链脲菌素与杆菌肽联合抗菌活性

本发明涉及生物领域，具体涉及链脲菌素抗菌及联合抗菌活性的应用。

背景技术：

1、革兰氏阴性(g-)菌耐药日益严重，其中以产超广谱β-内酰胺酶(esbl)、碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌(包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等)最为突出，有效药物匮乏，临床治疗困难，不得不使多年前就因肾毒性和神经毒性过大而基本遭弃用的多粘菌素类药物承担起当前对抗多药耐药g-菌最后一道防线的任务。然而，多粘菌素的耐药菌株也逐渐涌现，特别是质粒介导多粘菌素耐药基因mcr-1的出现进一步加剧了细菌耐药的现状。更为严峻的是近50年全球上市的新结构类型抗菌药物仅有抗革兰氏阳性(g+)菌的恶唑烷酮类、脂肽类、截短侧耳素类，以及抗结核的二芳基喹啉类，没有一个针对g-耐药菌，且目前处于临床及临床前研究的新骨架化合物也非常有限。寻找有效抗菌药物和联合用药抗菌方案是对抗当前临床棘手的g-耐药菌感染的重要策略。

2、链脲菌素(cas no.18883-66-4)于1956年分离自不产色链霉菌发酵液，属于亚硝基脲结构类型的小分子活性物质(分子量265.22)。最早因抗菌活性被发现，1959-1960年曾有两篇文献报道过其体内外抗菌活性，但由于文献年代过于久远，研究结果无法追溯。然而自1960年起，链脲菌素作为dna烷化剂，其抗肿瘤活性逐渐突显；另外，在抗肿瘤研究过程中发现链脲菌素具有破坏胰岛β细胞继而引发ⅱ型糖尿病的活性。自1960年至今，链脲菌素主要用于抗肿瘤治疗和ⅱ型糖尿病动物模型的构建，而其抗菌活性研究几乎全部中断，尤其链脲菌素与其他抗菌药物联合应用的抗菌活性尚未见任何报道。

技术实现思路

1、基于此，有必要发现和挖掘链脲菌素抗菌及联合抗菌活性的应用。

2、为实现上述目的，本发明具体技术方案如下：

3、基于当前流行耐药菌株，开展抗菌活性研究。受试菌株包括但不限于：g+菌中的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(mrsa)和万古霉素耐药肠球菌(vre)，g-菌中的产esbl耐药菌株、碳青霉烯类耐药菌株、多粘菌素耐药菌株。开展链脲菌素与9种抗菌药物的体外联合抗菌活性研究。

4、采用琼脂稀释法检测链脲菌素对18个种属(g-菌14个种属和g+菌4个种属)共计37株细菌的最低抑菌浓度(mic)，明确其抗菌谱。采用k-b纸片联合药敏实验检测链脲菌素与杆菌肽药物组合对9个种属共计15株细菌的联合药敏，以及链脲菌素与另外8种抗菌药物组合对大肠埃希菌(包括耐药菌株)的联合药敏。采用棋盘法体外联合药敏实验定量检测链脲菌素与杆菌肽药物组合对产超广谱β-内酰胺酶(esbl)、碳青霉烯类耐药、多粘菌素耐药的大肠埃希菌联合抗菌效应及联合用药指数。

5、首先，本发明提供了链脲菌素在抗革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中的应用。

6、优选的，所述革兰氏阳性菌包括表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌。

7、优选的，所述金黄色葡萄球菌包括甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌、甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌。

8、优选的，所述肠球菌包括万古霉素敏感肠球菌、万古霉素耐药肠球菌。

9、优选的，所述革兰氏阴性菌包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌、产气克雷伯菌、粘质沙雷氏菌、弗劳地枸橼酸菌、成团泛菌、普通变形杆菌、伤寒沙门菌、摩氏摩根氏菌、嗜麦芽窄食单胞菌、福氏志贺菌。

10、优选的，所述大肠埃希菌包括产超广谱β-内酰胺酶耐药大肠埃希菌、不产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌、碳青霉烯耐药大肠埃希菌、多粘菌素耐药大肠埃希菌、产新德里金属-β-内酰胺酶1大肠埃希菌。

11、优选的，所述肺炎克雷伯菌包括产超广谱β-内酰胺酶耐药肺炎克雷伯菌、不产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌、碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌、多粘菌素耐药肺炎克雷伯菌、产新德里金属-β-内酰胺酶1肺炎克雷伯菌。

12、进一步地，还提供了链脲菌素和杆菌肽在抗革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中的联合应用。

13、优选的，所述革兰氏阴性菌包括产超广谱β-内酰胺酶耐药菌株、碳青霉烯耐药菌株、多粘菌素耐药菌株。

14、进一步地，还提供了链脲菌素和抗菌药物在抗菌中的联合应用，所述抗菌药物包括罗红霉素、泰利霉素、诺氟沙星、万古霉素、新生霉素。

15、基于上述技术方案，本发明具有以下有益效果：

16、链脲菌素具有广谱抗菌活性，和其他抗菌药物联合应用还具有相加或协同抗菌活性，有效填补了抗菌化合物的应用不足，尤其是针对耐药性细菌提供有效地抗菌解决方案，提高疗效，减少耐药菌的传播。

技术特征：

1.链脲菌素和杆菌肽在制备抗耐药革兰氏阴性菌药物中的联合应用，其特征在于，所述耐药革兰氏阴性菌为耐药大肠埃希菌和耐药肺炎克雷伯菌，所述耐药大肠埃希菌为多粘菌素耐药大肠埃希菌，碳青霉烯类耐药大肠埃希菌，产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌，所述耐药肺炎克雷伯菌为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌。

技术总结
本发明公开了链脲菌素抗菌及联合抗菌活性的应用。本发明公开链脲菌素具有广谱抗菌活性，对耐药革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗菌活性，同时链脲菌素与其他抗菌药物联合使用时对耐药细菌具有累加或协同抗菌活性，可以填补目前临床抗耐药菌药物品种的不足，提高疗效，减少耐药菌的传播。

技术研发人员：李玥,游雪甫,杨信怡,姚开虎
受保护的技术使用者：首都医科大学附属北京儿童医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15