纳米组合物及其制备方法和用途与流程

本公开内容涉及生物医药领域，尤其是涉及由包含色氨酸二肽基的寡肽和顺铂形成的自组装纳米组合物及其制备方法和用途。

背景技术：

1、随着纳米技术在生物医药领域的广泛应用，基于各种高分子、无机或脂质材料所构建的纳米载运系统在实现药物的体内有效递送方面显示出极具潜力的应用价值和开发前景。与游离药物溶液相比，纳米载运系统具有改善药物体内过程、调节释药速率、增强病灶组织靶向性、提高生物利用度和降低药物毒副作用等优势。

2、然而，基于传统材料构建的纳米载运系统由于尺寸小、比表面积大，要实现对临床有效治疗剂量药物(尤其是化学小分子药物)的完全包封通常需要较大比例的载体材料，从而导致载药量低(<10％)、制备工艺复杂、缺乏重复性和可控性，难以实现大规模生产和临床转化。另外，体内连续引入大量高分子或无机类载体材料不可避免会带来因降解缓慢或代谢产物有毒等所致的蓄积毒性。近年来阳离子脂质纳米载体以其良好的生物降解性和制备可重复性而在核酸类药物的递送中受到青睐，但仍存在细胞转染效率不高和有一定细胞毒性等问题，从而在一定程度上影响了其在临床治疗上的使用。

3、顺铂，又名顺式-二氯二氨合铂，是一种含铂的抗癌药物，临床上对卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌、恶性淋巴瘤、头颈部鳞癌、甲状腺癌及成骨肉瘤等多种实体肿瘤均能显示疗效。但顺铂用于治疗癌症有一定的毒性，会引起副作用。

4、因此，在生物医药领域迫切需要开发新的生物相容性载体来推动基于顺铂的纳米药物的规模化生产和临床转化。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本公开内容提供了色氨酸二肽基自组装纳米组合物及其制备方法和用途，即利用色氨酸二肽所提供的具有芳香电子结构的吲哚环与药物(例如，顺铂)通过π-π相互作用驱动自组装形成纳米颗粒。该构建方式有别于传统的载体物理包埋，可实现对药物的高效负载，并避免了共价交联对药物活性的影响；同时色氨酸多肽基元可促进药物的内体逃逸及在胞质中的有效累积。

2、在一方面，本公开内容提供了纳米组合物，所述纳米组合物由含有色氨酸的寡肽和顺铂自组装形成。

3、在一些实施方案中，寡肽的通式可以是

4、xaa1-xaa2-xaa3-xaa4-xaa5-xaa6-w-w-xaa7-xaa8-xaa9-xaa10-xaa11-xaa12，其中，w是色氨酸；以及xaa1-xaa12可以各自独立地不存在或表示任意氨基酸残基。

5、在一些实施方案中，所述寡肽可以选自色氨酸-色氨酸、色氨酸-色氨酸-天冬氨酸、色氨酸-色氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸、色氨酸-色氨酸-精氨酸、色氨酸-色氨酸-谷氨酸、色氨酸-色氨酸-甘氨酸、色氨酸-色氨酸-丝氨酸、色氨酸-色氨酸-组氨酸、色氨酸-色氨酸-赖氨酸、色氨酸-色氨酸-酪氨酸、色氨酸-色氨酸-半胱氨酸、色氨酸-色氨酸-苏氨酸，优选地，所述寡肽可以选自色氨酸-色氨酸、色氨酸-色氨酸-天冬氨酸、色氨酸-色氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸、色氨酸-色氨酸-精氨酸、色氨酸-色氨酸-谷氨酸。

6、在一些实施方案中，所述纳米组合物可以是色氨酸-色氨酸-顺铂、色氨酸-色氨酸-天冬氨酸-顺铂、色氨酸-色氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-顺铂、色氨酸-色氨酸-精氨酸-顺铂或色氨酸-色氨酸-谷氨酸-顺铂；优选地，所述纳米组合物可以是色氨酸-色氨酸-谷氨酸-顺铂。

