一种具有皮肤抗衰老功效的亚麻籽提取物及其制备方法和应用与流程

本发明属于食品副产物增值加工，具体涉及一种具有皮肤抗衰老功效的亚麻籽提取物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、炎症及其相关疾病(如类风湿性关节炎，结肠炎，神经炎与牙周炎等)已经对人体健康造成了严重威胁，并进一步加剧了社会负担。炎症是人体自我保护的免疫机制，但是过度的炎症反应会对组织、器官造成伤害，并最终表现为疾病的发作。人体暴露于含有过多活性氧和自由基的环境中，会使得人体内氧化平衡状态的失衡，机体此时将启动自我保护的免疫机制。适度的炎症反应对人体具有保护作用，但是人体内炎症相关通路(如nf-κb信号通路)被过度激活后，炎性细胞将会聚集并启动细胞趋化机制，释放大量促炎细胞因子以及no。过量的no可引起血管扩张，引发机体微循环障碍，并且no还可与超氧阴离子互作，产生大量剧毒的过氧亚硝酸盐阴离子，将进一步诱发炎症，导致蛋白变性、组织病变进而影响机体健康。此外，促炎细胞因子是细胞受到刺激后释放的一类具有生物活性的小分子蛋白，参与炎症反应的各个阶段。常见的促炎细胞因子包括tnf-α、il-6和il-1β。

2、衰老是一直困扰人类健康发展的一个重大问题。目前已有研究确证了炎症发生与机体衰老的关系，炎症可引起自由基的过量产生，导致自由基稳态失衡从而加速衰老。此外，衰老与高促炎症反应状态相关，而高促炎症反应状态产生的原因是循环中促炎症介质水平的升高，并将进一步促进过氧化物自由基的产生和激活相关信号通路，从而诱导上皮细胞衰老。当人体受到外界刺激时，dna的损伤也会激活nf-κb以及相关信号通路，从而产生促炎细胞因子，进而阻滞细胞周期，诱导和维持细胞衰老表型。

3、化妆品中常见的抗衰活性成分主要分为三类：(1)多肽类，如棕榈酰五肽和乙酰基六肽，然而它们中的多数是化学合成或生物合成的，具有潜在的安全隐患；(2)维生素类，如维生素a和e，但其存在不稳定以及容易分解等缺点；(3)合成类，包括玻色因和富勒烯，虽有一定活性，但因其价格较贵、起效慢，并且长期效果和具体机制仍未明晰，导致其应用前景受限。因此，开发安全、稳定且高效的天然抗衰活性成分，符合未来绿色抗衰化妆品配方的发展趋势，是行业亟需解决的问题。

4、亚麻籽富含优质蛋白与多种生物活性物，其中亚麻籽环肽作为亚麻籽独有成分而受到了研究人员的广泛研究。目前已有研究发现其具有免疫活性，并且可促进骨质形成。此外，亚麻环肽作为一种天然来源的子环形肽，其结构相对稳定，对生物体无毒害作用，且具有良好的金属离子螯合能力，被认为具有成为新型膳食补充剂、新型食品或化妆品配料的潜力。中国发明专利cn105440103a公开了一种从皱纹盘鲍内脏中分离出的鲍鱼抗炎肽(aaip)，该抗炎肽可以剂量依赖性的抑制lps诱导的no的生成，并能显著降低促炎因子(如tnf-α、il-1β和il-6)的转录，以及显著抑制丝裂原活化蛋白激酶mapk(如p38与jnk)的磷酸化，从而抑制lps诱发的炎症反应，但上述发明存在提取复杂，效率低的问题。同时，中国发明专利cn113173970a也公开了一种从核桃粕中酶解出的抗炎肽(fpl)，并对四种炎性介质(no、tnf-α、il-6、il-1β)的生成具有抑制作用，但该发明存在目标肽非天然提取，产业化难度大等问题。中国发明专利cn109864899a也公开了一种具有延缓皮肤衰老功效的肽类组合物的制备方法，但该组合物通过人工复配实现，成分复杂且非纯天然。此外，中国发明专利cn104402975b还公开了一种抗衰老短肽g13及其制备方法，但该肽涉及基因工程和重组蛋白技术，制备较为复杂，对仪器设备要求较高，操作较为繁琐。因此，有必要开发一种新型的亚麻籽提取物制备方法，以解决天然原料制备困难、效率低、稳定性低、生产工序繁琐、原料存在安全隐患且活性单一等问题。

