红肉苹果和樱桃李组合物及其在抗动脉粥样硬化方面的应用的制作方法

本发明涉及食品和药品领域，具体涉及红肉苹果和樱桃李组合物及其在抗动脉粥样硬化方面的应用。

背景技术：

1、动脉粥样硬化(atherosclerosis，as)是一种累及动脉壁的炎症性疾病，特征是脂质和炎症细胞在大的动脉内膜内进行积聚。动脉粥样硬化会引发动脉粥样硬化性心血管疾病(atherosclerotic cardiovascular disease，ascvd)。临床确诊的ascvd疾病主要包括：急性冠脉综合征、具有心肌梗死的病史、稳定或不稳定型心绞痛、冠状动脉血管重建术(包括介入治疗和搭桥手术治疗)、其他外周动脉疾病或血管重建术后、动脉粥样硬化源性的脑卒中或短暂脑缺血发作，目前ascvd已成为全球死亡的首位原因，严重危害健康。在我国动脉粥样硬化的发病率有明显上升的趋势，且多见于中、老年人。研究表明到2020年，全球有20亿人有颈动脉粥样硬化。我国涉及8.5万人的一项调查显1/3老人有动脉粥样硬化。

2、治疗动脉粥样硬化的临床药物主要包括：(1)降血脂药物：他汀类、依折麦布、pcsk9抑制剂等；(2)抗血小板药物：阿司匹林、氯吡格雷等。as的发生机制复杂，大量研究表明低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,ldl-c)在as的发生和发展中起到了关键作用，降血脂类药物是首选药物。此外，关于动脉粥样硬化的发生机制还有氧化应激学说和炎症学说，目前已有一些文献报道或临床试验，如炎症学说相关的秋水仙碱、康纳单抗(canakinumab)以及氧化应激相关的普罗布考、艾地苯醌等。抗动脉粥样硬化临床还有一些中成药，如复方丹参滴丸、芪参益气滴丸、脑心通胶囊等。动脉粥样硬化需要在医生指导下制定治疗方案，且需要长期用药。不同药物会对人体产生不同程度的副作用，如肝脏和肌肉损伤、胃肠道反应等，因此需要更天然安全的方式进行干预。

3、红肉苹果(malus neidzwetzkyana dieck)是蔷薇科(rosaceae)苹果属(malusmill)植物，其果实的果肉呈红色，在种质资源的研究和加工利用方面有非常高的潜在利用价值。红肉苹果品种众多，果实大小和颜色差异大，我国、新西兰、日本、瑞士等国都有进行红肉苹果选育工作。具体包括中国新疆的洪勋系列、美国的robert crab、日本的红宝石甜、瑞士的红色之爱(redlove)等。新疆的红肉苹果在红果肉苹果属植物起源中有着重要作用。

4、樱桃李(prunus cerasifera ehrhart)，俗称野酸梅，是蔷薇科李属植物。野生樱桃李被列为国家ⅱ级重点保护物种，是世界罕见和濒危的原始野果树种资源，在世界范围内自然分布稀少，新疆伊犁河谷的大小西沟是世界最大的野生樱桃李集中分布区。樱桃李果实在我国新疆地区有着悠久的食用历史，居住在天山大西沟的哈萨克族、蒙古族牧民饮食以牛羊肉为主，其人群中患高血脂、高血压的人却很少，这与牧民长期采摘野生樱桃李制作果酱或将果实晒干泡茶的使用习惯有关。樱桃李包括多个品种，按照颜色分主要有黑果、红果、紫果、紫黑果、黄果等。

