用于治疗尿毒性瘙痒症的制剂的制作方法

用于治疗尿毒性瘙痒症的制剂
1.本发明是申请日为2017年6月16日的中国专利申请201780042643.4的分案申请，原申请的发明名称为“用于治疗尿毒性瘙痒症的制剂”。
发明领域
2.本发明涉及包括亲核化合物比如组氨酸或任何其它氨基酸或其多肽和/或衍生物的局部制剂，用于治疗受试者的由于尿素引起的发痒性皮肤干燥(itchy dry skin)，比如尿毒性瘙痒症(uremic pruritus)。本发明还涉及用于预防尿毒性瘙痒症的局部组合物。
3.发明背景
4.尿毒性瘙痒症是最令人痛苦的肾衰竭症状之一。其影响至多50％的透析(l)患者。尿毒症患者的皮肤由于贫血通常是苍白的，干燥且具有抓痕。该病症可以包括皮肤症状，比如湿疹、结节性痒疹、钱币状湿疹和licinification。主观症状包括剧烈瘙痒和灼热，其可以是局部的或全身性的。对于该疾病的病因学存在许多假说，其导致大量全身性治疗和局部治疗。通常，这些治疗几乎没有或没有效果，尽管某些可能在患者亚群中有帮助(l)。
5.尿毒症透析患者的代谢和内分泌变化很多且复杂(2)。体内尿素蓄积是慢性肾病的中枢代谢变化之一。尿素同时经由肾脏系统和通过发汗排出(3)。汗水中的浓度比血清中的浓度高2-4倍。这表明在尿毒症患者的皮肤中可能存在高浓度的尿素(4)。有时，浓度太大以至于尿素呈尿毒霜(uremic frost)可见。
6.角质层(皮肤的外部)由角质化的上皮层组成，其为富含蛋白的角质细胞形式，嵌入由神经酰胺、胆固醇和游离脂肪酸组成且与天然保湿因子(nmf)混合的脂质细胞间基质中(5)(6)。nmf的百分之五十由氨基酸组成，所述氨基酸来源于表皮蛋白特别是丝聚蛋白的酶分解(6)，且其关键氨基酸降解产物包括组氨酸、反式尿刊酸和吡咯烷酮羧酸(7)。nmf的其余部分由汗水组分组成，所述汗水组分包括电解质、乳酸、尿素和小部分的氨基酸。除了具有润湿作用(结合水)之外，氨基酸构成天然uv保护部分(反式尿刊酸)，并且起ph稳定因子作用。
7.在编码丝聚蛋白的基因中具有截断突变的个体极易感染严重形式的皮肤干燥、寻常性鱼鳞癣和/或湿疹。已经表明几乎50％的所有重度湿疹病例可以具有至少一种突变的丝聚蛋白基因。在不存在丝聚蛋白的载体中看到的屏障缺陷也看来导致哮喘易感性增加和病情恶化。
8.由于尿素在生化研究和工业过程中使蛋白质变性的能力，其被长期使用(8)。尿素使球状蛋白质变性的作用应归于未折叠形式的蛋白质分子的稳定化。在室温下，尿素对于氨基酸也具有直接浓度依赖性作用(8)。尿素水溶液中存在的少量氰酸根可以加入到蛋白质和氨基酸的-nh2基团以及存在的-sh基团中，得到氨基甲酰基衍生物(9)。已经证实氰酸根和氨基酸之间反应速率常数的对数与氨基酸或多肽的氨基的pka值线性相关(15)。
9.因此，预期尿毒症患者的角质层中的高浓度尿素(来自汗水的尿素)对于表皮和角质层中的酶生物进程具有深远影响。这些作用还没有被研究作为尿毒性瘙痒症的病因学因素或被视为治疗所述病症的新途径。预期尿毒症患者中存在浓度的尿素的变性作用对于
nmf的形成具有深远的影响。预期蛋白质(尤其是丝聚蛋白)变性必然减少丝聚蛋白衍生的氨基酸，其构成角质层中大多数nmf。进一步，任何可获得的组氨酸都不会转化成反式尿刊酸，因为所需的酶(组氨酸酶)也可被尿毒症患者皮肤中高浓度的尿素所变性。组氨酸本身将通过尿素对于分子的直接作用而变化。这些紊乱之前还没有被研究过，因为nmf的形成和生物效应的认识和动力学是新的，所述紊乱预期显著影响nmf的数量和质量。
10.关于现有技术，us2016/0008297公开了一种用于治疗或预防与肾病有关的皮肤发痒的局部制剂。没有公开用于螯合尿素的亲核攻击，并且没有包括制剂中使用的氨基酸来充当亲核试剂。
