氨基酸组合物及肝疾病的治疗方法与流程

氨基酸组合物及肝疾病的治疗方法
1.相关申请数据
2.本技术是申请号为201780078656.7、申请日为2017年12月19日、发明名称为“氨基酸组合物及肝疾病的治疗方法”的发明专利申请的分案申请。
3.本技术要求2016年12月19日申请的美国第62/436,073号、2017年1月6日申请的美国第62/443,205号、2017年4月28日申请的美国第62/491,773号、2017年8月14日申请的美国第62/545,322号及2017年10月24日申请的美国第62/576,267号的优先权，这些专利的全部内容各自以引用的方式并入本文中。


背景技术：

4.非酒精性脂肪肝病(nafld)为特征在于归因于除酒精外的病因的肝脏中的脂肪沉积物的疾病。nafld为发达国家中最普遍的肝病且影响接近25％的美国人。非酒精性脂肪变性肝炎(nash)为nafld的最严重形式，其可能导致肝脏发炎、纤维化、肝硬化、慢性肝脏衰竭及肝细胞癌(hcc)。
5.目前，无用于治疗nash或nafld的批准疗法。因此，尚未满足nafld及nash的新治疗的需要。


技术实现要素：

6.本文至少部分地揭示一种包括至少四种不同氨基酸(aa)实体的组合物。
7.在一些实施例中，所述组合物能够实现以下中的一种、两种、三种、四种、五种或六种或全部：
8.a)减少或预防肝纤维化；
9.b)减少或预防肝脏损伤；
10.c)减少或预防肝细胞发炎；
11.d)改善例如提高葡萄糖耐受性；
12.e)减少或预防脂肪变性；
13.f)减少或预防肝细胞气球样膨大；或
14.g)改善肠道功能。
15.在一些实施例中，所述组合物包含亮氨酸(l)-氨基酸实体、精氨酸(r)-氨基酸实体、谷氨酰胺(q)-氨基酸实体；及抗氧化剂或活性氧(ros)清除剂(例如n-乙酰半胱氨酸(nac)实体，例如nac)。在一些实施例中，至少一种氨基酸实体不以长度超过20个氨基酸残基的肽形式提供。
16.在一些实施例中：
17.(i)(a)的氨基酸实体(例如氨基酸实体的至少一个、两个或三个)选自表2；和/或
18.(ii)(a)r-氨基酸实体及q-氨基酸实体中的一种或两种以与l-氨基酸实体相比更高的量(重量％)存在，或(b)所述组合物进一步包含丝氨酸(s)-氨基酸实体。
19.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷
氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约0.5至3:0.5至4:1至4:0.1至2.5，例如l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1:1.5:2:0.15或约1:1.5:2:0.3。在某些实施例中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1+/-15％:1.5+/-15％:2+/-15％:0.15+/-15％或约1+/-15％:1.5+/-15％:2+/-15％:0.3+/-15％。在此段落中之前述实施例中的任一种中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1:0.75:2:0.15或约1:0.75:2:0.3。在此段落中之前述实施例中的任一种中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1+/-15％:0.75+/-15％:2+/-15％:0.15+/-15％或约1+/-15％:0.75+/-15％:2+/-15％:0.3+/-15％。
20.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1:0.5:0.5:1.5:2:0.15或约1:0.5:0.5:1.5:2:0.3。
21.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，组合物进一步包含l-甘氨酸及l-丝氨酸中的一种或两种。在一些实施例中，组合物包含l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及l-甘氨酸。在某些实施例中，组合物包含l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及l-丝氨酸。在某些实施例中，组合物包含l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、l-甘氨酸及l-丝氨酸。在此段落中之前述实施例中的任一种中，l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1:0.5:0.5:1.5:2:0.15或约1:0.5:0.5:1.5:2:0.3。在此段落中之前述实施例中的任一种中，l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1+/-15％:0.5+/-15％:0.5+/-15％:1.5+/-15％:2+/-15％:0.15+/-15％，或约1+/-15％:0.5+/-15％:0.5+/-15％:1.5+/-15％:2+/-15％:0.3+/-15％。
22.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，组合物包含约0.5g至约10g l-氨基酸实体、约0.25g至约5g i-氨基酸实体、约0.25g至约5g v-氨基酸实体、约0.5g至约20g r-氨基酸实体、约1g至约20g l-谷氨酰胺或其盐及约0.1g至约5g nac或其盐，例如组合物包含约1g l-氨基酸实体、约0.5g i-氨基酸实体、约0.5g v-氨基酸实体、约1.5g r-氨基酸实体、约2g l-谷氨酰胺或其盐及约0.15g或约0.3g nac或其盐。在某些实施例中，组合物包含约0.15g nac。在某些实施例中，组合物包含约0.3g nac。在实施例中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐及约0.9g nac或其盐。
23.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐、约0.9g nac或其盐及约6g l-丝氨酸或其盐。在实施例中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐、约0.9g nac或其盐及约6.67g l-丝氨酸或其盐。在实施例中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐、约0.9g nac或其盐、约9g l-丝氨酸或其盐及约9g l-甘氨酸或其盐。在实施例中，组合
物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐、约0.9g nac或其盐、约3.33g l-丝氨酸或其盐及约3.33g l-甘氨酸或其盐。
24.在一个方面中，本发明提供一种包括游离氨基酸的组合物，其中氨基酸包括精氨酸、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸及选自亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸中的一个、两个或全部的分支链氨基酸。
25.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，分支链氨基酸为亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸。
26.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸的重量比率为1:0.5:0.5:1.5:2:0.15。在某些实施例中，亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸的重量比率为1+/-15％:0.5+/-15％:0.5+/-15％:1.5+/-15％:2+/-15％:0.15+/-15％。
27.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，氨基酸的总重量(wt)为约2g至约60g。在一些实施例中，氨基酸的总重量为约6g、约12g、约18g、约24g或约48g。
28.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，组合物包括约0.5g至约10g亮氨酸、约0.25g至约5g异亮氨酸、约0.25g至约5g缬氨酸、约1g至约20g精氨酸、约1g至约20g谷氨酰胺及约0.1g至约5g n-乙酰半胱氨酸。
29.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，组合物包括约1g亮氨酸、约0.5g异亮氨酸、约0.5g缬氨酸、约1.5g精氨酸、约2g谷氨酰胺及约0.15g n-乙酰半胱氨酸。
30.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，组合物包括约2g亮氨酸、约1g异亮氨酸、约1g缬氨酸、约3.0g精氨酸、约4g谷氨酰胺及约0.3g n-乙酰半胱氨酸。
31.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，组合物包括约4g亮氨酸、约2g异亮氨酸、约2g缬氨酸、约6.0g精氨酸、约8g谷氨酰胺及约0.6g n-乙酰半胱氨酸。
32.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，氨基酸包括约10wt％至约30wt％亮氨酸、约5wt％至约15wt％异亮氨酸、约5wt％至约15wt％缬氨酸、约15wt％至约40wt％精氨酸、约20wt％至约50wt％谷氨酰胺及约1wt％至约8wt％n-乙酰半胱氨酸。
33.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，氨基酸包括约16wt％至约18wt％亮氨酸、约7wt％至约9wt％异亮氨酸、约7wt％至约9wt％缬氨酸、约28wt％至约32wt％精氨酸、约31wt％至约34wt％谷氨酰胺及约1wt％至约5wt％n-乙酰半胱氨酸。
34.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，氨基酸包括约16.8wt％亮氨酸、约8.4wt％异亮氨酸、约8.4wt％缬氨酸、约30.4wt％精氨酸、约33.6wt％谷氨酰胺及约2.5wt％n-乙酰半胱氨酸。
35.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中(其中下文(1)至(26)中论述的比率为重量比)：
36.1)l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为至少1.5:1，或至少1.75:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为约2:1；
37.2)l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少2:1，至少3:1，至少3.5:1，至少4:1，或至少5:1，且不超过6:1，例如l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为约4:1；
38.3)l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为至少1:1，至少3.5:3，至少4:3，或至少
2:1，且不超过5:2，例如l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约4:3；
39.4)l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少0.5:1，或至少0.75:1，且不超过1.5比1或不超过2:1，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:1；
40.5)l-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少2:1，至少3:1，至少3.5:1，或至少4:1，且不超过5比1或不超过6:1，例如l-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约4:1(例如4:0.9)；
41.6)可选地，其中l-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:3，大于1.5:3，约2:3，或约3:5，且不超过2.5:3或1:1，例如l-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约2:3，或l-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:5；或
42.7)(1)至(6)中的两个、三个、四个、五个或六个的组合。
43.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
44.8)i-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少1:1，至少1.5:1，或约2:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如i-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为约2:1；
45.9)i-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:3，大于1.5:3，或约2:3，且不超过2.5:3或不超过1:1，例如i-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约2:3；
46.10)i-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少1:4，至少1:3，或约1:2，且不超过1:1或不超过2:1，例如i-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:2；
47.11)i-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少1:1，至少1.5:1，或约2:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如i-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约2:1(例如2:0.9)；
48.12)可选地，其中i-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:4，大于1.5:4，约1:3，或约3:10，且不超过1.5:3或2:3，例如i-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:3，或i-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:10；或
49.13)(8)至(12)中的两个、三个、四个或五个的组合。
50.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
51.14)v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:4，大于1.5:4，或约1:3，且不超过1:2或不超过1:1，例如v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约1:3；
52.15)v-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:5，或大于1.5:5，约1:4，且不超过1.5:4或不超过1:3，例如v-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:4；
53.16)v-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少1:2，至少1.5:2，或约1:1，且不超过1.5:1或不超过2:1，例如v-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约1:1(例如1:0.9)；
54.17)可选地，其中v-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:8，大于1:7，约1:6，或约3:20，且不超过1.5:6或1:3，例如v-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:6，或v-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:20；或
55.18)(14)至(17)中的两个、三个或四个的组合。
56.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
57.19)r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:2，大于1.25:2，或约3:4，且不超过3.5:4或不超过1:1，例如r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约3:4；
58.20)r-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少4:1，至少4:1.5，或约3:1，且不超过3:1.5或不超过3:2，例如r-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约3:1(例如3:0.9)；
59.21)可选地，其中r-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:4，大于1:3，约1:2，或约9:20，且不超过1.5:2或1:1，例如r-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:2，或r-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约9:20；或
60.22)(19)至(21)中的两个或三个的组合。
61.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
62.23)l-谷氨酰胺与nac实体或其盐的比率为至少5:1，至少5:1.5，或约4:1，且不超过4:1.5或不超过3:1，例如l-谷氨酰胺与nac实体或其盐的比率为约4:1(例如4:0.9)；
63.24)可选地，其中l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:3，大于1.25:3，约2:3，或约3:5，且不超过2.5:3或1:1，例如l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体的比率为约2:3，或l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体的比率为约3:5；或
64.25)(23)及(24)的组合。
65.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
66.26)nac实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:8，大于1:7，或约1:6，且不超过1:5或不超过1.5:5，例如nac实体与s-氨基酸实体的比率为约1:6(例如0.9:6或2.7:20)。
67.在一个实施例中，组合物满足上文所定义的(1)至(7)的特性。
68.在某些实施例中，组合物满足上文所定义的特性(1)至(26)中的任一种的至少2、3、4、5、6或7个特性。
69.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为12:6:3:9:12:2.7。
70.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12:6:3:9:12:2.7:18。
71.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12:6:3:9:12:2.7:20。
72.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％。
73.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:18+/-15％。
74.在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12:6:3:9:12:2.7:9:9。在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12:6:3:9:12:2.7:10:10。
75.在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:9+/-15％:9+/-15％。在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9
+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:10+/-15％:10+/-15％。
76.在本文所揭示的方面及实施例中的任一种中，组合物进一步包括一种或多种医药学上可接受的赋形剂。
77.在一些实施例中，赋形剂选自由以下组成的组：柠檬酸、卵磷脂、甜味剂、分散增强剂、调味剂、苦味遮蔽剂及天然或人造染色剂。
78.在一些实施例中，组合物呈固体、粉末、溶液或凝胶形式。
79.在一些实施例中，氨基酸由亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸组成。
80.本发明的另一方面提供一种包括前述方面或实施例中的任一种的组合物的膳食组合物，例如其中膳食组合物选自医疗食品、功能食品或补充剂。
81.在一些实施例中，膳食组合物选自医疗食品、功能食品或补充剂。
82.在一些实施例中，个体具有2型糖尿病和/或相对较高bmi。
83.在一些实施例中，个体具有非酒精性脂肪肝病(nafld)。
84.在一些实施例中，个体具有非酒精性脂肪肝(nafl)。
85.在一些实施例中，个体具有小儿nafld。
86.在一些实施例中，患者具有脂肪变性。
87.在一些实施例中，个体具有非酒精性脂肪变性肝炎(nash)。
88.在一些实施例中，个体具有纤维化。
89.在一些实施例中，个体具有肝硬化。
90.在一些实施例中，个体具有afld。
91.在一些实施例中，个体具有ash。
92.在一些实施例中，个体具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险或提高的死亡风险。
93.在一些实施例中，个体具有2型糖尿病。
94.在一些实施例中，组合物促进个体减轻体重。
95.在适用的方法或膳食组合物的一些实施例中，组合物以约15g/d至约90g/d的剂量施用。
96.在适用的方法或膳食组合物的一些实施例中，组合物以约18g/d、约24g/d、约36g/d、约54g/d或约72g/d的剂量施用。
97.在适用的方法或膳食组合物的一些实施例中，组合物每天施用一次、两次至三次。
98.在适用的方法或膳食组合物的一些实施例中，组合物以约6g、约8g、约12g、约16g、约18g或约24g的剂量每天施用三次。
99.一个实施例提供包含本文所描述的组合物的营养补充剂、膳食调配物、功能食品、医疗食品、食品或饮品。另一实施例提供包含本文所描述的组合物的营养补充剂、膳食调配物、功能食品、医疗食品、食品或饮品，其用于管理本文所描述的疾病或病症中的任一种。本文所揭示的组合物可用于改善具有脂肪肝病，诸如非酒精性脂肪肝病(nafld；例如nafl或非酒精性脂肪变性肝炎(nash))或酒精性脂肪肝病(afld；例如酒精性脂肪变性肝炎(ash))的个体的肝功能。因此，本文揭示一种使用氨基酸实体组合物治疗(例如抑制、降低、缓解或预防)各种肝脏病症、疾病或其症状的方法，包括给药方案。组合物也可用作膳食组合物，例如医疗食品、功能食品或补充剂。
100.本发明的另一方面提供一种用于治疗一种或多种选自由以下组成的组的症状的方法：脂肪代谢降低、肝细胞凋亡、肝细胞气球样膨大、脂肪组织发炎、肝脏组织发炎、纤维化及氧化压力，其中所述方法包括向有需要的个体施用有效量的本文所揭示的方面或实施例中的任一种的组合物。
101.在一些实施例中，个体具有非酒精性脂肪肝病(nafld)。
102.在一些实施例中，个体具有非酒精性脂肪肝(nafl)。
103.在一些实施例中，个体具有小儿nafld。
104.在一些实施例中，患者具有脂肪变性。
105.在一些实施例中，个体具有非酒精性脂肪变性肝炎(nash)。
106.在一些实施例中，个体具有酒精性脂肪肝病(afld)。
107.在一些实施例中，个体具有酒精性脂肪变性肝炎(ash)。
108.在一些实施例中，个体具有纤维化。
109.在一些实施例中，个体具有肝硬化。
110.在一些实施例中，个体具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险或提高的死亡风险中的一种、两种或更多种(例如全部)。
111.在一些实施例中，个体具有2型糖尿病。
112.本发明的另一方面提供一种用于治疗非酒精性脂肪肝病(nafld)的方法，其包括向有需要的个体施用有效量的本文所揭示的方面或实施例中的任一种的组合物。
113.在一些实施例中，个体具有nafl。
114.在一些实施例中，个体具有小儿nafld。
115.在一些实施例中，患者具有脂肪变性。
116.本发明的另一方面提供一种用于治疗非酒精性脂肪变性肝炎(nash)的方法，其包括向有需要的个体施用有效量的本文所揭示的方面或实施例中的任一种的组合物。
117.在一些实施例中，个体具有纤维化。
118.本发明的另一方面提供一种用于治疗afld的方法，其包括向有需要的个体施用有效量的本文所揭示的方面或实施例中的任一种的组合物。
119.在一些实施例中，个体具有ash。
120.本发明的另一方面提供一种用于治疗肝硬化的方法，其包括向有需要的个体施用有效量的本文所揭示的方面或实施例中的任一种的组合物。
121.在一些实施例中，个体具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险或提高的死亡风险。
122.在一些实施例中，施用组合物使得个体中的一种或多种代谢症状得到改善。在一些实施例中，一种或多种代谢症状改善选自以下：游离脂肪酸及脂质代谢提高、粒线体功能改善、白色脂肪组织(wat)褐变、活性氧(ros)减少、谷胱甘肽(gsh)含量提高、肝脏发炎减少、肝细胞气球样膨大减少、肠道屏障功能改善、胰岛素分泌提高或葡萄糖耐受性改善。
123.在一些实施例中，在肝脏中发生游离脂肪酸及脂质代谢提高。
124.在一些实施例中，施用组合物使得在24小时的治疗期之后一种或多种代谢症状得到改善。
125.在一些实施例中，所述方法进一步包括确定以下中的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种(例如全部)的含量：
126.a)丙氨酸转氨酶(alt)；
127.b)天冬氨酸转氨酶(ast)；
128.c)脂联素；
129.d)iii型胶原蛋白的n端片段(proc3)；
130.e)胱天蛋白酶裂解的角蛋白18片段(m30及m65)；
131.f)il-1β；
132.g)c反应蛋白；
133.h)piiinp；
134.i)金属蛋白酶的组织抑制剂(timp)；例如timp1或timp2；
135.j)mcp-1；
136.k)fgf-21；
137.l)col1a1；
138.m)acta2；
139.n)基质金属蛋白酶(mmp)，例如mmp-13、mmp-2、mmp-9、mt1-mmp、mmp-3或mmp-10；
140.o)acox1；
141.p)il-10；或
142.q)nf-kb。
143.在一些实施例中，施用组合物使得在24小时的治疗期之后a)-q)中的一种或多种得到改善。
144.在一些实施例中，在用餐之前施用组合物。
145.在一些实施例中，与用餐同时施用组合物。
146.在一些实施例中，在用餐之后施用组合物。
147.在一些实施例中，与第二药剂一起施用组合物。
148.在一些实施例中，第二药剂选自由以下组成的组：法尼酯x受体(fxr)激动剂、硬脂酰基coa去饱和酶抑制剂、ccr2及ccr5趋化激素(chemokine)拮抗剂、pparα及δ激动剂、胱天蛋白酶抑制剂、半乳糖凝集素-3抑制剂、乙酰coa羧化酶抑制剂或回肠钠胆酸共转运体抑制剂。本发明的另一方面提供一种维持或改善肝脏健康的方法，其包含向个体施用有效量的本文所描述的组合物中的任一种。另一实施例提供一种向罹患nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash)的个体提供营养支持或补充的方法，其包含向个体施用有效量的本文所描述的组合物。又一实施例提供一种向个体提供帮助管理nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash)的营养补充的方法，其包含向有需要的个体施用有效量的本文所描述的组合物。
149.本发明的额外特征及实施例包括以下中的一种或多种。
150.本发明的另一方面提供一种包含以下的组合物：
151.a)l-氨基酸实体，其选自l-亮氨酸或其盐或β-羟基-β-甲基丁酸(hmb)或其盐或l-亮氨酸或其盐及hmb或其盐的组合；
152.b)r-氨基酸实体，其选自l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐或两种或三种l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐的组合；
153.c)l-谷氨酰胺或其盐；及
154.d)n-乙酰半胱氨酸(nac)或其盐。
155.在一个实施例中，提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
156.在一个实施例中，提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
157.在一个实施例中，提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
158.在一个实施例中，提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
159.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，甲硫氨酸(m)、色氨酸(w)、缬氨酸(v)或半胱氨酸(c)中的一种、两种、三种或四种，不存在，或若存在则以按重量(wt％)计小于组合物百分比的10％存在。在一些实施例中，(a)-(d)的总重量％大于组合物中的任何其他氨基酸实体的总重量％。
160.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，提供(a)-(d)中的氨基酸中的一种、两种、三种或四种作为二肽或三肽的部分，例如其量为组合物的至少10重量％。在某些实施例中，二肽为(a)-(d)中的氨基酸中的任一种的同二肽或杂二肽，例如(a)-(d)中的氨基酸中的一种、两种、三种或四种为同二肽或杂二肽。在某些实施例中，三肽为(a)-(d)中的任一种的同三肽或杂三肽，例如(a)-(d)中的一种、两种、三种或四种为同三肽或杂三肽。
161.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，(a)为l-氨基酸实体二肽或其盐(例如l-亮氨酸二肽或其盐)。在一些实施例中，(a)为同二肽。在一些实施例中，(a)为杂二肽，例如ala-leu。
162.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，(b)为l-精氨酸二肽或其盐。在一些实施例中，(b)为同二肽。在一些实施例中，(b)为杂二肽，例如ala-arg。
163.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，(c)为l-谷氨酰胺二肽或其盐。在一些实施例中，(c)为同二肽，例如gln-gln。在一些实施例中，(c)为杂二肽，例如ala-gln。
164.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
165.f)组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％大于r-氨基酸实体的重量％；
166.g)组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％大于l-氨基酸实体的重量％；
167.h)组合物中的r-氨基酸实体的重量％大于l-氨基酸实体的重量％；或
168.i)(f)-(h)中的两个或三个的组合。
169.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％比r-氨基酸实体的重量％大至少5％，例如l-谷氨酰胺或其盐的重量％比r-氨基酸实体的重量％至少大10％、15％、20％或25％。
170.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％比l-氨基酸实体的重量％大至少20％，例如组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％比l-氨基酸实体的重量％大至少25％、30％、35％、40％、45％或50％。
171.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，组合物中的r-氨基酸实体的重量％比l-氨基酸实体的重量％大至少10％，例如组合物中的r-氨基酸实体的重
量％比l-氨基酸实体的重量％大至少15％、20％、25％或30％。
172.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
173.j)l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为至少1:4，或至少2:5，且不超过3:4，例如l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约2:3；
174.k)l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少1:4，或至少1:3，且不超过3:4，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:2；
175.l)r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少1:4，或至少1:2，且不超过6:7，例如r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约3:4；或
176.m)(j)-(l)中的两个或三个的组合。
177.在一个实施例中，组合物满足上文所定义的(j)-(l)的特性。
178.在某些实施例中，组合物满足上文所定义的特性(j)-(m)中的任一种的至少2、3或4个特性。
179.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，所述组合物进一步包含异亮氨酸(i)-氨基酸-实体及缬氨酸(v)-氨基酸-实体中的一种或两种，例如i-氨基酸-实体及v-氨基酸-实体均存在。
180.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
181.n)组合物中的l-氨基酸-实体的重量％大于或等于i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合的重量％；
182.o)组合物中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合的重量％大于或等于l-谷氨酰胺或其盐的重量％；
183.p)组合物中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合的重量％小于r-氨基酸实体的重量％；
184.q)组合物中的r-氨基酸实体及l-谷氨酰胺或其盐的重量％大于l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合的重量％；或
185.r)(n)-(q)中的两个、三个或四个的组合。
186.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
187.s)r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的重量％为组合物的至少50％，或组合物的至少70％，但不超过组合物的90％；
188.t)nac或其盐的重量％为组合物的至少1％，或至少2％，但不超过10％；
189.u)l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合的重量％为组合物的至少15％，或至少20％，但不超过50％；
190.v)r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的重量％为组合物的至少40％，或至少50％，但不超过80％；或
191.w)(s)-(v)中的两个、三个或四个的组合。
192.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
193.x)l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为至少1.5:1，或至少1.75:1，且不超过2.5比1或不超过3:1，例如l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为约2:1；
194.y)l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少1.5:1，或至少1.75:1，且不超过2.5比1或不超过3:1，例如l与v的比率为约2:1；
195.z)l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:3，大于1.5比3，且小于3:3，例如l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约2:3；
196.aa)l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:4，大于1.5比4且小于4:4，或小于3:4，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:2；或
197.bb)(x)-(aa)中的两个、三个或四个的组合。
198.在一个实施例中，组合物满足上文所定义的(x)-(aa)的特性。
199.在某些实施例中，组合物满足上文所定义的特性(x)-(bb)中的任一种的至少2、3、4或5个特性。
200.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
201.cc)i-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少0.5:1，或至少0.75:1，且不超过1.5比1或不超过2:1，例如l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为约1:1；
202.dd)i-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为至少0.5:3，或至少0.75:3，且不超过2:3，或不超过1.5:3，例如l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为约1:3；
203.ee)i-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少0.5:4，或至少0.75:4，且不超过3:4，或不超过2:4，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:4；或
204.ff)或(cc)-(ee)中的两个或三个的组合。
205.在一个实施例中，组合物满足上文所定义的(cc)-(ee)的特性。
206.在某些实施例中，组合物满足上文所定义的特性(cc)-(ff)中的任一种的至少2、3或4个特性。
207.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
208.gg)l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少1.5:1，或至少1.75:1，且不超过2.5比1或不超过3:1，例如l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为约2:1；
209.hh)l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:3或大于1.5比3，且小于3:3，例如l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约2:3；
210.ii)l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:4或大于1.5比4，且小于4:4或小于3:4，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:2；或
211.jj)(gg)-(ii)中的两个或三个的组合。
212.在一个实施例中，组合物满足上文所定义的(gg)-(ii)的特性。
213.在某些实施例中，组合物满足上文所定义的特性(gg)-(jj)中的任一种的至少2、3或4个特性。
214.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
215.kk)v-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少0.5:4，或至少0.75:4，且不超过3:4，或不超过2:4，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:4；
216.ll)v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为至少0.5:3，或至少0.75:3，且不超过2:3，或不超过1.5:3，例如v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约1:3；
217.mm)l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为至少1:4，或至少2:3，或不超过5:7，或不超过6:7，例如比率为约6:11；或
218.nn)(kk)-(mm)中的两个或三个的组合。
219.在一个实施例中，组合物满足上文所定义的(kk)-(mm)的特性。
220.在某些实施例中，组合物满足上文所定义的特性(kk)-(nn)中的任一种的至少2、3或4个特性。
221.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，组合物进一步包含s-氨基酸实体。
222.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
223.1)l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为至少1.5:1，或至少1.75:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为约2:1；
224.2)l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少2:1，至少3:1，至少3.5:1，至少4:1，或至少5:1，且不超过6:1，例如l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为约4:1；
225.3)l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为至少1:1，至少3.5:3，至少4:3，或至少2:1，且不超过5:2，例如l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约4:3；
226.4)l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少0.5:1，或至少0.75:1，且不超过1.5比1或不超过2:1，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:1；
227.5)l-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少2:1，至少3:1，至少3.5:1，或至少4:1，且不超过5比1或不超过6:1，例如l-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约4:1(例如4:0.9)；
228.6)可选地，其中l-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:3，大于1.5:3，约2:3，或约3:5，且不超过2.5:3或1:1，例如l-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约2:3，或l-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:5；或
229.7)(1)至(6)中的两个、三个、四个、五个或六个的组合。
230.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
231.8)i-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少1:1，至少1.5:1，或约2:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如i-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为约2:1；
232.9)i-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:3，大于1.5:3，或约2:3，且不超过2.5:3或不超过1:1，例如i-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约2:3；
233.10)i-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少1:4，至少1:3，或约1:2，且不超过1:1或不超过2:1，例如i-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:2；
234.11)i-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少1:1，至少1.5:1，或约2:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如i-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约2:1(例如2:0.9)；
235.12)可选地，其中i-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:4，大于1.5:4，约1:3，或约3:10，且不超过1.5:3或2:3，例如i-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:3，或i-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:10；或
236.13)(8)至(12)中的两个、三个、四个或五个的组合。
237.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
238.14)v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:4，大于1.5:4，或约1:3，且不超过1:2或不超过1:1，例如v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约1:3；
239.15)v-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:5，或大于1.5:5，约1:4，且不超过1.5:4或不超过1:3，例如v-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:4；
240.16)v-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少1:2，至少1.5:2，或约1:1，且不超过1.5:1或不超过2:1，例如v-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约1:1(例如1:0.9)；
241.17)可选地，其中v-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:8，大于1:7，约1:6，或约3:20，且不超过1.5:6或1:3，例如v-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:6，或v-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:20；或
242.18)(14)至(17)中的两个、三个或四个的组合。
243.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
244.19)r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:2，大于1.25:2，或约3:4，且不超过3.5:4或不超过1:1，例如r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约3:4；
245.20)r-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少4:1，至少4:1.5，或约3:1，且不超过3:1.5或不超过3:2，例如r-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约3:1(例如3:0.9)；
246.21)可选地，其中r-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:4，大于1:3，约1:2，或约9:20，且不超过1.5:2或1:1，例如r-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:2，或r-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约9:20；或
247.22)(19)至(21)中的两个或三个的组合。
248.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
249.23)l-谷氨酰胺与nac实体或其盐的比率为至少5:1，至少5:1.5，或约4:1，且不超过4:1.5或不超过3:1，例如l-谷氨酰胺与nac实体或其盐的比率为约4:1(例如4:0.9)；
