使用间充质谱系前体细胞或干细胞治疗特定患者的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的方法与流程

本公开涉及用于治疗或预防有需要的受试者的急性呼吸窘迫综合征(ards)的方法。

背景技术：

1、与多种疾患(诸如病毒感染)相关的呼吸系统疾病对普通人群来说是个问题。在许多情况下，它们伴有炎症，这会加重肺部疾患，并可能导致急性呼吸窘迫综合征(ards)。与65岁以下的患者相比，65岁以上的患者更有可能出现疾病严重程度增加和临床结果更差的情况。

2、在患有急性呼吸窘迫综合征(ards)的老年患者中仍然存在未得到满足的治疗需求，特别是当继发于病毒感染且需要新的治疗方案时。

技术实现思路

1、本发明人已经证明，施用间充质谱系或前体细胞(mlpsc)可以改善患有急性呼吸窘迫综合征(ards)的患者的呼吸功能。生物标志物分析揭示在经mlpsc治疗的＜65岁的患者中炎症途径下调，并且这与改善的预后和呼吸功能的持久改善相对应。对经mlpsc治疗的、大于65岁的患者进行的相应生物标志物分析令人惊讶地揭示这些患者具有较高的炎症基线水平，并且这与呼吸功能的初始改善相对应，但并未持续。由于在无论年龄(＜65岁相对于＞65岁)的ards患者中都涉及相似的炎症途径，本发明人的发现表明如果用mlpsc的更高剂量或更长时间的给药治疗患者，则可以实现对具有增加的炎性生物标志物基线水平和/或＞65岁的患者进行改善的治疗。在某些实例中，用mlpsc的更高剂量或更长时间的给药可以实现与＜65岁的患者相当的结果。

2、因此，在第一实例中，本公开涉及治疗有需要的人受试者的急性呼吸窘迫综合征(ards)的方法，所述方法包括选择大于或等于65岁的患有ards的受试者，以及向所述受试者施用超过400万个间充质谱系前体细胞或干细胞(mlpsc)/千克体重(细胞/kg)。

3、在一个实例中，受试者的炎性生物标志物水平升高，这指示：

4、-嗜中性粒细胞和巨噬细胞流入肺部增加；

5、-巨噬细胞炎症增加和嗜中性粒细胞向肺部迁移增强；和/或，

6、-t细胞活化/增殖和细胞凋亡性死亡。

7、在另一个实例中，本公开涉及治疗有需要的人受试者的急性呼吸窘迫综合征(ards)的方法，所述方法包括选择具有升高的基线炎症水平的患有ards的受试者。在一个实例中，基于升高的基线炎症水平来确定基线炎症水平的升高。因此，在一个实例中，本公开涉及治疗有需要的人受试者的急性呼吸窘迫综合征(ards)的方法，所述方法包括选择具有增加的炎性生物标志物的患有ards的受试者，所述炎性生物标志物指示：

8、-嗜中性粒细胞和巨噬细胞流入肺部增加；

9、-巨噬细胞炎症增加和嗜中性粒细胞向肺部迁移增强；和/或，

10、-t细胞活化/增殖和细胞凋亡性死亡，

11、并且向所述受试者施用超过400万个间充质谱系前体细胞或干细胞(mlpsc)/千克体重(细胞/kg)。

12、在另一个实例中，本公开涉及治疗有需要的人受试者的或预防急性呼吸窘迫综合征(ards)的方法，所述方法包括向所述受试者施用超过400万个间充质谱系前体细胞或干细胞(mlpsc)/千克体重(细胞/kg)，其中所述受试者大于或等于65岁和/或具有增加的炎性生物标志物，所述炎性生物标志物指示：