11.us20150252035提及了在一些其它皮肤病症中与尿毒性瘙痒症有关的发痒的治疗，但是所公开的trpv4抑制剂不能通过充当亲核试剂螯合尿素。
12.us2009/0186853公开了可以治疗瘙痒的组氨酸衍生物和氨基酸的n-丙酰基(propanoyl)衍生物。然而，没有公开用亲核试剂治疗螯合尿素引起的发痒性皮肤干燥。相反，us2009/0186853提及了可以在所述制剂中包括尿素。
13.发明简述
14.根据本发明，提供一种包括用于治疗尿毒性瘙痒症的制剂，其包括亲核化合物，优选具有低氨基pka的氨基酸或其多肽和/或衍生物。不受任何理论的束缚，本发明人已经发现可以通过存在亲核化合物比如亲核氨基酸或多肽和/或衍生物，比如组氨酸、半胱氨酸、精氨酸、赖氨酸、甘氨酰甘氨酸、甘氨酰丙氨酸或三甘氨酸或四甘氨酸来抵抗患有尿毒性瘙痒症的患者皮肤上堆积的过量尿素的不期望作用。
15.根据本发明人进行的分析化学，看来这样的亲核试剂与尿素衍生的氰酸根反应，生成氨基甲酰化的终产物和氨。任何其余的非反应性亲核氨基酸，尤其是组氨酸，发挥由这样的氨基酸已知的有益皮肤效应，由此患有尿毒性瘙痒症的患者皮肤恢复为正常状态，而没有发痒的地方(itching spots)。对于关于肽和蛋白如何氨基甲酰化的进一步细节，参照g.r.stark的论文(15)，将其通过援引并入本文。
16.根据本发明，还提供一种用于治疗尿毒性瘙痒症的方法，该方法包括向所述受试者给药治疗有效量的亲核化合物，比如亲核氨基酸，优选组氨酸和/或其衍生物。
17.在另一个实施方案中，本发明进一步包括通过下述方法治疗由于尿素或尿液存在引起的其它皮肤病症，包括但不限于尿道造口皮炎(urostomi dermatitis)、失禁性皮炎和尿布皮炎，所述方法包括向所述受试者给药治疗有效量的亲核化合物，比如亲核氨基酸或其多肽和/或衍生物。
18.特别地，提供一种用于治疗或预防受试者的尿毒性瘙痒症的局部制剂，其包括组氨酸和/或其衍生物，其中所述制剂以氨基酸或其多肽和/或衍生物的浓度范围在0.001mg/cm2至5mg/cm2皮肤表面之间、优选地在0.003mg/cm2至1mg/cm2皮肤表面之间、更优选地在0.005mg/cm2至0.5mg/cm2皮肤表面之间应用于皮肤。
19.优选地，所述衍生物选自具有低pka的氨基酸或其多肽和/或衍生物，一种或多种组氨酸降解产物比如反式尿刊酸、组氨酸的肽或组氨酸的肽和一种或多种另外的氨基酸，及组氨酸的可药用盐。优选地，组氨酸为l-组氨酸。
20.在一个实施方案中，组氨酸和/或其衍生物为药物组合物中的唯一活性成分。
21.在另一个实施方案中，所述制剂进一步包括吡咯烷酮羧酸或其盐，优选钠盐。
22.附图简述
23.图1显示与尿毒性瘙痒症有关的生化失调的图。
24.图2显示暴露于尿素的重建人表皮样品的组织学检查。
25.图3显示暴露于尿素的重建人表皮样品的组织学检查。
26.图4显示暴露于尿素和局部应用含有2％氨基酸的霜剂的重建人表皮样品的组织学检查。
27.发明详述
28.如所述的，本发明还提供一种用于治疗尿毒性瘙痒症的治疗方法。特别地，在其第二个方面，本发明提供一种用于治疗受试者的尿毒性瘙痒症的方法，其中将包括组氨酸和/或其衍生物比如反式尿刊酸(uca)的局部制剂以如下组氨酸和/或其衍生物的浓度范围应用于皮肤：在0.001mg/cm2至5mg/cm2的皮肤表面之间，优选地在0.003mg/cm2至1mg/cm2的皮肤表面之间，更优选地在0.005mg/cm2至0.5mg/cm2的皮肤表面之间。氨基酸或其多肽和/或衍生物可以是药物组合物中的唯一活性成分。可选地，所述制剂包括其它活性剂，比如吡咯烷酮羧酸。
