一种柿叶水提物及其制备方法和应用

本发明属于植物有效成分提取，具体涉及一种柿叶水提物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、柿子(diospyros kaki l.)叶广泛分布在中国、日本和韩国等东亚国家，柿叶中主要含有黄酮类、萜类、酚酸类和脂肪酸等化学成分。在临床治疗中，柿叶提取物可用于制备防治脑动脉硬化、冠心病心绞痛、神经功能退化症、脑卒中后遗症的药物和保健品，制备的药物剂型多为片剂和胶囊剂。在现有研究中，柿子叶提取物的药理药效还具有抗氧化作用、抑制蛋白酶活性、分解黑色素、阻断紫外线穿透的作用。在国内市场上柿叶提取物的生产企业有多家，提取方法有多种，如水提、醇提、碱水提酸沉淀法等，然而提取工艺各不相同，质量参差不齐，最后得到的柿叶提取物的效果也有很大区别，治疗病症的效果也有差异。柿叶提取物中含有多种有效化合物，而不同的化合物活性功能不同，针对的病症也不相同，对于柿叶提取物与病症相关性的研究在现有技术中未见相关报道。

2、质谱(ms)是目前中草药植物化学成分结构鉴定的最稳健和敏感的方法之一，因为它不仅可以提供分子的质量信息，还可以提供其分子片段的信息，非常利于阐明化合物结构。另外，ms与lc液相色谱的联用可以分离混合物，这使得识别更简单容易。

3、顺铂是抗肿瘤的有效药物，可抑制多种恶心肿瘤，但对机体副作用较大，比如引起肾脏毒性、耳毒性、神经毒性、过敏反应，消化系统和造血系统损伤，对免疫细胞的杀伤性较大。然而保留顺铂抗肿瘤活性，减弱对机体的副作用是现阶段亟需解决的问题，目前并未发现通过制备柿叶提取物预防顺铂副作用的任何相关记载。

技术实现思路

1、鉴于上述问题，本发明提供了一种柿叶水提物及其制备方法和应用，该柿叶水提物与顺铂联用，具有显著升高白细胞和抗肿瘤活性，还可降低顺铂对免疫细胞的损伤。

2、为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：

3、本发明提供一种柿叶水提物的制备方法，包括如下步骤：将柿子叶于80～95℃水中浸泡，收集热水，减压浓缩，冷冻干燥得冻干粉末，即得柿叶水提物。

4、优选的，所述柿子叶需洗净后剪碎至尺寸≤4×4cm。

5、优选的，所述浸泡的时间为40～120min。

6、本发明提供所述的制备方法获得的柿叶水提物。

7、本发明提供所述的柿叶水提物在制备提升白细胞数量药物中的应用。

8、本发明提供所述的柿叶水提物在制备降低顺铂对免疫细胞损伤药物中的应用。

9、本发明提供所述的柿叶水提物在制备提高巨噬细胞活性药物中的应用。

10、优选的，所述柿叶水提物的有效浓度为20～200μg/ml。

11、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

12、本发明模拟泡茶叶程序，纯水煎煮柿子叶，经浓缩后冻干得到柿叶水提物。通过液质联用技术，探索出柿叶水提物有效成分。通过动物试验研究结果表明，柿叶水提物与顺铂联用，具有显著升高白细胞和抗肿瘤活性；同时，与顺铂的严重副作用相反，柿叶水提物对小鼠单核巨噬细胞和脾细胞没有明显杀伤作用，与顺铂联合用药更会降低顺铂对免疫细胞的伤害，保护免疫细胞免受化疗药物的杀伤，对肿瘤细胞有显著抑制作用。由此表明，柿叶水提物可以通过增强小鼠的免疫功能来有效抑制传统化疗药物的毒副作用并显示了功能性免疫增强剂的潜力。

13、本发明为阐明柿叶水提物药效物质基础，在构建化学成分信息库的基础上，采用超高效液相色谱仪与飞行时间质谱联用技术(uplc-esi-tof/ms)对柿叶水提物主要色谱峰的来源进行了归属，对其化学结构进行了推断和鉴定，其分析的结果可为柿叶水提物的质量控制和进一步的药理学分析奠定基础。

14、本发明制备方法简便易行，生产成本低，适合工业化生产。

技术特征：

1.一种柿叶水提物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将柿子叶于80～95℃水中浸泡，收集热水，减压浓缩，冷冻干燥得冻干粉末，即得柿叶水提物。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述柿子叶需洗净后剪碎至尺寸≤4×4cm。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述浸泡的时间为40～120min。

4.如权利要求1～3任一项所述的制备方法获得的柿叶水提物。

5.如权利要求4所述的柿叶水提物在制备提升白细胞数量药物中的应用。

6.如权利要求4所述的柿叶水提物在制备降低顺铂对免疫细胞损伤药物中的应用。

7.如权利要求4所述的柿叶水提物在制备提高巨噬细胞活性药物中的应用。

8.如权利要求5～7任意一项所述的应用，其特征在于，所述柿叶水提物的有效浓度为20～200μg/ml。

技术总结
本发明提供一种柿叶水提物及其制备方法和应用，属于植物有效成分提取技术领域。本发明将柿子叶于80～95℃水中浸泡，收集热水，减压浓缩，冷冻干燥得冻干粉末，即得柿叶水提物。经该方法获得的柿叶水提物，与顺铂联用，具有显著升高白细胞和抗肿瘤活性，增强机体免疫功能；与顺铂的严重副作用相反，柿叶水提物对小鼠单核巨噬细胞和脾细胞没有明显杀伤作用，与顺铂联合用药更会降低顺铂对细胞的伤害，保护免疫细胞免受化疗药物的杀伤。

技术研发人员：王玉记,李文斌,李士广,陈雨潇,王松灵
受保护的技术使用者：首都医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16