用于诱导抗原特异性免疫耐受的组合物、装置和方法与流程

背景技术：

1、许多种类的疾病和病症均涉及致病性或不希望的抗原特异性免疫反应(包括自身免疫性疾病、过敏)以及对生物药物产生抗药物抗体(ada)反应。传统的治疗方法依赖于施用广效免疫抑制剂，这些免疫抑制剂对于加剧每种疾病或病症的病理性免疫反应不具有特异性，并且常常会增加感染和恶性肿瘤的风险。免疫耐受是免疫系统对一组相关抗原无反应(包括对自身抗原的自身耐受和对食物抗原的口服耐受)或对特定抗原(因此表现出严格的抗原特异性)无反应的状态。能够实现抗原特异性免疫耐受诱导(iti)的疗法有潜力为治疗过敏性和自身免疫性疾病提供更有效的疗法，同时保持对其他抗原的免疫反应性，并提高已被批准用于治疗多种疾病(例如，血友病、类风湿性关节炎和癌症)的生物药物的效用。

技术实现思路

1、本披露提供了用于诱导免疫耐受的治疗性免疫接种或疫苗接种方法，其中将一种或多种抗原(例如，免疫原性分子，如肽、蛋白质、dna)以抑制对所递送的一种或多种抗原具有特异性的免疫反应的产生(如抗原特异性抗体的产生)的方式递送至受试者。

2、本文描述了一种可植入装置，其(i)含有经遗传修饰以表达和分泌一种或多种抗原的细胞(例如，与受试者同种异体的细胞)，并且(ii)被配置成在植入接受者中后递送至少一种免疫调节剂，该免疫调节剂例如通过促进抗原特异性调节性t细胞(treg)反应或通过抑制抗原特异性效应t细胞(teff)反应来促进耐受诱导。该装置被配置成保护抗原分泌细胞免受接受者免疫系统的影响，减轻接受者对植入装置的异物反应(fbr，如本文所定义)，并防止抗原分泌细胞离开装置，同时允许以足以诱导对抗原耐受的量和时间段从装置连续递送(例如，离开)分泌的抗原和免疫调节剂。

3、在实施例中，由装置递送的每种抗原是包含与靶蛋白抗原相同的氨基酸序列的蛋白质，或是其免疫原性片段，例如包含存在于靶蛋白抗原中的t细胞表位的肽。

4、在实施例中，免疫调节剂是免疫抑制剂化合物(例如，mtor抑制剂，如雷帕霉素)，其任选地作为包含在装置中的缓释配制品提供。在实施例中，免疫调节剂是由包含在装置中的经遗传修饰的细胞表达和分泌的免疫调节蛋白(例如，白细胞介素-10、白细胞介素-22、可溶性ctla-4或可溶性flt3-配体)，其可以是由抗原分泌细胞或由不同细胞表达和分泌的。在实施例中，该装置被配置成递送两种或更多种免疫调节剂，例如，mtor抑制剂和免疫调节蛋白的组合。

5、在实施例中，装置的表面包含减轻对装置的fbr(如本文所定义)的化合物或聚合物(例如，去纤维化化合物或去纤维化聚合物)。在实施例中，去纤维化聚合物包含生物相容性两性离子聚合物，例如，如wo 2017/218507、wo 2018/140834或liu等人,zwitterionically modified alginates mitigate cellular overgrowth for cellencapsulation[两性离子修饰的藻酸盐减轻细胞包封的细胞过度生长],naturecommunications[自然通讯](2019)10:5262中所述。在实施例中，该化合物是具有式(i)的化合物：

6、

7、或其药学上可接受的盐，其中变量a、l1、m、l2、p、l3和z以及相关的子变量如本文所定义。

8、在实施例中，该装置被配置为两隔室水凝胶胶囊，其中内隔室(包含经遗传修饰的细胞以及任选地免疫调节性小分子化合物)被屏障隔室完全环绕。在一些实施例中，屏障隔室包含用减轻接受者对装置的异物反应(fbr)的化合物共价修饰的聚合物。

9、在实施例中，将本文所述的装置或多个装置与药学上可接受的赋形剂组合以制备装置制品或组合物，该制品或组合物可施用于需要对该装置产生的一种或多种抗原进行耐受诱导的受试者(例如，施用至腹膜腔内)。在实施例中，施用装置制品或组合物以预防疾病或病症的发展(例如，受试者在遗传上易患自身免疫性疾病)，或在将生物药物计划施用于受试者之前诱导对该生物药物的耐受。在实施例中，将装置制品或组合物施用于受试者，用于治疗活动性疾病或病症，例如，以减缓疾病或病症的进展或改善其临床症状。