250.24)可选地，其中l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:3，大于1.25:3，约2:3，或约3:5，且不超过2.5:3或1:1，例如l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体的比率为约2:3，或l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体的比率为约3:5；或
251.25)(23)及(24)的组合。
252.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
253.26)nac实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:8，大于1:7，或约1:6，且不超过1:5或不超过1.5:5，例如nac实体与s-氨基酸实体的比率为约1:6(例如0.9:6或2.7:20)。
254.在一个实施例中，组合物满足上文所定义的(1)至(7)的特性。
255.在某些实施例中，组合物满足上文所定义的特性(1)至(26)中的任一种的至少2、3、4、5、6或7个特性。
256.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为12:6:3:9:12:2.7。
257.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12:6:3:9:12:2.7:18。
258.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12:6:3:9:12:2.7:20。
259.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％。
260.在一个实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12+/-15％:6+/-15％:3
+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:18+/-15％。
261.在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12:6:3:9:12:2.7:9:9。在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12:6:3:9:12:2.7:10:10。
262.在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:9+/-15％:9+/-15％。在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:10+/-15％:10+/-15％。
263.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中：
264.oo)组合物中的l-氨基酸实体的重量％大于nac或其盐的重量％；
265.pp)组合物中的r-氨基酸实体的重量％大于nac或其盐的重量％；
266.qq)组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％大于nac或其盐的重量％；或
267.rr)(oo)-(qq)中的两个或三个的组合。
268.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，(a)-(d)中的至少一种为游离氨基酸，例如(a)-(d)中的两个、三个或四个为游离氨基酸，例如组合物的总重量的至少50重量％为呈游离形式的一种或多种氨基酸实体。
269.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，(a)-(d)中的至少一种呈盐形式，例如(a)-(d)中的一种、两种、三种或四种呈盐形式，例如组合物的总重量的至少10重量％为呈盐形式的一种或多种氨基酸实体。
270.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，所述组合物能够实现以下中的一种、两种、三种、四种、五种或全部：
271.a)减少或预防肝纤维化；
272.b)减少或预防肝脏损伤；
273.c)减少或预防肝细胞发炎；
274.d)改善，例如提高葡萄糖耐受性；
275.e)减少或预防脂肪变性；
276.f)减少或预防肝细胞气球样膨大；或
277.g)改善肠道功能。
278.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，组合物进一步包含l-甘氨酸及l-丝氨酸中的一种或两种。在某些实施例中，组合物包含l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及l-甘氨酸。在某些实施例中，组合物包含l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及l-丝氨酸。在某些实施例中，组合物包含l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、l-甘氨酸及l-丝氨酸。在此段落中之前述实施例中的任一种中，l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨
基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1:0.5:0.5:1.5:2:0.15或约1:0.5:0.5:1.5:2:0.3。
279.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约0.5至3:0.5至4:1至4:0.1至2.5，例如l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1:1.5:2:0.15、约1:1.5:2:0.225、约1:1.5:2:0.3或约1:1.5:2:0.5。在此段落中之前述实施例中的任一种中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1:0.75:2:0.15、约1:0.75:2:0.225、约1:0.75:2:0.3或约1:0.75:2:0.5。
280.在一些实施例中，l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐与nac或其盐的重量比率为约1:0.5:0.5:1.5:2:0.15、约1:0.5:0.5:1.5:2:0.225、约1:0.5:0.5:1.5:2:0.3或约1:0.5:0.5:1.5:2:0.5。
281.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，组合物包含约0.5g至约10g l-氨基酸实体、约0.25g至约5g i-氨基酸实体、约0.25g至约5g v-氨基酸实体、约0.5g至约20g r-氨基酸实体、约1g至约20g l-谷氨酰胺或其盐及约0.1g至约5g nac或其盐，例如组合物包含约1g l-氨基酸实体、约0.5g i-氨基酸实体、约0.5g v-氨基酸实体、约1.5g r-氨基酸实体、约2g l-谷氨酰胺或其盐及约0.15g、约0.225g、约0.3g或约0.5g nac或其盐。在某些实施例中，组合物包含约0.15g nac。在某些实施例中，组合物包含约0.3g nac。在实施例中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐及约0.9g nac或其盐。在实施例中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐、约0.9g nac或其盐及约6g l-丝氨酸或其盐。在实施例中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐、约0.9g nac或其盐及约6.67g l-丝氨酸或其盐。在实施例中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐、约0.9g nac或其盐、约3g l-丝氨酸或其盐及约3g l-甘氨酸或其盐。在实施例中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐、约0.9g nac或其盐、约3.33g l-丝氨酸或其盐及约3.33g l-甘氨酸或其盐。
282.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，所述组合物包含：
283.a)l-亮氨酸或其盐；
284.b)l-异亮氨酸或其盐；
285.c)l-缬氨酸或其盐；
286.d)l-精氨酸或其盐；
287.e)l-谷氨酰胺或其盐；及
288.f)nac或其盐。
289.在一个实施例中，提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
290.在一个实施例中，提供l-异亮氨酸作为包含l-异亮氨酸或其盐的二肽或包含l-异亮氨酸或其盐的三肽的部分。
291.在一个实施例中，提供l-缬氨酸作为包含l-缬氨酸或其盐的二肽或包含l-缬氨酸或其盐的三肽的部分。
292.在一个实施例中，提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
293.在一个实施例中，提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
294.在一个实施例中，提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
295.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，组合物包含4至20种不同氨基酸实体的组合，例如5至15种不同氨基酸实体的组合。
296.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种的一些实施例中，至少两种、三种、四种或更多种氨基酸实体不包含于长度超过4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个氨基酸残基的肽中。
297.本发明的另一方面提供一种用于改善肝功能的方法，其中所述方法包含向有需要的个体施用有效量的组合物，所述组合物包含：
298.a)l-氨基酸实体，其选自l-亮氨酸或其盐或β-羟基-β-甲基丁酸(hmb)或其盐或l-亮氨酸或其盐及hmb或其盐的组合；
299.b)r-氨基酸实体，其选自l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐或两种或三种l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐的组合；
300.c)l-谷氨酰胺或其盐；及
301.d)n-乙酰半胱氨酸(nac)或其盐。
302.在一个实施例中，提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
303.在一个实施例中，提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
304.在一个实施例中，提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
305.在一个实施例中，提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
306.本发明的另一方面提供一种用于治疗一种或多种选自由以下组成的组的症状的方法：脂肪代谢降低、肝细胞凋亡、肝细胞气球样膨大、脂肪组织发炎、肝脏组织发炎、纤维化、肝脏损伤、脂肪变性、葡萄糖耐受性及氧化压力，其中所述方法包含向有需要的个体施用有效量的包含以下的组合物：
307.a)l-氨基酸实体，其选自l-亮氨酸或其盐或β-羟基-β-甲基丁酸(hmb)或其盐或l-亮氨酸或其盐及hmb或其盐的组合；
308.b)r-氨基酸实体，其选自l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐或两种或三种l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐的组合；
309.c)l-谷氨酰胺或其盐；及
310.d)n-乙酰半胱氨酸(nac)或其盐。
311.在一个实施例中，提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
312.在一个实施例中，提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
313.在一个实施例中，提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
314.在一个实施例中，提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
315.本发明的另一方面提供一种用于治疗脂肪肝病的方法，其中所述方法包含向有需要的个体施用有效量的包含以下的组合物：
316.a)l-氨基酸实体，其选自l-亮氨酸或其盐或β-羟基-β-甲基丁酸(hmb)或其盐或l-亮氨酸或其盐及hmb或其盐的组合；
317.b)r-氨基酸实体，其选自l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐或两种或三种l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐的组合；
318.c)l-谷氨酰胺或其盐；及
319.d)n-乙酰半胱氨酸(nac)或其盐。
320.在一个实施例中，提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
321.在一个实施例中，提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
322.在一个实施例中，提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
323.在一个实施例中，提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
324.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种，例如本文所描述的方法中的任一种的一些实施例中，个体具有选自由以下组成的组的疾病或病症：非酒精性脂肪肝(nafl)、非酒精性脂肪肝病(nafld)、非酒精性脂肪变性肝炎(nash)、酒精性脂肪肝病(afld)及酒精性脂肪变性肝炎(ash)。在某些实施例中，个体具有小儿nafld。
325.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种，例如本文所描述的方法中的任一种的一些实施例中，个体具有高bmi、肥胖症、肠道渗漏、肠道菌群失调或肠道微生物群落紊乱。
326.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种，例如本文所描述的方法中的任一种的一些实施例中，个体具有肝硬化、肝癌、提高的肝脏衰竭风险、提高的死亡风险、代谢综合征或2型糖尿病。
327.在本文所揭示的组合物或方法中的任一种，例如本文所描述的方法中的任一种的一些实施例中，个体具有相对于正常个体提高含量的发炎性细胞介素，例如个体具有相对于正常个体，例如不具有一种或多种症状或不具有脂肪肝病的个体提高含量的tnfα。
328.在例如本文所描述的方法中的任一种的一些实施例中，相对于正常个体(例如不具有一种或多种症状或不具有脂肪肝病的个体)，个体展现肌肉萎缩或肌肉组织与脂肪组织的比率降低，例如个体展现肌肉萎缩，而无纤维化或肝硬化中的一种或两种。
329.在例如本文所描述的方法中的任一种的一些实施例中，个体展现自脂肪组织至肝脏组织的反向脂质传送。
330.在例如本文所描述的方法中的任一种的一些实施例中，个体用组合物，例如如本文所描述的任何组合物治疗。在本文所描述的方面中的任一种的一些实施例中，
331.(i)(a)的氨基酸实体(例如氨基酸实体的至少一个、两个或三个)选自表2；和/或
332.(ii)r-氨基酸实体及q-氨基酸实体中的一种或两种以与l-氨基酸实体相比更高的量(重量％)存在。
附图说明
333.图1a-1b为显示stam小鼠模型(图1a)及fatzo小鼠模型(图1b)中用氨基酸组合物(氨基酸组合物a-1)处理对nafld活性评分、气球样膨大及纤维化的效果的图式。
334.图2为显示在施用包含本文所描述的氨基酸实体的组合物之前具有非酒精性脂肪肝病(nafld)、非酒精性脂肪变性肝炎(nash)及肝硬化的患者的代谢症状(顶部)及在施用组合物之后具有nafld、nash及肝硬化的患者的改善(底部)的示意图。
335.图3为显示向stam及fatzo小鼠施用氨基酸组合物的治疗方案的示意图。
336.图4a-e为显示用氨基酸组合物处理stam及fatzo小鼠对如用组织学确定的nafld活性评分(nas)、脂肪变性、发炎及肝纤维化的效果的一系列图式及图像。
337.图5a-5b为显示用氨基酸组合物处理的stam小鼠的肝脏不饱和脂肪酸及酰基肉碱的含量的图像。
338.图6为在显示在acox1活化的stam小鼠中用氨基酸组合物处理之后肝脏基因表达(expression)图案的基因图谱的图像。
339.图7a-7d为在stam小鼠中用氨基酸组合物处理之后肝脏基因表达图案的基因图谱的图像，其显示消炎剂il-10的上游调节因子活化(图7a)；抑制促炎性nf-kb(图7b)、干扰素、il-1b及il-2(图7c)；及抑制纤维发生tgf-b传讯路径。
340.图8为显示在用氨基酸组合物处理之后mcp-1及mip-1蛋白质含量的一系列图式，其为c-c趋化激素受体类型2(ccr2)及5(ccr5)的配体(ligand)。
341.图9a-9l为显示在用载体(vehicle)对照(图9a-9d)、livrqnac氨基酸组合物(图9e-9h)或游离脂肪酸及tnfα(ff+tnf；图9i-9l)处理之后脂质积聚于初级人类肝细胞中的一系列显微图像。
342.图10为显示在施用指定氨基酸组合物之后来自fatzo小鼠的肝脏组织学(用于胶原蛋白沉积的h&e染剂或天狼星红(sirius red)染剂)的一系列显微图像。
343.图11为显示在施用指定氨基酸组合物之后来自fatzo小鼠的肝脏组织学的一系列显微图像。
344.图12为显示在施用指定氨基酸组合物之后在来自fatzo小鼠的固定肝脏组织中观测到的nafld活性分数(左上图)、天狼星红染色(右上图)、脂肪变性水平(左下图)、发炎水平(中下图)及气球样膨大(右下图)的一系列图式。
具体实施方式
345.本发明至少部分地提供包含至少四种不同氨基酸实体的方法及组合物。在一些实
施例中，所述组合物能够实现以下中的一种、两种、三种、四种、五种或全部：
346.a)减少或预防中的一种或两种肝纤维化或肝脏损伤中的一种或两种；
347.b)减少或预防中的一种或两种肝细胞发炎；
348.c)改善，例如提高葡萄糖耐受性；
349.d)减少或预防中的一种或两种脂肪变性；或
350.e)减少或预防中的一种或两种肝细胞气球样膨大。
351.在一些实施例中，组合物中的至少一种氨基酸实体不为长度超过20个氨基酸残基的肽。
352.在一些实施例中，所述组合物包含亮氨酸(l)-氨基酸实体、精氨酸(r)-氨基酸实体、谷氨酰胺(q)-氨基酸实体；及抗氧化剂或活性氧(ros)清除剂(例如n-乙酰半胱氨酸(nac)实体，例如nac)。在一些实施例中，至少一种氨基酸实体不为长度超过20个氨基酸残基的肽。在一些实施例中，组合物能够改善肠道屏障功能。
353.可向个体施用本文所描述的组合物以提供改善肝功能或治疗(例如恢复、减轻、改善或预防)肝病(例如脂肪肝病)中的一种或两种的有利效果。可用组合物治疗的个体包括具有非酒精性脂肪肝病(nafld；例如小儿nafld)的个体，诸如具有非酒精性脂肪变性肝炎(nash)或nafl的个体，或具有酒精性脂肪肝病(afld)，诸如酒精性脂肪变性肝炎(ash)的个体。具体而言，个体可能具有高bmi、肥胖症、纤维化或肝硬化中的一种、两种或更多种(例如全部)。个体也可肠道渗漏、肠道菌群失调或肠道微生物群落紊乱中的一种、两种或更多种(例如全部)。
354.个体可展现在施用包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体；及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体，例如nac的组合物之后肝功能或肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))得到改善。举例而言，氨基酸实体组合物可以每天约总计15克至约每天总计90克(例如每天总共约48g或总共约72g)的剂量向个体施用例如两周、三周、四周、五周、六周、七周、八周、九周、10周、11周、12周、13周、14周、15周、16周或更长的治疗期。
355.用氨基酸实体组合物治疗可例如借由提高游离脂肪酸及脂质代谢，改善粒线体功能，白色脂肪组织(wat)褐变，减少活性氧(ros)，提高谷胱甘肽(gsh)含量，减少肝脏发炎，改善肠道屏障功能，提高胰岛素分泌或改善葡萄糖耐受性中的一种、两种、三种、四种、五种或更多种(例如全部)改善个体的肝功能。
356.在一些实施例中，组合物适用作改善个体(例如具有肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash)的个体)的肝功能的药物。在一些实施例中，包括氨基酸实体的组合物适用作治疗(例如恢复、减轻、改善或预防)个体的肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的药物。
357.在一些实施例中，组合物用于制造供改善个体(例如具有肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash)的个体)的肝功能用的药物。在一些实施例中，包括氨基酸实体的组合物用于制造供治疗(例如恢复、减轻、改善或预防)个体的肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))用的药物。
358.另外，组合物可用于个体(例如不具有肝病或具有肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的个体的膳食管理的方法中。
359.一个实施例提供包含本文所描述的组合物的营养补充剂、膳食调配物、功能食品、
医疗食品、食品或饮品。另一实施例提供包含本文所描述的组合物的营养补充剂、膳食调配物、功能食品、医疗食品、食品或饮品，其用于管理本文所描述的疾病或病症中的任一种。
360.一个实施例提供一种维持或改善肝脏健康的方法，其包含向个体施用有效量的本文所描述的组合物。另一实施例提供一种向具有肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的个体提供营养支持或补充的方法，其包含向所述个体施用有效量的本文所描述的组合物。又一实施例提供一种提供帮助管理肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的营养补充的方法，其包含向有需要的个体施用有效量的本文所描述的组合物。
361.定义
362.除非另外规定，否则用于申请专利范围及说明书中的术语如在下文中所阐述定义。
363.必须指出，除非上下文另外清楚指定，否则如本说明书及随附申请专利范围中所使用的单数形式“一(a)”、“一(an)”及“所述”包括复数个指示物。
364.如本文所使用，术语“氨基酸实体”指游离形式或盐形式、肽(例如二肽、寡肽或多肽)的氨基酸残基、氨基酸的衍生物、氨基酸之前驱体或氨基酸的代谢物中的一种或两种的氨基酸。
365.如本文所使用，术语“xxx氨基酸实体”若游离氨基酸包含呈盐形式的游离xxx或xxx，则指氨基酸实体；若为肽，则指包含xxx残基的肽；若为衍生物，则指xxx的衍生物；若为前驱体，则指xxx之前驱体；且若为代谢物，则指xxx代谢物。举例而言，在xxx为亮氨酸(l)的情况下，则l-氨基酸实体指游离l或呈盐形式的l、包含l残基、l衍生物、l前驱体或l代谢物的肽；在xxx为精氨酸(r)的情况下，则r-氨基酸实体指游离r或呈盐形式的r、包含r残基、r衍生物、r前驱体或r代谢物的肽；在xxx为谷氨酰胺(q)的情况下，则q-氨基酸实体指游离q或呈盐形式的q、包含q残基、q衍生物、q前驱体或q代谢物的肽；且在xxx为n-乙酰半胱氨酸(nac)的情况下，则nac-氨基酸实体指游离nac或呈盐形式的nac、包含nac残基、nac衍生物、nac前驱体或nac代谢物的肽。
[0366]“约”及“大致”一般应意谓鉴于量测值的性质或精确度，所量测的量的可接受误差程度。示例性误差程度在指定值或值范围的百分(％)的20内，典型地在10％内，且更典型地在5％内。
[0367]“氨基酸”指具有氨基(-nh2)、羧酸基(-c(＝o)oh)及经由中央碳原子键合的侧链的有机化合物，且包括必需及非必需氨基酸以及天然及非天然氨基酸。
[0368]
下文所显示的蛋白质性氨基酸除了其全名的外已知为三个及一个字母缩写。对于给定氨基酸，此等缩写在本文中可互换使用。举例而言，leu、l或亮氨酸均指氨基酸亮氨酸；ile、i或异亮氨酸均指氨基酸异亮氨酸；val、v或缬氨酸均指氨基酸缬氨酸；arg、r或精氨酸均指氨基酸精氨酸；且gln、q或谷氨酰胺均指氨基酸谷氨酰胺。
[0369]
同样地，非天然氨基酸衍生物n-乙酰半胱氨酸可与“nac”或“n-乙酰半胱氨酸”互换提及。
[0370]
氨基酸可以d-异构体或l-异构体形式存在。除非另外指明，否则本文所提及的氨基酸为氨基酸的l-异构体。
[0371]
表1.氨基酸名称及缩写.
[0372][0373][0374]
如本文所使用的术语“有效量”意谓足以明显且积极地改变待治疗的症状和/或病况(例如提供阳性临床反应)的氨基酸或医药组合物的量。有效量的用于医药组合物中的活性成分将随待治疗的特定病况、条件严重程度、治疗持续时间、并行疗法性质、所采用的特定活性成分、特定医药学上可接受的赋形剂和/或所利用的载剂(carrier)及与主治医师的知识及专门知识类似的因素变化。
[0375]
本文所描述的“医药组合物”包含至少一种氨基酸及医药学上可接受的载剂或赋形剂。在一些实施例中，医药组合物用作治疗剂、营养药剂、医疗食品或补充剂。
[0376]
如本文所使用，术语“医药学上可接受”指在合理医学判断的范畴内，适用于接触人类及动物的组织而无过度毒性、刺激、过敏性反应或其他问题或并发症，与合理的益处/风险比相匹配的氨基酸、材料、赋形剂、组合物和/或剂型。
[0377]
若其提供有利的临床效果，则组合物、调配物或产物为“治疗剂”。可借由减轻疾病
进展和/或缓解一种或多种疾病症状显示有利的临床效果。
[0378]
如本文所使用的“单位剂量(unit dose或unit dosage)”意谓为方便、安全性或监测起见个别封包或容器中所制备的医学的量或剂量。“单位剂量(unit dose或unit dosage)”包含一种或多种药物产品，其呈出售以供使用的形式，其在特定构造(诸如胶囊壳体)中具有活性成分与非活性组分(赋形剂)的特定混合物且分配成特定剂量。
[0379]
如本文所使用，术语“治疗(treat、treating或treatment)”肝病指在一个实施例中，改善例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash)(亦即，减缓或遏制或减轻疾病发展或其临床症状中的至少一种)。在另一实施例中，“治疗(treat、treating或treatment)”指缓解或改善至少一种物理参数(physical parameter)，包括患者可能辨别不出的物理参数。在又一实施例中，“治疗(treat、treating或treatment)”指以物理(例如使可辨别的症状稳定)、生理(例如使物理参数稳定)或两种方式调节肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的症状。在又一实施例中，“治疗(treat、treating或treatment)”指预防或延迟肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的发作或发展或进展。
[0380]
确定组合物中的氨基酸重量百分比及氨基酸比率
[0381]
氨基酸的组合物或混合物中的一种或多种特定氨基酸的重量比为相比于组合物或混合物中存在的氨基酸的总重量，组合物或混合物中的一种或多种特定氨基酸的重量比。此值借由特定氨基酸或组合物或混合物中的特定氨基酸的重量除以组合物或混合物中存在的全部氨基酸的重量来计算。
[0382]
包含氨基酸实体的组合物
[0383]
本发明提供包含氨基酸实体的组合物，例如医药组合物。此等医药组合物由包括呈游离形式或盐形式中的一种或两种的氨基酸、肽(例如二肽、寡肽或多肽)的氨基酸残基、氨基酸的衍生物、氨基酸之前驱体或氨基酸的代谢物组成的氨基酸实体。举例而言，组合物可包括亮氨酸(l)-氨基酸实体、精氨酸(r)-氨基酸实体、谷氨酰胺(q)-氨基酸实体；及抗氧化剂或活性氧(ros)清除剂，例如n-乙酰半胱氨酸(nac)实体，例如nac(表2)。具体而言，至少一种氨基酸实体不为长度超过20个氨基酸残基的肽。
[0384]
表2.包括本文所描述的组合物的氨基酸、前驱体、代谢物及衍生物的氨基酸实体.
[0385][0386][0387]
预期，可为s-氨基酸实体的丝氨酸的替代物包括例如甘氨酸、苏氨酸或丝氨酸及甘氨酸的组合(例如丝氨酸与甘氨酸的比率为1:1)。
[0388]
在一些实施例中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及ros清除剂(例如
nac实体，例如nac)的总重量大于组合物中的其他氨基酸实体的总重量。在某些实施例中，氨基酸实体组合物中可能不存在两个、三个或更多个(例如全部)甲硫氨酸(m)、色氨酸(w)或缬氨酸(v)，或若存在则以小于2重量(wt)％存在。
[0389]
在一些实施例中，r-氨基酸实体及q-氨基酸实体中的一种或两种以与l-氨基酸实体相比更高的量(重量％)存在。r-氨基酸实体可例如以比l-氨基酸实体大至少2重量％、至少3重量％、至少4重量％、至少5重量％、至少6重量％、至少7重量％或至少8重量％的量存在。q-氨基酸实体可例如以比l-氨基酸实体大至少2重量％、至少3重量％、至少4重量％或至少5重量％的量存在。
[0390]
在一些实施例中，l-氨基酸实体选自由以下组成的组：前驱体、代谢物及衍生物。在某些实施例中，l-氨基酸实体选自由以下组成的组：l-亮氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸(hmb)、氧代-亮氨酸、异戊酰基-coa、d-亮氨酸及n-乙酰亮氨酸。在一个实施例中，l-氨基酸实体为l-亮氨酸。在另一实施例中，l-氨基酸实体为hmb。
[0391]
在一些实施例中，r-氨基酸实体选自由以下组成的组：前驱体、代谢物及衍生物。在某些实施例中，r-氨基酸实体选自由以下组成的组：l-精氨酸、d-精氨酸、鸟氨酸、精氨基丁二酸、瓜氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、胍丁胺及n-乙酰基-精氨酸。在一个实施例中，r-氨基酸实体为l-精氨酸。在一个实施例中，r-氨基酸实体为肌酸。在另一实施例中，r-氨基酸实体为鸟氨酸。
[0392]
在一些实施例中，q-氨基酸实体选自由以下组成的组：前驱体、代谢物及衍生物。在某些实施例中，q-氨基酸实体选自由以下组成的组：l-谷氨酰胺、谷氨酸、氨甲酰基-p、谷氨酸、d-谷氨酰胺及n-乙酰谷氨酰胺。在一个实施例中，q-氨基酸实体为l-谷氨酰胺。
[0393]
在一些实施例中，nac-氨基酸实体选自由以下组成的组：前驱体、代谢物及衍生物。在某些实施例中，nac-氨基酸实体选自由以下组成的组：nac、丝氨酸、乙酰基丝氨酸、胱硫醚、胱硫醚、高半胱氨酸、甲硫氨酸、谷胱甘肽、d-半胱氨酸及l-半胱氨酸。在一个实施例中，nac实体为nac。在一个实施例中，nac实体为谷胱甘肽。
[0394]
在各种实施例中，组合物进一步包含一或两种额外分支链氨基酸(bcaa)-实体，例如异亮氨酸(i)-氨基酸-实体及缬氨酸(v)-氨基酸-实体中的一种或两种。在一些实施例中，i-氨基酸-实体及v-氨基酸-实体均存在。在某些实施例中，l-实体以与i-氨基酸-实体及v-氨基酸-实体中的一种或两种相比更高对量(按重量计的％)存在(例如l-实体以比i-氨基酸-实体及v-氨基酸-实体中的一种或两种大至少10重量％、至少15重量％、至少20重量％、至少25重量％、至少30重量％、至少35重量％、至少40重量％、至少45重量％或至少50重量％的量存在)。
[0395]
在一些实施例中，i-氨基酸实体选自由以下组成的组：盐、前驱体、代谢物及衍生物。在某些实施例中，i-氨基酸实体选自由以下组成的组：l-异亮氨酸、2-氧代-3-甲基-戊酸、苏氨酸、2-氧代-3-甲基-戊酸、甲基丁酰基-coa、d-异亮氨酸及n-乙酰基-异亮氨酸。在一个实施例中，i-氨基酸实体为l-异亮氨酸。
[0396]
在一些实施例中，v-氨基酸实体选自由以下组成的组：前驱体、代谢物及衍生物。在某些实施例中，v-氨基酸实体选自由以下组成的组：l-缬氨酸、2-氧代-戊酸、异丁酰基-coa、3-hib-coa、3-hib、d-缬氨酸及n-乙酰基-缬氨酸。在一个实施例中，i-氨基酸实体为l-缬氨酸。
[0397]
在一些实施例中，组合物包含l-亮氨酸或亮氨酸代谢物(例如hmb)、l-精氨酸或l-精氨酸代谢物(例如肌酸或鸟氨酸)、l-谷氨酰胺及nac或nac代谢物，例如谷胱甘肽。在一个实施例中，组合物包含l-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac。在一个实施例中，组合物包含hmb、肌酸、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。在一个实施例中，组合物包含hmb、鸟氨酸、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。在一个实施例中，组合物包含hmb、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac。在一个实施例中，组合物包含l-亮氨酸、肌酸、l-谷氨酰胺及nac。在一个实施例中，组合物包含l-亮氨酸、鸟氨酸、l-谷氨酰胺及nac。在一个实施例中，组合物包含l-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[0398]
在一些实施例中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体与nac-氨基酸实体的重量(wt)比率为约0.5至3:0.5至4:1至4:0.1至2.5。在一个实施例中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体与nac-氨基酸实体的重量比率为约1:1.5:2:0.15。
[0399]
在一些实施例中，l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体与nac-氨基酸实体的重量比率为约0.5至2:0.1至1:0.1至1:0.5至3:0.5至4:0.1至0.5。在一个实施例中，l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体与nac-氨基酸实体的重量比率为约1:0.5:0.5:1.5:2:0.15。
[0400]
在各种实施例中，所存在的氨基酸的总重量为约2g至约60g。在某些实施例中，所存在的氨基酸的总重量为约6g、约12g、约18g、约24g或约48g。在一个实施例中，所存在的氨基酸的总重量为约6g。在一个实施例中，所存在的氨基酸的总重量为约12g。在一个实施例中，所存在的氨基酸的总重量为约18g。在一个实施例中，所存在的氨基酸的总重量为约24g。在一个实施例中，所存在的氨基酸的总重量为约48g。
[0401]
在一些实施例中，组合物包含约0.5g至约10g l-氨基酸实体、约0.25g至约5g i-氨基酸实体、约0.25g至约5g v-氨基酸实体、约1g至约20g r-氨基酸实体、约1g至约20g q-氨基酸实体及约0.1g至约5g nac-氨基酸实体。在一个实施例中，组合物包含约1g l-氨基酸实体、约0.5g i-氨基酸实体、约0.5g v-氨基酸实体、约1.5g r-氨基酸实体、约2g q-氨基酸实体及约0.15g nac-氨基酸实体。在一个实施例中，组合物包含约2g l-氨基酸实体、约1g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g q-氨基酸实体及约0.3g nac-氨基酸实体。在一个实施例中，组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约2g v-氨基酸实体、约6g r-氨基酸实体、约8g q-氨基酸实体及约0.6g nac-氨基酸实体。
[0402]
在一些实施例中，氨基酸包含约10wt％至约30wt％亮氨酸、约5wt％至约15wt％异亮氨酸、约5wt％至约15wt％缬氨酸、约15wt％至约40wt％精氨酸、约20wt％至约50wt％谷氨酰胺及约1wt％至约8wt％n-乙酰半胱氨酸。在某些实施例中，氨基酸包含约16wt％至约18wt％亮氨酸、约7wt％至约9wt％异亮氨酸、约7wt％至约9wt％缬氨酸、约28wt％至约32wt％精氨酸、约31wt％至约34wt％谷氨酰胺及约1wt％至约5wt％n-乙酰半胱氨酸。在一个实施例中，氨基酸包含约16.8wt％亮氨酸、约8.4wt％异亮氨酸、约8.4wt％缬氨酸、约30.4wt％精氨酸、约33.6wt％谷氨酰胺及约2.5wt％n-乙酰半胱氨酸。
[0403]
在以上实施例中的任一种中，至少一种氨基酸实体为游离氨基酸，例如一种、两种、三种或更多种(例如全部)氨基酸实体为游离氨基酸。在一些实施例中，l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac-氨基酸实体为游离氨基酸实体。在某一实施例中，l-氨
基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac-氨基酸实体为游离氨基酸。
[0404]
在以上实施例中的任一种中，至少一种氨基酸实体呈盐形式，例如一种、两个、三个或更多个(例如全部)氨基酸实体呈盐形式。在一些实施例中，其中l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac-氨基酸实体呈盐形式。在某些实施例中，l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac-氨基酸实体呈盐形式。
[0405]
在以上实施例中的任一种中，组合物包含2至20种不同氨基酸实体，例如5至15种不同氨基酸实体的组合。
[0406]
在一些实施例中，nac实体比半胱氨酸更稳定。在某些实施例中，nac实体不包含半胱氨酸。
[0407]
在一些实施例中，组合物进一步包含一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个或更多个(例如全部)或更多丝氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、hmb、精氨酸、l-亮氨酸、瓜氨酸、谷氨酰胺、鸟氨酸、l-半胱氨酸、胱氨酸或谷胱甘肽。
[0408]
在一些实施例中，组合物进一步包含丝氨酸。
[0409]
在一些实施例中，组合物进一步包含甘氨酸。
[0410]
在一些实施例中，组合物进一步包含肉碱。
[0411]
在一些实施例中，组合物包括选自亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸中的一个、两个或全部的精氨酸、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸及分支链氨基酸(bcaa)。
[0412]
在一些实施例中，bcaa为亮氨酸。
[0413]
在一些实施例中，bcaa为异亮氨酸。
[0414]
在一些实施例中，bcaa为缬氨酸。
[0415]
在一些实施例中，bcaa为亮氨酸及异亮氨酸。
[0416]
在一些实施例中，bcaa为亮氨酸及缬氨酸。
[0417]
在一些实施例中，bcaa为异亮氨酸及缬氨酸。
[0418]
在一些实施例中，bcaa为亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸。
[0419]
具体而言，组合物可由亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸组成。
[0420]
在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5:2:0.1-0.3的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5:2:0.15的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5:2:0.25的重量比存在。
[0421]
在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸(例如精氨酸hcl)、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5-1.81:2:0.1-0.3的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸(例如精氨酸hcl)、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5-1.81:2:0.15的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸(例如精氨酸hcl)、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5-1.81:2:0.25的重量比存在。
[0422]
在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸(例如精氨酸hcl)、谷
氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.81:2:0.1-0.3的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸(例如精氨酸hcl)、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.81:2:0.15的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸(例如精氨酸hcl)、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.81:2:0.25的重量比存在。
[0423]
在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5:2:0.1至0.3的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5:2:0.25的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5:2:0.15的重量比存在。
[0424]
在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.81:2:0.1至0.3的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.81:2:0.25的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.81:2:0.15的重量比存在。
[0425]
在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.81:2:0.1-0.3的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.81:2:0.15的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.81:2:0.25的重量比存在。
[0426]
在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5:2:0.1至0.3的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以约1:0.5:0.5:1.5:2:0.25的重量比存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸以1:0.5:0.5:1.5:2:0.15的重量比存在。
[0427]
在一些实施例中，氨基酸的总重量(wt)为约2g至约60g。
[0428]
在一些实施例中，所存在的氨基酸的总重量为约5g、约6g、约7g、约11g、约12g、约13g、约14g、约15g、约16g、约17g、约18g、约19g、约20g、约21g、约22g、约23g、约24g、约25g、约26g、约27g、约28g、约29g、约30g、约31g、约32g、约33g、约34g、约35g、约36g、约37g、约38g、约39g、约40g、约41g、约42g、约43g、约44g、约45g、约46g、约47g、约48g、约49g或约50g。
[0429]
在某些实施例中，氨基酸的总重量为约6g。
[0430]
在某些实施例中，氨基酸的总重量为约12g。
[0431]
在某些实施例中，氨基酸的总重量为约18g。
[0432]
在某些实施例中，氨基酸的总重量为约24g。
[0433]
在某些实施例中，氨基酸的总重量为约48g。
[0434]
在一些实施例中，组合物包括约0.5g至约10g亮氨酸、约0.25g至约5g异亮氨酸、约0.25g至约5g缬氨酸、约1g至约20g精氨酸、约1g至约20g谷氨酰胺及约0.1g至约5g n-乙酰半胱氨酸。
[0435]
在一些实施例中，组合物包括至少1g亮氨酸、至少0.5g异亮氨酸、至少0.5g缬氨
酸、至少1.5g精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、至少2g谷氨酰胺及至少0.15g n-乙酰半胱氨酸。
[0436]
在一些实施例中，组合物包括约1g亮氨酸、约0.5g异亮氨酸、约0.5g缬氨酸、约1.5g精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、约2g谷氨酰胺及约0.15g n-乙酰半胱氨酸。
[0437]
在一些实施例中，组合物包括至少2g亮氨酸、至少1g异亮氨酸、至少1g缬氨酸、至少3.0g精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、至少4g谷氨酰胺及至少0.3g n-乙酰半胱氨酸。
[0438]
在一些实施例中，组合物包括约2g亮氨酸、约1g异亮氨酸、约1g缬氨酸、约3.0g精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、约4g谷氨酰胺及约0.3g n-乙酰半胱氨酸。
[0439]
在一些实施例中，组合物包括至少4g亮氨酸、至少2g异亮氨酸、至少2g缬氨酸、至少6.0g或精氨酸(或7.24g精氨酸hcl)、至少8g谷氨酰胺及至少0.6g n-乙酰半胱氨酸。
[0440]
在一些实施例中，组合物包括约4g亮氨酸、约2g异亮氨酸、约2g缬氨酸、约6.0g或精氨酸(或7.24g精氨酸hcl)、约8g谷氨酰胺及约0.6g n-乙酰半胱氨酸。
[0441]
在一些实施例中，组合物包括至少1.0g亮氨酸、至少0.5g异亮氨酸、至少0.5g缬氨酸、至少1.5g精氨酸、至少2.0g谷氨酰胺或至少0.15g n-乙酰半胱氨酸。在一些实施例中，组合物包括约1.0g亮氨酸、约0.5g异亮氨酸、约0.5g缬氨酸、约1.5g精氨酸、约2.0g谷氨酰胺或约0.15g n-乙酰半胱氨酸。
[0442]
在一些实施例中，组合物包括至少1.0g亮氨酸、至少0.5g异亮氨酸、至少0.5g缬氨酸、至少1.5g精氨酸、至少2.0g谷氨酰胺及至少0.25g n-乙酰半胱氨酸。在一些实施例中，组合物包括约1.0g亮氨酸、约0.5g异亮氨酸、约0.5g缬氨酸、约1.5g精氨酸、约2.0g谷氨酰胺及约0.25g n-乙酰半胱氨酸。
[0443]
在一些实施例中，组合物的氨基酸包括约10wt％至约30wt％亮氨酸、约5wt％至约15wt％异亮氨酸、约5wt％至约15wt％缬氨酸、约15wt％至约40wt％精氨酸、约20wt％至约50wt％谷氨酰胺及约1wt％至约8wt％n-乙酰半胱氨酸。
[0444]
在一些实施例中，组合物的氨基酸包括约16wt％至约18wt％亮氨酸、约7wt％至约9wt％异亮氨酸、约7wt％至约9wt％缬氨酸、约28wt％至约32wt％精氨酸、约31wt％至约34wt％谷氨酰胺及约1wt％至约5wt％n-乙酰半胱氨酸。
[0445]
在一些实施例中，组合物的氨基酸包括约16.8wt％亮氨酸、约8.4wt％异亮氨酸、约8.4wt％缬氨酸、约30.4wt％精氨酸、约33.6wt％谷氨酰胺及约2.5wt％n-乙酰半胱氨酸。
[0446]
在一些实施例中，组合物包含选自由以下组成的组的一种或多种赋形剂：柠檬酸、卵磷脂、甜味剂、分散增强剂、调味剂、苦味遮蔽剂及天然或人造染色剂。
[0447]
在一些实施例中，组合物包含柠檬酸。
[0448]
在一些实施例中，组合物呈固体、粉末、溶液或凝胶形式。在某些实施例中，组合物呈粉末形式(例如在封包中)。
[0449]
在一些实施例中，组合物包括一种或多种医药学上可接受的赋形剂，其中氨基酸包含亮氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸。本发明的一方面提供一种包含游离氨基酸及一种或多种医药学上可接受的赋形剂的组合物，其中氨基酸由亮氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸组成。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸及甘氨酸以1:1.5:2:0.15的重量比存在。在一些实施例中，组合物包含至少1.0g亮氨酸、至少1.5g精氨酸、至少2.0g谷氨酰胺或至少0.15g n-乙酰半胱氨酸。在一些实施例中，组合物包含至少1.5g精氨酸及至少2.0g谷氨酰胺。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、精氨
酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸分别以各自相比于总氨基酸重量20.4至22.6％、30.6至33.9％、40.9至45.2％及3.1至3.4％的重量％存在。在一些实施例中，氨基酸亮氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸分别以各自相比于总氨基酸重量21.5％、32.3％、43.0％及3.2％的重量％存在。
[0450]
在一些实施例中，组合物进一步包括法尼酯x受体(fxr)激动剂、硬脂酰基coa去饱和酶抑制剂、ccr2及ccr5趋化激素拮抗剂、pparα及δ激动剂、胱天蛋白酶抑制剂、半乳糖凝集素-3抑制剂、乙酰coa羧化酶抑制剂或回肠钠胆酸共转运体抑制剂。在一些实施例中，组合物进一步包含fxr激动剂。在某些实施例中，fxr激动剂为奥贝胆酸(obeticholic acid)。在一些实施例中，组合物进一步包括以下中的一种或多种：lmb-763、ljn-452、恩利卡生(emricasan)及森尼韦若(cenicriviroc)。
[0451]
示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.5:1.81:2:0.15(表3)。示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.5:1.5:2:0.15(表4)。
[0452]
表3.包括精氨酸hcl的组合物的示例性氨基酸组分.
