地美硝唑在制备治疗猫腹泻药物中的应用、一种用于治疗猫腹泻的地美硝唑制剂的制作方法

本发明涉及兽用药物领域，特别涉及地美硝唑在制备治疗猫腹泻药物中的应用。

背景技术：

1、地美硝唑，化学名称为：1,2-二甲基-5-硝基咪唑，分子式为c5h7n3o2，分子量为141.13，其结构式为：

2、

3、该化合物为类白色或微黄色粉末，光照不稳定，遇光渐变黑，无臭或基本无臭，溶于氯仿、乙醇、稀碱和稀酸，不溶于水和乙醚。

4、地美硝唑获批适应症为：预防螺旋体引起的猪下痢，防治禽类的组织滴虫病及六鞭虫病。其已知可以用于治疗禽弧菌性肝炎、坏死性组织、火鸡组织滴虫病。经查询，并无其在制备治疗猫腹泻药物中应用的相关报道。

5、猪三毛滴虫病是近些年来新发现的一种猪原虫病，在临床上以小猪顽固性腹泻较为常见，是导致小猪腹泻的重要原因之一。为了筛选治疗该病的理想药物，《不同药物对猪三毛滴虫病的治疗效果观察》一文展开了相关研究，其按每1000kg饲料添加20%地美硝唑1500g对患猪进行治疗，研究结果表明，由于耐药性问题以及感染猪三毛滴虫后并发感染其他肠道细菌（如大肠杆菌、沙门氏菌）问题导致单纯使用地美硝唑不能完全治愈患猪，尽管粪检中未检出三毛滴虫，但仍有部分患猪存在腹泻现象，治疗效果并不理想。

技术实现思路

1、本发明的第一目的在于提出地美硝唑在制备治疗猫腹泻药物中的新应用；

2、本发明的第二目的在于提供一种用于治疗猫腹泻的地美硝唑制剂；

3、本发明的第三目的在于提供地美硝唑咀嚼片的制备方法；

4、本发明的第四目的在于提出地美硝唑制剂或地美硝唑咀嚼片在制备治疗猫腹泻药物中的应用。

5、为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

6、本发明首先提出了化合物地美硝唑在制备治疗猫腹泻药物中的应用。

7、地美硝唑获批适应症为：预防螺旋体引起的猪下痢，防治禽类的组织滴虫病及六鞭虫病，临床中其主要应用于治疗禽弧菌性肝炎、坏死性组织、火鸡组织滴虫病等。经查询，暂未发现将地美硝唑作为制备治疗猫腹泻药物的相关报道。

8、造成猫腹泻的原因多种多样，但大部分原因是：如阿米巴原虫、弓形虫、毛滴虫、球虫、贾弟鞭毛虫等原虫感染，或者沙门氏菌、弯曲杆菌、产气荚膜梭菌、葡萄球菌、大肠埃希杆菌等细菌感染。以化合物地美硝唑对因原虫感染引起的猫腹泻进行治疗的原理是：地美硝唑可以抑制原虫的氧化还原反应，使氮链发生断裂。以化合物地美硝唑对因厌氧菌感染引起的猫腹泻进行治疗的原理是：厌氧菌的铁硫蛋白将硝基还原，还原后的产物与dna作用，引起细菌dna螺旋链损伤、断裂、解旋，进而导致细菌死亡。

9、以地美硝唑作为有效成分的药物对猫腹泻进行治疗的试验表明，使用地美硝唑治疗猫腹泻的疗效极好，如在40mg/kg，每日两次的给药治疗下，给药第1天的治愈率即超过一半，达到55.6%，在给药第6天，患猫全部被治愈，治愈率高达100%。

10、作为优选，所述猫腹泻为因原虫引起的猫腹泻。

11、作为进一步优选，所述原虫为猫胎儿三毛滴虫。

12、相较于其他引起猫腹泻的原虫，猫胎儿三毛滴虫具有一定的特殊性，在猫身上发现毛滴虫以来很长一段时间内，由于检测技术的限制，猫胎儿三毛滴虫经常与人五毛滴虫甚至是十二指肠贾第虫相混淆，导致在临床中被误诊、误治。直到2001年，首次通过分子生物学方法确定胎儿三毛滴虫是猫毛滴虫病的病原，可以引起猫的慢性大肠性腹泻。其形态特征是具有3根前鞭毛和1根后鞭毛，并有一个沿着身体延伸的波动膜，猫胎儿三毛滴虫的轴突是一种刚性的杆状组织，贯穿滋养体并从后端突出，长度约为10~25微米，宽度约为3~15微米。