5、红肉苹果和樱桃李富含花色苷、多酚、类黄酮等功能成分，具有较高的开发价值。但目前的研究仍较有限，主要集中在化学成分及抗氧化方面，还处于初步研究阶段。

技术实现思路

1、本技术发明人经过大量的实验研究后发现，红肉苹果(或红肉苹果提取物)和樱桃李(或樱桃李提取物)的组合在抗动脉粥样硬化方面具有协同增效作用。

2、为此，在本发明的第一方面，本发明提供了组合物，其包含：

3、第一组分，所述第一组分为红肉苹果或红肉苹果提取物；和

4、第二组分，所述第二组分为樱桃李或樱桃李提取物。

5、在一些实施方案中，所述第一组分和所述第二组分的重量比为1:10-10:1(如1:9-10:1，1:8-10:1，1:7-10:1，1:6-10:1，1:5-10:1，1:4-10:1，1:3-10:1，1:2-10:1，1:1-10:1，1:10-9:1，1:9-9:1，1:8-9:1，1:7-9:1，1:6-9:1，1:5-9:1，1:4-9:1，1:3-9:1，1:2-9:1，1:1-9:1，1:10-8:1，1:9-8:1，1:8-8:1，1:7-8:1，1:6-8:1，1:5-8:1，1:4-8:1，1:3-8:1，1:2-8:1，1:1-8:1，1:10-7:1，1:9-7:1，1:8-7:1，1:7-7:1，1:6-7:1，1:5-7:1，1:4-7:1，1:3-7:1，1:2-7:1，1:1-7:1，1:10-6:1，1:9-6:1，1:8-6:1，1:7-6:1，1:6-6:1，1:5-6:1，1:4-6:1，1:3-6:1，1:2-6:1，1:1-6:1，1:10-5:1，1:9-5:1，1:8-5:1，1:7-5:1，1:6-5:1，1:5-5:1，1:4-5:1，1:3-5:1，1:2-5:1，1:1-5:1，1:10-4:1，1:9-4:1，1:8-4:1，1:7-4:1，1:6-4:1，1:5-4:1，1:4-4:1，1:3-4:1，1:2-4:1，1:1-4:1，1:10-3:1，1:9-3:1，1:8-3:1，1:7-3:1，1:6-3:1，1:5-3:1，1:4-3:1，1:3-3:1，1:2-3:1，1:1-3:1，1:10-2:1，1:9-2:1，1:8-2:1，1:7-2:1，1:6-2:1，1:5-2:1，1:4-2:1，1:3-2:1，1:2-2:1，1:1-2:1，1:10-1:1，1:9-1:1，1:8-1:1，1:7-1:1，1:6-1:1，1:5-1:1，1:4-1:1，1:3-1:1，1:2-1:1，1:10-5:1，1:10-2:1，1:10-1:1，1:5-10:1，1:5-5:1，1:5-2:1，1:5-1:1，1:2-10:1，1:2-5:1，1:2-2:1，1:2-1:1，1:1-10:1，1:1-5:1，1:1-2:1，具体如1:9，1:8，1:7，1:6，1:5，1:4，1:3，1:2，1:1，2:1，3:1，4:1，5:1，6:1，7:1，8:1，9:1)。

6、在一些实施方案中，所述红肉苹果或红肉苹果提取物通过以下方式之一获得：鲜果、鲜果打浆或榨汁、浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离或其他提取方式。

7、在一些实施方案中，所述樱桃李或樱桃李提取物通过以下方式之一获得：鲜果、鲜果打浆或榨汁、浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离或其他提取方式。

8、在一些实施方案中，所述组合物是以鲜果、果汁、果酱、果粉(如冻干粉)、糖果(如压片糖果)、口服液、胶囊、片剂、果干、果脯、果酒或糕点等形式存在的。换句话说，所述组合物的产品形式可以是鲜果、果汁、果酱、果粉(如冻干粉)、糖果(如压片糖果)、口服液、胶囊、片剂、果干、果脯、果酒或糕点等。也就是说，所述组合物可以制成鲜果、果汁、果酱、果粉(如冻干粉)、糖果(如压片糖果)、口服液、胶囊、片剂、果干、果脯、果酒或糕点等。其中果汁、果酱、果粉(如冻干粉)、糖果(如压片糖果)、口服液、胶囊、片剂可由浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离或其他提取方式获得的提取物来制备。

9、在一些实施方案中，所述组合物是以药物(如中药、中成药、天然药物等)、普通食品或功能食品或保健食品的形式存在的。换句话说，所述组合物可以制成药物(如中药、中成药、天然药物等)、普通食品或功能食品或保健食品。

10、在一些实施方案中，所述红肉苹果是指果肉为红色的蔷薇科苹果属植物的果实。

11、在一些实施方案中，所述红肉苹果选自：洪勋1号(红勋1号)、洪勋3号(红勋3号)、洪勋4号(红勋4号)、洪勋6号(红勋6号)、洪勋8号(红勋8号)、红色之爱等。

12、在一些实施方案中，所述樱桃李选自樱桃李红果、樱桃李黑果、樱桃李紫果、樱桃李紫黑果、樱桃李黄果等。

13、在本发明的第二方面，本发明提供了组合产品，其包括：

14、第一产品，所述第一产品为前述的组合物；

15、第二产品，所述第二产品为预防和/或治疗动脉粥样硬化疾病的药物。

16、在一些实施方案中，所述动脉粥样硬化疾病选自主动脉及其主要分枝粥样硬化、冠状动脉粥样硬化、脑动脉粥样硬化、肾动脉粥样硬化、肠系膜动脉粥样硬化、四肢动脉粥样硬化等。