29.尿毒性瘙痒症是一种定义明确的指征，其可明显区别于炎症性皮肤病(特别是慢性炎症性皮肤病)比如特应性皮炎、各种形式的银屑病(包括斑块状屈侧银屑病(plaque flexural psoriasis)、滴状银屑病(guttate psoriasis)、脓疱性银屑病(pustular psoriasis)、指甲银屑病(nail psoriasis)、光敏性银屑病(photosensitive psoriasis)、红皮病型银屑病(erythrodermic psoriasis)和银屑病关节炎)、痤疮、鱼鳞病、接触性皮炎、湿疹、光照性皮肤(photodermatoses)和皮肤干燥病症。
30.皮肤屏障功能受多种因素控制，包括存在的蛋白质和其所处的环境(例如，ph)。本发明人认识到组氨酸不会转化成反式尿刊酸，因为所需的酶(组氨酸酶)可以被尿毒症患者皮肤中高浓度的尿素所变性。
31.在正常皮肤中，许多参与屏障形成的蛋白是ph依赖性的，并仅在上表层/角质层的产生uca的酸性环境中有活性(10)。除了保持内环境稳定之外，降低的角质层的ph直接抑制微生物感染和生长(11)。已知丝聚蛋白缺陷可引起氨基酸含量降低，包括角质层中的组氨酸水平降低，其从而可导致反式uca水平降低和ph异常高。在角质层中高于最适合的ph被认为减少ph依赖性脂质加工酶(例如，β-葡糖脑苷脂酶)及损伤屏障功能和修复(12)。
32.然而，本发明的研究没有关注解决患有皮肤疾病的丝聚蛋白缺陷的患者的生理学原因。而是本发明人已经发现在使用本发明中使用的氨基酸包括组氨酸或其多肽和/或衍生物作为活性成分看来补偿了尿毒性瘙痒症患者皮肤中高浓度尿素引起的丝聚蛋白缺陷。目前不存在预防和/或治疗尿毒性瘙痒症的任何方式。
33.而且，包括组氨酸和其大多数多肽和/或衍生物的氨基酸在常规剂量下显示出低的或没有哺乳动物毒性或是所报道的副作用。因此，使用包括组氨酸和其多肽和/或衍生物的氨基酸作为活性成分提供了使用益处，包括便于患者获取，改善的患者顺应性引起所述活性成分在广泛患者群中的用量增加，和与目前使用的可替代药物相比更长的连续治疗方案。而且，预期包括组氨酸和其大多数多肽和/或衍生物的氨基酸用于治疗患者的整个体表且针对大量皮肤病症(尤其是炎症性皮肤病)有效。优选地，这样的皮肤病是由于尿素或尿液的存在引起的，包括但不限于尿道造口皮炎、失禁性皮炎和尿布皮炎，更优选尿毒性瘙痒
症。
34.如图1所示，尿毒性瘙痒症是由汗腺管转运到上部皮肤表面的大量过量的尿素引起。本发明人进行的新观察是高尿素浓度干扰蛋白质和氨基酸的正常功能。而且，ph调节受到高浓度尿素的不利影响。
35.如本文所述的，包括组氨酸和大多数其多肽和/或衍生物的氨基酸可以以任何合适的形式使用，例如如本文讨论的。
36.包括组氨酸和大多数其多肽和/或衍生物的氨基酸可以作为单独疗法使用或者与常规疗法组合使用，用于预防和/或治疗尿毒性瘙痒症。合适的常规疗法包括用类固醇(例如，用于局部给药的类固醇)进行治疗和/或用合适的脂质和/或用光疗进行治疗。
37.本发明进一步提供上述局部制剂，用于治疗或预防老年人的老化皮肤的瘙痒。本发明还涉及所述制剂在治疗或预防丝聚蛋白缺陷患者的发痒性皮肤干燥中的用途。
38.根据本发明用于局部给药的药物组合物可以为例如溶液、霜剂、软膏剂、胶状物、凝胶、喷雾剂、泡沫剂、散剂、脂质体或水性或油性溶液或悬浮液的形式。本发明还涵盖水包油型乳剂、油包水型乳剂或多孔型(polyaphrons)(高内相乳剂(high internal emulsions)、凝胶乳剂等)。合适的赋形剂和载体包括，例如花生油、水、椰油酸乙酯、椰油酸辛酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油、液体石蜡、异丙醇、甘油、丙二醇、石蜡、纤维素、对羟基苯甲酸酯、硬脂醇、聚乙二醇、肉豆蔻酸异丙酯和苯氧基乙醇。