13、地美硝唑的临床适应症除上述疾病外，还包括对禽毛滴虫、牛三毛滴虫病和猪三毛滴虫病。需要指出的是，禽毛滴虫与猫胎儿三毛滴虫差异巨大，虫体呈卵圆形或椭圆形，大小为(5～19)×(2～9)微米，相较于猫胎儿三毛滴虫的三根前鞭毛，禽毛滴虫有4根起源于虫体前端的游离鞭毛；其次，虽然猫、牛、猪虽都属于哺乳动物，但该三种毛滴虫的基因型、宿主、靶器官、引起的疾病和对药物的敏感性及作用机理等均存在一定差别，转用难度较大。

14、（1）毛滴虫的基因型不同。关于胎儿三毛滴虫猫源分离株、牛源分离株、猪三毛滴虫的鉴定出现了一系列研究，通过dna测序，研究发现猫胎儿三毛滴虫和牛胎儿三毛滴虫转录间隔区存在一个单核苷酸多态性，此外，蛋白编码基因半胱氨酸蛋白酶、苹果酸脱氢酶1和its序列等10个基因位点均存在一定的差异。目前进一步的研究表明，猪三毛滴虫和猫胎儿三毛滴虫之间亦存在显著的遗传差异。

15、（2）毛滴虫的靶器官、引起的疾病不同。牛胎儿三毛滴虫病中，牛生殖系统是毛滴虫的靶器官，其会引发牛的生殖系统炎症、不孕和早期流产；猪三毛滴虫则定殖于家猪的空腔器官内，包括胃、盲肠和结肠内，主要会引发小猪顽固性腹泻；猫胎儿三毛滴虫定植于远端回肠和结肠，会导致淋巴浆细胞性和中性粒细胞性结肠炎，以及慢性恶臭腹泻。

16、此外，《不同药物对猪三毛滴虫病的治疗效果观察》一文中提到单独使用地美硝唑对猪腹泻进行治疗，由于耐药性问题以及感染三毛滴虫后并发感染其他肠道细菌问题导致单纯使用地美硝唑不能完全治愈患猪，仍有部分患猪存在腹泻现象。据文献（andersen, laet al. (2018) prevalence of enteropathogens incats with and without diarrheain four different management models for unowned cats in the southeast unitedstates. vet j 236:49–55.）报道，39%产生腹泻症状的猫与毛滴虫感染有关，而目前报道罗硝唑是治疗猫胎儿三毛滴虫的唯一有效药物，其治疗周期长达两周以上，且由于罗硝唑具有明显的毒性作用，可导致神经毒性（《plumb's veterinary drug handbook(2008)》807页），嗜睡，呕吐等，具有较强的致畸性，被列入禁药，因此开发用于猫胎儿三毛滴虫的安全、高效的药物具有强烈需求，本发明使用地美硝唑治疗猫胎儿三毛滴虫引起的腹泻具有意想不到的效果。

17、本发明使用地美硝唑治疗猫胎儿三毛滴虫引起的腹泻的过程中，通过剂量把控，解决了耐药性问题，实现短期一次性杀灭滴虫的作用，效果极好。具体的，对因猫胎儿三毛滴虫引起的猫腹泻的地美硝唑疗效考察表明，经一周的给药治疗，9只患猫大便全部恢复正常状态，且患猫的猫胎儿三毛滴虫检测全部呈现阴性，药物有效率高达100%，治愈率100%。

18、本发明提供了一种用于治疗猫腹泻的地美硝唑制剂，以地美硝唑为有效成分，还包含有其他的药学上可接受的辅料。

19、作为优选，所述药学上可接受的辅料包括：填充剂、甜味剂、润滑剂、助流剂、着色剂和诱食剂中的一种或几种。

20、作为进一步优选，所述制剂为咀嚼片。

21、现有地美硝唑药物为地美硝唑预混剂，但其具有以下缺点：

22、（1）现有地美硝唑预混剂的使用方法为将一定剂量的预混剂搅拌于日粮中或溶于饮水中，由于地美硝唑产品本身存在稳定性差、见光变黑等问题，使得其治疗实际利用率不高，且不易储存和使用，容易造成浪费；

23、（2）现有的地美硝唑预混剂味苦，适口性差，这会引起动物采食量减少，最终导致药物摄取剂量不足，从而影响药物的临床疗效；

24、（3）现有地美硝唑预混剂对呼吸道粘膜具有一定的刺激性，副作用明显；

25、（4）现有地美硝唑预混剂在体内吸收过程中易受各种酸碱和酶类的影响，导致药效降低。

26、本发明提供的一种用于治疗猫腹泻的地美硝唑咀嚼片，通过更改剂型、添加着色剂，减少光接触面积和制剂的光透过率，极大的提高了药物的光照稳定性。经比对，现有的地美硝唑预混剂在光照30天后的最大单杂约达到了同等光照条件下本发明的地美硝唑咀嚼片最大单杂的37倍，总杂则达到了约7.4倍，可见本发明的地美硝唑咀嚼片的光照稳定性明显优于地美硝唑预混剂，更容易储藏。其次，本发明提供的一种地美硝唑咀嚼片通过添加甜味剂、诱食剂等对地美硝唑的苦味进行矫正，咀嚼片口味佳且适口性好，猫服从性高，因此药物利用率更高，且与地美硝唑预混剂相比，喂食的剂量更容易控制，不容易造成浪费。此外，本发明的地美硝唑咀嚼片经咀嚼后可以直接在舌下毛细血管吸收，吸收速度快，生物利用度高，且不经过肠胃，肝肠循环，副作用小，不会对肠胃造成负担，不会对肝脏造成伤害，而且不会有首过效应，体内药物血浓度高。

