴眼液的制备：
106.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
107.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
108.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
109.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、润湿剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
110.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
111.6.灌装。
112.对比例4
113.本对比例提供一种复方妥布霉素滴眼液。处方组成与实施例1相同。
114.复方妥布霉素滴眼液的制备：
115.1.取600ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
116.2.取200ml注射用水，将地塞米松加入其中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
117.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
118.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、润湿剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
119.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
120.6.灌装。
121.对比例5
122.本对比例提供一种复方妥布霉素滴眼液，处方组成和制备方法与实施例1相同，区别仅在于，以羧甲基纤维素钠替代聚卡波非作为生物黏附剂，以吐温-80替代四丁酚醛作为润湿剂。处方组成见表7。
123.表7
124.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分地塞米松1活性成分
125.羧甲基纤维素钠10生物黏附剂吐温-802润湿剂丙二醇10促渗透剂聚乙烯吡咯烷酮30助悬剂氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
126.复方妥布霉素滴眼液的制备：
127.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
128.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
129.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
130.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、润湿剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
131.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
132.6.灌装。
133.对比例6
134.本对比例提供一种复方妥布霉素滴眼液，处方组成和制备方法与实施例1相同，区别仅在于，以卡波姆替代聚卡波非作为生物黏附剂。处方组成见表8。
135.表8
136.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分地塞米松1活性成分
137.卡波姆93410生物黏附剂四丁酚醛2润湿剂丙二醇10促渗透剂聚乙烯吡咯烷酮30助悬剂氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
138.复方妥布霉素滴眼液的制备：
139.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
140.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
141.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
142.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、润湿剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
143.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
144.6.灌装。
145.对比例7
146.本对比例提供一种复方妥布霉素滴眼液，处方组成和制备方法与实施例1相同，区别仅在于，以泊洛沙姆替代四丁酚醛作为润湿剂。处方组成见表9。
147.表9
148.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分地塞米松1活性成分
149.聚卡波非10生物黏附剂泊洛沙姆1882润湿剂丙二醇10促渗透剂聚乙烯吡咯烷酮30助悬剂氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
150.复方妥布霉素滴眼液的制备：
151.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
152.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
153.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