13、-嗜中性粒细胞和巨噬细胞流入肺部增加；

14、-巨噬细胞炎症增加和嗜中性粒细胞向肺部迁移增强；和/或，

15、-t细胞活化/增殖和细胞凋亡性死亡。

16、在一个实例中，受试者依赖于呼吸机。例如，可以在施用mlpsc之前，对受试者进行机械通气。

17、在一个实例中，指示嗜中性粒细胞和巨噬细胞流入肺部增加的一种或多种炎性生物标志物是ccr2或cxcr3结合趋化因子。例如，ccr2结合趋化因子可以是ccl2、ccl3或ccl7。在一个实例中，ccr2结合趋化因子是ccl2。在另一个实例中，cxcr3结合趋化因子是cxcl10或cxcl9。在一个实例中，cxcr3结合趋化因子是cxcl10。在一个实例中，指示巨噬细胞炎症增加和嗜中性粒细胞向肺部迁移增强的一种或多种炎性生物标志物是il-6或il-8。在一个实例中，指示t细胞活化/增殖和细胞凋亡性死亡的一种或多种炎性生物标志物是ccl19或il-2。

18、本发明人的发现表明，可以基于某种或某些生物标志物的水平和/或年龄来选择具有升高的炎性生物标志物水平的受试者进行有效治疗。在一个实例中，本公开的方法包括基于相对于＜65岁的受试者ccl2水平提高来选择受试者。在另一个实例中，基于相对于＜65岁的受试者ccl3水平增加来选择受试者。在另一个实例中，基于相对于＜65岁的受试者ccl7水平增加来选择受试者。在另一个实例中，本公开的方法包括基于相对于＜65岁的受试者cxcl10水平增加来选择受试者。在另一个实例中，基于相对于＜65岁的受试者cxcl9水平增加来选择受试者。在另一个实例中，本公开的方法包括基于相对于＜65岁的受试者il-6水平增加来选择受试者。在另一个实例中，基于相对于＜65岁的受试者il-8水平增加来选择受试者。在另一个实例中，本公开的方法包括基于相对于＜65岁的受试者ccl19水平增加来选择受试者。在另一个实例中，基于相对于＜65岁的受试者il-2水平增加来选择受试者。在这些实例中，相对于＜65岁的患者，炎性生物标志物的水平增加超过1倍。在另一个实例中，相对于＜65岁的患者，炎性生物标志物的水平增加至少2倍。在另一个实例中，相对于＜65岁的患者，炎性生物标志物的水平增加至少3倍。在另一个实例中，相对于＜65岁的患者，炎性生物标志物的水平增加至少4倍。在另一个实例中，相对于＜65岁的患者，炎性生物标志物的水平增加至少5倍。在另一个实例中，相对于＜65岁的患者，炎性生物标志物的水平增加超过5倍。在一个实例中，＜65岁的患者未服用皮质类固醇。

19、在另一个实例中，基于施用第一剂量的mlpsc后的持续crp水平来选择受试者。在一个实例中，基于施用第一剂量的mlpsc后7天的持续crp水平来选择受试者。在一个实例中，基于施用第一剂量的mlpsc后14天的持续crp水平来选择受试者。在一个实例中，基于施用第一剂量的mlpsc后21天的持续crp水平来选择受试者。在一个实例中，基于施用第一剂量的mlpsc后30天的持续crp水平来选择受试者。

20、在一个实例中，用本文公开的方法进行的治疗允许受试者脱离呼吸机。在一个实例中，受试者在治疗的60天内脱离呼吸机。

21、在一个实例中，本公开涉及治疗有需要的人受试者的或预防急性呼吸窘迫综合征(ards)的方法，所述方法包括：选择受试者，所述受试者：

22、-大于或等于65岁；和/或，

23、-相对于小于65岁的受试者，一种或多种炎性生物标志物水平升高；和/或，

24、-在施用包含少于400万个mlpsc/千克体重(细胞/kg)的第一剂量的间充质谱系前体细胞或干细胞(mlpsc)后3天，具有持续的crp水平；和

25、向所述受试者施用超过400万个间充质谱系前体细胞或干细胞(mlpsc)/千克体重(细胞/kg)。在一个实例中，所述方法进一步包括确定或已经确定一种或多种炎性生物标志物的受试者水平，所述炎性生物标志物选自包括以下的列表：(i)cxcr3结合趋化因子，优选cxcl10和/或cxcl9；(ii)ccr2-结合趋化因子，优选ccl2、ccl3和/或ccl7；(iii)il-6；(v)il-8；(vi)ccl19；(vii)il-2；和/或(viii)crp。