17、在一些实施方案中，所述预防和/或治疗动脉粥样硬化疾病的药物选自他汀类药物(如瑞舒伐他汀、阿托伐他汀、辛伐他汀)、依折麦布、pcsk9抑制剂、阿司匹林、氯吡格雷、秋水仙碱、康纳单抗、普罗布考、艾地苯醌等。

18、在一些实施方案中，所述第一产品和所述第二产品的重量比为1000:0.001-1000:33.4(如为1000:0.002075、1000:0.004175、1000:0.0083、1000:0.02075、1000:0.04175、1000:0.083、1000:0.08325、1000:0.167、1000:0.20875、1000:0.3125、1000:0.333、1000:0.4175、1000:0.62625、1000:0.835、1000:1.25、1000:1.67、1000:2.0875、1000:2.505、1000:2.875、1000:4.175、1000:8.35或1000:16.7，或者如1000:0.002075-1000:16.7)。

19、在一些实施方案中，所述第二产品为瑞舒伐他汀时，所述第一产品和所述第二产品的重量比为1000:0.01-1000:0.34(如为1000:0.02075、1000:0.04175、1000:0.083或1000:0.167，或者如1000:0.02075-1000:0.167)。

20、在一些实施方案中，所述第二产品为阿托伐他汀时，所述第一产品和所述第二产品的重量比为1000:0.02-1000:0.67(如为1000:0.04175、1000:0.08325、1000:0.167或1000:0.333，或者如1000:0.04175-1000:0.333)。

21、在一些实施方案中，所述第二产品为阿司匹林时，所述第一产品和所述第二产品的重量比为1000:0.10-1000:5.01(如为1000:0.20875、1000:0.4175、1000:0.62625、1000:0.835、1000:1.67或1000:2.505，或者如1000:0.20875-1000:2.505)。

22、在一些实施方案中，所述第二产品为氯吡格雷时，所述第一产品和所述第二产品的重量比为1000:0.10-1000:5.01(如为1000:0.20875、1000:0.4175、1000:0.62625、1000:0.835、1000:1.67或1000:2.505，或者如1000:0.20875-1000:2.505)。

23、在一些实施方案中，所述第二产品为秋水仙碱时，所述第一产品和所述第二产品的重量比为1000:0.001-1000:0.166(如为1000:0.002075、1000:0.004175、1000:0.0083、1000:0.02075或1000:0.083，或者如1000:0.002075-1000:0.083)。

24、在一些实施方案中，所述第二产品为普罗布考时，所述第一产品和所述第二产品的重量比为1000:1.0-1000:33.4(如为1000:2.0875、1000:2.875、1000:4.175、1000:8.35或1000:16.7，或者如1000:2.0875-1000:16.7)。

25、在本发明的第三方面，本发明提供了前述的组合物在制备药物(如中药、中成药、天然药物等)、普通食品或功能食品或保健食品中的用途，所述药物(如中药、中成药、天然药物等)、普通食品或功能食品或保健食品用于预防和/或治疗动脉粥样硬化疾病。本发明还提供了前述的组合产品在制备药物(如中药、中成药、天然药物等)中的用途，所述药物(如中药、中成药、天然药物等)用于预防和/或治疗动脉粥样硬化疾病。

26、本发明中，普通食品是指供人食用或者饮用的成品和原料，以及按照传统既是食品又是药品的物品，但是不包括以治疗为目的的物品。

27、本发明中，保健食品是指声称并具有特定保健功能或者以补充维生素、矿物质为目的的食品，即适用于特定人群食用，具有调节机体功能，不以治疗疾病为目的，并且对人体不产生任何急性、亚急性或慢性危害的食品。功能食品主要是欧美、日本对能够改善身体健康状况或减少患病的食品的一种称谓，类似于国内对保健食品的定义。

28、本发明中，中药是以中国传统医药理论指导采集、炮制、制剂，说明作用机理，指导临床应用的药物。中药主要来源于天然药及其加工品，包括植物药、动物药、矿物药及部分化学、生物制品类药物，以植物药居多。

29、本发明中，中成药是以中药材为原料，在中医药理论指导下，为了预防及治疗疾病的需要，按规定的处方和制剂工艺将其加工制成一定剂型的中药制品，是经国家药品监督管理部门批准的商品化的一类中药制剂。

30、本发明中，天然药物是指经现代医药体系证明具有一定药理活性的动物药、植物药和矿物药等。天然药物不等同于中药或中草药。天然药是指在现代医药理论指导下使用的天然药用物质及其制剂。其来源包括植物、动物和矿物，一般不包括来源于基因修饰动植物的物质、经微生物发酵或经化学等修饰的物质。，其包含独立包装的第一产品和第二产品，所述第一产品为红肉苹果和樱桃李组合产品，所述第二产品为抗动脉粥样硬化药物(例如降血脂类、抗血小板类、抗凝药物、抗炎症及抗氧化应激药物等)。

