抗TIGIT抗体及其使用方法与流程

本公开涉及抗tigit抗体和其使用方法。

背景技术：

1、具有ig和itim结构域的蛋白质t细胞免疫受体(tigit)，又称为vsig9或vstm3，是免疫球蛋白(ig)超家族中的i型跨膜蛋白。它具有单一ig结构域、i型跨膜结构域、单一细胞内免疫受体酪氨酸抑制基序(itim)和单一免疫球蛋白尾酪氨酸(itt)样磷酸化基序并且在活化的cd4阳性/cd25阳性调节性t细胞(treg)、记忆cd45ro阳性t细胞和自然杀手(nk)细胞上表达，但不在幼稚t细胞上表达。

2、cd155(又称为脊髓灰质炎病毒受体(pvr))在单核细胞和树突状细胞上高水平表达，并且能够通过结合其两种受体cd226和cd96活化效应t细胞和nk细胞，以及削弱treg的活性。tigit结合至cd155，并且经显示，它拮抗cd155与cd226和cd96的相互作用，由此抑制t细胞和nk细胞介导的免疫活性。

3、考虑到人tigit在调节免疫反应方面的作用，被设计用于阻断tigit配体相互作用的治疗剂非常有望用于治疗涉及免疫抑制的疾病。

技术实现思路

1、本公开提供特异性结合至tigit(例如人tigit)的抗体。还提供包含这些抗体的药物组合物、编码这些抗体的核酸、用于产生这些抗体的表达载体和宿主细胞，以及使用这些抗体治疗受试者的方法。

2、一方面，本公开提供一种特异性结合至人tigit的分离的抗体，所述抗体包含：

3、(a)vh，所述vh包含seq id no:7的vh氨基酸序列的cdrh1、cdrh2和cdrh3氨基酸序列；和/或

4、(b)vl，所述vl包含seq id no:9的vl氨基酸序列的cdrl1、cdrl2和cdrl3氨基酸序列，

5、其中所述vh包含分别在氨基酸位置12处的赖氨酸、在氨基酸位置16处的丝氨酸、在氨基酸位置73处的赖氨酸、在氨基酸位置76处的丝氨酸、在氨基酸位置78处的丙氨酸和/或在氨基酸位置83处的精氨酸，并且

6、其中所述vl包含在氨基酸位置45处的赖氨酸、在氨基酸位置57处的甘氨酸、在氨基酸位置58处的缬氨酸和/或在氨基酸位置80处的丙氨酸，

7、在每种情况下均根据kabat编号。

8、在某些实施方案中：

9、(a)所述vh包含分别在氨基酸位置12、16、73、76、78和83处的赖氨酸、丝氨酸、赖氨酸、丝氨酸、丙氨酸和精氨酸，并且所述vl包含分别在氨基酸位置45、57、58和80处的赖氨酸、甘氨酸、缬氨酸和丙氨酸；

10、(b)所述vh包含分别在氨基酸位置12、16和83处的赖氨酸、丝氨酸和精氨酸，并且所述vl包含分别在氨基酸位置45和80处的赖氨酸和丙氨酸；

11、(c)所述vh包含分别在氨基酸位置12、16、73、76、78和83处的赖氨酸、丝氨酸、赖氨酸、丝氨酸、丙氨酸和精氨酸，并且所述vl包含分别在氨基酸位置45和80处的赖氨酸和丙氨酸；或

12、(d)所述vh包含分别在氨基酸位置12、16和83处的赖氨酸、丝氨酸和精氨酸，并且所述vl包含分别在氨基酸位置45、57、58和80处的赖氨酸、甘氨酸、缬氨酸和丙氨酸，

13、所述氨基酸位置均根据kabat编号。

14、在某些实施方案中，所述抗体包含分别为seq id no:1、2、3、4、5和6的cdrh1、cdrh2、cdrh3、cdrl1、cdrl2和cdrl3氨基酸序列。

15、在某些实施方案中，所述抗体包含seq id no:7或8的vh氨基酸序列。在另一个实施方案中，所述vh的氨基酸序列由seq id no:7或8的氨基酸序列组成。在另一个实施方案中，所述抗体包含seq id no:9或10的vl氨基酸序列。在另一个实施方案中，所述vl由seqid no:9或10的氨基酸序列组成。