39.在局部给药至头皮的情况下，药物组合物可以配制成洗发香波或调理剂。在局部给药至皮肤的情况下，药物组合物可以配制成洗涤用品和沐浴用品(例如盆浴或淋浴凝胶和霜剂)的添加剂。这种用于局部给药的药物组合物可以包括也适用于化妆品的稀释剂或载体。
40.通过应用于皮肤的用于局部给药的药物组合物可以包括润肤露、及晒黑洗剂(sun tan lotions)和霜剂。
41.用于局部给药的药物组合物可以以任何合适的分配器提供。
42.在通过应用至皮肤的用于局部给药的药物组合物的情况下，应当选择稀释剂或载体以便帮助活性成分转运跨越皮肤屏障，并且可能需要能够跨越皮肤角蛋白层(keratinous layer)的一种。对于用于局部给药的药物组合物的制备，已知许多方法。例如，可以将活性成分与如本文讨论的已知载体材料混合。
43.可选地，技术人员应当理解可以利用局部注射，例如皮内注射获得局部给药。
44.通常，用于局部给药的组合物(比如霜剂)应当含有作为活性成分的约0.05w/w％至15w/w％，更特别地约0.1至5w/w％，甚至更特别地约0.2至2w/w％总组合物重量的氨基酸，包括组氨酸及其多肽和/或衍生物。
45.本发明的药物组合物可以通过本领域熟知的常规方法使用常规药物稀释剂或载体获得。
46.实施例1
47.用于局部给药的典型的霜剂可以含有∶
[0048][0049][0050]
可以如下制备霜剂。在一个合适的容器(a)中，合并versagel、异硬脂酸异硬脂基酯、环甲硅油和0.26％的月桂醇聚醚4，同时合适地混合。在第二个容器(b)中，合并二甲基硅油和0.04％月桂醇聚醚4，同时合适地混合。在第三个容器(c)中，混合聚山梨酯20与7.425％的水。在适当混合下，首先将容器a的内含物慢慢地加入容器c中，然后将容器b的内含物慢慢地加入容器c中。在第四个容器(d)中，合并甘油、2-吡咯烷酮-5-羧酸(钠盐)、柠檬酸、组氨酸、透明质酸钠、苯氧乙醇和41.55％的水。在第五个容器(e)中，合并卡波姆和13.50％的水。一旦充分分散和水合，将容器e的内含物加入到容器c中，同时搅拌，然后加入容器d的内含物。使用氢氧化钠调节ph(如果需要)，然后用剩余的水补足量。
[0051]
实施例2
[0052]
为了证实在尿素(其为患有up的个体中皮肤的一种不可避免的组分)的存在下组氨酸如何降解，将实施例1的霜剂进行5w/w％和10w/w％的尿素的暴露。随时间推移产生降解过程，在40℃下六周之后，在具有10w/w％尿素的霜剂中仅剩余20％组氨酸。
[0053]
因为组氨酸是一种必需氨基酸，需要其连续供应以维持皮肤的正常功能。进一步，重要的是因为该氨基酸是一种uca的前体，uca是一种用于皮肤中ph调节的重要缓冲剂。对于尿毒性瘙痒症，组氨酸的降解速率远高于在其它皮肤病症比如特应性皮炎中降解速率。
因此，本发明人认识到为了补偿降解，必须相应更高地供应组氨酸(以及其衍生物)，由此可以获得正常组氨酸水平。考虑到这一点，本发明人配制了如此高浓度的组氨酸(参考实施例1)。
[0054]
皮肤屏障功能受多种因素控制，包括存在的蛋白质和其所处的环境。皮肤屏障功能受损可能是由于丝聚蛋白缺陷。进一步，丝聚蛋白被蛋白酶分解，释放出大量组氨酸残基组分。然后，组氨酸残基被组氨酸酶脱氨基，其中形成其它反式-尿刊酸(trans-uca)。
[0055]
据信本发明解决了患有发痒性皮肤病症的患者的丝聚蛋白缺陷的问题。组氨酸和/或其衍生物补偿了丝聚蛋白缺陷。
[0056]
实施例3
[0057]