27、作为进一步优选，所述地美硝唑制剂的各组分的质量份为：地美硝唑25~35，填充剂35~55，甜味剂5~25，润滑剂1~3，助流剂1~3，着色剂2~5及诱食剂2~10。

28、作为进一步优选，所述填充剂包括直压乳糖、微晶纤维素、预胶化淀粉、甘露醇、山梨醇和木糖醇中的一种或几种。

29、作为进一步优选，所述甜味剂包括阿斯巴甜、三氯蔗糖、糖精钠和山梨醇中的一种或几种。

30、作为进一步优选，所述润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉和聚乙二醇6000中的一种或几种。

31、作为进一步优选，所述助流剂包括胶态二氧化硅。

32、作为进一步优选，所述着色剂包括日落黄、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、果绿、靛蓝、β-胡萝卜素和葡萄紫中的一种或几种。

33、作为进一步优选，所述诱食剂包括牛肉香精、鸡肉香精、鱼肉香精和虾肉香精中的一种或几种。

34、一种用于治疗猫腹泻的地美硝唑咀嚼片的制备方法，包括以下步骤：

35、（s.1）将地美硝唑、填充剂、甜味剂、润滑剂、助流剂、着色剂和诱食剂充分混合均匀，得到混合粉；

36、（s.2）将所述混合粉进行压片得到地美硝唑咀嚼片。

37、作为进一步优选，所述（s.1）包括以下步骤：

38、a.将填充剂与着色剂共同过筛，混合均匀；

39、b.将步骤a所得混合物与地美硝唑、诱食剂共同过筛，混合均匀；

40、c.将步骤b制得的混合物与甜味剂、润滑剂、助流剂共同过筛，混合均匀，得到混合粉。

41、所述地美硝唑制剂或地美硝唑咀嚼片在制备治疗猫腹泻药物中应用。

42、经验证，本发明的地美硝唑咀嚼片对猫腹泻进行治疗效果较好，如在剂量40mg/kg，每日两次的给药治疗下，给药第1天的治愈率即达到55.6%，在给药第6天的患猫全部被治愈，治愈率高达100%。

43、作为进一步优选，所述猫腹泻为因原虫引起的猫腹泻。

44、作为进一步优选，所述原虫为猫胎儿三毛滴虫。

45、因猫胎儿三毛滴虫引起的猫腹泻具有难诊断性、顽固性、易复发性、易传染性，对猫的健康存在一定威胁，目前兽医临床上使用最有效的药物是罗硝唑，但其最短治疗周期长达两周，且由于罗硝唑具有明显的毒性作用，因此副作用较大。

46、经验证，本发明的地美硝唑咀嚼片在治疗猫胎儿三毛滴虫引起的腹泻中，疗效较好，9只患猫经一周给药治疗后，未发现试验猫持续软便、便血现象，大便全部恢复正常状态，且患猫的猫胎儿三毛滴虫检测全部呈现阴性，药物有效率高达100%，治愈率100%，极大地缩短了猫腹泻治疗周期，且整个治疗过程没有发现明显副作用。

47、本发明与现有技术相比有以下优点：

48、（1）本发明对已知化合物1,2-二甲基-5-硝基咪唑发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域，药用前景较好；

49、（2）本发明的地美硝唑咀嚼片治疗猫腹泻疗效十分显著，药物药理作用强，腹泻治愈率高，治疗周期短；

50、（3）本发明提供的一种地美硝唑咀嚼片通过更改剂型、添加着色剂，减少光接触面积，极大的提高了药物的光照稳定性，利于存放，药品的安全性高；

51、（4）本发明提供的一种地美硝唑咀嚼片通过添加甜味剂、诱食剂等对地美硝唑的苦味进行矫正，咀嚼片口味佳且适口性好，猫服从性高，药物利用率更高，且与地美硝唑预混剂相比，喂食的剂量更容易控制，不容易造成浪费；

52、（5）本发明的地美硝唑咀嚼片经咀嚼可以直接在舌下毛细血管吸收，吸收速度快，生物利用度高，且因不经过肠胃，肝脏循环，副作用小，不会对肠胃造成负担，不会对肝脏造成伤害，亦不会有首过效应，体内药物血浓度高；

53、（6）本发明的用于治疗猫腹泻的地美硝唑咀嚼片制备方法简单，操作方便，无需复杂设备和制备步骤。