[0453]
氨基酸重量比率重量％g/封包1号剂量g2号剂量g亮氨酸116.781.00g2g4g异亮氨酸0.58.390.50g1g2g缬氨酸0.58.390.50g1g2g精氨酸hcl1.8130.371.81g3.62g7.24g谷氨酰胺233.562.00g4g8gn-乙酰半胱氨酸0.152.520.15g0.3g0.6g总计氨基酸
ꢀꢀ
5.96g～12g～24g
[0454]
表4.包括精氨酸的组合物的示例性氨基酸组分.
[0455]
氨基酸重量比率重量％g/封包1号剂量g2号剂量g亮氨酸117.701.00g24异亮氨酸0.58.850.50g12缬氨酸0.58.850.50g12精氨酸1.526.551.5g36谷氨酰胺235.42.00g48n-乙酰半胱氨酸0.152.650.15g0.30.6总计氨基酸
ꢀꢀ
5.65g11.3g22.6g
[0456]
示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.5:0.905:2:0.15(表5)。示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.5:0.75:2:0.15(表6)。
[0457]
表5.包括精氨酸hcl的组合物的示例性氨基酸组分.
[0458]
氨基酸重量比率重量％g/封包1号剂量g2号剂量g
亮氨酸119.781.00g2g4g异亮氨酸0.59.890.50g1g2g缬氨酸0.59.890.50g1g2g精氨酸hcl0.90517.900.905g1.81g3.62g谷氨酰胺239.562.00g4g8gn-乙酰半胱氨酸0.152.970.15g0.3g0.6g总计氨基酸
ꢀꢀ
5.06g～10g～20g
[0459]
表6.包括精氨酸的组合物的示例性氨基酸组分.
[0460]
氨基酸重量比率重量％g/封包1号剂量g2号剂量g亮氨酸120.411.00g24异亮氨酸0.510.200.50g12缬氨酸0.510.200.50g12精氨酸0.7515.310.75g1.53谷氨酰胺240.822.00g48n-乙酰半胱氨酸0.153.060.15g0.30.6总计氨基酸
ꢀꢀ
4.9g9.8g19.6g
[0461]
示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.25:0.905:1:0.225(表7)。示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.25:0.75:1:0.225(表8)。
[0462]
表7.包括精氨酸hcl的组合物的示例性氨基酸组分.
[0463][0464][0465]
表8.包括精氨酸的组合物的示例性氨基酸组分.
[0466]
氨基酸重量比率重量％g/封包1号剂量g2号剂量g亮氨酸126.851.00g24异亮氨酸0.513.420.50g12缬氨酸0.256.710.25g0.51精氨酸0.7520.130.75g1.53谷氨酰胺126.851.00g24n-乙酰半胱氨酸0.2256.040.225g0.450.9总计氨基酸
ꢀꢀ
3.725g7.45g14.9g
[0467]
示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸及丝氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.25:0.905:1:0.225:0.667(表9)。示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸及丝氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.25:0.75:1:0.225:1.5(表10)。
[0468]
表9.包括精氨酸hcl的组合物的示例性氨基酸组分.
[0469]
氨基酸重量比率重量％g/封包1号剂量g2号剂量g亮氨酸118.591.00g2g4g异亮氨酸0.59.290.50g1g2g缬氨酸0.254.650.25g0.50g1g精氨酸hcl0.90516.820.905g1.81g3.62g谷氨酰胺118.591.00g2g4gn-乙酰半胱氨酸0.2254.180.225g0.45g0.9g丝氨酸1.527.881.536总计氨基酸
ꢀꢀ
5.38g10.76g21.52g
[0470]
表10.包括精氨酸的组合物的示例性氨基酸组分.
[0471]
氨基酸重量比率重量％g/封包1号剂量g2号剂量g亮氨酸119.141.00g24异亮氨酸0.59.570.50g12缬氨酸0.254.780.25g0.51精氨酸0.7514.350.75g1.53谷氨酰胺119.141.00g24n-乙酰半胱氨酸0.2254.310.225g0.450.9丝氨酸1.528.711.536总计氨基酸
ꢀꢀ
5.22510.4520.9
[0472]
示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸hcl、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸及丝氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.25:0.905:1:0.225:0.667(表11)。示例性氨基酸组合物包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸及丝氨酸作为其氨基酸实体，其重量比率为1:0.5:0.25:0.75:1:0.225:1.667(表12)。
[0473]
表11.包括精氨酸hcl的组合物的示例性氨基酸组分.
[0474]
氨基酸重量比率重量％g/封包1号剂量g2号剂量g亮氨酸118.021.00g2g4g异亮氨酸0.59.010.50g1g2g缬氨酸0.254.500.25g0.50g1g精氨酸hcl0.90516.310.905g1.81g3.62g谷氨酰胺118.021.00g2g4gn-乙酰半胱氨酸0.2254.050.225g0.45g0.9g丝氨酸1.66730.091.67g3.33g6.67g
总计氨基酸
ꢀꢀ
5.55g11.09g22.19g
[0475]
表12.包括精氨酸的组合物的示例性氨基酸组分.
[0476][0477][0478]
本发明也提供一种包括至少四种不同氨基酸实体(例如四种、五种、六种或更多种不同氨基酸实体)的组合物，其中组合物能够实现以下中的一种、两种、三种、四种、五种或全部：
[0479]
a)减少或预防中的一种或两种肝纤维化或肝脏损伤中的一种或两种；
[0480]
b)减少或预防中的一种或两种肝细胞发炎；
[0481]
c)改善，例如提高葡萄糖耐受性；
[0482]
d)减少或预防中的一种或两种脂肪变性；或
[0483]
e)减少或预防中的一种或两种肝细胞气球样膨大，
[0484]
限制条件为至少一种氨基酸实体不为长度超过20个氨基酸残基的肽。
[0485]
在一些实施例中，组合物包括减少或预防肝纤维化或肝脏损伤中的一种或两种的至少四种不同氨基酸实体(例如四种、五种、六种或更多种不同氨基酸实体)。举例而言，减轻和/或抑制肝纤维化和/或肝脏损伤包含可包括减少胶原蛋白中的一种或两种，例如i型及iii型胶原蛋白或α-平滑肌肌动蛋白(αsma)的含量。
[0486]
在一些实施例中，组合物包括减少或预防肝细胞发炎的至少四种不同氨基酸实体(例如四种、五种、六种或更多种不同氨基酸实体)。在一些实施例中，减轻和/或抑制肝纤维化和/或肝脏损伤包括降低基质金属蛋白酶(mmp)(例如mmp-13、mmp-2、mmp-9、mt1-mmp、mmp-3或mmp-10)、金属蛋白酶的组织抑制剂(timp)(例如timp1)、天冬氨酸转氨酶(ast)、丙氨酸转氨酶(alt)或iii型胶原蛋白的n端片段(proc3)中的一种、两种、三种、四种或更多种(例如全部)的含量或活性。
[0487]
在一些实施例中，减少或预防肝细胞发炎包含降低nf-kb、干扰素、il-1b、il-2、mcp-1、mip-1、胱天蛋白酶裂解角蛋白18片段(例如m30或m65中的一种或两种)或c反应蛋白中的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种或更多种(例如全部)的含量或活性。在一个实施例中，减少或预防肝细胞发炎包含提高il-10的含量或活性。
[0488]
在一个实施例中，改善，例如提高葡萄糖耐受性包含提高脂联素的含量或活性。在一个实施例中，改善，例如提高葡萄糖耐受性包含降低fgf-21的含量或活性。
[0489]
在某些实施例中，肝细胞发炎包含lps诱导的肝细胞发炎。
[0490]
在一些实施例中，组合物能够增强脂肪酸氧化，例如降低不饱和脂肪酸的含量或
提高酰基肉碱的含量中的一种或两种(例如在stam小鼠模型或fatzo小鼠模型中)。在某些实施例中，不饱和脂肪酸含量降低为表53中所示的改变含量的至少25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％，例如，如实例9中所描述量测。在某些实施例中，酰基肉碱含量提高为表53中所示的改变含量的至少25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％，例如，如实例9中所描述量测。
[0491]
在某些实施例中，组合物能够使肝纤维化或肝脏损伤减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用丙氨酸转氨酶(alt)测定所检测，例如基于抗体的检测测定，例如elisa，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[0492]
在某些实施例中，组合物能够使肝纤维化或肝脏损伤减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用天冬氨酸转氨酶(ast)测定所检测，例如基于抗体的检测测定，例如elisa，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[0493]
在某些实施例中，组合物能够使丙氨酸转氨酶(alt)减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用alt测定所检测，例如基于抗体的检测测定，例如elisa，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[0494]
在某些实施例中，组合物能够使天冬氨酸转氨酶(ast)减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用ast测定所检测，例如基于抗体的检测测定，例如elisa，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[0495]
在某些实施例中，组合物能够使肝纤维化或肝脏损伤减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用羟脯氨酸测定所检测，例如基于抗体的检测测定，例如elisa，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[0496]
在某些实施例中，组合物能够使羟脯氨酸含量减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用羟脯氨酸测定所检测，例如基于抗体的检测测定，例如elisa，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[0497]
在某些实施例中，组合物能够使肝纤维化或肝脏损伤减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用lx-2细胞，例如lx-2细胞中的col1a1、acta2和/或timp2的含量所检测，例如，如使用核酸扩增方法，例如pcr或qrt-pcr所评估，例如，如实例7中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；nac；或包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物)。
[0498]
在某些实施例中，组合物能够使一种或多种胶原蛋白生物标记物(例如col1a1、acta2和/或timp2)的表达减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用lx-2细胞，
例如lx-2细胞中的col1a1、acta2和/或timp2的含量所检测，例如，如使用核酸扩增方法，例如pcr或qrt-pcr所评估，例如，如实例7中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；或nac)。
[0499]
在某些实施例中，组合物能够使一种或多种胶原蛋白生物标记物(例如col1a1)的表达减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用初级肝脏星状细胞，例如初级肝脏星状细胞中的col1a1的含量所检测，例如，如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所评估，例如，如实例12中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[0500]
在某些实施例中，组合物能够使一种或多种胶原蛋白生物标记物(例如原胶原1α1)的表达提高(increasing或increases)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用初级肝脏星状细胞，例如初级肝脏星状细胞中的原胶原1α1的含量所检测，例如，如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所评估，例如，如实例12中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[0501]
在某些实施例中，组合物能够使肝细胞发炎减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用hepg2细胞，例如降低的活性，例如hepg2细胞中的报导子测定中的nf-kb的降低的tnfα诱导的活性所检测，如实例8中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；或nac)。
[0502]
在某些实施例中，组合物能够使hepg2细胞中的nf-kb的tnfα诱导的活性降低(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用hepg2细胞，例如降低的活性，例如hepg2细胞中的报导子测定中的nf-kb的降低的tnfα诱导的活性所检测，如实例8中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；或nac)。
[0503]
在某些实施例中，组合物能够使例如stam小鼠模型或fatzo小鼠模型中的葡萄糖耐受性提高(increasing或increases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用葡萄糖含量的测定，例如使用葡萄糖氧化酶，例如使用血糖仪所检测，例如，如实例5中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照或阳性对照，例如二甲双胍)。
[0504]
在某些实施例中，组合物能够使例如stam小鼠模型或fatzo小鼠模型中的血糖代
谢提高(increasing或increases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用葡萄糖含量的测定，例如使用葡萄糖氧化酶，例如使用血糖仪所检测，例如，如实例5中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照或阳性对照，例如二甲双胍)。
[0505]
在某些实施例中，组合物能够使脂肪变性和/或发炎减少(decreasing或decreases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用mcp1/ccl2测定，例如在初级肝细胞中，例如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例10中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[0506]
在某些实施例中，组合物能够使mcp1/ccl2含量降低(decreasing或decreases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用mcp1/ccl2测定，例如在初级肝细胞中，例如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例10中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。在某些实施例中，组合物能够使tnfα发炎反应减少(decreasing或decreases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用mcp1/ccl2测定或il-6测定，例如在初级肝脏星状细胞中，例如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例11中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[0507]
在某些实施例中，组合物能够使mcp1/ccl2含量和/或il-6含量降低(decreasing或decreases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用mcp1/ccl2测定或il-6测定，例如在初级肝脏星状细胞中，例如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例11中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[0508]
在以上实施例中的任一种中，参考组合物包含单个氨基酸实体，例如l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体或nac-氨基酸实体(各自作为游离氨基酸单独测定)或氨基酸实体(例如l-氨基酸实体、i-氨基酸实体及v-氨基酸实体；r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac-氨基酸实体；l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体及q-氨基酸实体)的组合。在某些实施例中，参考组合物包含载体(例如pbs或生理盐水)。
[0509]
在一些实施例中，减少和/或预防肝纤维化和/或肝脏损伤的组合物包含一种或多种分支链氨基酸(bcaa)、一种或多种条件必需氨基酸(ceaa)及抗氧化剂或活性氧(ros)清除剂。
[0510]
在一些实施例中，减少和/或预防肝细胞发炎的组合物包含一种或多种bcaa、一种或多种ceaa及抗氧化剂或ros清除剂。
[0511]
在一些实施例中，提高葡萄糖耐受性的组合物包含一种或多种bcaa、一种或多种ceaa及抗氧化剂或ros清除剂。
[0512]
在一些实施例中，减少和/或预防脂肪变性的组合物包含一种或多种bcaa、一种或多种ceaa及抗氧化剂或ros清除剂。
[0513]
在一些实施例中，减少和/或预防肝细胞气球样膨大的组合物包含一种或多种bcaa、一种或多种ceaa及抗氧化剂或ros清除剂。
[0514]
在一个实施例中，bcaa包含l-氨基酸实体。在一个实施例中，bcaa包含l-氨基酸实体及i-氨基酸实体。在一个实施例中，bcaa包含l-氨基酸实体及v-氨基酸实体。在一个实施例中，bcaa包含l-氨基酸实体、v-氨基酸实体及i-氨基酸实体。在一个实施例中，ceaa包含r-氨基酸实体。在一个实施例中，ceaa包含q-氨基酸实体。在一个实施例中，ceaa包含r-氨基酸实体及q-氨基酸实体。在一个实施例中，抗氧化剂或ros清除剂包含nac实体，例如nac。
[0515]
在一些实施例中，组合物包含a)l-氨基酸实体、r-氨基酸实体及q-氨基酸实体；及b)抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体，例如nac。
[0516]
在一些实施例中，组合物进一步包含i-氨基酸-实体或v-氨基酸-实体。在其他实施例中，组合物进一步包含i-氨基酸-实体及v-氨基酸-实体。
[0517]
产生氨基酸组合物
[0518]
用于制得组合物的氨基酸可聚结和/或速溶化以帮助分散和/或溶解。
[0519]
本发明的氨基酸组合物可使用来自以下来源的氨基酸及氨基酸衍生物制得，或可使用其他来源：fusi-bcaa
tm
速溶化掺合物(重量比为2:1:1的l-亮氨酸、l-异亮氨酸及l-缬氨酸)，fusil
tm
速溶化l-亮氨酸、l-精氨酸hcl及l-谷氨酰胺可获自ajinomoto co.,inc；n-乙酰基-半胱氨酸可获自spectrum chemical。
[0520]
为了产生本发明的氨基酸组合物，可使用以下一般步骤：起始材料(个别氨基酸及赋形剂)可在掺合单元中掺合，继而验证掺合物均一性及氨基酸含量，且将掺合粉末填充至条状包装或其他单位剂型中。条状包装或其他单位剂型的内容物可在用于经口施用时分散于水中。
[0521]
调配物
[0522]
本发明的医药组合物可呈适用于经口使用(例如以锭剂、锭剂、硬性或软性胶囊、水性或油性悬浮液、乳液、可分散粉末或颗粒、糖浆或酏剂、医疗食品产品、类药剂营养品形式)、体表使用(例如以乳霜、软膏、凝胶或水性或油性溶液或悬浮液形式)、吸入施用(例如以细粉状粉末形式)或胃肠外施用(例如以用于静脉内、皮下、肌肉内投药的无菌水性或油性溶液或用于直肠投药的栓剂形式)的形式。
[0523]
赋形剂
[0524]
本发明的氨基酸组合物可用一种或多种赋形剂混配或调配。适合的赋形剂的非限制性实例包括促味剂、调味剂、缓冲剂、防腐剂、稳定剂、黏合剂、致密剂(compaction agent)、润滑剂、分散增强剂(dispersion enhancer)、崩解剂、调味剂、甜味剂及着色剂。
[0525]
在一些实施例中，赋形剂包含缓冲剂。适合的缓冲剂的非限制性实例包括柠檬酸、柠檬酸钠、碳酸镁、碳酸氢镁、碳酸钙及碳酸氢钙。
[0526]
在一些实施例中，赋形剂包含防腐剂。适合的防腐剂的非限制性实例包括抗氧化剂，诸如α-生育酚及抗坏血酸(ascorbate)；及抗菌剂，诸如对羟苯甲酸酯(paraben)、氯丁醇(chlorobutanol)及苯酚。
[0527]
在一些实施例中，组合物包含黏合剂作为赋形剂。适合的黏合剂的非限制性实例包括淀粉、预胶凝淀粉、明胶、聚乙烯吡咯啶酮、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、聚丙烯酰胺、聚乙烯唑烷酮、聚乙烯醇、c12-c18脂肪酸乙醇、聚乙二醇、多元醇、醣(saccharide)、寡醣及其组合。
[0528]
在一些实施例中，组合物包含润滑剂作为赋形剂。适合的润滑剂的非限制性实例包括硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、氢化植物油、碱性硬脂酸盐(sterotex)、聚氧化乙烯单硬脂酸盐、滑石、聚乙二醇、苯甲酸钠、月桂基硫酸钠、月桂基硫酸镁及轻质矿物油。
[0529]
在一些实施例中，组合物包含分散增强剂作为赋形剂。适合的分散剂的非限制性实例包括淀粉、褐藻酸、聚乙烯吡咯啶酮、瓜尔豆胶、高岭土、黄原胶、膨润土、纯化木材纤维素、羟基乙酸淀粉钠、异非晶形硅酸盐及微晶纤维素作为高hlb乳化剂界面活性剂。
[0530]
在一些实施例中，组合物包含崩解剂作为赋形剂。在一些实施例中，崩解剂为非发泡崩解剂。适合的非发泡崩解剂的非限制性实例包括淀粉，诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉、预胶凝及其经改质淀粉；甜味剂；黏土，诸如膨润土；微晶纤维素；海藻酸盐；羟基乙酸淀粉钠；树胶，诸如琼脂、瓜尔豆、刺槐豆、加拉亚胶、果胶及黄芪胶。在一些实施例中，崩解剂为发泡崩解剂。适合的发泡崩解剂的非限制性实例包括碳酸氢钠与柠檬酸及碳酸氢钠与酒石酸。
[0531]
在一些实施例中，赋形剂包含调味剂。调味剂可选自合成调味油及调味芳族物；天然油；植物、叶子、花及果实的提取物；及其组合。在一些实施例中，调味剂选自肉桂油；冬青油；胡椒薄荷油；三叶草油；干草油；大茴香油；桉树；香草；橘皮油，诸如柠檬油、橙油、葡萄及葡萄柚油；及水果香精，包括苹果、桃子、梨、草莓、覆盆子、樱桃、李子、菠萝及杏子。
[0532]
在一些实施例中，赋形剂包含甜味剂。适合的甜味剂的非限制性实例包括葡萄糖(玉米糖浆)、右旋糖、转化糖、果糖及其混合物(当不用作载剂时)；糖精及其各种盐，诸如钠盐；二肽甜味剂，诸如阿斯巴甜糖；二氢查尔酮化合物、甘草素；甜菊(甜菊苷)；蔗糖的氯衍生物，诸如蔗糖素；及糖醇，诸如山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇(sylitol)及其类似物。亦设想氢化淀粉水解产物及合成甜味剂3,6-二氢-6-甲基-1,2,3-噻嗪-4-酮-2,2-二氧化物，尤其钾盐(乙酰磺胺酸-k)及其钠及钙盐。
[0533]
在一些实施例中，组合物包含着色剂。适合的着色剂的非限制性实例包括食品、药物及化妆品色素(fd&c)、药物及化妆品色素(d&c)及外部药物及化妆品色素(ext.d&c)。着色剂可用作染料或其对应的色淀。
[0534]
特定赋形剂可包括以下中的一种或多种：柠檬酸、卵磷脂(例如alcolec f100)、甜味剂(例如蔗糖素、蔗糖素微粉化nf、乙酰磺胺酸钾(例如ace-k))、分散增强剂(例如黄原胶(例如ticaxan rapid-3))、调味剂(例如香草蛋奶冻#4306、nat orange wonf#1326、酸橙865.0032u及柠檬862.2169u)、苦味遮蔽剂(例如936.2160u)及天然或人造着色剂(例如fd&c yellow 6)。
[0535]
治疗方法
[0536]
可施用如本文所描述的组合物以改善例如具有肝病的患者的肝功能。也可施用如本文所描述的组合物以治疗(例如恢复、减轻、改善或预防)个体的病症，例如肝病。本发明
提供治疗选自脂肪肝病(脂肪变性肝炎)、酒精性脂肪变性肝炎(ash)、非酒精性脂肪肝病(nafld)、非酒精性脂肪肝(nafl)、非酒精性脂肪变性肝炎(nash)、肝纤维化及肝硬化的肝病的方法。具体而言，可施用(例如根据本文所描述的给药方案)有效量的组合物以治疗具有非酒精性脂肪肝病(nafld)、非酒精性脂肪肝(nafl)、非酒精性脂肪变性肝炎(nash)或肝硬化的个体。
[0537]
具有肝病的患者
[0538]
在一些实施例中，个体具有选自nafld及afld的脂肪肝病。在一些实施例中，个体具有小儿nafld。在一些实施例中，具有nafld的个体具有nash或nafl。在一些实施例中，具有afld的个体具有ash。
[0539]
在某些实施例中，个体展现肠道渗漏症状。在某些实施例中，个体具有肠道菌群失调。在某些实施例中，个体具有肠道微生物群落紊乱。个体可具有相对于不患脂肪肝病的正常个体提高含量的发炎性细胞介素，例如提高的tnfα。
[0540]
在某些实施例中，例如相对于不患脂肪肝病的正常个体，个体展现肌肉萎缩，例如肌肉组织与脂肪组织的比率降低。举例而言，个体展现肌肉萎缩，而无纤维化和/或肝硬化。
[0541]
在某些实施例中，个体展现自脂肪组织至肝脏组织的反向脂质传送。
[0542]
在一些实施例中，个体具有纤维化。个体可能具有肝硬化。个体也可具有代谢综合征。
[0543]
在某些实施例中，个体具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险或提高的死亡风险中的一种、两种或更多种(例如全部)。
[0544]
在一些实施例中，个体具有2型糖尿病。
[0545]
在一些实施例中，具有肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的个体为哺乳动物(例如人类)。在一些实施例中，个体已诊断出具有nafld、nash或肝硬化。在一些实施例中，个体尚未接受如本文所描述的组合物的先前治疗(例如个体为未经治疗的个体)。在一些实施例中，具有nafld、nash或肝硬化的个体具有糖尿病(例如2型糖尿病)。
[0546]
在一些实施例中，个体具有nafld。在一些实施例中，个体具有nafl。在某些实施例中，个体(例如儿童或青年)具有小儿nafld。在一些实施例中，个体具有肝脏脂肪变性。在一些实施例中，具有小儿nafld的个体具有脂肪变性。
[0547]
在一些实施例中，个体具有非酒精性脂肪变性肝炎(nash)。在一些实施例中，具有nash的个体具有纤维化。
[0548]
在一些实施例中，个体具有肝硬化。在一些实施例中，具有肝硬化的个体具有纤维化。在一些实施例中，具有肝硬化的个体具有肝癌。在一些实施例中，具有肝硬化的个体的肝脏衰竭风险提高。在一些实施例中，具有肝硬化的个体具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险。
[0549]
在一些实施例中，在施用组合物之前，个体展现肝病(例如nafld、nash或肝硬化)症状，例如代谢症状。在一些实施例中，个体展现肝病(例如nafld、nash或肝硬化)的代谢症状，其选自以下中的一种、两种、三种、四种、五种、六种或更多种(例如全部)：脂肪代谢降低、肝细胞凋亡、肝细胞气球样膨大、脂肪组织发炎、肝脏组织发炎、肝细胞气球样膨大、氧化压力(例如活性氧(ros)、肠道屏障功能下降、胰岛素分泌减少或葡萄糖耐受性降低(例如相对于不患肝病的健康个体)。
[0550]
在一些实施例中，在施用组合物之前，个体展现生物标记物的调节(例如提高)含量。在一些实施例中，个体展现选自以下中的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或更多种(例如全部)的生物标记物的经调节含量：acox1；il-10；nf-kb、干扰素、il-2；谷胱甘肽(gsh)；丙氨酸转氨酶(alt)；天冬氨酸转氨酶(ast)；脂联素；iii型胶原蛋白的n端片段(proc3)；胱天蛋白酶裂解的角蛋白18片段(m30及m65)；il-1β；c反应蛋白；piiinp；timp1；mcp-1；或fgf-21(例如相对于不患肝病的健康个体)。
[0551]
在一些实施例中，个体展现例如相对于不患肝病的健康个体提高含量的alt。
[0552]
在一些实施例中，个体展现例如相对于不患肝病的健康个体提高含量的ast。
[0553]
肝病症状改善
[0554]
可施用如本文所描述的组合物以治疗(例如恢复、减轻、改善或预防)具有肝病的个体(例如人类)，由此改善患者的肝病症状。在一些实施例中，向具有nafld的个体施用组合物。在一些实施例中，向具有nafl的个体施用组合物。在一些实施例中，向具有nash的个体施用组合物。在一些实施例中，向具有肝脏肝硬化的个体施用组合物。
[0555]
在一些实施例中，施用组合物(例如以本文所描述的给药方案)使得个体的nafld的一种或多种症状，例如nafld的代谢症状得到改善。
[0556]
在一些实施例中，组合物施用提高具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的游离脂肪酸及脂质代谢。在一些实施例中，施用组合物使得具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的粒线体功能得到改善。在一些实施例中，施用组合物使得具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的白色脂肪组织(wat)褐变。
[0557]
在一些实施例中，施用组合物减少具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)体内的活性氧(ros)。在一些实施例中，施用组合物提高具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)体内的谷胱甘肽(gsh)含量。
[0558]
在一些实施例中，施用组合物使得具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的肝脏发炎减少。在一些实施例中，施用组合物使得具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的肝细胞气球样膨大减少。
[0559]
在一些实施例中，施用组合物使得具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的肠道屏障功能得到改善。
[0560]
在一些实施例中，施用组合物提高具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的胰岛素分泌。在一些实施例中，施用组合物使得具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的葡萄糖耐受性得到改善。
[0561]
在一些实施例中，组合物减少或抑制具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的肝纤维化。在一些实施例中，组合物减少或抑制具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的肝纤维化。
[0562]
在一些实施例中，组合物减少具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的肝脏脂肪。在一些实施例中，组合物降低具有nafld的个体(例如具有小儿nafld的个体)的血液或血浆中的肝脏酶含量(例如alt或ast)。
[0563]
在一些实施例中，施用包括氨基酸实体的组合物(例如以本文所描述的给药方案)使得个体的nash的一种或多种症状，例如nash的代谢症状得到改善。
[0564]
在一些实施例中，施用组合物提高具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型
糖尿病的个体)的游离脂肪酸及脂质代谢。在一些实施例中，施用组合物使得具有nash的个体的粒线体功能得到改善。在一些实施例中，施用组合物使得具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的白色脂肪组织(wat)褐变。
[0565]
在一些实施例中，施用组合物减少具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)体内的活性氧(ros)。在一些实施例中，施用组合物提高具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)体内的谷胱甘肽(gsh)含量。
[0566]
在一些实施例中，施用组合物使得具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的肝脏发炎减少。在一些实施例中，施用组合物使得具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的肝细胞气球样膨大减少。
[0567]
在一些实施例中，施用组合物使得具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的肠道屏障功能得到改善。
[0568]
在一些实施例中，施用组合物提高具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的胰岛素分泌。在一些实施例中，施用组合物使得具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的葡萄糖耐受性得到改善。
[0569]
在一些实施例中，组合物减少或抑制具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的肝纤维化。在一些实施例中，组合物减少或抑制具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的肝纤维化。
[0570]
在一些实施例中，组合物减少具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的肝脏脂肪。在一些实施例中，组合物减少具有nash的个体(例如具有nafld、纤维化及2型糖尿病的个体)的血液或血浆中的肝脏酶含量(例如alt或ast)。
[0571]
在一些实施例中，施用包括氨基酸实体的组合物(例如以本文所描述的给药方案)使得个体的肝硬化的一种或多种症状，例如肝硬化的代谢症状得到改善。
[0572]
在一些实施例中，施用组合物减少具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)体内的活性氧(ros)。在一些实施例中，施用组合物提高具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)体内的谷胱甘肽(gsh)含量。
[0573]
在一些实施例中，施用组合物减少具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)的肝脏发炎。在一些实施例中，施用组合物减少具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)的肝细胞气球样膨大。
[0574]
在一些实施例中，施用组合物使得具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)的肠道屏障功能得到改善。
[0575]
在一些实施例中，施用组合物提高具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)的胰岛素分泌。在一些实施例中，施用组合物使得具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)的葡萄糖耐受性得到改善。
[0576]
在一些实施例中，组合物减少或抑制具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)的肝纤维化。在一些实施例中，组合物减少或抑制具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)的肝纤维
化。
[0577]
在一些实施例中，组合物减少具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)的肝脏脂肪。在一些实施例中，组合物降低具有肝硬化的个体(例如具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险及提高的死亡风险的个体)的血液或血浆中的肝脏酶含量(例如alt或ast)。
[0578]
给药方案
[0579]
可根据本文所描述的给药方案施用组合物以治疗(例如抑制、减少改善或预防)个体(例如人类)的病症，例如肝病。在一些实施例中，个体具有nafld。在一些实施例中，个体具有nafl。在一些实施例中，个体具有nash。在一些实施例中，个体具有肝硬化。
[0580]
组合物可在单个或多个给药方案中提供给具有肝病(例如nafl、nash或肝硬化)的患者。在一些实施例中，例如每天两次、每天三次、每天四次、每天五次、每天六次、每天七次或更多次施用剂量。在一些实施例中，组合物施用至少2天、3天、4天、5天、6天、7天或2周。在一些实施例中，组合物施用至少10周、11周、12周、13周、14周、15周、16周、17周、18周、19周、20周或更长时间。在一些实施例中，组合物长期施用，例如超过30天，例如31天、40天、50天、60天、3个月、6个月、9个月、一年、两年或三年)。
[0581]
在一些实施例中，组合物以约2g至约60g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一些实施例中，组合物以约5g至约15g，约10g至约20g，约20g至约40g，或约30g至约50g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。
[0582]
在一些实施例中，组合物以约5g至约10g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一些实施例中，组合物以约6g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一个实施例中，组合物以约6g总氨基酸的剂量施用，每天三次。
[0583]
在一些实施例中，组合物以约10g至约20g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一些实施例中，组合物以约12g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一个实施例中，组合物以约12g总氨基酸的剂量施用，每天三次。
[0584]
在一些实施例中，组合物以约20g至约40g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一些实施例中，组合物以约18g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一个实施例中，组合物以约18g总氨基酸的剂量施用，每天三次。
[0585]
在一些实施例中，组合物以约20g至约40g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一些实施例中，组合物以约24g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一个实施例中，组合物以约24g总氨基酸的剂量施用，每天三次。
[0586]
在一些实施例中，组合物以约30g至约50g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一些实施例中，组合物以约48g总氨基酸的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。在一个实施例中，组合物以约48g总氨基酸的剂量施用，每天三次。
[0587]
在一些实施例中，组合物以约5克、约8克、约9克、约10克、约11克、约12克、约13克、约14克、约15克、约16克、约17克、约18克、约19克、约20克、约21克、约22克、约24克、约25克、约26克、约27克、约28克、约29克或约30克总氨基酸(例如约12g或约24g)的剂量施用，例如每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次或每天六次(例如每天三次)。
[0588]
在一些实施例中，向具有肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的个体每隔2小时、每隔3小时、每隔4小时、每隔5小时、每隔6小时、每隔7小时、每隔8小时、每隔9小时或每隔10小时施用组合物。
[0589]
在一个实施例中，在用餐之前向具有nafld的个体施用组合物。在一个实施例中，在用餐时向具有nafld的个体施用组合物。在一个实施例中，在用餐之后向具有nafld的个体施用组合物。
[0590]
在一个实施例中，在用餐之前向具有nafl的个体施用组合物。在一个实施例中，在用餐时向具有nafl的个体施用组合物。在一个实施例中，在用餐之后向具有nafl的个体施用组合物。
[0591]
在一个实施例中，在用餐之前向具有nash的个体施用组合物。在一个实施例中，在用餐时向具有nash的个体施用组合物。在一个实施例中，在用餐之后向具有nash的个体施用组合物。
[0592]
在一个实施例中，在用餐之前向具有肝硬化的个体施用组合物。在一个实施例中，在用餐时向具有肝硬化的个体施用组合物。在一个实施例中，在用餐之后向具有肝硬化的个体施用组合物。
[0593]
在一个实施例中，组合物包括至少1g亮氨酸、至少0.5g异亮氨酸、至少0.5g缬氨酸、至少1.5g精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、至少2g谷氨酰胺及至少0.15g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少18g)。
[0594]
在一个实施例中，组合物包括约1g亮氨酸、约0.5g异亮氨酸、约0.5g缬氨酸、约1.5g精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、约2g谷氨酰胺及约0.15g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约18g)。
[0595]
在一个实施例中，组合物包括至少2g亮氨酸、至少1g异亮氨酸、至少1g缬氨酸、至少3.0g精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、至少4g谷氨酰胺及至少0.3g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少36g)。
[0596]
在一个实施例中，组合物包括约2g亮氨酸、约1g异亮氨酸、约1g缬氨酸、约3.0g或精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、约4g谷氨酰胺及约0.3g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约36g)。
[0597]
在一个实施例中，组合物包括至少4g亮氨酸、至少2g异亮氨酸、至少2g缬氨酸、至少6.0g精氨酸(或7.24g精氨酸hcl)、至少8g谷氨酰胺及至少0.6g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少72g)。
[0598]
在一个实施例中，组合物包括约4g亮氨酸、约2g异亮氨酸、约2g缬氨酸、约6.0g精氨酸(或7.24g精氨酸hcl)、约8g谷氨酰胺及约0.6g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约72g)。
[0599]
在一个实施例中，组合物包括至少1g亮氨酸、至少0.5g异亮氨酸、至少0.5g缬氨酸、至少0.75g精氨酸(或0.905g精氨酸hcl)、至少2g谷氨酰胺及至少0.15g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少18g)。
[0600]
在一个实施例中，组合物包括约1g亮氨酸、约0.5g异亮氨酸、约0.5g缬氨酸、约0.75g精氨酸(或0.905g精氨酸hcl)、约2g谷氨酰胺及约0.15g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约18g)。
[0601]
在一个实施例中，组合物包括至少2g亮氨酸、至少1g异亮氨酸、至少1g缬氨酸、至少1.5g精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、至少4g谷氨酰胺及至少0.3g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少36g)。
[0602]
在一个实施例中，组合物包括约2g亮氨酸、约1g异亮氨酸、约1g缬氨酸、约1.5g或精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、约4g谷氨酰胺及约0.3g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约36g)。
[0603]
在一个实施例中，组合物包括至少4g亮氨酸、至少2g异亮氨酸、至少2g缬氨酸、至少3.0g精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、至少8g谷氨酰胺及至少0.6g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少72g)。
[0604]
在一个实施例中，组合物包括约4g亮氨酸、约2g异亮氨酸、约2g缬氨酸、约3.0g精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、约8g谷氨酰胺及约0.6g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约72g)。
[0605]
在一个实施例中，组合物包括至少1g亮氨酸、至少0.5g异亮氨酸、至少0.25g缬氨酸、至少0.75g精氨酸(或0.905g精氨酸hcl)、至少1g谷氨酰胺及至少0.225g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少18g)。
[0606]
在一个实施例中，组合物包括约1g亮氨酸、约0.5g异亮氨酸、约0.25g缬氨酸、约0.75g精氨酸(或0.905g精氨酸hcl)、约1g谷氨酰胺及约0.225g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约18g)。
[0607]
在一个实施例中，组合物包括至少2g亮氨酸、至少1g异亮氨酸、至少0.5g缬氨酸、至少1.5g精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、至少2g谷氨酰胺及至少0.45g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少36g)。
[0608]
在一个实施例中，组合物包括约2g亮氨酸、约1g异亮氨酸、约0.5g缬氨酸、约1.5g或精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、约2g谷氨酰胺及约0.45g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约36g)。
[0609]
在一个实施例中，组合物包括至少4g亮氨酸、至少2g异亮氨酸、至少1g缬氨酸、至少3g精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、至少4g谷氨酰胺及至少0.9g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少72g)。
[0610]
在一个实施例中，组合物包括约4g亮氨酸、约2g异亮氨酸、约1g缬氨酸、约3g精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、约4g谷氨酰胺及约0.9g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约72g)。
[0611]
在一个实施例中，组合物包括至少1g亮氨酸、至少0.5g异亮氨酸、至少0.25g缬氨酸、至少0.75g精氨酸(或0.905g精氨酸hcl)、至少1g谷氨酰胺、至少0.225g n-乙酰半胱氨酸及至少1.5g或约1.67g丝氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少18g或每天总共至少20g)。
[0612]
在一个实施例中，组合物包括约1g亮氨酸、约0.5g异亮氨酸、约0.25g缬氨酸、约0.75g精氨酸(或0.905g精氨酸hcl)、约1g谷氨酰胺、约0.225g n-乙酰半胱氨酸及约1.5g或约1.67g丝氨酸，每天施用三次(例如每天总共约18g或每天总共至少20g)。
[0613]
在一个实施例中，组合物包括至少2g亮氨酸、至少1g异亮氨酸、至少0.5g缬氨酸、至少1.5g精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、至少2g谷氨酰胺、至少0.45g n-乙酰半胱氨酸及至少3g或约3.33g丝氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少36g或每天总共至少40g)。
[0614]
在一个实施例中，组合物包括约2g亮氨酸、约1g异亮氨酸、约0.5g缬氨酸、约1.5g或精氨酸(或1.81g精氨酸hcl)、约2g谷氨酰胺、约0.45g n-乙酰半胱氨酸及约3g或约3.33g丝氨酸，每天施用三次(例如每天总共约36g或每天总共至少40g)。
[0615]
在一个实施例中，组合物包括至少4g亮氨酸、至少2g异亮氨酸、至少1g缬氨酸、至少3g精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、至少4g谷氨酰胺、至少0.9g n-乙酰半胱氨酸及至少6g或约6.67g丝氨酸，每天施用三次(例如每天总共至少90g)。
[0616]
在一个实施例中，组合物包括约4g亮氨酸、约2g异亮氨酸、约1g缬氨酸、约3g精氨酸(或3.62g精氨酸hcl)、约4g谷氨酰胺、约0.9g n-乙酰半胱氨酸及约6g或约6.67g丝氨酸，每天施用三次(例如每天总共约90g)。在一些实施例中，组合物包含四个条状包装，各条状包装包含组合物(例如，如本文所描述)所包括各氨基酸数量的25％。
[0617]
第二药剂
[0618]
在一些实施例中，所述方法进一步包含在施用氨基酸组合物之前、的时或之后施用法尼酯x受体(fxr)激动剂、硬脂酰基coa去饱和酶抑制剂、ccr2及ccr5趋化激素拮抗剂、pparα及δ激动剂、胱天蛋白酶抑制剂、半乳糖凝集素-3抑制剂、乙酰coa羧化酶抑制剂或回肠钠胆酸共转运体抑制剂。
[0619]
在一些实施例中，所述方法进一步包括施用fxr激动剂。在一些实施例中，fxr激动剂为奥贝胆酸(obeticholic acid)。在一些实施例中，所述方法进一步包括施用以下中的一种或多种：lmb-763、ljn-452、恩利卡生及森尼韦若。
[0620]
膳食组合物
[0621]
包括氨基酸实体的组合物可为膳食组合物，例如选自医疗食品、功能食品或补充剂。
[0622]
包括氨基酸实体的组合物可适用作膳食组合物，例如选自医疗食品、功能食品或补充剂。在一些实施例中，膳食组合物用于包括向个体施用组合物的方法。
[0623]
在一些实施例中，个体具有2型糖尿病或相对较高bmi中的一种或两种。
[0624]
在一些实施例中，个体具有脂肪肝病。
[0625]
在一些实施例中，个体具有nafld(例如小儿nafld)。在一个实施例中，个体具有nash。在一个实施例中，个体具有nafl。
[0626]
在一些实施例中，个体具有afld。在一个实施例中，个体具有ash。
[0627]
在一些实施例中，个体具有纤维化、肝硬化、肝癌、提高的肝脏衰竭风险或提高的
死亡风险中的一种、两种、三种、四种或更多种(例如全部)。
[0628]
在一些实施例中，组合物促进个体减轻体重。
[0629]
在一些实施例中，施用膳食组合物使得个体的一种或多种代谢症状得到改善，例如一种或多种代谢症状选自以下：游离脂肪酸及脂质代谢提高(例如在肝脏中)、粒线体功能改善、白色脂肪组织(wat)褐变、活性氧(ros)减少、谷胱甘肽(gsh)含量提高、肝脏发炎减少、肝细胞气球样膨大减少、肠道屏障功能改善、胰岛素分泌提高或葡萄糖耐受性改善。在某些实施例中，施用组合物使得在24小时的治疗期之后一种或多种代谢症状得到改善。
[0630]
所述方法可进一步包括确定以下中的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种、十一种、十二种、十三种、十四种或更多种(例如全部)的含量：
[0631]
a)丙氨酸转氨酶(alt)；
[0632]
b)天冬氨酸转氨酶(ast)；
[0633]
c)脂联素；
[0634]
d)iii型胶原蛋白的n端片段(proc3)；
[0635]
e)胱天蛋白酶裂解的角蛋白18片段(m30及m65)；
[0636]
f)il-1β；
[0637]
g)c反应蛋白；
[0638]
h)piiinp；
[0639]
i)金属蛋白酶的组织抑制剂(timp)；例如timp1或timp2；
[0640]
j)mcp-1；
[0641]
k)fgf-21；
[0642]
l)col1a1；
[0643]
m)acta2；
[0644]
n)基质金属蛋白酶(mmp)，例如mmp-13、mmp-2、mmp-9、mt1-mmp、mmp-3或mmp-10；
[0645]
o)acox1；
[0646]
p)il-10；或
[0647]
q)nf-kb。
[0648]
在某些实施例中，施用组合物使得在24小时的治疗期之后a)-q)中的一种或多种得到改善。
[0649]
在一些实施例中，在施用组合物之前，个体展现例如相对于不患肝病的健康个体提高的alt或ast中的一种或两种的含量。在一些实施例中，施用组合物减少alt或ast中的一种或两种的含量。
[0650]
向个体提供氨基酸的方法
[0651]
本发明提供一种向个体提供氨基酸实体的方法，其包含向所述个体施用有效量的本文所描述的组合物，例如包含亮氨酸(l)-氨基酸实体、精氨酸(r)-氨基酸实体、谷氨酰胺(q)-氨基酸实体；及抗氧化剂或活性氧(ros)清除剂，例如n-乙酰半胱氨酸(nac)实体，例如nac的组合物。在一些实施例中，至少一种氨基酸实体不为长度超过20个氨基酸残基的肽。
[0652]
本发明也提供一种在个体中增加一种、两种、三种或更多种(例如全部)氨基酸实体的方法，其包含向个体施用有效量的本文所描述的组合物。在一些实施例中，施用组合物提高个体的血液、血浆或血清中的一种、两种或更多种(例如全部)，例如来自个体的血液、
血浆或血清样品中的氨基酸实体。
[0653]
生物标记物
[0654]
本文所揭示的方法中的任一种可包括评估或监测向具有肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的个体施用包括氨基酸实体的组合物的效用。
[0655]
在实施例中，治疗具有肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的个体的组合物的效用值包含量测以下中的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种、十一种、十二种、十三种、十四种、十五种、十六种或更多种(例如全部)：
[0656]
a)丙氨酸转氨酶(alt)；
[0657]
b)天冬氨酸转氨酶(ast)；
[0658]
c)脂联素；
[0659]
d)iii型胶原蛋白的n端片段(proc3)；
[0660]
e)胱天蛋白酶裂解的角蛋白18片段(m30及m65)；
[0661]
f)il-1β；
[0662]
g)c反应蛋白；
[0663]
h)piiinp；
[0664]
i)金属蛋白酶的组织抑制剂(timp)；例如timp1或timp2；
[0665]
j)mcp-1；
[0666]
k)fgf-21；
[0667]
l)col1a1；
[0668]
m)acta2；
[0669]
n)基质金属蛋白酶(mmp)，例如mmp-13、mmp-2、mmp-9、mt1-mmp、mmp-3或mmp-10；
[0670]
o)acox1；
[0671]
p)il-10；或
[0672]
q)nf-kb。
[0673]
在本文所揭示的方法中的任一种的一些实施例中，a)-q)中的一种或多种的量测值获自由具有肝病(例如nafld(例如nash或nafl)或afld(例如ash))的个体获得的样品。在一些实施例中，样品选自血液样品(例如血浆样品)或肝脏样品。
[0674]
在一些实施例中，在接受包括氨基酸实体的组合物之前、期间或在接受包括氨基酸实体的组合物之后评估个体。
[0675]
在一些实施例中，施用包括氨基酸实体的组合物(例如以约2g至约60g总氨基酸，例如约6g、约12g、约18g、约24g或约48g的剂量)使得以下中的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种、十一种、十二种、十三种、十四种、十五种、十六种或更多种(例如全部)得到改善：
[0676]
a)丙氨酸转氨酶(alt)；
[0677]
b)天冬氨酸转氨酶(ast)；
[0678]
c)脂联素；
[0679]
d)iii型胶原蛋白的n端片段(proc3)；
[0680]
e)胱天蛋白酶裂解的角蛋白18片段(m30及m65)；
[0681]
f)il-1β；
[0682]
g)c反应蛋白；
[0683]
h)piiinp；
[0684]
i)金属蛋白酶的组织抑制剂(timp)；例如timp1或timp2；
[0685]
j)mcp-1；
[0686]
k)fgf-21；
[0687]
l)col1a1；
[0688]
m)acta2；
[0689]
n)基质金属蛋白酶(mmp)，例如mmp-13、mmp-2、mmp-9、mt1-mmp、mmp-3或mmp-10；
[0690]
o)acox1；
[0691]
p)il-10；或
[0692]
q)nf-kb。
[0693]
在一些实施例中，施用包括氨基酸实体的组合物(例如以约2g至约60g总氨基酸，例如约6g、约12g、约18g、约24g或约48g的剂量，每天三次)使得在约24小时、约72小时、约1周、约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周、约10周、约11周或12周的治疗期之后a)-k)的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种(例如全部)得到改善。在某些实施例中，施用组合物使得在约2周的治疗期之后a)-k)的一种、两种、三种、四种、五种或更多种得到改善。
[0694]
编号实施例
[0695]
本发明进一步参看以下编号实施例描述。
[0696]
1.一种组合物，其包含：
[0697]
a)亮氨酸(l)-氨基酸实体、精氨酸(r)-氨基酸实体及谷氨酰胺(q)-氨基酸实体；及
[0698]
b)抗氧化剂或活性氧(ros)清除剂，例如n-乙酰半胱氨酸(nac)实体，例如nac；
[0699]
限制条件为：
[0700]
c)至少一种氨基酸实体不以长度超过20个氨基酸残基的肽形式提供，及
[0701]
可选地，其中：
[0702]
(i)(a)的氨基酸实体(例如氨基酸实体的至少一个、两个或三个)选自表2；或
[0703]
(ii)(a)r-氨基酸实体及q-氨基酸实体中的一种或两种以与l-氨基酸实体相比更高的量(重量％)存在，或(b)所述组合物进一步包含丝氨酸(s)-氨基酸实体。
[0704]
1a.如实施例1的组合物，其中所述组合物满足(i)的特性。
[0705]
1b.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物满足(ii)(a)的特性。
[0706]
1c.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物满足(ii)(b)的特性。
[0707]
1d.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物进一步包含s-氨基酸实体，且其中所述s-氨基酸实体以与任何其他氨基酸实体相比更高的量存在。
[0708]
2.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含氨基酸及三种氨基酸实体。
[0709]
3.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含氨基酸前驱体及三种氨基酸实体。
[0710]
4.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含氨基酸代谢物及三种
氨基酸实体。