10、另一方面，本披露的特征在于可植入装置，用于向受试者(例如，人受试者)递送由包含在该装置中的细胞分泌的至少一种治疗物质(例如，治疗性蛋白或肽)。该装置被配置成在植入受试者中后以足以诱导受试者免疫系统对所递送的治疗物质的耐受的量和时间段递送至少一种免疫调节剂(例如，免疫抑制剂化合物或免疫抑制细胞因子，各自如本文所定义)。该装置的特征还在于其具有以下配置：防止细胞离开装置同时允许治疗物质和免疫调节剂离开该装置，保护经遗传修饰的细胞免受接受者免疫系统的影响，并减轻对植入装置的fbr(如本文所定义的)。在实施例中，与不递送任何免疫调节剂的植入参比装置相比，通过该植入装置递送免疫调节剂导致受试者较低的抗药物抗体(ada)反应(例如，如本文所定义的)。可植入装置可用于向受试者提供治疗物质的方法中，该方法包括向该受试者施用(例如，植入)装置、包含该装置的组合物或包含多个装置的组合物。在实施例中，受试者患有凝血障碍(例如，血友病a)、溶酶体贮积障碍(例如，法布里病(fabry disease)、mps-1)、内分泌障碍、糖尿病、或神经系统变性疾病。

11、本文还提供了经遗传修饰的哺乳动物(例如，人)细胞，其表达和分泌本文所述的一种或多种免疫调节蛋白。在实施例中，免疫调节蛋白由插入到细胞基因组一个或多个位置的外源编码序列编码。在实施例中，外源编码序列经密码子优化以实现细胞的更高表达。在实施例中，细胞衍生自人rpe细胞，例如，arpe-19细胞。

技术特征：

1.一种可植入装置，其包含经遗传修饰以表达和分泌一种或多种抗原的第一多个哺乳动物细胞，其中该装置被配置成：

2.如权利要求1所述的可植入装置，其包括以下特征中的至少一个：

3.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(iv)，并且其中该信号肽序列基本上由mgwraagalllalllhgrlla(seq id no:20)组成。

4.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(ii)和特征(iii)之一或两者，任选地其中该装置不包括特征(ii)。

5.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(i)。

6.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(v)。

7.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(vi)。

8.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(vii)。

9.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(ii)，并且其中该免疫调节蛋白是il-10蛋白、il-22蛋白或可溶性ctla-4蛋白(sctla-4)，并且任选地其中：

10.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(ii)和(iii)，其中该免疫调节蛋白是可溶性flt3-配体蛋白(sflt3-l)，任选地其中该sflt3-l蛋白由图4c中所示的外源编码序列编码。

11.如权利要求1所述的可植入装置，其中该免疫调节剂包含免疫抑制剂化合物的缓释配制品。

12.如权利要求11所述的可植入装置，其中该免疫抑制剂化合物是mtor抑制剂，任选地其中该免疫抑制剂化合物是雷帕霉素化合物。

13.如权利要求12所述的可植入装置，其中该免疫抑制剂化合物是雷帕霉素。

14.如权利要求1所述的可植入装置，其中每种多个经遗传修饰的细胞包含在被屏障隔室环绕的细胞容纳隔室中，任选地其中该细胞容纳隔室包含第一水凝胶形成聚合物，并且该屏障隔室包含第二水凝胶形成聚合物。

15.如权利要求14所述的可植入装置，其中该第一水凝胶形成聚合物和该第二水凝胶形成聚合物中的一种或两种是藻酸盐。

16.如权利要求14所述的可植入装置，其包含两个或更多个细胞容纳隔室。

17.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(v)，其中该减轻fbr的化合物是具有式(i)的化合物：

18.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(v)，其中该减轻fbr的化合物选自表4中所示的化合物或其药学上可接受的盐。

19.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(v)，其中该减轻fbr的化合物是：

20.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(v)，其中该减轻fbr的化合物是：

21.如权利要求2所述的可植入装置，其包括特征(v)，其中该减轻fbr的化合物是

22.如权利要求1所述的可植入装置，其中由该第一多个经遗传修饰的哺乳动物细胞分泌的抗原是治疗性蛋白或治疗性肽，任选地其中该治疗性蛋白是凝血因子、凝固因子、激素、酶、抗体、细胞因子或可溶性细胞因子受体。

23.如权利要求1所述的可植入装置，其中该至少一种免疫调节剂是包含在该装置内的雷帕霉素化合物的缓释配制品，任选地其中向该受试者连续递送该雷帕霉素化合物至少20天。

24.一种水凝胶胶囊，其包含：

25.如权利要求24所述的水凝胶胶囊，其中该细胞容纳隔室进一步包含经遗传修饰以表达和分泌免疫调节蛋白的活细胞。

26.如权利要求25所述的水凝胶胶囊，其中该免疫调节蛋白是il-10蛋白、il-22蛋白、可溶性ctla-4蛋白(sctla-4)或可溶性flt3-配体(sflt3-l)，并且任选地其中：