31、本发明中，“个体”包括人或非人动物。示例性人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鱼类、鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物(例如鼠、绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。

32、本发明中，“樱桃李提取物”或者“红肉苹果提取物”是指以樱桃李或红肉苹果为原料，经过物理和/或化学提取分离过程，获取和富集樱桃李或红肉苹果中的一种或多种有效成分而形成的产物，其可以作为食品(例如普通食品或功能食品或保健食品)或药品的原料或辅料。示例性的提取方式包括但不限于：浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离等。

33、以下提供示例性的制备红肉苹果和樱桃李提取物的方法。

34、浸提提取

35、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过浸提提取(例如水浸提提取或醇浸提提取)得到。

36、在某些实施方案中，所述浸提提取包括以下步骤：

37、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者分离出果汁和果渣；在某些实施方案中，利用纱布(例如100-300目纱布，例如200目纱布)过滤分离出果汁和果渣；

38、步骤2：将果浆或者果渣与提取介质(例如水或乙醇)混合，并加入纤维素酶在常温或加热(例如，10-100℃，例如50℃)条件下提取(例如提取30-100min，例如60min)，过滤得到果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，果浆或果渣与提取介质以1：(2-10)(例如1:5)的重量比混合；在某些实施方案中，所述乙醇为20％-100％(例如20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％)的乙醇；

39、步骤3：将果浆提取液或者果汁与果渣提取液的合并液进行浓缩，得到红肉苹果和樱桃李的浸提提取物；在某些实施方案中，通过旋转蒸发进行浓缩；在某些实施方案中，旋转蒸发的温度为30-60℃，例如50℃；

40、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

41、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过水浸提提取得到，在某些实施方案中，所述水浸提提取包括以下步骤：

42、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者用100-300目纱布过滤果汁，制得红肉苹果和樱桃李果汁，分离果汁和果渣；在某些实施方案中，所述纱布的目数选取200目；

43、步骤2：红肉苹果和樱桃李果浆或者果渣按料液比1：(2-10)与水混合，并加入纤维素酶，10-100℃浸提提取30-100min，过滤制得果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，所述料液比选取1:5；在某些实施方案中，浸提提取温度选取50℃；在某些实施方案中，提取时间选取60min；在某些实施方案中，纤维素酶的添加量(以果渣或果浆重量为基准)为0.2％-1％(例如0.5％)；

44、步骤3：红肉苹果和樱桃李果浆提取液或果汁与果渣提取液的合并液，在30-60℃旋转蒸发浓缩，制得红肉苹果和樱桃李水浸提提取物；在某些实施方案中，旋转蒸发温度选取50℃；

45、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李水浸提提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

46、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过醇浸提提取得到，在某些实施方案中，所述醇浸提提取包括以下步骤：

47、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者用100-300目纱布过滤果汁，制得红肉苹果和樱桃李果汁，分离果汁和果渣；在某些实施方案中，所述纱布的目数选取200目；

48、步骤2：红肉苹果和樱桃李果浆或者果渣按料液比1：(2-10)与20％-100％(例如20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％)的乙醇混合，添加0.2％-1％(以果渣或果浆重量为基准)(例如0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％或1％)的纤维素酶，10-100℃浸提提取30-100min，过滤制得果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，所述料液比选取1:5；在某些实施方案中，所使用的乙醇的浓度为40％；在某些实施方案中，浸提提取温度选取50℃；在某些实施方案中，提取时间选取60min；

49、步骤3：红肉苹果和樱桃李果浆提取液或果汁与果渣提取液的合并液，在30-60℃旋转蒸发浓缩，果浆提取液直接浓缩，制得红肉苹果和樱桃李醇浸提提取物；在某些实施方案中，旋转蒸发温度选取50℃；任选地，对提取物进行挥干处理以除去其中残留的乙醇；

50、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李醇浸提提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

51、超声提取

52、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过超声提取(例如超声水提取或超声醇提取)得到。

53、在某些实施方案中，所述超声提取包括以下步骤：

54、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者分离出果汁和果渣；在某些实施方案中，利用纱布(例如100-300目纱布，例如200目纱布)过滤分离出果汁和果渣；

55、步骤2：将果浆或果渣与提取介质(例如水或乙醇)和纤维素酶混合，在加热条件(例如30-50℃，例如45℃)下提取(例如提取30-100min，例如60min)，继而在超声条件(例如100-500w的超声功率)下超声(例如超声20-60min，例如超声30min)，过滤得到果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，纤维素酶的添加量(以果渣或果浆重量为基准)为0.2％-1％(例如0.5％)；在某些实施方案中，果浆或果渣与提取介质以1：(2-10)(例如1:5)的重量比混合；在某些实施方案中，所述乙醇为20％-100％(例如20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％)的乙醇；