[0711]
5.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含氨基酸衍生物及三种氨基酸实体。
[0712]
6.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含两种氨基酸及两种氨基酸实体。
[0713]
7.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含两种氨基酸前驱体及两种氨基酸实体。
[0714]
8.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含两种氨基酸代谢物及两种氨基酸实体。
[0715]
9.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含两种氨基酸衍生物及两种氨基酸实体。
[0716]
10.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含三种氨基酸及一种氨基酸实体。
[0717]
11.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含三种氨基酸前驱体及一种氨基酸实体。
[0718]
12.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含三种氨基酸代谢物及一种氨基酸实体。
[0719]
13.如实施例1至1d中任一种的组合物，其中所述组合物包含三种氨基酸衍生物及一种氨基酸实体。
[0720]
14.如实施例1至2中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体及q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0721]
15.如实施例1至2、2、14或380中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0722]
16.如实施例1至2、14或381中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0723]
17.如实施例1至2、14或382中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、瓜氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0724]
18.如实施例1至2、14或383中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、天冬氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0725]
19.如实施例1至2、14或384中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、l-谷氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0726]
20.如实施例1至2、14或385中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、鸟氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0727]
21.如实施例1至2、14或386中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、胍丁胺、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0728]
22.如实施例1至2、14或387中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、肌酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0729]
23.如实施例1至2、14或388中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0730]
24.如实施例1至2、14或389中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0731]
25.如实施例1至2、14或428中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0732]
26.如实施例1至2、14或429中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0733]
27.如实施例1至2、14或430中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0734]
28.如实施例1至2、14或431中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0735]
29.如实施例1至2、14或432中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0736]
30.如实施例1至2、14或445中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac。
[0737]
31.如实施例1至2、14或446中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0738]
32.如实施例1至2、14或447中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0739]
33.如实施例1至2、14或448中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0740]
34.如实施例1至2、14或449中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[0741]
35.如实施例1至2、14或450中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[0742]
36.如实施例1至2、14或451中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[0743]
37.如实施例1至2、14或452中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[0744]
38.如实施例1至2、14或453中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0745]
39.如实施例1至2、14或454中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[0746]
40.如实施例1至2、14、380或428中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0747]
41.如实施例1至2、14、381或429中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、精氨基丁二酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0748]
42.如实施例1至2、14、382或431中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、瓜氨酸、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0749]
43.如实施例1至2、14或383中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、天
冬氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0750]
44.如实施例1至2、14、380或445中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、l-精氨酸、q-氨基酸实体及nac。
[0751]
45.如实施例1至2、14、381或446中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0752]
46.如实施例1至2、14、382或447中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、瓜氨酸、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0753]
47.如实施例1至2、14、383或448中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、天冬氨酸、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0754]
48.如实施例1至2、14、384或449中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、谷氨酸、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[0755]
49.如实施例1至2、14、385或450中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、鸟氨酸、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[0756]
50.如实施例1至2、14、386或451中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、胍丁胺、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[0757]
51.如实施例1至2、14、387或452中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、肌酸、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[0758]
52.如实施例1至2、14、388或453中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0759]
53.如实施例1至2、14、389或454中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[0760]
54.如实施例1至2、14、428或445中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及nac。
[0761]
55.如实施例1至2、14、429或446中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及丝氨酸。
[0762]
56.如实施例1至2、14、430或447中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[0763]
57.如实施例1至2、14、432或448中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及胱硫醚。
[0764]
58.如实施例1至2、14、433或449中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[0765]
59.如实施例1至2、14或450中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及高半胱氨酸。
[0766]
60.如实施例1至2、14或451中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[0767]
61.如实施例1至2、14或452中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[0768]
62.如实施例1至2、14或453中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及l-半胱氨酸。
[0769]
63.如实施例1至2、14或454中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及胱氨酸。
[0770]
64.如实施例1至2、14、380或445中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac。
[0771]
65.如实施例1至2、14、381或446中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、精氨基丁二酸、谷氨酸及丝氨酸。
[0772]
66.如实施例1至2、14、382或447中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、瓜氨酸、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[0773]
67.如实施例1至2、14、383或448中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、天冬氨酸、d-谷氨酰胺及胱硫醚。
[0774]
68.如实施例1至2、14、384或449中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、谷氨酸、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[0775]
69.如实施例1至2、14、385或450中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、鸟氨酸、谷氨酸及高半胱氨酸。
[0776]
70.如实施例1至2、14、386或451中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、胍丁胺、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[0777]
71.如实施例1至2、14、387或452中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、肌酸、d-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[0778]
72.如实施例1至2、14、388或453中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0779]
73.如实施例1至2、14、389或454中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、精氨基丁二酸及胱氨酸。
[0780]
74.如实施例1或3的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0781]
75.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体及q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0782]
76.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、l-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0783]
77.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0784]
78.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、瓜氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0785]
79.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、天冬氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0786]
80.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、谷氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0787]
81.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、鸟氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0788]
82.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、胍丁胺、
q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0789]
83.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、肌酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0790]
84.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0791]
85.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0792]
86.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0793]
87.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0794]
88.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0795]
89.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0796]
90.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0797]
91.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac。
[0798]
92.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0799]
93.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0800]
94.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0801]
95.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[0802]
96.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[0803]
97.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[0804]
98.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[0805]
99.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0806]
100.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac实体。
[0807]
101.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[0808]
102.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0809]
103.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、精氨基丁二酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0810]
104.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、瓜氨酸、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0811]
105.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、天冬氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0812]
106.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、l-精氨酸、q-氨基酸实体及nac。
[0813]
107.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0814]
108.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、瓜氨酸、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0815]
109.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、天冬氨酸、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0816]
110.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、谷氨酸、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[0817]
111.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、鸟氨酸、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[0818]
112.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、胍丁胺、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[0819]
113.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、肌酸、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[0820]
114.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0821]
115.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[0822]
116.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及nac。
[0823]
117.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及丝氨酸。
[0824]
118.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[0825]
119.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及胱硫醚。
[0826]
120.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[0827]
121.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基
酸实体、谷氨酸及高半胱氨酸。
[0828]
122.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[0829]
123.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[0830]
124.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及l-半胱氨酸。
[0831]
125.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及胱氨酸。
[0832]
126.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac。
[0833]
127.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、精氨基丁二酸、谷氨酸及丝氨酸。
[0834]
128.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、瓜氨酸、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[0835]
129.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、天冬氨酸、d-谷氨酰胺及胱硫醚。
[0836]
130.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[0837]
131.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、鸟氨酸、谷氨酸及高半胱氨酸。
[0838]
132.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、胍丁胺、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[0839]
133.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、肌酸、d-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[0840]
134.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0841]
135.如实施例1至1d、3或74的组合物，其中所述组合物包含氧代-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、精氨基丁二酸及胱氨酸。
[0842]
136.如实施例1至1d或4的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0843]
137.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、l-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0844]
138.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0845]
139.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、瓜氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0846]
140.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、天冬氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0847]
141.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、谷氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0848]
142.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、鸟氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0849]
143.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、胍丁胺、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0850]
144.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、肌酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0851]
145.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、d-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0852]
146.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0853]
147.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如抗氧化剂，例如nac实体。
[0854]
148.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如抗氧化剂，例如nac实体。
[0855]
149.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如抗氧化剂，例如nac实体。
[0856]
150.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如抗氧化剂，例如nac实体。
[0857]
151.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如抗氧化剂，例如nac实体。
[0858]
152.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac。
[0859]
153.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0860]
154.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0861]
155.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0862]
156.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[0863]
157.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[0864]
158.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[0865]
159.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[0866]
160.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、
q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0867]
161.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及半胱氨酸。
[0868]
162.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[0869]
163.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0870]
164.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、精氨基丁二酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0871]
165.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、瓜氨酸、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0872]
166.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、天冬氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0873]
167.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、l-精氨酸、q-氨基酸实体及nac。
[0874]
168.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0875]
169.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、瓜氨酸、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0876]
170.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、天冬氨酸、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0877]
171.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、谷氨酸、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[0878]
172.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、鸟氨酸、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[0879]
173.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、胍丁胺、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[0880]
174.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、肌酸、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[0881]
175.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0882]
176.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[0883]
177.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及nac。
[0884]
178.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、谷氨酸及丝氨酸。
[0885]
179.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[0886]
180.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及胱硫醚。
[0887]
181.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[0888]
182.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、谷氨酸及高半胱氨酸。
[0889]
183.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[0890]
184.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[0891]
185.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及l-半胱氨酸。
[0892]
186.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、r-氨基酸实体、谷氨酸及胱氨酸。
[0893]
187.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac。
[0894]
188.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、精氨基丁二酸、谷氨酸及丝氨酸。
[0895]
189.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、瓜氨酸、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[0896]
190.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、天冬氨酸、d-谷氨酰胺及胱硫醚。
[0897]
191.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、n-乙酰基-谷氨酰胺、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[0898]
192.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、鸟氨酸、谷氨酸及高半胱氨酸。
[0899]
193.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、胍丁胺、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[0900]
194.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、肌酸、d-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[0901]
195.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0902]
196.如实施例1至1d、4或136的组合物，其中所述组合物包含hmb、n-乙酰基-精氨酸、精氨基丁二酸及胱氨酸。
[0903]
197.如实施例1至1d或4的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0904]
198.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、l-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0905]
199.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、精氨
基丁二酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0906]
200.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、瓜氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0907]
201.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、天冬氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0908]
202.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、谷氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0909]
203.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、鸟氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0910]
204.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、胍丁胺、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0911]
205.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、肌酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0912]
206.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、d-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0913]
207.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0914]
208.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0915]
209.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0916]
210.如实施例1至1d 4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0917]
211.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0918]
212.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0919]
213.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac。
[0920]
214.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0921]
215.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0922]
216.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0923]
217.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[0924]
218.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[0925]
219.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[0926]
220.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[0927]
221.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0928]
222.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及半胱氨酸。
[0929]
223.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[0930]
224.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0931]
225.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、精氨基丁二酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0932]
226.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、瓜氨酸、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0933]
227.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、天冬氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0934]
228.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、l-精氨酸、q-氨基酸实体及nac。
[0935]
229.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0936]
230.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、瓜氨酸、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0937]
231.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、天冬氨酸、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0938]
232.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、谷氨酸、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[0939]
233.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、鸟氨酸、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[0940]
234.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、胍丁胺、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[0941]
235.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、肌酸、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[0942]
236.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0943]
237.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[0944]
238.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨
基酸实体、l-谷氨酰胺及nac。
[0945]
239.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、谷氨酸及丝氨酸。
[0946]
240.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[0947]
241.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及胱硫醚。
[0948]
242.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[0949]
243.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、谷氨酸及高半胱氨酸。
[0950]
244.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[0951]
245.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[0952]
246.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及l-半胱氨酸。
[0953]
247.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、r-氨基酸实体、谷氨酸及胱氨酸。
[0954]
248.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac。
[0955]
249.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、精氨基丁二酸、谷氨酸及丝氨酸。
[0956]
250.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、瓜氨酸、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[0957]
251.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、天冬氨酸、d-谷氨酰胺及胱硫醚。
[0958]
252.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、n-乙酰基-谷氨酰胺、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[0959]
253.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、鸟氨酸、谷氨酸及高半胱氨酸。
[0960]
254.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、胍丁胺、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[0961]
255.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、肌酸、d-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[0962]
256.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0963]
257.如实施例1至1d、4或197的组合物，其中所述组合物包含异戊酰基-coa、n-乙酰基-精氨酸、精氨基丁二酸及胱氨酸。
[0964]
258.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0965]
259.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、l-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0966]
260.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0967]
261.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、瓜氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0968]
262.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、天冬氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0969]
263.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、谷氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0970]
264.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中组合物包含d-亮氨酸、鸟氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0971]
265.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、胍丁胺、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0972]
266.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、肌酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0973]
267.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0974]
268.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0975]
269.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0976]
270.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0977]
271.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0978]
272.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0979]
273.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0980]
274.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac。
[0981]
275.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0982]
276.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0983]
277.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸
实体、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0984]
278.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[0985]
279.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[0986]
280.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[0987]
281.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[0988]
282.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[0989]
283.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及半胱氨酸。
[0990]
284.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[0991]
285.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0992]
286.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、精氨基丁二酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0993]
287.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、瓜氨酸、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0994]
288.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、天冬氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[0995]
289.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、l-精氨酸、q-氨基酸实体及nac。
[0996]
290.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[0997]
291.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、瓜氨酸、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[0998]
292.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、天冬氨酸、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[0999]
293.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、谷氨酸、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[1000]
294.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、鸟氨酸、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[1001]
295.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、胍丁胺、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[1002]
296.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、肌酸、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[1003]
297.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[1004]
298.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[1005]
299.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及nac。
[1006]
300.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及丝氨酸。
[1007]
301.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[1008]
302.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及胱硫醚。
[1009]
303.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[1010]
304.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及高半胱氨酸。
[1011]
305.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[1012]
306.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[1013]
307.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及l-半胱氨酸。
[1014]
308.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及胱氨酸。
[1015]
309.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac。
[1016]
310.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、精氨基丁二酸、谷氨酸及丝氨酸。
[1017]
311.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、瓜氨酸、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[1018]
312.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、天冬氨酸、d-谷氨酰胺及胱硫醚。
[1019]
313.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[1020]
314.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、鸟氨酸、谷氨酸及高半胱氨酸。
[1021]
315.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、胍丁胺、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[1022]
316.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、肌酸、d-谷
氨酰胺及d-半胱氨酸。
[1023]
317.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[1024]
318.如实施例1至1d、5或258的组合物，其中所述组合物包含d-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、精氨基丁二酸及胱氨酸。
[1025]
319.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1026]