为了进一步研究在人的up(尿毒性瘙痒症)的皮肤中可能的氨基甲酰化，本发明人在重建人表皮(rhe)模型中进行了一系列研究。将来自的4cm2大的皮肤样品放到各自具有1ml体积的6孔板中。在18-25天龄的皮肤样品中进行该实验。rhe是一种用于研究皮肤的代谢、毒性和炎症反应的标准技术(13)。皮肤样品是由人类表皮干细胞发育的。它们是在具有基础生长培养基的聚氨基甲酸酯网(polycarbamate net)上发育的。rhe含有表皮中的所有不同细胞层，包括角质层。将样品保持在37℃下5％co2气压中。将其在无菌条件下处理。每日加入新生长培养基。在发育18天之后，4cm2大的皮肤样品备用；时间间隔类似于正常人类皮肤更新。
[0058]
进行12个独立实验，包括2个对照。根据标准规程每日更换生长培养基(1ml)。在第3天采集6个样品，在第6天采集6个样品，并立即冷冻在-80℃下，直到蛋白质分析。所有样品部分都进行组织学检查。
[0059]
使来自皮肤样品角质层侧的所有样品都进行下述暴露(独立实验)。
[0060]
1.对照∶保持未处理。
[0061]
2.水溶液中的尿素量-以mg/cm2皮肤计算-与up中的相同。基于尿毒症患者中平均血清尿素水平的总和的计算结果，该计算量相当于0.3mg/cm2，所述尿素来自汗水且由尿素主动转运到表皮中细胞贡献。通过将200μl的6mg尿素/ml的溶液加入到皮肤样品表面进行尿素的加入。
[0062]
3.如上述项目2下，但是以双倍量(0.6mg/cm2)。
[0063]
4.如上述项目3下，并加入200μl的1％组氨酸溶液。
[0064]
5.将5％市售可获得的尿素霜剂给药用于预期人类用途。
[0065]
6.将10％市售可获得的尿素霜剂给药用于预期人类用途。
[0066]
将第3天采集的皮肤样品暴露0至2-6天和1至2-4天(表1)。
[0067]
将第6天采集的皮肤样品如上暴露和进一步暴露3至2-6天。根据表1，尿素水溶液立即被吸收进入皮肤样品。两个霜剂保持沉积在皮肤上部，因此，仅应用两次：第0天和第3天(对于6-天实验)。避免每日暴露以使感染的风险最小。由于必须由所述霜剂的贮存效果预期连续尿素暴露，因此，两种不同的应用方法不是直接可比较的。进一步，由于在第3天仅一次补充暴露，来自第6天采集的实验2、3和4的尿素浓度可相对低。
[0068]
图2和3显示在第3天和第6天采集的实验组织学图像。在第3天，在实验2、3、5和6中看到显著的变化。看到角质层的重度水肿和紊乱，以及棘层的过早细胞死亡。实验1(对照)和4类似，与18天龄的未处理的rhs样品的一般外观相同。在6天的实验中看到类似的组织学
变化。显然所述皮肤样品更老。在实验2和3中，皮肤在某程度上恢复，可能反映出尿素暴露有限(仅第3天)。
[0069]
该实验解释了可能剂量和对于rhs样品的时间依赖性尿素作用。角质层的显著水肿反映尿素的水结合能力。但是细胞死亡也表明来自水溶液中尿素释放的氰化物离子的直接毒性效应。值得注意的是组氨酸(一种亲核试剂)可以抵消该作用，如在第3天和第6天采集的实验4中解释的。
[0070]
根据前述研究的方法进行蛋白质分析(14)。将来自皮肤样品的氨基甲酰化的蛋白涂布到elisa孔，并使用一级多克隆的抗-同型瓜氨酸(homocitrullin)抗体和二级标记的多克隆检测抗体定量。elisa读数(吸光度单位)提供在表2中。
[0071]
使来自皮肤样品的蛋白质在sds page中进一步运行，用多克隆的抗-同型瓜氨酸(homocitrullin)抗体进行免疫印迹。来自该实验的结果验证了来自实验6的蛋白质得到了阳性带，表明在该样品中存在氨基甲酰化的蛋白质。来自这些实验的主要结论是在暴露于浓度与up患者中的尿素相当的尿素3天和6天之后，在rhe模型中可证实蛋白质氨基甲酰化。该实验解释了时间和浓度的影响。因此，根据本发明，组氨酸能够抵消这些作用。