16、另一方面，本公开提供一种特异性结合至人tigit的分离的抗体，所述抗体包含：包含seq id no:7或8的氨基酸序列的vh，和/或包含seq id no:9或10的氨基酸序列的vl。在某些实施方案中，所述vh的氨基酸序列由seq id no:7或8的氨基酸序列组成，和/或所述vl的氨基酸序列由seq id no:9或10的氨基酸序列组成。在另一个实施方案中，所述抗体包含分别为seq id no:7和9；7和10；8和9；或8和10的vh和vl氨基酸序列。在另一个实施方案中，vh和vl的氨基酸序列分别由seq id no:7和9；7和10；8和9；或8和10的氨基酸序列组成。

17、在某些实施方案中，所述抗体包含重链恒定区，所述重链恒定区选自由以下各项组成的组：igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2。在另一个实施方案中，所述抗体包含igg1重链恒定区。在另一个实施方案中，所述抗体包含重链恒定区，所述重链恒定区包含seq id no:16或22的氨基酸序列。在另一个实施方案中，igg1重链恒定区的氨基酸序列包含根据eu编号系统编号的n297a突变。

18、在某些实施方案中，所述抗体包含作为野生型重链恒定区的变体的重链恒定区，其中所述变体重链恒定区结合至fcγr的亲和力比所述野生型重链恒定区结合至fcγr的亲和力高。在另一个实施方案中，fcγr是fcγriib或fcγriiia。

19、在某些实施方案中，igg1重链恒定区的氨基酸序列包含根据eu编号系统编号的s267e和l328f突变。在另一个实施方案中，igg1重链恒定区的氨基酸序列包含根据eu编号系统编号的至少一个选自由以下各项组成的组的突变：s239d、a330l和i332e。在另一个实施方案中，igg1重链恒定区的氨基酸序列包含根据eu编号系统编号的s239d、a330l和i332e突变。

20、在某些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含seq id no:11、12、19或20的氨基酸序列。在另一个实施方案中，所述重链由seq id no:11、12、19或20的氨基酸序列组成。在另一个实施方案中，所述抗体包含轻链恒定区，所述轻链恒定区包含seq id no:17或18的氨基酸序列。在另一个实施方案中，所述抗体包含轻链，所述轻链包含seq id no:13、14、15或21的氨基酸序列。在另一个实施方案中，所述轻链由seq id no:13、14、15或21的氨基酸序列组成。

21、另一方面，本公开提供一种特异性结合至人tigit的分离的抗体，其中所述抗体包含：包含seq id no:11、12、19或20的氨基酸序列的重链，和/或包含seq id no:13、14、15或21的氨基酸序列的轻链。

22、在某些实施方案中，所述重链的氨基酸序列由seq id no:11、12、19或20的氨基酸序列组成；和/或所述轻链的氨基酸序列由seq id no:13、14、15或21的氨基酸序列组成。在另一个实施方案中，重链和轻链分别包含以下氨基酸序列：seq id no:11和13；11和14；11和15；11和21；12和13；12和14；12和15；12和21；19和13；19和14；19和15；19和21；20和13；20和14；20和15；或20和21。在另一个实施方案中，重链和轻链分别由以下氨基酸序列组成：seq id no:11和13；11和14；11和15；11和21；12和13；12和14；12和15；12和21；19和13；19和14；19和15；19和21；20和13；20和14；20和15；或20和21。

23、在某些实施方案中，所述抗体是多特异性抗体。在另一个实施方案中，所述分离的抗体与细胞毒性剂、细胞生长抑制剂、毒素、放射性核素或可检测标记缀合。在另一个实施方案中，所述分离的抗体与抗体缀合。

24、另一方面，本公开提供一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸编码本文所公开的分离的抗体的vh和/或vl，或重链和/或轻链。

