经鼻施予流感疫苗的制作方法

本发明涉及能够由鼻腔粘膜高效地摄取的经鼻施予型的流感疫苗。

背景技术：

1、冬季流行的流感病毒是在上呼吸道感染并呈现急性发热、咳嗽及咽喉痛的急性感染症。作为对该流感病毒的预防法，可举出疫苗，但在世界上已经批准的疫苗几乎都是注射型疫苗，能够促进以血中抗体应答为代表的全身性免疫应答，但不能诱导在病毒感染局部的粘膜免疫。

2、已知在欧美对于感染人数多、脑病风险高的儿童而言，与已经批准的注射型疫苗相比，感染防御效果高的经鼻施予减毒活疫苗被批准，对于上呼吸道感染症，经鼻疫苗显示出高的效果。但是，在欧美被批准的用于儿童的减毒活疫苗(非专利文献1)虽然具有高的有效性，但是另一方面，其副反应也强，因此可应用于2岁以上的儿童，不能对重症化风险最高的不足2岁的婴幼儿施予。

3、在日本，为了解决该副反应的问题，正在研究开发灭活全毒粒疫苗的经鼻施予制剂，有报道称在临床上，通过灭活全毒粒疫苗的经鼻施予不仅能够诱导血中的抗体应答，而且还能够诱导鼻腔粘膜的iga(非专利文献2)。但是，临床上所施予的灭活全毒粒疫苗的用量是已经批准疫苗的3倍量即45μgha/株/剂，在灭活全毒粒疫苗的经鼻施予中，若不是高效价的疫苗，则不能实现充分的免疫诱导。这是因为经常暴露于外界的粘膜上皮细胞具有屏障功能。

4、作为用于使疫苗跨越粘膜上皮屏障、高效地摄取至体内的方法之一，可举出介由m细胞递送疫苗。m细胞筛选外来的抗原，高效地将外来抗原向存在于正下方的免疫活性细胞递送，是有助于粘膜免疫调节的细胞。已知有几种将该m细胞靶向化进行特异性结合的物质，可举出耶尔森菌属细菌所具有的侵袭素、作为轮状病毒的表面抗原的σ1蛋白质，但均为外来蛋白质，在这些蛋白质性的靶向化分子中，对靶向化分子的免疫诱导存在悬念。

5、本申请的发明人发现如专利文献1、2及非专利文献3所示，将没食子酸衍生物tetragalloyl-d-lysine dendrimer(tgdk)作为非蛋白质性的m细胞靶向化分子，证明其将肠道m细胞靶向化。但是，不知道该tgdk在经鼻施予中显示出与肠道同样的功能，另外，也不知道其与流感疫苗的组合是有效的。

6、现有技术文献

7、专利文献

8、专利文献1：国际公开第2007/052641号

9、专利文献2：国际公开第2013/024859号

10、非专利文献

11、非专利文献1：mossad sb.demystifying flumist,a new intranasal,liveinfluenza vaccine(揭秘鼻喷式流感疫苗，一种新型鼻内流感活疫苗).cleve clin j med(克利夫兰医学杂志).2003sep；70(9):801-6.

12、非专利文献2：ainai a,tamura s,suzuki t,et al.intranasal vaccinationwith an inactivated whole influenza virus vaccine induces strong antibodyresponses in serum and nasal mucus of healthy adults(经鼻接种灭活流感全病毒疫苗可在健康成年人的血清和鼻粘液中引起强烈的抗体应答).hum vaccin immunother(人类疫苗和免疫疗法).2013sep；9(9):1962-70.

13、非专利文献3：misumi s,masuyama m,takamune n,et al.targeted delivery ofimmunogen to primate m cells with tetragalloyl lysine dendrimer(tetragalloyllysine dendrimer靶向递送免疫原至灵长类m细胞).journal of immunology(免疫学杂志),2009；182(10):6061-6070

技术实现思路

1、发明所要解决的课题

2、本发明涉及提供在经鼻施予中有效性高的流感疫苗。

3、用于解决课题的手段

4、本申请的发明人深入研究的结果发现，在将化学键合有m细胞靶向化分子tgdk的流感抗原经鼻粘膜施予的情况下，血中及鼻腔的免疫应答升高，该病毒抗原作为经鼻施予流感疫苗是有用的。

5、即，本发明涉及以下的1)～5)。

6、1)经鼻施予的流感疫苗组合物，其含有化学键合有tgdk的流感抗原。

7、2)如1)所述的疫苗组合物，其中，流感抗原是选自a型流感病毒株及b型流感病毒株中的1种以上的病毒的抗原。

8、3)如1)或2)所述的疫苗组合物，其中，流感抗原是裂解抗原或灭活全病毒抗原。

9、4)如1)～3)中任一项所述的疫苗组合物，其被制剂化成液剂或干燥粉末。

10、5)如1)～4)中任一项所述的疫苗组合物，其中，组合物中的流感抗原的含量为1～21μgha/株。

11、6)免疫方法，其将含有化学键合有tgdk的流感抗原的流感疫苗组合物经鼻施予至需要其的对象。

12、7)流感的预防方法，其将含有化学键合有tgdk的流感抗原的流感疫苗组合物经鼻施予至需要其的对象。

13、发明效果

14、根据本发明，能够提供能够诱导粘膜免疫的有效性高的流感疫苗，通过附加价值高的流感预防药的创制，成为对医药品产业的巨大贡献。

1.经鼻施予的流感疫苗组合物，其含有化学键合有tgdk的流感抗原。

2.如权利要求1所述的疫苗组合物，其中，流感抗原是选自a型流感病毒株及b型流感病毒株中的1种以上的病毒的抗原。

3.如权利要求1或2所述的疫苗组合物，其中，流感抗原是裂解抗原或灭活全病毒抗原。

4.如权利要求1～3中任一项所述的疫苗组合物，其被制剂化成液剂或干燥粉末。

5.如权利要求1～4中任一项所述的疫苗组合物，其中，组合物中的流感抗原的含量为1～21μgha/株。

6.免疫方法，其中，将含有化学键合有tgdk的流感抗原的流感疫苗组合物经鼻施予至需要其的对象。

7.流感的预防方法，其中，将含有化学键合有tgdk的流感抗原的流感疫苗组合物经鼻施予至需要其的对象。