154.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、润湿剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
155.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
156.6.灌装。
157.对比例8
158.本对比例提供一种复方妥布霉素滴眼液，处方组成和制备方法与实施例1相同，区别仅在于，以羟丙甲纤维素替代聚乙烯吡咯烷酮作为助悬剂。处方组成见表10。
159.表10
160.成分用量(g)作用硫酸妥布霉素4.58活性成分地塞米松1活性成分
161.聚卡波非10生物黏附剂四丁酚醛2润湿剂丙二醇10促渗透剂羟丙甲纤维素30助悬剂氯化钠3.0渗透压调节剂无水硫酸钠6.6渗透压调节剂依地酸二钠1金属离子螯合剂苯扎氯铵0.1抑菌剂硫酸或氢氧化钠适量ph调节剂注射用水至1000ml溶剂
162.复方妥布霉素滴眼液的制备：
163.1.取800ml注射用水，加热至70℃，在搅拌状态下缓慢加入助悬剂，充分搅拌使溶解，得到助悬剂水溶液，备用；
164.2.取200ml助悬剂水溶液，将地塞米松加入上述溶液中，加入纳米研磨机中，121℃，灭菌12min，获得灭菌处理后的地塞米松混悬液；
165.3.开启研磨，转速2000rpm，研磨时间40min，使地塞米松药物粒径d(0.9)达到5μm以下；
166.4.将硫酸妥布霉素、生物黏附剂、润湿剂、促渗透剂、渗透压调节剂、金属离子螯合剂、抑菌剂加入上述剩余600ml助悬剂溶液中，用硫酸调ph至5.5，加注射用水至800ml，并通过0.22微米的微孔滤膜过滤除菌；
167.5.向其中加入灭菌处理后的地塞米松混悬液，充分搅拌；
168.6.灌装。
169.实验例1
170.本实验例对上述实施例和对比例分别进行以下实验：
171.1.沉降度和再分散性
172.将滴眼液配置完成后分别静置考察24小时，考察沉降度和再分散性。
173.沉降度试验：观察是否存在澄清液与沉降物的界限。
174.再分散性试验：随时间的增加，若底部缓慢出现微量沉淀，观察轻摇后，沉淀是否容易再分散及颗粒凝集情况。检测粒径与0时相比的变化情况。结果如下见表11。
175.表11
[0176][0177]
各样品静置24小时后的性状参见图1。
[0178]
上述考察显示，本发明实施例中将地塞米松与特定助悬剂共同灭菌后研磨工艺制备的混悬液，经过静置考察后几乎没有沉淀析出，再分散后粒径与0时相比几乎没有变化。而对比例4没有与助悬剂共同灭菌并研磨，研磨后的粒径稍大，存放过程中易发生沉降，再分散性也稍差。对比例1中未加入生物黏附剂，存放中发生一定沉降，说明本发明的生物黏附剂也一定助悬效果。对比例8采用羟丙甲纤维素替代聚乙烯吡咯烷酮作为助悬剂，其效果较差，研磨后的粒径稍大，存放过程中易发生沉降，再分散性也稍差。
[0179]
2.眼部滞留时间
[0180]
取实施例1-3、对比例1-8制备得到的复方妥布霉素滴眼液，分别向其中加入2％的荧光素钠，充分混合均匀获得待测样品。取健康家兔33只，随机分为11组，每组3只。分别滴入等量上述各待测样品(单次给药，家兔的每只眼睛各2滴)，滴入后使家兔眼闭合10s，在5、10、20、30、40、50、60min时，用紫外灯在365nm波长处观察眼角膜表面的连续荧光层强弱，以角膜表面连续荧光层消失时间评价滴眼液的眼部滞留时间。各实验组每只家兔的眼部滞留时间结果如下表12。
[0181]
表12
[0182][0183]
通过眼部滞留时间考察显示，本发明实施例1-3选择合适的生物黏附剂和润湿剂制备的混悬液，在眼部滞留时间更长，且不同家兔之间更稳定，均在50min及以上。
[0184]
对比例4采用常规灭菌和研磨工艺，可能是因为粒径稍大导致眼部滞留时间较实施例1稍短。对比例2，3，7，8中没有加入或更换了润湿剂、促渗透剂、助悬剂，药物在眼部的滞留时间有一定减少，在30min～50min之间。对比例1，6中没有加入或更换了其他种类生物黏附剂，对比例5中更换了生物黏附剂和润湿剂的种类，药物在眼部的滞留时间均明显减少，均不足30min。
[0185]
3.组织药物含量实验
[0186]
选择家兔66只，平均分成11组，按照常规妥布霉素地塞米松滴眼液说明书，分别给予家兔双眼滴入等量实施例1-3、对比例1-8的滴眼液。具体为单次给药，家兔的每只眼睛各2滴，相当于每只家兔两只眼睛共给药200微克地塞米松。给药后样品提取：在给予家兔妥布霉素地塞米松滴眼液药物后，分别于给药后0.5h、1.0h、2.0h各取2只受试家兔，处死，手术分离家兔眼的玻璃体，将每只家兔的两只眼的玻璃体合并，用二氯甲烷于玻璃体中萃取药物，分离有机相，萃取3次，合并有机相，并于70℃恒温水浴锅上，用氮气吹干，残渣用0.2ml的40％乙腈水溶解，采用hplc-ms/ms检测分析，获得地塞米松在各实验组的每只家兔眼睛中的含量。将各实验组每只家兔的结果取平均值后结果如下表13。
[0187]
表13
[0188][0189]
通过组织药物含量考察显示，本发明实施例1-3选择合适的生物黏附剂、润湿剂和促渗透剂制备的混悬型滴眼液，在家兔眼部组织含量明显更高，且停留时间更长，可提高生物利用度。对比例1没有加入生物黏附剂，虽然0.5h与实施例基本接近，但是由于药物在眼部滞留时间较短，1.0h药物的组织含量明显开始呈现降低趋势。对比例2没有加入润湿剂，整体吸收程度稍低。对比例3没有加入促渗透剂，虽然1.0h时药物的组织含量仍然呈现升高趋势，但是整体明显低于本发明实施例。对比例4由于粒径偏大，眼部滞留时间和吸收程度均降低。对比例5-8更换了生物黏附剂或润湿剂或助悬剂，眼部滞留时间和吸收程度均不同
程度降低。
[0190]
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。