56、步骤3：将红肉苹果和樱桃李果浆提取液或果汁与果渣提取液的合并液进行浓缩，得到红肉苹果和樱桃李的超声提取物；在某些实施方案中，通过旋转蒸发进行浓缩；在某些实施方案中，旋转蒸发的温度为30-60℃，例如50℃；

57、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李超声提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

58、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过超声水提取得到，在某些实施方案中，所述超声水提取包括以下步骤：

59、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者用100-300目纱布过滤果汁，制得红肉苹果和樱桃李果汁，分离果汁和果渣；在某些实施方案中，所述纱布的目数选取200目；

60、步骤2：将红肉苹果和樱桃李果浆或果渣按料液比1：(2-10)与水混合，添加0.2％-1％(以果渣或果浆重量为基准)的纤维素酶，30-50℃水浴提取30-100min，100-500w超声20-60min，过滤制得果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，料液比选取1:5；在某些实施方案中，纤维素酶添加量为0.5％；在某些实施方案中，水浴温度为45℃；在某些实施方案中，提取时间选取60min；在某些实施方案中，超声功率为500w；在某些实施方案中，超声时间为30min；

61、步骤3：红肉苹果和樱桃李果浆或果汁与果渣提取液的合并液，在30-60℃旋转蒸发浓缩，制得红肉苹果和樱桃李超声提取水提取物；在某些实施方案中，旋转蒸发温度选取50℃；

62、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李超声水提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

63、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过超声醇提取得到，在某些实施方案中，所述超声醇提取包括以下步骤：

64、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者用100-300目纱布过滤果汁，制得红肉苹果和樱桃李果汁，分离果汁和果渣；在某些实施方案中，所述纱布的目数选取200目；

65、步骤2：将红肉苹果和樱桃李果浆或果渣按料液比1：(2-10)与20％-100％的乙醇混合，添加0.2％-1％(以果渣或果浆重量为基准)的纤维素酶，30-50℃水浴提取30-100min，100-500w超声20-60min，过滤制得果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，料液比选取1:5；在某些实施方案中，所使用的乙醇的浓度为40％；在某些实施方案中，纤维素酶添加量为0.5％；在某些实施方案中，水浴温度为45℃；在某些实施方案中，提取时间选取60min；在某些实施方案中，超声功率为500w；在某些实施方案中，超声时间为30min；

66、步骤3：红肉苹果和樱桃李果浆提取液或果汁与果渣提取液的合并液，在30-60℃旋转蒸发浓缩，制得红肉苹果和樱桃李超声提取醇提取物；在某些实施方案中，旋转蒸发温度选取50℃；任选地，对提取物进行挥干处理以除去其中残留的乙醇；

67、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李超声醇提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

68、超高压提取

69、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过超高压提取(例如超高压水提取或超高压醇提取)得到。如本文中使用的，“超高压”指的是压强超过100mpa(相当于1000个大气压)。

70、在某些实施方案中，所述超高压提取包括以下步骤：

71、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者分离出果汁和果渣；在某些实施方案中，利用纱布(例如100-300目纱布，例如200目纱布)过滤分离出果汁和果渣；

72、步骤2：将果浆或果渣与提取介质(例如水或乙醇)混合，在超高压(例如200-600mpa，例如400mpa)条件下处理(例如处理3-10min，例如处理5min)，过滤得到果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，果浆或果渣与提取介质以1：(2-10)(例如1:5)的重量比混合；在某些实施方案中，所述乙醇为50％-95％的乙醇；

73、步骤3：将红肉苹果和樱桃李果浆或果汁与果渣提取液的合并液进行浓缩，得到红肉苹果和樱桃李的超高压提取物；在某些实施方案中，通过旋转蒸发进行浓缩；在某些实施方案中，旋转蒸发的温度为30-60℃，例如50℃；

74、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李超高压提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

75、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过超高压水提取得到，在某些实施方案中，所述超高压水提取包括以下步骤：

76、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者用100-300目纱布过滤果汁，制得红肉苹果和樱桃李果汁，分离果汁和果渣；在某些实施方案中，所述纱布的目数选取200目；

77、步骤2：红肉苹果和樱桃李果浆或果渣按料液比1：(2-10)与水混合，超高压200-600mpa处理3-10min，过滤制得果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，料液比选取1:5；在某些实施方案中，超高压压力为400mpa；在某些实施方案中，超高压处理时间选取5min；