7、在一些实施方案中，所述纳米组合物的载药量可以是约20％至约60％，优选是约24％至约55％，更优选是约24％至约50％。

8、在一些实施方案中，所述纳米组合物粒径可以是10-1000nm，优选是20-200nm。

9、在另一方面，本公开内容提供了包含上述纳米组合物以及至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

10、在一些实施方案中，所述药学上可接受的赋形剂选自粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、溶剂、防腐剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、助溶剂、乳化剂、增溶剂、渗透压调节剂和着色剂中的一种或多种。

11、在又一方面，本公开内容提供了上述纳米组合物的制备方法，包括：将寡肽分散于水相c中，然后加入顺铂，获得混合液c，将混合液c避光高速搅拌，去除溶剂，得到所述纳米组合物的胶体溶液。

12、在一些实施方案中，所述寡肽与顺铂的摩尔比可以是约0.25-20:1，优选是约0.5-20:1，优选是约1-5:1，更优选是约1-2:1。

13、在一些实施方案中，所述纳米组合物的包封率可以是约35％至约99％，优选是约67.5％至约99％，更优选是约80％至约99％。

14、在一些实施方案中，所述水相c选自纯化水、注射用水、4-羟乙基哌嗪乙磺酸(hepes)缓冲液、三羟甲基氨基甲烷(tris)缓冲液或磷酸缓冲盐(pbs)缓冲液中的一种或多种；优选地，所述水相c是hepes缓冲液；更优选的，所述水相c的ph为5-9。

15、在一些实施方案中，所述方法还包括添加分散剂的步骤。

16、在一些实施方案中，所述分散剂选自mpeg2k-nhs、血清白蛋白、磷脂聚乙二醇(depe-peg2000)、卵磷脂、聚乙二醇聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga-peg)中的一种或多种；优选地，所述分散剂是mpeg2k-nhs。

17、在一些实施方案中，在将寡肽分散于水相c中之后，还包括于水相d中透析的步骤。

18、在一些实施方案中，所述水相d选自纯化水、注射用水、4-羟乙基哌嗪乙磺酸(hepes)缓冲液、三羟甲基氨基甲烷(tris)缓冲液或磷酸缓冲盐(pbs)缓冲液中的一种或多种；优选地，所述水相d是注射用水。

19、在一些实施方案中，将混合液c在40-60℃下，优选地在50℃下避光高速搅拌。

20、在一些实施方案中，去除混合液c中的溶剂采用减压蒸发法、高速离心法、透析法或超滤法，优选使用减压蒸发法。

21、在一些实施方案中，所述方法可以还包括添加冻干保护剂，冷冻干燥得到固体粉末的步骤。

22、在一些实施方案中，所述冻干保护剂可以选自蔗糖、海藻糖和甘露醇中的一种或多种；优选地，所述冻干保护剂可以是蔗糖。

23、在另一方面，本公开内容提供了上述纳米组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

24、在又一方面，本公开内容提供了上述纳米组合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。

25、在另一方面，本公开内容提供了用于治疗肿瘤的上述纳米组合物或上述药物组合物。

26、在又一方面，本公开内容提供了治疗肿瘤的方法，所述方法包括向有需要的对象给予包含上述纳米组合物的药物或上述药物组合物，例如治疗有效量的包含上述纳米组合物的药物或上述药物组合物。

27、在一些实施方案中，所述肿瘤是癌症。

28、在一些实施方案中，所述肿瘤是肺癌、乳腺癌、胃癌、食管癌、肾上腺皮质癌、皮肤鳞癌、头颈部癌、甲状腺癌、肝癌、胰腺癌、胆管癌、结直肠癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、阴道鳞状上皮癌、睾丸癌、前列腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、黑色素瘤、骨肉瘤、恶性淋巴瘤或神经母细胞瘤。