320.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、l-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1027]
321.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1028]
322.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、瓜氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1029]
323.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、天冬氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1030]
324.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、谷氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1031]
325.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、鸟氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1032]
326.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、胍丁胺、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1033]
327.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、肌酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1034]
328.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1035]
329.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1036]
330.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1037]
331.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1038]
332.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1039]
333.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1040]
334.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1041]
335.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac。
[1042]
336.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[1043]
337.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[1044]
338.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[1045]
339.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[1046]
340.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[1047]
341.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[1048]
342.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[1049]
343.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[1050]
344.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及半胱氨酸。
[1051]
345.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[1052]
346.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1053]
347.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、精氨基丁二酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1054]
348.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、瓜氨酸、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1055]
349.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、天冬氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1056]
350.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、l-精氨酸、q-氨基酸实体及nac。
[1057]
351.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[1058]
352.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、瓜氨酸、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[1059]
353.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、天冬氨酸、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[1060]
354.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、谷氨酸、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[1061]
355.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、鸟
氨酸、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[1062]
356.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、胍丁胺、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[1063]
357.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、肌酸、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[1064]
358.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[1065]
359.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[1066]
360.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及nac。
[1067]
361.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及丝氨酸。
[1068]
362.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[1069]
363.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及胱硫醚。
[1070]
364.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[1071]
365.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及高半胱氨酸。
[1072]
366.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[1073]
367.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[1074]
368.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及l-半胱氨酸。
[1075]
369.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、r-氨基酸实体、谷氨酸及胱氨酸。
[1076]
370.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac。
[1077]
371.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、精氨基丁二酸、谷氨酸及丝氨酸。
[1078]
372.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、瓜氨酸、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[1079]
373.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、天冬氨酸、d-谷氨酰胺及胱硫醚。
[1080]
374.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺、l-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[1081]
375.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、鸟氨酸、谷氨酸及高半胱氨酸。
[1082]
376.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、胍丁胺、氨甲酰基-p及甲硫氨酸。
[1083]
377.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、肌酸、d-谷氨酰胺及d-半胱氨酸。
[1084]
378.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、d-精氨酸、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[1085]
379.如实施例1至1d、5或319的组合物，其中所述组合物包含n-乙酰基-亮氨酸、n-乙酰基-精氨酸、精氨基丁二酸及胱氨酸。
[1086]
380.如实施例1至1d或2的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、l-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1087]
381.如实施例1至1d或2的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、精氨基丁二酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1088]
382.如实施例1至1d、3或4的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、瓜氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1089]
383.如实施例1至1d或3的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、天冬氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1090]
384.如实施例1至1d或3的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、谷氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1091]
385.如实施例1至1d或4的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、鸟氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1092]
386.如实施例1至1d或4的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、胍丁胺、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1093]
387.如实施例1至1d或4的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、肌酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1094]
388.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、d-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1095]
389.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1096]
390.如实施例1至1d、3或384的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、谷氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1097]
391.如实施例1至1d、4或385的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、鸟氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1098]
392.如实施例1至1d、4或386的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、胍丁胺、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1099]
393.如实施例1至1d、4或387的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、肌酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1100]
394.如实施例1至1d、4或388的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、d-精
氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1101]
395.如实施例1至1d、4或389的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、d-精氨酸、n-乙酰基-精氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1102]
396.如实施例1至1d或380的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1103]
397.如实施例1至2或381中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、精氨基丁二酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1104]
398.如实施例1至1d、3、4或382的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、瓜氨酸、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1105]
399.如实施例1至1d、3或383的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、天冬氨酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1106]
400.如实施例1至1d或3或384的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、谷氨酸、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1107]
401.如实施例1至1d、4或385的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、鸟氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1108]
402.如实施例1至1d、4或386的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、胍丁胺、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1109]
403.如实施例1至1d、4或387的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、肌酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1110]
404.如实施例1至1d、5或388的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、d-精氨酸、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1111]
405.如实施例1至1d、5或389的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、n-乙酰基-精氨酸、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1112]
406.如实施例1至1d、3、80或445的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac。
[1113]
407.如实施例1至2、381或446中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、精氨基丁二酸、谷氨酸及丝氨酸。
[1114]
408.如实施例1至1d、3、4、382或447的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、瓜氨酸、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[1115]
409.如实施例1至1d、3、383或448的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、天冬氨酸、谷氨酸及胱硫醚。
[1116]
410.如实施例1至1d、3、384或449的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、谷氨酸、d-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[1117]
411.如实施例1至1d、4、385或448的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、鸟氨酸、n-乙酰基-谷氨酰胺及胱硫醚。
[1118]
412.如实施例1至1d、4、386或450的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、胍丁胺、l-谷氨酰胺及高半胱氨酸。
[1119]
413.如实施例1至1d、4、387或451的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、肌酸、谷氨酸及甲硫氨酸。
[1120]
414.如实施例1至1d、5、388或454的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、d-精氨酸、氨甲酰基-p及d-半胱氨酸。
[1121]
415.如实施例1至1d、5、389或453的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、n-乙酰基-精氨酸、谷氨酸及l-半胱氨酸。
[1122]
416.如实施例1至1d、380或454的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及胱氨酸。
[1123]
417.如实施例1至1d、6或445的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、l-精氨酸、q-氨基酸及nac。
[1124]
418.如实施例1至2或446中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、精氨基丁二酸、q-氨基酸及丝氨酸。
[1125]
419.如实施例1至1d、3或447的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、瓜氨酸、q-氨基酸及乙酰基丝氨酸。
[1126]
420.如实施例1至1d、4或448的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、天冬氨酸、q-氨基酸及胱硫醚。
[1127]
421.如实施例1至1d、3或449的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、谷氨酸、q-氨基酸及谷胱甘肽。
[1128]
422.如实施例1至1d、4或448的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、鸟氨酸、q-氨基酸及胱硫醚。
[1129]
423.如实施例1至1d、4或450的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、胍丁胺、q-氨基酸及高半胱氨酸。
[1130]
424.如实施例1至1d、4或451的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、肌酸、q-氨基酸及甲硫氨酸。
[1131]
425.如实施例1至1d、5或452的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、d-精氨酸、q-氨基酸及d-半胱氨酸。
[1132]
426.如实施例1至1d、5或453的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、n-乙酰基-精氨酸、q-氨基酸及l-半胱氨酸。
[1133]
427.如实施例1至1d、5或454的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、l-精氨酸、q-氨基酸及胱氨酸。
[1134]
428.如实施例1至1d或2的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1135]
429.如实施例1至1d、3或4的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、谷氨酸及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1136]
430.如实施例1至1d或4的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1137]
431.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1138]
432.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1139]
433.如实施例1至1d、5或431的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、r-氨基酸
实体、d-谷氨酰胺及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1140]
434.如实施例1至1d、4或430的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、l-精氨酸、氨甲酰基-p及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1141]
435.如实施例1至2、428或445中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及nac。
[1142]
436.如实施例1至1d、4、429或446的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、谷氨酸及丝氨酸。
[1143]
437.如实施例1至1d、4、430或447的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及乙酰基丝氨酸。
[1144]
438.如实施例1至1d、5、431或448的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、d-谷氨酰胺及胱硫醚。
[1145]
439.如实施例1至1d、5、432或449的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及谷胱甘肽。
[1146]
440.如实施例1至2、428或450中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺及高半胱氨酸。
[1147]
441.如实施例1至1d、3、4、429或451的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、谷氨酸及甲硫氨酸。
[1148]
442.如实施例1至1d、4、430或452的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、氨甲酰基-p及d-半胱氨酸。
[1149]
443.如实施例1至1d、5、431或453的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、d-谷氨酰胺及l-半胱氨酸。
[1150]
444.如实施例1至1d、5、432或454的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、n-乙酰基-谷氨酰胺及胱氨酸。
[1151]
445.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及nac。
[1152]
446.如实施例1至1d或3的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及丝氨酸。
[1153]
447.如实施例1至1d或3的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及乙酰基丝氨酸。
[1154]
448.如实施例1至1d或3的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱硫醚。
[1155]
449.如实施例1至1d或4的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及谷胱甘肽。
[1156]
450.如实施例1至1d或4的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及高半胱氨酸。
[1157]
451.如实施例1至1d或4的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及甲硫氨酸。
[1158]
452.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及d-半胱氨酸。
[1159]
453.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及l-半胱氨酸。
[1160]
454.如实施例1至1d或5的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、q-氨基酸实体及胱氨酸。
[1161]
455.如实施例1至1d或2的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸、鸟氨酸、q-氨基酸实体及抗氧化剂或ros清除剂，例如nac实体。
[1162]
456.如实施例1至1d或455的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸、鸟氨酸、l-谷氨酰胺及nac。
[1163]
457.如实施例1至1d或455的组合物，其中所述组合物包含hmb、鸟氨酸、l-谷氨酰胺及nac。
[1164]
458.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸或亮氨酸代谢物(例如hmb)、l-精氨酸或l-精氨酸代谢物(例如肌酸)、l-谷氨酰胺及nac或nac代谢物，例如谷胱甘肽。
[1165]
459.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物包含l-亮氨酸或亮氨酸代谢物(例如hmb)、l-精氨酸或l-精氨酸代谢物(例如肌酸)、l-谷氨酰胺及nac或nac代谢物，例如谷胱甘肽。
[1166]
460.如前述实施例中任一种的组合物，其进一步包含异亮氨酸(i)-氨基酸实体。
[1167]
461.如实施例460的组合物，其中所述i-氨基酸实体为氨基酸。
[1168]
462.如实施例460或461的组合物，其中所述氨基酸实体为l-异亮氨酸。
[1169]
463.如实施例460的组合物，其中所述i-氨基酸实体为氨基酸前驱体。
[1170]
464.如实施例460或463的组合物，其中所述i-氨基酸实体为2-氧代-3-甲基-戊酸。
[1171]
465.如实施例460或463的组合物，其中所述i-氨基酸实体为苏氨酸。
[1172]
466.如实施例460的组合物，其中所述i-氨基酸实体为氨基酸代谢物。
[1173]
467.如实施例460或466的组合物，其中所述i-氨基酸实体为2-氧代-3-甲基-戊酸。
[1174]
468.如实施例460或466的组合物，其中所述i-氨基酸实体为甲基丁酰基-coa。
[1175]
469.如实施例460的组合物，其中所述i-氨基酸实体为氨基酸衍生物。
[1176]
470.如实施例460或469的组合物，其中所述i-氨基酸实体为d-异亮氨酸。
[1177]
471.如实施例460或469的组合物，其中所述i-氨基酸实体为n-乙酰基-异亮氨酸。
[1178]
472.如前述实施例中任一种的组合物，其进一步包含缬氨酸(v)-氨基酸实体。
[1179]
473.如实施例472的组合物，其中所述v-氨基酸实体为氨基酸。
[1180]
474.如实施例472或473的组合物，其中所述v-氨基酸实体为l-缬氨酸。
[1181]
475.如实施例472的组合物，其中所述v-氨基酸实体为氨基酸前驱体。
[1182]
476.如实施例472或475的组合物，其中所述v-氨基酸实体为2-氧代-戊酸。
[1183]
477.如实施例472的组合物，其中所述v-氨基酸实体为氨基酸代谢物。
[1184]
478.如实施例472或477的组合物，其中所述v-氨基酸实体为异丁酰基-coa。
[1185]
479.如实施例472或477的组合物，其中所述v-氨基酸实体为3-hib-coa。
[1186]
480.如实施例472或477的组合物，其中所述v-氨基酸实体为3-hib。
[1187]
481.如实施例472的组合物，其中所述v-氨基酸实体为氨基酸衍生物。
[1188]
482.如实施例472或481的组合物，其中所述v-氨基酸实体为d-缬氨酸。
[1189]
483.如实施例472或481的组合物，其中所述v-氨基酸实体为n-乙酰基-缬氨酸。
[1190]
484.如前述实施例中任一种的组合物，其进一步包含l-甘氨酸。
[1191]
485.如前述实施例中任一种的组合物，其进一步包含s-氨基酸实体(例如l-丝氨酸、磷酸丝氨酸、p-羟基丙酮酸、l-甘氨酸、色氨酸、乙酰基丝氨酸、胱硫醚、磷脂酰丝氨酸或其任何组合，例如l-丝氨酸及l-甘氨酸)。
[1192]
486.如前述实施例中任一种的组合物，其进一步包含肉碱。
[1193]
487.如前述实施例中任一种的组合物，其包含：
[1194]
a)l-氨基酸实体，其选自l-亮氨酸或其盐或β-羟基-β-甲基丁酸(hmb)或其盐或l-亮氨酸或其盐及hmb或其盐的组合；
[1195]
b)r-氨基酸实体，其选自l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐或两种或三种l-精氨酸或其盐、鸟氨酸或其盐或肌酸或其盐的组合；
[1196]
c)l-谷氨酰胺或其盐；及
[1197]
d)n-乙酰半胱氨酸(nac)或其盐。
[1198]
488.如前述实施例中任一种的组合物，其中提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
[1199]
489.如前述实施例中任一种的组合物，其中提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
[1200]
490.如前述实施例中任一种的组合物，其中提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
[1201]
491.如前述实施例中任一种的组合物，其中提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
[1202]
492.如前述实施例中任一种的组合物，其中甲硫氨酸(m)、色氨酸(w)、缬氨酸(v)或半胱氨酸(c)中的一种、两种、三种或四种，不存在，或若存在则以小于组合物的10重量(wt)％存在。
[1203]
493.如前述实施例中任一种的组合物，其中(a)-(d)的总重量％大于组合物中的任何其他氨基酸实体的总重量％。
[1204]
494.如前述实施例中任一种的组合物，其中提供(a)-(d)中的氨基酸中的一种、两种、三种或四种作为二肽或三肽的部分，例如其量为组合物的至少10重量％。
[1205]
495.如实施例494的组合物，其中二肽为(a)-(d)中的氨基酸中的任一种的同二肽或杂二肽，例如(a)-(d)中的氨基酸中的一种、两种、三种或四种为同二肽或杂二肽。
[1206]
496.如实施例494的组合物，其中三肽为(a)-(d)中的氨基酸中的任一种的同三肽或杂三肽，例如(a)-(d)中的氨基酸中的一种、两种、三种或四种为同三肽或杂三肽。
[1207]
497.如前述实施例中任一种的组合物，其中(a)为l-氨基酸实体二肽或其盐(例如l-亮氨酸二肽或其盐)。
[1208]
498.如实施例497的组合物，其中(a)为同二肽或杂二肽，例如ala-leu。
[1209]
499.如前述实施例中任一种的组合物，其中(b)为l-精氨酸二肽或其盐。
[1210]
500.如实施例499的组合物，其中(b)为同二肽或杂二肽，例如ala-arg。
[1211]
501.如前述实施例中任一种的组合物，其中(c)为l-谷氨酰胺二肽或其盐。
[1212]
502.如实施例501的组合物，其中(c)为同二肽，例如gln-gln，或其中(c)为杂二肽，例如ala-gln。
[1213]
503.如前述实施例中任一种的组合物，其中：
[1214]
f)组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％大于r-氨基酸实体的重量％；
[1215]
g)组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％大于l-氨基酸实体的重量％；
[1216]
h)组合物中的r-氨基酸实体的重量％大于l-氨基酸实体的重量％；或
[1217]
i)(f)-(h)中的两个或三个的组合。
[1218]
504.如前述实施例中任一种的组合物，其中组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％比r-氨基酸实体的重量％大至少5％，例如l-谷氨酰胺或其盐的重量％比r-氨基酸实体的重量％大至少10％、15％、20％或25％。
[1219]
505.如前述实施例中任一种的组合物，其中组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％比l-氨基酸实体的重量％大至少20％，例如组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％比l-氨基酸实体的重量％大至少25％、30％、35％、40％、45％或50％。
[1220]
506.如前述实施例中任一种的组合物，其中组合物中的r-氨基酸实体的重量％比l-氨基酸实体的重量％大至少10％，例如组合物中的r-氨基酸实体的重量％比l-氨基酸实体的重量％大至少15％、20％、25％或30％。
[1221]
507.如前述实施例中任一种的组合物，其中：
[1222]
j)l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为至少1:4，或至少2:5，且不超过3:4，例如l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约2:3；
[1223]
k)l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少1:4，或至少1:3，且不超过3:4，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:2；
[1224]
l)r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少1:4，或至少1:2，且不超过6:7，例如r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约3:4；或
[1225]
m)(j)-(l)中的两个或三个的组合。
[1226]
508.如前述实施例中任一种的组合物，其进一步包含异亮氨酸(i)-氨基酸-实体及缬氨酸(v)-氨基酸-实体中的一种或两种，例如i-氨基酸-实体及v-氨基酸-实体均存在。
[1227]
509.如实施例508的组合物，其中：
[1228]
n)组合物中的l-氨基酸-实体的重量％大于或等于i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合的重量％；
[1229]
o)组合物中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合的重量％大于或等于l-谷氨酰胺或其盐的重量％；
[1230]
p)组合物中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合的重量％小于r-氨基酸实体的重量％；
[1231]
q)组合物中的r-氨基酸实体及l-谷氨酰胺或其盐的重量％大于l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合的重量％；或
[1232]
r)(n)-(q)中的两个、三个或四个的组合。
[1233]
510.如实施例508或509的组合物，其中：
[1234]
s)r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的重量％为组合物的至少50％，
谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为至少1:4，或至少2:3，或不超过5:7，或不超过6:7，例如比率为约6:11；或
[1259]
nn)(kk)-(mm)中的两个或三个的组合。
[1260]
515.如前述实施例中任一种的组合物，其中：
[1261]
oo)组合物中的l-氨基酸实体的重量％大于nac或其盐的重量％；
[1262]
pp)组合物中的r-氨基酸实体的重量％大于nac或其盐的重量％；
[1263]
qq)组合物中的l-谷氨酰胺或其盐的重量％大于nac或其盐的所述；或
[1264]
rr)(oo)-(qq)中的两个或三个的组合。
[1265]
516.如前述实施例中任一种的组合物，其中(a)-(d)的氨基酸中的至少一种为游离氨基酸，例如(a)-(d)的氨基酸中的两种、三种或四种为游离氨基酸，例如组合物的总重量的至少50重量％为一种或多种呈游离形式的氨基酸实体。
[1266]
517.如前述实施例中任一种的组合物，其中(a)-(d)的氨基酸中的至少一种呈盐形式，例如(a)-(d)的氨基酸中的一种、两种、三种或四种呈盐形式，例如组合物的总重量的至少10重量％为一种或多种呈盐形式的氨基酸实体。
[1267]
518.如实施例517的组合物，其中组合物的总重量的至少10重量％为一种或多种呈盐形式的氨基酸实体。
[1268]
519.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物能够实现以下中的一种、两种、三种、四种、五种或全部：
[1269]
a)减少或预防肝纤维化；
[1270]
b)减少或预防肝脏损伤；
[1271]
c)减少或预防肝细胞发炎；
[1272]
d)改善，例如提高葡萄糖耐受性；
[1273]
e)减少或预防脂肪变性；
[1274]
f)减少或预防肝细胞气球样膨大；或
[1275]
g)改善肠道功能。
[1276]
520.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物进一步包含丝氨酸(s)-氨基酸实体，例如s-氨基酸实体，其选自l-丝氨酸、磷酸丝氨酸、p-羟基丙酮酸、l-甘氨酸、色氨酸、乙酰基丝氨酸、胱硫醚、半胱氨酸、磷脂酰丝氨酸及d-丝氨酸或其组合，例如l-丝氨酸及l-甘氨酸的组合。
[1277]
521.如实施例520的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及l-甘氨酸。
[1278]
522.如实施例520的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及l-丝氨酸。
[1279]
523.如实施例520的组合物，其中所述组合物包含l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及l-甘氨酸及l-丝氨酸。
[1280]
524.如实施例520至523中任一种的组合物，其中l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的重量比率为约1:0.5:0.5:1.5:2:0.15或约1:0.5:0.5:1.5:2:0.3。
[1281]
525.如前述实施例中任一种的组合物，其中l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨
酰胺或其盐及nac或其盐的重量比率为约0.5至3:0.5至4:1至4:0.1至2.5，例如l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的重量比率为约1:1.5:2:0.15或约1:1.5:2:0.3。
[1282]
526.如实施例525的组合物，其中l-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的重量比率为约1:0.75:2:0.15或约1:0.75:2:0.3。
[1283]
527.如前述实施例中任一种的组合物，其中l-氨基酸实体、i-氨基酸实体、v-氨基酸实体、r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的重量比率为约1:0.5:0.5:1.5:2:0.15或约1:0.5:0.5:1.5:2:0.3。
[1284]
528.如实施例13至33中任一种的组合物，其中所述组合物包含约0.5g至约10g l-氨基酸实体、约0.25g至约5g i-氨基酸实体、约0.25g至约5g v-氨基酸实体、约0.5g至约20g r-氨基酸实体、约1g至约20g l-谷氨酰胺或其盐及约0.1g至约5g nac或其盐，例如所述组合物包含约1g l-氨基酸实体、约0.5g i-氨基酸实体、约0.5g v-氨基酸实体、约1.5g r-氨基酸实体、约2g l-谷氨酰胺或其盐及约0.15g或约0.3g nac或其盐。
[1285]
529.如实施例528的组合物，其中所述组合物包含约4g l-氨基酸实体、约2g i-氨基酸实体、约1g v-氨基酸实体、约3g r-氨基酸实体、约4g l-谷氨酰胺或其盐及约0.9g nac或其盐。
[1286]
530.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物包含：
[1287]
a)l-亮氨酸或其盐；
[1288]
b)l-异亮氨酸或其盐；
[1289]
c)l-缬氨酸或其盐；
[1290]
b)l-精氨酸或其盐；
[1291]
e)l-谷氨酰胺或其盐；及
[1292]
f)nac或其盐。
[1293]
531.如实施例530的组合物，其中提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
[1294]
532.如实施例530或531的组合物，其中提供l-异亮氨酸作为包含l-异亮氨酸或其盐的二肽或包含l-异亮氨酸或其盐的三肽的部分。
[1295]
533.如实施例530至532中任一种的组合物，其中提供l-缬氨酸作为包含l-缬氨酸或其盐的二肽或包含l-缬氨酸或其盐的三肽的部分。
[1296]
534.如实施例530至533中任一种的组合物，其中提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
[1297]
535.如实施例530至534中任一种的组合物，其中提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
[1298]
536.如实施例530至535中任一种的组合物，其中提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
[1299]
537.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物包含4至20种不同氨基酸实体的组合，例如5至15种不同氨基酸实体的组合。
[1300]
538.如前述实施例中任一种的组合物，其中至少两种、三种、四种或更多种氨基酸实体不为长度超过4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个氨基酸残基的
肽。
[1301]
539.一种用于改善肝功能的方法，其中所述方法包含向有需要的个体施用有效量之前述实施例中任一种的组合物。
[1302]
540.如实施例539的方法，其中提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
[1303]
541.如实施例539或540的方法，其中提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
[1304]
542.如实施例539至541中任一种的方法，其中提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
[1305]
543.如实施例539至542中任一种的方法，其中提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
[1306]
544.一种用于治疗一种或多种选自由以下组成的组的症状的方法：脂肪代谢降低、肝细胞凋亡、肝细胞气球样膨大、脂肪组织发炎、肝脏组织发炎、纤维化、肝脏损伤、脂肪变性、葡萄糖耐受性及氧化压力，其中所述方法包含向有需要的个体施用有效量之前述实施例中任一种的组合物。
[1307]
545.如实施例544的方法，其中提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
[1308]
546.如实施例544或545的方法，其中提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
[1309]
547.如实施例544至546中任一种的方法，其中提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
[1310]
548.如实施例544至547中任一种的方法，其中提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
[1311]
549.一种用于治疗脂肪肝病的方法，其中所述方法包含向有需要的个体施用有效量之前述实施例中任一种的组合物。
[1312]
550.如实施例549的方法，其中提供l-亮氨酸作为包含l-亮氨酸或其盐的二肽或包含l-亮氨酸或其盐的三肽的部分。
[1313]
551.如实施例549或550的方法，其中提供l-精氨酸作为包含l-精氨酸或其盐的二肽或包含l-精氨酸或其盐的三肽的部分。
[1314]
552.如实施例549至551中任一种的方法，其中提供l-谷氨酰胺作为包含l-谷氨酰胺或其盐的二肽或包含l-谷氨酰胺或其盐的三肽的部分。
[1315]
553.如实施例549至552中任一种的方法，其中提供nac作为包含nac或其盐的二肽或包含nac或其盐的三肽的一部分。
[1316]
554.如前述实施例中任一种的方法，其中所述个体具有选自由以下组成的组的疾病或病症：非酒精性脂肪肝(nafl)、非酒精性脂肪肝病(nafld)、非酒精性脂肪变性肝炎(nash)、酒精性脂肪肝病(afld)及酒精性脂肪变性肝炎(ash)。
[1317]
555.如实施例554的方法，其中所述个体具有小儿nafld。
[1318]
556.如前述实施例中任一种的方法，其中所述个体具有高bmi、肥胖症、肠道渗漏、肠道菌群失调或肠道微生物群落紊乱。
[1319]
557.如前述实施例中任一种的方法，其中所述个体具有肝硬化、肝癌、提高的肝脏衰竭风险、提高的死亡风险、代谢综合征或2型糖尿病。
[1320]
558.如前述实施例中任一种的方法，其中所述个体具有相对于正常个体提高的发炎性细胞介素含量，例如所述个体具有相对于例如不具有一种或多种症状或不患脂肪肝病的正常个体提高的tnfα含量。
[1321]
559.如前述实施例中任一种的方法，其中相对于例如不具有一种或多种症状或不患脂肪肝病的正常个体，所述患者展现肌肉萎缩或肌肉组织与脂肪组织的比率降低，例如患者展现肌肉萎缩，而无纤维化或肝硬化中的一种或两种。
[1322]
560.如前述实施例中任一种的方法，其中所述个体展现自脂肪组织至肝脏组织的反向脂质传送。
[1323]
561.如前述实施例中任一种的组合物，其中所述组合物包含游离氨基酸，其中氨基酸包含精氨酸、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸及分支链氨基酸，其选自亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸中的一种、两种或全部。
[1324]
562.如实施例561的组合物，其中分支链氨基酸为亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸。
[1325]
563.如实施例561或562的组合物，其中亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、n-乙酰半胱氨酸的wt比率为1:0.5:0.5:1.5:2:0.15。
[1326]
564.如实施例561至563中任一种的组合物，其中氨基酸的总重量(wt)为约2g至约60g。
[1327]
565.如实施例564的组合物，其中氨基酸的总重量为约6g、约12g、约18g、约24g或约48g。
[1328]
566.如实施例561至565中任一种的组合物，其中所述组合物包含约0.5g至约10g亮氨酸、约0.25g至约5g异亮氨酸、约0.25g至约5g缬氨酸、约1g至约20g精氨酸、约1g至约20g谷氨酰胺及约0.1g至约5g n-乙酰半胱氨酸。
[1329]
567.如实施例566的组合物，其中所述组合物包含约1g亮氨酸、约0.5g异亮氨酸、约0.5g缬氨酸、约1.5g精氨酸、约2g谷氨酰胺及约0.15g n-乙酰半胱氨酸。
[1330]
568.如实施例566的组合物，其中所述组合物包含约2g亮氨酸、约1g异亮氨酸、约1g缬氨酸、约3.0g精氨酸、约4g谷氨酰胺及约0.3g n-乙酰半胱氨酸。
[1331]
569.如实施例566的组合物，其中所述组合物包含约4g亮氨酸、约2g异亮氨酸、约2g缬氨酸、约6.0g精氨酸、约8g谷氨酰胺及约0.6g n-乙酰半胱氨酸。
[1332]
570.如实施例561至566中任一种的组合物，其中氨基酸包含约10wt％至约30wt％亮氨酸、约5wt％至约15wt％异亮氨酸、约5wt％至约15wt％缬氨酸、约15wt％至约40wt％精氨酸、约20wt％至约50wt％谷氨酰胺及约1wt％至约8wt％n-乙酰半胱氨酸。
[1333]
571.如实施例570的组合物，其中氨基酸包含约16wt％至约18wt％亮氨酸、约7wt％至约9wt％异亮氨酸、约7wt％至约9wt％缬氨酸、约28wt％至约32wt％精氨酸、约31wt％至约34wt％谷氨酰胺及约1wt％至约5wt％n-乙酰半胱氨酸。
[1334]
572.如实施例571的组合物，其中氨基酸包含约16.8wt％亮氨酸、约8.4wt％异亮氨酸、约8.4wt％缬氨酸、约30.4wt％精氨酸、约33.6wt％谷氨酰胺及约2.5wt％n-乙酰半胱氨酸。
[1335]
573.如前述实施例中任一种的组合物，其中组合物进一步包含一种或多种医药学
上可接受的赋形剂。
[1336]
574.如实施例573的组合物，其中赋形剂选自由以下组成的组：柠檬酸、卵磷脂、甜味剂、分散增强剂、调味剂、苦味遮蔽剂及天然或人造染色剂。
[1337]
575.如前述实施例中任一种的组合物，其中组合物呈固体、粉末、溶液或凝胶形式。
[1338]
576.如前述实施例中任一种的组合物，其中氨基酸由亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及n-乙酰半胱氨酸组成。
[1339]
577.一种用于治疗一种或多种选自由以下组成的组的症状的方法：脂肪代谢降低、肝细胞凋亡、肝细胞气球样膨大、脂肪组织发炎、肝脏组织发炎、纤维化及氧化压力，其中所述方法包含向有需要的个体施用有效量的实施例561至576中任一种的组合物。
[1340]
578.如实施例577的方法，其中所述个体具有非酒精性脂肪肝病(nafld)。
[1341]
579.如实施例577或578的方法，其中所述个体具有小儿nafld。
[1342]
580.如实施例578或579的方法，其中所述患者具有脂肪变性。
[1343]
581.如实施例577的方法，其中所述个体具有非酒精性脂肪变性肝炎(nash)。
[1344]
582.如实施例581的方法，其中所述个体具有纤维化。
[1345]
583.如实施例577的方法，其中所述个体具有肝硬化。
[1346]
584.如实施例583的方法，其中所述个体具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险或提高的死亡风险。
[1347]
585.如实施例577至584中任一种的方法，其中所述个体具有2型糖尿病。
[1348]
586.一种用于治疗非酒精性脂肪肝病(nafld)的方法，其包含向有需要的个体施用有效量的实施例561至576中任一种的组合物。
[1349]
587.如实施例586的方法，其中所述个体具有小儿nafld。
[1350]
588.如实施例586或587的方法，其中所述患者具有脂肪变性。
[1351]
589.一种用于治疗非酒精性脂肪变性肝炎(nash)的方法，其包含向有需要的个体施用有效量的实施例561至576中任一种的组合物。
[1352]
590.如实施例589的方法，其中所述个体具有纤维化。
[1353]
591.一种用于治疗肝硬化的方法，其包含向有需要的个体施用有效量的实施例561至576中任一种的组合物。
[1354]
592.如实施例591的方法，其中所述个体具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险或提高的死亡风险。
[1355]
593.如实施例577至592中任一种的方法，其中施用所述组合物使得个体的一种或多种代谢症状得到改善。
[1356]
594.如实施例593的方法，其中一种或多种代谢症状改善选自以下：游离脂肪酸及脂质代谢提高、粒线体功能改善、白色脂肪组织(wat)褐变、活性氧(ros)减少、谷胱甘肽(gsh)含量提高、肝脏发炎减少、肝细胞气球样膨大减少、肠道屏障功能改善、胰岛素分泌或葡萄糖耐受性提高。
[1357]
595.如实施例594的方法，其中在肝脏中发生游离脂肪酸及脂质代谢提高。
[1358]
596.如实施例594或595的方法，其中施用所述组合物使得在24小时的治疗期之后一种或多种代谢症状得到改善。
[1359]
597.如实施例577至596中任一种的方法，其中所述方法进一步包含确定以下中的一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个或更多个(例如全部)的含量：
[1360]
a)丙氨酸转氨酶(alt)；
[1361]
b)天冬氨酸转氨酶(ast)；
[1362]
c)脂联素；
[1363]
d)iii型胶原蛋白的n端片段(proc3)；
[1364]
e)胱天蛋白酶裂解的角蛋白18片段(m30及m65)；
[1365]
f)il-1β；
[1366]
g)c反应蛋白；
[1367]
h)piiinp；
[1368]
i)timp1；
[1369]
j)mcp-1；或
[1370]
k)fgf-21。
[1371]
598.如实施例597的方法，其中施用组合物使得在24小时的治疗期之后a)-k)中的一种或多种得到改善。
[1372]
599.如实施例577至598中任一种的方法，其中所述组合物在用餐之前施用。
[1373]
600.如实施例577至598中任一种的方法，其中所述组合物在用餐时施用。
[1374]
601.如实施例577至598中任一种的方法，其中所述组合物在用餐之后施用。
[1375]
602.如实施例577至601中任一种的方法，其中所述组合物与第二药剂一起施用。
[1376]
603.如实施例602的方法，其中所述第二药剂选自由以下组成的组：法尼酯x受体(fxr)激动剂、硬脂酰基coa去饱和酶抑制剂、ccr2及ccr5趋化激素拮抗剂、pparα及δ激动剂、胱天蛋白酶抑制剂、半乳糖凝集素-3抑制剂、乙酰coa羧化酶抑制剂或回肠钠胆酸共转运体抑制剂。
[1377]
604.一种包含实施例561至576中任一种的组合物的膳食组合物，例如其中膳食组合物选自医疗食品、功能食品或补充剂。
[1378]
605.如实施例561至576中任一种的组合物，其适用作膳食组合物，例如其中膳食组合物选自医疗食品、功能食品或补充剂。
[1379]
606.如实施例605的膳食组合物，其中所述个体具有2型糖尿病和/或相对较高bmi。
[1380]
607.如实施例605或606中任一种的膳食组合物，其中所述个体具有非酒精性脂肪肝病(nafld)。
[1381]
608.如实施例605至607中任一种的膳食组合物，其中所述个体具有小儿nafld。
[1382]
609.如实施例605至608中任一种的膳食组合物，其中所述患者具有脂肪变性。
[1383]
610.如实施例605至609中任一种的膳食组合物，其中所述个体具有非酒精性脂肪变性肝炎(nash)。
[1384]
611.如实施例610的膳食组合物，其中所述个体具有纤维化。
[1385]
612.如实施例604至606中任一种的膳食组合物，其中所述个体具有肝硬化。
[1386]
613.如实施例612的膳食组合物，其中所述个体具有肝癌、提高的肝脏衰竭风险或提高的死亡风险。
[1387]
614.如实施例604至613中任一种的膳食组合物，其中所述个体具有2型糖尿病。
[1388]
615.如实施例604至614中任一种的膳食组合物，其中所述组合物促进个体减轻体重。
[1389]
616.如前述实施例中任一种的方法或膳食组合物，其中所述组合物以约15g/d至约90g/d的剂量施用。
[1390]
617.如实施例616的方法或膳食组合物，其中所述组合物以约18g/d、约24g/d、约36g/d、约54g/d或约72g/d的剂量施用。
[1391]
618.如前述实施例中任一种的方法或膳食组合物，其中所述组合物每天施用一次、两次至三次。
[1392]
619.如前述实施例中任一种的方法或膳食组合物，其中所述组合物以约6g、约8g、约12g、约16g、约18g或约24g的剂量施用，每天三次。
[1393]
620.如前述实施例中任一种的组合物，其中：
[1394]
1)l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为至少1.5:1，或至少1.75:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为约2:1；
[1395]
2)l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少2:1，至少3:1，至少3.5:1，至少4:1或至少5:1，且不超过6:1，例如l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为约4:1；
[1396]
3)l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为至少1:1，至少3.5:3，至少4:3，或至少2:1，且不超过5:2，例如l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约4:3；
[1397]
4)l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少0.5:1，或至少0.75:1，且不超过1.5比1或不超过2:1，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:1；
