本发明涉及导尿管领域，特别涉及载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的制备方法及其应用。
背景技术：
1、缺血性海绵状纤维化引起的尿道管腔狭窄促进了尿道狭窄的形成。男性尿道狭窄的发生率约为0.6％。尿道狭窄的原因主要包括外尿道损伤和内尿道损伤，前者如盆腔骨折，后者主要是医源性损伤，如机械损伤、热损伤和激光能量辐射amu损伤。随着尿道腔逐渐狭窄，这些患者可能表现出不同程度的下尿路梗阻症状，如尿犹豫、不完全排空、夜间排尿、尿频，严重时，尿潴留、尿道感染坏死、尿道周围脓肿、肾功能衰竭。
2、目前治疗主要包括尿道扩张、尿道切口、尿道支架放置和尿道重建手术(如狭窄切除尿道端至末端吻合、口腔黏膜置换尿道成形术、组织工程置换尿道成形术)。然而，尽管尿道成形术发展迅速，但由于置换术后粘膜下纤维化和尿道瘢痕，复发率仍然很高，特别是长距离尿道狭窄患者，通常需要定期尿道扩张，甚至再手术。这给患者在生理、心理和经济方面造成了巨大的负担。为此，许多研究探讨了基于细胞的治疗、药物传递和组织工程的原则，为尿道狭窄的治疗提供了更多潜在的选择。
3、尿道狭窄的形成和复发与损伤组织愈合过程中纤维化的形成有关，主要与尿道粘膜下层细胞外基质(ecm)过度沉积、胶原水平升高、胶原i型和iii型比例变化、ecm降解不平衡有关。与许多纤维化相关疾病类似，尿道组织中成纤维细胞基因的异常表达被认为是瘢痕形成的主要原因。转化生长因子β1(tgf-β1)是一种有效的成纤维细胞趋化因子，是纤维化的重要介质，可诱导成纤维细胞胶原的产生和分泌，从而导致组织纤维化疾病。因此，抗纤维化药物的有效应用已成为治疗尿道狭窄的重要手段之一。
4、pfd已被临床用于治疗特发性肺纤维化。pfd作为一种tgf-β配体抑制剂，通过阻断多种细胞中tgf-β的产生来抑制成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的合成，从而减缓特发性纤维化的进展。pfds的抗纤维化作用已被创造性地用于多种疾病模型的基础和临床研究，包括急性肾损伤、克罗恩病，甚至covid-19。因此，本研究选择pfd作为抗纤维化药物，探讨其治疗尿道狭窄的疗效。
5、近十年来，材料医学和组织工程技术发展迅速。大量研究表明，纳米材料可用于组织工程重建和药物缓释。聚乳酸-共乙醇酸(plga)纳米颗粒因其优异的生物相容性和各种不溶性治疗能力而获得美国食品和药物管理局(fda)和欧洲药品管理局(ema)的批准。plga纳米颗粒作为纳米载体的有效性已被许多研究证实。因此，我们选择plga纳米颗粒作为装载吡非尼酮的载体，通过吡非尼酮的局部缓释和控释来评价抑制尿道狭窄的效果。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的制备方法及其应用，以解决上述背景技术中提出的问题。
2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的制备方法，包括以下步骤：
3、s1，双乳液的制备，首先预先制备含有纳米颗粒与吡非尼酮复合物的双乳液；
4、s2，乳化，然后在超声波将双乳液匀浆器中重新乳化，在室温下搅拌22-26小时，使二氯甲烷完全蒸发；
5、s3，离心，对纳米颗粒进行一定条件下离心，在去离子水中洗涤多次，并在去离子水中悬浮，得到含pfd的纳米颗粒悬浮液；
6、s4，孵育，导管在含有多巴胺盐酸盐的pbs中孵育，然后通过搅拌形成经聚多巴胺修饰的导管；
7、s5，洗涤，然后用去离子水将这些修饰的聚多巴胺导管洗涤两次，并浸泡在步骤s3中制备的含pfd的纳米颗粒悬浮液中，形成一个装载np/pfd复合物的导管；
8、s6，观察，最后用扫描电镜观察np/pfd复合物导管的表面形貌。
9、优选的，制备含有纳米颗粒与吡非尼酮复合物的双乳液的具体步骤如下：
10、s11，将200μl磷酸盐缓冲盐和吡非尼酮，乳化在4ml二氯甲烷和40毫克聚乳酸乙醇酸中；
11、s12，动摇在超声波匀浆器后进行冰浴1min，然后将9ml 1.5％聚乙烯醇加入摇匀混合物中，形成含有纳米颗粒与吡非尼酮复合物的双乳液。
12、优选的，在步骤s3中，纳米颗粒的离心条件为，在12000rpm，小于4c下离心5分钟，然后在去离子水中洗涤3次。
