以Mysm1基因为抑制靶标的物质在提高线粒体活性中的应用

本发明属于生物，涉及以mysm1基因为抑制靶标的物质在提高线粒体活性中的应用。

背景技术：

1、线粒体存在于绝大多数真核生物中，是一种具有双层膜结构的细胞器。线粒体除了能够参与氧化磷酸化为机体提供能量以外，同时还具有维持钙稳态、生成活性氧以及参与细胞信号传导等功能。线粒体功能障碍主要表现为线粒体形态、能量代谢、线粒体动力学以及线粒体质量控制的改变。近年来研究报道，线粒体功能障碍在衰老、神经退行性疾病等多种疾病中均有出现，因此，挽救线粒体功能可能是治疗这些疾病的一种方式。

2、线粒体移植治疗是从正常组织细胞分离线粒体，然后注入患者线粒体损伤或缺失的部位，从而挽救线粒体，达到恢复细胞正常功能的一项治疗技术。研究表明，不管是外源性线粒体还是自体线粒体移植均不会引起明显的免疫排斥反应。在动物实验中，线粒体移植作为治疗缺血再灌注损伤、神经系统相关疾病的研究已有报道，临床试验发现线粒体移植能改善先天性心脏病。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供以mysm1基因为抑制靶标的物质在提高线粒体活性中的应用。