26、本发明人还鉴定出用细胞疗法的治疗可以降低患者的炎性生物标志物的水平。因此，在另一个实例中，用根据本公开的组合物的治疗降低至少一种炎性生物标志物的水平，这指示：

27、-嗜中性粒细胞和巨噬细胞流入肺部减少；

28、-减少炎性体；

29、-减少巨噬细胞活化和嗜中性粒细胞向肺迁移；

30、-减少的t细胞流入和活化；或

31、-减少巨噬细胞和嗜中性粒细胞炎症的循环生物标志物。

32、在一个实例中，炎性生物标志物是cxcr3-结合趋化因子，例如cxcl10。在另一个实例中，cxcr3-结合趋化因子是cxcl9。在另一个实例中，炎性生物标志物是ccr2-结合趋化因子，例如ccl2。在另一个实例中，ccr2-结合趋化因子是ccl3。在另一个实例中，ccr2-结合趋化因子是ccl7。在另一个实例中，炎性生物标志物是il-6。在另一个实例中，炎性生物标志物是il-8。在另一个实例中，炎性生物标志物是tnf。在另一个实例中，炎性生物标志物是il-18。在另一个实例中，炎性生物标志物是ccl19。在另一个实例中，炎性生物标志物是il-4。在另一个实例中，炎性生物标志物是il-13。在另一个实例中，炎性生物标志物是gm-csf。在另一个实例中，炎性生物标志物是crp。在另一个实例中，炎性生物标志物是铁蛋白。

33、在一个实例中，根据本公开的治疗在施用超过400万个mlpsc/千克体重(细胞/kg)的3至14天内降低crp和/或铁蛋白水平。在另一个实例中，治疗改善受试者的呼吸功能。例如，可以使用柏林标准来确定改善的呼吸功能。在一个实例中，在第14天和/或第21天，治疗改善了受试者的柏林标准。在一个实例中，相对于基线呼吸功能，改善的呼吸功能在第7天后仍维持。在一个实例中，相对于基线呼吸功能，改善的呼吸功能在第14天仍维持。

34、在一个实例中，向受试者施用超过500万个mlpsc/kg。在另一个实例中，向受试者施用超过600万个mlpsc/kg。在另一个实例中，向受试者施用超过800万个mlpsc/kg。在一个实例中，通过至少2至3个剂量施用超过400万个mlpsc/kg。在一个实例中，通过3个剂量施用超过400万个mlpsc/kg。在一个实例中，受试者在施用第一剂量的mlpsc的5至9天内接受超过400万个mlpsc/千克体重(细胞/千克)。在一个实例中，本公开的方法包括施用1×108至2.5×108个mlpsc/剂量之间的量。在另一个实例中，本公开的方法包括施用约1.6×108个mlpsc/剂量。在另一个实例中，本公开的方法包括施用约200万个mlpsc/kg/剂量。

35、在一个实例中，受试者的ards是中度或重度。

36、在一个实例中，在施用本文公开的细胞组合物之前，受试者正在服用皮质类固醇。在另一个实例中，根据本公开的方法进一步包括施用皮质类固醇。在一个实例中，皮质类固醇是地塞米松。

37、在一个实例中，ards由病毒感染引起。病毒感染可以由例如鼻病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒(rsv)或冠状病毒引起。