[0072]
表1
[0073]
第3天
[0074]
天0123生长培养基xxx 尿素霜剂x
ꢀꢀꢀ
尿素溶液xx
ꢀꢀ
采集
ꢀꢀꢀ
x
[0075]
第6天
[0076]
天0123456生长培养基xxxxxx 尿素霜剂x
ꢀꢀ
x
ꢀꢀꢀ
尿素溶液xx x
ꢀꢀꢀ
采集
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
x
[0077]
表2
[0078][0079][0080]
elisa读数显示为吸光度单位。
[0081]
up∶尿毒性瘙痒症
[0082]
实施例4
[0083]
使用如实施例3所述的相同方法。该研究是基于使用购自的人类重建表皮(rhe)模型。一式两份，进行三个实验，包括2个对照。根据标准方案，每日更换含有和不含有加入物的生长培养基(1ml)(参见下文)。与实施例3形成对照，通过将尿素加入到生长培养基中进行尿素暴露。实验1相当于两个对照；实验2采用含有4mg/ml尿素的生长培养基；实验3采用含有4mg/ml尿素且加入含有2％氨基酸的5mg(500μl)霜剂的生长培养基，在第0天和第3天应用于rhe皮肤表面上部。当在6天之后采集时，所有6个皮肤样品用肉眼观察看起来都是健康的。没有任何感染或坏死的症状。将其立即冷冻在-80℃下直到蛋白质分析。将所有样品的部分都送去进行组织学检查。
[0084]
组织学变化
[0085]
最显著的变化是水肿，特别是同时暴露于尿素和2％的氨基酸的皮肤样品。在实验2和3中，细胞发生变化，但是在用2％氨基酸处理的皮肤样品中存在更多活细胞。
[0086]
表3elisa读数显示为吸光度单位。两个实验的平均值。
[0087][0088]
蛋白质氨基甲酰化
[0089]
使用与实验3中相同的方法研究蛋白质氨基甲酰化。将来自皮肤样品的总蛋白的氨基甲酰化数据显示在表3中。发现在用补充有4mg/ml尿素的生长培养基培养的两个皮肤样品中氨基甲酰化水平最高。发现在用补充有尿素4mg/ml和2％氨基酸霜剂的生长培养基培养的皮肤样品中氨基甲酰化水平最低，但是来自这些皮肤样品的氨基甲酰化水平与对照样品中看到的没有统计学差异。
[0090]
实施例3和4的组合结果
[0091]
在实施例3中，使用组氨酸作为亲核试剂的实例进行rhe样品暴露，以计算实际生活中的情况。所有暴露都在皮肤样品上部进行。在暴露于计算透析患者中存在的尿素浓度之后6天之内，可以证实蛋白质的氨基甲酰化。加入0.5％组氨酸，类似于nmf中存在的浓度，防止了该氨基甲酰化。暴露于含有5％和10％尿素的市售霜剂的样品发展为角质层水合(如预期的)(图2和3)和最高程度的蛋白质氨基甲酰化(表2)。
[0092]
在实施例4中，测试最大容许的暴露浓度，其对于尿毒性瘙痒症以及尿布皮炎和尿道造口皮炎(urostomia dermatitis)具有相关性。该测试在rhe体系中进行。进一步，测试含有总浓度2％的3种亲核试剂(氨基酸)的霜剂。以高于平均透析患者中8倍的浓度加入尿素。
[0093]
应用2％氨基酸霜剂引起rhe皮肤样品的预期水合(图4)。蛋白质分析显示局部应用霜剂能够防止在放大尿素浓度暴露期间的蛋白质氨基甲酰化(表3)。
[0094]
实施例5
[0095]
在下述中，列出了本发明涵盖的代表性制剂(i-vii)的制备。
[0096]
i)水包油型乳体霜剂(emulsion cream)配方
[0097][0098][0099]
将预混物a相加热至70℃。
[0100]
将b相加入到a相中。
[0101]