78、步骤3：红肉苹果和樱桃李果浆提取液或果汁与果渣提取液的合并液，在30-60℃旋转蒸发浓缩，制得红肉苹果和樱桃李超高压提取水提取物；在某些实施方案中，旋转蒸发温度选取50℃；

79、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李超高压水提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

80、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过超高压醇提取得到，在某些实施方案中，所述超高压醇提取包括以下步骤：

81、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者用100-300目纱布过滤果汁，制得红肉苹果和樱桃李果汁，分离果汁和果渣；在某些实施方案中，所述纱布的目数选取200目；

82、步骤2：红肉苹果和樱桃李果浆或果渣按料液比1：(2-10)与20％-100％(例如20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％)的乙醇混合，超高压200-600mpa处理3-10min，过滤制得果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，料液比选取1:5；在某些实施方案中，超高压压力为400mpa；在某些实施方案中，超高压处理时间选取5min；在某些实施方案中，所述乙醇为40％的乙醇；

83、步骤3：红肉苹果和樱桃李果浆提取液或果汁与果渣提取液的合并液，在30-60℃旋转蒸发浓缩，制得红肉苹果和樱桃李超高压提取醇提取物；在某些实施方案中，旋转蒸发温度选取50℃；任选地，对提取物进行挥干处理以除去其中残留的乙醇；

84、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李超高压醇提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

85、亚临界提取(又称“亚临界萃取”)

86、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李提取物通过亚临界提取(例如亚临界水提取或亚临界醇提取)得到。

87、在某些实施方案中，所述亚临界提取包括以下步骤：

88、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者分离出果汁和果渣；在某些实施方案中，利用纱布(例如100-300目纱布，例如200目纱布)过滤分离出果汁和果渣；

89、步骤2：将果浆或果渣与提取介质(例如水或乙醇)混合，进行亚临界萃取处理(例如处理10-50min例如30min)，过滤得到果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，果浆或果渣与提取介质以1：(2-10)(例如1:5)的重量比混合；在某些实施方案中，所述乙醇为50％-95％的乙醇；在某些实施方案中，亚临界萃取的处理温度为100-150℃(例如110℃)；

90、步骤3：将果浆或果汁与果渣提取液的合并液进行浓缩，得到红肉苹果和樱桃李的亚临界提取物；在某些实施方案中，通过旋转蒸发进行浓缩；在某些实施方案中，旋转蒸发的温度为30-60℃，例如50℃；

91、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李亚临界提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

92、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过亚临界水提取得到，在某些实施方案中，所述亚临界水提取包括以下步骤：

93、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者用100-300目纱布过滤果汁，制得红肉苹果和樱桃李果汁，分离果汁和果渣；在某些实施方案中，所述纱布的目数为200目；

94、步骤2：红肉苹果和樱桃李果浆或果渣按料液比1：(2-10)与水混合，亚临界萃取10-50min，处理温度为100-150℃，过滤制得果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，料液比选取1:5；在某些实施方案中，处理温度为110℃；在某些实施方案中，处理时间为30min；

95、步骤3：红肉苹果和樱桃李果浆提取液或果汁与果渣提取液的合并液，在30-60℃旋转蒸发浓缩，制得红肉苹果和樱桃李亚临界提取水提取物；在某些实施方案中，旋转蒸发温度选取50℃；

96、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李亚临界水提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

97、在某些实施方案中，本发明的红肉苹果和樱桃李提取物通过亚临界醇提取得到，在某些实施方案中，所述亚临界醇提取包括以下步骤：

98、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，直接获得果浆，或者用100-300目纱布过滤果汁，制得红肉苹果和樱桃李果汁，分离果汁和果渣；在某些实施方案中，所述纱布的目数为200目；

99、步骤2：红肉苹果和樱桃李果浆或果渣按料液比1：(2-10)与20％-100％(例如20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％)的乙醇混合，亚临界萃取10-50min，处理温度为100-150℃，过滤制得果浆或果渣提取液；在某些实施方案中，料液比选取1:5；在某些实施方案中，处理温度为110℃；在某些实施方案中，处理时间为30min；

100、步骤3：红肉苹果和樱桃李果浆提取液或果汁与果渣提取液的合并液，在30-60℃旋转蒸发浓缩，制得红肉苹果和樱桃李亚临界提取醇提取物；在某些实施方案中，旋转蒸发温度选取50℃；任选地，对提取物进行挥干处理以除去其中残留的乙醇；

101、步骤4：将提取得到的红肉苹果和樱桃李亚临界醇提取物按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取。