38、在一个实例中，ards由冠状病毒感染引起。冠状病毒可以是例如严重急性呼吸综合征冠状病毒(sars-cov)、中东呼吸综合征冠状病毒(mers-cov)、covid-19、229e、nl63、oc43或khu1。在一个实例中，冠状病毒是sars-cov、mers-cov或covid-19(sars-cov-2)。在一个实例中，ards继发于sars-cov-2感染。

39、在一个实例中，ards是由血栓形成，诸如静脉血栓形成或动脉血栓形成引起的。在另一个实例中，ards是由肺栓塞引起的。

40、在一个实例中，mlpsc已经被冷冻保存和解冻。在一个实例中，mlpsc是从中间冷冻保存的mlpsc群体培养扩增的。在另一个实例中，将mlpsc培养扩增至少约5代。在一个实例中，mlpsc表达至少13pg tnf-r1/百万个mlpsc。在一个实例中，mlpsc表达约13pg至约44pgtnf-r1/百万个mlpsc。在一个实例中，将培养扩增的mlpsc培养扩增至少20次群体倍增。在另一个实例中，将培养扩增的mlpsc培养扩增至少30次群体倍增。在一个实例中，mlpsc是间充质干细胞(msc)。在另一个实例中，mlpsc是同种异体的。例如，mlpsc可以是同种异体的msc。

41、在另一个实例中，mlpsc被修饰以携带或表达抗病毒药物或溶血栓剂。在一个实例中，抗病毒药物是瑞德西韦。在一个实例中，溶血栓剂选自由以下各项组成的组：eminase(阿尼普酶(anistreplase))、retavase(瑞替普酶)、streptase(链激酶，卡比激酶(kabikinase))。

42、在另一个实例中，对mlpsc进行遗传修饰以表达抗病毒肽或编码其的核酸。

43、在一个实例中，将组合物静脉内施用。

44、在一个实例中，通过至少2至3个剂量向受试者施用超过400万个mlpsc/kg。在一个实例中，受试者在施用第一剂的5至9天内接受超过400万个mlpsc/kg。在另一个实例中，受试者在施用第一剂的7天内接受超过400万个mlpsc/kg。在这些实例中，剂量包含在1×108和2.5×108个细胞/剂量之间的量。例如，剂量包含1.6×108个细胞。在另一个实例中，剂量包含200万个细胞/kg。

45、在一个实例中，将本公开的mlpsc在组合物中施用。在一个实例中，组合物进一步包含plasma-lyte a、二甲基亚砜(dmso)、人血清白蛋白(hsa)。在一个实例中，组合物进一步包含p1asma-lyte a(70％)、dmso(10％)、hsa(25％)溶液，所述hsa溶液包含5％hsa和15％缓冲液。

46、在一个实例中，组合物包含超过6.68×106个活细胞/ml。

47、在另一个实例中，本公开涉及治疗有需要的人受试者的急性呼吸窘迫综合征(ards)的方法，所述方法包括：

48、-向所述受试者施用400万个间充质谱系前体细胞或干细胞(mlpsc)/千克体重(细胞/kg)；

49、-在施用mlpsc之前，相对于一种或多种生物标志物的基线水平，确定或已经确定一种或多种选自由以下各项组成的组的生物标志物的受试者水平：cxcl10、cxcl9、ccl2、ccl3、ccl7、il-6、il-8、ccl19、il-2、铁蛋白和/或crp；

50、如果一种或多种生物标志物的水平没有自基线下降，则向所述受试者施用另外剂量的mlpsc，其中在另外的剂量之后，已经向所述受试者施用了超过400万个间充质谱系前体细胞或干细胞(mlpsc)/千克体重(细胞/kg)。

51、在一个实例中，生物标志物是crp和/或铁蛋白。在一个实例中，相对于在第7天和/或第14天的基线，确定受试者的crp和/或铁蛋白水平。

52、在一个实例中，另一剂量包含200万个mlpsc/千克体重(细胞/kg)。