[1398]
5)l-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少2:1，至少3:1，至少3.5:1，或至少4:1，且不超过5比1或不超过6:1，例如l-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约4:1(例如4:0.9)；
[1399]
6)可选地，其中l-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:3，大于1.5:3，约2:3，或约3:5，且不超过2.5:3或1:1，例如l-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约2:3，或l-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:5；或
[1400]
7)(1)至(6)中的两个、三个、四个、五个或六个的组合。
[1401]
621.如实施例620的组合物，其中：
[1402]
8)i-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少1:1，至少1.5:1，或约2:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如i-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为约2:1；
[1403]
9)i-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:3，大于1.5:3，或约2:3，且不超过2.5:3或不超过1:1，例如i-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约2:3；
[1404]
10)i-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少1:4，至少1:3，或约1:2，且不超过1:1或不超过2:1，例如i-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:2；
[1405]
11)i-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少1:1，至少1.5:1，或约2:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如i-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约2:1(例如2:0.9)；
[1406]
12)可选地，其中i-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:4，大于1.5:4，约1:3，或约3:10，且不超过1.5:3或2:3，例如i-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:3，或i-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:10；或
[1407]
13)(8)至(12)中的两个、三个、四个或五个的组合。
[1408]
622.如实施例620或621的组合物，其中：
[1409]
14)v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:4，大于1.5:4，或约1:3，且不超过1:2或不超过1:1，例如v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约1:3；
[1410]
15)v-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:5，或大于1.5:5，约1:4，且不超过1.5:4或不超过1:3，例如v-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:4；
[1411]
16)v-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少1:2，至少1.5:2，或约1:1，且不超过1.5:1或不超过2:1，例如v-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约1:1(例如1:0.9)；
[1412]
17)可选地，其中v-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:8，大于1:7，约1:6，或约3:20，且不超过1.5:6或1:3，例如v-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:6，或v-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:20；或
[1413]
18)(14)至(17)中的两个、三个或四个的组合。
[1414]
623.如实施例620至622中任一种的组合物，其中：
[1415]
19)r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:2，大于1.25:2，或约3:4，且不超过3.5:4或不超过1:1，例如r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约3:4；
[1416]
20)r-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少4:1，至少4:1.5，或约3:1，且不超过3:1.5或不超过3:2，例如r-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约3:1(例如3:0.9)；
[1417]
21)可选地，其中r-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:4，大于1:3，约1:2，或约9:20，且不超过1.5:2或1:1，例如r-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:2，或r-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约9:20；或
[1418]
22)(19)至(21)中的两个或三个的组合。
[1419]
624.如实施例620至623中任一种的组合物，其中：
[1420]
23)l-谷氨酰胺与nac实体或其盐的比率为至少5:1，至少5:1.5，或约4:1，且不超过4:1.5或不超过3:1，例如l-谷氨酰胺与nac实体或其盐的比率为约4:1(例如4:0.9)；
[1421]
24)可选地，其中l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:3，大于1.25:3，约2:3，或约3:5，且不超过2.5:3或1:1，例如l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体的比率为约2:3，或l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体的比率为约3:5；或
[1422]
25)(23)及(24)的组合。
[1423]
625.如实施例620至624中任一种的组合物，其中：
[1424]
26)nac实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:8，大于1:7，或约1:6，且不超过1:5或不超过1.5:5，例如nac实体与s-氨基酸实体的比率为约1:6(例如0.9:6或2.7:20)。
[1425]
626.如实施例620至625中任一种的组合物，其中所述组合物满足上文所定义的(1)至(7)的特性。
[1426]
627.如实施例620至626中任一种的组合物，其中所述组合物满足上文所定义的特性(1)至(26)中的任一种的至少2、3、4、5、6或7个特性。
[1427]
628.如实施例620至627中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为12:6:3:9:12:2.7。
[1428]
629.如实施例620至628中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体
与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12:6:3:9:12:2.7:18。
[1429]
630.如实施例620至629中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12:6:3:9:12:2.7:20。
[1430]
631.如实施例620至630中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％。
[1431]
632.如实施例620至631中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:18+/-15％。
[1432]
633.如实施例620至632中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12:6:3:9:12:2.7:9:9。在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12:6:3:9:12:2.7:10:10。
[1433]
634.如实施例620至633中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:9+/-15％:9+/-15％。在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:10+/-15％:10+/-15％。
[1434]
635.一种医药组合物，其包含前述实施例中任一种的组合物。
[1435]
636.如前述实施例中任一种的组合物，其中l-氨基酸实体选自由以下组成的组：l-亮氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸(hmb)、氧代-亮氨酸、异戊酰基-coa、d-亮氨酸及n-乙酰基-亮氨酸或其组合。
[1436]
637.如前述实施例中任一种的组合物，其中r-氨基酸实体选自由以下组成的组：l-精氨酸、鸟氨酸、精氨基丁二酸、瓜氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、胍丁胺、肌酸、d-精氨酸及n-乙酰基-精氨酸或其组合。
[1437]
638.如前述实施例中任一种的组合物，其中q-氨基酸实体选自由以下组成的组：l-谷氨酰胺、谷氨酸、氨甲酰基-p、谷氨酸、d-谷氨酰胺及n-乙酰基谷氨酰胺或其组合。
[1438]
639.如前述实施例中任一种的组合物，其中nac-氨基酸实体选自由以下组成的组：nac、丝氨酸、乙酰基丝氨酸、胱硫醚、谷胱甘肽、高半胱氨酸、甲硫氨酸、d-半胱氨酸、l-半胱氨酸、半胱胺及胱氨酸或其组合。
[1439]
640.如前述实施例中任一种的组合物，其中s-氨基酸实体选自由以下组成的组：l-丝氨酸、磷酸丝氨酸、p-羟基丙酮酸、l-甘氨酸、色氨酸、乙酰基丝氨酸、胱硫醚及磷脂酰丝氨酸。
[1440]
641.一种包含前述实施例中任一种的组合物的膳食组合物，例如其中膳食组合物
选自医疗食品、功能食品或补充剂。
[1441]
642.一种向个体提供氨基酸实体的方法，其包含向所述个体施用有效量之前述实施例中任一种的组合物。
[1442]
643.一种制造或制得组合物的方法，其包含形成包含以下的组合物：
[1443]
a)l-氨基酸实体，
[1444]
b)r-氨基酸实体，
[1445]
c)q-氨基酸实体；
[1446]
d)nac实体，例如nac；及
[1447]
可选地，e)s-氨基酸实体；
[1448]
限制条件为：
[1449]
f)至少一种氨基酸实体不以长度超过20个氨基酸残基的肽形式提供，其中：
[1450]
(i)(a)的氨基酸实体选自表2；及
[1451]
(ii)r-氨基酸实体及q-氨基酸实体中的一种或两种以与l-氨基酸实体相比更高的量(重量％)存在。
[1452]
644.如前述实施例中任一种的方法，其中：
[1453]
1)l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为至少1.5:1，或至少1.75:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如l-氨基酸实体与i-氨基酸实体的比率为约2:1；
[1454]
2)l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少2:1，至少3:1，至少3.5:1，至少4:1，或至少5:1，且不超过6:1，例如l-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为约4:1；
[1455]
3)l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为至少1:1，至少3.5:3，至少4:3，或至少2:1，且不超过5:2，例如l-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约4:3；
[1456]
4)l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少0.5:1，或至少0.75:1，且不超过1.5比1或不超过2:1，例如l-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:1；
[1457]
5)l-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少2:1，至少3:1，至少3.5:1，或至少4:1，且不超过5比1或不超过6:1，例如l-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约4:1(例如4:0.9)；
[1458]
6)可选地，其中l-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:3，大于1.5:3，约2:3，或约3:5，且不超过2.5:3或1:1，例如l-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约2:3，或l-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:5；或
[1459]
7)(1)至(6)中的两个、三个、四个、五个或六个的组合。
[1460]
645.如实施例644的方法，其中：
[1461]
8)i-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为至少1:1，至少1.5:1，或约2:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如i-氨基酸实体与v-氨基酸实体的比率为约2:1；
[1462]
9)i-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:3，大于1.5:3，或约2:3，且不超过2.5:3或不超过1:1，例如i-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约2:3；
[1463]
10)i-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为至少1:4，至少1:3，或约1:2，且不超过1:1或不超过2:1，例如i-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:2；
[1464]
11)i-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少1:1，至少1.5:1，或约2:1，且不超过2.5:1或不超过3:1，例如i-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约2:1(例如2:0.9)；
[1465]
12)可选地，其中i-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:4，大于1.5:4，约1:3，或约3:10，且不超过1.5:3或2:3，例如i-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:3，或i-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:10；或
[1466]
13)(8)至(12)中的两个、三个、四个或五个的组合。
[1467]
646.如实施例644或645的方法，其中：
[1468]
14)v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为大于1:4，大于1.5:4，或约1:3，且不超过1:2或不超过1:1，例如v-氨基酸实体与r-氨基酸实体的比率为约1:3；
[1469]
15)v-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:5，或大于1.5:5，约1:4，且不超过1.5:4或不超过1:3，例如v-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约1:4；
[1470]
16)v-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少1:2，至少1.5:2，或约1:1，且不超过1.5:1或不超过2:1，例如v-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约1:1(例如1:0.9)；
[1471]
17)可选地，其中v-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:8，大于1:7，约1:6，或约3:20，且不超过1.5:6或1:3，例如v-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:6，或v-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约3:20；或
[1472]
18)(14)至(17)中的两个、三个或四个的组合。
[1473]
647.如644至646实施例中任一种的方法，其中：
[1474]
19)r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为大于1:2，大于1.25:2，或约3:4，且不超过3.5:4或不超过1:1，例如r-氨基酸实体与l-谷氨酰胺或其盐的比率为约3:4；
[1475]
20)r-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为至少4:1，至少4:1.5，或约3:1，且不超过3:1.5或不超过3:2，例如r-氨基酸实体与nac实体或其盐的比率为约3:1(例如3:0.9)；
[1476]
21)可选地，其中r-氨基酸实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:4，大于1:3，约1:2，或约9:20，且不超过1.5:2或1:1，例如r-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约1:2，或r-氨基酸实体与s-氨基酸实体的比率为约9:20；或
[1477]
22)(19)至(21)中的两个或三个的组合。
[1478]
648.如实施例644至647中任一种的方法，其中：
[1479]
23)l-谷氨酰胺与nac实体或其盐的比率为至少5:1，至少5:1.5，或约4:1，且不超过4:1.5或不超过3:1，例如l-谷氨酰胺与nac实体或其盐的比率为约4:1(例如4:0.9)；
[1480]
24)可选地，其中l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:3，大于1.25:3，约2:3，或约3:5，且不超过2.5:3或1:1，例如l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体的比率为约2:3，或l-谷氨酰胺与s-氨基酸实体的比率为约3:5；或
[1481]
25)(23)及(24)的组合。
[1482]
649.如实施例644至648中任一种的方法，其中：
[1483]
26)nac实体与s-氨基酸实体或其盐的比率为大于1:8，大于1:7，或约1:6，且不超过1:5或不超过1.5:5，例如nac实体与s-氨基酸实体的比率为约1:6(例如0.9:6或2.7:20)。
[1484]
650.如实施例644至649中任一种的方法，其中所述组合物满足上文所定义的(1)至(7)的特性。
[1485]
651.如实施例644至650中任一种的方法，其中所述组合物满足上文所定义的特性(1)至(26)中的任一种的至少2、3、4、5、6或7个特性。
[1486]
652.如实施例644至651中任一种的方法，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与
v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为12:6:3:9:12:2.7。
[1487]
653.如实施例644至652中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12:6:3:9:12:2.7:18。
[1488]
654.如实施例644至653中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12:6:3:9:12:2.7:20。
[1489]
655.如实施例644至654中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐及nac或其盐的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％。
[1490]
656.如实施例644至655中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐及s-氨基酸实体的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:18+/-15％。
[1491]
657.如实施例644至656中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12:6:3:9:12:2.7:9:9。在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12:6:3:9:12:2.7:10:10。
[1492]
658.如实施例644至657中任一种的组合物，其中l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:9+/-15％:9+/-15％。在某些实施例中，l-氨基酸-实体、i-氨基酸-实体与v-氨基酸-实体的组合与r-氨基酸实体、l-谷氨酰胺或其盐、nac或其盐、s-氨基酸实体及l-甘氨酸的比率为12+/-15％:6+/-15％:3+/-15％:9+/-15％:12+/-15％:2.7+/-15％:10+/-15％:10+/-15％。
[1493]
659.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够增强脂肪酸氧化，例如降低不饱和脂肪酸含量或提高酰基肉碱含量(例如在stam小鼠模型或fatzo小鼠模型中)中的一种或两种。在某些实施例中，不饱和脂肪酸的含量降低为例如如实例9中所描述量测的表53中显示的含量改变的至少25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％。在某些实施例中，酰基肉碱含量提高为例如如实例9中所描述量测的表53中显示的含量改变的至少25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％。
[1494]
660.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使肝纤维化或肝脏损伤减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用丙氨酸转氨酶(alt)测定，例如基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[1495]
661.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使肝纤维化或肝脏损伤减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、
25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用天冬氨酸转氨酶测定(ast)，例如基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[1496]
662.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使丙氨酸转氨酶(alt)减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用alt测定，例如基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[1497]
663.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够天冬氨酸转氨酶(ast)减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用ast测定，例如基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[1498]
664.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使肝纤维化或肝脏损伤减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用羟脯氨酸测定，例如基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[1499]
665.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使羟脯氨酸含量减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％，如使用羟脯氨酸测定，例如基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例4中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照)。
[1500]
666.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使肝纤维化或肝脏损伤减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用lx-2细胞，例如lx-2细胞中的col1a1、acta2和/或timp2的含量所检测，例如，如使用核酸扩增方法，例如pcr或qrt-pcr所评估，例如，如实例7中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；nac；或包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物)。
[1501]
667.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够一种或多种胶原蛋白生物标记物(例如col1a1、acta2和/或timp2)的表达减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用lx-2细胞，例如lx-2细胞中的col1a1、acta2和/或timp2的含量所检测，例如，如使用核酸扩增方法，例如pcr或qrt-pcr所评估，例如，如实例7中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；或nac)。
[1502]
668.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使一种或多种胶原蛋白生物标记物(例如col1a1)的表达减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用初级肝脏星状细胞，例如初级肝脏星状细胞中的col1a1的含量所检测，例如，如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所评估，例如，如实例12中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰
胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[1503]
669.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使一种或多种胶原蛋白生物标记物(例如原胶原1α1)的表达提高(increasing或increases)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用初级肝脏星状细胞，例如初级肝脏星状细胞中的原胶原1α1的含量所检测，例如，如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所评估，例如，如实例12中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[1504]
670.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使肝细胞发炎减少(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用hepg2细胞所检测，例如降低的活性，例如降低的hepg2细胞中报导子测定中的nf-kb的tnfα诱导活性，如实例8中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；或nac)。
[1505]
671.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使hepg2细胞中的nf-kb的tnfα诱导活性降低(reducing或reduces)至少5％、10％、15％、20％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，如使用hepg2细胞所检测，例如降低的活性，例如降低的hepg2细胞中的报导子测定中的nf-kb的tnfα诱导活性，如实例8中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；或nac)。
[1506]
672.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使例如stam小鼠模型或fatzo小鼠模型中的葡萄糖耐受性提高(increasing或increases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用葡萄糖含量的测定，例如使用葡萄糖氧化酶，例如使用血糖仪所检测，例如，如实例5中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照或阳性对照，例如二甲双胍)。
[1507]
673.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使例如stam小鼠模型或fatzo小鼠模型中的血糖代谢提高(increasing或increases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用葡萄糖含量的测定，例如使用葡萄糖氧化酶，例如使用血糖仪所检测，例如，如实例5中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照或阳性对照，例如二甲双胍)。
[1508]
674.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使脂肪变性和/或发炎减少(decreasing或decreases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用mcp1/ccl2测定，例如在初级肝细胞中，例如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例10中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组
合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[1509]
675.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使mcp1/ccl2含量降低(decreasing或decreases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用mcp1/ccl2测定，例如在初级肝细胞中，例如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例10中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[1510]
676.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使tnfα发炎反应减少(decreasing或decreases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用mcp1/ccl2测定或il-6测定，例如在初级肝脏星状细胞中，例如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例11中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[1511]
677.如前述实施例中任一种的组合物或方法，其中所述组合物能够使mcp1/ccl2含量和/或il-6含量减少(decreasing或decreases)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，如使用mcp1/ccl2测定或il-6测定，例如在初级肝脏星状细胞中，例如使用基于抗体的检测测定，例如elisa所检测，例如，如实例11中所描述，例如相对于参考组合物(例如载体对照；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸的氨基酸组合物；包含l-精氨酸、l-谷氨酰胺及nac的氨基酸组合物；包含l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸及l-谷氨酰胺的氨基酸组合物；缬氨酸；谷氨酰胺；精氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；或nac)。
[1512]
678.如上述实施例中任一种的适用作药物的组合物。
[1513]
679.如上述实施例中任一种的适用于本文公开的方法的组合物。
[1514]
680.如上述实施例中任一种的组合物在制造药物中的用途。
[1515]
681.如上述实施例中任一种项的组合物在制造用于治疗本文公开的任何病症或病况的药物中的用途。
[1516]
尽管上文实施例中的多种以附属形式显示，预期实施例中的任一种或其组合可呈独立形式。
[1517]
实例
[1518]
阐述以下实例以帮助理解本发明，但不意欲且不应理解为以任何方式限制其范畴。
[1519]
实例1：产生氨基酸组合物的方法
[1520]
本发明的氨基酸组合物及其调配物可根据此项技术中已知的方法制得。其也可借由下文所描述的方法制得。
[1521]
掺合且筛分起始材料(个别氨基酸及赋形剂)以产生粉末掺合物，其填充至条状包装中。在用于经口施用时使条状包装的内容物分散于水中。混合及复原方案的一个实例及由此制得的条状包装调配物提供于下。
[1522]
混合方案
[1523]
1.将成分称取至容器中。
[1524]
2.密封容器且放置于turbula混合器中且在低设置下混合内容物2分钟。
[1525]
3.使用14号筛网筛分掺合粉末且使未穿过筛的任何凝集块分开。
[1526]
4.使经掺合及筛分的粉末转移回到容器中且在低设置下在turbula混合器中混合10分钟。
[1527]
表13.条状包装调配物
[1528][1529][1530]
复原方案
[1531]
根据以下方案复原条状包装调配物：
[1532]
1.称量粉末掺合物的总计(g)“量/条状包装”。
[1533]
2.将约118.3g(4oz)冷过滤水称取至可密封容器中。
[1534]
3.将粉末掺合物的“每条状包装量”转移至可密封容器且密封容器。
[1535]
4.剧烈摇晃容器20至30秒。
[1536]
实例2：氨基酸组合物的分析型特征
[1537]
下文所描述用于表征根据实例1制备的氨基酸组合物的调配物的一些物理化学特性的方法。
[1538]
鉴别及测定。借由反相hplc评估氨基酸组合物a-1及氨基酸组合物a-2的调配物中存在的各氨基酸的鉴别及测定标示值％。
[1539]
氨基酸分析
[1540]
简言的，发展使用反相高压液相层析(hplc)的氨基酸分析方法以量测在再悬浮之后本文所描述的氨基酸组合物的调配物中的游离氨基酸含量(n-乙酰半胱氨酸除外)。根据agilent technical注释修改管柱及层析条件：“使用agilent poroshell hph-c18管柱(agilent application注释5991-5571en)的自动化氨基酸分析”。样品中的初级氨基酸使用agilent 1260或1290uplc孔板自动进样器，使用邻苯二甲醛(o-phthaldialdehyde)(opa)在线衍生。使用agilent zorbax eclipse plus管柱(4.6mm id
×
100mm，3.5μm)实现分离。使用荧光(fld)，在340nm放射/450nm激发波长及uv检测下在338nm下检测初级氨基酸的opa衍生物。根据氨基酸标准物的已知代表性层析图，预期个别氨基酸溶离。样品中的氨基酸浓度借由使样品峰面积符合标准曲线确定。或者，可使用accq-tag化学物质及标准物(waters)衍生化进行氨基酸分析。
[1541]
氨基酸分析：n-乙酰半胱氨酸
[1542]
对于n-乙酰半胱氨酸(nac)，基于关于“乙酰半胱氨酸”的美国药典专论第39章(united states pharmacopeia monograph chapter 39)(usp《39》)发展hplc测试方法以确定本文所描述的调配物的复原粉末的n-乙酰半胱氨酸含量。此hplc方法涉及使用反相管柱，而无任何衍生化步骤。使用c-18主链作为固定相及0.05m kh2po4作为移动相的管柱进行分离。在214nm下进行uv检测。随后用5％乙腈冲洗管柱以在每次注射结束时移除任何残余样品组分。在工序结束时，使用涉及更强有机溶剂的低流速“系统冲洗”程序来保存储存管柱。根据标准物的已知代表性层析图，预期n-乙酰半胱氨酸溶离。样品中的n-乙酰半胱氨酸浓度借由使样品峰面积符合标准曲线确定。
[1543]
氨基酸组合物a-1的调配物的结果(相比于每份理论g)显示于表14中。对于谷氨酰胺，观测到1.84g的每份平均质量；相比于每份2.00g理论值，此产生92％的一致性％(或标示值％)。对于精氨酸，观测到1.69g的每份平均质量；相比于每份1.50g理论值，此产生113％的一致性％(或标示值％)。对于缬氨酸，观测到0.51g的每份平均质量；相比于每份0.50g理论值，此产生101％的一致性％(或标示值％)。对于异亮氨酸，观测到0.52g的每份平均质量；相比于每份0.50g理论值，此产生104％的一致性％(或标示值％)。对于亮氨酸，观测到1.04g的每份平均质量；相比于每份1.00g理论值，此产生104％的一致性％(或标示值％)。对于n-乙酰半胱氨酸(nac)，观测到0.28g的每份平均质量；相比于每份0.25g理论值，此产生111％的一致性％(或标示值％)。总体而言，氨基酸组合物a-1的调配物中的氨基酸及氨基酸衍生物具有92至113％的标示值％范围。
[1544]
表14.标示值％结果：氨基酸组合物a-1的调配物
[1545][1546]
氨基酸组合物a-2的调配物的结果(相比于每份理论g)显示于表15中。对于谷氨酰胺，观测到2.102g的每份平均质量；相比于每份2.00g理论值，此产生105.1％的一致性％(或标示值％)。对于精氨酸，观测到1.922g的每份平均质量；相比于每份1.5g理论值，此产生107.5％的一致性％(或标示值％)。对于缬氨酸，观测到0.536g的每份平均质量；相比于每份0.50g理论值，此产生107.5％的一致性％(或标示值％)。对于异亮氨酸，观测到0.531g的每份平均质量；相比于每份0.50g理论值，此产生106.2％的一致性％(或标示值％)。对于亮氨酸，观测到1.058g的每份平均质量；相比于每份1.00g理论值，此产生105.8％的一致性％(或标示值％)。对于n-乙酰半胱氨酸(nac)，观测到0.153g的每份平均质量；相比于每份0.15g理论值，此产生101.7％的一致性％(或标示值％)。总体而言，氨基酸组合物a-2的调配物中的氨基酸及氨基酸衍生物具有101至107％的标示值％范围。个别样品具有98.3至108.8％的标示值％范围。
[1547]
表15.标示值％结果：氨基酸组合物a-2的调配物
[1548][1549]
实例3：氨基酸组合物的药物动力学(pk)特征
[1550]
本发明的氨基酸组合物特征在于在啮齿动物及人类个体中响应于组合物摄取其对氨基酸浓度的药物动力学作用。
[1551]
大鼠药物动力学
[1552]
在大鼠中测试氨基酸组合物a-1的调配物的药物动力学作用。在隔夜禁食之后，借由经口管饲向大鼠给与调配物。恰好在给药之前且在其后5、15、30、60、120、240及360分钟时采集门静脉及颈静脉血液。量测氨基酸含量的血浆浓度，且确定最大浓度(c
最大
)、最大浓度时间(t
最大
)及半衰期(t
1/2
)。针对基线内源性氨基酸含量，校正最大浓度值。大鼠pk研究结果显示于以下表16-21中。
[1553]
表16.氨基酸组合物a-1的亮氨酸大鼠pk调配物
[1554][1555]
表17.氨基酸组合物a-1的异亮氨酸大鼠pk调配物
[1556][1557]
表18.氨基酸组合物a-1的缬氨酸大鼠pk调配物
[1558][1559]
表19.氨基酸组合物a-1的精氨酸大鼠pk调配物
[1560][1561]
表20.氨基酸组合物a-1的谷氨酰胺大鼠pk调配物
[1562][1563]
表21.氨基酸组合物a-1的n-乙酰半胱氨酸大鼠pk调配物
[1564][1565]
假定异速生长(allometric scaling)将大鼠mg/kg剂量转化成人类等效mg/kg剂量。此等等效mg/kg剂量及人类克剂量克(假定体重为70kg)的比较显示于表22中。
[1566]
表22.氨基酸剂量：大鼠及人类的比较
[1567]
剂量leuilevalargglnnac大鼠(mg/kg)26613313339953166
人类(mg/kg)432121648611人类(g)31.51.54.560.75
[1568]
人类药物动力学
[1569]
在年龄介于18与40之间的六个表观健康人类个体中评估根据实例1制备的经口施用的氨基酸组合物a-1的调配物对氨基酸药物动力学的影响。确定两种剂量下响应于氨基酸组合物a-1的调配物的摄取的氨基酸的血浆浓度改变(高：3个条状包装，约18g氨基酸；对比于低：1个条状包装，约6g氨基酸)。在初始基线之后及其后的特定时间间隔[亦即，0(预施用)、15、30、60、90、120、150、180、210及240分钟]采集血液样品(3ml)。量测氨基酸含量的血浆浓度，且确定最大浓度(c
最大
)、最大浓度时间(t
最大
)、半衰期(t
1/2
)及(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸及谷氨酰胺的血浆浓度时间疗程的曲线下面积)的总暴露量。针对基线内源性氨基酸含量，校正最大浓度及总暴露值。此等结果显示于表23至27中。
[1570]
表23.氨基酸组合物a-1的亮氨酸人类pk调配物
[1571][1572]
表24.氨基酸组合物a-1的异亮氨酸人类pk调配物
[1573][1574]
表25.氨基酸组合物a-1的缬氨酸人类pk调配物
[1575][1576]
表26.氨基酸组合物a-1的精氨酸人类pk调配物
[1577][1578]
表27.氨基酸组合物a-1的谷氨酰胺人类pk调配物
[1579][1580]
实例4：治疗剂氨基酸组合物a-1治疗改善化学诱导的纤维化的动物模型中的肝纤维化
[1581]
测试氨基酸组合物a-1影响化学诱导的肝纤维化的模型中的肝纤维化的能力。在小鼠中使用四氯化碳；ccl4化学诱导实验肝脏纤维化的常用模型(gideon smith，皮肤及肝脏纤维化的动物模型(animal models of cutaneous and hepatic fibrosis)；progress in molecular biology and translational science，第105卷，第371至408页)。ccl4在4周治疗之后产生发炎、肝细胞损伤、坏死及纤维化且在8周之后产生肝硬化。四氯化碳(ccl4)在小鼠中诱导的肝纤维化类似于包括发炎、再生及纤维形成的人类肝纤维化的重要特性。
[1582]
动物
[1583]
7至8周龄的雄性balb/c小鼠用于此研究。圈养动物，每笼四个，保持标准12小时光照周期且自由摄取水及标准小鼠食物。食物及水可随意获得。
[1584]
程序
[1585]
用5％ ccl4或载体腹膜内(ip)给与动物，典型地一周3天，持续4周。每周调配ccl4。借由经口管饲，以23mg/ml、76mg/ml或153mg/ml给与10ml/kg氨基酸组合物a-1，每天两次。每周称量动物两次且经由后眼眶窦采集血液，每周一次，采集血清。在四个周之后，采集血液以便血清分离且经由颈椎脱位术使小鼠安乐死。移除肝脏的两个叶片(lobe)，使左叶放置于含有10％福尔马林的导管中以便于病理组织学，而称量右叶且放置于含有2.3mm氧化锆珠粒及2
×
体积1:100蛋白酶抑制剂(sigma aldrich，#p8340)的珠磨器导管中。在珠磨器机器中使组织样品均质化2分钟且即刻在3,000rpm下在4℃下快速离心15分钟。在2周及4周时分析血清的alt/ast含量。进一步评估均质化肝脏样品的羟脯氨酸(hyp)含量以鉴别肝纤维化形成。
[1586]
羟脯氨酸(第4周)
[1587]
羟脯氨酸(4-羟脯氨酸，hyp)为共同非蛋白型氨基酸且用作说明纤维化的胶原蛋白存在量之间接量度。经ccl4处理的动物中的肝脏hyp含量水平明显高于经载体处理的动
物。数据为平均值
±
标准偏差(stdev)；“comp a-1”：氨基酸组合物a-1；*p《0.05借由未配对t测试与载体对照进行比较。原始数据显示于表28中。
[1588]
表28.肝脏含量水平结果
[1589][1590]
ast含量及alt含量
[1591]
天冬氨酸转氨酶(ast)及丙氨酸转氨酶(alt)为通常量测的肝脏健康的临床生物标记物。ast及alt含量在施用ccl4的动物中均明显提高，持续所述研究的整个持续时间，表明发生肝脏损伤。数据为平均值
±
标准偏差(stdev)；“comp a-1”：氨基酸组合物a-1；p值与载体/ccl4对照进行比较；借由单尾t测试；n.s.不显著。原始数据显示于表29及30中。
[1592]
表29.alt含量结果
[1593][1594]
表30.ast含量结果
[1595][1596][1597]
概述
[1598]
用氨基酸组合物a-1治疗导致化学诱导的纤维化减少，如降低的羟脯氨酸含量、胶原蛋白产生标记物所指示，且使得肝脏损伤的临床生物标记物得到改善，如肝脏酶alt及ast的含量降低所指示(表31至33)。
[1599]
表31.肝脏hyp含量水平结果：原始数据
[1600][1601]
表32.alt含量结果：原始数据
[1602][1603]
[1604]
表33.ast含量结果：原始数据
[1605][1606]
实例5：用氨基酸组合物a-1治疗处理提高临床前动物模型的口服葡萄糖耐受性
[1607]
测试氨基酸组合物a-1及二甲双胍影响基因肥胖b6.cg-lep
ob
/j(ob/ob)小鼠模型(maida a等人，2010，pmid:20972533)的葡萄糖耐受性的能力。
[1608]
模型描述
[1609]
b6.cg-lep
ob
/j(ob/ob)具有(lep)基因的自发突变。ob/ob小鼠展现暴食、肥胖症及代谢综合征/t2dm类症状，例如高血糖症、高胰岛素血症及胰岛素抗性。ob/ob小鼠具有减弱的肠道障壁功能、肠道微生物易位及肝脏星状细胞的发炎性纤维发生表型(brun p等人，2004，pmid:17023554)。ob/ob小鼠股四头肌中发生骨胳肌肉发育不全，类似于人类老化效果(hamrick mw等人，2004，pmid:15003785)。ob/ob小鼠展现葡萄糖及胰岛素不耐受性。二甲双胍降低血浆葡萄糖(cool b等人，cell metab 2006，pmid:16753576)、肝脏三酸甘油酯及ob/ob小鼠中的反向nafld(lin hz等人，2000，pmid:10973319；cool b等人，cell metab 2006，pmid:16753576)。二甲双胍治疗的单次剂量减少血糖且提高c57/bl6中的葡萄糖耐受性(ogtt)。
[1610]
实验设计
[1611]
使八周龄雄性ob/ob小鼠经受测试物品(氨基酸组合物a-1及二甲双胍)的治疗，继而在第3天经受口服葡萄糖耐受性测试(ogtt)。在前1天借由体重及未禁食的血糖将小鼠随机分组。在am投药之前，在第1天、第2天及第3天，在每天上午记录体重。借由经口管饲，以10ml/kg给与测试物品。基于每天体重计算测试物品剂量。治疗时程及剂量列出于以下部分(表34)中。am剂量在0700施用，且pm剂量在1800施用。在第3天，在6小时禁食之后进行口服
葡萄糖耐受性测试(ogtt)。
[1612]
表34.治疗时程
[1613][1614][1615]
基线葡萄糖及生物化学(胰岛素、三酸甘油酯及胆固醇)
[1616]
在ogtt测试之前，使小鼠禁食6小时。在0700小时下在第3天移除食品；在禁食期间提供水。自剪尾或面部穿刺在-30分钟时(相对于ogtt)将血液样品采集至k2edta套管中，以便于基线葡萄糖及血液生物化学(胰岛素、三酸甘油酯及胆固醇)。借由血糖仪(sdi statstrip xpress或等效物)量测血糖。在k2edta中采集血浆且保存在-80℃下。
[1617]
口服葡萄糖耐受性测试(ogtt)
[1618]
在-30分钟时抽取小鼠血液以便获得基线葡萄糖及血浆。随后借由经口管饲，在-30分钟时给与测试物品。在2.0g/kg体重的剂量下经口(p.o.)施用葡萄糖。紧接着在葡萄糖注射之前0分钟，且随后其后15、30、60、120及240分钟量测血糖含量(显示为以下表35中的0.25、0.5、1、2及4小时)。
[1619]
结果显示于表35中。数据为平均值
±
标准偏差(stdev)。(借由邓尼特多重比较(dunnett's multiple comparisons)p值：相比于载体对照，**p《0.005；相比于载体对照，***p《0.001；相比于载体对照，****p《0.0005。)
[1620]
结果
[1621]
表35.ogtt结果：平均血糖含量(mg/dl)及标准偏差(stdev)
[1622][1623]
概述
[1624]
用氨基酸组合物a-1治疗使得口服葡萄糖耐受性得到改善，如经口葡萄糖装载后血糖消除率改善指示。另外，用氨基酸组合物a-1治疗3天不改变ob/ob小鼠中的基线血糖(表36)。
[1625]
表36.ogtt结果：血糖含量(mg/dl)原始数据
[1626][1627][1628]
chemblocks inc.)再悬浮于0.5％甲基纤维素水溶液中直至3mg/ml(10
×
)。氨基酸组合物a-1以每天两次(9am及7pm)1500mg/kg的剂量施用。oca以每天一次(9am)30mg/kg的剂量施用。
[1639]
组织学分析
[1640]
对于以下测定，使用第2组(载体)、第3组(氨基酸组合物a-1)及第4组(oca)中的小鼠的肝脏样品。对于he染色，自用布安氏溶液预先固定且用利利-迈尔氏(lillie-mayer)苏木精(hematoxylin)(muto pure chemicals co.,ltd.,japan)及曙红溶液(wako pure chemical industries)染色的肝脏组织石蜡块切割切片。根据kleiner的准则计算nafld活性评分(nas)(kleiner de.等人，hepatology，2005；41:1313)。
[1641]
实验设计
[1642]
研究组
[1643]
第1组：stz：用正常饮食随意喂饲十个新生经stz预致敏的小鼠，而不进行任何处理，直至9周龄为止。
[1644]
第2组：载体：自6至9周龄，以每天两次(9am及7pm)10ml/kg的体积向十个nash小鼠经口施用载体(10％磷酸盐缓冲盐水，ph 7.2)。
[1645]
第3组：氨基酸组合物a-1：自6至9周龄，以每天两次(9am及7pm)1500mg/kg的剂量向十个nash小鼠经口施用补充有氨基酸组合物a-1的灌注水。
[1646]
第4组：oca：自6至9周龄，以每天一次(9am)30mg/kg的剂量向十个nash小鼠经口施用补充有oca的0.5％甲基纤维素。
[1647]
第5组：正常：用正常饮食随意喂饲十个正常小鼠，而不进行任何处理，直至9周龄为止。
[1648]
第6组：hfd：用高脂饮食随意喂饲十个正常小鼠，而不进行任何处理，直至9周龄为止。
[1649]
组织学分析结果：he染色、nafld活性评分及α-平滑肌肌动蛋白染色非酒精性脂肪肝病活性评分结果
[1650]
经由组织学分析及来自各动物的h&e染色肝脏切片评级评估非酒精性脂肪肝病(nafld)活性评分。此评分为对脂肪变性(0-3)、发炎(0-2)及肝细胞气球样膨大(0-2)的程度进行评级的三个个别分数的总和。使用kleiner等人的评分标准对全部组织进行分级(kleiner等人hepatology.2005，41(6):1313-21)。结果显示于表37中。数据为平均值
±
标准偏差(stdev)。喂饲标准食物的正常c57bl/6小鼠具有0+/-0的平均评分。经载体处理的stam
tm
小鼠具有4.7+/-0.67的平均评分。经氨基酸组合物a-1处理的小鼠具有3.1+/-0.74的平均评分。经oca处理的小鼠具有2.9+/-0.74的平均评分。对于nafld活性评分，当使用邓尼特(dunnett)多重比较测试进行比较时，氨基酸组合物a-1及oca两者在统计学上均与载体不同(氨基酸组合物a-1p＝0.0001，oca p＝0.0001)。
[1651]
类似地，相比于1.6+/-0.52的经载体处理的stam
tm
小鼠的平均气球样膨大评分，经氨基酸组合物a-1处理的小鼠显示0.4+/-0.52的平均气球样膨大评分，且经oca处理的小鼠的平均气球样膨大评分为0.3+/-0.48。对于气球样膨大评分，当使用邓尼特多重比较测试进行比较时，氨基酸组合物a-1及oca两者在统计学上均与载体不同(氨基酸组合物a-1p＝0.0001，oca p＝0.0001)。原始数据显示于表37至40中。
[1652]
表37.nafld活性评分
[1653][1654]
表38.nafld活性：脂肪变性评分
[1655][1656]
表39.nafld活性：发炎评分
[1657][1658][1659]
表40.nafld活性：气球样膨大评分
[1660][1661]
纤维化：天狼星红染色结果
[1662]
借由来自各动物的染色肝脏切片的天狼星红分析阳性染色的单元面积评估纤维化。使用阳性染色面积百分比定量图像，用作纤维化量度。此分析结果显示于表39中。数据为平均值
±
标准偏差(stdev)。喂饲标准食物的正常c57bl/6小鼠具有0.286+/-0.09的平均阳性面积。经载体处理的stam
tm
小鼠具有1.1+/-0.26的平均阳性面积。经氨基酸组合物a-1处理的小鼠具有0.828+/-0.33的平均阳性面积。经oca处理的小鼠具有0.776+/-0.25的平均评分。当使用邓尼特多重比较测试进行比较时，氨基酸组合物a-1及oca在统计学上与载体不同(氨基酸组合物a-1p＝0.00494，oca p《0.016)。原始数据显示于表41中。
[1663]
表41.纤维化(平均阳性染色面积，天狼星红)
[1664][1665]
类似于在用氨基酸组合物a-1处理后stam小鼠模型中的nafld活性评分、气球样膨大及纤维化的统计显著改善(图1a)，用氨基酸组合物a-1处理后高脂、高果糖及胆固醇饮食(hffc)小鼠模型中确定出nafld活性评分、气球样膨大及纤维化统计显著改善(图1b)。
[1666]
α-平滑肌肌动蛋白(α-sma)染色结果
[1667]
染色全部小鼠的肝脏切片的标记物α-平滑肌肌动蛋白(αsma)以鉴别活化肝脏星状细胞。使用阳性染色面积百分比定量图像，用作星状细胞活化的量度。结果显示于表42中。数据为平均值
±
标准偏差(stdev)；p值与经载体处理的stam小鼠对照进行比较；借由单尾t测试。
[1668]
喂饲标准食物的正常c57bl/6小鼠具有0.682+/-0.26的平均阳性面积。经载体处理的stam
tm
小鼠具有2.128+/-0.50的平均阳性面积。经氨基酸组合物a-1处理的小鼠具有1.657+/-0.84的平均阳性面积。经oca处理的小鼠具有1.562+/-0.31的平均评分。
[1669]
表42.活化肝脏星状细胞(平均阳性染色面积，α-平滑肌肌动蛋白)
[1670][1671]
概述
[1672]
用氨基酸组合物a-1治疗使nash严重程度明显降低至等效于借由oca的法尼酯x受体(fxr)抑制的水平(intercept pharmaceuticals,inc.目前正临床研究其nash治疗)，如nafld活性评分(nas)显著降低(相比于2.9+/-0.74的经oca处理的小鼠平均评分，平均nas：氨基酸组合物a-1的3.1+/-0.74与4.7+/-0.67)的经载体处理的stam
tm
小鼠平均评分所指示，及纤维化发展，如肝脏星状细胞活化下调(平均αsma阳性染色面积：相比于1.562+/-0.31的经oca处理的小鼠平均面积，氨基酸组合物a-1的1.657+/-0.84与2.128+/-0.50的经载体处理的stam
tm
小鼠平均面积)所指示。
[1673]
表43.nafld活性评分：原始数据
[1674][1675]
表44.nafld活性：脂肪变性评分：原始数据
[1676][1677]
表45.nafld活性：发炎评分：原始数据
[1678][1679]
表46.nafld活性：气球样膨大评分：原始数据
[1680][1681]
表47.纤维化(平均阳性染色面积，天狼星红)：原始数据
[1682][1683]
表48.活化肝脏星状细胞(平均阳性染色面积，α-平滑肌肌动蛋白)
[1684][1685]
实例7：用氨基酸组合物处理的肝脏星状细胞中的纤维发生基因表达减少
[1686]
健康肝脏中的肝脏星状细胞在狄氏腔(space of disse)中，在肝细胞与肝脏窦状
隙内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cell)之间。响应于肝脏损伤肝脏星状细胞变得活化、增殖及收缩，提高αsma产量、i型及iii型胶原蛋白及特定mmp及timp蛋白质分泌。lx-2选为细胞活化肝脏星状细胞的模型且用于测试特定氨基酸组合物是否将减少tgfβ1诱导的纤维发生基因表达。
[1687]
在第0天，在胶原蛋白i涂布的96孔微孔板(thermofisher)中在补充有2％经热灭活胎牛血清(hi-fbs，hyclone)及0.2％ primocin(invivogen)且在37℃，5％ co2下培育隔夜的达尔伯克氏改良伊格尔培养基(dmem，corning)中使lx-2肝脏星状细胞(millipore)每孔接种1.67e4细胞。在第1天，细胞用150μl/孔dpbs(gibco)洗涤两次且用无氨基酸dmem(us biologicals)置换，其含有所定义的定制氨基酸浓度，基于血液中的平均生理学浓度，基于人类代谢物组数据库(1、2、3)中公布的值，其具有25mm葡萄糖、1mm丙酮酸钠及基础hmdb中存在的40
×
浓度下的所定义的氨基酸组合物livrq+n-乙酰半胱氨酸、livrq、rq+n-乙酰半胱氨酸、n-乙酰半胱氨酸、liv的剂量曲线衍生的氨基酸浓度或单独地具有亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸50x hmdb衍生浓度(人类代谢物组数据库(wishart ds,tzur d,knox c等人,hmdb：人类代谢物组数据库(hmdb:human metabolome database).nucleic acids res.2007年1月；35(数据库期号):d521-6.17202168))。含有n-乙酰半胱氨酸的组合用10mm给与。在37℃，5％co2下预处理细胞6小时。在预处理之后，使tgfβ1(r&d系统)或载体掺入各孔中，最终浓度为5ng/ml，且在此刺激下在37℃，5％ co2下培育细胞另外12小时。
[1688]
在12小时培育之后，如使用快速通道细胞多重套组(fastlane cell multiplex kit)(qiagen)所描述，如制造商方案中所描述，制备rna。在使用快速通道细胞多重套组之后续qrt-pcr实验中利用两微升细胞裂解物，降低的最终qpcr反应物体积为20μl。在裂解物上进行定量pcr以确定胶原蛋白-1a1表达，其使用δδct方法，使用taqman引物探针标准化为β-肌动蛋白管家表达(整合dna技术：col1a1，hs.pt.58.15517795；actb，hs.pt.39a.22214847；acta2，hs.pt.56a.24853961；timp2，hs.pt.58.14780594)。
[1689]
结果：
[1690]
表49显示相比于具有或不具有tgfβ1刺激的载体用氨基酸组合处理的lx-2细胞中的col1a1、acta2及timp2基因表达。livrq+n-乙酰半胱氨酸、livrq、rq+n-乙酰半胱氨酸及n-乙酰半胱氨酸降低col1a1表达及timp2表达。livrq+n-乙酰半胱氨酸显示col1a1、acta2及timp2基因表达的最大降低。livrq-n-乙酰半胱氨酸降低acta2表达明显大于单独的n-乙酰半胱氨酸、rq+n-乙酰半胱氨酸及liv。livrq+n-乙酰半胱氨酸降低timp2表达明显大于其他组合中的任一种(表49)。
[1691]
表49.