技术实现思路

1、为了克服上述现有技术的不足，本发明以亚麻籽或油饼为原料，并通过高压脉冲电场耦合亚临界萃取从其油中经吸附洗脱获得了一种具有抗衰老功效的亚麻籽提取物，解决了天然原料制备困难、效率低、稳定性低、生产工序繁琐、原料存在安全隐患且活性单一等问题。

2、为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

3、本发明第一方面提供了一种亚麻籽提取物的制备方法，包括以下步骤：

4、s1、先对干亚麻籽进行高压脉冲电场处理，再以正丁烷为溶剂对其进行亚临界萃取，获得亚麻籽油；

5、s2、通过吸附剂从亚麻籽油中富集环肽，富集后用乙醇重悬并离心收集下层澄清溶液，再经过滤、浓缩后制得亚麻籽提取物。

6、优选地，所述高压脉冲电场处理的电场强度为25-35kv/cm，脉冲频率为100-200hz，处理的温度为10-20℃，处理的时间为100-800μs。

7、优选地，所述高压脉冲电场处理在ldt-100/4-25型高压脉冲电场提取装置中进行。

8、优选地，亚临界萃取时，亚麻籽与正丁烷的料液比为1g:30-50ml，萃取的温度为30-70℃，萃取的时间为1-3h。

9、本发明的亚麻籽提取物是由亚麻籽经高压脉冲电场耦合亚临界萃取后，再经吸附和生物乙醇洗脱后得到，其主要成分为高纯度混合环肽，每个环肽有8-10个氨基酸残基，分子量为1000da左右。所得亚麻籽提取物中各环肽的比例为：环肽a([1-9-nαc]-cla)，30-40％；环肽b([1-9-nαc]-clb)，25-35％；环肽c([1-9-nαc]，[1-meto]-clb)，3-5％；环肽d([1-8-nαc]-cld)，3-5％；环肽e([1-8-nαc],[1-meto]-cld)，3-4％；环肽f([1-8-nαc]-cle)，3-4％；环肽g([1-8-nαc],[1-meto]-cle)，2-3％；环肽h([1-8-nαc]-clf)，2-3％；环肽i([1-8-nαc]，[3-meto]-clf)，1-2％；环肽j([1-8-nαc],[1-meto]-clf)，1-2％；环肽k([1-8-nαc]，[1,3-meto]-clf)，1-2％；环肽l([1-8-nαc]-clg)，1-2％；环肽m([1-8-nαc]，[3-meto]-clg)，1-2％；环肽n([1-8-nαc],[1-meto]-clg)，1-2％；环肽o([1-8-nαc]，[1,3-meto]-clg)，1-2％。

