一种巨噬细胞靶向水凝胶微球载体及其制备方法与流程

本发明涉及生物医学，尤其涉及一种巨噬细胞靶向水凝胶微球载体及其制备方法。

背景技术：

1、水凝胶是一种具有三维网状交联结构的高分子材料，通过将部分疏水基团和亲水残基引入水溶性高分子而形成，因具有性质柔软、能保持一定的形状、能吸收大量的水分、且生物相容性好的优点，水凝胶被广泛应用于支架涂层、细胞载体、组织工程以及药物载体等领域。

2、其中水凝胶作为药物载体时，现有的载药方式主要为直接将药物混合于水凝胶中进行负载，这种负载方式虽然制备方法简单易于操作，但是使用过程中，药物随着水凝胶的降解在短时间内直接释放，药效持续时间较短。

技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题是：为了解决现有技术中水凝胶作为药物载体时，药效持续时间较短的问题，本发明提供一种可注射水凝胶微球载体的制备方法，该制备方法通过将醛基化脂质体与水凝胶通过席夫碱相结合，提高结构的稳定性，延长药物释放时间，解决了现有技术中水凝胶作为药物载体时药效持续时间较短的问题。

2、本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

3、一种巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，包括如下步骤：

4、s1：通过逆向蒸发法制备醛基化巨噬细胞靶向脂质体乳悬液；

5、s2：通过微流控技术制备gelma水凝胶微球；

6、s3：将所述gelma水凝胶微球与所述醛基化巨噬细胞靶向脂质体乳悬液混合，得到混合液；

7、s4：室温下，于恒温摇床使所述混合液反应，通过醛基及氨基反应形成席夫碱，实现所述醛基化巨噬细胞靶向脂质体和所述gelma水凝胶微球的接枝，形成表面涂层，得到巨噬细胞靶向水凝胶微球载体。

8、可选地，步骤s1包括：

9、s11：将磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、胆固醇和醛基磷脂溶解于有机溶剂中，得到反应溶液；

10、s12：使用旋转蒸发器除去所述反应溶液中的有机溶剂，得到胶体产品；

11、s13：向所述胶体产品中加入去离子水进行水化，得到脂质体乳液；

12、s14：采用聚碳酸酯膜无菌过滤器对所述脂质体乳液进行过滤，得到醛基化巨噬细胞靶向脂质体乳悬液。

13、可选地，步骤s11中的原料还包括二氢辣椒素。

14、可选地，步骤s11中的有机溶剂为三氯甲烷。

15、可选地，步骤s11中二氢辣椒素、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、胆固醇、醛基磷脂以及有机溶剂的用量比值为(1-5)mg：(90-100)mg：(20-30)mg：(7-8)mg：(8-15)mg：5ml。

16、可选地，步骤s2包括：

17、s21：将肉豆蔻酸异丙酯与司盘80混合，得到第一溶液；

18、s22：将gelma与苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐在避光条件下溶解于去离子水中，得到第二溶液；

19、s23：以所述第一溶液作为油相，与同轴静电纺丝针头的外径相连；以所述第二溶液作为分散相，与所述同轴静电纺丝针头的内径相连；

20、s24：在50℃恒温条件下，分别以恒定速率将所述第一溶液与所述第二溶液推进所述同轴静电纺丝针头的外径和内径，以所述第一溶液为收集溶液，得到水凝胶微球；

21、s25：利用蓝光对所述水凝胶微球进行照射，得到沉淀有gelma水凝胶微球和第一溶液的混合物；

22、s26：吸去所述混合物中的第一溶液，加入丙酮溶液后，再加入去离子水，洗去丙酮及残存的第一溶液，得到gelma水凝胶微球水溶液；

23、s27：将所述gelma水凝胶微球水溶液在-80℃条件下冷冻24小时，利用真空冷冻干燥机冻干燥48-72小时，得到gelma水凝胶微球。

24、可选地，步骤s22中gelma的取代度为20％-50％。

25、可选地，步骤s21中肉豆蔻酸异丙酯与司盘80的体积比为9:1。

26、可选地，步骤s22中gelma与苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐的质量比为9:1。

27、本发明的另一目的在于提供一种巨噬细胞靶向水凝胶微球载体，通过如上所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法进行制备。

28、本发明的有益效果是：

29、本发明提供的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，通过制备醛基化巨噬细胞靶向脂质体乳悬液，使得脂质体表面带有醛基，进而能够使得醛基化巨噬细胞靶向脂质体表面的醛基与gelma水凝胶微球表面的氨基通过席夫碱反应，进行接枝，从而使得醛基化巨噬细胞靶向脂质体涂装于gelma水凝胶微球表面，提高脂质体与水凝胶微球之间的结合力；通过该方法制备的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的药物释放过程包括席夫碱健的破碎、水凝胶的降解和脂质体的破裂，从而有助于延长药物释放时间，增加药效持续时间。

技术特征：

1.一种巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，其特征在于，步骤s1包括：

3.如权利要求2所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，其特征在于，步骤s11中的原料还包括二氢辣椒素。

4.如权利要求2所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，其特征在于，步骤s11中的有机溶剂为三氯甲烷。

5.如权利要求3所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，其特征在于，步骤s11中二氢辣椒素、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、胆固醇、醛基磷脂以及有机溶剂的用量比值为(1-5)mg：(90-100)mg：(20-30)mg：(7-8)mg：(8-15)mg：5ml。

6.如权利要求1所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，其特征在于，步骤s2包括：

7.如权利要求6所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，其特征在于，步骤s22中gelma的取代度为20％-50％。

8.如权利要求6所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，其特征在于，步骤s21中肉豆蔻酸异丙酯与司盘80的体积比为9:1。

9.如权利要求6所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，其特征在于，步骤s22中gelma与苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐的质量比为9:1。

10.一种巨噬细胞靶向水凝胶微球载体，其特征在于，通过如权利要求1-9任一项所述的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法进行制备。

技术总结
本发明提供一种巨噬细胞靶向水凝胶微球载体及其制备方法，涉及生物医学技术领域；制备方法包括如下步骤：通过逆向蒸发法制备醛基化巨噬细胞靶向脂质体乳悬液；通过微流控技术制备加入光交联剂的Gelma水凝胶微球；将Gelma水凝胶微球在蓝光交联后，与醛基化巨噬细胞靶向脂质体乳悬液混合，得到混合液；室温下，于恒温摇床使混合液反应，得到水凝胶微球载体。本发明提供的巨噬细胞靶向水凝胶微球载体的制备方法，使得脂质体表面带有醛基，进而能够使得醛基化巨噬细胞靶向脂质体表面的醛基与Gelma水凝胶微球表面的氨基通过席夫碱反应，进行接枝，提高脂质体与水凝胶微球之间的结合力，有助于延长药物释放时间，增加药效持续时间。

技术研发人员：周鑫叠
受保护的技术使用者：常州市第二人民医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13