[1692]
[1693][1694]
表50显示在1
×
或50
×
hmdb衍生氨基酸浓度下在具有或不具有tgfβ1刺激的情况下个别氨基酸的col1a1表达。单独地，仅半胱氨酸显示在50
×
下col1a1表达显著减小。
[1695]
表50.
[1696][1697][1698]
实例8：用氨基酸组合物处理后肝细胞发炎减少
[1699]
使用稳定地表达nf-kb荧光素酶报导系统(signosis，inc.)的hepg2肝细胞癌细胞评估氨基酸影响肝细胞发炎的能力。在96孔微孔板(thermofisher)中在补充有0.1％经热灭活胎牛血清(hi-fbs，hyclone)及0.2％ primocin(invivogen)且在37℃，5％ co2下培育隔夜的达尔伯克氏改良伊格尔培养基(dmem，corning)中在第0天以4.5e4接种hepg2细胞。在第1天，细胞用150μl/孔dpbs(gibco)洗涤一次且用无氨基酸dmem(us biologicals)置换，其含有所定义的定制氨基酸浓度，基于血液中的平均生理学浓度，基于人类代谢物组数据库(wishart ds,tzur d,knox c,等人,hmdb：人类代谢物组数据库.nucleic acids res.2007年1月；35(数据库期号):d521-6.17202168)中公布的值，其在50
×
下具有25mm葡萄糖、1mm丙酮酸钠及剂量曲线的所定义的氨基酸组合物(亦即，载体、livrq+n-乙酰半胱氨酸、livrq、rq+n-乙酰半胱氨酸、单独的n-乙酰半胱氨酸，liv或单独地与亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、谷氨酰胺及半胱氨酸一起)(表51)。在37℃，5％ co2下在限定的培养基中预处理细胞12小时。在预处理之后，使tnfα(r&d系统)或载体掺入各孔中以便达到100pm的最终浓度且在此刺激下在37℃，5％ co2下培育细胞额外6小时。在12小时培育之后，在150ul冷pbs中洗涤细胞1次且使用惰性裂解缓冲液溶解且根据制造商方案(signosis)进行荧光素酶测定。使用bio-tek synergyh4读板仪及亮度计评估萤火虫荧光素酶活性(sitcheran r*,comb wc,cogswell pc,baldwin as*。谷氨酸受体信号传导中的表皮成长因子受体对nf-kappab的必需作用(essential role for epidermalgrowth factor receptor inglutamate receptor signaling to nf-kappab).mol cell biol.(2008)8月；28(16):5061-70。电子版2008年6月9日)。
[1700]
相对于1
×
血浆氨基酸基线培养基，tnfα刺激的nf-kb活性不受在50
×
亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸及谷氨酰胺中处理细胞影响。50
×
半胱氨酸中的预处理细胞明显减弱tnfα诱导的nf-kb活性。单一氨基酸的组合处理对nf-kb报导子活性具有不同作用，但重要的是，所有6种氨基酸一起(livrqnac)的组合产生对肝细胞中的tnfα诱导的nf-kb活性的最明显抑制(表51)。
[1701]
表51.
[1702][1703]
实例9：氨基酸组合物处理借由影响脂质代谢、发炎及纤维化改善两个啮齿动物模型中的nash进展
[1704]
调配氨基酸组合物以同时靶向疾病病变的多个机制，从而安全地且有效地治疗nash(表52)。如本文所描述，在两个确定的nash小鼠模型中研究氨基酸组合物的功效以测定氨基酸组合物对与nash及相关病症相关待迹象及症状的效果(图2)。
[1705]
表52.氨基酸组合物的示例性氨基酸组分.
[1706]
氨基酸重量比率重量％g/封包1号剂量g2号剂量g亮氨酸116.781.00g2g4g异亮氨酸0.58.390.50g1g2g缬氨酸0.58.390.50g1g2g精氨酸hcl1.8130.371.81g3.62g7.24g谷氨酰胺233.562.00g4g8gn-乙酰半胱氨酸0.152.520.15g0.3g0.6g总氨基酸
ꢀꢀ
5.96g约12g约24g
[1707]
动物研究
[1708]
stam
tm
小鼠为smc laboratories,inc研发的非酒精性脂肪变性肝炎(nash)及肝细胞癌(hcc)的模型。截至5周龄存在脂肪肝的证据，继而截至7周龄存在nash的证据，且截至9周龄存在纤维化的证据。在出生后2天接受低剂量链佐霉素且4周龄开始喂饲高脂饮食
(57％千卡脂肪、hfd32，clea japan,inc.)的c57bl/6小鼠中产生雄性stam小鼠(saito k.等人,2015sci rep 5:12466；以全文引用的方式并入本文中)。以1.6m/kg的剂量，向stam小鼠施用氨基酸组合物，每天两次，持续3周，从6周龄开始。包括经载体处理的stam小鼠的一个群组作为对照。在9周龄时使未禁食的小鼠安乐死。收集血浆及肝脏样品以便进一步分析(图3)。
[1709]
fatzo
tm
小鼠为crown bioscience,inc研发的肥胖症、代谢综合征及nash的近亲多基因模型(peterson rg.等人,2017plos one；以全文引用的方式并入本文中)。在6周龄时开始，给雄性fatzo小鼠喂饲高脂、果糖及胆固醇(hffc)饮食(40％千卡脂肪、d12079b，research diets,inc.及含5％果糖的饮用水)以诱导nafld及nash。截至诱导后4周存在脂肪肝的证据，继而截至诱导后16周存在nash的证据，且截至诱导20周存在纤维化的证据。在诱导后16周开始，以3.0g/kg的剂量施用经设计的氨基酸组合物，每天两次，持续4周(图3)。包括经载体处理的fatzo小鼠的一个群组作为对照。在诱导后20周龄时使未禁食的小鼠安乐死。收集血浆及肝脏样品以便进一步分析。
[1710]
组织学分析
[1711]
aperio scanscope cs整个载玻片数字成像系统(vista，ca)用于h&e，苦酸天狼星红(picric sirius red),sma,f4/80中的成像。自整个载片捕获图像。
[1712]
使用nash临床研究网络(crn)肝脏组织学评分系统，由对样品id不知情的兽医学病理学家评估肝脏(kleiner de,等人,2015，以全文引用的方式并入本文中)。nash crn评分系统评定脂肪变性、小叶发炎、肝细胞气球样膨大、退化及纤维化的进展。用nash评分系统分析各情况的肝脏的一个横截面。在0-3刻度上评估脂肪变性、小叶发炎及纤维化进展。在0-2刻度上评估气球样膨大退化。
[1713]
使用aperio自动图像定量的阳性像素计数算法来定量经扫描的载玻片图像中存在的特定染剂百分比。遮蔽且评估颜色范围(色调及饱和度范围)及三个强度范围(较弱、阳性及较强)。算法统计各强度范围中的数目及强度总和以及三个额外数量：平均强度、强/总数目的比率及较弱阳性像素的平均强度。
[1714]
特定阳性像素算法用于使天狼星红及油红o肝脏切片成像。阳性像素算法经修改以区分橙色及蓝色颜色。针对天狼星红评估，作出正常“色调值”(0.1至0.96)及“颜色饱和度”(0.04至0.29)的改变。分析排除脉管及伪影。
[1715]
肝脏三酸甘油酯及胆固醇量测
[1716]
借由福尔奇(folch)方法获得肝脏总计脂质提取物(folch j.等人,j.biol.chem.1957；226:497；以全文引用的方式并入本文中)。使肝脏样品于氯仿-甲醇(2:1，v/v)中均质化且在室温下培育隔夜。在用氯仿-甲醇-水(8:4:3，v/v/v)洗涤之后，使提取物蒸发至干燥且溶解于异丙醇中。分别借由三酸甘油酯e-测试及胆固醇e-测试量测肝脏三酸甘油酯及胆固醇含量。
[1717]
基因表达分析
[1718]
使用illumina truseq多股mrna样品制备套组(illumina#rs-122-2103)将肝脏rna样品转化成cdna库。在q2溶液(morrisville，nc)下分析转录组。rna seq数据经标准化且使用ingenuity通路分析(qiagen生物信息)进行分析。小鼠肝脏基因表达集中于通路水平，因为其可转译成人类nafld(teufel a,等人,gastroenterology,2016，以全文引用的方
式并入本文中)。
[1719]
代谢物分析
[1720]
根据人类代谢物组技术(yamagata，日本)进行基于两个毛细电泳法飞行时间质谱分析(ce-tofms)及lc-tofms平台的代谢分析。借由将迁移时间及m/z比率与可靠的标准进行比较来鉴别样品中的代谢物且借由将其峰值区域与可靠的标准物进行比较来定量。
[1721]
肝脏细胞介素/趋化激素量测
[1722]
使用多重elisa测定(meso scale discovery，马里兰州罗克维尔(rockville,maryland))定量肝脏中的il-1b、mcp-1及mip-1蛋白质的含量。
[1723]
氨基酸组合物改善stam及fatzo两种小鼠的气球样膨大及纤维化
[1724]
氨基酸组合物处理明显降低stam及fatzo两种小鼠的nafld活性分数(nas)(图4a)。氨基酸组合物处理也明显减少stam小鼠的肝细胞气球样膨大(图4b)。根据组织学量度，用氨基酸组合物处理stam小鼠不会改变脂肪变性及发炎的分数。借由用氨基酸组合物处理stam小鼠，天狼星红阳性的纤维化面积明显减小，而借由用氨基酸组合物处理stam小鼠，不会改变油红o面积(图4c)。肝脏三酸甘油酯及胆固醇含量不会改变。
[1725]
氨基酸组合物处理也明显减少fatzo小鼠的肝细胞气球样膨大(图4d)。用氨基酸组合物治疗处理的fatzo小鼠的脂肪变性及发炎分数以及肝脏三酸甘油酯及胆固醇含量不改变。借由用氨基酸组合物处理fatzo小鼠，天狼星红阳性的纤维化面积明显减小，而借由用氨基酸组合物治疗处理fatzo小鼠，不会改变油红o面积(图4e)。
[1726]
氨基酸组合物增强脂肪酸氧化
[1727]
借由肝脏脂质积聚表征nafld。肝脏三酸甘油酯可归因于自血浆重生脂肪生成采集及非酯化脂肪酸吸收与脂肪酸氧化处置及富含三酸甘油酯的脂蛋白分泌之间的精确平衡(kawano y,cohen de,jgastroenterol.2013，以全文引用的方式并入本文中)。相比于对照小鼠，stam小鼠具有更高肝脏不饱和脂肪酸，其因氨基酸组合物处理而减少(图5a及表53)。借由氨基酸组合物处理提高stam小鼠的肝脏酰基肉碱，表明增强的脂肪酸β氧化(图5b及表53)。
[1728]
表53.相比于对照，用氨基酸组合物(经处理)治疗stam小鼠之后肝脏酰基肉碱及不饱和脂肪酸的p值及倍数变化。
[1729]
[1730]
在ingenuity通路分析研发的上游调节因子系统生物学知识库框架的情况下解释受氨基酸组合物治疗影响的肝脏的差异基因表达模式。计算出的z分数指明，基因表达模式与编码作为上游调节因子的过氧化物酶体脂肪酸氧化的acox1活化一致(图6及表54)。
[1731]
表54.相比于对照，用氨基酸组合物(经处理)治疗stam小鼠之后与acox1通路相关的基因表达的p值及倍数变化。
[1732][1733][1734]
氨基酸组合物调节发炎路径
[1735]
发炎为nash的“第二冲击”。归因于氨基酸组合物治疗，在与消炎剂il-10的上游调节因子活化(图7a)及促炎性nf-kb(图7b及表55)、干扰素、il-1b及il-2(图7c及表55)的抑制相关的ipa分析内，肝脏中的差异基因表达模式产生z分数。在蛋白质水平下，氨基酸组合物治疗明显下调肝脏mcp-1及mip-1，其分别为c-c趋化激素受体类型2(ccr2)及5(ccr5)的配体(图8)。因此，氨基酸组合物治疗使得免疫系统朝向抗炎性状态调和，其可减缓nash进展。
[1736]
表55.相比于对照，用氨基酸组合物(经处理)治疗stam小鼠之后与acox1通路相关的基因表达的p值及倍数变化。
[1737][1738]
下，用补充有5ug人类重组egf(corning)、2mm格鲁塔玛(gibco)及1
×
青霉素/链霉素的无血清肝细胞培养基(肝细胞限定的培养基(corning))培育隔夜。在第1天，用150μl/孔威廉氏e培养基(gibco)洗涤细胞两次，且在肝细胞培养基中在上文所描述的相同条件下培育24小时。
[1749]
氨基酸预处理
[1750]
在第2天，用150ul dpbs 1
×
(gibco)洗涤细胞两次且基于血液中的平均生理学浓度，维持在含有限定的定制氨基酸浓度的无氨基酸wem(us biologicals)中。值公布于人类代谢物组数据库(wishart ds,tzur d,knox c,等人,hmdb：人类代谢物组数据库.nucleic acids res.2007年1月；35(数据库期号):d521-6.17202168)中；其以全文引用的方式并入本文中)。此定制培养基补充有11mm葡萄糖、0.272mm丙酮酸钠及剂量曲线的各种范围浓度的限定的氨基酸组合物(亦即，载体、livrq+n-乙酰半胱氨酸、livrq、rq+n-乙酰半胱氨酸、单独的n-乙酰半胱氨酸、liv或单独地与l-亮氨酸、l-异亮氨酸、l-缬氨酸、l-精氨酸、l-谷氨酰胺及l-半胱氨酸一起)。细胞在此限定的培养基中在37℃，5％ co2下维持24小时。
[1751]
游离脂肪酸及不同氨基酸组合的共治疗
[1752]
在预处理之后，在1ng/ml或载体下，使细胞曝露于补充有tnf-α(thermofisher)的具有2:1(油酸(oleate):棕榈酸(palmitate))的比率的250um游离脂肪酸(ffa)。细胞与ffa混合物及不同氨基酸组合一起在37℃，5％co2下培育24小时。在24小时培育之后，移出培养基以便细胞介素分析且替换为含有相同刺激条件及氨基酸浓度的新鲜培养基。培育细胞额外48小时，总共72小时ffa及tnfα刺激。
[1753]
24小时后借由elisa进行细胞介素分析
[1754]
在1/5或1/10稀释度下，在1
×
反应剂稀释剂(反应剂辅助性套组2，r&d系统)中，借由elisa(人类cck2/mcp-1duoset elisa,r&d系统)量测人类ccl2(mcp-1)。数据标准化为借由hoechst 3342(life technologies)在下文所描述的荧光显微镜中染色的细胞核计数确定的特定每孔细胞密度。
[1755]
在72小时之后借由荧光显微术进行细胞内脂质积聚分析
[1756]
在72小时之后，在100ul pbs1
×
(gibco)中洗涤细胞两次，用4％多聚甲醛固定，且用pbs 1
×
(100ul)洗涤两次。在固定之后，用稀释1000x的hcs lipidtox red neutral(thermofisher scientific)染色脂质且用稀释至4ug/ml的hoechst 3342(life技术)染色细胞核。lipidtox
tm
中性脂质染剂对借由荧光显微术使用高成分成像仪(分子装置(molecular devices))检测到的中性脂质小液滴具有极高亲和力。
[1757]
结果
[1758]
脂质积聚及脂肪变性表型
[1759]
发现来自健康供体的原代人类肝细胞具有低水平的脂质积聚(图9a-9d)。用游离脂肪酸(ff)+tnfα处理细胞诱导具有宏观脂肪变性表型的脂质积聚(图9i-9l)。livrqnac处理使肝细胞表型自宏观脂肪变性改变至微观脂肪变性(图9e-9h)。
[1760]
mcp1/ccl2分泌
[1761]
表56-59显示来自两个健康供体的原代人类肝细胞细胞中减去基线的mcp1/ccl2分泌(表56及57为供体1，且表58及59为供体2)。livrqnac、livrqnac+g、livrqnac+s、livrq及rqnac使得两个供体中的mcp1/ccl2分泌明显减少。然而，组合liv仅明显提高供体中的一
种的mcp1/ccl2分泌。相比于单独的liv，向liv组合添加精氨酸(r)及谷氨酰胺(q)使两个供体中的mcp1/ccl2分泌减少。单独地，n-乙酰基-半胱氨酸及谷氨酰胺显示mcp1/ccl2分泌明显减少，而精氨酸使得mcp1分泌提高。异亮氨酸、亮氨酸及缬氨酸对mcp1/ccl2分泌无作用。
[1762]
表56.在施用氨基酸组合物后供体1的mcp1表达改变
[1763][1764][1765]
表57.在施用单一氨基酸组合物后供体1的mcp1表达改变
[1766][1767]
表58.在施用氨基酸组合物后供体2的mcp1表达改变
[1768]
[1769][1770]
表59.在施用单一氨基酸组合物后供体2的mcp1表达改变
[1771][1772]
实例11：肝脏星状细胞-tnfα发炎反应
[1773]
方法
[1774]
基于用于选择供体的以下标准，原代人类肝脏星状细胞获自samsara sciences：成人年龄(18岁与50岁之间)，bmi正常(》18.5且《25)，且无混杂肝病。将在通道10的下的t75或t150烧瓶中在完整hsc培养基中生长至约80％汇合的原代人类肝脏星状细胞接种于无菌胶原蛋白i涂布的96孔光学塑料微孔板(thermoscientific，152036)中，每孔4000个细胞(每cm2约1250个细胞)且在37℃，5％ co2下，在含湿气培育箱中培育6小时。
[1775]
在6小时之后，自培育箱移出培养盘且轻轻地用移液管移出培养基且用150μl/孔dpbs洗涤一次。移出dpbs且以150μl/孔，将预处理培养基(
±
单一氨基酸丢弃，1
×
hmdb dmem+3％渗析fbs+0.2％ primocin，
±
补充氨基酸剂量；培养基组合物参见实验)施加至细胞中。培养板返回至培育箱隔夜，约14至15小时。
[1776]
在隔夜预处理之后，自细胞移除培养基，且施加现补充有3ng/ml tnfα的相同预处
理培养基。各培养板含有3ng/ml tnfα(在1x人类血浆氨基酸(hmdb或paa)浓度培养基中)、0ng/ml tnfα(在1
×
hmdb中)及3ng/ml tnfα+50nm苯胍麦(在1xhmdb中)以充当对照。培养板在37℃，5％co2下培育12小时。
[1777]
在用tnfα刺激12小时之后，移除上清液且以两个单独等分试样冷冻在-80℃下。轻轻地用dpbs及100μl/孔1
×
hmdb dmem+3％渗析fbs+0.2％ primocin+10％ cck-8活力反应剂(dojindo)洗涤培养板一次。培养板在37℃，5％ co2下培育1小时。
[1778]
在1小时培育之后，在synergy读板仪上量测存活力(吸亮度在977(测试)、900(参考)及450(cck8)nm下)。紧接着，移除培养基且在室温下用70μl/孔含4％多聚甲醛的pbs固定培养板20分钟，继而用150μl pbs洗涤两次，且在4℃下储存有100μl/孔pbs直至免疫荧光染色为止。
[1779]
借由elisa(人类cck2/mcp-1duoset elisa，r&d系统；人类il-6duoset elisa，r&d系统)，以1/5及1/20的稀释度，在1
×
反应剂稀释剂(反应剂辅助性套组2，r&d系统)中量测人类ccl2/mcp1及人类il-6。将数据标准化为赫斯特染色细胞核数目确定的特定每孔细胞密度。
[1780]
结果
[1781]
促炎性mcp-1趋化激素分泌
[1782]
表60-63显示在来自两个供体的原代人类肝脏星状细胞中的每细胞标准化mcp-1趋化激素分泌作为血浆氨基酸背景的倍数变化。在各处理组内借由单因素变异数分析与邓尼特氏多重比较测试计算统计显著性。livrqnac+g及rqnac明显减少两个供体中的mcp-1分泌。livrqnac、livrqnac+s减少mcp1分泌且在两个供体中的一种中为统计显著的。单独地，缬氨酸、精氨酸及亮氨酸中的每一种对mcp-1分泌无显著影响。谷氨酰胺减少两个供体中的mcp1分泌，但仅在两个供体中的一种中为统计显著的。n-乙酰基-半胱氨酸明显减少两个供体中的mcp-1分泌。
[1783]
表60.在施用氨基酸组合物后供体3的mcp1分泌改变
[1784]
[1785][1786]
表61.在施用单一氨基酸组合物后供体3的mcp1分泌改变
[1787]
[1788][1789]
表62.在施用氨基酸组合物后供体4的mcp1分泌改变
[1790]
[1791][1792]
表63.在施用单一氨基酸组合物后供体4的mcp1分泌改变
[1793]
[1794][1795]
il-6细胞介素分泌
[1796]
表64-67显示在来自两个供体的原代人类肝脏星状细胞中的每细胞标准化il-6细胞介素分泌作为血浆氨基酸背景的倍数变化。在各处理组内借由单因素变异数分析与邓尼特氏多重比较测试计算统计显著性。livrqnac、livrqnac+s及rqnac明显减少两个供体中的一种的il-6分泌。livrqnac+g、livrqnac+s及rqnac减少两个供体的il-6分泌。liv及livrq对任一供体的il-6分泌无显著影响。单独地，缬氨酸、精氨酸、异亮氨酸及亮氨酸对il-6分泌无显著作用。n-乙酰基-半胱氨酸减少两个供体中的il-6分泌，但仅在两个供体中的一种中为统计显著的。谷氨酰胺明显减少两个供体中的il-6分泌。
[1797]
表64.在施用氨基酸组合物后供体1的il-6细胞介素分泌改变
[1798]
[1799][1800][1801]
表65.在施用单一氨基酸组合物后供体1的il-6细胞介素分泌改变
[1802][1803]
表66.在施用氨基酸组合物后供体2的il-6细胞介素分泌改变
[1804]
[1805][1806][1807]
表67.在施用单一氨基酸组合物后供体2的il-6细胞介素分泌改变
[1808][1809]
实例12：肝脏星状细胞的tgfβ1纤维发生基因表达
[1810]
基于用于选择供体的以下标准，原代人类肝脏星状细胞获自samsara sciences：成人年龄(18岁与50岁之间)，bmi正常(》18.5且《25)，且无混杂肝病。将在通道10的下的t75或t150烧瓶中在完整hsc培养基中生长至约80％汇合的细胞接种于无菌胶原蛋白i涂布的96孔光学塑料微孔板(thermoscientific，152036)中，每孔6000个细胞(每cm2约1250个细胞)且在37℃，5％ co2下，在含湿气培育箱中，在具有2％胎牛血清及1％抗生素-抗霉菌素的dmem中培育隔夜。
[1811]
在隔夜培育之后，自培育箱移除培养板且轻轻地用移液管移出培养基且用150μl/孔dpbs洗涤两次。移出dpbs且以150μl/孔，将预处理培养基(
±
单一氨基酸丢弃，1
×
hmdb dmem+1％抗生素-抗霉菌素，10mm hepes，
±
补充氨基酸剂量；培养基组合物参见实验)施加
至细胞中。培养板返回至培育箱持续10.5小时。
[1812]
在10.5小时预处理之后，自细胞移除培养基，且施加现补充有3ng/ml tgfβ1的相同预处理培养基。各培养板含有3ng/ml tgfβ1(在1x人类血浆氨基酸(hmdb或paa)浓度培养基中)、0ng/ml tgfβ1(在1
×
hmdb中)及3ng/ml tgfβ1+20μm水飞蓟宾(silybin)(在1
×
hmdb中)以充当对照。培养板随后在37℃，5％ co2下培育24小时。
[1813]
在24小时刺激之后，移除上清液且以两个单独等分试样冷冻在-80℃下。随后用125μl每孔缓冲液fcw(快速通道细胞多重nr套组，qiagen，216713)洗涤细胞。紧接着移除洗涤缓冲液且施加50μl细胞处理混合物(含有基因组dna淘汰(wipeout)缓冲液)以使细胞溶解，在室温下培育10分钟。随后将rna裂解物转移至96孔qpcr培养板，密封，且在热循环器上在75℃下消化gdna 5分钟。将rna裂解物冷冻在-80℃下。
[1814]
各20μl单步rt-qpcr反应物含有4μl rna裂解物。分别使用具有可商购引物探针混合物(人类col1a1引物探针组，hex；人类timp2引物探针组，cy5；及人类gapdh引物探针组，fam，来自idt)的hex、cy5及fam荧光通道，col1a1、timp2及gapdh的基因表达为多重的。在各单一氨基酸丢弃及补充时使用δδcq方法借由标准化为其自身1
×
hmdb浓度来评估基因表达。
[1815]
自上清液借由elisa(人类原胶原iα1duoset elisa，r&d系统)，以1/100稀释度，在1
×
反应剂稀释剂(反应剂辅助性套组2，r&d系统)中量测人类原胶原iα1。
[1816]
结果
[1817]
col1a1基因表达
[1818]
表68、69、69-1、69-2、69-3及69-4显示来自三个不同健康供体的原代人类肝脏星状细胞中的col1a1基因表达的平均倍数变化。livrqnac及livrqnac+s显示三个供体中的两种中的col1a1基因表达明显减少。livrqnac+g及rqnac显示所有三个供体中的col1a1表达明显减少。livrq显示仅一个供体中的col1a1基因表达的显著改变。liv单独不明显改变col1a1基因表达。
[1819]
当单独施用氨基酸时，亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸及精氨酸中的每一种不明显改变任何供体中的col1a1基因表达。谷氨酰胺减少三个供体中的两种的col1a1基因表达。n-乙酰基-半胱氨酸明显减少所有三个供体中的col1a1基因表达。
[1820]
表68.在施用氨基酸组合物之后标准化为第一供体中的gapdh表达的col1a1基因表达的倍数变化
[1821]
[1822][1823][1824]
表69.在施用单一氨基酸组合物之后标准化为第一供体中的gapdh表达的col1a1基因表达的倍数变化
[1825][1826]
表69-1.在施用氨基酸组合物之后标准化为第二供体中的gapdh表达的col1a1基因表达的倍数变化
[1827][1828]
表69-2.在施用单一氨基酸组合物之后标准化为第二供体中的gapdh表达的
col1a1基因表达的倍数变化
[1829][1830][1831]
表69-3.在施用氨基酸组合物之后标准化为第三供体中的gapdh表达的col1a1基因表达的倍数变化
[1832][1833][1834]
表69-4.在施用单一氨基酸组合物之后标准化至第二供体中的gapdh表达的
col1a1基因表达的倍数变化
[1835][1836][1837]
原胶原iα1分泌
[1838]
表70、71、71-1、71-2、71-3及71-4显示标准化为其相应基线氨基酸条件的来自三个不同健康供体的原代人类肝脏星状细胞中的原胶原iα1的倍数变化。在各处理组内借由单因素变异数分析与邓尼特氏多重比较测试计算统计显著性。组合liv明显提高所有三个供体中的原胶原iα1分泌。向liv组合添加精氨酸(r)及谷氨酰胺(q)削弱单独的liv的促纤维发生作用。livrqnac、livrqnac+g、livrqnac+s及rqnac明显减少所有三个供体中的原胶原iα1分泌。单独地，n-乙酰基-半胱氨酸显示明显减少三个供体中的两种中的原胶原iα1分泌。缬氨酸明显提高两个供体仅一种中的原胶原iα1分泌，而异亮氨酸及精氨酸明显提高三个供体中的两种中的原胶原iα1分泌。换言的，单独施用的谷氨酰胺对原胶原iα1分泌无显
著影响。因而，基于个别氨基酸处理的作用，将无法预期，相对于单独的liv，具有精氨酸及谷氨酰胺的liv的促纤维发生作用降低。
[1839]
表70.在第一供体中施用氨基酸组合物之后原胶原1α1分泌的倍数变化
[1840][1841][1842]
表71.在第一供体中施用单一氨基酸组合物之后原胶原1α1分泌的倍数变化
[1843][1844][1845]
表71-1.在第二供体中施用氨基酸组合物之后原胶原1α1分泌的倍数变化
[1846]
[1847][1848]
表71-2.在第二供体中施用单一氨基酸组合物之后原胶原1α1分泌的倍数变化
[1849]
[1850][1851]
表71-3.在第三供体中施用氨基酸组合物之后原胶原1α1分泌的倍数变化
[1852]
[1853][1854]
表71-4.在第三供体中施用单一氨基酸组合物之后原胶原1α1分泌的倍数变化
[1855]
[1856][1857]
实例13：原发性人类巨噬细胞中的细胞介素分泌
[1858]
分离末梢血液单核细胞(pbmc)
[1859]
谨慎地将未纯化白血球层(buffy coat)(研究血液组分)倒入50ml离心管中且用具有钙及镁(gibco)的室温杜尔贝科氏磷酸盐缓冲盐水(dpbs)稀释。经稀释的白血球层进一步分到四个总计50ml离心管中，每个导管20ml。谨慎地将淋巴细胞分离培养基(corning)用移液管移取至各离心管底部。在20℃下在850xg下离心混合物32分钟，减速度及加速度为0。
[1860]
在离心之后使pbmc层与其他组分分离且添加至含有25ml dpbs的新50ml离心管中。用dpbs使总体积达到50ml且在600
×
g下在20℃下以9的加速度、5的减速度离心10分钟。自细胞集结粒谨慎地移除上清液。使用10ml dpbs使细胞集结粒再悬浮。随后使用dpbs使总体积达到50ml且在450
×
g下在20℃下以9的加速度，9的减速度离心5分钟。再次重复上清液移除及细胞集结粒再悬浮。
[1861]
随后自细胞集结粒谨慎地移除上清液。使细胞集结粒再悬浮于不具有钙或镁的10ml dpbs中且经由70um细胞过滤器过滤。使用cellometer k2自动化细胞计数器确定总pbmc数目。保存总共5e6个细胞以便流动式细胞量测分析。在490
×
g下在20℃下以9的加速度，9的减速度离心剩余细胞5分钟。
[1862]
cd14+细胞选择
[1863]
使用easysep
tm
人类cd14阳性选择套组ii(stemcell technologies)选择cd14+细胞。以1
×
108个细胞/毫升，使细胞再悬浮于冷easysep
tm
缓冲液(stemcell technologies)中。将总共100ul/ml easysep
tm
人类cd14阳性选择混合液ii添加至细胞悬浮液中，混合且在室温下培育10分钟。将总共100ul/ml rapidspheres添加至混合物中且在混合之后在室温下培育3分钟，随后添加robosep缓冲液直至总体积达到10ml。将15ml导管中的混合物放置于磁体中且在室温下培育3分钟。丢弃上清液且将10ml新鲜easysep
tm
缓冲液添加至15ml导管中。添加robosep缓冲液，混合及丢弃上清液重复超过两次。
[1864]
阴性及阳性溶离份在490
×
g下在20℃下以9的加速度，9的减速度离心5分钟，且再悬浮于dmem(gibco)及10％经热灭活胎牛血清(atlanta bio)及青霉素/链霉素中。统计细
胞且在490
×
g下在20℃下以9的加速度，9的减速度再次离心5分钟。在离心之后，使细胞再悬浮于含有500u/mlgm的dmem(gibco)及10％经热灭活胎牛血清(atlanta bio)及青霉素/链霉素中且以1-2
×