27.如权利要求24所述的水凝胶胶囊，其中该缓释配制品存在于该细胞容纳隔室和该屏障隔室之一或两者中。

28.如权利要求24所述的水凝胶胶囊，其中该免疫抑制剂化合物是雷帕霉素化合物，任选地其中该雷帕霉素化合物是雷帕霉素。

29.如权利要求28所述的水凝胶胶囊，其中该第一聚合物组合物包含水凝胶形成聚合物，并且该雷帕霉素化合物的缓释配制品通过以下方法来制备，该方法包括将所需量的该雷帕霉素化合物的无定形粉末添加到所需体积的包含该水凝胶形成聚合物的溶液中，对所得混合物进行超声处理直至形成基本上均匀的悬浮液，将这些活细胞添加到该悬浮液中，以及使该聚合物、雷帕霉素化合物和细胞悬浮液的液滴与交联溶液接触，任选地其中该水凝胶形成聚合物是藻酸盐。

30.如权利要求29所述的水凝胶胶囊，其中选择雷帕霉素化合物粉末的量和该水凝胶形成聚合物溶液的体积，以获得每ml聚合物溶液约2.5mg粉末的混合物。

31.如权利要求25所述的水凝胶胶囊，其中该屏障隔室包含用以下共价修饰的藻酸盐：

32.如权利要求25所述的水凝胶胶囊，其中该屏障隔室包含用以下共价修饰的藻酸盐：

33.如权利要求25所述的水凝胶胶囊，其中这些活细胞的至少一部分经遗传修饰以连续表达和分泌第二抗原，其中该第一和第二抗原由相同细胞或不同细胞表达和分泌。

34.如权利要求25所述的水凝胶胶囊，其中该胶囊中的所有这些经遗传修饰的细胞均衍生自arpe-19细胞或诱导性多能干细胞。

35.如权利要求25所述的水凝胶胶囊，其中该免疫调节蛋白是il-10蛋白，任选地其中该il-10蛋白由图1b、1d、1e或1f中所示的外源编码序列编码。

36.一种装置组合物，其包含水凝胶胶囊制品和药学上可接受的赋形剂，其中该制品中的每个水凝胶胶囊均是如权利要求24至35中任一项所定义的水凝胶胶囊，并且任选地其中该装置组合物的体积小于10毫升(ml)、小于8ml或小于5ml。

37.一种可植入装置，其包含经遗传修饰以表达和分泌治疗物质的哺乳动物细胞，其中该装置被配置成：

38.如权利要求37所述的可植入装置，其中该装置包含该免疫抑制剂化合物的缓释配制品，任选地其中该免疫抑制剂化合物是mtor抑制剂。

39.如权利要求37所述的可植入装置，其中该免疫抑制剂化合物是雷帕霉素化合物，任选地其中该雷帕霉素化合物是雷帕霉素。

40.如权利要求37所述的可植入装置，其中除该治疗物质之外，这些哺乳动物细胞经遗传修饰以表达和分泌免疫调节蛋白，任选地其中该免疫调节蛋白是il-10蛋白、il-22蛋白、可溶性ctla-4蛋白(sctla-4)或可溶性flt3-配体(sflt3-l)。

41.如权利要求37所述的可植入装置，其中该装置的外表面包含用选自由以下组成的组的至少一种化合物共价修饰的聚合物：上表4中所示的化合物100、化合物101、化合物110、化合物112、化合物113、化合物114、化合物122和化合物123，或该化合物的药学上可接受的盐。

42.如权利要求37所述的可植入装置，其中该装置是水凝胶胶囊，该水凝胶胶囊包含：

43.如权利要求42所述的可植入装置，其中该第一水凝胶形成聚合物是藻酸盐，任选地其中该藻酸盐用由grgdsp组成的肽共价修饰，并且该第二水凝胶形成聚合物是藻酸盐，任选地其中该屏障隔室进一步包含未经修饰的藻酸盐。

44.如权利要求37所述的可植入装置，其中该治疗物质是凝血因子、凝固因子、激素、酶、抗体、细胞因子或可溶性细胞因子受体。

45.一种装置组合物，其包含装置的制品和药学上可接受的赋形剂，其中该制品中的每个装置是如权利要求37所述的装置，并且任选地其中该组合物的体积小于10毫升、小于8ml或小于5ml。

46.一种向受试者提供治疗物质的方法，该方法包括向该受试者施用如权利要求37所述的装置或如权利要求45所述的装置组合物。

47.如权利要求46所述的方法，该方法进一步包括：

48.一种经遗传修饰的细胞，其包含图1b、1d、1e、1f、2c、2e、3c、3e或4c中任一所示的外源核苷酸编码序列。

49.如权利要求48所述的经遗传修饰的细胞，其衍生自arpe-19细胞。

技术总结
本文描述了被配置成连续递送一种或多种抗原与一种或多种免疫抑制药剂的组合的可植入装置。这些装置可用于诱导对所递送的一种或多种抗原的抗原特异性免疫耐受，以及用于在递送治疗物质时减少或防止抗药物抗体反应。

技术研发人员：S·B·博斯,H·班杜克瓦拉
受保护的技术使用者：西吉隆医疗股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16