25、另一方面，本公开提供一种载体，所述载体包含本文所公开的多核苷酸。

26、另一方面，本公开提供一种重组宿主细胞，所述重组宿主细胞包含：

27、(a)本文所公开的多核苷酸；

28、(b)本文所公开的载体；

29、(c)多核苷酸，所述多核苷酸编码本文所公开的分离的抗体的vh和vl或重链和轻链；

30、(d)载体，所述载体包含编码本文所公开的分离的抗体的vh和vl或重链和轻链的多核苷酸；

31、(e)编码本文所公开的分离的抗体的vh或重链的第一多核苷酸，以及编码本文所公开的分离的抗体的vl或轻链的第二多核苷酸；或

32、(f)第一载体，所述第一载体包含编码本文所公开的分离的抗体的vh或重链的第一多核苷酸；以及第二载体，所述第二载体包含编码本文所公开的分离的抗体的vl或轻链的第二多核苷酸。

33、另一方面，本公开提供一种药物组合物，所述药物组合物包含本文所公开的分离的抗体、本文所公开的多核苷酸、本文所公开的载体或本文所公开的宿主细胞，以及药学上可接受的载剂或赋形剂。

34、另一方面，本公开提供一种产生分离的抗体的方法，所述方法包括在适合条件下培养本文所公开的宿主细胞，由此表达多核苷酸并产生所述分离的抗体。

35、另一方面，本公开提供一种产生分离的抗体的方法，所述方法包括在适合条件下在细胞中表达：

36、(a)编码本文所公开的抗体的vh的第一多核苷酸和编码本文所公开的抗体的vl的第二多核苷酸；或

37、(b)编码本文所公开的抗体的重链的第一多核苷酸和编码本文所公开的抗体的轻链的第二多核苷酸，

38、由此表达多核苷酸并产生所述抗体。

39、另一方面，本公开提供一种增强受试者的免疫反应的方法，所述方法包括将有效量的本文所公开的分离的抗体、本文所公开的多核苷酸、本文所公开的载体、本文所公开的宿主细胞或本文所公开的药物组合物施用给所述受试者。

40、另一方面，本公开提供一种治疗受试者的癌症的方法，所述方法包括将有效量的本文所公开的分离的抗体、本文所公开的多核苷酸、本文所公开的载体、本文所公开的宿主细胞或本文所公开的药物组合物施用给所述受试者。

41、在某些实施方案中，所述分离的抗体、多核苷酸、载体、宿主细胞或药物组合物是通过全身、静脉内、皮下、肿瘤内施用，或者递送至肿瘤引流淋巴结。

42、在某些实施方案中，所述方法还包括将另外的治疗剂施用给受试者。

43、在某些实施方案中，所述另外的治疗剂是化疗剂。

44、在某些实施方案中，所述另外的治疗剂是检查点靶向剂。在另一个实施方案中，所述检查点靶向剂选自由以下各项组成的组：拮抗性抗pd-1抗体、拮抗性抗pd-l1抗体、拮抗性抗pd-l2抗体、拮抗性抗ctla-4抗体、拮抗性抗tim-3抗体、拮抗性抗lag-3抗体、拮抗性抗vista抗体、拮抗性抗tigit抗体、拮抗性抗ceacam1抗体、拮抗性抗cd96抗体、激动性抗gitr抗体和激动性抗ox40抗体。在另一个实施方案中，所述另外的治疗剂是抗pd-1抗体，任选地其中所述抗pd-1抗体是帕博利珠单抗(pembrolizumab)或纳武单抗(nivolumab)。

45、在某些实施方案中，所述另外的治疗剂是吲哚胺-2,3-双加氧酶(ido)的抑制剂。在另一个实施方案中，所述抑制剂选自由以下各项组成的组：依帕卡司他(epacadostat)、f001287、吲哚莫德(indoximod)和nlg919。

46、在某些实施方案中，所述另外的治疗剂是疫苗。在另一个实施方案中，所述疫苗包含热休克蛋白肽复合物(hsppc)，所述hsppc包含与抗原肽复合的热休克蛋白。在另一个实施方案中，所述热休克蛋白是hsc70并且与肿瘤相关抗原肽复合。在另一个实施方案中，所述热休克蛋白是gp96蛋白并且与肿瘤相关抗原肽复合，任选地其中所述hsppc来源于从受试者获得的肿瘤。

47、另一方面，本公开提供一种治疗受试者的感染性疾病的方法，所述方法包括将有效量的本文所公开的分离的抗体、本文所公开的多核苷酸、本文所公开的载体、本文所公开的宿主细胞或本文所公开的药物组合物施用给所述受试者。