106个细胞/毫升接种于10cm组织培养培养板上。在馈入/采集中间使细胞保持在37℃5％ co2中。
[1865]
cd14+细胞馈入
[1866]
借由移除培养基及未附着细胞，在490
×
g下在20℃下以9的加速度，9的减速度离心5分钟，且再悬浮于含有500u/mlgm-csf的新鲜dmem(gibco)及10％经热灭活胎牛血清(atlanta bio)及青霉素/链霉素中来每隔3-4天馈入细胞。将再悬浮细胞接种于10cm组织培养培养板上且在37℃，5％co2下培育。
[1867]
巨噬细胞采集
[1868]
在全部细胞附着之后，移除培养上清液且用5ml pbs洗涤培养物1
×
。添加总共3ml室温细胞汽提剂(cellstripper)且在37℃，5％ co2下培育培养物大致10分钟直至细胞变圆且开始分离为止。使用细胞刮刀来使细胞完全自培养板分离。在490g下在室温下快速离心采集到的细胞5分钟且再悬浮于含10％ dmso的经热灭活胎牛血清中且紧接着冷冻在-80℃下。
[1869]
筛网
[1870]
在第0天，以每孔3.0e4个细胞，在96孔微孔板(thermofisher)中，将原代人类pmbc衍生的巨噬细胞接种于补充有青霉素-链霉素(hyclone)及10％经热灭活胎牛血清(hi-fbs)(atlanta bio)的达尔伯克氏改良伊格尔培养基(dmem)(gibco)中且在37℃，5％ co2下培育隔夜。在第1天，细胞用150ul每孔dpbs(gibco)洗涤一次且用75ul以下各种处理：
[1871]
a.基于血液中的平均生理学浓度，基于人类代谢物组数据库(hmdb)中公布的值，含有限定的定制氨基酸浓度的无氨基酸dmem(us biologicals)，其具有6mm葡萄糖、1mm丙酮酸钠、10mm hepes、0.2％primocin(invivogen)；或
[1872]
b.具有一种各种浓度的氨基酸的上文所描述的相同培养基，其包括全部丢弃。
[1873]
在第2天，用补充有0.30ng/ml脂多醣(lps)(sigma)的上文所描述的75ul相同培养基处理细胞，以便达到0.15ng/ml lps的最终浓度。用1um bx-795(tocis)、1um tak242(sigma)、0.15ng/ml lps或磷酸盐缓冲盐水(pbs)处理对照孔。
[1874]
在第3天，采集上清液且紧接着冷冻在-80℃冷冻器中。用150ul dpbs洗涤细胞一次且使用wst-8细胞增殖细胞毒性测定(dojindo)评估存活力。在测定之后，细胞用150ul pbs洗涤两次且用4％多聚甲醛固定5分钟，继而用150ul pbs额外洗涤两次。借由il-6及tnfa的elisa，使用可商购的套组(r&d系统)，根据制造商供应方案，分析上清液样品中的蛋白质水平。结果显示于以下表71-5至71-10中。
[1875]
表71-5.il-6量测：供体1
[1876]
[1877]
[1878][1879]
livrqnac、livrqnac+g、livrqnac+s、rqnac及nac治疗明显减少原代人类单核球衍生的巨噬细胞中的lps诱导的il-6分泌。livrq治疗明显提高il-6分泌，而liv无作用。单独施用的精氨酸及谷氨酰胺提高il-6分泌，而其他单独氨基酸不影响il-6分泌。进行两因素变异数分析邓尼特多重比较以便进行统计分析。平均值表示为减去基线的值。
[1880]
表71-6.il-6量测值：供体2
[1881]
[1882]
[1883][1884]
livrqnac、livrqnac+g、livrqnac+s、rqnac及nac治疗明显减少原代人类单核球衍生的巨噬细胞中的lps诱导的il-6分泌。livrq及liv治疗明显提高il-6分泌。单独施用的谷氨酰胺及亮氨酸提高il-6分泌，而其他单独的氨基酸无作用。进行两因素变异数分析邓尼特多重比较以便进行统计分析。平均值表示为减去基线的值。
[1885]
表71-7.il-6量测值：供体3
[1886]
[1887]
[1888][1889]
livrqnac+g、livrqnac+s、rqnac及nac治疗明显减少原代人类单核球衍生的巨噬细胞中的lps诱导的il-6分泌。livrq治疗提高il-6分泌，而liv及livrqnac对il-6分泌无统计显著作用。单独施用的谷氨酰胺明显提高il-6分泌，而其他单独的氨基酸无作用。进行两因素变异数分析邓尼特多重比较以便进行统计分析。平均值表示为减去基线的值。
[1890]
表71-8.tnfα量测值：供体1
[1891]
[1892]
[1893][1894]
livrqnac、livrqnac+g、livrqnac+s、rqnac及nac治疗明显减少原代人类单核球衍生的巨噬细胞中的lps诱导的tnfa分泌。liv治疗提高tnfa分泌，而livrq对tnfa分泌无显著作用。单独地施用的氨基酸中无一种对tnfa分泌起作用。进行两因素变异数分析邓尼特多重比较以便进行统计分析。平均值表示为减去基线的值。
[1895]
表71-9.tnfα量测值：供体2
[1896]
[1897]
[1898][1899]
livrqnac、livrqnac+g、livrqnac+s、rqnac及nac治疗明显减少原代人类单核球衍生的巨噬细胞中的lps诱导的tnfa分泌。liv及livrq治疗提高tnfa分泌。单独施用的亮氨酸、异亮氨酸及谷氨酰胺提高tnfa分泌，而其他氨基酸无作用。进行两因素变异数分析邓尼特多重比较以便进行统计分析。平均值表示为减去基线的值。
[1900]
表71-10.tnfα量测值：供体3
[1901]
[1902]
[1903][1904]
#归因于技术误差，在exp3中未量测出亮氨酸
[1905]
livrqnac、livrqnac+g、livrqnac+s、rqnac及nac治疗明显减少原代人类单核球衍生的巨噬细胞中的lps诱导的tnfa分泌。liv及livrq治疗提高tnfa分泌。除了提高tnfa分泌的谷氨酰胺以外，单独施用的氨基酸对tnfa分泌无显著作用。进行两因素变异数分析邓尼特多重比较以便进行统计分析。平均值表示为减去基线的值。
[1906]
实例14：用氨基酸组合物治疗nafld患者
[1907]
本文所描述的研究提供施用包括氨基酸的组合物以治疗具有nafld的患者。组合物可包括约2g亮氨酸、约1g异亮氨酸、约1g缬氨酸、约3.62g精氨酸、约4g谷氨酰胺及约0.3g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约36g)。组合物也可包括约2g亮氨酸、约1g异亮氨酸、约1g缬氨酸、约3.62g精氨酸、约4g谷氨酰胺及约0.6g n-乙酰半胱氨酸，每天施用三次(例如每天总共约37g)。
[1908]
或者，组合物可包括约4g亮氨酸、约2g异亮氨酸、约2g缬氨酸、约7.24g精氨酸、约8g谷氨酰胺及约0.6g n-乙酰半胱氨酸，每天施用两次或三次(例如每天总共约48g或总共约72g)。组合物也可包括约4g亮氨酸、约2g异亮氨酸、约2g缬氨酸、约7.24g精氨酸、约8g谷氨酰胺及约1.2g n-乙酰半胱氨酸，每天施用两次或三次(例如每天总共约49g或总共约73g)。
[1909]
对于各组合物，可在用餐之前、的时或之后施用剂量。或者，组合物不在用餐之前、的时或之后立刻施用。氨基酸组合物可施用至少12周，例如12周、13周、14周、15周或16周的时间段。具体而言，氨基酸组合物施用至少16周，例如16周的时间段。组合物可经口施用。
[1910]
选择入选氨基酸组合物的临床研究中的nafld患者的关键标准包括：1)nafld诊断；2)2型糖尿病；3)相对较高bmi；4)小于0.6的nafld纤维化评分；5)肝脏活检；及7)肝脏的mri和/或ct评定。除了nafld的外，患者也可具有2型糖尿病。
[1911]
脂肪肝病可为借由以下方法中的至少一种在3个月隔离内确定的脂肪变性先前病史记录：借由mri，pdff≥8％的肝脏脂肪；具有≥300db/m的对照衰减参数的肝纤维化扫描；或指示非nash nafld脂肪变性＞i级的肝脏活检。若患者不具有3个月隔离内的此记录的先前脂肪变性病史，则在隔离时必须使用下式记录≥10％的肝脏脂肪评分：
[1912]
肝脏脂肪预测百分比＝10^(-0.805+(0.282*代谢综合征[是＝1/否＝0])+(0.078*2型糖尿病[是＝2/否＝0])+(0.525*log10(胰岛素mu/l))+(0.521*log10(ast u/l))-(0.454*log10(ast/alt))
34
[1913]
患者可在隔离之前3个月内进行稳定锻炼、饮食及生活方式惯例，无太大体重波动，例如个体在隔离期最后3个月期间体重应在其体重的
±
3％内。患者在隔离时可具有≥32kg/m2的身体质量指数(bmi)。对于mri设备无法适应bmi≥45kg/m2的患者的部位，可应用40至45kg/m2之间的上限。
[1914]
患者在隔离之前必须服用稳定剂量的降葡萄糖药物(其可包括二甲双胍、磺酰脲、二肽基肽酶-4(dpp-4)抑制剂、钠-葡萄糖共转运子2(sglt2)抑制剂或长效基础胰岛素)至少3个月且计划继续服用相同药物，而不预期在研究期间对其药物进行剂量调节。若患者同时用抗高血压药物(例如β阻断剂、氢氯噻嗪、ace抑制剂、血管紧张素受体阻断剂)、血脂异常药物(例如他汀类、纤维酸酯)及甲状腺功能低下药物(例如左旋甲状腺素)治疗，则患者可入选研究，只要其在隔离之前已服用稳定剂量及方案的此等药物持续至少3个月且计划继续服用相同药物，而不预期在研究期间对其药物进行剂量调节即可。患者可服用维生素补充剂(例如多维生素；维生素e《400iu/天)。然而，其必须在隔离之前服用稳定剂量及方案的此等维生素补充剂持续至少3个月，而不预期在研究期间进行剂量调节。
[1915]
研究中的主要终点包括向具有nafld的患者施用包括氨基酸的组合物的安全性及耐受性。说明nafld症状改善的第二终点包括以下：1)借由mri肝内脂肪降低；及2)评定肝脏生物化学、纤维化/细胞凋亡及代谢所涉及的生物标记物。可在来自nafld患者的样品(例如血浆或肝脏样品)中评估以下生物标记物：a)丙氨酸转氨酶(alt)；b)天冬氨酸转氨酶(ast)；c)脂联素；d)iii型胶原蛋白的n端片段(proc3)；e)胱天蛋白酶裂解的角蛋白18片段(m30及m65)；f)il-1β；g)c反应蛋白；h)piiinp；i)timp1；j)mcp-1；k)fgf-21；或l)γ谷氨酰基转移酶(ggt)。举例而言，具有nafld的个体可展现用组合物治疗后alt、ast或ggt中的一种、两种或更多种(例如全部)的含量降低。
[1916]
患者可展现血浆葡萄糖、胰岛素、稳态模型评定胰岛素抗性(homa ir)、脂质曲线、血红蛋白a1c(hba1c)及例如自基线至第6周及第12周的其他代谢参数的平均变化，包括例如自基线至第6周及第12周的口服葡萄糖耐受性测试(ogtt)的设定下血浆葡萄糖及胰岛素水平变化。患者可展现例如自基线至第6周及第12周的体重平均变化。
[1917]
施用氨基酸组合物可使得患者的nafld活性评分、葡萄糖耐受性、肝细胞发炎、肝纤维化或肝脏损伤、脂肪变性或肝细胞气球样膨大得到改善。
[1918]
实例15.用氨基酸组合物治疗小鼠模型的nash
[1919]
诱导小鼠nash
[1920]
在一个实例中，检测livrqnac及相关氨基酸组合物对fatzo小鼠模型的肥胖症、代谢驱动非酒精性脂肪变性肝炎(nash)的作用。
[1921]
材料及方法
[1922]
诱导小鼠nash
[1923]
在16周诱导阶段期间，借由在饮用水(wdf)中补充有5％果糖的西方饮食(研究饮食号d12079b；脂肪40％kcal，蛋白质17％kcal，碳水化合物43％kcal)诱导60只雄性fatzo小鼠的nash。膳食及水可随意获得。出于对照目的，设置用对照饮食(n＝6，purina号5008；
脂肪17％kcal，蛋白质27％kcal，碳水化合物56％kcal)及无菌水喂饲同胎仔畜(littermate)对照雄性fatzo小鼠。将小鼠圈养在具有微小隔离盒的塑料笼具中。灭菌垫褥一周替换一次。每笼圈养三只小鼠且在整个研究期间维持十二小时光照周期。每天监测室温且维持在22-25℃下。在诱导阶段期间每周记录体重。
[1924]
研究设计
[1925]
在16周饮食诱导之后，6只小鼠保持对照饮食(第1组，对照)，同时60只经诱导的小鼠按体重及血浆葡萄糖(摄食)随机分组以便指定以下处理。在西方饮食nash诱导4周之后的16周开始用测试物品施用fatzo小鼠。借由经口管饲施用测试物品。在西方饮食nash诱导后的20周将动物安乐死，且收集组织以用于分析。
[1926][1927]
测试物品
[1928]
livrqnac、livrqnac+g、lrqnac及oca(advanced chemblocks,inc.)、初始及灌注水由axcella health,inc提供。0.5％甲基纤维素由crownbio,inc提供。根据附录1制备投药溶液。ta化合物(氨基酸组合物)为每天于灌注水(baxter号27f7114)及赋形剂0.125％黄原胶、1.5mm月桂基硫酸钠及0.28％卵磷脂中新鲜调配的氨基酸掺合物。使奥贝胆酸(oca)悬浮于含0.5％甲基纤维素的灌注水中。所有测试物品冷藏储存。主持者以冷冻粉末形式提供ta化合物。继续投药4周。
[1929]
使livrqnac+g及lrqnac的亮氨酸剂量与livrqnac的剂量相匹配。
[1930]
氨基酸组合物
[1931]
[1932][1933]
测试物品施用
[1934]
在整个研究期间，借由经口管饲，以10ml/kg的体积施用livrqnac、livrqnac+g、lrqnac、oca及载体。借由每日体重计算剂量。livrqnac、livrqnac+g、lrqnac及载体每天施用两次(bid)，而oca一天一次(qd)上午施用。小鼠每天接受一次oca(qd)及一种载体qd。剂量借由经口管饲在0700且借由经口管饲在1800施用4周。
[1935]
体重及血糖
[1936]
每天监测存活力、临床症状及行为。在投药时间段期间每天记录体重。每周在am(0700)，经由尾部夹片采集血液样品以便于量测葡萄糖(statstrip血糖仪)。
[1937]
尸检及样品采集
[1938]
用co2吸入麻醉动物且经由心脏穿刺放血以便安乐死。结束时，借由心脏穿刺在麻醉动物中获得最终血液样品(k2edta)。样品冷冻提供给axcella health。记录器官重量(总肝脏、性腺脂肪垫)。胰脏及小肠及性腺脂肪垫固定在10％缓冲福尔马林中且如方案中所指导制备。小肠、性腺脂肪垫及肝脏切片也快速冷冻在液氮中且运送给主持者。
[1939]
组织学分析
[1940]
将肝脏组织固定在4℃下的波恩氏溶液(bouin's solution)中24小时，继而固定在标准浓度乙醇，随后二甲苯的浴中以准备好组织石蜡包埋。在包埋于石蜡中且冷却之后，切出五微米切片且染成惯例h&e及苦酸天狼星红。将肝脏的右叶片及左叶片的切片冷冻在oct中以便用油红色染色分析脂质含量。aperio整个载玻片数字成像系统(scan scope cs,vista,ca)用于成像。所有载玻片在20
×
下成像。扫描时间范围为1.5分钟至2.25分钟的最长时间。整个图像容纳且储存于其光谱软件系统中且自整个载玻片拍摄图像。
[1941]
使用nash肝脏评分标准评估肝脏。在此小鼠研究中，用nash评分系统分析各种情况的肝脏的一个横截面。根据公布的nash crn评分系统，此评分系统包含nafld活性评分(nas)、纤维化阶段及借由图案辨识鉴别nash。nas可在0至8范围内且借由h&e染色切片的脂肪变性(0-3)、小叶发炎(0-3)及肝细胞气球样膨大(0-2)的分数总和计算得到。根据苦酸天狼星红染色的载玻片评分纤维化(0-4)。nash系统用于人类肝脏18规格活检体。系统地评估脂肪变性、小叶发炎、肝细胞气球样膨大退化、纤维化、nas及借由图案辨识nash的存在。在此研究中，评估此研究中的每只小鼠的肝脏的一个总横截面。此约为18规格人类肝脏活检的尺寸的15倍。病变评分确定为0、+1、+2或+3。对位置(门脉周、小叶中央及中间区带)病变及脂肪积聚(病灶、门脉周和/或小叶中央)进行评分。评分的其他部分为病变分布：病灶、多
灶和/或扩散。以及病变的轻度、中度及重度。此等参数构成总nash评分。
[1942]
使用dako flex system在自动化免疫染色仪上进行所有免疫组织化学染色步骤；在室温下进行培育且tris缓冲生理盐水加0.05％ tween20，ph 7.4(tbs-dako corp.)用作所有洗液及稀释剂。在每次培育之后进行充分洗涤。第一抗体包括抗小鼠sma、f4/80、mac-2及苦酸天狼星红。对照切片经同型对照处理，使用与第一抗体相同的浓度，以检验染色特异性。
[1943]
根据h&e染色切片分析白色脂肪组织(wat)脂肪细胞尺寸。使用aperio image scope应用，借由量测区域的10个最大脂肪细胞的面积来评估各组织样本的3个定位区域(组织边缘、不包围血管区域的组织、包围血管区域的组织)。在各组织内，对各区域的10个热点进行定量(um2)且取平均值。
[1944]
借由免疫组织化学染色鉴别胰腺β-胰岛细胞。
[1945]
图像分析
[1946]
采用aperio自动图像定量来对免疫组织化学染色油红色o及天狼星红染色的阳性像素进行定量。使用阳性像素计数算法来对经扫描的载玻片图像中存在的特定染剂百分比进行定量。遮蔽且评估颜色范围(色调及饱和度范围)及三个强度范围(较弱、阳性及较强)。算法统计各强度范围中的数目及强度总和以及三个额外数量：平均强度、强/总数目的比率及较弱阳性像素的平均强度。阳性像素算法经修改以区分橙色及蓝色颜色。针对天狼星红评估，作出正常“色调值”(0.1至0.96)及“颜色饱和度”(0.04至0.29)的改变。分析排除脉管及伪影。
[1947]
肝脏基因表达分析
[1948]
mcp-1及mip-1a的肝脏基因表达借由定量pcr量测。
[1949]
肝脏细胞介素及趋化激素量测
[1950]
使用多重elisa测定(meso scale discovery,马里兰州罗克维尔)定量肝脏il-1b、mcp-1及mip-1蛋白质含量。
[1951]
统计分析
[1952]
使用bonferroni多重比较测试在graphpad prism 6(graphpad software inc.,usa)上进行肝脏组织学评分的统计分析。p值《0.05视为统计显著。结果表示为平均值
±
sem。在第2组(载体)与下组之间进行比较；第3组(livrqnac 1,500mg/kg)、第4组(livrqnac 3,000mg/kg)、第5组(livrqnac+g，3,885mg/kg)及(lrqnac，2,469mg/kg)。
[1953]
结果
[1954]
体重及肝脏重量
[1955]
相比于饲喂对照组动物，喂饲补充有果糖的西方饮食(wdf)16周对体重产生显著作用。在施用测试药剂之前，喂饲wdf的动物相比于喂饲对照饮食的动物明显更重(47.6
±
0.45与43.9
±
1.03g；p《0.01)。
[1956]
相比于所有处理组中的基线值，体重下降；相比于载体组的重量损失无显著差异(对照、载体、livrqnac(1500mg/kg)、livrqnac(3000mg/kg)、livrqnac+g、lrqnac及oca分别为-7.6
±
0.9、-6.9
±
1.3、-6.8
±
1.4、-5.7
±
1.2、-6.4
±
1.0、-4.7
±
1.6和-3.9
±
1.5％；
[1957]
p《0.4992)。
[1958]
相比于对照饮食，喂饲wdf的载体处理动物的肝脏重量(体重％)明显更高(7.22
±
0.3与5.05
±
0.24％；p《0.0001)；然而，在喂饲wdf的动物中，相比于载体，注意到任何处理组中均无显著作用(载体、livrqnac(1500mg/kg)、livrqnac(3000mg/kg)、livrqnac+g、lrqnac及oca分别为7.22
±
03、7.14
±
0.3、7.19
±
0.26、6.69
±
0.18、7.02
±
0.5及6.81
±
0.2；p《0.7450)。
[1959]
血糖
[1960]
相比于饲喂对照组动物，喂饲补充有果糖的西方饮食(wdf)16周对血糖产生显著作用。在施用测试药剂之前，喂饲wdf的动物相比于喂饲对照饮食的动物具有明显降低的葡萄糖(160.0
±
3.01与218.3
±
28.6mg/dl；p《0.0001)。
[1961]
血糖(尽管基线时对照动物中更高)在4周化合物施用期间保持相对稳定。当在投药时间段期间取平均值时，相比于载体，任何处理组的平均血糖无显著差异(对照、载体、livrqnac(1500mg/kg)、livrqnac(3000mg/kg)、livrqnac+g、lrqnac及oca分别为166.0
±
9.7、157.1
±
4.6、154.6
±
2.3、159.4
±
3.8、155.5
±
3.8、153.6
±
3.0及169.7
±
6.3mg/dl；p《0.1587)。
[1962]
肝脏三酸甘油酯及胆固醇
[1963]
相比于喂饲对照饮食的载体处理动物，在wdf喂饲之后，肝脏三酸甘油酯及胆固醇含量同样提高(肝脏三酸甘油酯p《0.0040；肝脏胆固醇：p《0.0001)。在喂饲wdf的动物中，当相比于载体时，任何处理组的肝脏三酸甘油酯无显著差异(p《0.1206)。尽管相比于载体oca使肝脏胆固醇含量降低32％(p《0.05)，相比于wdf喂饲载体组，氨基酸组合物处理组不影响肝脏胆固醇。
[1964][1965]
肝脏组织学
[1966]
喂饲对照饮食的fatzo小鼠产生轻度脂肪变性且无发炎、气球样膨大或纤维化(图10)。喂饲wdf且用载体处理的fatzo小鼠产生显著脂肪变性、轻度发炎、气球样膨大及纤维化。相比于载体组中的主要大泡型脂肪变性，在livrqnac、livrqnac+g及lrqnac组中观测到主要小泡型及减少的大泡型脂肪变性的混合物，如图11中所示。
[1967]
由固定肝脏组织中的脂肪变性(0-3)、发炎(0-3)及气球样膨大(0-2)的组织学评分计算nafld活性评分。在喂饲wdf的动物中，所有氨基酸组合物处理均使得nas相比于载体处理组显著降低(图12)。相比于载体，livrqnac及氨基酸组合物处理减少肝脏脂肪变性，但仅livrqnac+g及lrqnac达到统计显著性(p《0.05)，而livrqnac未实现(livrqnac3.0g/kg，p＝0.12)。所有氨基酸组合物处理明显减少肝细胞气球样膨大、脂毒性及细胞死亡的生物标记物。氨基酸组合物处理不明显改变肝炎。总的，肝脏病理学的氨基酸组合物相关改善主要归因于肝细胞气球样膨大减少。
[1968]
相比于载体，oca对nas评分及nas组分无显著作用。
[1969][1970][1971]
来自载体处理的动物的肝脏证明轻度纤维化；0.8
±
0.1的评分。仅来自经livrqnac(1500mg/kg)处理的动物的肝脏证明当相比于载体处理组时纤维化显著降低(0.2
±
0.1与0.8
±
0.1，p《0.01)，但不经livrqnac(3000mg/kg)、livrqnac+g或lrqnac处理。天狼星红胶原蛋白染色证明，相比于载体(livrqnac 1500mg/kg，p《0.01；livrqnac 3000mg/kg，p《0.01；livrqnac+g，p＝0.09；lrqnac，p《0.05)所有氨基酸组合物处理明显减少胶原蛋白沉积。oca不影响肝纤维化评分或天狼星红胶原蛋白染色面积。
[1972][1973]
相比于载体组，与肝脏三酸甘油酯水平一致，氨基酸组合物处理不改变肝脏油红o染色面积。oca减小油红o染色面积(p《0.05)。
[1974][1975]
肝脏基因表达
[1976]
mcp-1(ccl2)及mip-1a(ccl3)为经由巨噬细胞及嗜中性白血球募集介导肝炎的促炎性趋化激素。mcp-1及mip-1a分别为ccr2及ccr5的配体，其提供有希望的治疗剂目标以治疗nash的肝纤维化。相比于喂饲对照饮食的小鼠，喂饲wdf的小鼠中的肝脏中的mcp-1及mip-1a rna表达水平明显上调，如表74及75中所示。
[1977]
表74.在施用氨基酸组合物之后mcp-1mrna水平的倍数变化
[1978]
[1979]
表75.在施用氨基酸组合物之后mip-1a mrna水平的倍数变化
[1980][1981]
相比于载体组，livrqnac及lrqnac处理不明显改变肝脏mcp-1及mip-1a rna表达。相比于载体组(p＝0.054)及livrqnac组(p《0.05)，livrqnac+g处理使得肝脏mcp-1rna表达略微降低。类似地，相比于载体组，livrqnac+g处理使得肝脏mcp-1rna表达略微降低，但差值不显著(p＝0.19)及livrqnac组(p《0.05)。
[1982]
肝脏趋化激素及细胞介素
[1983]
相比于喂饲对照饮食的小鼠，与rna数据一致，喂饲wdf的小鼠中的肝脏mcp-1及mip-1a蛋白质水平提高，如表76及77中所示。
[1984]
表76.在施用氨基酸组合物之后的平均肝脏mcp-1蛋白质水平
[1985][1986]
表77.在施用氨基酸组合物之后的平均肝脏mip-1a蛋白质水平
[1987][1988]
肝脏mcp-1及mip-1a蛋白质水平也与rna表现水平正相关，如表78及79中所示。
[1989]
表78.在施用氨基酸组合物之后mcp-1蛋白质与rna水平之间的相关性
[1990]
对照饮食y＝0.0022x+0.0542r2＝0.3202载体y＝0.0029x+0.3316r2＝0.7986livrqnac(3000mg/kg)y＝0.0036x+0.0144r2＝0.7831livrqnac+g(3885mg/kg)y＝0.0018x+0.2542r2＝0.3988lrqnac(2469mg/kg)y＝0.0027x+0.2969r2＝0.6857
[1991]
表79.在施用氨基酸组合物之后mip-1a蛋白质与rna水平之间的相关性
[1992]
对照饮食y＝0.001x+0.0593r2＝.069载体y＝0.0057x+0.191r2＝0.4202livrqnac(3000mg/kg)y＝0.0051x+0.2334r2＝0.7887livrqnac+g(3885mg/kg)y＝0.0045x+0.1817r2＝0.4403lrqnac(2469mg/kg)y＝0.0064x+0.1814r2＝0.4875
[1993]
相比于载体组，livrqnac及lrqnac处理不明显改变肝脏mcp-1及mip-1a蛋白质水平。相比于livrqnac组，livrqnac+g处理略微降低肝脏mcp-1(p＝0.095)及mip-1a(p《0.05)
蛋白质水平。另外，肝脏mcp-1及mip-1a蛋白质水平正相关，如表80中所示。
[1994]
表80.在施用氨基酸组合物之后mcp-1与mip-1a蛋白质水平之间的相关性
[1995][1996][1997]
相比于喂饲对照饮食的小鼠，喂饲wdf的小鼠中肝脏中的促炎性细胞介素il-1b、il-6、tnfa及cxcl1蛋白质水平提高，如表81-84中所示。
[1998]
表81.在施用氨基酸组合物之后的平均肝脏il-1b蛋白质水平
[1999][2000]
表82.在施用氨基酸组合物之后的平均肝脏il-6蛋白质水平
[2001][2002]
表83.在施用氨基酸组合物之后的平均肝脏cxcl1蛋白质水平
[2003][2004]
表84.在施用氨基酸组合物之后的平均肝脏tnfα蛋白质水平
[2005][2006]
相比于载体，livrqnac、livrqnac+g及lrqnac处理不明显改变il-1b、il-6、tnfa及cxcl1蛋白质水平。相比于livrqnac，livrqnac+g处理降低肝脏tnfa水平。
[2007]
概述
[2008]
基于临床观测结果，与用对照饮食喂饲的那些相比，喂饲wdf的fatzo小鼠体重增加更多。喂饲wdf与喂饲对照饮食的小鼠之间的喂饲血糖水平相当，但体重改变有差异。所有处理在fatzo小鼠中均具有良好耐受性。在治疗期期间，喂饲wdf及喂饲对照饮食的小鼠
体重下降，其可归因于与经由经口管饲一天两次施用测试物品或载体相关的压力。
[2009]
相比于载体，所有氨基酸组合物处理组中的nas明显减少，主要归因于气球样膨大评分。所有氨基酸组合物处理组中的肝细胞气球样膨大明显减少。livrqnac+g及lrqnac处理组中的脂肪变性明显减少。livrqnac也减少脂肪变性，但差异不明显。发炎不受氨基酸组合物处理影响。尽管livrqnac+g及lrqnac处理组中的脂肪变性评分有组织学改善，但借由氨基酸组合物处理，三酸甘油酯、胆固醇及油红色o染色保持无变化。与组织学及生物化学数据一致，重生脂肪生成酶fasn及acaca rna水平不受氨基酸组合物处理影响。
[2010]
尽管肝脏三酸甘油酯水平不受氨基酸组合物处理影响，肝细胞脂肪变性的特征因氨基酸组合物处理而不同。喂饲wdf的小鼠(载体组)的肝脏证明主要大泡型脂肪变性。相比之下，在所有氨基酸组合物处理组中，大泡型脂肪变性减少，及小泡型及大泡型脂肪变性的混合物。大泡型至小泡型脂肪变性表型上的氨基酸组合物的生物学意义及机制值得进一步研究。
[2011]
nafld的fatzo模型中的肝纤维化评分明显因低剂量而非高剂量livrqnac处理降低。livrqnac+g及lrqnac对纤维化无作用。然而，天狼星红胶原蛋白染色证明，livrqnac、livrqnac+g及lrqnac明显减少肝脏中的胶原蛋白沉积。
[2012]
与肝炎评分一致，促炎性趋化激素mcp-1及mip-1a及细胞介素il-1b、il-6、tnfa及cxcl1的肝脏rna及蛋白质水平不明显受氨基酸组合物处理影响。值得注意的是，livrqnac+g(等效于livrqnac加甘氨酸)处理具有相比于livrqnac减少的肝脏mcp-1、mip-1a及tnfa。
[2013]
在nafld及nash期间，观测到与发炎相关的提高的肝脏氧化压力。谷胱甘肽(gsh)为可抵消活性氧的关键内源性抗氧化剂。甘氨酸及其直接代谢前驱体、丝氨酸为gsh生物合成的底物。因此，丝氨酸和/或甘氨酸补充帮助补给gsh及改善nafld及nash。livrqnacg处理减少肝脏中的发炎趋化激素及细胞介素，支持了补充甘氨酸或丝氨酸有利于nafld及nash。
[2014]
总的，在fatzo小鼠中测试的所有三种氨基酸组合物(livrqnac、livrqnac+g及lrqnac)减少nafld活性评分、肝细胞气球样膨大及纤维化。此等氨基酸组合物可用于治疗nash。含有甘氨酸的氨基酸组合物可进一步减少肝炎，其使得肝纤维化减少。
[2015]
尽管本发明已参照较佳实施例及多个替代实施例进行特定显示及描述，但应理解，在不背离本发明的精神及范畴的情况下，熟习相关技术人员可对其中的形式及细节进行各种变更。
[2016]
出于所有目的，引用在本说明书的正文内的所有参考文献、发布专利及专利申请案以引用的方式全文并入本文中。