102、大孔树脂分离

103、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李提取物通过大孔树脂分离得到。

104、在某些实施方案中，所述大孔树脂分离包括以下步骤：

105、步骤1：由上述不同提取方式(浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取等)制备得到红肉苹果和樱桃李提取物；或者红肉苹果和樱桃李直接进行打浆处理，获得果浆；

106、步骤2：将上述红肉苹果和樱桃李的提取物或者果浆与95％-100％乙醇混合，提取物或者果浆与乙醇的混合比例为1：(2-10)(重量比)(例如1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10)；混合时间为1-5小时(例如3小时)，之后进行过滤分离得到醇沉汁及沉淀，醇沉汁经旋转蒸发除去乙醇，旋转蒸发的温度为30-60℃(例如30℃、40℃、50℃或60℃)，得到醇沉清汁；某些实施方案中，也可将上述红肉苹果和樱桃李提取物的提取物或者红肉苹果和樱桃李的果浆加入果胶酶进行酶解澄清处理，获得酶解清汁，酶解温度为20-60℃(例如20℃、30℃、40℃、50℃或60℃)，酶解时间为30-240min(例如30min、60min、90min、120min、150min、180min、210min或240min)，果胶酶添加量为100-1000ppm(例如100ppm、200ppm、300ppm、400ppm、500ppm、600ppm、700ppm、800ppm、900ppm或1000ppm)；

107、步骤3：使用大孔吸附树脂对上述醇沉清汁或酶解清汁进行吸附，并依次用水和20％-100％的乙醇(例如20％乙醇、40％乙醇、60％乙醇、80％乙醇、100％乙醇中的任意几种)进行梯度洗脱，分别收集每个梯度的洗脱液；在某些实施方案中，洗脱速度为1～5bv/h(1～5个柱体积)；

108、步骤4：将上述洗脱液进行旋转蒸发去除乙醇，旋转蒸发温度为30-60℃(例如30℃、40℃、50℃或60℃)，获得不同大孔树脂分离样品。

109、红肉苹果和樱桃李可单独提取制备后按比例混合制备成组合物，也可先按不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行提取制备组合物。如前所述，本发明的组合物的产品形式可以是鲜果、果汁、果酱、果粉(如冻干粉)、糖果(如压片糖果)、口服液、胶囊、片剂、果干、果脯、果酒或糕点。其中果汁、果酱、果粉(如冻干粉)、糖果(如压片糖果)、口服液、胶囊、片剂可由浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离或其他提取方式获得的提取物来制备。另外，本发明的组合物的产品形式可以是药品、普通食品或功能食品或保健食品。在一些实施方案中，果汁、果酱、果粉(如冻干粉)、糖果(如压片糖果)、口服液、胶囊、片剂、果干、果脯、果酒或糕点等产品形式中，本发明的组合物可以作为主要原料，例如，占总原料的30wt％以上、40wt％以上、50wt％以上、60wt％以上、70wt％以上、80wt％以上、90wt％以上或100wt％；任选地，所述产品还可以包含例如水、甜味物质等其他成分，或其他种类水果或其提取物。

110、以下提供示例性的制备红肉苹果和樱桃李产品(例如鲜果、果汁、果酱、果粉、压片糖果、口服液、胶囊)的方法。

111、鲜果

112、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李鲜果可以通过包含以下步骤的方法得到：

113、步骤1：在成熟前1个月至完全成熟时采收红肉苹果和樱桃李，采果时优先选择晴天采果；

114、步骤2：挑选并去除烂果或颜色较差的果；

115、步骤3：采后冷藏存放；

116、步骤4：将红肉苹果和樱桃李鲜果按照不同比例(重量比)组合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)。

117、获得的红肉苹果和樱桃李鲜果可供直接食用。

118、果汁

119、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李果汁可以通过包含以下步骤的方法得到：

120、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆；

121、步骤2：对浆料进行过滤(例如用100-300目纱布过滤)，制得红肉苹果和樱桃李果汁浊汁；在某些实施方案中，所述纱布的目数为200目；

122、步骤3：将红肉苹果和樱桃李浊汁按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行打浆制备果汁。

123、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李果汁还可以通过包含以下步骤的方法得到：

124、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆；

125、步骤2：对浆料进行过滤(例如用100-300目纱布过滤)，加果胶酶酶解过滤；制得红肉苹果和樱桃李果汁清汁；在某些实施方案中，所述纱布的目数为200目；

126、步骤3：将红肉苹果和樱桃李清汁按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行打浆制备果汁。

127、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李果汁还可由前述浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离或其他提取方式获得的提取物为原料来制备。