将c相加热至75℃。
[0102]
使用高剪切混合将c相加入到a相中。
[0103]
在混合下冷却至25℃。
[0104]
ii)油包水型乳体霜剂(emulsion cream)配方
[0105][0106][0107]
方法
[0108]
将水相和油相分别加热至65-70
[0109]
将水相(b)加入到油相(a)中，同时搅拌。
[0110]
搅拌至冷却。
[0111]
iii)凝胶配方
[0112]
组分％甘油3.002-吡咯烷酮-5-羧酸(na盐)0.50组氨酸0.50卡波姆(ultrez 10)0.80柠檬酸0.10苯甲酸钠0.20透明质酸钠(sodium hyalauronate)0.05氢氧化钠(20％溶液)适量(至ph5.5)水适量 100.00
[0113]
方法
[0114]
在第一容器(a)中，将透明质酸钠溶于50％的水中。一旦溶解，加入甘油、2-吡咯烷酮-5-羧酸(钠盐)、柠檬酸和组氨酸。在第二容器(b)中，在合适的搅拌下，将卡波姆分散到30％的水中。在第三容器(c)中，将苯甲酸钠溶于5％水中。将容器a的内含物加入到容器b
中，同时搅拌，然后加入容器c的内含物。如果需要，用氢氧化钠调节ph，然后加入水适量。
[0115]
iv)peg基无水软膏配方
[0116]
ꢀꢀ
油酸5.00丁基化羟基茴香醚0.10peg 400025.00组氨酸0.50peg 40069.40 100.00
[0117]
方法
[0118]
在容器a中，将油酸和丁基化羟基茴香醚混合并加热至65-70℃，同时合适地搅拌。在容器b中，将peg 4000、组氨酸和peg 400合并并加热至65-70℃，同时合适地搅拌。将容器a的内含物加入到容器b中，同时高剪切混合五分钟。将其冷却至室温，同时适当搅拌。
[0119]
v)无水软膏配方
[0120]
ꢀꢀ
棕榈酸鲸蜡酯5.00癸二酸二乙酯8.00角鲨烷5.00丙二醇5.00组氨酸0.50凡士林76.50 100.00
[0121]
方法
[0122]
在容器a中，合并丙二醇和组氨酸并加热至65-70℃，同时合适地搅拌。在容器b中，合并并保持组分至65-70℃，同时合适地搅拌。将容器a的内含物加入到容器b中，同时高剪切混合五分钟。使冷却至室温，同时适当搅拌。
[0123]
vi)洗发香波配方
[0124]
ꢀꢀ
月桂基醚硫酸钠7.00edta四钠0.14柠檬酸(无水)1.11椰油酰胺单乙醇胺1.00月桂基硫酸钠7.00椰油酰胺丙基甜菜碱2.00氯化钠0.70水适量 100.00
[0125]
方法
[0126]
合并所有组分，同时适当搅拌，使起泡最少。
[0127]
vii)油包水型乳体霜剂(emulsion cream)配方
[0128][0129][0130]
在一个合适的容器(a)中，合并versagel、异硬脂酸异硬脂基酯、arlamol hd和0.26％的月桂醇聚醚4，同时合适地混合。在第二容器(b)中，合并二甲基硅油和0.04％的月桂醇聚醚4，同时合适地混合。在第三容器(c)中，混合聚山梨酯20与7.425％的水。在适当混合下，首先将容器a的内含物，然后将容器b的内含物，慢慢地加入到容器c中。在第四容器(d)中，合并甘油、2-吡咯烷酮-5-羧酸(钠盐)、柠檬酸、l-组氨酸、l-精氨酸、l-赖氨酸盐酸盐、透明质酸钠、苯氧乙醇和37.85％的水。在第五容器(e)中，合并卡波姆和13.50％的水。一旦完全分散和水合，在搅拌下将容器e的内含物加入到容器c中，然后加入容器d的内含物。使用氢氧化钠调节ph(如果需要)，然后，用剩余的水补足量。
[0131]
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