一种刺五加提取物注射液及其制备方法与流程

本发明属于药物，具体涉及一种刺五加提取物注射液及其制备方法。

背景技术：

1、刺五加根茎和叶具有特殊香气，其味微苦、稍辛，归脾、肾、心经，具有益气健脾、补肾安神的功效，尤其在抗疲劳、抗炎、抗应激和增强免疫力方面有显著作用，同时对心血管、糖尿病和神经衰弱等方面疾病有一定疗效。

2、刺五加注射液是由五加科植物刺五加中提出的有效成分制成的中药注射液，其中含有多种刺五加苷、异秦皮苷、丁香苷、金丝桃苷、刺五加多糖等有效成分。刺五加能调节机体新陈代谢的功能，提高机体对有害刺激因子的非特异性抵抗力，能增强垂体-肾上腺皮质系统的功能，提高机体的适应性和耐受性，减低体内外多种致病因子对机体的损害，对中枢神经系统即有兴奋作用又有抑制作用。刺五加注射液可扩张血管、增加冠状动脉血流量、减少耗氧量、降低血液粘度、改善血液循环，并有镇静、改善睡眠、增加食欲等作用。主要用于肝肾不足所致的短暂性脑缺血发作、脑动脉硬化、脑血栓形成、脑栓塞等。

3、近年来由于其在临床上广泛的应用所引起的不良反应时有报道。其不良反应类型主要有过敏反应、过敏性休克、全身性过敏反应等，临床主要表现为头晕、头痛、胸闷、呼吸困难、血压下降、烦躁，部分患者伴有皮疹、全身瘙痒、发热、寒战、鼻塞、流涕等。

4、中国发明专利申请201610646228.7公开了一种提高刺五加药物注射制剂稳定性的组合物制备方法，包括下述步骤：(1)称取刺五加的提取液2g-40g、苯甲酸和/或苯甲酸钠5mg-3g；(2)苯甲酸、苯甲酸钠分别配制成5mg/100ml-3g/100ml的溶液，备用；(3)刺五加的提取液加入30℃-40℃的注射用水500ml中，搅拌至完全溶解后，加入的活性炭，所述活性炭用量为0.02g/100ml，搅拌15min，过滤脱碳；(4)步骤(3)所得滤液用步骤(2)配置的苯甲酸和/或苯甲酸钠溶液调节ph值为5.0-7.0，加入30℃-40℃的注射用水至1000ml；(5)将步骤(4)所得药液过滤至澄清，灌装，灭菌，即得。但是刺五加与其他辅料配伍容易产生的副作用。

5、中国发明专利申请cn200310125129.7公开了将刺五加药材先用乙醇回流提取，提取液用大孔吸附树脂吸附，用水洗脱去杂质后，再用20％-70％的乙醇洗脱，收集20％-70％的乙醇洗脱部位，减压回收乙醇至干，得刺五加总苷类组分；将醇提后的刺五加药渣，用水加热提取三次，水提液合并，浓缩，减压回收乙醇至干，得刺五加总苷类组分；将醇提后的刺五加药渣，用水加热提取三次，水提液合并，浓缩，反复醇沉三次，沉淀加水使溶解，配成1％的溶液，过截留分子量介于6000-20万的中空纤维柱超滤，截留浓缩液真空低温干燥或冷冻干燥，得到多糖有效组分。该方法是分开提取刺五加苷类和多糖类成分，步骤较多，工艺较繁琐，提取周期长。

6、中国发明专利申请cn201610648413公开了一种刺五加组合物的提取方法，先是水提醇沉，然后采用乙醇/盐双水相萃取方法对浓缩滤液进行萃取，收集乙醇相，减压蒸馏，真空干燥，即得。该方法制得的提取物组合物不含糖类、新绿原酸、隐绿原酸等有效成分。研究表明刺五加糖类具有免疫调节作用，绿原酸类具有抗菌解热、抗血栓、抗炎、抑制血小板聚集等作用。中药药效物质是一个复杂的化学成分体系，具有多成分多靶点的中药提取物组合物是中医药治病的主要形式，所以在刺五加提取时，兼顾糖类与绿原酸类成分是非常必要的。

技术实现思路

1、本发明的目的是克服现有技术的不足而提供一种稳定性好、有效成分含量高、制备简单的刺五加提取物注射液及其制备方法。

2、为了达到本发明的上述目的，本发明采用的具体技术方案为：

3、一种刺五加提取物注射液的制备方法，包括以下步骤：对刺五加的茎进行提取，得到刺五加提取物，然后进行纯化，制备刺五加提取物注射液；

4、所述纯化的步骤包括：

5、(1)大孔树脂柱层析分离：所述大孔吸附树脂层析柱为：上层为d-101、中层为nka和下层为hpd750组成的层析柱；刺五加提取物以水洗脱6-8个保留体积，再以乙醇洗脱6-8个保留体积，收集乙醇洗脱液，浓缩，得刺五加浓缩液；