128、果酱

129、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李果酱可以通过包含以下步骤的方法得到：

130、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆；

131、步骤2：将果浆水煮加热浓缩制成红肉苹果和樱桃李果酱；

132、步骤3：将红肉苹果和樱桃李果酱按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行打浆制备果酱。

133、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李果酱还可由前述浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离或其他提取方式获得的提取物或者果汁为原料来制备。

134、果粉

135、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李果粉可以通过包含以下步骤的方法得到：

136、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆，

137、步骤2：将果浆冷冻干燥制成果浆冻干粉；

138、步骤3：将红肉苹果和樱桃李冻干粉按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行打浆制备冻干粉。

139、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李果粉还可以通过包含以下步骤的方法得到：

140、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆；

141、步骤2：对浆料进行过滤(例如用100-300目纱布过滤)，制得红肉苹果和樱桃李果汁；在某些实施方案中，所述纱布的目数为200目；

142、步骤3：将果汁冷冻干燥制成果汁冻干粉；

143、步骤4：将红肉苹果和樱桃李冻干粉按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行打浆制备冻干粉。

144、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李果粉还可以参照以上步骤，使用带式干燥制备获得果粉。

145、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李果粉还可由前述浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离或其他提取方式获得的提取物为原料来制备，通过冷冻干燥或带式干燥来制备果粉。

146、压片糖果

147、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李压片糖果可以通过包含以下步骤的方法得到：

148、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆；

149、步骤2：将果浆冷冻干燥或带式干燥制成果粉；

150、步骤3：对果粉和辅料进行压片制成压片糖果；

151、步骤4：将红肉苹果和樱桃李压片糖果按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行打浆制备压片糖果。

152、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李压片糖果还可以通过包含以下步骤的方法得到：

153、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆；

154、步骤2：对浆料进行过滤(例如用100-300目纱布过滤)，制得红肉苹果果汁；在某些实施方案中，所述纱布的目数为200目；

155、步骤3：将果汁冷冻干燥或带式干燥制成果粉；

156、步骤4：对果粉和辅料进行压片制成压片糖果。

157、步骤5：将红肉苹果和樱桃李压片糖果按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行打浆制备压片糖果。

158、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李压片糖果还可由前述浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离或其他提取方式获得的提取物为原料来制备。

159、口服液

160、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李口服液可以通过包含以下步骤的方法得到：

161、步骤1：制备不同比例(重量比)(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)的红肉苹果和樱桃李提取物(例如，通过鲜果打浆或榨汁、浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取或大孔树脂分离制得，步骤同上文)；

162、步骤2：对红肉苹果和樱桃李提取物进行灭菌制得红肉苹果口服液。

163、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李口服液还可以通过包含以下步骤的方法得到：

164、步骤1：制备不同比例(重量比)(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)的红肉苹果和樱桃李提取物(例如，通过鲜果打浆或榨汁、浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取或大孔树脂分离制得，步骤同上文)；

165、步骤2：加果胶酶酶解过滤制备清汁提取物组合物；

166、步骤3：对红肉苹果和樱桃李清汁提取物进行灭菌制得红肉苹果口服液。

167、胶囊

168、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李胶囊可以通过包含以下步骤的方法得到：

169、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆；

170、步骤2：将果浆冷冻干燥或带式干燥制成果浆冻干粉；

171、步骤3：将红肉苹果和樱桃李果粉按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行打浆制备果粉；

172、步骤4：将果粉装入胶囊壳，制成胶囊。

173、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李胶囊还可以通过包含以下步骤的方法得到：

174、步骤1：分别将红肉苹果和樱桃李去籽或去核后打浆；

175、步骤2：对浆料进行过滤(例如用100-300目纱布过滤)，制得红肉苹果和樱桃李果汁；在某些实施方案中，所述纱布的目数为200目；

176、步骤3：将果汁冷冻干燥或带式干燥制成果粉；

177、步骤4：将红肉苹果和樱桃李果粉按照不同比例(重量比)混合(1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)制备成组合物，或者在步骤1先按前述不同比例混合红肉苹果和樱桃李原料，再进行打浆制备果粉；

178、步骤5：将果粉装入胶囊壳，制成胶囊。

179、在某些实施方案中，红肉苹果和樱桃李胶囊还可由前述浸提提取、超声提取、超高压提取、亚临界提取、大孔树脂分离或其他提取方式获得的提取物为原料来制备。

180、有益效果

181、本发明选用天然红肉苹果和樱桃李，制备的红肉苹果和樱桃李组合物具有很好的抗动脉粥样硬化作用，两种复配的效果优于单独使用红肉苹果或樱桃李，且具有协同增效作用。另外，所述组合物进一步与药物联用的效果优于组合物或药物单独使用的效果，且具有协同增效作用。