13、优选的，在步骤s4中，导管在含有0.5mg/ml多巴胺盐酸盐和ph 8.5的pbs中孵育，然后在室温下，搅拌3小时。
14、载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的应用，用于评价np/pfd复合物导管插入导尿道后纳米颗粒的分布，在此过程中的具体步骤为：使用罗丹明b对np/pfd复合物进行标记，然后形成一个负载罗丹明b标记的np/pfd复合物的导管，用于行逆行尿道造影术，评估尿道狭窄的形成情况。
15、优选的，制备负载罗丹明b标记的np/pfd复合物的导管的具体步骤如下：
16、s101，首先，导管在含有盐酸多巴胺的pbs中孵育；
17、s102，然后，通过搅拌，在室温下，3小时，形成经聚多巴胺修饰的导管；
18、s103，然后将步骤二中聚多巴胺修饰的导管，用去离子水洗涤两次，并浸泡在罗丹明b标记的np/pfd复合物悬液中，形成一个负载罗丹明b标记的np/pfd复合物的导管。
19、优选的，在步骤s103中，罗丹明b标记的np/pfd复合物悬液的制备具体步骤如下：
20、s113，首先预先制备含有罗丹明b的悬液；
21、s123，然后在超声波将双乳液匀浆器中重新乳化，在室温下搅拌24小时，使二氯甲烷完全蒸发；
22、s133，最后，将纳米颗粒在12,000rpm，在小于4c，5分钟条件下离心，在去离子水中洗涤3次，并在去离子水中悬浮。
23、优选的，在步骤s113中，制备含有罗丹明b的悬液的具体操作为：将200μl pbs，罗丹明b，pfd，在2ml二氯甲烷中乳化，20mg plga，在超声匀浆器中摇晃，然后冰浴，0.5min，然后，加入4.5ml 1.5％ pva加入摇匀混合物中，罗丹明b标记的np/pfd复合物悬液。
24、本发明的技术效果和优点：
25、本发明利用加载罗丹明b标记np/pfd复合物，本研究中装载np/pfd复合物的导尿管可以预防和减少尿道狭窄，为尿道狭窄的临床药物治疗提供更多的参考。我们所探索的兔尿道狭窄建模方法操作简单，成功地建立了狭窄模型，可作为动物尿道狭窄建模的有效方法。
1.载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的制备方法，其特征在于，制备含有纳米颗粒与吡非尼酮复合物的双乳液的具体步骤如下：
3.根据权利要求1所述的载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的制备方法，其特征在于，在步骤s3中，纳米颗粒的离心条件为，在12000rpm，小于4c下离心5分钟，然后在去离子水中洗涤3次。
4.根据权利要求1所述的载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的制备方法，其特征在于，在步骤s4中，导管在含有0.5mg/ml多巴胺盐酸盐和ph 8.5的pbs中孵育，然后在室温下，搅拌3小时。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的应用，其特征在于，用于评价np/pfd复合物导管插入导尿道后纳米颗粒的分布，在此过程中的具体步骤为：使用罗丹明b对np/pfd复合物进行标记，然后形成一个负载罗丹明b标记的np/pfd复合物的导管，用于行逆行尿道造影术，评估尿道狭窄的形成情况。
6.根据权利要求1所述的载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的应用，其特征在于，制备负载罗丹明b标记的np/pfd复合物的导管的具体步骤如下：
7.根据权利要求6所述的载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的应用，其特征在于，在步骤s103中，罗丹明b标记的np/pfd复合物悬液的制备具体步骤如下：
8.根据权利要求7所述的载纳米颗粒与吡非尼酮复合物导尿管的应用，其特征在于，在步骤s113中，制备含有罗丹明b的悬液的具体操作为：将200μl pbs，罗丹明b，pfd，在2ml二氯甲烷中乳化，20mg plga，在超声匀浆器中摇晃，然后冰浴，0.5min，然后，加入4.5ml1.5％pva加入摇匀混合物中，罗丹明b标记的np/pfd复合物悬液。