6、(2)硅胶柱层析分离：刺五加浓缩液中加入200-300目硅胶，拌样后经硅胶柱层析用4-6倍柱体积的乙酸乙酯、三氟乙酸和丙酮的混合溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，加水溶解，得刺五加纯化液。

7、优选地，步骤(1)中所述d-101、nka和hpd750的厚度比为1:1-2:1-2；所述乙醇为ph＝3-5的60-70wt％的乙醇。

8、优选地，步骤(2)中所述乙酸乙酯、三氟乙酸和丙酮的体积比为80-89:10-20:1。

9、优选地，所述刺五加注射液的制备过程包括以下步骤：

10、s1、浓配：将刺五加纯化液依次经绢布过滤、聚醚砜滤芯过滤和超滤器超滤，倒入浓配罐，加注射用水定容，加入活性炭，加热，搅拌，得到混合液1；

11、s2、稀配：混合液1降温后，依次经板框过滤器过滤和分子量为8-10kd的超滤器超滤至稀配罐，加注射用水定容，调ph，搅拌，取样检测合格后加入注射用水至全量，得到注射液中间品；

12、s3、灌封：将检测合格的注射液中间品进行过滤后灌封；

13、s4、灭菌：115-116℃灭菌30-40min；

14、s5、灯检，贴签，包装，即得。

15、进一步优选地，步骤s1中所述绢布的孔径为100-500目；所述聚醚砜滤芯的孔径为0.22μm-0.8μm。

16、进一步优选地，步骤s1中所述超滤器超滤包括：依次经过分子量为90-100kd的超滤器和分子量为10-30kd的超滤器。

17、进一步优选地，步骤s1中定容至浓配罐体积的65-75％，加入活性炭，所述活性炭的添加量为0.2g/ml；所述加热的温度为90-100℃，加热的时间为15-25min。

18、进一步优选地，步骤s2中降温后的温度为60-70℃；定容至稀配罐体积的80-90％，所述调ph的试剂为质量浓度为30-40％的naoh溶液，调节ph至4-6。

19、优选地，所述刺五加提取物的制备方法包括以下步骤：

20、1)取刺五加的茎，粉碎成2-10cm的段，依次在100-120℃和80-110℃干燥，蒸汽压力＜0.4mpa，得到刺五加净药材；

21、2)取刺五加净药材，加6-8倍量的水煎煮，煎煮温度为95-105℃，煎煮时间为2-4h，煎煮2次，超声和微波联合辅助提取，超声功率280-320w，微波功率180-220w，过滤，得滤液a；

22、3)用石灰乳调节滤液a的ph值至10-12，搅拌，转速为45-55r/min，时间为4-6min，用质量分数为15-25％的硫酸继续调节滤液a的ph值至4-6，搅拌，转速为45-55r/min，时间为8-12min，静置4h以上，取上层清液，得溶液b；

23、4)将溶液b浓缩至75-85℃时相对密度1.05-1.20，加入体积分数为85-95％的乙醇溶液至含醇量80-90％，静置12h以上，过滤，即得。

24、刺五加净药材的制备：挑选去除非刺五加中杂质和霉变的成分，净选后的药材用高压水枪冲洗至无灰尘，按《93zr-8.0b型铡切揉搓机标准操作规程》进行操作，粉碎至2-10cm的段，粉碎后按照《带式干燥机标准操作规程》进行烘干，高温段温度控制在100-120℃，低温段温度控制在80-110℃，蒸汽压力不得超过0.4mpa，干燥时间控制在13-15min(电机频率50hz)。

25、本发明还涉及上述制备方法制得的刺五加提取物注射液，所述刺五加提取物注射液的规格为每支20ml，所述刺五加提取物注射液中包括4.5-5.5mg/ml的总黄酮、0.7-1.0mg/ml的紫丁香苷和0.3-0.5mg/ml的刺五加苷e。

26、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

27、(1)本发明刺五加提取物注射液有效成分含量高，包括4.5-5.5mg/ml的总黄酮、0.7-1.0mg/ml的紫丁香苷和0.3-0.5mg/ml的刺五加苷e；

28、(2)本发明的刺五加提取物注射液稳定性进一步提高。