10、优选地，所述吸附剂为凹凸棒土。

11、优选地，富集时，将所述吸附剂与亚麻籽油以1：1的质量比进行混合。

12、优选地，所述浓缩为浓缩至看不见液体为止。

13、本发明第二方面提供了一种亚麻籽提取物，所述亚麻籽提取物采用第一方面所述的制备方法制备得到。

14、本发明第三方面提供了第一方面所述的亚麻籽提取物在制备抗衰化妆品和/或抗炎抑衰产品中的应用。

15、经研究发现，本发明制备的亚麻籽提取物不仅对细胞没有毒性，而且能有效抑制脂多糖(lipopolysaccharide，lps)诱导的raw 264.7巨噬细胞中一氧化氮(nitric oxide，no)的释放，同时能在基因与蛋白水平显著抑制促炎因子(tumor necrosisfactor，tnf-α/interleukin-1β，il-1β/interleukin-6，il-6)的表达。此外，该亚麻籽提取物可通过提高细胞活性氧清除能力，并调节细胞周期、细胞凋亡、胶原蛋白合成以及基质金属蛋白酶相关基因与蛋白的表达，从而对氧化应激致衰老的细胞具有显著的修复作用。以上结果表明，本发明的亚麻籽提取物可通过抑制炎症、清除自由基、促进胶原蛋白合成以及抑制基质金属蛋白酶的表达等方式，达到抑制炎症与延缓皮肤衰老的功效。与传统的化妆品配料或药物相比，本发明的亚麻籽提取物具有无毒副作用，且能长期补充使用的特点，显现出极优良的抗衰生物活性和开发利用前景，在未来有望成为抗衰老化妆品的重要原料。

16、本发明第四方面提供了一种抗衰化妆品，所述抗衰化妆品以第二方面所述的亚麻籽提取物作为主要活性成分。

17、在一些实施方式中，所述化妆品可以是肤用化妆品、美容化妆品或特殊功能化妆品；化妆品的剂型可以为液体(如洗面乳、浴液、洗发液、化妆水、香水、洁肤水、卸妆液、精华液、原液)、乳液(如护发乳、精华乳)、膏霜类(如润面霜、粉底霜、遮瑕膏、焗发膏、精华霜、妆前霜)、粉类(如爽身粉、散粉、洁肤粉、蜜粉)、块状(粉饼、腮红粉、口红、发蜡)、或油状(卸妆油、润肤油、润发油、精华油)等。由此，可以根据不同人群使用习惯和需求，将含有第二方面所述的亚麻籽提取物活性成分的化妆品根据各种剂型相应的制备方法，制成各种市场所需的剂型。

18、优选地，所述抗衰化妆品还包括辅料，如保湿材料(甘油、丁二醇、透明质酸钠、泛醇、海藻糖等)、润肤材料(棕榈酸异丙酯、异壬酸异壬酯、聚二甲基硅氧烷、环五聚二甲基硅氧烷、辛酸/癸酸甘油三酯、霍霍巴籽油、角鲨烷等)、增稠剂(鲸蜡硬脂醇、丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物)、防腐剂(羟苯甲酯、羟苯丙酯、苯氧乙醇、乙基己基甘油等)。

19、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

20、本发明制备的亚麻籽提取物来自于天然亚麻籽或其加工副产物油饼，是由亚麻籽油经高压脉冲电场耦合亚临界溶剂提取后，再经物理吸附和乙醇洗脱后得到。该提取物包含具有强稳定性的亚麻籽环肽，并且相对于传统化妆品的抗衰成分，具有更好的抑炎抗衰、氧化损伤修复和促进胶原蛋白合成的能力，并且其提取过程具有绿色、安全、高效的特点，是一种极具产业化前景的生物活性物，解决了天然原料制备困难、效率低、稳定性低、生产工序繁琐、原料存在安全隐患且活性单一等问题。总体而言，本发明具有以下优点：

21、(1)所制备得到的亚麻籽提取物来源天然，高压脉冲电场耦合亚临界绿色萃取节能高效，对人体和环境均友好；

22、(2)所制备得到的亚麻籽提取物可通过抑制炎症进而发挥其强抗衰老作用；

23、(3)所制备得到的亚麻籽提取物可通过提高自由基清除力与胶原蛋白合成能力，并通过降低基质金属蛋白酶活性从而发挥其抗衰老作用；

24、(4)所制备得到的亚麻籽提取物具有显著的抗衰老功效，其抗衰活性优于现有抗衰活性物(玻色因和富勒烯)。