2、本发明提供了重组星形胶质细胞在制备用于治疗神经元氧化损伤的药物中的应用；所述重组星形胶质细胞为mysm1基因被抑制表达的星形胶质细胞。

3、所述重组星形胶质细胞的制备方法包括如下步骤：在受体星形胶质细胞中导入用于抑制mysm1基因表达的物质，得到重组星形胶质细胞。

4、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为shrna。

5、具体的，所述shrna如seq id no：3所示。

6、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为表达所述shrna的重组慢病毒。

7、具体的，所述表达所述shrna的重组慢病毒为lv-shmysm1-zsgreen-puro重组慢病毒。

8、本发明还保护重组星形胶质细胞的线粒体在制备用于治疗神经元氧化损伤的药物中的应用；所述重组星形胶质细胞为mysm1基因被抑制表达的星形胶质细胞。

9、所述重组星形胶质细胞的制备方法包括如下步骤：在受体星形胶质细胞中导入用于抑制mysm1基因表达的物质，得到重组星形胶质细胞。

10、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为shrna。

11、具体的，所述shrna如seq id no：3所示。

12、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为表达所述shrna的重组慢病毒。

13、具体的，所述表达所述shrna的重组慢病毒为lv-shmysm1-zsgreen-puro重组慢病毒。

14、本发明还保护用于抑制星形胶质细胞中mysm1基因表达的物质在制备产品中的应用；

15、所述产品的功能为如下(a1)和/或(a2)和/或(a3)和/或(a4)和/或(a5)：

16、(a1)用于提高星形胶质细胞的线粒体膜电位；

17、(a2)用于挽救星形胶质细胞因炎性因子刺激导致的线粒体损伤；

18、(a3)用于提高星形胶质细胞的atp含量；

19、(a4)用于提高星形胶质细胞生产atp的能力；

20、(a5)用于提高星形胶质细胞的线粒体对神经元氧化损伤的修复能力。

21、所述炎性因子具体可为tnf-α和/或il-1β。

22、所述用于抑制星形胶质细胞中mysm1基因表达的物质具体可为shrna。

23、具体的，所述shrna如seq id no：3所示。

24、所述用于抑制星形胶质细胞中mysm1基因表达的物质具体可为表达所述shrna的重组慢病毒。

25、具体的，所述表达所述shrna的重组慢病毒为lv-shmysm1-zsgreen-puro重组慢病毒。

26、本发明还保护重组星形胶质细胞在制备线粒体中的应用；所述重组星形胶质细胞为mysm1基因被抑制表达的星形胶质细胞。

27、所述重组星形胶质细胞的制备方法包括如下步骤：在受体星形胶质细胞中导入用于抑制mysm1基因表达的物质，得到重组星形胶质细胞。

28、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为shrna。

29、具体的，所述shrna如seq id no：3所示。

30、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为表达所述shrna的重组慢病毒。

31、具体的，所述表达所述shrna的重组慢病毒为lv-shmysm1-zsgreen-puro重组慢病毒。

32、与受体星形胶质细胞的线粒体相比，所述重组星形胶质细胞的线粒体具有如下如下特性(b1)和/或(b2)和/或(b3)：

33、(b1)膜电位提高；

34、(b2)对炎性因子刺激导致的线粒体损伤的防御能力增强；

35、(b3)对神经元氧化损伤的修复能力增强。

36、所述炎性因子具体可为tnf-α和/或il-1β。

37、本发明还保护一种制备线粒体的方法，依次包括如下步骤：

38、(1)制备重组星形胶质细胞；所述重组星形胶质细胞为mysm1基因被抑制表达的星形胶质细胞；

39、(2)从所述重组星形胶质细胞中提取线粒体。

40、所述重组星形胶质细胞的制备方法包括如下步骤：在受体星形胶质细胞中导入用于抑制mysm1基因表达的物质，得到重组星形胶质细胞。

41、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为shrna。

42、具体的，所述shrna如seq id no：3所示。

43、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为表达所述shrna的重组慢病毒。

44、具体的，所述表达所述shrna的重组慢病毒为lv-shmysm1-zsgreen-puro重组慢病毒。

45、与受体星形胶质细胞的线粒体相比，所述重组星形胶质细胞的线粒体具有如下如下特性(b1)和/或(b2)和/或(b3)：

46、(b1)膜电位提高；

47、(b2)对炎性因子刺激导致的线粒体损伤的防御能力增强；

48、(b3)对神经元氧化损伤的修复能力增强。

49、所述炎性因子具体可为tnf-α和/或il-1β。

50、所述方法制备得到的线粒体也属于本发明的保护范围。

51、与受体星形胶质细胞的线粒体相比，所述重组星形胶质细胞的线粒体具有如下如下特性(b1)和/或(b2)和/或(b3)：

52、(b1)膜电位提高；

53、(b2)对炎性因子刺激导致的线粒体损伤的防御能力增强；

54、(b3)对神经元氧化损伤的修复能力增强。

55、本发明还保护所述线粒体在制备用于治疗神经元氧化损伤的药物中的应用。

56、本发明还保护一种制备mysm1基因被抑制表达的星形胶质细胞的方法，包括如下步骤：在受体星形胶质细胞中导入用于抑制mysm1基因表达的物质，得到重组星形胶质细胞。

57、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为shrna。

58、具体的，所述shrna如seq id no：3所示。

59、所述用于抑制mysm1基因表达的物质具体可为表达所述shrna的重组慢病毒。

60、具体的，所述表达所述shrna的重组慢病毒为lv-shmysm1-zsgreen-puro重组慢病毒。

61、本发明还保护所述方法制备得到的重组星形胶质细胞。

62、以上任一所述受体星形胶质细胞为离体的星形胶质细胞。

63、具体的，所述受体星形胶质细胞可为从离体的小鼠大脑分离并传代获得的星形胶质细胞。具体的，所述小鼠为c57bl/6n乳鼠。

64、具体的，所述受体星形胶质细胞可为c8-d1a细胞。

65、mysm1基因为编码mysm1蛋白的基因。

66、mysm1蛋白为组蛋白h2a去泛素化酶。

67、具体的，mysm1蛋白是氨基酸序列如seq id no：1所示的蛋白质。

68、具体的mysm1基因(cdna序列)如seq id no：2所示。

69、线粒体存在于绝大多数真核生物中，是一种具有双层膜结构的细胞器。线粒体除了能够参与氧化磷酸化为机体提供能量外，还具有维持钙稳态，生成活性氧及参与细胞信号传导等。近年来研究发现，在衰老、神经退行性疾病等多种疾病中均出现线粒体功能障碍，因此，挽救线粒体功能成为治疗这些疾病的一种策略。目前已经有报道用线粒体移植的方式治疗神经退行性疾病等的动物研究。本发明提供为后续应用线粒体移植治疗相关疾病提供理论基础与物质基础。